Определение группы крови по стандартным сывороткам. Определение группы крови стандартными сыворотками — подробная информация

• 1-я группа: отсутствуют агглютиногены, в сыворотке – агглютинины есть;
• 2-я группа: есть А и бета;
• 3-я группа: есть В и альфа;
• 4-я группа: есть А, В, агглютининов нет.

Техника определения

Техника определения группы крови по системе АВ0 основана на визуальном наблюдении агглютинации .

Проводить исследование нужно при:

Задайте свой вопрос врачу клинической лабораторной диагностики

Анна Поняева. Закончила нижегородскую медицинскую академию (2007-2014) и Ординатуру по клинико-лабораторной диагностике (2014-2016).

«Люди голубой крови», «королевская кровь», «кровный брат» - существует много выражений, которые затрагивают одну из важнейших систем в организме человека. Она отвечает за тканевое питание, дыхание, обмен веществ, всасывание и усваивание питательных веществ. Роль кровеносной системы сложно переоценить. Здесь нет мелочей. Так, групповая принадлежность и резус-фактор играют большую роль в жизни человека. Особенно это важно для женщины. Определение группы, биохимический и другие анализы предваряют любое вмешательство в организм пациента. Лечение практически каждого заболевания начинается с взятия биологического материала для исследования.

В Японии считают, что характер человека полностью зависит от того, какая у него групповая принадлежность крови. У обладателей первой группы преобладают такие качества, как самоуверенность и решительность. Люди со второй группой крови надежны, но замкнуты в себе. Те, кто обладают третьей, чаще всего честолюбивы и умны. У требовательных, уравновешенных людей течет в жилах кровь четвертой группы. По этому принципу многие создают семьи, заводят друзей, работодатели подыскивают себе сотрудников.

На Австралийском континенте живет удивительный человек Джеймс Харрисон. За свои 74 года он успел сдать кровь около 1000 раз! Медики утверждают, что как минимум 2 млн новорожденных детишек сумел спасти этот необычный донор. Он обладает не только самой редкой группой, но и может похвастаться наличием особых антител, которые помогают младенцам с тяжелой анемией успешно бороться с недугом.

Система АВО

В мире существует 4 группы крови, имеющих свои особенности. Первая группа не содержит белков антигенов А и В, поэтому она является универсальной в качестве донорской. Но человеку, имеющую такую группу крови, нельзя переливать никакую другую, кроме первой. Вторая группа носит антигены А. Она совместима с первой и второй. Третья группа крови имеет в своем составе антигены В. И к ней идеально подходит первая или третья. Четвертая группа содержит антигены А и В, и она совместима с кровью любой группы. В настоящее время врачи стараются осуществлять переливание реципиенту той же группы, что и его собственная.

Это общепринятая система, в которой работают все медицинские учреждения мира. Определение группы крови и резус-фактора проводят всем новорожденным детям, людям перед любым оперативным вмешательством, переливанием крови и ее компонентов. Особенно за этими показателями у женщин во время беременности наблюдают акушеры-гинекологи.

Методы определения группы крови

Существует несколько способов определения групповой принадлежности крови человека в лабораторных и даже домашних условиях:

1. По стандартным сывороткам.
2. По стандартным эритроцитам.
3. С применением цоликлонов.
4. По группе крови родителей.

Важно отметить, что определение группы крови и резус-фактора последним способом не является достоверным. Этот метод можно назвать «домашним». Он подходит в качестве развлечения подросшим детишкам, для лучшего понимания того, как же происходит наследование подобных признаков ребенком.

Как определить группу крови, используя цоликлоны

Применение цоликлонов - это простой и современный способ определения группы крови человека и ее резус-фактора. Препарат получают из биологического материала мышей и повсеместно используют в системе АВО. Плюсы цоликлонов в том, что они быстрее агглютинируются, то есть сворачиваются, с кровью и реакция становится более выраженной. Чаще всего лаборанты используют реагенты анти-А и анти-В, однако в некоторых случаях работают и с анти-АВ и анти-О. Определение группы крови с помощью цоликлонов требует меньше времени и подготовки.

