- Rh-mənfi qanda Rh faktoruna - Rh-müsbət qanın eritrositlərinin səthində yerləşən spesifik bir proteinə qarşı natamam anti-eritrosit antikorlarını təyin etməyə yönəlmiş antiglobulin testi. Bu testin iki növü var: birbaşa - qırmızı qan hüceyrələrinin səthində antikorların aşkarlanması, dolayı - qan serumunda antikorların aşkarlanması. Birbaşa test qan xəstəliklərinin diaqnozu və müalicəsinin monitorinqi üçün aparılır: hemolitik anemiya, hemolitik xəstəlik yenidoğulmuşlar və s. Transfüzyon zamanı donor və alıcının qanının uyğunluğunu qiymətləndirmək, həmçinin hamiləliyin planlaşdırılması və idarə edilməsi zamanı Rh konfliktinin mövcudluğunu və riskini müəyyən etmək üçün dolayı test aparılır. Coombs testi üçün material venoz qandır, tədqiqat aglütinasiya reaksiyasına əsaslanan üsullardan istifadə etməklə aparılır. Normalda hər iki test mənfi nəticə verir. Təhlil bir gün ərzində tamamlanır.
Coombs testi - klinik sınaq Rh-mənfi qan, Rh faktoruna antikorları aşkar etməyə yönəlmişdir. Test Rh konfliktinin və hemolitik reaksiyaların inkişaf riskini müəyyən etmək üçün istifadə olunur. Hər bir insanda qırmızı qan hüceyrələrinin səthində müəyyən bir antigenlər və ya aqqlütinogenlər var - müxtəlif təbiətli birləşmələr, mövcudluğu və ya olmaması qan qrupunu və Rh faktorunu təyin etmək üçün istifadə olunur. O cümlədən antigenlərin bir çox növləri var tibbi təcrübə Qan qrupunu təyin edən A və B aqqlütinogenləri və Rh faktoru olan aqqlütinogen D ən böyük praktik əhəmiyyətə malikdir. Müsbət bir Rh faktoru ilə D antigenləri eritrositlərin xarici membranında aşkar edilir, lakin mənfi bir amil ilə onlar yoxdur.
Antiglobulin testi də adlandırılan Coombs testi qanda Rh faktoru sisteminə qarşı natamam anti-eritrosit anticisimlərini aşkar etmək məqsədi daşıyır. Rh faktoruna qarşı anticisimlər, agglutinogens D ilə qırmızı qan hüceyrələri daxil olduqda, Rh-mənfi qanda əmələ gələn spesifik immunoqlobulinlərdir.Bu, dölün və hamilə qadının qanı qarışdıqda, əvvəlcədən qan olmadan həyata keçirilən qanköçürmə zamanı baş verə bilər. yazmaq. Coombs testi iki versiyada mövcuddur - birbaşa və dolayı. Birbaşa Coombs testi apararkən, qırmızı qan hüceyrələrinin səthinə yapışan antikorlar aşkar edilir. Tədqiqat hemolitik reaksiyanın səbəbini müəyyən etmək üçün istifadə olunur. Dolayı Coombs testi qan plazmasında anti-eritrosit anticisimlərini aşkar etməyə yönəldilmişdir. Donor və alıcı və ya ana və döl arasında qanın uyğunluğunu müəyyən etmək lazımdır və Rh münaqişəsinin inkişafının və qırmızı qan hüceyrələrinin sonrakı hemolizinin qarşısını almağa kömək edir.
Coombs testinin hər iki versiyası üçün qan damardan alınır. Təhlil antiglobulin serumundan istifadə edərək aglütinasiya yolu ilə aparılır. Tədqiqatın nəticələri hemolitik reaksiyaların səbəblərini müəyyən etmək üçün hematologiyada, qanköçürmə zamanı cərrahiyyə və reanimasiyada, mamalıq və ginekologiyada Rh-mənfi qanı olan qadınlarda hamiləliklərin monitorinqi zamanı istifadə olunur.
Göstərişlər
Qırmızı qan hüceyrələrinin səthinə yapışan antikorları aşkar edən birbaşa Coombs testi hemolitik reaksiyalar (qırmızı qan hüceyrələrinin məhv edilməsi) üçün təyin edilir. müxtəlif mənşəli. Tədqiqat ilkin otoimmün hemolitik anemiya, transfuziyadan sonrakı hemolitik anemiya, yeni doğulmuş uşağın hemolitik xəstəliyi, otoimmün, şiş və ya eritrositlərin səbəb olduğu eritrositlərin hemolizi üçün göstərilir. yoluxucu xəstəliklər, həmçinin qəbul dərmanlar məsələn, quinidin, metildopa, prokainamid. Qan plazmasında antikorları təyin edən dolayı Coombs testi Rh konfliktinin inkişafının qarşısını almaq üçün istifadə olunur. Uşağın gələcək atasının müsbət Rh faktoru olması şərti ilə qanköçürməyə hazırlaşan xəstələrə, eləcə də mənfi Rh faktoru olan hamilə qadınlara göstərilir.
