Coombsův test, přímý a nepřímý, kde to udělat. Typy a důvody pro provádění Coombsova testu

– antiglobulinový test zaměřený na identifikaci v Rh-negativní krvi neúplných antierytrocytárních protilátek proti Rh faktoru - specifickému proteinu, který se nachází na povrchu erytrocytů Rh-pozitivní krve. Existují dva typy tohoto testu: přímý - průkaz protilátek na povrchu červených krvinek, nepřímý - průkaz protilátek v krevním séru. Přímé testování se provádí při diagnostice a sledování léčby krevních onemocnění: hemolytická anémie, hemolytické onemocnění novorozenci a další. Nepřímý test se provádí k posouzení kompatibility krve dárce a příjemce během transfuze a také ke zjištění přítomnosti a rizika Rh konfliktu při plánování a řízení těhotenství. Materiálem pro Coombsův test je venózní krev, studie se provádí metodami založenými na aglutinační reakci. Normálně oba testy dávají negativní výsledek. Analýza je dokončena během jednoho dne.

Coombsův test - klinické hodnocení Rh-negativní krev, zaměřená na průkaz protilátek proti Rh faktoru. Test se používá k identifikaci rizika rozvoje Rh konfliktu a hemolytických reakcí. U každého člověka obsahuje povrch červených krvinek určitý soubor antigenů nebo aglutinogenů – sloučenin různé povahy, jejichž přítomnost či nepřítomnost se využívá k určení krevní skupiny a Rh faktoru. Existuje mnoho typů antigenů, včetně lékařská praxe Největší praktický význam mají aglutinogeny A a B, které určují krevní skupinu, a aglutinogen D, Rh faktor. Při pozitivním Rh faktoru jsou D antigeny detekovány na vnější membráně erytrocytů, při negativním však nikoliv.

Coombsův test, nazývaný také antiglobulinový test, je zaměřen na detekci neúplných antierytrocytárních protilátek proti systému Rh faktoru v krvi. Protilátky proti Rh faktoru jsou specifické imunoglobuliny, které se tvoří v Rh-negativní krvi, když do ní vstupují červené krvinky s aglutinogeny D. K tomu může dojít při smíchání krve plodu a těhotné ženy, při krevních transfuzích prováděných bez předchozí krve psaní na stroji. Coombsův test existuje ve dvou verzích – přímé a nepřímé. Při provádění přímého Coombsova testu jsou detekovány protilátky navázané na povrchu červených krvinek. Studie se používá k určení příčiny hemolytické reakce. Nepřímý Coombsův test je zaměřen na průkaz protilátek proti erytrocytům v krevní plazmě. Je nutné zjistit kompatibilitu krve mezi dárcem a příjemcem nebo matkou a plodem a pomáhá předcházet rozvoji Rh konfliktu a následné hemolýze červených krvinek.

Krev pro obě verze Coombsova testu se odebírá ze žíly. Analýza se provádí aglutinací pomocí antiglobulinového séra. Výsledky studie se využívají v hematologii k identifikaci příčin hemolytických reakcí, v chirurgii a resuscitaci při provádění krevních transfuzí, v porodnictví a gynekologii při sledování těhotenství u žen s Rh negativní krví.

Indikace

Přímý Coombsův test, který detekuje protilátky navázané na povrchu červených krvinek, je předepsán pro hemolytické reakce (destrukce červených krvinek) různého původu. Studie je indikována při primární autoimunitní hemolytické anémii, potransfuzní hemolytické anémii, hemolytickém onemocnění novorozence, hemolýze erytrocytů způsobené autoimunitním, nádorovým popř. infekční choroby, stejně jako recepce léky například chinidin, methyldopa, prokainamid. K prevenci vzniku Rh konfliktu se používá nepřímý Coombsův test, který stanovuje protilátky v krevní plazmě. Je indikován pro pacienty při přípravě na krevní transfuze a také pro těhotné ženy s negativním Rh faktorem za předpokladu, že budoucí otec dítěte má pozitivní Rh faktor.