На специальном планшете делают две надписи соответственно названиям используемых цоликлонов. Под ними наносят небольшую каплю исследуемой крови, рядом - немного реагента. Стеклянной или любой другой чистой палочкой перемешивают обе жидкости, затем в течение двух минут медленно покачивают планшет для лучшего соединения и сворачивания белков. По реакции агглютинации судят о результатах. Полное отсутствие склеивания говорит о том, что исследуемая кровь принадлежит к первой группе. Склеивание с цоликлоном анти-А доказывает, что она относится к второй группе. Если наблюдается реакция с реагентом анти-В, значит, у пациента кровь третьей группы. При агглютинации с обоими цоликлонами ясно, что исследуемый материал содержит антигены А и В. Следовательно, является кровью четвертой группы.

Определение группы крови и резус-фактора с помощью цоликлонов является наиболее удобным и распространенным в настоящее время. Для того чтобы узнать резусную принадлежность, нужно на планшет нанести несколько капель цоликлона анти-D-супер и одну - исследуемой биологической жидкости. Далее нужно их смешать. Наличие реакции свертывания говорит о том, что пациент имеет положительный резус-фактор. Соответственно, отсутствие агглютинации означает то, что резус отрицательный.

Определение группы крови стандартными сыворотками

В этом случае используют стандартные сыворотки четырех известных групп. Каждого реагента берут по две серии, чтобы обеспечить наиболее точный результат. Для облегчения работы сыворотки окрашены каждая в свой цвет: О(I) - бесцветная, А(II) - синяя, В(III) - красная, АВ(IV) - желтая. На специальный планшет наносят сыворотки первых трех групп по две серии каждой. Рядом капают по одной капле исследуемой крови, взятой из пальца. Планшет аккуратно покачивают до полного перемешивания и по реакции агглютинации судят о результатах. Определение группы крови - это всегда скрупулезная манипуляция, которая требует внимательности и сосредоточения.

Стандартные эритроциты для определения группы крови

Определение группы крови стандартными эритроцитами - это еще один высокоточный метод выявления групповой принадлежности. Его проводят с использованием стандартных эритроцитов, полученных из материала донора. Сыворотку центрифугированной крови наносят на планшет в два ряда по три капли в каждом. Возле каждой из них помещают немного эритроцитарной массы в следующем порядке: О(I), А(II), В(III) - по две серии. Так же как и при определении группы другими методами, в этом случае тщательно перемешивают капли крови и реагенты и судят о результатах по свертыванию белка.

Определение групповой принадлежности ребенка по крови родителей

Определение группы крови по родителям - это, пожалуй, единственный «домашний» метод. Согласно закону наследования ребенок берет от отца и матери по одному антигену. В таблице ниже представлены все возможные варианты наследования ребенком группы крови.

Определение группы крови ребенка по таблице может дать представление о наследовании генов и позволит с пользой провести время. Этот способ не является точным. Но он достаточно информативен. Разумеется, определение группы крови по родителям - это не самый лучший метод, для достоверного результата стоит обратиться в клинику.

Забор крови

Для определения групповой принадлежности берут материал из пальца и из вены. Для анализа используют как цельную кровь, так и сыворотку, которую получают в результате центрифугирования пробирки с биологическим материалом. Детям при рождении определение группы крови и резус-фактора проводят, применяя материал, взятый из пяточки.

Анализ берут в амбулатории или стационаре в условиях полной асептики и с использованием средств антисептики. Манипуляцию может делать только человек с медицинским образованием, а проведением реакции должен заниматься лаборант. Анализ проводят несколько раз разные медработники, чтобы исключить влияние человеческого фактора на результат исследования. Существуют приборы, которые способны точно и достоверно определить группу крови и резус-фактор, но даже после использования техники всегда проводится перепроверка, ведь здесь нельзя ошибаться.

Подготовка к сдаче крови на анализ

Группа крови и резус-фактор не меняются в течение всей жизни и не зависят от приема пищи, состояния здоровья, внешних факторов. Поэтому перед сдачей анализа не требуется специфической подготовки. Однако, чтобы снизить риск ухудшения качества исследования, важно сдавать материал натощак, а ужин должен быть легким и обязательно не позже 18.00.

Группа крови на рукаве

В жизни происходят разные ситуации, никто не застрахован от травм или несчастных случаев. Каждому человеку нужно знать свою группу крови, ведь при наступлении чрезвычайных обстоятельств эта информация может спасти жизнь в прямом смысле слова. Не зря в паспорт медработники ставят всем желающим соответствующую печать. Берегите здоровье свое и своих родных людей!

