Хиперлипидемия (хиперлипидемия) -повишаване на концентрацията общи липидикато плазма физиологичен феноменможе да се наблюдава 1-4 часа след хранене. Хранителната хиперлипемия е по-изразена, колкото по-ниско е нивото на липидите в кръвта на пациента на празен стомах.
Концентрацията на липиди в кръвта се променя под редица патологични състояния:
Нефротичен синдром, липоидна нефроза, остър и хроничен нефрит;
Билиарна цироза на черния дроб, остър хепатит;
Затлъстяване - атеросклероза;
хипотиреоидизъм;
Панкреатит и др.
Изследването на нивата на холестерола (CH) отразява само патологията на липидния метаболизъм в организма. Хиперхолестеролемията е документиран рисков фактор коронарна атеросклероза. CS е основен компонент на мембраната на всички клетки; специалните физикохимични свойства на CS кристалите и конформацията на неговите молекули допринасят за подредеността и подвижността на фосфолипидите в мембраните при температурни промени, което позволява на мембраната да бъде в междинно фазово състояние (“гел - течен кристал”) и консервирайте физиологични функции. CS се използва като прекурсор в биосинтезата на стероидни хормони (глюко- и минералокортикоиди, полови хормони), витамин D 3, както и жлъчни киселини. Условно можем да различим 3 групи холестерол:
A - бързо сменяем (30 g);
B – бавнообменна (50 g);
B – много бавно обменящи се (60 g).
Ендогенният холестерол се синтезира в значителни количества в черния дроб (80%). Екзогенният холестерол влиза в тялото като част от животински продукти. Осъществява се транспорт на холестерола от черния дроб до екстрахепаталните тъкани
LDL. Отстраняването на холестерола от черния дроб от екстрахепаталните тъкани в черния дроб се извършва от зрели форми на HDL (50% - LDL, 25% HDL, 17% VLDL, 5% -CM).
Хиперлипопротеинемия и хиперхолестеролемия (класификация на Fredrickson):
Тип 1 – хиперхиломикронемия;
тип 2 - а - хипер-β-липопротеинемия, b - хипер-β и хиперпре-β-липопротеинемия;
тип 3 – дис-β-липопротеинемия;
тип 4 – хипер-пре-β-липопротеинемия;
Тип 5 – хипер-пре-β-липопротеинемия и хиперхиломикронемия.
Най-атерогенни са тип 2 и 3.
Фосфолипидите са група липиди, съдържащи в допълнение към фосфорната киселина (основен компонент), алкохол (обикновено глицерол), остатъци от мастни киселини и азотни основи. В клиничната и лабораторна практика съществува метод за определяне на нивото на общите фосфолипиди, чието ниво се повишава при пациенти с първична и вторична хиперлипопротеинемия IIa и IIb. Намаление се наблюдава при редица заболявания:
Хранителна дистрофия;
Мастна дегенерация на черния дроб,
Портална цироза;
Прогресия на атеросклерозата;
Хипертиреоидизъм и др.
Липидната пероксидация (LPO) е процес на свободни радикали, чието иницииране става с образуването на реактивни кислородни видове - супероксиден йон O 2 . ; хидроксилен радикал HO . ; хидропероксиден радикал HO 2 . ; синглетен кислород О2; хипохлоритен йон ClO - . Основните субстрати на LPO са полиненаситени мастни киселини, открити в структурата на мембранните фосфолипиди. Най-силният катализатор са металните йони на желязото. СЕКСЪТ е физиологичен процес, който има важноза тялото, тъй като регулира пропускливостта на мембраната, засяга деленето и растежа на клетките, започва фагосинтеза, е път за биосинтеза на някои биологични вещества(простагландини, тромбоксани). Нивото на липидна пероксидация се контролира от антиоксидантната система ( аскорбинова киселина, пикочна киселина, β-каротин и др.). Загубата на баланс между двете системи води до смърт на клетките и клетъчните структури.
За диагностика е обичайно да се определя съдържанието на продукти на липидна пероксидация (диенови конюгати, малондиалдехид, бази на Шиф) и концентрацията на основния естествен антиоксидант - алфа-токоферол в плазмата и червените кръвни клетки с изчисляване на коефициента MDA / TF . Интегрален тест за оценка на LPO е определянето на пропускливостта на мембраните на еритроцитите.
2. Обмяна на пигментинабор от сложни трансформации на различни цветни вещества в тялото на човека и животните.