Rh uyğunluğunu müəyyən etmək üçün Coombs testi Rh-müsbət qanı olan xəstələrə təyin edilmir. Bu hallarda, qırmızı qan hüceyrələrinin səthində artıq antigenlər var, antikorların istehsalı qanköçürmə və ya fetal qanın hamilə qadının qanına daxil olması ilə təhrik edilə bilməz. Həmçinin, hər iki valideyndə mənfi Rh faktoru - irsi resessiv xüsusiyyət varsa, tədqiqat hamilə qadınlar üçün göstərilmir. Belə cütlərdə uşaq həmişə mənfi Rh qanına malikdir, ana ilə immunoloji münaqişə mümkün deyil. Hemolitik patologiyalarda antiglobulin testi terapiyanın müvəffəqiyyətini izləmək üçün istifadə edilmir, çünki nəticələr qırmızı qan hüceyrələrinin məhv edilməsi prosesinin fəaliyyətini əks etdirmir.
Coombs testinin məhdudiyyəti tədqiqat prosedurunun zəhmətkeşliyidir - etibarlı nəticələr əldə etmək üçün temperatur və vaxt şərtlərinə, reagentlərin və biomaterialın hazırlanması qaydalarına riayət etmək lazımdır. Coombs testinin üstünlüklərinə onun daxildir yüksək həssaslıq. Hemolitik anemiyada, hemoglobin, bilirubin və retikulositlərin səviyyəsi normallaşsa belə, bu testin nəticələri müsbət olaraq qalır.
Materialın təhlili və toplanması üçün hazırlıq
Coombs testini yerinə yetirmək üçün istifadə olunan material venoz qandır. Qan götürmə prosedurunun vaxtı və xəstənin hazırlanması üçün xüsusi tələblər yoxdur. Hər hansı bir araşdırmada olduğu kimi, yeməkdən sonra ən azı 4 saat fasilə vermək və son 30 dəqiqə ərzində siqareti dayandırmaq tövsiyə olunur. fiziki fəaliyyət, emosional stressdən qaçın. Dərman qəbul etməyi dayandırmağın zəruriliyini əvvəlcədən həkiminizlə müzakirə etməyə dəyər - bəzi dərmanlar Coombs testinin nəticələrini təhrif edə bilər. Qan bir şprisdən istifadə edərək kubital venadan və ya daha az tez-tez əlin arxasındakı bir damardan alınır. Bir neçə saat ərzində material laboratoriyaya çatdırılır.
Birbaşa Coombs testi apararkən xəstənin qan serumuna antiglobulin serumu əlavə edilir. Bir müddətdən sonra qarışıq aglutinatların olması üçün yoxlanılır - qırmızı qan hüceyrələrində antikorlar varsa, onlar əmələ gəlir. Nəticə müsbət olarsa, aglütinasiya titri müəyyən edilir. Dolayı Coombs testi daha çox addımdan ibarətdir. Birincisi, serumda mövcud olan antikorlar inkubasiya zamanı enjekte edilmiş qırmızı qan hüceyrələrinə sabitlənir. Sonra nümunəyə antiqlobulin zərdabı əlavə edilir, müəyyən müddətdən sonra aglütinatların olması və titri müəyyən edilir. Analiz müddəti 1 gündür.
Normal nəticələr
Normalda, birbaşa Coombs testinin nəticəsi mənfi olur (-). Bu o deməkdir ki, qanda qırmızı qan hüceyrələri ilə əlaqəli antikorlar yoxdur və onlar hemolizə səbəb ola bilməz. Normal nəticə dolayı test Coombs da mənfidir (-), yəni qan plazmasında Rh faktoruna qarşı antikorlar yoxdur. Resipiyent üçün qanköçürməyə hazırlaşarkən, bu, donorun qanı ilə uyğunluq deməkdir; hamiləliyin monitorinqi zamanı bu, ananın Rh həssaslığının olmaması, immunoloji münaqişənin inkişaf riskinin aşağı olması deməkdir. Fizioloji amillər, məsələn, pəhriz vərdişləri və ya fiziki fəaliyyət, test nəticələrinə təsir göstərə bilməz. Buna görə də, nəticə müsbət olarsa, həkim məsləhətləşməsi lazımdır.
Təhlilin diaqnostik dəyəri
Coombs testinin müsbət nəticəsi keyfiyyətcə (+) ilə (++++) arasında və ya kəmiyyət olaraq 1:16-dan 1:256-a qədər titrlərlə ifadə edilir. Qırmızı qan hüceyrələrində və qan zərdabında antikorların konsentrasiyasının təyini hər iki növ nümunədə aparılır. Birbaşa Coombs testi müsbət olarsa, qırmızı qan hüceyrələrinin xarici membranında antikorlar aşkar edilir və bu qan hüceyrələrinin məhvinə səbəb olur. Səbəb əvvəlcədən yazılmadan qanköçürmə ola bilər - transfüzyondan sonrakı hemolitik reaksiya, həmçinin yeni doğulmuş uşağın eritroblastozu, dərmanların istifadəsi ilə bağlı hemolitik reaksiya, birincili və ya ikincili autoimmun hemolitik anemiya. Qırmızı qan hüceyrələrinin ikincil məhvinə sistemik lupus eritematosus, Evans sindromu, Waldenström makroqlobulinemiya, paroksismal soyuq hemoglobinuriya, xroniki lenfositik lösemi, limfoma, yoluxucu mononükleoz, sifilis, mikoplazma pnevmoniyası səbəb ola bilər.