Pro stanovení Rh kompatibility není Coombsův test předepisován pacientům s Rh-pozitivní krví. V těchto případech jsou již na povrchu červených krvinek antigeny, tvorbu protilátek nelze vyprovokovat krevní transfuzí ani vstupem fetální krve do krevního oběhu těhotné. Studie také není indikována těhotným ženám, pokud mají oba rodiče negativní Rh faktor – dědičný recesivní znak. Dítě v takových párech má vždy Rh-negativní krev, imunologický konflikt s matkou je nemožný. U hemolytických patologií se antiglobulinový test nepoužívá ke sledování úspěšnosti terapie, protože výsledky neodrážejí aktivitu procesu destrukce červených krvinek.

Limitací Coombsova testu je pracnost výzkumného postupu - pro získání spolehlivých výsledků je nutné dodržet teplotní a časové podmínky, pravidla pro přípravu reagencií a biomateriálu. Mezi výhody Coombsova testu patří jeho vysoká citlivost. U hemolytické anémie zůstávají výsledky tohoto testu pozitivní, i když jsou hladiny hemoglobinu, bilirubinu a retikulocytů normalizovány.

Příprava na analýzu a sběr materiálu

Materiál použitý k provedení Coombsova testu je venózní krev. Nejsou žádné zvláštní požadavky na dobu odběru krve a na přípravu pacienta. Jako u každé jiné studie se doporučuje udělat si po jídle alespoň 4 hodiny pauzu a na posledních 30 minut přestat kouřit. fyzická aktivita, vyvarujte se emočního stresu. Vyplatí se také předem prodiskutovat s lékařem nutnost vysazení léků – některé léky mohou zkreslit výsledky Coombsova testu. Krev se odebírá injekční stříkačkou z loketní žíly nebo méně často ze žíly na hřbetu ruky. Během několika hodin je materiál doručen do laboratoře.

Při provádění přímého Coombsova testu se do krevního séra pacienta přidá antiglobulinové sérum. Po nějaké době se směs vyšetří na přítomnost aglutinátů – ty se tvoří, pokud jsou na červených krvinkách protilátky. Pokud je výsledek pozitivní, stanoví se aglutinační titr. Nepřímý Coombsův test se skládá z více kroků. Nejprve se protilátky přítomné v séru fixují na injikované červené krvinky během inkubace. Poté se ke vzorku přidá antiglobulinové sérum, po nějaké době se stanoví přítomnost a titr aglutinátů. Doba analýzy je 1 den.

Normální výsledky

Normálně je výsledek přímého Coombsova testu negativní (-). To znamená, že v krvi nejsou žádné protilátky spojené s červenými krvinkami a nemohou způsobit hemolýzu. Normální výsledek nepřímý test Coombs je také negativní (-), to znamená, že v krevní plazmě nejsou žádné protilátky proti Rh faktoru. Při přípravě na transfuzi krve pro příjemce to znamená kompatibilitu s krví dárce, při sledování těhotenství to znamená absenci Rh senzibilizace matky, nízké riziko rozvoje imunologického konfliktu. Fyziologické faktory, jako jsou stravovací návyky popř fyzická aktivita, nemůže ovlivnit výsledek testu. Pokud je tedy výsledek pozitivní, je nutná konzultace s lékařem.

Diagnostická hodnota analýzy

Pozitivní výsledek Coombsova testu je vyjádřen kvalitativně, od (+) do (++++), nebo kvantitativně, titry od 1:16 do 1:256. Stanovení koncentrace protilátek na červených krvinkách a v krevním séru se provádí u obou typů vzorků. Pokud je přímý Coombsův test pozitivní, jsou na vnější membráně červených krvinek detekovány protilátky, které vedou k destrukci těchto krvinek. Příčinou může být krevní transfuze bez předchozí typizace – potransfuzní hemolytická reakce, dále erytroblastóza novorozence, hemolytická reakce v důsledku užívání léků, primární nebo sekundární autoimunitní hemolytická anémie. Sekundární destrukci červených krvinek může způsobit systémový lupus erythematodes, Evansův syndrom, Waldenströmova makroglobulinémie, paroxysmální studená hemoglobinurie, chronická lymfocytární leukémie, lymfom, infekční mononukleóza, syfilis, mykoplazmatická pneumonie.

