Ifa analizinin hazırlanması kaç gün sürer? Enzim immunoassay kan testi hakkında ayrıntılar, nedir ve yorumlanması

Teşhis teknikleri modern zamanlar belirli bir hastalığın laboratuvarda tanımlanmasını mümkün kılmaktadır. özel analizler. Bunlardan biri, önceden konulmuş bir tanıyı doğrulayabilen, enzime bağlı immünosorbent kan testidir.

Enzim immünolojik testi ELISA en etkili ve en etkili yöntemlerden biridir. modern yöntemler bağışıklıkla ilişkili bozuklukların tanımlanmasına olanak sağlar ve hormonal dengesizlikler yanı sıra onkolojik süreçler. Test sırasında vücutta enfeksiyon oluştuğunda üretilen antikorlar kanda tespit edilebiliyor. Bu nüans dikkate alındığında hastalık, gelişiminin en erken aşamasında bile tespit edilebilir.

Tekniğin temeli nedir?

ELISA analizinin sonuçları elde edilen sonuçlara dayanmaktadır. kimyasal reaksiyonlar Antikorları tanımak için özel tanımlama işaretleri görevi gören enzimler üzerinde. Sonuç olarak, immünokimyasal reaksiyonlar sırasında antikorlar belirli antijenlerle etkileşime girmeye başlar. Bütün bunlar şunu iddia etmek için sebep veriyor yanlış sonuçlar ELISA için kan bağışlarken minimum düzeydedir.

Çalışma miktarı belirlememizi sağlar bağışıklık hücreleriözellikleri ve gerekli antikorların varlığı

Solüsyonda renklenme tespit edildiğinde sonuç pozitif kabul edilir. Renk, antijenlerin antikorla etkileşime girdiğini gösterir. Böyle bir şey olmazsa sonuç olumsuzdur.

(bu dosyadaki 3. makaleye bağlantı), vücudun direnme yeteneğini değerlendirmenize olanak tanır bulaşıcı hastalıklar Hastalığın evresini gösteren ve hastalığın evresini gösteren Enzim Bağlı İmmunosorbent Assay (ELISA) önemli bir yer tutar. Bu çalışmanın yürütülmesi, kanın koruyucu fonksiyonunun aktivitesini kapsamlı bir şekilde değerlendirmenize ve bulaşıcı patolojilerde, ayrıca kan hastalıklarında, otoimmün süreçlerde ve hormonal problemlerde immün yetmezlik durumunu tanımlamanıza olanak tanır.

Tek bir analizde bu kadar çok hedefi kapsamak nasıl mümkün olabiliyor ve bunun uygulanması için hangi göstergeler var? Hadi anlamaya çalışalım.

ELISA yöntemi kullanılarak yapılan kan testi nedir?

Bu labaratuvar testi belirli antijenlere (patojenik ajanlar) karşı spesifik antikorların (protein niteliğindeki koruyucu kan faktörleri) varlığını belirlemenizi sağlar. Antikorlar arasında, immün kompleksler formunda bulunabilen immünoglobulinler birincil öneme sahiptir.

İmmünoglobulinler, yabancı antijenlerin girişine yanıt olarak ortaya çıkan karmaşık insan nörohumoral reaksiyonlarının bir sonucu olarak üretilir. Her patojenik ajan türü kendine özgü antikorları üretir. Bir antijeni veya patolojik mikroorganizmayı "bağlayarak" karmaşık bir "antijen-antikor" bileşiği oluşturarak, ardından nötralizasyon, enzimatik lizis, fagositoz reaksiyonları ve vücuttan uzaklaştırılma yoluyla etki ederler.

Not:ELISA yönteminin hastada mevcut olan patojenin veya zararlı maddenin türünü belirli komplekslerin varlığıyla belirlemesi sağlanır.

Bilmek temel prensiplerİnsan bağışıklık sisteminin nasıl çalıştığını aşağıdakilere bakarak görebilirsiniz: bu video gözden geçirmek:

İmmünoglobulinler nelerdir?

5 ana immünoglobulin sınıfı keşfedilmiş ve incelenmiştir - IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. geri kalanların rolü henüz tam olarak açıklığa kavuşturulmamıştır ve bilimsel araştırma aşamasındadır.

Not:en önemlisi pratik tıp A, M ve G sınıfı immünoglobulinler önemlidir. Tanımın bilgi içeriği, bunların ortaya çıkışı, maksimumu ve kaybolması gibi farklı zaman aralıklarına dayanmaktadır.

Bu konuyu daha ayrıntılı olarak ele alalım.