Dolayı Coombs testinin müsbət nəticəsi plazmada Rh faktoruna qarşı antikorların olduğunu göstərir. Praktikada bu, Rh həssaslığının baş verdiyini və hamiləlik dövründə donor qanının infuziyasından sonra Rh konfliktinin inkişafı ehtimalının olduğunu göstərir. Hamiləliyin ağırlaşmalarının qarşısını almaq üçün Coombs testinin müsbət nəticəsi olan qadınlar xüsusi qeydiyyata alınırlar.
Anormallıqların müalicəsi
Coombs testi izoseroloji tədqiqatlara aiddir. Onun nəticələri Rh konfliktinin inkişafının qarşısını almaq üçün hemolitik reaksiyanı müəyyən etməyə, həmçinin donor və alıcının, ana və dölün qanının uyğunluğunu müəyyən etməyə imkan verir. Testin nəticəsi müsbət olarsa, o zaman iştirak edən həkiminizdən - mama-ginekoloqdan, hematoloqdan, cərrahdan məsləhət almalısınız.
Coombs testi bir üsuldur laboratoriya tədqiqatı, hemaqlütinasiyaya təsir etməklə əmələ gəlir. O, antikorların immunoqlobulinlərə və ferment elementlərinə qarşı həssaslığına, həmçinin C3 və ya Lg ilə örtülmüş eritrositləri aglütinasiya etmək qabiliyyətinə əsaslanır.
Birbaşa Coombs diaqnozu
Hüceyrələrin kənarında quraşdırılmış antikorları və ya tamamlayıcı komponentləri aşkar etmək üçün istifadə olunur. Birbaşa Coombs testi aşağıdakı kimi aparılır.
Belə bir nümunənin istifadəsi
Birbaşa Coombs diaqnozu müəyyən hallarda istifadə olunur, məsələn:
- transfuziya təsiri;
- otoimmün hemoliz;
- narkotik səbəb olan hemolitik anemiya.
Dolayı Coombs testi
Bu diaqnoz, bir qayda olaraq, 0 tipli donor qırmızı qan hüceyrələri ilə inkubasiya edilən serumdakı hüceyrələrə antikorları aşkar etməyə imkan verir və sonra birbaşa test aparılır. Müraciət edin dolayı diaqnoz Aşağıdakı hallarda Coombs:
Təhlil üçün necə hazırlaşmaq olar
İmtahana hazırlaşmağın bəzi qaydaları var.
- Xəstə yeni doğulmuşdursa, valideynlər bilməlidirlər ki, test yenidoğanın hemolitik xəstəliyini aşkar etməyə kömək edəcəkdir.
- Xəstədə hemolitik anemiya şübhəsi varsa, ona izah edilməlidir ki, analiz ona qoruyucu pozğunluqlar, dərmanlar və ya digər amillərdən qaynaqlandığını öyrənməyə imkan verəcəkdir.
- Coombs testi, birbaşa və dolayı, qidalanma və ya pəhrizlə bağlı heç bir məhdudiyyət qoymur.
- Xəstəyə müayinənin venadan qan götürülməsini tələb edəcəyini bildirmək, həmçinin venipunkturun nə vaxt aparılacağını ona söyləmək lazımdır.
- Siz də ehtimal barədə xəbərdarlıq edilməlidir diskomfort bandajın qola və prosedurun özünə tətbiqi dövründə.
- Nümunə nəticəsinə təsir edə biləcək dərmanlar dayandırılmalıdır.
Bu dərmanlara aşağıdakılar daxildir:
- "Streptomisin";
- "Metildopa";
- "Prokainamid";
- sulfanilamidlər;
- "Melphalan";
- "Quinidin";
- "Rifampin";
- "İzoniazid";
- sefalosporinlər;
- "Hydralazine";
- "Xlorpromazin";
- "Levodopa";
- "Tetrasiklin";
- "Difenilhidantoin";
- "Ethosuximide";
- "Penisilin";
- mefenamik turşu.
Qan nümunəsi səhər boş bir mədədə aparılır.
Tədbir necə keçirilir
Coombs testi aşağıdakı ardıcıllıqla aparılır:
- Yetkin bir xəstədə diaqnostika apararkən, venipunkturdan sonra qan EDTA (etilendiamintetraasetat) olan borulara alınır.
- Yenidoğulmuşun qanı göbək bağından EDTA olan bir şüşəyə çəkilir.
- Punksiya sahəsi qanaxma dayanana qədər pambıq çubuqla sıxılır.
- Venipunktur yerində qançır görünsə, isti kompreslər təyin olunur.
