Ang indirect (passive) hemagglutination reaction (IRHA) ay batay sa katotohanan na ang mga pulang selula ng dugo, kung ang isang natutunaw na antigen ay na-adsorbed sa kanilang ibabaw, ay nakakakuha ng kakayahang mag-aglutinate kapag nakikipag-ugnayan sa mga antibodies sa adsorbed antigen. Ang diagram ng RNGA ay ipinapakita sa Fig. 34. Ang RNGA ay malawakang ginagamit sa pagsusuri ng ilang mga impeksiyon.
kanin. 34. Scheme ng passive hemagglutination reaction (RPHA). A - pagkuha ng erythrocyte diagnosticum: B - RPGA: 1 - erythrocyte: 2 - antigen na pinag-aaralan; 3 - erythrocyte diagnosticum; 4 - antibody sa antigen na pinag-aaralan: 5 - agglutinate
Pag-set up ng isang reaksyon. Ang test serum ay pinainit sa loob ng 30 minuto sa 56° C, diluted na sunud-sunod sa isang ratio na 1:10 - 1:1280 at ibinuhos sa 0.25 ml sa mga test tube o balon, kung saan 2 patak ng erythrocyte diagnosticum (erythrocytes na may antigen adsorbed sa kanila. ) ay pagkatapos ay idinagdag.
Mga kontrol: isang suspensyon ng erythrocyte diagnosticum na may kilalang immune serum; suspensyon ng diagnosticum na may normal na suwero; isang suspensyon ng mga normal na pulang selula ng dugo na may test serum. Sa unang kontrol, dapat mangyari ang agglutination, sa pangalawa at pangatlo hindi ito dapat mangyari.
Gamit ang RIGA, maaari mong makita ang isang hindi kilalang antigen kung ang mga kilalang antibodies ay na-adsorbed sa mga pulang selula ng dugo.
Ang reaksyon ng hemagglutination ay maaaring isagawa sa dami ng 0.025 ml (micromethod) gamit ang Takachi microtitrator.
1. Ano ang ipinahihiwatig ng isang positibong resulta ng pagsusuri sa X-ray sa pagitan ng mga pulang selula ng dugo at ng materyal na sinusuri para sa pagkakaroon ng virus?
2. Magaganap ba ang agglutination ng mga pulang selula ng dugo kung ang isang virus at ang kaukulang serum nito ay idinagdag sa kanila? Ano ang pangalan ng reaksyon na nagpapakita ng hindi pangkaraniwang bagay na ito?
Mag-ehersisyo
Isaalang-alang at irehistro ang resulta ng RIGA.
Reaksyon ng ulan
Sa reaksyon ng precipitation, ang isang tiyak na immune complex ay namuo, na binubuo ng isang natutunaw na antigen (lysate, extract, hapten) at isang tiyak na antibody sa pagkakaroon ng mga electrolytes.
Ang maulap na singsing o precipitate na nabuo bilang resulta ng reaksyong ito ay tinatawag na precipitate. Ang reaksyong ito ay higit na naiiba sa reaksyon ng aglutinasyon sa laki ng mga partikulo ng antigen.
Ang reaksyon ng pag-ulan ay karaniwang ginagamit upang matukoy ang antigen sa pagsusuri ng isang bilang ng mga impeksiyon ( anthrax, meningitis, atbp.); sa forensic medicine - upang matukoy ang mga species ng dugo, tamud, atbp.; sa sanitary at hygienic studies - kapag nagtatatag ng falsification ng mga produkto; sa tulong nito, natutukoy ang phylogenetic na relasyon ng mga hayop at halaman. Para sa reaksyon na kailangan mo:
1. Antibodies (precipitin) - immune serum na may mataas na titer ng antibodies (hindi mas mababa sa 1:100,000). Ang titer ng precipitating serum ay tinutukoy ng pinakamataas na pagbabanto ng antigen kung saan ito tumutugon. Ang serum ay kadalasang ginagamit na undiluted o sa isang dilution na 1:5 - 1:10.
2. Antigen - dissolved substances ng protina o lipoid polysaccharide nature (full antigens at haptens).
3. Isotonic solution.
Ang mga pangunahing pamamaraan para sa pagsasagawa ng reaksyon ng pag-ulan ay: reaksyon ng pag-ulan ng singsing at reaksyon ng pag-ulan sa agar (gel).
Pansin! Ang lahat ng mga sangkap na kasangkot sa reaksyon ng pag-ulan ay dapat na ganap na transparent.
Reaksyon ng pag-ulan ng singsing. Gamit ang isang Pasteur pipette, magdagdag ng 0.2-0.3 ml (5-6 patak) ng serum sa precipitation tube (hindi dapat makuha ang serum sa mga dingding ng tubo). Ang antigen sa parehong dami ay maingat na inilalagay sa serum, na ibinubuhos ito ng manipis na Pasteur pipette sa dingding ng test tube. Ang test tube ay pinananatili sa isang hilig na posisyon. Kapag maayos na naka-layer, dapat mayroong malinaw na hangganan sa pagitan ng serum at ng antigen. Maingat, upang hindi paghaluin ang likido, ilagay ang test tube sa isang stand. Sa isang positibong resulta ng reaksyon, ang isang maulap na "singsing" ay nabuo sa hangganan ng antigen at antibody - isang precipitate (tingnan ang Fig. 48).
Ang reaksyon ay sinamahan ng isang bilang ng mga kontrol (Talahanayan 18). Ang pagkakasunud-sunod ng pagdaragdag ng mga sangkap ng reaksyon sa test tube ay napakahalaga. Hindi mo maaaring i-layer ang serum sa antigen (sa control - sa isang isotonic solution), dahil mas malaki ang relative density ng serum, lulubog ito sa ilalim ng test tube, at ang hangganan sa pagitan ng mga likido ay hindi mabubunyag.
Talahanayan 18. Scheme para sa pag-set up ng ring precipitation reaction
Tandaan. + pagkakaroon ng isang "singsing"; - kawalan ng "singsing".
Ang mga resulta ay naitala pagkatapos ng 5-30 minuto, sa ilang mga kaso pagkatapos ng isang oras, gaya ng nakasanayan na nagsisimula sa mga kontrol. Ang "singsing" sa 2nd test tube ay nagpapahiwatig ng kakayahan ng immune serum na pumasok tiyak na reaksyon na may kaukulang antigen. Dapat ay walang "singsing" sa 3-5 test tubes - walang mga antibodies at antigens na naaayon sa bawat isa. Ang isang "singsing" sa 1st tube - isang positibong resulta ng reaksyon - ay nagpapahiwatig na ang test antigen ay tumutugma sa kinuha na immune serum, ang kawalan ng isang "singsing" (isang "singsing" lamang sa 2nd tube) ay nagpapahiwatig ng kanilang hindi pagkakapare-pareho - isang negatibo resulta ng reaksyon.