Най-известният кръвен пигмент е хемоглобинът (хромопротеин, който се състои от протеиновата част на глобина и простетична група, представена от 4 хема, всеки хем се състои от 4 пиролови ядра, които са свързани помежду си с метинови мостове, в центъра има железен йон със степен на окисление 2+). Средната продължителност на живота на един еритроцит е 100-110 дни. В края на този период настъпва разрушаване и разрушаване на хемоглобина. Процесът на разпадане започва още през съдово легло, завършва в клетъчните елементи на системата от фагоцитни мононуклеарни клетки (клетки на Купфер на черния дроб, хистиоцити съединителна тъкан, плазмени клетки костен мозък). Хемоглобинът в съдовото легло се свързва с плазмения хаптоглобин и се задържа в съдовото легло, без да преминава през бъбречния филтър. Поради трипсиноподобното действие на бета-веригата на хаптоглобина и конформационните промени, причинени от неговото влияние в порфириновия пръстен на хема, се създават условия за по-лесно разрушаване на хемоглобина в клетъчните елементи на фагоцитната мононуклеарна система -молекулен зелен пигмент вердоглобин(синоними: вердохемоглобин, холеглобин, псевдохемоглобин) е комплекс, състоящ се от глобин, счупена порфиринова пръстенна система и фери желязо. По-нататъшните трансформации водят до загуба на желязо и глобин от вердоглобин, в резултат на което порфириновият пръстен се разгръща във верига и се образува зелен жлъчен пигмент с ниско молекулно тегло - биливердин. Почти цялото количество се възстановява ензимно в най-важния червено-жълт пигмент на жлъчката - билирубин,който е често срещан компонент на кръвната плазма На повърхността плазмена мембранахепатоцитът претърпява дисоциация. В този случай освободеният билирубин образува временен асоциат с липидите на плазмената мембрана и се движи през нея поради активността на определени ензимни системи. По-нататъшното преминаване на свободния билирубин в клетката става с участието на два протеина носител в този процес: лигандин (той транспортира основното количество билирубин) и протеин Z.
Лигандин и протеин Z също се намират в бъбреците и червата, следователно, в случай на недостатъчна чернодробна функция, те са свободни да компенсират отслабването на процесите на детоксикация в този орган. И двете са доста разтворими във вода, но нямат способността да се движат през липидния слой на мембраната. Чрез свързването на билирубина с глюкуроновата киселина, присъщата токсичност на свободния билирубин до голяма степен се губи. Хидрофобен, липофилен свободен билирубин, който лесно се разтваря в мембранните липиди и следователно прониква в митохондриите, разединява дишането и окислителното фосфорилиране в тях, нарушава протеиновия синтез, потока на калиеви йони през мембраната на клетките и органелите. Това се отразява негативно на състоянието на централната нервна система, причинявайки у пациентите редица характерни неврологични симптоми.
Билирубиновите глюкурониди (или свързаният, конюгиран билирубин), за разлика от свободния билирубин, веднага реагират с диазореагента („директен“ билирубин). Трябва да се има предвид, че в самата кръвна плазма билирубинът, който не е конюгиран с глюкуронова киселина, може да бъде свързан с албумин или не. Последната фракция (билирубин, несвързан с албумин, липиди или други кръвни съставки) е най-токсична.
Билирубиновите глюкурониди, благодарение на ензимните системи на мембраните, активно преминават през тях (срещу градиента на концентрация) в жлъчните пътища, екскретиран заедно с жлъчката в чревния лумен. В него, под въздействието на ензими, произведени от чревната микрофлора, глюкуронидната връзка се разрушава. Освободеният свободен билирубин се редуцира, за да образува първо мезобилирубин и след това мезобилиноген (уробилиноген) в тънките черва. Обикновено определена част от мезобилиногена се абсорбира в тънките черва и в горната част на дебелото черво през системата портална венанавлиза в черния дроб, където се разрушава почти напълно (чрез окисление), превръщайки се в дипиролови съединения - пропент-диопент и мезобилевкан.
Мезобилиноген (уробилиноген) не навлиза в общото кръвообращение. Част от него, заедно с продуктите на разрушаване, отново се изпраща в чревния лумен като част от жлъчката (ентерохепотична циркулация). Въпреки това, дори и при най-незначителните промени в черния дроб, той бариерна функциядо голяма степен се „отстранява“ и мезобилиногенът навлиза първо в общото кръвообращение и след това в урината. По-голямата част от него е насочена от тънки червав дебелата, където под въздействието на анаеробна микрофлора (Escherichia coli и други бактерии) претърпява по-нататъшна редукция с образуването на стеркобилиноген. Полученият стеркобилиноген (дневно количество 100-200 mg) почти напълно се екскретира с изпражненията. Във въздуха той се окислява и се превръща в стеркобилин, който е един от пигментите на изпражненията. Малка част от стеркобилиноген се абсорбира през лигавицата на дебелото черво в системата на долната вена кава, доставя се в кръвта до бъбреците и се екскретира в урината.
Така че в урината здрав човекНяма мезобилиноген (уробилиноген), но съдържа малко стеркобилин (който често неправилно се нарича "уробилин")
За определяне на съдържанието на билирубин в кръвния серум (плазма), химически и физико-химични методиизследвания, включително колориметрични, спектрофотометрични (ръчни и автоматизирани), хроматографски, флуориметрични и някои други.
Един от важните субективни признаци на нарушение на пигментния метаболизъм е появата на жълтеница, която обикновено се отбелязва, когато нивото на билирубина в кръвта е 27-34 µmol / l или повече. Причините за хипербилирубинемия могат да бъдат: 1) повишена хемолиза на червените кръвни клетки (повече от 80% общ билирубинпредставена от неконюгиран пигмент); 2) нарушена функция на чернодробните клетки и 3) забавено изтичане на жлъчката (хипербилирубинемията е с чернодробен произход, ако повече от 80% от общия билирубин е конюгиран билирубин). В първия случай се говори за така наречената хемолитична жълтеница, във втория - за паренхимна жълтеница (може да бъде причинена от наследствени дефекти в процесите на транспортиране на билирубин и неговото глюкурониране), в третия - за механична (или обструктивна). , застойна) жълтеница.