Ana görev immünoglobulin A (IgA) mukoza zarının koruyucu işlevlerinden oluşur solunum sistemi, gastrointestinal sistem ve idrar sistemi. Hastalığın akut başlangıcında bunları tespit etmek imkansızdır. Bu koruyucu kompleksler hastalığın başlangıcının yalnızca 2. haftasından itibaren, bazen daha sonra ortaya çıkar. İmmünoglobulin A'nın büyük kısmı mukoza dokularında yoğunlaşmıştır. Yaklaşık %80 civarında. Kalan antikorlar kanda dolaşır. Ana işlevi mikroorganizmaların nötralizasyonu ve yok edilmesidir. Yatıştıktan sonra akut belirtiler Hastalığın başlangıcından itibaren 8 haftaya kadar bu immünglobulinlerin miktarı azalmaya başlar ve tamamen yok olur. IgA'nın daha sonraki bir tarihte tespit edilmesi kronik bir sürece işaret eder.

Akut fazın ana ve ilk belirteçleri patoloji geliştirmeköyle immünoglobulinler sınıf M (IgM). Hastalığın başlangıcından itibaren 5. günde tespit edilirler. Kandaki varlığı yaklaşık 6 hafta içinde belirlenebilir. Daha sonra hızla kaybolmaya başlarlar.

Artık bağışıklık tepkisi kandaki varlığıyla karakterize edilir. immünoglobulinler sınıf G (IgG). Bu faktörlerin kanda ortaya çıkması hastalığın başlangıcından yaklaşık bir ay sonra tespit edilir. Gelecekte, aylarca, yıllarca ve hatta bir ömür boyu belirlenebilirler; koruyucu fonksiyon hastalığın geri dönüşünden (nüksetmesinden) ve bazı durumlarda patolojinin ikincil gelişimini imkansız hale getirmekten. İmmünoglobulin G miktarı tekrar artmaya başlarsa şüphelenilebilir yeniden enfeksiyon. Benzer bir sonuç, 2 hafta arayla alınan iki veya üç numunenin incelenmesiyle de çıkarılabilir.

İmmünoglobulin D (IgD) B-lenfositlerde bulunur ve düşük konsantrasyonlarda bulunur. sağlıklı insanlar. 10 yıllık ömrün ardından maksimum değerlerine ulaşır. Hastalarda hamilelik sırasında immünoglobulin D miktarı artar. sistemik hastalıklar bağ dokusu, bağışıklık yetersizliğinden kaynaklanan hastalıklar.

Enzim immünoassay kan testlerinin kullanımı için endikasyonlar

Vücuttaki varlığa karşı antikorların belirlenmesi patojen mikroplar, neden olan:

• trichomoniasis;
• ureaplasmosis ve

İmmünoglobulin miktarında ve ile birlikte bir artış var.

Teşhis aşağıdakileri tespit etmek için gerçekleştirilir:

• herpetik hastalıklar;
• gruplar viral hepatit;
• Epstein Barr Virüsü;
• sitomegoalovirüs.

ELISA'yı kullanarak 600 tip alerjene karşı antikorların varlığını belirleyebilir, immün yetmezlik durumunu tespit edebilir, Kapsamlı sınav Nakil operasyonlarından önce tedavinin etkinliğini belirlemek için kapsamlı bir analiz yapın.

ELISA: ek yöntem kanser hücrelerinin tespiti.

Kan ELISA'sı nasıl yapılır?

Enzim immünolojik testi için çoğu durumda hasta kanı kullanılır, bazen doku toplanır camsı, omurilik kanalı sıvısı, amniyotik sıvı.

Kan, bir enjeksiyon iğnesi yoluyla kübital damardan bir şırıngaya çekilir. Çalışma aç karnına gerçekleştirilir. Bir miktar almanın unutulmaması gerekir. tıbbi malzemeler analiz sonucunu etkileyebilir. Kan bağışlamadan önce sigara ve alkolden uzak durmalısınız. İlaç kullanımı sonuçları bozabilir.

İmmünoglobulinler IgM, IgG, IgA'nın negatif değerleri durumunda, hastalığın yokluğundan veya başlangıç ​​​​fazından bahsedebiliriz; Tam iyileşmeönemli bir süre geçtikten sonra.

IgA ve IgM tespit edilmezse ve IgG pozitifse, büyük olasılıkla bulaşıcı bir hastalıktan sonra veya aşılamadan sonra oluşan bağışıklıktan bahsediyoruz.

Ne zaman yüksek titre IgM, IgG, IgA değerlerinin negatif olması durumunda akut bulaşıcı bir hastalığın var olduğu sonucuna varabiliriz.

İmmünoglobulin sonuçlarının eşzamanlı pozitif değerleri - IgA, IgM, IgG, mevcut bir kronik hastalığın nüksetmesinin akut fazının karakteristiğidir.

İçin kronik enfeksiyon Sürecin azalma aşamasında olan (remisyon) ELISA, immünoglobulin M'nin (IgM) negatif değerlerini gösterirken, immünoglobulin G (IgG) ve A'nın (IgA) sonucu pozitif olacaktır.

Enzim immünoassay kan testi yönteminin avantajları

ELISA yönteminin başlıca avantajları şunlardır:

• düşük analiz maliyeti;
• tanısal özgüllük, doğruluk;
• dinamik kontrol (tedavinin etkinliğini ve hastalığın aşamalarını belirlemek için analizin tekrarlanması);
• enfeksiyon alanlarında toplu muayene yapma imkanı;
• sonuç alma hızı;
• analizin göreceli basitliği;
• kullanım imkanı Bilişim Teknolojileri işlemde;
• Hasta için güvenlik ve ağrısızlık.