Reaksyon ng pag-ulan sa agar (gel). Ang kakaiba ng reaksyon ay ang pakikipag-ugnayan ng antigen at antibody ay nangyayari sa isang siksik na daluyan, ibig sabihin, sa isang gel. Ang resultang precipitate ay nagbibigay ng malabo na guhit sa kapal ng daluyan. Ang kawalan ng banda ay nagpapahiwatig ng pagkakaiba sa pagitan ng mga bahagi ng reaksyon. Ang reaksyong ito ay malawakang ginagamit sa biomedical na pananaliksik, lalo na sa pag-aaral ng pagbuo ng toxin sa causative agent ng dipterya.
Kontrolin ang mga tanong
1. Ano ang pangunahing pagkakaiba sa pagitan ng agglutination at precipitation reactions?
2. Bakit hindi maaaring gamitin ang maulap na sangkap sa reaksyon ng pag-ulan?
Mag-ehersisyo
1. I-set up ang ring precipitation reaction at i-sketch ang resulta.
2. Pag-aralan ang likas na katangian ng pakikipag-ugnayan ng antigen sa antibody sa reaksyon ng precipitation sa agar, i-sketch ang resulta (kumuha ng isang tasa mula sa iyong guro).
Reaksyon ng Lysis (immune cytolysis)
Ang immune lysis ay ang paglusaw ng mga selula sa ilalim ng impluwensya ng mga antibodies kapag ipinag-uutos na paglahok pandagdag. Para sa reaksyon na kailangan mo:
1. Antigen - microbes, pulang selula ng dugo o iba pang mga selula.
2. Antibody (lysine) - immune serum, mas madalas na pasyente serum. Ang bacteriaolytic serum ay naglalaman ng mga antibodies na kasangkot sa lysis ng bakterya; hemolytic - mga hemolysin na nagtataguyod ng lysis ng mga pulang selula ng dugo; para sa lysis ng spirochetes, spirochetolysins ay kinakailangan, mga cell - itolysins, atbp.
3. Komplemento. Karamihan sa mga pandagdag sa serum mga guinea pig. Ang serum na ito (isang halo mula sa ilang mga hayop) ay kadalasang ginagamit bilang pandagdag. Ang sariwang (katutubong) complement ay hindi matatag at madaling masira sa pamamagitan ng pag-init, pag-alog, o pag-iimbak, kaya maaari itong magamit nang hindi hihigit sa dalawang araw pagkatapos matanggap. Upang mapanatili ang pandagdag, 2% ang idinagdag dito boric acid at 3% sodium sulfate. Ang pandagdag na ito ay maaaring maimbak sa 4°C nang hanggang dalawang linggo. Ang dry complement ay kadalasang ginagamit. Bago gamitin, ito ay natunaw sa isang isotonic na solusyon sa orihinal na dami (ipinahiwatig sa label).
4. Isotonic solution.
Reaksyon ng hemolysis(Talahanayan 19). Para sa reaksyon na kailangan mo:
1. Antigen - 3% suspensyon ng mga hugasan na erythrocytes ng tupa sa rate na 0.3 ml ng erythrocyte sediment at 9.7 ml ng isotonic solution.
2. Antibody - hemolytic serum (hemolysin) laban sa mga erythrocytes ng tupa; karaniwang inihanda sa produksyon, lyophilized at ang titer na nakasaad sa label.
Ang hemolysin titer ay ang pinakamataas na serum dilution kung saan ang kumpletong hemolysis ng isang 3% na suspensyon ng mga pulang selula ng dugo ay nangyayari sa pagkakaroon ng complement. Para sa reaksyon ng hemolysis, ang hemolysin ay kinuha sa triple titer, i.e. diluted 3 beses na mas mababa kaysa bago ang titer. Halimbawa, na may serum titer na 1:1200, ang serum ay natunaw ng 1:400 (0.1 ml ng serum * at 39.9 ml ng isotonic solution). Ang labis na hemolysin ay kinakailangan, dahil ang ilan sa mga ito ay maaaring ma-adsorbed ng iba pang mga bahagi ng reaksyon.
* (Hindi ka dapat kumuha ng mas mababa sa 0.1 ml ng suwero - ang katumpakan ng pagsukat ay magdurusa.)
3. Ang komplemento ay diluted 1:10 (0.2 ml ng complement at 1.8 ml ng isotonic solution).
4. Isotonic solution.
Talahanayan 19. Hemolysis reaction scheme
Accounting para sa mga resulta. Kung ang reaksyon ay natupad nang tama, ang hemolysis ay magaganap sa 1st test tube - ang mga nilalaman nito ay magiging transparent. Sa mga kontrol, ang likido ay nananatiling maulap: sa ika-2 tubo ay walang sapat na pandagdag para sa hemolysis, sa ika-3 tubo ay walang hemolysin, sa ika-4 na tubo ay walang hemolysin o pandagdag, sa ika-5 na tubo ang antigen ay gumagawa hindi tumutugma sa antibody,
Kung kinakailangan, ang hemolytic serum ay titrated ayon sa sumusunod na diagram(Talahanayan 20).
Bago ang titration, maghanda ng paunang serum dilution na 1:100 (0.1 ml ng serum at 9.9 ml ng isotonic solution), kung saan mga kinakailangang pagbabanto, Halimbawa:
Mula sa mga dilution na ito, magdagdag ng 0.5 ml ng serum sa titration test tubes, tulad ng ipinapakita sa Table. 20.
Talahanayan 20. Titration scheme para sa hemolytic serum (hemolysin)
Sa halimbawang ibinigay sa talahanayan. 20, ang titer ng hemolytic serum ay 1:1200.
Kapag gumagamit ng sariwang hemolytic serum, dapat itong hindi aktibo upang sirain ang pandagdag na nasa loob nito. Upang gawin ito, pinainit ito ng 30 minuto sa 56° C sa isang paliguan ng tubig o sa isang inactivator na may thermostat. Ang huling paraan ay mas mahusay: inaalis nito ang posibilidad ng sobrang pag-init ng whey, ibig sabihin, ang denaturation nito. Ang denatured sera ay hindi angkop para sa pagsubok.
