№ 43 Vacunas genéticamente modificadas. Principios de obtención, aplicación.
Las vacunas genéticamente modificadas son medicamentos obtenidos mediante biotecnología, que esencialmente se reduce a la recombinación genética.
En primer lugar se obtiene un gen que debe integrarse en el genoma del receptor. Se pueden obtener genes pequeños mediante síntesis química. Para hacer esto, se descifra el número y la secuencia de aminoácidos en la molécula de proteína de la sustancia, luego, utilizando estos datos, se determina el orden de los nucleótidos en el gen y luego se realiza la síntesis química del gen.
Las estructuras grandes, que son bastante difíciles de sintetizar, se obtienen mediante aislamiento (clonación) y eliminación selectiva de estas formaciones genéticas mediante enzimas de restricción.
El gen diana obtenido mediante uno de los métodos se fusiona con enzimas a otro gen, que se utiliza como vector para insertar el gen híbrido en la célula. Como vectores pueden servir plásmidos, bacteriófagos, virus humanos y animales. El gen expresado se inserta en una bacteria o célula animal, que comienza a sintetizar una sustancia previamente inusual codificada por el gen expresado.
E. coli, B. subtilis, pseudomonas, levaduras y virus se utilizan con mayor frecuencia como receptores del gen expresado; algunas cepas pueden cambiar hasta el 50% de sus capacidades sintéticas a la síntesis de una sustancia extraña; estas cepas se llaman así; superproductores.
A veces se añade un adyuvante a las vacunas genéticamente modificadas.
Ejemplos de tales vacunas son la vacuna contra la hepatitis B (Engerix), la sífilis, el cólera, la brucelosis, la influenza y la rabia.
Existen ciertas dificultades en el desarrollo y aplicación:
- mucho tiempo Los medicamentos genéticamente modificados se trataron con precaución.
- se gastan fondos importantes en el desarrollo de tecnología para obtener una vacuna
- Al obtener medicamentos mediante este método, surge la pregunta sobre la identidad del material resultante con una sustancia natural.
Preparados vacunales asociados y combinados. Ventajas. Terapia con vacunas.
Las vacunas asociadas son preparados que incluyen varios antígenos diferentes y permiten la inmunización contra varias infecciones simultáneamente. Si el fármaco contiene antígenos homogéneos, dicha vacuna asociada se denomina polivacuna. Si el fármaco asociado consta de antígenos diferentes, es aconsejable llamarlo vacuna combinada.
La inmunización combinada también es posible cuando se administran varias vacunas simultáneamente en diferentes partes del cuerpo, por ejemplo, contra la viruela (por vía cutánea) y la peste (por vía subcutánea).
Un ejemplo de polivacuna es una vacuna viva contra la polio que contiene cepas atenuadas del virus de la polio tipos I, II, III. Ejemplo vacuna combinada es la DTP, que incluye la vacuna corpuscular inactivada contra la tos ferina, la difteria y el toxoide tetánico.
Las vacunas combinadas se utilizan en situaciones antiepidémicas difíciles. Su acción se basa en la capacidad sistema inmunitario responder a varios antígenos simultáneamente.
La ingeniería genética es una ciencia experimental que estudia los patrones de construcción y comportamiento in vitro de moléculas de ADN recombinante funcionalmente activas en la célula receptora.
Objeto de estudio ingeniería genética son genes: segmentos de ADN que codifican la síntesis de determinadas proteínas.
El principio de crear genética. vacunas diseñadas radica en el hecho de que el gen que nos interesa (responsable de la síntesis de la proteína inmune del virus) se “corta” del ADN del virus mediante enzimas (enzimas de restricción) y se inserta mediante enzimas (ligasas), en el ADN del vector (por ejemplo, en el plásmido de E. coli, este ADN circular autónomo de 4 a 6 mil pares de nucleótidos, capaz de multiplicarse en células de E. soja). Luego, este ADN recombinante se introduce en las células de E. coli, en las que el ADN recombinante se multiplica (replica) y se produce la expresión del gen integrado, es decir, la síntesis de la proteína correspondiente (codificada por el gen integrado del virus).