С паренхимна форма на жълтеницаИма деструктивно-дистрофични промени в паренхимните клетки на черния дроб и инфилтративни в стромата, което води до повишаване на налягането в черния дроб. жлъчните пътища. Стагнацията на билирубина в черния дроб също се улеснява от рязкото отслабване на метаболитните процеси в засегнатите хепатоцити, които губят способността си да извършват нормално различни биохимични и физиологични процеси, по-специално прехвърляне на свързания билирубин от клетките в жлъчката срещу градиент на концентрация. Увеличаването на концентрацията на конюгиран билирубин в кръвта води до появата му в урината.
Най-„финият“ признак на увреждане на черния дроб при хепатит е външният вид мезобилиноген(уробилиноген) в урината.
При паренхимна жълтеница се повишава главно концентрацията на свързания (конюгиран) билирубин в кръвта. Съдържанието на свободен билирубин се увеличава, но в по-малка степен.
Патогенезата на обструктивната жълтеница се основава на спирането на жлъчния поток в червата, което води до изчезване на стеркобилиноген от урината. При застойна жълтеница съдържанието на конюгиран билирубин в кръвта се увеличава главно. Екстрахепаталната холестатична жълтеница е придружена от триада клинични признаци: Обезцветени изпражнения, тъмна урина и сърбяща кожа. Клинично интрахепаталната холестаза се проявява със сърбеж по кожата и жълтеница. При лабораторни изследванияхипербилирубинемия (поради свързана), билирубинурия, повишена алкална фосфатаза с нормални стойноститрансаминази в кръвния серум.
Хемолитична жълтеницаса причинени от хемолиза на червените кръвни клетки и, като следствие, повишено образуване на билирубин. Увеличаването на свободния билирубин е един от основните признаци на хемолитична жълтеница.
IN клинична практикаразграничават вродена и придобита функционална хипербилирубинемия, причинена от нарушение на елиминирането на билирубин от тялото (наличие на дефекти в ензимните и други системи за пренос на билирубин през клетъчните мембрани и неговото глюкурониране в тях). Синдромът на Gilbert е наследствено доброкачествено хронично заболяване, което протича с умерена нехемолитична неконюгирана хипербилирубинемия. Постхепатитна хипербилирубинемия Калка - придобит ензимен дефект, водещ до повишаване на нивото на свободния билирубин в кръвта, вродена фамилна нехемолитична жълтеница на Crigler - Nayjar (липса на глюкуронилтрансфераза в хепатоцитите), жълтеница с вроден хипотиреоидизъм (тироксинът стимулира ензимна глюкуронилтрансферазна система), физиологична жълтеница на новородени, лекарствена жълтеница и др.
Нарушенията в пигментния метаболизъм могат да бъдат причинени от промени не само в процесите на разграждане на хема, но и в образуването на неговите предшественици - порфирини (циклични органични съединения на базата на порфинов пръстен, състоящ се от 4 пирола, свързани с метинови мостове). Порфирия – група наследствени заболявания, придружен от генетичен дефицит в активността на ензимите, участващи в биосинтезата на хема, при който се открива повишаване на съдържанието на порфирини или техните прекурсори в организма, което причинява редица клинични признаци (прекомерно образуване на метаболитни продукти, предизвиква развитие на неврологични симптоми и (или) повишена фоточувствителност на кожата).
Най-широко използваните методи за определяне на билирубина се основават на взаимодействието му с диазореагент (реактив на Ерлих). Методът Jendrassik-Grof стана широко разпространен. При този метод смес от кофеин и натриев бензоат в ацетатен буфер се използва като "освободител" на билирубина. Ензимното определяне на билирубина се основава на неговото окисление от билирубиноксидаза. Възможно е да се определи неконюгиран билирубин чрез други методи на ензимно окисление.
Понастоящем определянето на билирубина с помощта на методи на „суха химия“ става все по-широко разпространено, особено при бърза диагностика.
витамини.
Витамините са незаменими нискомолекулни вещества, които влизат в тялото с храната отвън и участват в регулирането на биохимичните процеси на ензимно ниво.
Прилики и разлики между витамини и хормони.
Прилики– регулира метаболизма в човешкото тяло чрез ензими:
· витаминиса част от ензимите и са коензими или кофактори;
· Хормониили регулират активността на съществуващите ензими в клетката, или са индуктори или репресори в биосинтезата на необходимите ензими.
Разлика:
· витамини– ниско молекулно тегло органични съединения, екзогенни фактори, регулиращи метаболизма и идващи от храната отвън.
· Хормони– органични съединения с високо молекулно тегло, ендогенни фактори, синтезирани в ендокринните жлези на тялото в отговор на промени във външните или вътрешна средачовешкото тяло, а също така регулира метаболизма.
Витамините се класифицират на:
1. Мастноразтворими: A, D, E, K, A.