Reaksyon ng Bacteriolysis. Sa reaksyong ito, umakma ang lyses bacteria sa pagkakaroon ng naaangkop (homologous) serum. Ang scheme ng reaksyon sa panimula ay katulad ng scheme ng reaksyon ng hemolysis. Ang kaibahan ay pagkatapos ng dalawang oras na pagpapapisa ng itlog, ang lahat ng mga test tube ay ibinhi sa mga Petri dish na may medium na paborable para sa microorganism na kinuha sa eksperimento upang malaman kung ito ay lysed. Kung ang eksperimento ay natupad nang tama, ang mga kultura mula sa 2-5 test tubes (mga kontrol) ay dapat magpakita ng masaganang paglaki. Ang kakulangan ng paglaki o mahinang paglaki sa inoculation mula sa 1st test tube (eksperimento) ay nagpapahiwatig ng pagkamatay ng mga microbes, ibig sabihin, na sila ay homologous sa antibody.
Pansin! Ang reaksyon ng bacteriolysis ay dapat isagawa sa ilalim ng mga kondisyong aseptiko.
Kontrolin ang mga tanong
1. Ano ang mangyayari sa mga pulang selula ng dugo kung distilled water ang gagamitin sa halip na isotonic sodium chloride solution? Ano ang batayan ng hindi pangkaraniwang bagay na ito?
2. Anong reaksyon ang magaganap kapag ang mga erythrocytes ay nakikipag-ugnayan sa homologous immune serum sa kawalan ng complement?
Mag-ehersisyo
I-set up ang reaksyon ng hemolysis. Itala at i-sketch ang resulta.
Kaugnay na impormasyon.
Gumagamit ito ng mga pulang selula ng dugo o neutral mga sintetikong materyales(halimbawa, mga latex particle), sa ibabaw kung saan ang mga antigens (bacterial, viral, tissue) o antibodies ay na-sorbed. Ang kanilang aglutinasyon ay nangyayari kapag ang naaangkop na sera o antigens ay idinagdag. Ang mga pulang selula ng dugo na na-sensitize sa mga antigen ay tinatawag na antigenic erythrocyte diagnosticum at ginagamit upang tuklasin at i-titrate ang mga antibodies. Ang mga erythrocyte ay na-sensitized sa mga antibodies. ay tinatawag na immunoglobulin erythrocyte diagnosticums at ginagamit upang makita ang mga antigen.
Ang passive hemagglutination reaction ay ginagamit upang masuri ang mga sakit na dulot ng bacteria (typhoid at paratyphoid fever, dysentery, brucellosis, plague, cholera, atbp.), protozoa (malaria) at mga virus (influenza, mga impeksyon sa adenoviral, viral hepatitis B, tigdas, tick-borne encephalitis, Crimean hemorrhagic fever, atbp.), pati na rin para sa pagtukoy ng ilang mga hormone, pagtukoy hypersensitivity matiyaga sa mga gamot at mga hormone tulad ng penicillin at insulin.
Passive hemagglutination reaction (RPHA). Ang passive hemagglutination test ay isang sensitibong pamamaraan serological diagnostics at ginagamit para sa parehong maaga at retrospective na diagnosis, pati na rin upang matukoy ang immunopogic na estado ng mga nabakunahang tao. Sa mga pasyente na may tularemia, ang mga antibodies ay kadalasang nakikita sa katapusan ng ika-1 o ika-2 linggo ng sakit pagkatapos ng 1-1.5 na buwan, umabot ang mga titer ng RPHA pinakamataas na pagganap(1:100000-1:20000, bihirang mas mataas), pagkatapos ay bumababa sila at nananatili sa antas ng 1:100-1:200 sa loob ng mahabang panahon.
Sa mga nabakunahang tao, ang mga antibodies ay patuloy ding nakikita, gayunpaman, sa mas mababang titer, hindi hihigit sa 1:2000-1:5000 1-1.5 buwan pagkatapos ng pagbabakuna, at nananatili sa loob ng ilang taon sa mababang antas ng 1:20-1:80.
Ang antigen para sa pagtatanghal ng RPHA ay tularemia erythrocyte diagnosticum (antigenic). Ang gamot ay pormalinisadong mga pulang selula ng dugo ng tupa, sensitized na may tularemia antigen, magagamit sa likido at tuyo na anyo. Paghahanda ng likido - isang 10% na pagsususpinde ng mga pulang selula ng dugo sa isang solusyon ng formaldehyde na 10% na konsentrasyon. Dry lyophilized na paghahanda - isang 10% na suspensyon ng mga pulang selula ng dugo na pinatuyo sa isang vacuum na walang preservative. Bago gamitin, ito ay diluted ayon sa mga direksyon sa label. Upang i-set up ang reaksyon sa mga polystyrene plate, ang parehong mga gamot ay ginagamit sa isang 2.5% na konsentrasyon, at kapag nagse-set up ng reaksyon sa microvolumes - sa isang 0.5% na konsentrasyon.
Teknik para sa pag-set up ng RPGA. Ang test sera ay diluted na may physiological solution 1:5 (1:10) at pinainit sa 56 degrees C sa loob ng 30 minuto. Pagkatapos nito, upang maalis ang mga heterogenous na antibodies sa mga erythrocytes ng tupa, ang sera ay ginagamot ng 50% na pagsususpinde ng mga formalinized na erythrocytes ng tupa. Upang gawin ito, magdagdag ng mga pulang selula ng dugo sa bilis na 2 patak (0.05 ml) bawat 1 ml ng serum at ihalo nang lubusan sa pamamagitan ng pag-alog. Ang serum ay naiwan hanggang sa ang mga erythrocytes ay ganap na nanirahan, o na-centrifuge pagkatapos ng isang oras sa temperatura ng silid, pagkatapos nito ay handa na para sa pagsusuri.