Las células bacterianas de E. coli se cultivan en un medio nutritivo y se "produce" la proteína inmunogénica del virus, que se aísla y, después de una purificación adecuada, se utiliza como material para la vacuna. Sin embargo, cabe señalar que muchas proteínas virales sintetizadas con éxito en microorganismos tienen una actividad inmunogénica muy baja. La razón de esto son las peculiaridades de la formación de la estructura de las proteínas virales. Por regla general, están glicosilados y tienen una estructura terciaria o cuaternaria compleja. Así, la hemaglutinina del virus de la influenza se encuentra en el virión en forma de trímero, que se forma a partir de polipéptidos monoméricos en células animales. No es posible obtener una estructura de hemaglutinina funcionalmente activa de este tipo in vitro. La inmunogenicidad de la hemaglutinina en el virión es varios miles de veces mayor que la del polipéptido monomérico sintetizado en bacterias.
En la producción de vacunas genéticamente modificadas, además de los plásmidos, se utilizan como vectores fagos, levaduras y virus animales (virus vaccinia, adenovirus, baculovirus y herpesvirus).
El mayor efecto se obtuvo con el virus vaccinia utilizado como vector. Este virus tiene un genoma grande (alrededor de 187 mil pares de bases). Puedes eliminarlo de área significativa(unos 30 mil pares de nucleótidos), que no es vital para la reproducción de este virus en las células, y en su lugar se insertan genes extraños de los virus contra los cuales se recibe la vacuna. El ADN recombinante resultante es capaz de multiplicarse en el organismo del vacunado e inducir la formación de inmunidad no sólo contra la viruela, sino también contra el virus cuyo gen está incrustado en su genoma. La utilización del virus vaccinia como vector para la vacunación tiene varias ventajas: la capacidad de multiplicarse en células animales de muchas especies; expresar múltiples genes; inducir humoral y inmunidades celulares; estabilidad térmica; producción económica y facilidad de uso. Las deficiencias previamente identificadas en el virus vaccinia asociadas con la reactogenicidad se eliminaron en gran medida utilizando manipulación genética. La posibilidad de incluir varios genes que codifican los inmunógenos correspondientes permite vacunar a los animales simultáneamente contra varias enfermedades virales. Sin embargo, hay que tener en cuenta que para las personas que ya son inmunes al virus vaccinia, la vacunación con virus recombinantes no produce ningún efecto debido a la falta de supervivencia del mismo.
EN últimos años recibió drogas profilácticas de una cepa recombinante del virus vaccinia que contiene genes que codifican glicoproteínas de superficie de los principales virus de la gripe, la rabia, la sicitis respiratoria, la enfermedad de Aujeszky y la rinotraqueítis infecciosa. ganado etc.
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La tecnología recombinante ha logrado un gran avance en la creación de vacunas fundamentalmente nuevas. Principio de creación vacunas genéticamente modificadas consiste en que un gen que codifica la formación de un antígeno protector del patógeno contra el que se dirigirá la vacuna se inserta en el genoma de virus, bacterias, levaduras o células eucariotas vivos atenuados.
Los propios microorganismos modificados se utilizan como vacunas. o un antígeno protector formado durante su cultivo in vitro. En el primer caso, la respuesta inmune se dirige no sólo contra los productos del gen integrado, sino también contra el vector portador.
Un ejemplo de vacuna recombinante que consta de un antígeno preparado es la vacuna contra la hepatitis B, y un ejemplo de vacunas vectoriales cuyos antígenos se producen in vivo es la vacuna contra la rabia. Se derivó de la vacuna vaccinia y se encontró amplia aplicación en la prevención de la rabia entre animales salvajes utilizando cebos que contengan esta vacuna.
Para crear vacunas de virus vivos vectoriales, se utiliza un virus atenuado que contiene ADN, en cuyo genoma se inserta el gen preclonado necesario. El virus, portador del vector, se multiplica activamente y el producto del gen integrado asegura la formación de inmunidad. El vector puede contener varios genes incorporados responsables de la expresión de los antígenos extraños correspondientes. Se obtuvieron vacunas vectoriales experimentales basadas en el virus vaccinia mediante varicela, gripe A, hepatitis A y B, malaria, herpes simple. Lamentablemente, las vacunas se han probado principalmente en animales, que son resistentes a la mayoría de estas infecciones.
El producto recombinante no siempre tiene la misma estructura que el antígeno natural. La inmunogenicidad de dicho producto puede reducirse. Los antígenos virales naturales en las células eucariotas se someten a glicosilación, lo que aumenta la inmunogenicidad de dichos antígenos. En las bacterias, la glicosilación está ausente o se produce de manera diferente que en las células de eucariotas superiores. En los eucariotas inferiores (hongos), los procesos postraduccionales ocupan una posición media.