Как происходит определение группы крови по стандартным сывороткам? Наверное, наблюдая за действиями лаборанта и за происходящей на специальной планшетке химической реакцией, подобный вопрос задавали себе многие. Ничего загадочного в этом процессе нет, а механизм установления групповой принадлежности основан на реакции агглютинации, которая происходит при взаимодействии компонентов крови агглютиногенов и элементов сыворотки.

Основные характеристики групп

Определение группы по стандартным сывороткам основано на том, что в крови человека содержатся, в различных комбинациях агглютиногены (А и В) и агглютинины (a и b). При встрече одноименных агглютинина и агглютиногена происходит быстрая агглютинация, а на планшетке этот процесс будет выглядеть как распадание однородного кровяного пятна на множество мелких пятнышек.

• 0 (I) - содержит только агглютинины a и b;
• A (II) - имеется антиген А и агглютинин b;
• В (III) - есть агглютиноген B и антитело а;
• АВ (IV) - в сыворотке нет антител, а на поверхности эритроцита располагается агглютеногенный комплекс АВ.

Тип крови с помощью стандартных сывороточных растворов определяется в течение 5-10 минут и не требует дополнительной подготовки пациента к исследованию. Этим способом можно исследовать как венозную, так и периферическую кровь, получая одинаковый результат.

В экстренных случаях (подготовка к срочной операции или необходимость немедленного восполнения кровопотери) проводят смешивание, капая кровь из прокола на пальце больного прямо на планшетку с налитыми на нее стандартными сыворотками.

Техника проведения анализа

Для исследования применяется плоская планшетка с углублениями в ней. Углубления расположены по 3 в ряд (имеется 2 ряда) и имеется одно внизу.

Над каждой парой углублений для удобства лаборанта написано I, II или III и для нанесения в ячейки соответствующих стандартных сывороток.

1. В первом ряду в соответствующие ячейки наливается несколько капель сывороточного раствора I, II и III вида (в соответствии с наименованием углубления).
2. Во второй ряд дублируются аналогичные растворы, но другой серии изготовления (необходимый контроль для избегания ложной агглютинации из-за некачественной сыворотки).
3. В растворы стеклянной палочкой добавляются по капле венозной или периферической крови.
4. Перемешивание, чтобы избежать случайного повреждения эритроцитов, производится плавным покачиванием планшетки.
5. Далее материал оставляется на 5 минут, после чего проводится оценка полученного результата.

Оценивается вид и структура жидкостей по типу раствора, также проверяется соответствие с аналогичным раствором в рядом расположенной ячейке.

Если, к примеру, в одном углублении с цифрой II произошла агглютинация, а в другом с аналогичным реактивом нет, то определение группы крови с помощью сывороточных составов считается неверным. Его необходимо повторить, используя сыворотки 2 других серий.

Оценка результатов

Тип крови стандартными сывороточными реактивами определяется на основании видимой реакции агглютинации, и результат может быть следующим:

1. I - основные и контрольные капли на лабораторной тарелочке остались без изменений.
2. II - химическая реакция произошла в ячейках I и III.
3. III - наблюдается агглютинация в углублении I и II.
4. IV - имеются изменения во всех емкостях лабораторной тарелочки.

При определении IV типа всегда проводится контроль с сывороткой IV, чтобы предотвратить ложноположительный результат. В контрольном смешивании по истечении 5 минут не должно произойти никаких изменений.

Методом определения типа крови при помощи стандартных сывороточных реактивов пользуются почти во всех лабораториях. Быстрый и доступный способ позволяет в течение нескольких минут определит группу.

Полученные данные учитываются только в том случае, когда агглютинация ярко выражена. Слабая химическая реакция может быть из-за старых реактивов или из-за неправильного проведения анализа. Результат не может считаться достоверным. В сомнительных случаях, помимо исследования стандартными сывороточными составами, могут быть сделаны для уточнения группы тесты с цоликлонами или «эритротест».

С помощью стандартных сывороточных составов определение группы возможно за несколько минут. Метод очень прост и не требует от лаборанта специальных навыков.

Кровь обладает особыми иммуногенетическими свойствами, по которым всех людей можно разделить на определенные группы. Каждый человек обязан знать, к какой группе крови он принадлежит. Это может понадобиться при оказании экстренной медицинской помощи, когда невозможно по какой-либо причине провести достоверное определение группы крови. Исследователями была подтверждена . Определив свою группу крови, человек сможет узнать особенности своего здоровья и вовремя профилактировать болезни.