Kan ELISA'nın herhangi bir dezavantajı var mı?

Çalışmanın ana olumsuz yönü, yanlış negatif ve yanlış pozitif veriler elde etme olasılığıdır. Yanlış anlaşılmaların nedeni teknik eksiklikler veya resmi bozabilecek ilaç kullanımı olabilir.

ELISA şunları tespit etmek için kullanılır:

• (ascaris, kıl kurdu);
• akut ve kronik form opisthorchiasis;
• trişinoz;
• Giardia'nın varlığı (ek bir analiz olarak);
• leishmaniasis formları;
• amebiasis;
• Toksoplazma içeriği;

Sonuç olarak, modern immünolojinin sürekli olarak gelişme aşamasında olduğunu ve hastalıkların teşhisi ve tedavisi için yeni yöntemler aradığını belirtmek gerekir.

Stepanenko Vladimir, cerrah

ELISA çalışması nasıl yapılır?

Reaksiyon mekanizması

Enzim immünoanalizi aşağıdakilere dayanmaktadır: bağışıklık reaksiyonu antijenin bir antikorla birlikte kullanılması ve antikorlara bir enzim etiketinin eklenmesi, enzimatik aktivitenin ortaya çıkması veya seviyesindeki bir değişiklik yoluyla antijen-antikor reaksiyonunun sonucunun dikkate alınmasını mümkün kılar. Basitleştirilmiş bir biçimde, reaksiyon mekanizması şu şekilde gösterilebilir:

	İlk reaksiyon, tespit edilen Ig (Ab) ile immünolojik tabletin gözeneklerinin yüzeyine sabitlenen saflaştırılmış patojen antijeni (Ag) arasında meydana gelir.
	Oluşan immün kompleksleri tanımlamak için, bağlı spesifik Ig'nin bir antijen gibi davrandığı ve peroksidaz (K) enzimi ile etiketlenmiş karşılık gelen insan Ig'sine bir Ig'yi (Ab) temsil eden bir konjugatın bulunduğu ikinci bir immünolojik reaksiyon gerçekleştirilir. , ona karşı antikor olarak kullanılır.
	Daha sonra, konjugat molekülünün enzimatik kısmı tarafından katalize edilen bir enzimatik reaksiyon meydana gelir. Bu reaksiyonun substratı, reaksiyon sırasında renkli bir madde oluşturan renksiz bir maddedir. Kuyucuktaki rengin yoğunluğu belirli bir şekilde numunede bulunan immünoglobulin miktarına bağlıdır.

Sonuçların hesaplanması

Enzim immünolojik testinin yapılması

Serodiyagnoz için, antijenin önceden adsorbe edildiği hücrelerin duvarlarında 96 oyuklu polistiren plakalar kullanılır. Test serumu tabletin hücresine eklenir. Bu durumda antijene homolog antikorlar bağlanır. Bağlanmayan antikorlar yıkamayla uzaklaştırılır. Daha sonra hücrelere bir enzimle etiketlenmiş insan immünoglobulinlerine (antikorlar) karşı antikorlar eklenir. Test serumunda tespit edilebilir antikorlar mevcutsa, bu aşamada bunlar, etiketli antikorların reaksiyona gireceği antijenler olarak hareket edeceklerdir. Yıkamadan sonra kromojenik bir maddenin (boyanın) eklenmesi, hücrelerde gelişen rengin reaksiyonunu dikkate almamızı sağlayacaktır. Rengin yoğunluğu enzim miktarıyla ve dolayısıyla antikor miktarıyla orantılıdır. Bir hücredeki sıvının optik yoğunluğunu (OD) ölçerken ve bunu bir kontrol örneğiyle karşılaştırırken, antikor konsantrasyonu birim cinsinden hesaplanır. En sık kullanılanı, sonuçları optik yoğunluk birimleri cinsinden hesaplamaktır. Her test sisteminin, sonuçları yorumlarken yönlendirilmesi gereken normallik ve patoloji göstergelerini kaydetmek için kendi göstergeleri olduğu dikkate alınmalıdır. sonuçlar.

ELISA ile hangi enfeksiyonlar tespit edilebilir?

Esas olarak modern zührevi hastalıklarda, sifilizin (diğer reaksiyonlarla birlikte), HIV enfeksiyonunun, viral hepatitin teşhisinde kullanılır. sınırlı değer klamidya enfeksiyonu, sitomegalovirüs enfeksiyonu ve diğer herpes enfeksiyonlarının teşhisi için ELISA yöntemi ayrıca çeşitli bulaşıcı hastalıklara yönelik antikorları, hormon seviyelerini, otoantikorları ve çeşitli belirteçleri belirlemek için kullanılır. onkolojik hastalıklar.

ELISA sonuçları nasıl yorumlanır?

