1. Komplexometrická metoda. Možnost přímé titrace. Metoda je založena na vlastnosti hořečnatých iontů kvantitativně reagovat s komplexonem (trilon B) za vzniku silných, ve vodě rozpustných, bezbarvých intrakomplexních sloučenin.
Titrant: Roztok Trilonu B je disodná sůl kyseliny ethylendiamintetraoctové (zkráceně Na2H2TrB).
Indikátory: kovové indikátory jsou organická barviva, která mají různé barvy ve volné formě a ve formě komplexu s kovem, který je méně odolný než komplex Trilonu B s kovem. Změna barvy kovových indikátorů závisí na pH prostředí.
Stanovení hořečnatých solí se provádí v amoniakovém pufru při pH 9,5-10,0. Indikátor – speciální kyselý černý chrom (eriochromová černá T). Barevný přechod od červenofialové k modré.
Oxid hořečnatý je předem rozpuštěn ve zředěné kyselině chlorovodíkové.
Mg 2+ + H 2 Ind MgInd + 2H +
Zbarvení roztoku kvůli
kovový komplex s indikátorem
V bodě ekvivalence:
MgInd + Na 2 H 2 TrB MgNa 2 TrB + H 2 Ind
Zbarvení roztoku kvůli
volný ukazatel
f eq (LV) = 1
2. Acidimetrická neutralizační metoda(možnost zpětné titrace). Používá se pro kvantitativní stanovení oxidu hořečnatého. Metoda je založena na vlastnosti oxidu hořečnatého kvantitativně interagovat s kyselinou chlorovodíkovou za vzniku soli:
MgO + 2HCI -> MgCl2 + 2H20
HC1 + NaOH → NaCI + H2O
f eq (oxid hořečnatý) = ½
Úložný prostor
Podle obecného seznamu v dobře uzavřené nádobě. Při porušení skladovacích podmínek síran hořečnatý postupně ztrácí krystalizační vodu (erozí); oxid hořečnatý interaguje s oxidem uhličitým a vlhkostí obsaženou ve vzduchu a tvoří směs uhličitanu a hydroxidu hořečnatého:
MgO + CO 2 → MgCO 3
MgO + H20 -> Mg(OH)2
aplikace
Oxid hořečnatý– antacidum s mírným laxativním účinkem.
Síran hořečnatý– antispasmodikum, antikonvulzivum, sedativum, choleretikum a projímadlo.
SLOUČENINY VÁPNÍKU
Účtenka
Chlorid vápenatý získaný z přírodního minerálu kalcit:
CaC03 + 2HC1 → CaCI2 + CO2 + H20
Přidružené nečistoty (železné a hořečnaté soli) se vysrážejí roztokem hydroxidu vápenatého:
2FeCI3 + 3Ca(OH)2 → 2Fe(OH)3↓ + 3CaCI2
MgCI 2 + Ca(OH) 2 → Mg(OH) 2 ↓ + CaCI 2
Sraženiny hydroxidu železa a hořečnatého se odfiltrují.
Kvalitativní stanovení chloridů.
Do zkumavky nalijte 1 ml moči, přidejte 2-3 kapky 30% kyseliny dusičné a 3-4 kapky 1% dusičnanu stříbrného. Vytvoří se sýrovitá sraženina chloridu stříbrného. Napište reakci.
Kvalitativní detekce síranů.
Do 1 ml moči přidejte 2-3 kapky 1% kyseliny octové a 2-3 ml roztoku chloridu barnatého. Vysráží se nerozpustná sraženina síranu barnatého. Napište reakci.
Detekce fosfátů.
Nalijte 1 ml molybdenového činidla do zkumavky a zahřejte ji k varu. Poté přidejte 5-6 kapek moči. Tvoří se žlutá krystalická sraženina fosfomolybdenanu amonného, nerozpustná v kyselině dusičné, ale rozpustná v amoniaku.
Detekce vápenatých iontů.