Групповую систему AB0 открыл миру Ландштейнер еще в 1900 году. Позже изучались другие различия крови человека и животных (например, ).

Принадлежность к группе крови закреплена в генетическом коде, и наследуется с другими индивидуальными признаками. Формирование антигенного происходит во внутриутробном периоде, и он не изменяет свои специфические свойства всю жизнь человека.

Элементы кровяной системы

В жидкой подвижной плазме крови равномерно распределены клеточные элементы: эритроциты, лейкоциты и тромбоциты. Форменные элементы занимают до 35-45% от общего объема крови. Помимо этого в плазме находятся жировые частицы клеток, так называемая «кровяная пыль» (гемоконии). могут содержать в своем составе специфические антигены (агглютиногены A и B). В плазме крови могут обнаруживаться антитела (агглютинины α и β). Комбинации антигенов и антител позволяют классифицировать группы крови по системе AB0.

Иные виды групповых систем крови избирают только присутствие антигенов в эритроцитах. Антитела к ним обычно появляются при вливании реципиенту неподходящей крови, иммунологической и плода.

Согласно системе AB0 всех людей разделяют на такие группы:

• Первая 0 (I) () – в красных кровяных тельцах нет антигенов, а в сыворотке обнаруживаются агглютинины α и β
• Вторая A (II) – содержит в своем составе агглютиноген A
• Третья B (III) () – присутствует агглютиноген B
• Четвертая AB (IV) – вместе фиксируются эритроцитарные агглютиногены A и B.

Система AB0 дает возможность избежать опасных последствий при неправильном переливании крови. Для идеальной совместимости крови нужно, чтобы кровь донора соответствовала такой же группе в системе AB0, что и кровь пациента. Переливание чужеродной группы крови может вызвать иммунологическую несовместимость и приведет к трансфузионным осложнениям. Перед обязательно изучают состав крови и проводят ряд анализов на совместимость.

Лабораторные компоненты

Для определения типа группы крови пациенту не требуется специальной подготовки, необходимо лишь воздержаться от употребления алкоголя и не принимать никаких лекарственных средств накануне анализа.

В лабораторию берут с собой направление от врача. Хорошо заранее приобрести одноразовый набор для взятия крови или шприц – это надежно защитит от возможного инфицирования в процессе отбора проб. или вены. У грудного ребенка кровь обычно берут из пятки.

В основе определения типа крови лежит реакция агглютинации, при этом образуются хлопья склеенных между собой эритроцитов. Набор для лабораторного исследования на группу крови включает стандартные сыворотки и эритроциты в виде раствора, контрольные реактивы, физиологический раствор (натрия хлорид 0,9 %-ный) и специальные белые пластинки из пластика или фарфора, пипетки.

Для достоверного , в лаборатории должна быть температура воздуха в пределах 21-24° C и яркое освещение. Все расходные компоненты обязательно проверяют на соответствие единой серии, срокам использования и условиям хранения. Недопустимо наличие взвеси, осадка, помутнения в растворах эритроцитов и сыворотке.

Определение сыворотками

На белой пластинке отмечают по порядку названия групп крови 0, A, B. Большие капли стандартной сыворотки групп 0(I), A(II), B(III) наносят на пластину напротив ее надписи, а рядом сыворотки другой серии: получается два ряда капель.

Использование разных серий реагентов применяют для исключения ошибки. Каждую каплю стандартной сыворотки аккуратно смешивают с небольшой каплей крови пациента. Все манипуляции выполняют пипеткой или палочкой из стекла. Затем пластину немного покачивают и оценивают результат исследования в каждой капле. Если в течении пяти минут образуются хлопья из агглютинированных эритроцитов, результат принимают за положительный.

Для исключения возможной ошибки, каждую каплю крови на пластине смешивают с каплей физраствора и ожидают еще пять минут. Если хлопья начинают оседать во всех каплях, то проводят контроль реакции, путем смешивания исследуемой крови и стандартного раствора сыворотки группы AB(IV). В последнем случае склеивания эритроцитов не должно регистрироваться.