Antikorların varlığının ve seviyesinin incelenmesi çeşitli sınıflar bazı durumlarda aşamaların belirlenmesine yardımcı olur bulaşıcı süreç

Hastalık aşaması	IgM	IgA	IgG
Birincil aşama (enfeksiyondan 2 hafta sonra)
Birincil aşama (Enfeksiyondan 2,5 - 3 hafta sonra)
Birincil aşama (enfeksiyondan 3-4 hafta sonra)
Kronik fazın alevlenmesi (alevlenmenin başlangıcından itibaren 2 hafta)
Kronik faz
Geçmiş (tedavi edilmiş enfeksiyon)
İyileşmek		sonra titrede 2-4 kat azalma başarılı tedavi	Başarılı tedaviden 1-1,5 ay sonra titrede 4-8 kat azalma
Negatif sonuç

Ne yazık ki bu önemli avantaj ELISA, nasıl kantitatif antikorlar pratik çalışmalarda çok önemli değildir - yani. Doğru tanıya izin vermez ve reçetenin dozajını ve zamanlamasını etkilemez ilaçlar.

Frengi tanısında ELISA yönteminin rolü nedir?

Frengi tanısında ELISA yöntemi ilk kez 1975 yılında kullanıldı. Şu anda Rusya'da frenginin serolojik tanısı için yaygın olarak kullanılmaktadır ve genellikle frengiyi tanımlayan bir çalışma yürütülmektedir. Treponema pallidum antijenlerine (IgM ve IgG) karşı toplam antikorlar , ancak bazı durumlarda M sınıfının yalnızca “erken” antikorlarını belirlemek mümkün olsa da, sifiliz için ELISA, enfeksiyon anından itibaren 3 hafta sonra pozitif hale gelir ve oldukça uzun süre pozitif kalır. zaman uzun zaman tedaviden sonra bile (bazen yaşam boyunca). Bu nedenle ELISA, frenginin tedavisini doğrulamak için bir test olarak kullanılmaz. Çoğu durumda, ELISA'nın yalnızca niteliksel bir tespiti yapılır - yani. niceliksel belirleme de mümkün olmasına rağmen yalnızca olumlu veya olumsuz bir sonuç.

(ELISA), özel hücrelerin (antikorların) araştırılmasına dayanan, laboratuvarda kan test etme yöntemidir. çeşitli hastalıklar. Yöntem sadece patojeni tanımlamaya değil, aynı zamanda hangi aşamada olduğunu da belirlemeye olanak tanır. patolojik süreç. İkincisi prognoz için çok önemlidir ve ileri tedavi hasta.

Yöntemin avantajları ve dezavantajları

Hepsinin arasından modern yöntemler tanısal ELISA en yenilikçi ve teknik açıdan doğrudur. Başlıca avantajları şunlardır:

1. Hastanın kanında bulaşıcı hastalıklara karşı mevcut tüm antikorları arama yeteneği.
2. Araştırma yönteminin yüksek erişilebilirliği. Günümüzde ELISA testleri orta ölçekli herhangi bir laboratuvar tarafından yapılabilmektedir.
3. Yöntemin neredeyse %100 özgüllüğü ve duyarlılığı.
4. Miktarların karşılaştırılması sayesinde antikorları ve antijenleri arama, patolojik sürecin aşamasını oluşturma ve dinamiklerini takip etme yeteneği.

Diğer testlere göre bu çok sayıda avantaj, testin tek dezavantajını tamamen gölgede bırakıyor: Antikorları tespit edebiliyor, ancak patojenin kendisini tespit edemiyor.

Analizi değerlendirmek için anahtar terimler

ELISA analizinin ne olduğunu, ne olduğunu ve nasıl yapıldığını anlamak için uzmanların kullandığı temel terimleri tanımanız gerekir.

1. Antikor- insan bağışıklık sistemi hücreleri (B tipi lenfositler) tarafından üretilen bir protein. Cevap veriyorlar spesifik reaksiyon yabancı bir maddenin veya maddenin vücuda girmesi. Antikorların bir diğer adı immünoglobulinlerdir, bunlar farklı sınıflar: A, E, M, G. Kütle, reaksiyon hızı, yarı ömür ve bir dizi başka özellik bakımından birbirlerinden farklılık gösterirler. Normalde insan kanı esas olarak G sınıfı immünoglobulinleri içerir. Herhangi bir enfeksiyon meydana geldiğinde, alerjik reaksiyonlarda immünoglobulin E'nin miktarı keskin bir şekilde artar.
2. Antijen- yabancı bir ajan organik kökenli ve yüksek moleküler ağırlığa sahiptir. Çoğu zaman patojenleri veya bunların biyolojik olarak aktif maddelerini temsil eder.
3. Antijen-antikor kompleksi veya bağışıklık kompleksi, yabancı bir madde ile immünoglobulinin doğrudan birleşimidir ve bu, bir bağışıklık reaksiyonunun gelişmesine yol açar.