Ang likidong pagbabanto ay ibinubuhos sa dami ng 0.5 ML sa isang hilera ng mga balon sa isang polystyrene plate. Sa panahon ng paunang pag-aaral ng sera, ipinapayong subukan ang mga ito sa pamamagitan ng pag-set up ng reaksyon sa isang maikling hilera ng plato (6-wells). Kung ang mga antibodies ay nakita sa isang maikling serye, ang sera ay muling susuriin sa isang mahabang serye ng mga dilution (12 balon). Pagkatapos matapon ang dilution liquid, magdagdag ng 0.5 ml ng test sera sa isang 1:5 dilution sa unang balon ng bawat hilera (maikli o mahaba). Pagkatapos ang parehong mga volume ng suwero ay titrated na may dalawang beses dilutions. Kaya, ang mga serum dilution ay nakuha sa maikling serye mula 1:10 hanggang 1:320, at sa mahabang serye mula 1:10 hanggang 1:20480. Pagkatapos ng titration ng sera, isang patak (0.05 ml) ng gumaganang 2.5% na suspensyon ng sensitized erythrocytes ay idinagdag sa bawat balon. Ang mga nilalaman ng mga plato ay lubusang inalog hanggang sa makuha ang isang homogenous na suspensyon. Ang mga plato ay iniiwan sa temperatura ng silid sa isang nakatigil na ibabaw ng mesa. Ang paunang pag-record ng reaksyon ay isinasagawa pagkatapos ng 2-3 oras, ang pangwakas na pagpapasiya ng titer ay ginawa pagkatapos ng kumpletong sedimentation ng mga pulang selula ng dugo sa mga balon. Ang mga sumusunod na kontrol ay ibinibigay para sa reaksyon: 1) test serum diluted 1:10 sa dami ng 0.5 ml + 1 drop ng 2.5% suspension ng unsensitized erythrocytes; 2) dilution liquid sa dami ng 0.5 ml + 1 drop ng 2.5% suspension ng unsensitized erythrocytes; 3) dilution liquid sa dami ng 0.5 ml + 1 drop ng 2.5% suspension ng sensitized erythrocytes. Ang lahat ng mga kontrol ay dapat magbigay ng malinaw na negatibong reaksyon.
Accounting at pagtatasa ng RPGA. Ang reaksyon ay tinasa ayon sa sumusunod na pamamaraan:
1) nang husto positibong reaksyon(++++) - ang mga pulang selula ng dugo ay nahuhulog sa ilalim ng butas sa isang pantay na layer sa anyo ng isang "payong", na kadalasang may mga scalloped na gilid;
2) positibong reaksyon (+++) - ang mga pulang selula ng dugo ay sumasakop ng hindi bababa sa 2/3 ng ilalim ng balon;
3) mahinang positibong reaksyon (++) - maliit ang aglutinate at matatagpuan sa pinakagitna ng balon;
4) kaduda-dudang reaksyon (+) - sa paligid ng sediment ng mga erythrocytes sa pinakasentro ng balon ay may mga indibidwal na butil ng agglutinate;
5) negatibo (-) - sa ilalim ng butas, ang mga pulang selula ng dugo ay tumira sa anyo ng isang "button" o isang maliit na singsing na may makinis, malinaw na tinukoy na mga gilid.
Ang serum titer ay isinasaalang-alang batay sa huling pagbabanto ng suwero, na nagbigay ng napakalinaw na reaksyon (hindi bababa sa tatlong plus). Ang pagbabanto ng 1:100 o mas mataas ay itinuturing na isang diagnostic titer, gayunpaman, tulad ng sa kaso ng RA, kinakailangan na subaybayan ang pagtaas nito.
Ang RPGA para sa tularemia ay medyo tiyak at nakakakita ng ilan mga cross reaction lamang sa brucellosis serums. Differential diagnosis posible sa taas ng mga titer sa RPGA, na mas mataas sa homologous antigen.
Pamamaraan para sa pag-set up ng RPHA sa mga microvolume. Ang RPGA ay maaaring isagawa sa microvolumes gamit ang Takachi-type microtitrator (o round-bottomed microplates na may micropipettes), na nagpapahintulot sa titration ng materyal sa mga volume na 25 μl at 50 μl. Ang pamamaraan ng reaksyon at ang pagkakasunud-sunod ng lahat ng mga operasyon ay kapareho ng kapag nag-aaral sa mga polystyrene plate. Gayunpaman, dapat itong tandaan na ang sensitivity ng micromethod ay karaniwang isang dilution (ibig sabihin, 2 beses) na mas mababa kaysa sa macromethod.
Upang i-set up ang reaksyon sa isang microtitrator, isang dilution na likido sa dami ng 50 μl ay idinagdag sa bawat balon gamit ang isang dropper pipette. Pagkatapos, gamit ang mga titrator na may 50 μl na ulo, ang test serum ay kinokolekta sa pamamagitan ng paglubog ng ulo dito. Tiyaking napuno ng likido ang ulo ng titrator. Ang titrator na may suwero ay inilipat sa unang balon at, pinipigilan ito patayong posisyon, gumawa ng ilan mga paggalaw ng paikot Papunta at pabalik. Pagkatapos ang titrator ay inilipat sa susunod na balon at ang pagmamanipula ay paulit-ulit. Maaaring isagawa ang titration nang sabay-sabay sa ilang mga hilera. Matapos i-titrate ang buong serye, ang titrator ay hinuhugasan ng distilled water (pagbabago ng 2 bahagi) sa pamamagitan ng pag-ikot ng mga paggalaw, ang tubig ay tinanggal mula sa ulo gamit ang isang pamunas at sinunog sa apoy ng burner.
Pagkatapos ng titration, magdagdag ng 25 μl ng erythrocyte diagnostic fluid sa mga balon. Ang konsentrasyon ng diagnosticum para sa RPHA sa mga microvolum ay dapat na 0.5% (ibig sabihin, ang isang 2.5% na pagsususpinde ng mga pulang selula ng dugo ay karagdagang natunaw ng 5 beses). Pagkatapos magdagdag ng mga pulang selula ng dugo, ang mga plato ay dapat na inalog nang bahagya hanggang sa makuha ang isang homogenous na suspensyon. Ang mga resulta ay maaaring maitala sa loob ng 1-1.5 na oras, na isang makabuluhang bentahe ng RPGA sa isang microtiter. Bilang karagdagan, ang pamamaraan na ito ay nangangailangan ng maliit na dami ng lahat ng mga sangkap ng reaksyon at pagsubok ng sera.
Ang reaksyon ay isinasaalang-alang ayon sa sumusunod na pamamaraan:
1) "+" - kumpletong hemagglutination, kung saan ang mga pulang selula ng dugo ay nahulog sa ilalim ng balon sa isang pantay na layer sa anyo ng isang "payong", na sumasakop ng hindi bababa sa 2/3 ng ilalim;
2) "+-" - bahagyang hemagglutination, kung saan ang mga pulang selula ng dugo ay nahuhulog sa ilalim sa anyo ng isang maluwag na singsing na maliit ang sukat;
3) “-“ – kawalan ng hemagglutination, kapag ang mga pulang selula ng dugo ay bumagsak sa ilalim sa anyo ng isang maliit na butones o singsing na may makinis na gilid.