Revelador vacuna genéticamente modificada debe proporcionar datos sobre la estabilidad del sistema de expresión de antígenos durante el almacenamiento del banco de células en funcionamiento. Si hay cambios en el cultivo de semillas, que pueden ir acompañados de reordenamiento, división o inserción de nucleótidos, es necesario determinar la secuencia de nucleótidos, estudiar mapas de péptidos y la secuencia de aminoácidos terminales del producto modificado genéticamente. El uso del mapeo de enzimas de restricción en combinación con el estudio de marcadores codificados por el vector (susceptibilidad a los antibióticos, etc.) puede indicar la aparición de cambios en la estructura del vector.
Los principios para crear vacunas bacterianas recombinantes son similares. Un paso importante es la clonación de genes y la obtención de genes mutantes que codifiquen formas inmunogénicas, pero no tóxicas, del antígeno. Se han clonado genes para las toxinas de la difteria y el tétanos, la toxina de Pseudomonas aeruginosa, el ántrax, el cólera, la tos ferina y la shigelosis. Se están haciendo intentos para obtener vacunas recombinantes contra la gonorrea y la infección meningocócica.
Como portador de vectores bacterianos se utilizan BCG, Vibrio cholerae, Escherichia coli, Salmonella tythimurium. El grupo de patógenos intestinales es prometedor para el desarrollo de vacunas enterales. Las vacunas vivas recombinantes administradas por vía oral tienen una vida útil corta, pero son capaces de inducir una inmunidad duradera durante este período. Es posible crear vacunas multicomponentes para la prevención simultánea de varias infecciones diarreicas. Las vacunas de vectores bacterianos, a diferencia de las virales, se pueden controlar con antibióticos. Se han probado experimentalmente vacunas orales contra la hepatitis B y la malaria.
En el futuro, está previsto utilizar vectores que contengan no sólo genes que controlen la síntesis de antígenos protectores, sino también genes que codifiquen diversos mediadores de la respuesta inmunitaria. Se han obtenido cepas de BCG recombinantes que secretan interferón, interleucinas y factor estimulante de granupocitos. Los estudios preliminares indican que las cepas son muy eficaces contra la tuberculosis y el cáncer. vejiga. Es bastante difícil obtener una vacuna vectorial eficaz basada en bacterias debido a la inestabilidad de la transfección del material genético, la toxicidad del antígeno extraño para las bacterias y la pequeña cantidad de antígeno expresado.
La vacunación se puede caracterizar de diferentes maneras: genocidio, exterminio de la población, experimento a gran escala con niños vivos, manipulación de la conciencia de las masas. En cualquier caso, una mirada saludable a través del espejo demuestra que salud y vacunas son cosas incompatibles.
RGIV – nuevos productos en la prevención de enfermedades infecciosas. Un ejemplo de tal vacuna es la vacuna contra la hepatitis B. Armados con métodos de ingeniería genética, los biólogos médicos tienen acceso directo al genoma. Ahora es posible insertar genes, eliminarlos o duplicarlos.
Por ejemplo, un gen de un organismo puede insertarse en el genoma de otro. Esta transferencia de información genética es posible incluso a través de “la distancia evolutiva que separa a los humanos de las bacterias”. La molécula de ADN se puede cortar en fragmentos individuales utilizando enzimas específicas y estos fragmentos se pueden introducir en otras células.
Se ha hecho posible incorporar genes de otros organismos a las células bacterianas, incluidos genes responsables de la síntesis de proteínas. De esta manera en condiciones modernas recibir una cantidad significativa de interferón, insulina y otros productos biológicos. De manera similar se obtuvo una vacuna contra la hepatitis B: el gen del virus de la hepatitis está integrado en la célula de levadura.
Como todo lo nuevo, especialmente un fármaco modificado genéticamente destinado a administración parenteral (¡nuevamente, en grandes cantidades y tres horas después del nacimiento de un niño!), esta vacuna requiere observaciones a largo plazo, es decir, estamos hablando de la misma "gran cantidad". ensayos a escala... en niños."
De numerosas publicaciones se desprende: “Las observaciones se vuelven más precisas y valiosas si se llevan a cabo durante campañas de inmunización masiva. En dichas campañas se vacuna a un gran número de niños en un corto período de tiempo. La aparición de un grupo de ciertos síndromes patológicos durante este período indica, por regla general, su relación causal con la vacunación”. El concepto de un determinado síndrome patológico puede incluir fiebre y tos de corta duración, así como parálisis o retraso mental total o parcial.