Yöntemin özü ve kapsamı

Hastaların sıklıkla aklına şu soru geliyor: ELISA analizi nedir, nasıl yapılır ve ne için yapılır? Aşamalarını kısaca anlatarak yöntemden anlaşılır bir şekilde bahsedebilirsiniz.

Hazırlık aşaması. Laboratuvar doktoru 96 gözlü özel bir plaka kullanır. Belirli bir patojenin antijeni her kuyucuğun yüzeyine uygulanır.

1. Aşama. Kan alınır ve kuyuya damla damla uygulanır. Kuyu, kandaki antijen ile antikor arasında bir reaksiyon başlatır.

2. aşama. Bağışıklık komplekslerinin oluşumuyla ilgili reaksiyon delikte tüm hızıyla devam ediyor. Sonuç olarak belli renkte bir madde oluşur. Rengin yoğunluğu, hastanın kanındaki her spesifik patojene karşı antikor miktarına bağlıdır.

Sahne 3. Sonucun fotometri ile değerlendirilmesi. Bu amaçla spektrofotometre adı verilen özel bir cihaz kullanılır. Delikteki malzemenin yoğunluğunu kontrol numunesi ile karşılaştırmak için kullanılır. Daha sonra cihaz tarafından matematiksel analiz sonucu üretir.

Sonuçların değerlendirilmesi ve ELISA'nın amacı

Sonucun yorumlanması birkaç önemli nüansa bağlıdır:

1. Kuyunun optik yoğunluğu.
2. Kuyulu plaka üreticisi (test sistemleri).
3. Çalışmanın gerçekleştirildiği laboratuvar.

Bu nüanslar göz önüne alındığında, farklı test sistemlerinden veya farklı laboratuvarlardan alınan iki sonucu asla karşılaştırmamalısınız.

ELISA analizini etkileyen bir diğer önemli nokta ise antikor aviditesidir. Bu parametre, antijen miktarını ve antijen-antikor kompleksindeki bağın gücünü karakterize eder. Tanımı, protein yapılarını çözmek için bağışıklık kompleksinin üre ile işlenmesine dayanmaktadır. Bu, antijen ile antikor arasındaki zayıf bağları yok etmenize ve yalnızca güçlü bağları bırakmanıza olanak tanır. Avidite çalışmasının önemi enfeksiyonun süresini belirlemede kullanılabilmesidir. Bu bilgi hamile kadınlarda tanı koymak için son derece önemlidir.

ELISA yöntemini kullanan bir kan testi şunları sağlar:

1. Çeşitli patojen antijenlerini aramak.
2. Hormonal seviyeleri incelemek.
3. Otoimmün patolojinin varlığının incelenmesi için.
4. Kanser belirteçlerini tespit etmek için.

ELISA Çeşitleri

ELISA analizi aşağıdaki türlere sahiptir:

1. Dolaylı.
2. Dümdüz.
3. Rekabetçi.
4. Engelleme yöntemi.

Ancak gerçekte günümüzde yalnızca ELISA (enzim bağlantılı immünosorbent tahlili) adı verilen bir yöntem kullanılmaktadır. Kuyu yüzeyinde renk değişikliği ile bir antijen-antikor kompleksi oluşumunun yukarıda açıklanan reaksiyonuna dayanmaktadır.

Kantitatif ELISA kan testinin kendisi özel ilgiyi hak ediyor. Bu bir analiz türü değil, sonuçları değerlendirmenin bir yoludur. Bu sayede antikor sayısı hesaplanır ve sınıfları belirlenir. Sonuç, numunenin optik yoğunluğuna, ELISA analizinin gerçekleştirildiği test sistemine ve laboratuvara bağlıdır.

ELISA ile tespit edilen hastalıklar

ELISA, tanımlamanızı sağlayan bir kan testidir. büyük miktarçeşitli bulaşıcı hastalıklar. Üstelik hem viral hem de viral enfeksiyonlar eşit doğrulukla tespit edilir. bakteriyel hastalıklar. Örneğin, bağışıklık komplekslerinin oluşumunu kullanarak, aşağıdaki hastalıkların patojenlerinin antijenlerinin varlığı kanıtlanabilir:

Ayrıca ELISA şunları tespit etmenizi sağlar:

1. Kanser belirteçleri - TNF (tümör nekroz faktörü), PSA (prostata özgü antijen), CEA (karsinoembriyonik antijen), CA-125 (yumurtalık tümörü belirteci)
2. Hamilelik hormonu hCG'dir (insan koryonik gonadotropini).
3. İhlaller üreme sistemi: Kadın ve erkek üreme sistemlerinin hormonları.
4. Tiroid bezinin patolojisi.

Bugün HIV için ELISA testinin bu tehlikeli hastalığı teşhis etmenin ana yolu olduğunu belirtmek önemlidir.

ELISA için materyal ve örnekleme tekniği

ELISA gerçekleştirmek için hastadan aç karnına kan alınır. Daha sonra doğrudan analiz için kullanılan kandan serum elde edilir. Ayrıca ELISA da yapılabilir. Beyin omurilik sıvısı(beyin omurilik sıvısı), servikal kanalın mukusu (serviks), amniyotik sıvı ve hatta vitreus sıvısı (göz küresi).