Pagtitiyak positibong resulta, na nakuha sa RPHA, ay maaaring masuri gamit ang isang tatlong bahagi na reaksyon - ang reaksyon ng pagsugpo ng passive hemagglutination (RPHA).
Pamamaraan para sa pag-set up ng RTPGA. Ang reaksyong ito ay ginagamit upang kumpirmahin ang pagiging tiyak ng isang positibong resulta ng RPGA kapag ito ay may pagdududa o partikular na interes sa epidemiological. Ang mekanismo ng reaksyon ay ang tiyak na pagsugpo ng hemagglutination kapag ang isang suspensyon ng pinatay na tularemia bacteria ay idinagdag sa test serum. Tatlong sangkap ang nakikipag-ugnayan sa reaksyon: test serum, partikular na tularemia antigen at antigenic erythrocyte diagnosticum RTPHA ay karaniwang inilalagay sa isang hilera ng 7-8 na balon. Maipapayo na mag-install ng paulit-ulit na RPGA na kahanay sa RTPGA. Ang 0.25 ml ng dilution na likido ay ibinuhos sa dalawang hanay ng mga balon, pagkatapos ay ang pagsubok na serum sa dami ng 0.25 ml ay idinagdag sa mga unang balon ng parehong mga hilera at ang titration ay isinasagawa ng dalawang magkaparehong hanay ng serum dilutions. Magdagdag ng 0.25 ml ng dilution liquid sa lahat ng mga balon ng ikalawang hanay, at 0.25 ml ng isang suspensyon ng tularemia bacteria sa mga balon ng unang hilera. Ginagamit ang Tularemia diagnosticum (naglalaman ng 25 bilyong tularemia bacteria sa 1 ml), na dati nang natunaw ng 50 beses. Ang pagsususpinde na ito ay naglalaman ng 500 milyong bakterya sa 1 ml o 125 milyon sa dami ng 0.25 ml. Matapos idagdag ang antigen, ang plato ay naiwan sa loob ng 1 oras sa temperatura ng silid, pagkatapos kung saan ang isang patak (0.05 ml) ng erythrocyte diagnosticum ay idinagdag sa lahat ng mga balon ng parehong mga hilera, ang plato ay inalog at iniwan sa isang patag na ibabaw ng mesa. Ang accounting ay isinasagawa pagkatapos ng 2-3 oras.
Accounting at pagtatasa ng RTPGA. Kung ang test serum ay naglalaman ng mga tiyak na tularemia antibodies, sila ay neutralisado ng idinagdag na antigen at ang hemagglutination ay hindi mangyayari sa unang hilera ng mga balon, o, kung mataas na titer serum, ang hemagglutination ay makikita sa mas maliit (2-4) na bilang ng mga balon kaysa sa hanay na may RPGA. Sa kasong ito, ang pagtitiyak ng mga resulta ay nakumpirma. Kung ang hemagglutination ay nabanggit sa parehong mga hilera, i.e. Kung ang mga resulta ng RTPGA at RPGA ay nag-tutugma, ito ay nagpapahiwatig ng kawalan ng tularemia antibodies sa test serum. Sa kasong ito, ang pangunahing resulta ng RPGA ay itinuturing na hindi tiyak.
Pamamaraan para sa pagtatanghal ng RTHG sa mga microvolume. Ang RTPGA, tulad ng RPGA, ay maaaring isagawa sa mga microvolume gamit ang isang Takachi-type microtiter. Upang gawin ito, magdagdag ng 0.25 μl ng diluting liquid sa mga balon ng microplate sa dalawang hanay ng 7-8 na balon bawat isa. Pagkatapos, gamit ang isang titrator, 0.25 μl ng test serum ay idinagdag at titrated sa parehong mga hanay. Pagkatapos nito, 25 μl ng tularemia antigen (ang konsentrasyon nito ay 500 milyong tularemia bacteria sa 1 ml) ay idinagdag sa bawat balon sa unang hilera, at 25 μl ng dilution na likido ay idinagdag sa pangalawang hilera. Ang mga plato ay naiwan sa loob ng 1 oras sa temperatura ng silid, pagkatapos kung saan 25 μl ng antigenic zritrocytic diagnosticum (0.5% na konsentrasyon) ay idinagdag sa lahat ng mga balon ng parehong mga hilera. Ang accounting at pagsusuri ng mga resulta ay isinasagawa katulad ng mga reaksyon sa macrovolumes.
Talaan ng mga nilalaman ng paksang "Immunomodulators. Immunodiagnosis ng mga nakakahawang sakit.":Mga reaksyon ng passive agglutination. Mga hindi direktang reaksyon ng agglutination. Hindi direkta o passive hemagglutination reaction (IRHA, RPHA). Baliktarin ang RNGA. Passive hemagglutination inhibition reaction (PHA).
Ang mga ito mga reaksyon ay tinatawag hindi direkta (passive), dahil ginagamit nila ang Ag (o AT) na artipisyal na na-sorbed sa ibabaw ng iba't ibang mga corpuscular particle.
Hindi direkta o passive na reaksyon ng hemagglutination (RNGA, RPGA) ay isa sa mga pinaka-sensitibong serological na reaksyon. Ito ay batay sa kakayahan ng AT na makipag-ugnayan sa Ag na naayos sa iba't ibang mga pulang selula ng dugo, na pagkatapos ay agglutinate. Para sa higit na katatagan ng mga diagnosticum, ang mga pulang selula ng dugo ay pormalin.
Baliktarin ang RNGA ginagamit upang makita ang Ag sa suwero ng dugo; Para sa layuning ito, hindi Ag, ngunit AT ay naayos sa mga erythrocytes. Ang mga reaksyon ng ganitong uri ay malawakang ginagamit upang masuri ang mga nakakahawang sakit, magtatag ng pagbubuntis, makita ang hypersensitivity sa mga gamot, atbp.
Passive hemagglutination inhibition reaction (RTPGA) - karagdagang pag-unlad RNGA; sa isang kahulugan ay kumokontrol sa pagiging tiyak nito. Unlike RNGA, may kasamang tatlong bahagi; Ang Ag, AT at Ag (AT) ay na-adsorbed sa mga erythrocytes. Sa una, ang Ag ay tumutugon sa AT (karaniwang antiserum), pagkatapos ay ang mga erythrocyte na na-sensitized na may parehong Ag (o AT) ay idinagdag sa pinaghalong. Kung, sa panahon ng pakikipag-ugnayan ng Ag sa AT, walang libreng AT (o Ag) na nananatili sa system, kung gayon ang agglutination ng erythrocyte diagnosticum ay hindi sinusunod.