- Qan toplandıqdan sonra xəstəyə dərman qəbul etməyə qayıtmağa icazə verilir.
- Yenidoğanın valideynlərinə məlumat vermək lazımdır ki, anemiyanın dinamikasını izləmək üçün ikincil analiz tələb oluna bilər.
Coombs testinin üstünlükləri
Belə tədqiqatın bəzi üstünlükləri var, yəni:
Təhlilin mənfi cəhətləri
Müsbət Coombs testi, xarakterik icra dəqiqliyini tələb edən kifayət qədər əmək tələb edən bir müayinə üsuludur. Onu istifadə edərkən, xüsusilə zəif müsbət təsirlərin təfsiri ilə bağlı müəyyən çətinliklərlə qarşılaşa bilərsiniz.
Səhv mənfi və ya zəif olduğu müəyyən edilmişdir müsbət reaksiyalar Coombs nümunələrinin istehsalı zamanı qeyri-qənaətbəxş aktiv hüceyrə yuyulmasının, antiglobulin reagentinin zərdab qalıqları ilə zəifləməsinin, həmçinin antiglobulinin yapışa biləcəyi yağsız xarici ilə birləşmələrin nəticələri ola bilər və bununla da effektivliyini itirə bilər.
Coombs testinin başqa bir çatışmazlığı var - antiglobulin reagentinin aşağı sabitliyi, alınması və saxlanması. fərdi xüsusiyyətlər, bu da antiqlobulin zərdabının hemaqlütinasiyaya təsirini ədədi olaraq qiymətləndirməyi çətinləşdirir.
Tədqiqat zamanı aşkar edilə bilən xəstəliklər
Coombs diaqnostikası bəzi xəstəlikləri aşkar etməyə imkan verir, məsələn:
- yenidoğanın hemolitik pozğunluğu;
- müxtəlif transfuziya reaksiyaları;
- otoimmün hemoliz;
- narkotik səbəb olan hemolitik anemiya.
Bu gün Coombs testi həm böyüklər, həm də yeni doğulmuş uşaqlar üçün kifayət qədər məşhur qan testi sistemi hesab olunur. Bu, müxtəlif xəstəlikləri müəyyən etməyə imkan verir.
1 böyük damcı serum O(I), A(II), B(III) pipetlərdən (fərqli!) istifadə edərək boşqaba və ya şüşə slaydın üzərinə çəkin. Vaxtı qeyd etdikdən sonra zərdab damcılarını qan damcıları ilə birləşdirmək üçün təmiz şüşə çubuqdan və ya şüşə slaydın təmiz küncündən istifadə edin. Təyin 5 dəqiqə davam edir, boşqab silkələnir, sonra hər damla qarışığına 1 damcı salin məhlulu əlavə edilir və nəticələri qiymətləndirin. Serum 2 fərqli seriyada gəlsə daha yaxşı olar. Qan qrupunun nəticələri hər iki serum lotunda uyğun olmalıdır.
İzohemaqqlütinasiya nəticələrinin qiymətləndirilməsi:
əgər hər 3 sera mənfi reaksiya veribsə, yəni qarışıq eyni dərəcədə çəhrayı rəngdədirsə - bu O(I) qan qrupudur;
Əgər mənfi reaksiya yalnız A (II) qrupunun zərdabları verdi və sera O (I) və B (III) müsbət reaksiya verdi, yəni taxıllar meydana çıxdı - bu A (II) qan qrupudur;
B(II) qrupunun serumu mənfi reaksiya verdi, O(I) və A(II) qrupunun serumları isə müsbət reaksiya verdi - bu B(III) qan qrupudur.
izomaqlütinasiya. Reaksiya müsbət olarsa, qarışıqda yapışqan qırmızı qan hüceyrələrinin kiçik qırmızı dənələri görünür. Taxıllar birləşərək daha iri taxıllara, sonuncular isə lopalara çevrilir. Serum demək olar ki, rəngsizləşir;
reaksiya mənfi olarsa, qarışıq 5 dəqiqə ərzində bərabər rəngli qalır çəhrayı rəng və taxıl tapılmır;
O(I), A(II), B(III) qruplarının 3 serası ilə işləyərkən 4 reaksiya kombinasiyası mümkündür:
hər 3 sera müsbət reaksiya verdi - yoxlanılan qan AB(IV) qrupu idi. Bu zaman AB(IV) qrup serumu ilə tədqiqat aparılır.
Qeyd! Tədqiq olunan qan damcıları serum damcılarından 5-10 dəfə kiçik olmalıdır.
İzohemaqlütinasiya xətaları.
Aqqlütinasiyanın olması lazım olan yerdə həyata keçirilməməsi və olmamalı olduğu yerdə aglütinasiyanın olması. Bu, zəif serum titri və zəif qırmızı qan hüceyrələrinin aglütinasiyası ilə əlaqədar ola bilər.
Olmaması lazım olan yerdə aglütinasiyanın olması- Bu, qırmızı qan hüceyrələrinin yığınları "sikkə sütunları" əmələ gətirdiyi zaman psevdoaglütinasiyadır. Plitəni silkələmək və ya şoran əlavə etmək onları məhv edir.