Kan bağışlamadan önce hastaya herhangi bir ilaç almaması gerektiği konusunda hasta uyarılır. ilaçlar ve antibiyotik tedavisi ve antiviral ilaçlar Kan alımının en az iki hafta önce bitirilmesi tavsiye edilir.

Sonuçların alınması ve kodunun çözülmesi için son tarihler

Laboratuvardan yanıt alma süresi, çalışmanın hızına değil, hastalığın hangi aşamada olduğuna ve kanda hangi antikorların ortaya çıktığına bağlıdır. Örneğin: immünoglobulinler M, analiz için kan alındıktan yaklaşık 2 hafta sonra ortaya çıkar ve sürecin birincil enfeksiyon aşamasında olduğu veya kronik enfeksiyonun alevlendiği anlamına gelir. Aynı zamanda birincil enfeksiyon sırasında M ve G sınıfı antikorlar ortaya çıkar. Üstelik ikincisi 4 hafta sonra tespit edilebilir.

IgA 2-3 hafta sonra tek başına veya M ile birlikte ortaya çıkar, yani Akut enfeksiyon veya G ile birlikte kronik bir süreci belirtir.

Çok farklı terimler Antikorların kanda görülmesi hastayı sonuç için uzun süre beklemeye zorlayacaktır. ELISA testi yapıldıktan sonra bir aydan fazla beklenmesi kabul edilebilir. Bir doktor tarafından deşifre edilmesi ve yorumlanması da belli bir süre alır.

Mevcut teşhis yöntemlerinin listesi son yıllarda hızla genişliyor; teşhis uzmanları, önceki tüm analizlerin avantajlarını yeni yöntemlerle birleştirmeye ve önceki tüm dezavantajları ortadan kaldırmaya çalışıyor.

İÇİNDE Son zamanlarda giderek listede teşhis prosedürleri bir enzim bağışıklık tahlili içerir - modern ve oldukça yeni bir test olup, tıpla ilgisi olmayan ortalama bir kişi tarafından hakkında çok az şey bilinmektedir. Bununla birlikte, bu teknik, kalifiye tıbbi personel arasında hızla taraftarları arasında yer alıyor. Özelliklerini ve temel özelliklerini öğrenerek ne olduğunu ve hangi durumlarda kullanılması gerektiğini anlamaya çalışabilirsiniz.

Enzim immünolojik tahlili, moleküler "antijen-antikor" reaksiyonuna dayanan, belirli proteinlerin tespit edilmesini mümkün kılan enstrümantal bir laboratuvar tekniğidir. biyolojik malzemeler(araştırma için örnekler). Bu tür proteinler enzimler, çeşitli mikroorganizmalar (virüsler, bakteriler, mantarlar), protozoa vb. olabilir.

Yöntemin keşfedilmesinden sonra, bulan kişinin adıyla alakası olmayan, İngilizce'deki tam adının kısaltması olan - enzim bağlı immünosorbent tahlili olan ELISA testi adı verilmiştir. Dünyanın her yerindeki doktorlar bu ismi kullanıyor; Rusça konuşulan ülkelerdeki bazı doktorlar da bu tür araştırmalara bu şekilde hitap ediyor.

Yöntemin temel prensibi moleküler “antijen-antikor” reaksiyonudur.

Antijen, vücuda giren herhangi bir yabancı moleküldür. insan vücudu hastalığa neden olan mikrobun bir parçası olarak. Antijenler genellikle protein molekülleridir. Mikroorganizmaların yanı sıra böyle bir "yabancı", grup veya Rh faktörüne uymayan yabancı kan hücreleri de olabilir.

Böyle bir antijenin vücuda girmesine yanıt olarak, herhangi bir yabancı moleküle karşı korumayı amaçlayan bir bağışıklık reaksiyonu başlatılır. Bu, özel ajanların sentezi nedeniyle oluşur bağışıklık sistemi- antikorlar (immünoglobulinler). Her antikor yalnızca belirli bir antijen için uygundur ve patojenik "yabancıyı" ona tek bir kompleks halinde bağlayarak nötralize eder. Bu tür bir bağlanma sürecine “antijen-antikor” reaksiyonu adı verilir.

Antikor türleri

Tüm antikorlar (immünoglobulinler), bağışıklık tepkisinin hangi aşamasında göründüklerine bağlı olarak 5 türe ayrılır:

ELISA teşhisi için immünoglobulinler IgG, IgM ve IgA seviyeleri çoğunlukla önemlidir. Titrelerinden, bir kişinin daha önce hastalığa yakalanıp yakalanmadığını veya yakın zamanda enfekte olup olmadığını, bağışıklık geliştirip geliştirmediğini veya vücudunun patolojiye karşı savunmasız olup olmadığını öğrenebilirsiniz.

Enzim immünolojik testinin avantajları ve dezavantajları

Açık şu an ELISA en doğru ve hassas yöntemlerden biridir. Tıbbın çeşitli alanlarındaki uzmanlar tarafından benimsenmiş ve uygulama kapsamını genişletmeye devam etmektedir.