11621 0
Ang mga reaksyon ng serological ay itinalaga alinsunod sa mga phenomena na kasama ng pagbuo ng antigen-antibody complex sa panahon ng pakikipag-ugnayan ng mga sangkap na may iba't ibang mga katangian. May mga reaksyon ng agglutination, precipitation at lysis.
Agglutination reaction (RA)
Ang agglutination reaction (RA) ay batay sa paggamit ng isang corpuscular antigen (isang suspensyon ng bacteria, sensitized erythrocytes, latex particle, atbp.) na nakikipag-ugnayan sa mga partikular na antibodies, bilang isang resulta kung saan ang nagreresultang antigen-antibody complex ay namuo. Ang reaksyong ito ay malawakang ginagamit sa laboratory practice para sa serological diagnosis. impeksyon sa bacterial at para sa pagkakakilanlan ng mga nakahiwalay na microorganism.
Ang RA ay ginagamit upang masuri ang maraming mga nakakahawang sakit: brucellosis (Wright, Heddleson reaction), tularemia, leptospirosis (RAL - Leptospira agglutination at lysis reaction), listeriosis, typhus (RAR - Rickettsia agglutination reaction), shigellosis, yersiniosis, pseudotuberculosis, atbp.
Hindi direkta o passive agglutination reaction (RIGA o RPGA).
Upang maisagawa ang reaksyong ito, ginagamit ang mga pulang selula ng dugo ng mga hayop (tupa, unggoy, guinea pig, ilang ibon) na may mga antibodies o antigen, na nakakamit sa pamamagitan ng pagpapapisa ng suspensyon ng mga pulang selula ng dugo at solusyon ng antigen o immune serum.
Ang mga diagnostic na nakuha batay sa mga erythrocytes na na-sensitize sa mga antigen ay tinatawag antigen erythrocyte diagnosticums. Ang mga ito ay inilaan para sa pagpapasiya ng mga antibodies sa mga serial dilution ng sera ng dugo, halimbawa, erythrocyte shigella diagnosticums, erythrocyte salmonella O-diagnosticums.
Alinsunod dito, ang mga diagnostic batay sa mga erythrocytes na na-sensitize sa mga partikular na immunoglobulin ay tinatawag antibodies(immunoglobulin) diagnosticums at nagsisilbi silang pagtuklas ng mga antigen sa iba't ibang mga materyales, halimbawa, erythrocyte immunoglobulin diphtheria diagnosticum para sa RIGA, na ginagamit upang makita ang diphtheria exotoxin ng corynebacteria sa isang likidong nutrient medium kapag ang materyal mula sa ilong at oropharynx ay na-inoculate dito.
Ang reaksyon ng hemagglutination ay ginagamit upang masuri ang parehong bacterial (typhoid fever, paratyphoid fever, dysentery, brucellosis, plague, cholera, atbp.) at viral (influenza, adenoviral infections, measles, atbp.) na mga impeksyon. Sa mga tuntunin ng pagiging sensitibo at pagtitiyak, ang RIGA ay higit na mataas sa RA.
Hemagglutination inhibition reaction (HAI)
Ang hemagglutination inhibition reaction (HAI) ay ginagamit upang titrate ang mga antiviral antibodies sa serum ng dugo, gayundin upang maitatag ang uri ng mga nakahiwalay na kultura ng viral. Maaaring gamitin ang RTGA upang masuri ang mga iyon mga impeksyon sa viral, ang mga pathogen na may mga katangian ng hemagglutinating.
Ang prinsipyo ng pamamaraan ay ang serum na naglalaman ng mga antibodies sa isang partikular na uri ng virus ay pinipigilan ang aktibidad ng hemagglutinating nito at ang mga pulang selula ng dugo ay nananatiling hindi pinagsama.
Passive hemagglutination inhibition (delay) reaction (RPHA).
Tatlong sangkap ang kasangkot sa RTPGA: immune serum, antigen (test material) at sensitized erythrocytes.
Kung ang materyal ng pagsubok ay naglalaman ng isang antigen na partikular na tumutugon sa mga immune antibodies karaniwang serum, pagkatapos ito ay nagbubuklod sa kanila, at sa kasunod na pagdaragdag ng mga erythrocytes na na-sensitize sa isang antigen na homologous sa serum, ang hemagglutination ay hindi nangyayari.
Ginagamit ang RTPHA upang makita ang mga microbial antigens, para sa kanilang quantitative determination, at para din makontrol ang specificity ng RTPGA.
Latex agglutination reaction (RLA)
Ang mga latex particle ay ginagamit bilang carrier ng antibodies (immunoglobulins). Ang RLA ay isang malinaw na paraan para sa pag-diagnose ng mga nakakahawang sakit, na isinasaalang-alang ang oras na kinakailangan (hanggang 10 minuto) at ang kakayahang makakita ng antigen sa isang maliit na dami ng materyal sa pagsubok.
Ang RLA ay ginagamit upang ipahiwatig ang mga antigen ng Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae type b, Neisseria meningitidis sa cerebrospinal fluid, upang makita ang grupo A streptococci sa mga pamunas sa lalamunan, upang masuri ang salmonellosis, yersiniosis at iba pang mga sakit. Ang sensitivity ng pamamaraan ay 1-10 ng/ml, o 10³ -10⁶ bacterial cells sa 1 µl.
Coagglutination reaction (CoA)
Ang reaksyon ng coagglutination (CoA) ay batay sa kakayahan ng protina A ng staphylococci na mag-attach ng mga partikular na immunoglobulin. RCA - isang paraan ng express diagnostics - nagsisilbi upang matukoy ang natutunaw na mga thermostable na antigen sa mga pagtatago ng tao at sa komposisyon ng mga nagpapalipat-lipat na immune complex (CIC). Ang pagtuklas ng mga tiyak na antigens sa komposisyon ng CEC ay nangangailangan ng kanilang paunang pag-ulan mula sa serum ng dugo.
Reaksyon ng ulan
Sa reaksyon ng pag-ulan (RP), bilang isang resulta ng pakikipag-ugnayan ng mga antibodies na may mataas na dispersed na natutunaw na antigens (protina, polysaccharides), ang mga complex ay nabuo kasama ang pakikilahok ng pandagdag - precipitates. Ito ay isang sensitibong pagsubok na ginagamit upang makita at makilala ang iba't ibang mga antigen at antibodies. Ang pinakasimpleng halimbawa ng mataas na kalidad na RP ay ang pagbuo ng isang opaque precipitation band sa isang test tube sa hangganan ng antigen layering sa immune serum - ang ring precipitation reaction. Ang iba't ibang uri ng RP sa semi-liquid agar o agarose gels ay malawakang ginagamit (double immunodiffusion method, radial immunodiffusion method, immunoelectrophoresis).