Pozitivní výsledek nepřímého Coombsova testu ukazuje na přítomnost protilátek proti Rh faktoru v plazmě. V praxi to znamená, že došlo k Rh senzibilizaci a existuje možnost rozvoje Rh konfliktu po infuzi dárcovské krve během těhotenství. Aby se předešlo těhotenským komplikacím, jsou ženy s pozitivním výsledkem Coombsova testu zařazeny do speciálního registru.

Léčba abnormalit

Coombsův test odkazuje na izoserologické studie. Jeho výsledky umožňují identifikovat hemolytickou reakci a také určit kompatibilitu krve dárce a příjemce, matky a plodu, aby se zabránilo rozvoji Rh konfliktu. Pokud je výsledek testu pozitivní, musíte požádat o radu svého ošetřujícího lékaře - porodníka-gynekologa, hematologa, chirurga.

Coombsův test je metoda laboratorní výzkum, vyrobený ovlivněním hemaglutinace. Je založena na citlivosti protilátek k imunoglobulinům a enzymovým prvkům a také na jejich schopnosti aglutinovat erytrocyty potažené C3 nebo Lg.

Přímá Coombsova diagnostika

Používá se k detekci protilátek nebo komponent komplementu instalovaných na vnější straně buněk. Přímý Coombsův test se provádí následovně.

Použití takového vzorku

Přímá Coombsova diagnostika se používá v určitých případech, jako jsou:

• transfuzní účinky;
• autoimunitní hemolýza;
• hemolytická anémie způsobená léky.

Nepřímý Coombsův test

Tato diagnóza umožňuje detekovat protilátky proti buňkám v séru, které je inkubováno zpravidla s dárcovskými červenými krvinkami typu 0, a poté je proveden přímý test. Aplikovat nepřímá diagnóza Coombs v následujících případech:

Jak se připravit na analýzu

Pro přípravu na zkoušku platí určitá pravidla.

1. Pokud je pacient novorozenec, rodiče si musí být vědomi toho, že test pomůže diagnostikovat hemolytické onemocnění novorozence.
2. Pokud má pacient podezření na hemolytickou anémii, je třeba mu vysvětlit, že analýza mu umožní zjistit, zda je způsobena ochrannými poruchami, léky nebo jinými faktory.
3. Coombsův test, přímý ani nepřímý, nečiní žádná omezení ve výživě nebo dietě.
4. Je nutné pacienta upozornit, že vyšetření bude vyžadovat odběr krve ze žíly, a také mu přesně sdělit, kdy bude venepunkce provedena.
5. Také byste měli být na tuto možnost upozorněni nepohodlí po dobu přikládání obvazu na paži a samotného zákroku.
6. Léky, které mohou ovlivnit výsledek vzorku, by měly být vysazeny.

Mezi tyto léky patří:

• "Streptomycin";
• "Methyldopa";
• "Prokainamid";
• sulfonamidy;
• "Melfalan";
• "chinidin";
• "Rifampin";
• "Isoniazid";
• cefalosporiny;
• "Hydralazin";
• "chlorpromazin";
• "Levodopa";
• "tetracyklin";
• "difenylhydantoin";
• "Ethosuximid";
• "Penicilin";
• kyselina mefenamová.

Odběr krve se provádí ráno nalačno.

Jak se akce koná

Coombsův test se provádí v následujícím pořadí:

1. Při provádění diagnostiky u dospělého pacienta se po venepunkci odebírá krev do zkumavek s EDTA (ethylendiamintetraacetát).
2. Krev novorozence se odebírá z pupeční šňůry do kádinky obsahující EDTA.
3. Oblast vpichu se přitlačí vatovým tamponem, dokud se krvácení nezastaví.
4. Pokud se v místě venepunkce objeví modřina, předepisují se teplé obklady.
5. Po odběru krve je pacientovi umožněn návrat k užívání léků.
6. Je nutné informovat rodiče novorozence, že může být zapotřebí sekundární analýza pro sledování dynamiky anémie.