Yöntemin avantajları

• Elde edilen verilerin yüksek doğruluğu.
• Hassasiyet (numunedeki patojenin minimum varlığıyla bile gerekli maddeyi tespit etmenizi sağlar).
• Hastalığın ilk günlerinde veya kuluçka döneminde tanı konulması mümkündür.
• Benzer doğruluktaki diğer yöntemlere kıyasla veri toplama hızı.
• Sürecin yüksek otomasyonu ve minimum insan katılımı, bu da sanatçının hatasını azaltır.
• Patolojik sürecin aşaması ve seçilen tedavinin etkinliği hakkında veri elde etmek.
• Materyal toplarken ağrısız ve minimal invaziv.

Yöntemin dezavantajları

• Çoğu durumda, patojenin kendisine değil, vücudun patojenik ajana tepkisini belirlemenize olanak tanır.
• Test son derece spesifik olduğundan, testten önce şüphelenilen hastalığın tam olarak bilinmesi gerekir.
• Teknik sorunlardan, ilaç kullanımından veya birkaç ilacın aynı anda bulunmasından kaynaklanan yanlış okuma olasılığı kronik hastalıklar veya ihlaller metabolik süreçler hastanın vücudunda.
• Elde edilen verileri yorumlamak için bilgi sahibi olmak gerektiğinden, sonuçların yorumlanması yalnızca yüksek nitelikli bir uzman tarafından yapılmalıdır. özel Eğitim ve belirli bir alanda geniş bir tıbbi bilgi stoğu.
• ELISA oldukça nadir bir testtir, bu nedenle tüm teşhis laboratuvarlarında yapılmaz.
• Yöntem oldukça pahalıdır, çünkü laboratuvarın reaktiflere ek olarak çok sayıda pahalı ekipmana ve özel enstitülerde üretilen antijen örneklerine sahip olması gerekir.

Enzim immunoassay hangi durumlarda kullanılır?

Enzim immünolojik testinin endikasyonlarının tam listesi çok geniştir; neredeyse tüm tıp dallarını içerir.

Çoğu zaman ELISA aşağıdaki amaçlar için kullanılır:

• bulaşıcı hastalıkların tespiti;
• cinsel yolla bulaşan hastalıkların tanısı;
• tanım bağışıklık durumu veya bazı otoimmün hastalıklar;
• tümör belirteçlerinin tanımlanması;
• hormonların belirlenmesi.

Bulaşıcı olması durumunda ve viral hastalıklar Teknik, aşağıdaki patolojileri tanımlamamızı sağlar:

Ek olarak ELISA, enfarktüs durumunu hızlı ve etkili bir şekilde belirlemenize, vücudun üreme potansiyelini değerlendirmenize, alerjileri, kaynaklarını vb. tanımlamanıza olanak tanır.

Enzim immünoassay tekniği gerçekleştirmek için kullanılır klinik denemeler yeni ilaçların geliştirilmesi sırasında ve bunların insan vücudu üzerindeki etkilerinin değerlendirilmesinde.

Örnek türleri ve araştırma için seçilme yöntemleri

Çoğu zaman, enzim immünolojik testi için test materyali hastanın antekubital veninden alınan kandır. Numune toplama işlemi çoğunlukla sabahları aç karnına yapılır. Örneklemenin ardından araştırmaya müdahale eden oluşan hücreler ayrılır ve kandan uzaklaştırılır, geriye sadece serum kalır.

Genitoüriner enfeksiyonları teşhis ederken, materyal genellikle genital organların mukoza dokularından, üretra veya rahim ağzından gelen mukuslardan, rektumdan alınan numunelerden, kasık bölgesindeki erozyon veya ülserlerden ve vücudun diğer kısımlarından alınan kazıntılardan oluşan lekeler haline gelir. Swaplar da alınabilir ağız boşluğu ve nazofarenksten.

Bazen hamilelik sırasında obstetrik ve jinekolojik uygulamalarda amniyotik sıvının durumunu belirlemek için enzim immünoassay kullanılır. Bu durumda amniyotik sıvı örnek haline gelir. Bunun için amniyotik kesenin uzun bir iğne ile delinmesiyle az miktarda sıvı alınır. Olası riskleri en aza indirmek için tüm manipülasyonlar steril aletlerle gerçekleştirilir.

Çoğunlukla materyal beyin omurilik veya seröz sıvı haline gelir. Bu ne zaman olur lokal anestezi enjeksiyon yoluyla uygulanan bir ilaçtır.

Çalışmayı gönderen uzman, enzim immünolojik testi için ne tür materyallerin gerekli olduğunu açıklamalıdır. Çoğu zaman birden fazla türden veya farklı yerlerden numuneler aynı anda alınır. Bu tür bir muayene için sevki yapan doktorun, hastaya biyomateryal bağışına yönelik hazırlıklar hakkında da bilgi vermesi gerekir.