Panaqlütinasiya, zərdab bütün qırmızı qan hüceyrələrini, o cümlədən öz qan qrupunu birləşdirən zaman. 5-ci dəqiqədə aglütinasiya əlamətləri yox olur.
Otaqda aşağı hava temperaturu (15 ° C-dən aşağı) səbəbindən qırmızı qan hüceyrələri bir-birinə yapışdıqda soyuq panaqlütinasiya da var.
Bütün bu hallarda ya təkrar reaksiya aparılır, ya da standart qırmızı qan hüceyrələrindən istifadə edilir.
Rh qanının təyini
Rh statusunu müəyyən etmək üçün, yəni insanların qanında Rh sistemi antigenlərinin olub-olmamasını aşkar etmək üçün spesifikliyi ilə fərqlənən, yəni bu sistemin müxtəlif antigenlərinə qarşı antikorları olan standart anti-Rh seraları (reagentlər) istifadə olunur. Rh 0 (D) antigenini təyin etmək üçün ən çox 10% jelatin məhlulu əlavə edilməklə anti-Rhesus serum və ya 33% poliqlükin məhlulu ilə əvvəlcədən hazırlanmış standart anti-rezus reagentindən istifadə olunur. Daha dəqiq tədqiqat nəticələrini əldə etmək, həmçinin digər seroloji sistemlərin antigenlərini müəyyən etmək üçün Kumbs testindən istifadə olunur (köçürülmüş qanın uyğunluğunun müəyyən edilməsində də çox həssasdır). Tədqiqat üçün yerli qan və ya bəzi konservantlarla hazırlanmış qan istifadə olunur. Bu vəziyyətdə qan konservantdan on qat həcmdə izotonik natrium xlorid məhlulu ilə yuyulmalıdır. Rh statusunu təyin edərkən- Rh 0 (D) iki müxtəlif seriyalı serum və ya anti-rezus reagentindən iki nümunə və eyni zamanda Rh-müsbət (Rh+) və Rh-mənfi (Rh-) qandan alınan standart qırmızı qan hüceyrələrindən istifadə edilməlidir. şəxslər nəzarət üçün istifadə edilməlidir. Digər izoantigenləri təyin edərkən, standart zərdabda antikorların yönəldildiyi antigeni ehtiva edən və ya olmayan qırmızı qan hüceyrələrindən müvafiq olaraq istifadə edilməlidir.
Qismən istilik aglutininlər otoimmün hemolitik anemiyanın inkişafına səbəb ola biləcək ən çox yayılmış antikor növüdür. Bu antikorlar IgG-yə, nadir hallarda IgM, IgA-ya aiddir.
COOMBS TESTİ
Coombs testi: giriş. Coombs testi hemaqlütinasiya reaksiyasına əsaslanan laboratoriya diaqnostik metodudur.
Otoimmün hemolitik anemiyanın diaqnozunun əsas üsulu Coombs testidir. O, immunoqlobulinlərə (xüsusilə IgG) və ya komplement komponentlərinə (xüsusilə S3) xas olan antikorların IgG və ya S3 ilə örtülmüş eritrositləri aglütinasiya etmək qabiliyyətinə əsaslanır.
IgG və C3b-nin eritrositlərə bağlanması otoimmün hemolitik anemiyada və dərman vasitəsi ilə törədilən immun hemolitik anemiyada müşahidə olunur. Birbaşa Coombs testi. Birbaşa Coombs testi qırmızı qan hüceyrələrinin səthində sabitlənmiş antikorları və ya tamamlayıcı komponentləri aşkar etmək üçün istifadə olunur. Bu aşağıdakı kimi həyata keçirilir:
İnsan immunoqlobulinlərinə (antiqlobulin zərdabına) və ya komplementə (antikomplementar serum) qarşı anticisimlər əldə etmək üçün heyvan insan serumu, immunoqlobulinləri və ya insan komplementi ilə immunizasiya edilir. Heyvandan alınan zərdab digər zülallara qarşı antikorlardan təmizlənir.
Xəstənin qırmızı qan hüceyrələri zərdabın tamamilə çıxarılması üçün salin ilə yuyulur, bu, immunoqlobulinlərə qarşı antikorları neytrallaşdırır və tamamlayır və yanlış mənfi nəticəyə səbəb ola bilər.
Qırmızı qan hüceyrələrinin səthində antikorlar və ya komplement komponentləri sabitləşərsə, antiqlobulin və ya anti-komplement serumunun əlavə edilməsi qırmızı qan hüceyrələrinin aglütinasiyasına səbəb olur.
Birbaşa Coombs testi aşağıdakı hallarda istifadə olunur:
Otoimmün hemoliz.
Yenidoğulmuşların hemolitik xəstəliyi.
Dərmanla əlaqəli immun hemolitik anemiya.
Hemolitik transfuziya reaksiyaları. Dolayı Coombs testi. Dolayı Coombs testi zərdabda qırmızı qan hüceyrələrinə qarşı antikorları aşkar edir. Bunun üçün xəstənin zərdabında 0 qrup donor qırmızı qan hüceyrələri ilə inkubasiya edilir və sonra birbaşa Kumbs testi aparılır.