Complement fixation reaction (CFR)
Ang complement fixation reaction (CFR) ay batay sa phenomenon ng hemolysis na may partisipasyon ng complement, i.e. may kakayahang tuklasin lamang ang mga antibodies sa pag-aayos ng pandagdag.
Ang RSC ay malawakang ginagamit para sa pagsusuri ng maraming bacterial at viral infection, rickettsial infection, chlamydia, nakakahawang mononucleosis, impeksyon sa protozoal, helminthiases. Ang RSK ay kumplikado serological reaksyon, kung saan dalawang sistema ang kasangkot: ang sistema ng pagsubok (serum ng dugo), na kinakatawan ng antigen-antibody at complement system, at ang hemolytic system (mga pulang selula ng dugo ng tupa + hemolytic serum). Ang hemolytic serum ay heat-inactivated rabbit blood serum na nabakunahan ng sheep erythrocytes. Naglalaman ito ng mga antibodies laban sa mga pulang selula ng dugo ng tupa.
Ang isang positibong resulta ng RSC - ang kawalan ng hemolysis - ay sinusunod kung ang test serum ay naglalaman ng mga antibodies na homologous sa antigen. Sa kasong ito, ang nagreresultang antigen-antibody complex ay nagbubuklod ng pandagdag, at sa kawalan ng libreng pandagdag, ang pagdaragdag ng hemolytic system ay hindi sinamahan ng hemolysis. Kung walang mga antibodies na tumutugma sa antigen sa suwero, ang pagbuo ng isang antigen-antibody complex ay hindi mangyayari, ang pandagdag ay nananatiling libre at ang serum ay nagiging sanhi ng hemolysis ng mga pulang selula ng dugo, i.e. ang pagkakaroon ng hemolysis ay isang negatibong resulta ng reaksyon.
Yushchuk N.D., Vengerov Yu.Ya.
Reaksyon ng aglutinasyon - RA(mula sa lat. agglutinatio- adhesion) ay isang simpleng reaksyon kung saan ang mga antibodies ay nagbubuklod sa mga corpuscular antigens (bacteria, erythrocytes o iba pang mga cell, hindi matutunaw na mga particle na may mga antigen na na-adsorbed sa kanila, pati na rin ang mga macromolecular aggregates). Ito ay nangyayari sa pagkakaroon ng mga electrolyte, halimbawa, kapag ang isang isotonic sodium chloride solution ay idinagdag.
Mag-apply iba't ibang mga pagpipilian agglutination reactions: detalyado, indicative, indirect, etc. Ang agglutination reaction ay ipinapakita sa pamamagitan ng pagbuo ng flakes o sediment
Ginagamit ang RA para sa:
pagpapasiya ng mga antibodies sa serum ng dugo ng mga pasyente, halimbawa, na may brucellosis (mga reaksyon ng Wright, Heddelson), typhoid fever at paratyphoid fever (Vidal reaction) at iba pa Nakakahawang sakit;
pagpapasiya ng pathogen na nakahiwalay sa pasyente;
pagpapasiya ng mga pangkat ng dugo gamit ang monoclonal antibodies laban sa erythrocyte alloantigens.
Upang matukoy ang mga antibodies sa isang pasyente ilagaypinalawak reaksyon ng aglutinasyon: idagdag sa mga dilution ng serum ng dugo ng pasyente diagnosticum(suspensyon ng mga napatay na mikrobyo) at pagkatapos ng ilang oras ng pagpapapisa ng itlog sa 37 °C, ang pinakamataas na serum dilution (serum titer) ay nabanggit, kung saan naganap ang agglutination, ibig sabihin, nabuo ang isang precipitate.
Ang kalikasan at bilis ng agglutination ay depende sa uri ng antigen at antibodies. Ang isang halimbawa ay ang mga kakaibang pakikipag-ugnayan ng diagnosticums (O- at R-antigens) na may mga tiyak na antibodies. Agglutination reaksyon sa O-diagnosticum(mga bakterya na pinatay ng init, pinapanatili ang init-stable O-antigen) ay nangyayari sa anyo ng fine-grained agglutination. Ang agglutination reaction na may H-diagnosticum (bacteria na pinatay ng formaldehyde, na pinapanatili ang thermolabile flagellar H-antigen) ay magaspang at mas mabilis na nagpapatuloy.
Kung kinakailangan upang matukoy ang pathogen na nakahiwalay sa pasyente, ilagay nagpapahiwatig na reaksyon ng aglutinasyon, gamit ang diagnostic antibodies (agglutinating serum), i.e., ang serotyping ng pathogen ay isinasagawa. Ang isang indikatibong reaksyon ay isinasagawa sa isang glass slide. Ang isang purong kultura ng pathogen na nakahiwalay mula sa pasyente ay idinagdag sa isang patak ng diagnostic agglutinating serum sa isang pagbabanto ng 1:10 o 1:20. Ang isang kontrol ay inilalagay sa malapit: sa halip na serum, isang patak ng sodium chloride solution ang inilapat. Kapag lumitaw ang flocculent sediment sa isang patak na naglalaman ng serum at microbes, a malawak na reaksyon ng agglutination sa mga test tube na may pagtaas ng mga dilution ng agglutinating serum, kung saan idinagdag ang 2-3 patak ng suspensyon ng pathogen. Ang aglutinasyon ay isinasaalang-alang ng dami ng sediment at ang antas ng linaw ng likido. Ang reaksyon ay itinuturing na positibo kung ang agglutination ay sinusunod sa isang pagbabanto na malapit sa titer ng diagnostic serum. Kasabay nito, ang mga kontrol ay isinasaalang-alang: ang serum na diluted na may isotonic sodium chloride solution ay dapat na transparent, ang suspensyon ng microbes sa parehong solusyon ay dapat na pantay na maulap, nang walang sediment.
Ang iba't ibang kaugnay na bakterya ay maaaring pagsama-samahin ng parehong diagnostic agglutinating serum, na nagpapahirap sa kanilang pagkakakilanlan. Samakatuwid ginagamit nila adsorbed agglutinating sera, mula sa kung saan ang mga cross-reacting antibodies ay inalis sa pamamagitan ng adsorption sa mga kaugnay na bakterya. Ang nasabing sera ay nagpapanatili ng mga antibodies na partikular lamang sa isang partikular na bacterium. Ang paggawa ng espesyal na monoreceptor diagnostic agglutinating sera ay iminungkahi ni A. Castellani (1902).