Výhody Coombsova testu

Takový výzkum má některé výhody, jmenovitě:

Nevýhody analýzy

Pozitivní Coombsův test je poměrně pracná vyšetřovací metoda, která vyžaduje charakteristickou přesnost provedení. Při jeho užívání se můžete setkat s určitými obtížemi, souvisejícími zejména s interpretací slabě pozitivních účinků.

Bylo zjištěno, že chybné negativní nebo slabé pozitivní reakce při výrobě vzorků Coombs mohou být důsledky neuspokojivě aktivního mytí buněk, oslabení antiglobulinového činidla zbytky séra, ale i spojení s nemastným zevnějškem, na kterém se může antiglobulin uchytit a tím ztrácet účinnost.

Coombsův test má ještě jednu nevýhodu – nízkou stabilitu antiglobulinového činidla, jehož získávání a skladování individuální vlastnosti, což obdobně znesnadňuje numerické posouzení vlivu antiglobulinového séra na hemaglutinaci.

Nemoci, které lze odhalit během výzkumu

Coombsova diagnostika umožňuje odhalit určité typy onemocnění, jako jsou:

• hemolytická malátnost novorozence;
• různé transfuzní reakce;
• autoimunitní hemolýza;
• hemolytická anémie způsobená léky.

Dnes je Coombsův test považován za poměrně populární systém krevních testů pro dospělé i novorozence. Umožňuje identifikovat mnoho různých onemocnění.

Naneste 1 velkou kapku séra O(I), A(II), B(III) na misku nebo podložní sklíčko pomocí pipet (různé!). Po zaznamenání času použijte čistou skleněnou tyčinku nebo čistý roh podložního sklíčka ke spojení kapek séra s kapkami krve. Stanovení trvá 5 minut, protřepejte destičku, poté přidejte do každé směsi kapek 1 kapku fyziologického roztoku a vyhodnoťte výsledky. Je lepší, když se sérum dodává ve 2 různých sériích. Výsledky krevních skupin se musí shodovat v obou šaržích séra.

Vyhodnocení výsledků izohemaglutinace:

isohemaglutinace. Pokud je reakce pozitivní, objeví se ve směsi drobná červená zrnka adhezivních červených krvinek. Zrna se spojují do větších zrn a ta do vloček. Sérum je téměř vybledlé;

pokud je reakce negativní, zůstane směs rovnoměrně zbarvená po dobu 5 minut růžová barva a žádná zrna nejsou nalezena;

Při práci se 3 séry skupin O(I), A(II), B(III) jsou možné 4 kombinace reakcí:

1. pokud všechna 3 séra vykazovala negativní reakci, to znamená, že směs je jednotně zbarvená do růžova - jedná se o krevní skupinu O(I);

   Li negativní reakce pouze sérum skupiny A(II) dalo a séra O(I) a B(III) dala pozitivní reakci, to znamená, že se objevila zrna - to je krevní skupina A(II);

   sérum skupiny B(II) vykázalo negativní reakci a séra skupiny O(I) a A(II) vykázala pozitivní reakci - to je krevní skupina B(III).

všechna 3 séra vykazovala pozitivní reakce - testovaná krev byla skupina AB(IV). V tomto případě se studie provádí se sérem skupiny AB(IV).

Poznámka! Kapky testované krve by měly být 5-10krát menší než kapky séra.

Isohemaglutinační chyby.

Neschopnost provést aglutinaci tam, kde by měla být, a přítomnost aglutinace tam, kde by neměla být. To může být způsobeno slabým titrem séra a špatnou aglutinací červených krvinek.

Přítomnost aglutinace tam, kde by neměla být žádná- Jedná se o pseudoaglutinaci, kdy hromady červených krvinek tvoří „sloupce mincí“. Zatřesení talířem nebo přidání fyziologického roztoku je ničí.