Dolayı Coombs testi aşağıdakı hallarda istifadə olunur:
Donor və alıcı qanının fərdi uyğunluğunun müəyyən edilməsi.
Alloantikorların, o cümlədən hemolitik transfuziya reaksiyalarına səbəb olan antikorların aşkarlanması.
Tibbi genetika və məhkəmə tibbdə səthi eritrosit antigenlərinin təyini.
Sümük iliyi transplantasiyası zamanı eyni əkizlərin təsdiqi.
Bioloji test aparmaq üçün qan mümkün qədər tez köçürülməyə başlayır (tercihen axınla). 25 ml qan köçürüldükdən sonra sistem borusu sıxacla sıxılır. Sonra 3 dəqiqəlik fasilə verilir, bu müddət ərzində alıcının vəziyyəti izlənilir. Bioloji testin aparılması üçün üç dəfə 25 ml qan yeridilir. Testin sonunda (3 dəqiqəlik fasilələrlə 25 ml-lik fraksiya dozalarında ilk 75 ml qan köçürüldükdən sonra) sistem lazımi transfuziya sürətinə uyğunlaşdırılır. Xəstəyə birdən çox şüşə qan köçürüldükdə, iynəni venadan çıxarmaq lazımdır. Bu zaman iynə qanı bitmiş flakonun sınaq borusundan çıxarılır və növbəti flakona daxil edilir. Sistem borusu (rezin və ya plastik) bu anda bir sıxacla sıxılır. Əgər qanköçürmə zamanı resipiyentə hər hansı digər dərmanı venadaxili vermək zərurəti yaranarsa, bu, sistemin rezin borusunu deşməklə həyata keçirilir. Plastik borunun deşilməsi yolverilməzdir, çünki onlar düşmür. Hər qanköçürmədən sonra xəstəni müəyyən etmək və dərhal aradan qaldırmaq üçün nəzarət edilməlidir mümkün fəsadlar, o cümlədən allergik reaksiyalar. Qanköçürmə bitdikdən 2 saat sonra bədən istiliyi ölçülməlidir. Artarsa, növbəti 4 saat ərzində ölçmə hər saat təkrarlanmalıdır. Eyni dərəcədə vacibdir, sidik ifrazının və sidik tərkibinin monitorinqi, zəhərli posttransfuziya reaksiyasının mövcudluğunu təyin etməyə imkan verir. Qanköçürmədən sonra oliquriya və anuriyanın başlaması, sidikdə qan hüceyrələrinin və zülalın olması posttransfuziya hemolizinin inkişafının birbaşa göstəricisidir.
COMBES REAKSİYASI(R. R. A. Kumbs, ingilis immunoloqu, 1921-ci il təvəllüdlü; sinonimi: Coombs testi, antiglobulin testi) - eritrositlərin avto- və izoantigenlərinə qarşı natamam anticisimləri aşkar etmək üçün immunoloji reaksiya.
Reaksiya 1908-ci ildə S. Moreschi tərəfindən hazırlanmış, lakin qəbul edilmişdir geniş tətbiq yalnız 1945-ci ildən sonra Kumbs qanköçürmə, Rh münaqişəsi, autoallergik və otoimmün vəziyyətlərin diaqnostikası və s. zamanı uyğunluğun müəyyən edilməsində öz rolunu nümayiş etdirdikdən sonra.
Coombs reaksiyası xüsusi hazırlanmış preparatın - antiglobulin serumunun istifadəsinə əsaslanır. Antiglobulin zərdabının olması ilə, natamam antikorlarla yüklənmiş qırmızı qan hüceyrələri aglutinasiya edir. Səthində antikor olmayan qırmızı qan hüceyrələri qeyri-aqqlütinasiya olunur.
K.r. aşağıdakılar üçün geniş istifadə olunur: a) izosensibilizasiya vəziyyətinin müəyyən edilməsi, yəni təkrar qanköçürmə zamanı (bax. Qanköçürmə) və ya hamiləlik zamanı (bax. Hamiləlik) baş verən izoantikorların aşkarlanması; b) qanköçürmə zamanı uyğunluq testinin aparılması; c) eritrositlərdə Rh faktorunun növünün təyini (bax); d) qazanılmış hemolitik anemiya (bax) və digər autoallergik xəstəlikləri (bax), həmçinin allergik komponentlə baş verən bəzi infeksiyalar olan xəstələrin qırmızı qan hüceyrələrində otoimmün antikorların aşkar edilməsi; e) yenidoğulmuşların hemolitik xəstəliyindən əziyyət çəkən uşaqların qırmızı qan hüceyrələrinə sabitlənmiş izoimmun antikorların aşkar edilməsi (bax). K.r. məhkəmə və antropoloji tədqiqatlarda da istifadə olunur.