2. Водоразтворими: група B, PP, H, C, THFA (тетрахидрофолиева киселина), пантотенова киселина(B 3), P (рутин).
Витамин А (ретинол, антиксерофталмичен) –химическата структура е представена от β-йононов пръстен и 2 изопренови остатъка; Потребността на организма е 2,5-30 мг на ден.
Най-ранният и специфичен знакхиповитаминоза А - хемералопия (нощна слепота) - нарушено зрение в здрач. Възниква поради липса визуален пигмент- родопсин. Родопсинът съдържа ретинал (витамин А алдехид) като активна група - намира се в ретиналните пръчици. Тези клетки (пръчки) възприемат светлинни сигнали с ниска интензивност.
Родопсин = опсин (протеин) + цис-ретинал.
Когато родопсинът се възбужда от светлина, цис-ретиналът, в резултат на ензимни пренареждания вътре в молекулата, се трансформира в изцяло транс-ретинал (на светлина). Това води до конформационно пренареждане на цялата молекула родопсин. Родопсинът се разделя на опсин и транс-ретинал, което е тригер, който възбужда в окончанията зрителен нервимпулс, който след това се предава на мозъка.
На тъмно, в резултат на ензимни реакции, транс-ретиналът се превръща обратно в цис-ретинал и, комбинирайки се с опсин, образува родопсин.
Витамин А също влияе върху процесите на растеж и развитие покривен епител. Следователно, при недостиг на витамини се наблюдава увреждане на кожата, лигавиците и очите, което се изразява в патологична кератинизация на кожата и лигавиците. Пациентите развиват ксерофталмия - сухота на роговицата на окото, тъй като слъзният канал се блокира в резултат на кератинизация на епитела. Тъй като окото престава да се измива със сълзи, които имат бактерициден ефект, се развива конюнктивит, язва и омекване на роговицата - кератомалация. При недостиг на витамин А може да има и увреждане на стомашно-чревната лигавица, дихателната и пикочно-половия тракт. Устойчивостта на всички тъкани към инфекции е нарушена. С развитието на дефицит на витамини в детска възраст се наблюдава забавяне на растежа.
Понастоящем е доказано участието на витамин А в защитата на клетъчните мембрани от оксиданти - тоест витамин А има антиоксидантна функция.
Липидисе наричат мазнини, които влизат в тялото с храната и се образуват в черния дроб. Кръвта (плазма или серум) съдържа 3 основни класа липиди: триглицериди (TG), холестерол (CS) и неговите естери, фосфолипиди (PL).
Липидите могат да привличат вода, но повечето от тях не се разтварят в кръвта. Те се транспортират в свързано с протеин състояние (под формата на липопротеини или с други думи липопротеини). Липопротеините се различават не само по състав, но и по размер и плътност, но структурата им е почти еднаква. Централна част(ядро) е представено от холестерол и неговите естери, мастни киселини, триглицериди. Обвивката на молекулата се състои от протеини (апопротеини) и водоразтворими липиди (фосфолипиди и неестерифициран холестерол). Външната част на апопротеините е способна да образува водородни връзки с водни молекули. По този начин липопротеините могат да бъдат частично разтворени в мазнини и частично във вода.
Хиломикроните, след като навлязат в кръвта, се разпадат на глицерол и мастни киселини, което води до образуването на липопротеини. Хиломикронните остатъци, съдържащи холестерол, се обработват в черния дроб.
Холестеролът и триглицеридите се образуват в черния дроб в липопротеини с много ниска плътност (VLDL), които освобождават част от триглицеридите към периферните тъкани, докато останалата част се връща обратно в черния дроб и се превръща в липопротеини с ниска плътност (LDL).
L PN II са преносители на холестерол за периферните тъкани, който се използва за изграждане на клетъчни мембрани и метаболитни реакции. В този случай неестерифицираният холестерол навлиза в кръвната плазма и се свързва с липопротеините с висока плътност (HDL). Естерифицираният холестерол (свързан с естери) се превръща в VLDL. След това цикълът се повтаря.
Кръвта също така съдържа липопротеини с междинна плътност (IDL), които са остатъци от хиломикрони и VLDL и съдържат големи количества холестерол. DILI в чернодробните клетки с участието на липаза се превръщат в LDL.
Кръвната плазма съдържа 3,5-8 g/l липиди. Повишаването на нивата на липидите в кръвта се нарича хиперлипидемия, а намаляването се нарича хиполипидемия. Индикаторът за общите липиди в кръвта не дава подробна картина на състоянието на метаболизма на мазнините в организма.
Количественото определяне на специфични липиди е от диагностично значение. Липидният състав на кръвната плазма е представен в таблицата.