Do 1 ml moči přidejte 1-2 kapky 3% kyseliny octové a 1-2 kapky šťavelanu amonného. Vypadne sraženina šťavelanu vápenatého (krystaly pod mikroskopem vypadají jako obaly). Napište reakci.
Detekce amoniaku.
Do zkumavky se nalijí 2 ml moči, přidá se stejný objem hydroxidu vápenatého a nad zkumavku se přidrží červený lakmusový papírek navlhčený vodou. Po nějaké době papír zmodrá od uvolněného čpavku.
Detekce kreatininu. Weylova reakce.
Do 1 ml moči přidejte 1 ml 10% roztoku hydroxidu sodného a 2 kapky 10% roztoku nitroprusidu sodného, objeví se červené zbarvení, které následně zežloutne.
Práce 3. Patologické složky moči.
Kvalitativní stanovení bílkovin.
Močový protein se skládá ze sérového albuminu a globulinu. Navíc moč obsahující krev a hnis reaguje na bílkoviny. Protein v moči se detekuje pomocí srážecích reakcí.
Normální moč obsahuje malé množství bílkovin (0,05-0,15 g/den), které běžné kvalitativní vzorky nezjistí. Protein v moči se nachází u nefrózy, nefritidy, srdeční dekompenzace a některých dalších patologií. Testy bílkovin v moči jsou založeny na jeho denaturaci různými činidly.
Test varu.
2-3 ml moči (filtrované; pokud je zásaditá, tak se okyselí kyselinou octovou do slabě kyselé reakce), přivedeme k varu a přidáme 2-3 kapky kyseliny octové. Výskyt sraženiny, která se po přidání kyseliny nerozpustí, ukazuje na přítomnost bílkoviny v testované moči. Sraženiny fosforečnanů a uhličitanů vápníku a hořčíku se rozpouštějí v kyselejším roztoku.
Hellerův test.
Opatrně, držte zkumavku pod úhlem, přidejte 1 ml filtrované moči do 1 ml koncentrované kyseliny dusičné (moč je lepší vrstvit pipetou). Na hranici dvou vrstev se v přítomnosti proteinu objeví bílý prstenec.
Test s kyselinou sulfosalicylovou.
Přidejte 3-4 kapky 20% roztoku kyseliny sulfosalicylové do 1 ml filtrované moči. Vzhled sedimentu nebo zákalu ukazuje na přítomnost proteinu.
Poznámka! Nadbytek kyseliny sulfosalicylové může způsobit rozpuštění.
Kvalitativní stanovení cukru v moči pomocí Fehlingova činidla.
Normálně moč obsahuje 0,2-0,4 g/l glukózy a běžnými reakcemi není detekována. Při cukrovce a některých dalších onemocněních, dále po velkém příjmu sacharidů s jídlem, emočním stresu, otravách éterem, oxidem, chloroformem a poškození ledvin se objevuje ve významném množství v moči.
Nalijte 1-2 ml moči do zkumavky, přidejte stejný objem Fehlingova činidla a opatrně zahřejte vrchní vrstvu tekutiny. Pokud je přítomen cukr, všimněte si tvorby cihlově červené sraženiny.
Metoda stanovení vápníku barevnou reakcí
S murexidem v přítomnosti glycerolu.
Princip metody. Murexide tvoří s vápníkem v alkalickém prostředí barevný komplex, jehož stabilita se zvyšuje přidáním glycerolu do roztoku.
Průběh odhodlání. Přidejte 0,1 ml testovacího séra do 0,3 ml vody, poté přidejte 3 ml murexid-glycerolového činidla.
1) promícháme a po 5 minutách se fotometrují v kyvetě o délce optické dráhy 1 cm při vlnové délce 490 nm proti slepému vzorku, do kterého se místo testovacího séra nabere voda. Současně se umístí kalibrační vzorek, do kterého se místo séra odebere 0,1 ml kalibračního roztoku.
Výpočet se provádí podle kalibračního plánu.