K. r-nin səhnələşdirilməsi üçün əsas material. serum və ya sitratlı plazma və xəstənin qırmızı qan hüceyrələridir. K. r.-nin iki variantı var: dolayı və birbaşa. Dolayı K. r ilə. Xəstənin serumu öyrənilir və sərbəst dövran edən antikorlar müəyyən edilir. Birbaşa K. r. qırmızı qan hüceyrələrinin üzərində sabitlənmiş antikorların olub olmadığını yoxlayın formalı elementlər qan.
K. r üçün antiglobulin serumu. immunizasiya laboratoriyası tərəfindən əldə edilmişdir. etanol, ammonium sulfat və ya gel filtrasiyası ilə insan zərdabından təcrid olunmuş qlobulinləri olan heyvanlar (dovşanlar, keçilər, qoyunlar və s.) Sephadex üzərində gel filtrasiyası. Antiqlobulin zərdabını əldə edərkən heyvanların insan qlobulinləri ilə immunizasiyası nəticəsində yaranan heteroaglütinasiya edən anticisimləri çıxarmaq lazımdır. Bu, immun serumun eritrositlərin qarışığı ilə adsorbsiya edilməsi ilə əldə edilir fərqli qrup qan və ya izotonik natrium xlorid məhlulu ilə seyreltilir. Sonuncu halda, hetero-aqqlütininlərin titri aşağı olmalıdır (1: 16 - 1: 32), belə ki, antiglobulin serum, seyreltildikdən sonra K. r-də yaxşı fəaliyyəti saxlayır.
Dolayı Coombs reaksiyası
Dolayı Coombs reaksiyası iki mərhələdə aparılır. Birinci mərhələ xüsusi olaraq bu məqsəd üçün nəzərdə tutulmuş 4 X 0,5 sm ölçülü kiçik sınaq borularında aparılır.Hər bir sınaq borusuna üç damcı seruma bir damcı əlavə edin (bütöv, 1: 2 və s.), mövcudluğu antikorların şübhəsi bilinən antigenik tərkibli eritrositlərin çöküntüsüdür. Sınaq borusunun içindəkilər qarışdırılır və 1 saat ərzində t° 37° temperaturda termostata qoyulur. Sonra qırmızı qan hüceyrələri üç dəfə izotonik natrium xlorid məhlulu ilə yuyulur. İkinci mərhələ yuyulmuş eritrositlərin 5%-li suspenziyasının hazırlanmasından və bir damcı eritrositlərin bir damcı antiqlobulin zərdabının ağ (çini) boşqab üzərində islanmış səthi ilə birləşdirilməsindən ibarətdir. Nəticələr 10 dəqiqəyə qədər nəzərə alınır. İstisna yanlış müsbət nəticələr nəzarət tədqiqatlarının aparılması ilə istehsal olunur. Antiglobulin serum əvəzinə izotonik natrium xlorid məhlulunun istifadəsi qırmızı qan hüceyrələrinin aglütinasiyası ilə müşayiət olunmamalıdır. Dolayı K. r ifa edir. məlum izoantigen fenotipinin eritrositlərinə qarşı antikorların spesifikliyini təyin etməyə imkan verir. Məsələn, qırmızı qan hüceyrələri 0(I), CDE, Kk, Fya ilə xəstənin serumunun öyrənilməsi; 0(1), CDe, Kk, Fya; 0(I), сDe, Kk, Fya; 0(I), cDE, Kk, Fya; 0(I), cde, kk, Fya göstərdi müsbət nəticə 1 və 4-cü hallarda qan nümunəsi ilə; digər qan nümunələri (2, 3, 5-ci hallar) mənfi nəticə göstərdi. Serumda anti-E antikorları var. Dolayı K. r-nin köməyi ilə. antigenlərə qarşı natamam antikorlar aşkar edilə bilər: C, D, E, c, e; K, k; Fya, Fyb; Lea, Leb; Jka, Jkb və s. (bax: Qan qrupları).
Birbaşa Coombs reaksiyası
Texnikasında birbaşa Coombs reaksiyası dolayı K.R.-nin ikinci mərhələsinə uyğundur: xəstənin izotonik natrium xlorid məhlulu ilə üç dəfə yuyulmuş qırmızı qan hüceyrələri (5% suspenziya) antiglobulin serumu ilə birləşdirilir. Birbaşa K.r. tədqiq olunan xəstənin qırmızı qan hüceyrələrinin artıq in vivo olaraq antikorlarla həssaslaşdığına inanmaq üçün əsas olduqda həyata keçirilir. Müsbət düz xətt K. r. Qadın orqanizminin dölün antigenlərinə həssaslaşması və plasenta vasitəsilə anticisimlərin uşağın orqanizminə daxil olması nəticəsində yaranan yenidoğulmuşların hemolitik xəstəliyinin, həmçinin qazanılmış hemolitik anemiyanın diaqnostik əlaməti kimi çıxış edir.