Además de la vacuna Engerix contra la hepatitis B, la vacuna surcoreana contra la hepatitis, que se está imponiendo activamente en nuestro país, se declara "igual de segura y eficaz". Las vacunas genéticamente modificadas son un tratamiento “preventivo” con muchas incógnitas. Nuestro país no puede verificar la seguridad de estos productos debido a la falta de instalaciones experimentales adecuadas. No podemos controlar cualitativamente las vacunas compradas ni crear las condiciones para la preparación de nuestras propias vacunas seguras. Pruebas recombinantes medicamentos- un experimento de alta tecnología que requiere enormes costos. Desgraciadamente, en este sentido estamos muy lejos del nivel de los laboratorios avanzados del mundo y prácticamente no nos centramos en el control de dichos productos. En este sentido, en Rusia (y Ucrania) se registra todo lo que no ha pasado. ensayos clínicos de fabricantes extranjeros de estas vacunas, o las pruebas pasadas, pero en volumen insuficiente... De ahí la avalancha de vacunas de diversos simpatizantes, que “tratan de ayudar a Rusia” y nos traen no las tecnologías de mañana o de hoy, sino las tecnologías de anteayer: “básicamente, residuos de su producción moderna, o aquellas vacunas que necesitan ser estudiadas en “experimentos a gran escala en niños " Más a menudo esto se llama “observaciones a gran escala”, pero la tarea es una: ¡experimentar con nuestros hijos!
Parecería absurdo e inmoral demostrar el peligro de las sales de mercurio para los bebés, cuando las consecuencias de sus efectos en el organismo de un adulto son ampliamente conocidas.
Recordemos que las sales de mercurio son más peligrosas que el propio mercurio. Sin embargo, nacional vacuna DPT, que contiene 100 µg/ml de mertiolato (sal organomercurial) y 500 µg/ml de formalina (el mutágeno y alérgeno más potente) se ha utilizado durante unos 40 años. Las propiedades alergénicas del formaldehído incluyen: angioedema, urticaria, rinopatía ( secreción nasal crónica), bronquitis asmática, asma bronquial, gastritis alérgica, colecistitis, colitis, eritema y grietas en la piel, etc. Todo esto lo han observado los pediatras desde hace más de 40 años, pero las estadísticas se esconden tras puertas de hierro al público en general. Miles de niños han estado sufriendo durante décadas, pero a los funcionarios médicos no les importa.
No existen datos sobre el efecto del mertiodiat y la formalina; NADIE HA ESTUDIADO ESTE CONGLOMERADO en animales jóvenes en términos de reacciones inmediatas y consecuencias a largo plazo; digamos para los adolescentes. ¡Las empresas ADVERTENCIAS, por lo tanto, no asumen ninguna responsabilidad por las acciones de nuestros vacunadores y controladores! Así, en nuestro país continúan muchos años de “ensayos a gran escala” en nuestros niños con el desarrollo de diversos síndromes patológicos. Cada día, más y más bebés inocentes (aquellos que escaparon del aborto) son arrojados a esta picadora de carne infernal, uniéndose a las filas de los niños discapacitados y sus desafortunados padres, sin ser conscientes de la verdadera causa del sufrimiento de sus hijos. Una “campaña de intimidación a la población” cuidadosamente preparada y llevada a cabo con epidemias de difteria, tuberculosis e influenza por un lado y medidas prohibitivas contra jardines de infancia y escuelas no deja ninguna posibilidad a los padres.
NO PODEMOS PERMITIR QUE SÓLO LAS EMPRESAS Y LOS VACUNADORES POCO COMPETENTES DECIDAN CORPORAtivamente EL DESTINO DE NUESTROS NIÑOS.
Dado que la vacunación con BCG a los recién nacidos no se realiza en ningún otro lugar del mundo, las actividades realizadas en Rusia y Ucrania son un experimento, porque "están evaluando la eficacia de la inmunización combinada de los recién nacidos contra la hepatitis B y contra la tuberculosis en el contexto de una vacunación masiva". inmunización." ¡Estrés inaceptable en el cuerpo de los recién nacidos! Este experimento, “vacunación a gran escala para la detección de síndromes patológicos”, se está llevando a cabo a escala estatal, que proporcionó un número ilimitado de sus propios niños para tales observaciones... ¡sin informar a los padres al respecto! Además, los “síndromes patológicos” pueden aparecer un año después, cinco años o mucho más tarde... Existe evidencia de que esta vacuna puede causar cirrosis hepática después de 15 a 20 años.