Определение группы крови на основании полученных результатов:

• Первая группа – ни в одной из капель не произошло склеивание эритроцитов
• – положительная реакция крови с сыворотками групп 0(I) и B(III)
• Третья группа – агглютинация крови со стандартными сыворотками 0(I) и A(II)
• – положительный результат в трех каплях и отрицательный с контрольной сывороткой AB(IV).

Существует перекрестный способ определения типа плазмы, при этом дополнительно используют стандартные эритроциты. Этот способ определения группы крови помогает выявить плазменные групповые антител α и β и открывает более полную характеристику крови. Применяют перекрестный способ перед переливанием крови. Отбор проб венозной крови проводят заранее, ее отстаивают и отделяют плазму от форменных элементов.

Иногда вместо стандартных сывороток, применяют растворы Цоликлон с моноклональными антителами. Получают их при участии технологий генной инженерии.

При , очень важен квалификационный уровень медицинского работника, его аккуратность и внимательность. Ошибочный результат могут спровоцировать неправильный порядок нанесения реактивов, использование загрязненных или мокрых пипеток, непригодных реагентов, пренебрежение контрольным исследованием.

Редкость результатов

При анализе медицинских статистических данных оказывается, что наиболее распространена первая группа крови – до 65% всего населения Земли. За ней следуют вторая с результатом 25% и третья (около 8% населения). Самым редким результатом при определении групп крови остается четвертая группа, особенно с отрицательным резус-фактором.

Результаты определения группы крови регистрируются медицинским сотрудником, проводившим анализ, в амбулаторной карте или документе, удостоверяющем личность (паспорт). Обязательно вносится дата исследования и подпись ответственного медицинского работника.

Определение группы крови с помощью стандартных парных изогемагглютинирующих сывороток.

1Вступительное слово: Мы проводим определение группы крови со стандартными сыворотками в процедурном кабинете по назначению врача. На мне шапочка, очки, маска, халат, фартук, перчатки. Руки предварительно обработаны гигиеническим способом.

2 Оснащение:

Стандартные сыворотки двух серий

Исследуемая кровь в пробирке

Тарелка для определения группы крови.

Четыре стерильных стеклянных палочки (в стакане, чашке Петри)

Изотонический раствор хлорида натрия (пробирка)

Стерильные пипетки 2 шт.

Ёмкость с 3% раствором хлорамина.

3 Проведение манипуляции

Внести по капле (0,1 мл) стандартных сывороток в отдельные лунки.

Внести на тарелку большую каплю крови рядом с лункой 4й группы, на расстоянии не менее 1 см от нее.

Отдельными концами стеклянных палочек внести кровь в сыворотки (соотношение 10:1), смешать

Покачивать тарелку 5 мин, наблюдать агглютинацию.

В лунки, в которых произошла агглютинация добавить физиологический раствор (0,1 мл)

Покачивать тарелку, наблюдать агглютинацию.

Форма ответа:

При определении группы крови со стандартными сыворотками

Агглютинация не наблюдается ни в одной из лунок – первая группа

Агглютинация наблюдается в первой и третьей лунках – вторая группа

Агглютинация наблюдается в первой и второй лунках – третья группа

Агглютинация наблюдается во всех лунках – вероятно четвертая группа

Определяем результат с сывороткой четвертой группы (аналогично)

Форма ответа:

С сывороткой четвертой группы агглютинация не наблюдается – четвертая группа

С сывороткой четвертой группы агглютинация не наблюдается – определить группу крови невозможно, следует заменить сыворотки.

После проведения манипуляции все загрязненные кровью предметы замачиваем в трехпроцентном растворе хлорамина на один час.

4 Возможные ошибки:

Грубые ошибки:

Не использование средств защиты медработника.

Повторное использование палочек.

Перенос палочек, контактировавших с кровью над лотком с чистыми палочками.

Не соответствие картины агглютинации заключению о групповой принадлежности.

Не продезинфицированы предметы контактировавшие с кровью

Не грубые ошибки:

Время ожидания агглютинации менее 5 мин.

Не внесен физраствор в лунки, в которых произошла агглютинация.

Удерживание палочек за концы а не за центр.

5 Критерии оценивания:

Сдал – отсутствие грубых ошибок, наличие не более двух не грубых ошибок.

Не сдал – наличие грубых ошибок, наличие более двух не грубых ошибок.

При совершении грубой ошибки преподаватель может попросить повторить соответствующий этап манипуляции. Если ошибка повторяется – не сдал. Допускается не более одного повторения.