Hindi direktang (passive) hemagglutination reaksyon(RNGA, RPGA) ay batay sa paggamit ng mga pulang selula ng dugo na may mga antigen o antibodies na na-adsorbed sa kanilang ibabaw, ang pakikipag-ugnayan nito sa mga kaukulang antibodies o antigens ng serum ng dugo ay nagdudulot ng pagdikit at pag-ulan ng mga pulang selula ng dugo sa ilalim ng test tube o cell V sa anyo ng scalloped sediment (Larawan 13.2). Sa negatibong reaksyon Ang mga pulang selula ng dugo ay tumira ■ sa anyo ng isang “button”. Kadalasan, ang mga antibodies ay nakikita sa RNGA gamit ang isang antigenic erythrocyte diagnosticum, na mga erythrocytes na may adsorbed. sa ang mga ito ay may mga antigens. Minsan ginagamit ang mga diagnostic na anti-A erythrocyte, kung saan na-adsorbed ang mga antibodies. Halimbawa, ang botulinum toxin ay maaaring matukoy sa pamamagitan ng pagdaragdag ng erythrocyte antibody botulinum toxin dito (ang reaksyong ito ay tinatawag na baligtarin ang hindi direktang reaksyon ng hemagglutination- RONG). Ginagamit ang RNGA upang masuri ang mga nakakahawang sakit at matukoy ang gonadotropic hormone V ihi kapag nagtatag ng pagbubuntis, upang matukoy ang hypersensitivity sa mga gamot, hormone at sa ilang iba pang mga kaso.
COMBES REACTION
(Coombs test) - isang paraan para sa pagtukoy ng Rh antibodies sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo, na nagiging sanhi ng pag-ulan ng mga globulin sa serum ng dugo. Ang pagsusulit na ito ay ginagamit para sa diagnosis hemolytic anemia sa mga sanggol na may Rh incompatibility na nakakaranas ng pagkasira ng mga pulang selula ng dugo.
Reaksyon ng coagglutination. Ang mga pathogen cell ay tinutukoy gamit ang staphylococci na paunang ginagamot na may immune diagnostic serum. Staphylococci na naglalaman ng protina A, pagkakaroon ng isang affinity para sa Fc fragment ng immunoglobulins, nonspecifically adsorb antimicrobial antibodies, na pagkatapos ay nakikipag-ugnayan sa mga aktibong sentro na may kaukulang microbes na nakahiwalay mula sa mga pasyente. Bilang resulta ng coagglutination, ang mga natuklap ay nabuo na binubuo ng staphylococci, diagnostic serum antibodies at ang nakitang microbe.
Hemagglutination inhibition reaction(RTGA) ay batay sa blockade, pagsugpo sa mga viral antigen ng immune serum antibodies, bilang resulta kung saan ang mga virus ay nawawalan ng kakayahang pagsama-samahin ang mga pulang selula ng dugo (Larawan 13.3). Ginagamit ang RTGA upang masuri ang maraming mga sakit na viral, ang mga sanhi ng ahente nito (mga virus ng trangkaso, tigdas, rubella, tick-borne encephalitis, atbp.) ay maaaring pagsama-samahin ang mga pulang selula ng dugo ng iba't ibang mga hayop.
- Isang grupo ng mga doktor mula sa WHO ang dumating sa India upang tukuyin ang mga pasyenteng may polio at tumulong sa pagsasagawa ng unibersal na pagbabakuna laban sa polio. Sa isa sa mga nayon na sinuri, isang 6 na taong gulang na batang lalaki ang dinala sa mga doktor mula sa isang malaking pamilya na nagkasakit 5 araw na ang nakakaraan. Biglang tumaas ang temperatura, nagkaroon ng matinding sakit ng ulo, paulit-ulit na pagsusuka, pananakit ng mga braso at binti. Sa pag-inspeksyon: init, matinding panghihina, sintomas ng meningeal, sa kanang binti nabawasan tono ng kalamnan, ang mga tendon reflexes ay mahinang humina, ang paa ay nakabitin. Sa panahon ng pagbutas ng spinal canal, ang cerebrospinal fluid ay dumaloy sa ilalim altapresyon, ang bilang ng mga lymphocytes ay tumaas, ang bakterya ay hindi nakahiwalay. Naihatid paunang pagsusuri"paralitikong anyo ng polio." Paano nahawa ang batang lalaki? Paano isinasagawa ang partikular na aktibong pag-iwas sa polio? May panganib bang makahawa sa ibang mga bata sa pamilyang ito, ano ang dapat gawin?
Sagot: Ang batang lalaki ay maaaring nahawahan sa pamamagitan ng fecal-oral route sa pamamagitan ng pagkain, tubig, at gayundin sa pamamagitan ng airborne droplets. Ang pangunahing hakbang para sa pag-iwas sa polio ay pagbabakuna na may live na bakuna sa kultura mula sa 3 serotypes ng Sabin strains Sa Russia ito ay ginagamit pagbabakuna sa polio para sa oral administration na ginawa ng Institute of Poliomyelitis at Viral Encephalitis na pinangalanan. M.P. Chumakova. Ang bakuna ay isang trivalent na paghahanda ng attenuated Sabin strains ng polio virus type 1, 2, 3, na nakuha sa isang pangunahing kultura ng African green monkey kidney cells. . Ang mga batang may edad na 3 buwan hanggang 6 na taon ay napapailalim sa regular na pagbabakuna sa polio. Ang mga pagbabakuna sa oral polio vaccine ay isinasagawa gamit ang 2 o 4 na patak ng bakuna nang pasalita nang tatlong beses sa 3, 4, 5 at 6 na buwan na may tatlong booster dose sa 18, 20 buwan at 14 na taon. Ang maysakit na batang lalaki ay dapat na maospital, at lahat ng iba pang mga anak ng pamilyang ito ay dapat mabakunahan ng live na bakunang polio.
- Komposisyon at paggamit ng bakuna sa trangkaso trivalent polymer-subunit liquid (influenza)
Ito ay isang molekular na bakuna. Komposisyon: surface Ag ng influenza virus ng tatlong subtype (A/H1N1, A/H3N2, B). Application: para sa pag-iwas sa trangkaso
Kard ng pagsusulit Blg. 23