Enzim immünolojik tahlili için hazırlık

Enzim immünolojik testi sonrasında elde edilen verilerin doğruluğunu arttırmak için materyal seçimine yönelik hazırlık şu şekilde olmalıdır:

• Çalışmadan 10 gün önce antibiyotikleri, antiviral ve antimikotik ilaçları hariç tutun;
• bir gün boyunca alkolü, sigarayı ve uyuşturucu madde almayı dışlamak gerekir;
• aynı dönemde aşırı fiziksel efordan kaçınmak gerekir;
• Reçeteyi yazan kişiyi hastanın aldığı tüm ilaçlar konusunda uyarın;
• Hamileyseniz veya hamile olduğunuzdan şüpheleniyorsanız doktorunuza bildirin.

Test materyallerinin sabahları aç karnına toplanması en iyisidir.

Teşhis hormonal seviyelerin durumunu belirlemeyi amaçlıyorsa, o zaman aşağıdakilerin sağlanması önemlidir: sakin durum bir gün önce ve kaçının Sinir gerginliği. Kadınlarda hormon amaçlı kan bağışı adet dönemine göre açıkça belirlenmektedir. aylık döngü randevu sırasında doktor tarafından görüşülecektir.

Örneklemeden 2-3 gün önce, kızarmış ve yağlı yiyecekleri menüden çıkarmanız gerekir ve hepatit testinden önce narenciye veya diğer turuncu veya sarı meyve ve sebzeleri yemeyin.

Enzim immünolojik tahlil sonuçlarının yorumlanması

Nitel bir çalışmanın sonucu genellikle “+” (algılandı) veya “-” (bulunamadı) işaretleriyle gösterilir.

Belirli immünoglobulin gruplarının varlığına veya yokluğuna dayanarak aşağıdaki sonuçlar çıkarılabilir:

• JgM (-), JgG (-), JgA (-) - hastalığa karşı bağışıklık tamamen yoktur (vücut daha önce bu tür antijenle karşılaşmamıştır);
• JgM (-), JgG (+), JgA (-) - bu antijenle veya aşıyla daha önce bir çarpışma olmuş;
• JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) - akut patolojik süreç (büyük olasılıkla birincil);
• JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) - kronik süreç;
• JgM (+), JgG (+), JgA (+) - nüksetme;
• JgM (-) - iyileşme aşaması.

Kantitatif değerler büyük bir bilgi yükü taşır, ancak önceki endikasyonlara, hastanın yaşına ve her bir spesifik hastalığın normlarına dayanarak bunları yalnızca ilgili doktor yorumlayabilir. Bu nedenle sonuçları kendiniz değerlendiremezsiniz.

Sonuçları ne kadar beklemeniz gerekiyor?

Bu tekniğin, eldeki verilerin elde edilme süresinin belirlenmesine bağlı olarak birçok çeşidi vardır. Ortalama süre ELISA teşhisi 4-6 saat sürer ve bu da sonuçların hemen ertesi gün verilmesini sağlar.

En uzun yöntemler, örneğin HIV enfeksiyonu durumunda 10 güne kadar sürer.

Şu tarihte: acil ihtiyaç Cevabın 1-2 saat içinde alındığı ekspres yöntemleri kullanmak mümkündür.

ELISA testini nereden alabilirim?

Bu tür teşhislere yönelik ekipmanlar oldukça pahalı olduğundan, tüm laboratuvarlar bunu satın alamaz. Ayrıca spesifik antijenler içeren testlerin raf ömrü sınırlıdır (genellikle yaklaşık 1 yıl) ve bu nedenle sürekli güncellenmeleri gerekir.

Bu nedenlerden dolayı hükümet tıbbi kurumlar ELISA laboratuvarları her zaman mevcut değildir. Çoğu zaman büyük özel tıbbi veya büyük teşhis merkezlerine başvurmak gerekir.

ELISA testinin yapılabilmesi için laboratuvarın özel bir lisansa sahip olması, personelin ve laboratuvar asistanlarının özel eğitimden geçmesi gerekmektedir.

Çoğu zaman spesifik teşhis merkezi veya hastayı muayeneye yönlendiren doktorun önerdiği laboratuvar.

Enzim immünolojik testinin maliyeti

Fiyatı bu çalışmaülkenin bulunduğu bölgeye ve hizmeti veren kliniğin düzeyine bağlıdır. Moskova'da Minimum fiyat bir antijenin belirlenmesi için 700 ruble'den başlar. Birden fazla immünoglobulinin aynı anda tanımlanması gerekiyorsa, fiyat eklenecektir.

Ne zaman acil analiz maliyet 150-200 ruble artar. her bir antijen için.

Oldukça yüksek maliyete rağmen, enzim immünoassay, hastanın muayenesinin olabildiğince bilgilendirici ve hızlı yapılmasını mümkün kılar, bu da tedaviye başlamadan önceki süreyi azaltır ve kişinin durumunun daha hızlı stabilizasyonuna olanak tanır.

Bu video “Enzim immünolojik testinin temelleri” filmini sunmaktadır.