Panaglutinace, kdy sérum slepí všechny červené krvinky, včetně těch vlastní krevní skupiny. Do 5. minuty známky aglutinace zmizí.

Dochází také k tzv. studené panaglutinaci, kdy se červené krvinky slepí kvůli nízké teplotě vzduchu (pod 15 °C) v místnosti.

Ve všech těchto případech se provádí buď opakovaná reakce, nebo za použití standardních červených krvinek.

Stanovení Rh krve

Ke stanovení stavu Rh, tedy k detekci přítomnosti nebo nepřítomnosti antigenů systému Rh v lidské krvi, se používají standardní anti-Rh séra (reagenty), lišící se specificitou, tj. obsahující protilátky proti různým antigenům tohoto systému. Pro stanovení Rh 0 (D) antigenu se nejčastěji používá anti-Rhesus sérum s přídavkem 10% roztoku želatiny nebo se používá standardní anti-Rhesus činidlo předem připravené s 33% roztokem polyglucinu. K získání přesnějších výsledků výzkumu, stejně jako k identifikaci antigenů jiných sérologických systémů, se používá Coombsův test (je také velmi citlivý při stanovení kompatibility transfundované krve). Pro výzkum se používá nativní krev nebo krev připravená s nějakým konzervantem. V tomto případě by měla být krev omyta od konzervační látky desetinásobným objemem izotonického roztoku chloridu sodného. Při určování stavu Rh- Rh 0 (D) měly by být použity dva vzorky séra nebo anti-Rhesus reagencie ze dvou různých sérií a současně standardní červené krvinky získané z krve z Rh-pozitivní (Rh +) a Rh-negativní (Rh -) ke kontrole by měli být využíváni jednotlivci. Při stanovení dalších izoantigenů by měly být odpovídajícím způsobem použity kontrolní červené krvinky, které obsahují nebo postrádají antigen, proti kterému jsou protilátky ve standardním séru namířeny.

Parciální tepelné aglutininy jsou nejčastějším typem protilátek, které mohou způsobit rozvoj autoimunitní hemolytické anémie. Tyto protilátky patří k IgG, vzácně k IgM, IgA.

COOMBSOVÝ TEST

Coombsův test: úvod. Coombsův test je laboratorní diagnostická metoda založená na hemaglutinační reakci.

Hlavní metodou pro diagnostiku autoimunitní hemolytické anémie je Coombsův test. Je založena na schopnosti protilátek specifických pro imunoglobuliny (zejména IgG) nebo složky komplementu (zejména S3) aglutinovat erytrocyty potažené IgG nebo S3.

Vazba IgG a C3b na erytrocyty je pozorována u autoimunitní hemolytické anémie a polékové imunitní hemolytické anémie. Přímý Coombsův test. Přímý Coombsův test se používá k detekci protilátek nebo složek komplementu fixovaných na povrchu červených krvinek. Provádí se následovně:

K získání protilátek proti lidským imunoglobulinům (antiglobulinové sérum) nebo komplementu (antikomplementární sérum) je zvíře imunizováno lidským sérem, imunoglobuliny nebo lidským komplementem. Sérum získané ze zvířete je purifikováno od protilátek proti jiným proteinům.

Červené krvinky pacienta se promyjí fyziologickým roztokem, aby se úplně odstranilo sérum, které neutralizuje protilátky proti imunoglobulinům a komplementu a může způsobit falešně negativní výsledek.

Pokud jsou protilátky nebo složky komplementu fixovány na povrchu červených krvinek, přidání antiglobulinu nebo antikomplementového séra způsobí aglutinaci červených krvinek.

Přímý Coombsův test se používá v následujících případech:

Autoimunitní hemolýza.

Hemolytická nemoc novorozenců.

Imunitní hemolytická anémie vyvolaná léky.