Липиден състав на кръвната плазма
| Липидна фракция | Нормален индикатор | |
| Общи липиди | 4,6-10,4 mmol/l | |
| Фосфолипиди | 1,95-4,9 mmol/l | |
| Липиден фосфор | 1,97-4,68 mmol/l | |
| Неутрални мазнини | 0-200 mg% | |
| Триглицериди | 0,565-1,695 mmol/l (серум) | |
| Неестерифицирани мастни киселини | 400-800 mmol/l | |
| Свободни мастни киселини | 0,3-0,8 µmol/l | |
| Общ холестерол (има норми за възрастта) | 3,9-6,5 mmol/l (унифициран метод) | |
| Свободен холестерол | 1,04-2,33 mmol/l | |
| Холестеролови естери | 2,33-3,49 mmol/l | |
| HDL | М | 1,25-4,25 g/l |
| И | 2,5-6,5 g/l | |
| LDL | 3-4,5 g/l | |
Дислипидемиите се делят на първични, свързани с вродени нарушения на метаболизма, и вторични. Причините за вторична дислипидемия са липса на физическа активност и прекомерно хранене, алкохолизъм, захарен диабет, хипертиреоидизъм, чернодробна цироза и хронична бъбречна недостатъчност. В допълнение, те могат да се развият по време на лечение с глюкокортикостероиди, B-блокери, прогестини и естрогени. Класификацията на дислипидемиите е представена в таблицата.
Класификация на дислипидемиите
| Тип | Повишени кръвни нива | |
| Липопротеини | Липиди | |
| аз | Хиломикрони | Холестерол, триглицериди |
| включено | LDL | Холестерол (не винаги) |
| Тип | Повишени кръвни нива | |
| Липопротеини | Липиди | |
| Nb | LDL, VLDL | Холестерол, триглицериди |
| III | VLDL, LPPP | Холестерол, триглицериди |
| IV | VLDL | Холестерол (не винаги), триглицериди |
| V | Хиломикрони, VLDL | Холестерол, триглицериди |
– група от разнородни химическа структураи физични и химични свойства на веществата. В кръвния серум те са представени главно от мастни киселини, триглицериди, холестерол и фосфолипиди.
Триглицеридиса основната форма на съхранение на липиди в мастната тъкан и транспорт на липиди в кръвта. Необходимо е изследване на нивата на триглицеридите, за да се определи вида на хиперлипопротеинемията и да се оцени рискът от развитие на сърдечно-съдови заболявания.
Холестеролизпълнява основни функции: включен в клетъчни мембрани, е прекурсор на жлъчни киселини, стероидни хормони и витамин D и действа като антиоксидант. Около 10% от руското население имат повишено нивохолестерол в кръвта. Това състояние е безсимптомно и може да доведе до тежки заболявания(атеросклеротични съдови лезии, коронарна болест на сърцето).
Липидите са неразтворими във вода, така че се транспортират чрез кръвен серум в комбинация с протеини. Липидно+протеинови комплекси се наричат липопротеини. И се наричат протеини, които участват в транспорта на липидите апопротеини.
В кръвния серум присъстват няколко класа липопротеини: хиломикрони, липопротеини с много ниска плътност (VLDL), липопротеини с ниска плътност (LDL) и липопротеини с висока плътност (HDL).
Всяка липопротеинова фракция има своя собствена функция. се синтезират в черния дроб и транспортират главно триглицеридите. играяважна роля в атерогенезата.Липопротеини с ниска плътност (LDL) богати на холестерол, доставят холестерол в периферните тъкани. Нивата на VLDL и LDL насърчават отлагането на холестерол в съдовата стена и се считат за атерогенни фактори.участват в обратния транспорт на холестерола от тъканите, като го отнемат от претоварените тъканни клетки и го прехвърлят в черния дроб, който го „оползотворява“ и извежда от тялото. високо ниво на HDLсчита се за антиатерогенен фактор (предпазва организма от атеросклероза).
Ролята на холестерола и риска от развитие на атеросклероза зависи от това в кои липопротеинови фракции е включен. За да се оцени съотношението на атерогенните и антиатерогенните липопротеини, се използва атерогенен индекс.
Аполипопротеини- Това са протеини, които се намират на повърхността на липопротеините.
Аполипопротеин А (ApoA протеин)е основният протеинов компонент на липопротеините (HDL), който транспортира холестерола от клетките на периферната тъкан към черния дроб.
Аполипопротеин В (ApoB протеин)е част от липопротеините, които транспортират липидите до периферните тъкани.
Измерването на концентрацията на аполипопротеин А и аполипопротеин В в кръвния серум осигурява най-точното и недвусмислено определяне на съотношението на атерогенните и антиатерогенните свойства на липопротеините, което се оценява като риск от развитие на атеросклеротични съдови лезии и коронарна болест на сърцето през следващите пет години .
Към изследването липиден профилвключва следните показатели: холестерол, триглицериди, VLDL, LDL, HDL, коефициент на атерогенност, съотношение холестерол/триглицериди, глюкоза. Този профил дава пълна информацияотносно липидния метаболизъм, ви позволява да определите рисковете от развитие на атеросклеротични съдови лезии, коронарна болест на сърцето, да идентифицирате наличието на дислипопротеинемия и да я типизирате, а също така, ако е необходимо, да изберете правилната терапия за понижаване на липидите.
Показания
Повишена концентрацияхолестеролима диагностична стойностс първична фамилна хиперлипидемия (наследствени форми на заболяването); бременност, хипотиреоидизъм, нефротичен синдром, обструктивни чернодробни заболявания, заболявания на панкреаса ( хроничен панкреатит, злокачествени новообразувания), захарен диабет.