¿Qué componentes incluye ENGERIX (vacuna contra la hepatitis B)?
1. La base del fármaco es la levadura de panadería "modificada", "ampliamente utilizada en la producción de pan y cerveza". Aquí claramente falta la palabra “modificado genéticamente”, aparentemente debido a que esta combinación ya ha asustado bastante a la población con el ejemplo de la soja, las patatas y el maíz importados del extranjero. Un producto genéticamente modificado combina las propiedades de los ingredientes que lo componen y que, cuando se utilizan, tienen consecuencias impredecibles. ¿Qué escondieron los ingenieros genéticos en una célula de levadura además del virus de la hepatitis B? Puede agregar allí el gen del virus del SIDA o el gen de cualquier enfermedad cancerosa.
2. Hidróxido de aluminio. Cabe destacar aquí que desde hace muchas décadas no se recomienda (!) el uso de este adyuvante para vacunar a los niños.
3. El tiomerosal es un mertiolato (sal organomercurial), cuyo efecto perjudicial sobre el sistema central sistema nervioso se conoce desde hace mucho tiempo y pertenece a la categoría de pesticidas.
4. Polisorbente (no descifrado).
Vacunas moleculares.
AG está presente en forma molecular o en forma de fragmentos de sus moléculas que determinan la especificidad de la antigenicidad, es decir, en forma de epítopos, determinantes.
Se obtienen antígenos en forma molecular:
a) en el proceso de biosíntesis durante el cultivo de cepas naturales y recombinantes de bacterias y virus y
b) síntesis química (más laboriosa y tiene oportunidades limitadas comparado con la biosíntesis.
Un ejemplo típico Antígenos moleculares formados por biosíntesis de cepas naturales. son toxoides(tétanos, difteria, botulinum, etc.), obtenidos a partir de toxinas neutralizadas. En la práctica médica se utiliza una vacuna molecular contra Vir. Hepatitis B, obtenida a partir del Ag del virus producido por una cepa de levadura recombinante.
Vacunas genéticamente modificadas. Las vacunas genéticamente modificadas contienen Ag patógenos obtenidos mediante métodos de ingeniería genética e incluyen solo componentes altamente inmunogénicos que contribuyen a la formación. inmunidad protectora
Son posibles varias opciones para crear vacunas genéticamente modificadas.
Introducción de genes de virulencia en microorganismos avirulentos o débilmente virulentos.
Introducción de genes de virulencia en microorganismos no relacionados con posterior aislamiento de Ag y su uso como inmunógeno.
Eliminación artificial de genes de virulencia y uso de organismos modificados en forma de vacunas corpusculares.
Vacunas vectoriales (recombinantes)
Vacunas obtenidas mediante métodos de ingeniería genética. La esencia del método: los genes de un microorganismo virulento responsable de la síntesis de antígenos protectores se insertan en el genoma de un microorganismo inofensivo (p. ej. coli), que, cuando se cultiva, produce y acumula el antígeno correspondiente.
Vacunas recombinantes: para producir estas vacunas se utiliza tecnología recombinante, incorporando el material genético de un microorganismo en células de levadura que producen el antígeno. Después de cultivar la levadura, se aísla el antígeno deseado, se purifica y se prepara una vacuna. Un ejemplo de este tipo de vacunas es la vacuna contra la hepatitis B (Euvax B).
Las vacunas se utilizan principalmente para la prevención activa específica y, a veces, para el tratamiento de enfermedades.
El niño Kolya I., de 7 años, se volvió caprichoso, se niega a comer, tiene un sueño inquieto y una temperatura de 38,5 grados. El segundo día después de la enfermedad, el pediatra, al examinar al niño, descubrió un agrandamiento del derecho. glándula parótida. La piel sobre la hinchazón está tensa, pero no inflamada. el medico diagnostico Paperas» Enumerar los eslabones de la cadena epidémica: fuente, formas posibles transferencias. ¿Qué métodos de diagnóstico de laboratorio se deben utilizar para confirmar el diagnóstico? ¿Qué medicamentos se deben utilizar para la prevención?