1) Murexideglycerolové činidlo: 20 mg murexidu se rozpustí v 10 ml 4N. KOH, 1 ml tohoto roztoku se smíchá s 20 ml směsi 10 ml vody a 10 ml glycerinu.
b klesá se zvyšující se koncentrací vápníku). Zvýšení pH vede ke snížení citlivosti (obr. 21). Optimální množství alkálie je 5 ml 10% roztoku NaOH/SO. Pro fotometrické stanovení vápníku se používá 0,02% vodný roztok kyselého chromu tmavě modrého. Vodné roztoky činidla jsou stabilní několik týdnů. Definice
Al, Fe, Co, Ni, Mn interferují. Vliv těchto prvků se eliminuje maskováním triethanolaminem s přídavkem fluoridu sodného nebo 1% roztoku kyanidu sodného.
Fotometrická metoda stanovení vápníku s kyselým chromovým tmavě modrým se používá při analýze cementářských surovinových směsí a slínků. Metoda je navržena pro stanovení velkého množství vápníku (40 -45 % CaO). V tomto případě je většina vápníku vázána na bezbarvý komplex s komplexonem III a zbývající vápník (~6 %) je stanoven barevnou reakcí s kyselým chromem tmavě modrým.
0,15 g analyzovaného materiálu se roztaví s 1 dílem směsi (1 g boraxu a 2 díly sody), tavenina se rozpustí ve 100 ml HG1 (1:3) a zředí vodou na 500 ml. Z výsledného roztoku odeberte 20 ml do 100 ml odměrné baňky, přidejte 5 ml roztoku obsahujícího 1 % triethanolaminu a 0,5 % NaF, 20 ml roztoku 0,00450 g7 complexop III, methylovou červeň zneutralizujte 1 % roztokem NaOH a přidejte přebytek 5 ml. Poté se přidá 10 ml 0,02% vodného roztoku kyselého chromu tmavě modrého, doplní se vodou po značku a fotometrem na FEK-M se žlutým filtrem (L = 595 nm) v kyvetě o I = 1 cm.
Tmavě modrý kyselý chrom se také používá pro fotometrické stanovení vápníku v biologických předmětech, litině a kovovém titanu. Používá se také pro nepřímé fotometrické stanovení vápníkové eriochromové černi T.
Stanovení vápníku jinými činidly]
Vápník se sráží jako fosforečnan, molybdenan nebo wolframan. Sraženina se oddělí filtrací, rozpustí se v kyselině a vhodnými metodami se stanoví fosforečnanový ion, molybden a wolfram. Loretin se používá k vysrážení vápníku, poté se fotometruje loretinát železa.
V řadě kolorimetrických metod se vápník vysráží ve formě K2Ca a následně se stanoví N02-ion, nikl s dimethylglyoximem nebo se měří zelené zbarvení, které se objeví při reakci K2Ca s naftylhydroxamátem sodným.
Ce(IV) sulfát se používá pro kolorimetrické stanovení vápníku po jeho vysrážení oxalátem. Sediment posledně jmenovaného se rozpustí v kyselině sírové, přidá se přebytek Ce(S04)2 a změří se intenzita barvy. Pro nepřímé stanovení vápníku je možná i tato možnost: po rozpuštění šťavelanu vápenatého v kyselině sírové a přidání přebytku Ce(S04)2 a jodidu draselného fotometricky změřit žluté zbarvení volného jódu nebo modré zbarvení po přidání škrobu.
Vápník lze s vysokou přesností stanovit fotometrickým měřením barvy manganistanu draselného přidaného v přebytku k šťavelanu vápenatému rozpuštěnému v kyselině.
Když se kyselina chloranilová přidá k šťavelanu vápenatému a vysráží se chloranilát vápenatý, ten se stanoví měřením optické hustoty matečného roztoku. Kalibrační křivka je sestrojena pro 0-0,2 mg Ca.
Jedna z kolorimetrických možností stanovení vápníku ve formě šťavelanu je založena na vybělení červené barvy roztoku thiokyanátu železa šťavelany)