Намалена концентрацияхолестеролима диагностична стойност при чернодробни заболявания (цироза, хепатит), гладуване, сепсис, хипертиреоидизъм, мегалобластна анемия.
Повишена концентрациятриглицеридиима диагностична стойност за първична хиперлипидемия (наследствени форми на заболяването); затлъстяване, прекомерна консумациявъглехидрати, алкохолизъм, захарен диабет, хипотиреоидизъм, нефротичен синдром, хрон бъбречна недостатъчност, подагра, остър и хроничен панкреатит.
Намалена концентрациятриглицеридиима диагностична стойност за хиполипопротеинемия, хипертиреоидизъм, синдром на малабсорбция.
Липопротеини с много ниска плътност (VLDL)използвани за диагностициране на дислипидемия (типове IIb, III, IV и V). Високите концентрации на VLDL в кръвния серум индиректно отразяват атерогенните свойства на серума.
Повишена концентрациялипопротеин с ниска плътност (LDL)има диагностична стойност за първична хиперхолестеролемия, дислипопротеинемия (типове IIa и IIb); за затлъстяване, обструктивна жълтеница, нефротичен синдром, захарен диабет, хипотиреоидизъм. Определянето на нивата на LDL е необходимо за предписване на продължително лечение, чиято цел е да се намалят липидните концентрации.
Повишена концентрацияима диагностична стойност за чернодробна цироза и алкохолизъм.
Намалена концентрациялипопротеин с висока плътност (HDL)има диагностична стойност за хипертриглицеридемия, атеросклероза, нефротичен синдром, захарен диабет, остри инфекции, затлъстяване, тютюнопушене.
Определяне на ниво аполипопротеин Апоказан за ранна оценка на риска от коронарна болест на сърцето; идентифициране на пациенти с наследствена предразположеност към атеросклероза в относително в млада възраст; проследяване на лечението с лекарства за понижаване на липидите.
Повишена концентрацияаполипопротеин Аима диагностична стойност при чернодробни заболявания и бременност.
Намалена концентрацияаполипопротеин Аима диагностична стойност за нефротичен синдром, хронична бъбречна недостатъчност, триглицеридемия, холестаза, сепсис.
Диагностична стойностаполипопротеин В- най-точният индикатор за риска от развитие на сърдечно-съдови заболявания, е и най-адекватният показател за ефективността на терапията със статини.
Повишена концентрацияаполипопротеин Вима диагностична стойност за дислипопротеинемия (типове IIa, IIb, IV и V), коронарна болест на сърцето, захарен диабет, хипотиреоидизъм, нефротичен синдром, чернодробни заболявания, синдром на Иценко-Кушинг, порфирия.
Намалена концентрацияаполипопротеин Вима диагностична стойност за хипертиреоидизъм, синдром на малабсорбция, хронична анемия, възпалителни заболяваниястави, миелом.
Методика
Определянето се извършва на биохимичен анализатор “Архитект 8000”.
Подготовка
за изследване на липидния профил (холестерол, триглицериди, HDL-C, LDL-C, Apo-протеини на липопротеини (Apo A1 и Apo-B)
Необходимо е да се въздържате от физическа активност, пиене на алкохол, пушене и лекарства, диетични промени най-малко две седмици преди вземането на кръв.
Кръвта се взема само на празен стомах, 12-14 часа след последното хранене.
За предпочитане сутрешен прием лекарстваизвършете след вземане на кръв (ако е възможно).
Следните процедури не трябва да се извършват преди кръводаряване: инжекции, пункции, общ масажтяло, ендоскопия, биопсия, ЕКГ, рентгеново изследване, особено с въвеждането на контрастно вещество, диализа.
Ако все още беше незначително физическа активност– Трябва да почивате поне 15 минути преди кръводаряване.
Изследване на липидите не се извършва, когато инфекциозни заболявания, тъй като има понижение на нивото на общия холестерол и HDL-C, независимо от вида на инфекциозния агент или клиничното състояние на пациента. Липидният профил трябва да се проверява само след пълно възстановяванепациент.
Много е важно тези препоръки да се спазват стриктно, тъй като само в този случай ще бъдат получени надеждни резултати от кръвния тест.
За количествено определяне на общите липиди в кръвния серум най-често се използва колориметричният метод с фосфованилинов реактив. Обикновените липиди реагират след хидролиза със сярна киселина с фосфованилинов реагент, за да образуват червен цвят. Интензивността на цвета е пропорционална на съдържанието на общите липиди в кръвния серум.
1. Добавете реактиви в три епруветки според следната диаграма:
2. Смесете съдържанието на епруветките и оставете на тъмно за 40-60 минути. (цветът на разтвора се променя от жълт на розов).
3. Разбъркайте отново и измерете оптичната плътност при 500-560 nm (зелен филтър) срещу сляпа проба в кювета с дебелина на слоя 5 mm.
4. Изчислете количеството на общите липиди, като използвате формулата:
където D 1 е екстинкцията на експерименталната проба в кюветата;
D 2 – екстинкция на калибровъчния разтвор на липидите в кюветата;
X е концентрацията на общите липиди в стандартния разтвор.
Дефинирайте понятието "общи липиди". Сравнете получената стойност с нормалните стойности. Какви биохимични процеси могат да се съдят по този показател?