Hemolytické transfuzní reakce. Nepřímý Coombsův test. Nepřímý Coombsův test detekuje protilátky proti červeným krvinkám v séru. K tomu se pacientovo sérum inkubuje s červenými krvinkami dárce skupiny 0 a poté se provede přímý Coombsův test.

Nepřímý Coombsův test se používá v následujících případech:

Stanovení individuální kompatibility krve dárce a příjemce.

Detekce aloprotilátek, včetně protilátek, které způsobují hemolytické transfuzní reakce.

Stanovení povrchových erytrocytárních antigenů v lékařské genetice a soudním lékařství.

Potvrzení jednovaječných dvojčat při transplantaci kostní dřeně.

K provedení biologického testu se krev začne podávat co nejrychleji (nejlépe proudem). Po transfuzi 25 ml krve se zkumavka systému upne svorkou. Poté následuje 3minutová pauza, během které je sledován stav příjemce. K provedení biologického testu se třikrát vstříkne 25 ml krve. Na konci testu (po transfuzi prvních 75 ml krve ve zlomkových dávkách 25 ml v intervalech 3 minut) se systém upraví na požadovanou rychlost transfuze. Při transfuzi více než jedné lahvičky krve pacientovi je nutné vyjmout jehlu ze žíly. V tomto případě se jehla vyjme ze zkumavky lahvičky, ve které vytekla krev, a vloží se do další lahvičky. Systémová trubka (pryžová nebo plastová) je v tomto okamžiku sevřena svorkou. Pokud je během krevní transfuze nutné podat příjemci nitrožilně jakýkoli jiný lék, provede se to propíchnutím pryžové hadičky systému. Proražení plastové trubice je nepřijatelné, protože nespadne. Po každé krevní transfuzi musí být pacient sledován, aby byl identifikován a okamžitě odstraněn možné komplikace, počítaje v to alergické reakce. 2 hodiny po ukončení krevní transfuze by měla být změřena tělesná teplota. Pokud se zvýší, je nutné měření opakovat každou hodinu po dobu následujících 4 hodin. Neméně důležité je sledování močení a složení moči, které umožňuje zjistit přítomnost toxické potransfuzní reakce. Vznik oligurie a anurie po krevní transfuzi, přítomnost krvinek a bílkovin v moči jsou přímým ukazatelem rozvoje posttransfuzní hemolýzy.

REAKCE HŘEBENU(R. R. A. Coombs, anglický imunolog, narozen v roce 1921; synonymum: Coombsův test, antiglobulinový test) - imunologická reakce k detekci nekompletních protilátek proti auto- a izoantigenům erytrocytů.

Reakce byla vyvinuta v roce 1908 S. Moreschi, ale obdržela široké uplatnění teprve od roku 1945 poté, co Coombs prokázal svou roli při určování kompatibility při krevních transfuzích, Rh konfliktu, diagnostice autoalergických a autoimunitních stavů atd.

Coombsova reakce je založena na použití speciálně připraveného léku – antiglobulinového séra. V přítomnosti antiglobulinového séra dochází k aglutinaci červených krvinek naložených neúplnými protilátkami. Červené krvinky, které na svém povrchu neobsahují protilátky, zůstávají neaglutinované.

K.r. se široce používá pro: a) stanovení stavu izosenzibilizace, tj. zjištění izoprotilátek, které se vyskytují při opakovaných krevních transfuzích (viz Krevní transfuze) nebo těhotenství (viz Těhotenství); b) provedení testu kompatibility během krevních transfuzí; c) stanovení typu Rh faktoru v erytrocytech (viz); d) průkaz autoimunitních protilátek na červených krvinkách pacientů se získanou hemolytickou anémií (viz) a jinými autoalergickými onemocněními (viz), jakož i u některých infekcí, které se vyskytují s alergickou složkou; e) průkaz izoimunitních protilátek fixovaných na červených krvinkách dětí s hemolytickým onemocněním novorozenců (viz). K.r. používá se také ve forenzním a antropologickém výzkumu.