Arxada son illər K.r. əhəmiyyətli dərəcədə yaxşılaşmışdır. Onun köməyi ilə yalnız qırmızı qan hüceyrələrində antikorların varlığını müəyyən etmək deyil, həm də immunoglobulinlər sinfini təyin etmək mümkündür (bax). Bunun üçün immunoglobulinlərin müəyyən siniflərinə qarşı serum istifadə edin: IgG, IgM, IgA. Rhesus, Kell antigenləri, Duffy antigenləri və digər antigenlərə qarşı izoimmun antikorlar, həmçinin isti otoimmün antikorlar adətən IgG kimi təsnif edilir. Soyuq otoimmün antikorlar, həmçinin Le və bəzi digər antigenlərə qarşı izoimmun antikorlar, bir qayda olaraq, IgM-ə aiddir. Yalnız nadir otoimmün antikorlar IgA xarakteri daşıyır (bax: Autoantikorlar).
Biblioqrafiya: Dygin V.P. Daxili xəstəliklər klinikasında otoimmün xəstəliklər, L., 1970, bibliogr. ; Kassirsky I. A. və Alekseev G. A. Clinical hematology, M., 1970; Kosyakov P. N. Sağlamlıq və xəstəlikdə insan izoantigenləri və izoantikorları, M., 1974, bibliogr.; Boivin P. e. a. Les anemies hemolitiques, s. 93, S., 1971, biblioqrafiya; İmmunologiyanın klinik aspektləri, ed. tərəfindən P. G. H. Geli a. o., Oksford, 1975; Coombs R. R. A., Mourant A. E. a. Race R. R. Hemolitik xəstəliyi olan körpələrdə qırmızı hüceyrələrin in-vivo izosensitizasiyası, Lancet, v. 1, səh. 264, 1946.
Coombs testidir klinik analiz qanda təhlükəli ola biləcək müəyyən antikorların olub olmadığını müəyyən etmək üçün edilən qan testi. Bu antikorlar qırmızı qan hüceyrələrinə yapışır və onları işğal edə bilər immun sistemi, eləcə də başqa yollarla zərər vurur. Tibbi terminologiyada bu tədqiqata antiglobulin testi (AGT) də deyilir.
Coombs nümunələrinin növləri
Coombs testlərinin iki növü var - birbaşa və dolayı.
Birbaşa Coombs testi birbaşa (DAT) olaraq da bilinir, qırmızı qan hüceyrələrinin səthinə yapışan avtomatik antikorları aşkar edir. Bu antikorlar bəzən müəyyən xəstəliklər səbəbindən və ya prokainamid, metildopa və ya quinidin kimi müəyyən dərmanlar qəbul edərkən bədəndə istehsal olunur.
Bu antikorlar təhlükəlidir, çünki bəzən qırmızı qan hüceyrələrini məhv edərək anemiyaya səbəb olurlar.
Bu test bəzən sarılıq və ya anemiyanın səbəbini təyin etmək üçün təyin edilir.
Normalda Coombs reaksiyası mənfi olur.
Üçün müsbət:
- yenidoğulmuşların hemolitik xəstəliyi;
- otoimmün hemoliz;
- hemolitik transfuziya reaksiyaları;
- dərmana bağlı immun hemolitik anemiya.
Dolayı Coombs testi kimi də tanınır, qan serumunda olan qırmızı qan hüceyrələrinə qarşı antikorları aşkar etmək üçün istifadə olunur (serum qırmızı qan hüceyrələri və koaqulyant aradan qaldırıldıqdan sonra qanın şəffaf sarı mayesidir).
Dolayı Coombs testi qanköçürmə zamanı donorun qanının alıcının qanına uyğun olub-olmadığını müəyyən etmək üçün istifadə olunur. Bu, uyğunluq testi adlanır və donorun qanına hər hansı bir mənfi reaksiyanın qarşısını almağa kömək edir. Bu analiz hamilə qadınlar üçün də tövsiyə olunur. Bəzi qadınlarda plasentadan fetal qana keçərək yeni doğulmuş körpəyə zərər verə bilən, hemolitik anemiya kimi tanınan hemolitik xəstəliyə səbəb olan IgG antikorları var.
Prosedur
Qan adətən bir damardan bir şpris istifadə edərək alınır arxa tərəf xurma və ya dirsək əyrisində. Bundan əvvəl, ponksiyon yeri hərtərəfli dezinfeksiya edilir və qan testindən sonra təmiz doka və ya pambıq yun tətbiq olunur.
Alınan qan laboratoriyada təmizlənir və qırmızı qan hüceyrələri ayrılır. Nümunə daha sonra fərqli serum və Coombs reagentlərindən istifadə etməklə ardıcıl olaraq sınaqdan keçirilir. Əgər aglütinasiya yoxdursa (qırmızı qan hüceyrələrinin yığılması), bu müsbət nəticə deməkdir.
Ancaq test mənfi olarsa, bu, qanda qırmızı qan hüceyrələrinə qarşı fəaliyyət göstərən antikorların olduğunu göstərir. Bu göstərə bilər müxtəlif xəstəliklər məsələn, anemiya (həm təbii, həm də dərman qəbulu nəticəsində yaranan), sifilis və ya mikoplazma infeksiyası. Nəticələri aldıqdan sonra iştirak edən həkim müvafiq müalicəni təyin edəcək.
Video