Експеримент 4. Определяне на съдържанието на b- и pre-b-липопротеини в кръвния серум.
2. Комплект пипети.
3. Стъклена пръчка.
5. Кювети, 0,5 см.
Реактиви. 1. Кръвен серум.
2. Калциев хлорид, 0,025 М разтвор.
3. Хепарин, 1% разтвор.
4. Дестилирана вода.
1. Изсипете 2 ml 0,025 M калциев хлорид в епруветка и добавете 0,2 ml кръвен серум.
2. Смесете и измерете оптичната плътност на пробата (D 1) на FEC-e при дължина на вълната 630-690 nm (червен филтър) в кювета с дебелина на слоя 0,5 cm срещу дестилирана вода. Запишете стойността на оптичната плътност D 1.
3. След това добавете 0,04 ml 1% разтвор на хепарин (1000 единици в 1 ml) към кюветата и отново измерете оптичната плътност D2 точно след 4 минути.
Разликата в стойностите (D 2 - D 1) съответства на оптичната плътност, дължаща се на утайката на b-липопротеините.
Изчислете съдържанието на b- и pre-b-липопротеини по формулата:
където 12 е коефициентът за превръщане в g/l.
Посочете мястото на биосинтеза на b-липопротеините. Каква функция изпълняват в тялото на човека и животните? Сравнете получената стойност с нормалните стойности. В какви случаи се наблюдават отклонения от нормалните стойности?
Урок № 16. „Липиден метаболизъм (част 2)“
Цел на урока: изучаване на процесите на катаболизъм и анаболизъм на мастни киселини.
ВЪПРОСИ КЪМ ТЕСТА:
1. Биохимичен механизъм на окисление на мастни киселини.
2. Метаболизъм на кетонни тела: образуване, биохимична цел. Какви фактори предразполагат към развитие на кетоза при животните?
3. Биохимичен механизъм на синтеза на мастни киселини.
4. Биосинтеза на триацилглицероли. Биохимичната роля на този процес.
5. Биосинтеза на фосфолипиди. Биохимичната роля на този процес.
Дата на завършване ________ Точка ____ Подпис на учителя ____________
Експериментална работа.
Експеримент 1. Експресен метод за определяне на кетонни тела в урина, мляко, кръвен серум (тест на Lestrade).
устройства. 1. Поставка с епруветки.
2. Комплект пипети.
3. Стъклена пръчка.
4. Филтърна хартия.
Реактиви. 1. Реагент на прах.
3. Кръвен серум.
4. Мляко.
1. Поставете малко количество (0,1-0,2 g) реагент на прах върху филтърната хартия на върха на скалпела.
2. Прехвърлете няколко капки кръвен серум към прахообразния реагент.
Минималното ниво на кетонни тела в кръвта, което дава положителна реакция, равно на 10 mg/100 ml (10 mg%). Скоростта на развитие на цвета и неговият интензитет са пропорционални на концентрацията на кетонни тела в тестовата проба: ако виолетовият цвят се появи веднага - съдържанието е 50-80 mg% или повече; ако се появи след 1 минута, пробата съдържа 30-50 mg%; появата на бледо оцветяване след 3 минути показва наличието на 10-30 mg% кетонни тела.
Трябва да се помни, че тестът е повече от 3 пъти по-чувствителен при определяне на ацето оцетна киселинаотколкото ацетон. От всички кетонни тела в човешкия серум преобладаващата е ацетооцетната киселина, но в кръвта на здрави крави 70-90% от кетонните тела са b-хидроксимаслена киселина, а в млякото тя представлява 87-92%.
Направете заключение въз основа на резултатите от вашите изследвания. Обяснете защо прекомерното образуване на кетонни тела е опасно в човешкото и животинското тяло?
Те имат различна плътност и са показатели за липидния метаболизъм. Съществуват различни методи за количествено определяне на общите липиди: колориметричен, нефелометричен.
Принцип на метода. Продуктите на хидролизата на ненаситените липиди образуват червено съединение с реагента фосванилин, чийто интензитет на цвета е право пропорционален на съдържанието на общите липиди.
Повечето липиди не се намират в кръвта в свободно състояние, а като част от протеиново-липидните комплекси: хиломикрони, α-липопротеини, β-липопротеини. Липопротеините могат да бъдат разделени по различни методи: центрофугиране в солеви разтвориразлични плътности, електрофореза, тънкослойна хроматография. По време на ултрацентрофугиране се изолират хиломикрони и липопротеини с различна плътност: висока (HDL - α-липопротеини), ниска (LDL - β-липопротеини), много ниска (VLDL - пре-β-липопротеини) и др.
Липопротеиновите фракции се различават по количеството протеин, относителното молекулно тегло на липопротеините и процентното съдържание на отделните липидни компоненти. Така α-липопротеините, съдържащи голямо количество протеин (50-60%), имат по-висока относителна плътност (1,063-1,21), докато β-липопротеините и пре-β-липопротеините съдържат по-малко протеини и значително количество липиди - до 95% от общото относително молекулно тегло и ниска относителна плътност (1,01-1,063).