Hlavním materiálem pro inscenaci K. r. jsou sérum nebo citrátová plazma a červené krvinky pacienta. Existují dvě varianty K. r.: nepřímá a přímá. S nepřímým K. r. Studuje se pacientovo sérum a stanoví se volně cirkulující protilátky. S přímým K. r. zkoumat červené krvinky na přítomnost protilátek na nich fixovaných tvarované prvky krev.

Antiglobulinové sérum pro K. r. získané imunizační laboratoří. zvířat (králíci, kozy, ovce atd.) s globuliny izolovanými z lidského séra frakcionací ethanolem, síranem amonným nebo gelovou filtrací na Sephadexu. Při získávání antiglobulinového séra je nutné odstranit heteroaglutinační protilátky vzniklé imunizací zvířat lidskými globuliny. Toho je dosaženo adsorpcí imunitního séra se směsí erytrocytů od lidí s jiná skupina krev nebo její zředění izotonickým roztokem chloridu sodného. V druhém případě by titr heteroaglutininů měl být nízký (1:16 - 1:32), aby si antiglobulinové sérum po naředění zachovalo dobrou aktivitu v K.r.

Nepřímá Coombsova reakce

Nepřímá Coombsova reakce se provádí ve dvou stupních. První fáze se provádí v malých zkumavkách speciálně navržených pro tento účel o rozměrech 4 x 0,5 cm. Do každé zkumavky přidejte jednu kapku do tří kapek séra (celého, 1:2 atd.), ve kterém je přítomnost protilátek je podezřelý sediment erytrocytů známého antigenního složení. Obsah zkumavky se promíchá a umístí na 1 hodinu do termostatu při t° 37°. Poté se červené krvinky třikrát promyjí izotonickým roztokem chloridu sodného. Druhý stupeň spočívá v přípravě 5% suspenze promytých erytrocytů a smíchání jedné kapky erytrocytů s jednou kapkou antiglobulinového séra na bílé (porcelánové) destičce s navlhčeným povrchem. Výsledky se berou v úvahu do 10 minut. Výjimka falešně pozitivní výsledky vytvořené provedením kontrolních studií. Použití izotonického roztoku chloridu sodného místo antiglobulinového séra by nemělo být doprovázeno aglutinací červených krvinek. Provádějící nepřímé K. r. proti erytrocytům známého izoantigenního fenotypu umožňuje stanovit specificitu protilátek. Například studie pacientova séra s červenými krvinkami 0(I), CDE, Kk, Fya; 0(1), CDe, Kk, Fya; 0(I), сDe, Kk, Fya; 0(I), cDE, Kk, Fya; 0(I), cde, kk, Fya ukázal pozitivní výsledek se vzorkem krve v případech 1 a 4; ostatní krevní vzorky (případy 2, 3, 5) vykazovaly negativní výsledek. Sérum obsahuje anti-E protilátky. Pomocí nepřímého K. r. nekompletní protilátky proti antigenům lze detekovat: C, D, E, c, e; K, k; Fya, Fyb; Lea, Leb; Jka, Jkb atd. (viz Krevní skupiny).

Přímá Coombsova reakce

Přímá Coombsova reakce ve své technice odpovídá druhému stupni nepřímé K.R.: červené krvinky pacienta (5% suspenze), třikrát promyté izotonickým roztokem chloridu sodného, ​​jsou kombinovány s antiglobulinovým sérem. Přímý K.r. provádí se, když existuje důvod se domnívat, že červené krvinky studovaného pacienta jsou již senzibilizovány protilátkami in vivo. Kladná přímka K. r. slouží jako diagnostický příznak pro hemolytické onemocnění novorozenců způsobené senzibilizací organismu ženy na fetální antigeny a průnikem protilátek přes placentu do těla dítěte a také získanou hemolytickou anémii.

Za minulé roky K.r. výrazně zlepšila. S jeho pomocí je možné nejen zjistit přítomnost protilátek na červených krvinkách, ale také stanovit třídu imunoglobulinů (viz). K tomu použijte sérum proti určitým třídám imunoglobulinů: IgG, IgM, IgA. Izoimunní protilátky proti Rhesus, Kell antigenům, Duffyho antigenům a dalším antigenům, stejně jako teplé autoimunitní protilátky, jsou obvykle klasifikovány jako IgG. Chladové autoimunitní protilátky, stejně jako izoimunní protilátky proti Le a některým dalším antigenům zpravidla patří k IgM. Pouze vzácné autoimunitní protilátky jsou IgA povahy (viz Autoprotilátky).

Bibliografie: Dygin V.P. Autoimunitní onemocnění na klinice interních chorob, L., 1970, bibliogr. ; Kassirsky I. A. a Alekseev G. A. Clinical hematology, M., 1970; Kosyakov P. N. Human isoantigens and isoprotilátky ve zdraví a nemoci, M., 1974, bibliogr.; Boivin P. e. A. Les anemies hemolytiques, str. 93, P., 1971, bibliogr.; Klinické aspekty imunologie, ed. od P. G. H. Geli a. o., Oxford, 1975; Coombs R. R. A., Mourant A. E. a. Race R. R. Izosenzitizace červených krvinek in vivo u dětí s hemolytickým onemocněním, Lancet, v. 1, str. 264, 1946.

Coombsův test je klinická analýza krevní test, který se provádí za účelem zjištění, zda krev obsahuje určité protilátky, které mohou být nebezpečné. Tyto protilátky ulpívají na červených krvinkách a mohou napadnout imunitní systém, stejně jako způsobit škodu jiným způsobem. V lékařské terminologii se tato studie také nazývá antiglobulinový test (AGT).

Typy Coombsových vzorků

Existují dva typy Coombsových testů – přímý a nepřímý.

Přímý Coombsův test, také známý jako přímý (DAT), detekuje autoprotilátky, které se vážou na povrch červených krvinek. Tyto protilátky jsou někdy produkovány v těle v důsledku určitých onemocnění nebo při užívání určitých léků, jako je prokainamid, methyldopa nebo chinidin.

Tyto protilátky jsou nebezpečné, protože někdy způsobují anémii ničením červených krvinek.

Tento test je někdy nařízen k diagnostice příčiny žloutenky nebo anémie.

Normálně je Coombsova reakce negativní.

Pozitivní pro:

• hemolytické onemocnění novorozenců;
• autoimunitní hemolýza;
• hemolytické transfuzní reakce;
• imunitní hemolytická anémie vyvolaná léky.

Nepřímý Coombsův test, také známý jako , se používá k detekci protilátek proti červeným krvinkám nalezeným v krevním séru (sérum je čirá žlutá tekutina krve, která zůstane po odstranění červených krvinek a koagulantu).

Nepřímý Coombsův test se používá během krevní transfuze k určení, zda krev dárce odpovídá krvi příjemce. To se nazývá test kompatibility a pomáhá předcházet jakékoli nežádoucí reakci na krev dárce. Tato analýza doporučeno i pro těhotné ženy. Některé ženy mají protilátky IgG, které mohou procházet placentou do krve plodu a poškodit novorozence, což způsobuje hemolytické onemocnění známé jako hemolytická anémie.

Postup

Krev se odebírá pomocí injekční stříkačky ze žíly, obvykle s zadní strana dlani nebo na ohybu lokte. Před tím se místo vpichu důkladně vydezinfikuje a po odběru krve se přiloží čistá gáza nebo vata.

Výsledná krev se čistí v laboratoři a oddělují se červené krvinky. Vzorek je poté testován postupně pomocí různých sér a Coombsových činidel, které jsou kontrastovány. Pokud nedochází k aglutinaci (shlukování červených krvinek), znamená to pozitivní výsledek.

Pokud je ale test negativní, znamená to, že v krvi jsou protilátky, které působí proti červeným krvinkám. To může naznačovat různé nemoci, jako je anémie (přirozená i způsobená užíváním léků), syfilis nebo mykoplazmatická infekce. Po obdržení výsledků ošetřující lékař předepíše vhodnou léčbu.

Video