Принцип на метода. Когато серумният LDL взаимодейства с хепариновия реагент, се появява мътност, чийто интензитет се определя фотометрично. Хепариновият реактив е смес от хепарин и калциев хлорид.
Проучван материал: кръвен серум.
Реактиви: 0,27% разтвор на CaCl2, 1% разтвор на хепарин.
Оборудване: микропипета, FEC, кювета с дължина на оптичния път 5 mm, епруветки.
ХОД НА РАБОТАТА. Добавете 2 ml 0,27% разтвор на CaCl 2 и 0,2 ml кръвен серум в епруветка и разбъркайте. Определя се оптичната плътност на разтвора (E 1) спрямо 0,27% разтвор на CaCl 2 в кювети, като се използва червен филтър (630 nm). Разтворът от кюветата се излива в епруветка, с микропипета се добавят 0,04 ml 1% разтвор на хепарин, разбърква се и точно след 4 минути отново се определя оптичната плътност на разтвора (Е 2) при същите условия. .
Разликата в оптичната плътност се изчислява и умножава по 1000 - емпиричен коефициент, предложен от Ledvina, тъй като изграждането на калибровъчна крива е свързано с редица трудности. Отговорът се изразява в g/l.
x(g/l) = (E 2 - E 1) 1000.
. Съдържанието на LDL (b-липопротеини) в кръвта варира в зависимост от възрастта, пола и нормално е 3,0-4,5 g/l. Повишаване на концентрацията на LDL се наблюдава при атеросклероза, обструктивна жълтеница, остър хепатит, хронични заболяваниячерен дроб, диабет, гликогеноза, ксантоматоза и затлъстяване, намален при b-плазмоцитом. Средното съдържание на LDL холестерол е около 47%.
Определяне на общия холестерол в кръвния серум въз основа на реакцията на Либерман-Буркхард (метод на Ilk)
Екзогенният холестерол в количество от 0,3-0,5 g идва от хранителни продукти, а ендогенният се синтезира в организма в количество 0,8-2 g дневно. Особено много холестерол се синтезира в черния дроб, бъбреците, надбъбречните жлези и артериалната стена. Холестеролът се синтезира от 18 молекули ацетил-КоА, 14 молекули NADPH, 18 молекули АТФ.
Когато оцетен анхидрид и концентрирана сярна киселина се добавят към кръвния серум, течността става последователно червена, синя и накрая зелено. Реакцията се причинява от образуването на зелена сулфонова киселина холестерилен.
Реактиви: реактив на Либерман-Буркхард (смес от ледена оцетна киселина, оцетен анхидрид и концентрирана сярна киселина в съотношение 1:5:1), стандартен (1,8 g/l) разтвор на холестерол.
Оборудване: сухи епруветки, сухи пипети, FEC, кювети с дължина на оптичния път 5 mm, термостат.
ХОД НА РАБОТАТА. Всички епруветки, пипети, кювети трябва да са сухи. Трябва да бъдете много внимателни, когато работите с реактива на Либерман-Буркхард. 2,1 ml реактив на Либерман-Буркхард се поставя в суха епруветка, 0,1 ml нехемолизиран кръвен серум се добавя много бавно по стената на епруветката, епруветката се разклаща енергично и след това се термостатира за 20 минути при 37ºC . Получава се изумруденозелен цвят, който се колориметрира на FEC с червен филтър (630-690 nm) срещу реактива на Либерман-Буркхард. Оптичната плътност, получена на FEC, се използва за определяне на концентрацията на холестерол съгласно калибровъчната графика. Установената концентрация на холестерол се умножава по 1000, тъй като в експеримента се вземат 0,1 ml серум. Коефициентът на преобразуване в единици SI (mmol/l) е 0,0258. Нормално съдържаниеобщ холестерол (свободен и естерифициран) в кръвния серум 2,97-8,79 mmol/l (115-340 mg%).
Изграждане на калибровъчна графика. От стандартен разтвор на холестерол, където 1 ml съдържа 1,8 mg холестерол, вземете 0,05; 0,1; 0,15; 0,2; 0,25 ml и се регулира до обем от 2,2 ml с реактива на Liebermann-Burkhard (2,15; 2,1; 2,05; 2,0; 1,95 ml, съответно). Количеството холестерол в пробата е 0,09; 0,18; 0,27; 0,36; 0,45 мг. Получените стандартни холестеролни разтвори, както и епруветките се разклащат енергично и се поставят в термостат за 20 минути, след което се фотометрират. Графиката за калибриране е изградена въз основа на стойностите на екстинкция, получени в резултат на фотометрия на стандартни разтвори.
Клинична и диагностична стойност. Ако липидният метаболизъм е нарушен, холестеролът може да се натрупа в кръвта. Повишаване на холестерола в кръвта (хиперхолестеролемия) се наблюдава при атеросклероза, захарен диабет, обструктивна жълтеница, нефрит, нефроза (особено липоидна нефроза), хипотиреоидизъм. Намаляване на холестерола в кръвта (хипохолестеролемия) се наблюдава при анемия, гладуване, туберкулоза, хипертиреоидизъм, ракова кахексия, паренхимна жълтеница, увреждане на централната нервна система, фебрилни състояния, когато се прилага.
