ಕಾಂಪ್ಲಿಮೆಂಟ್ ಫಿಕ್ಸೇಶನ್ ರಿಯಾಕ್ಷನ್ (CFR) ಒಂದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಜನಕ-ಪ್ರತಿಕಾಯ ಸಂಕೀರ್ಣವು ಯಾವಾಗಲೂ ಆಡ್ಸರ್ಬ್ (ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ) ಸ್ವತಃ ಪೂರಕವಾಗಿದೆ ಎಂಬ ಅಂಶವನ್ನು ಆಧರಿಸಿದೆ.
ಈ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಪ್ರತಿಜನಕಗಳ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಸೋಂಕುಗಳ ಸಿರೊಡಯಾಗ್ನೋಸಿಸ್ನಲ್ಲಿ ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಸ್ಪೈರೋಚೆಟ್ಸ್ (ವಾಸ್ಸೆರ್ಮನ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ), ರಿಕೆಟ್ಸಿಯಾ ಮತ್ತು ವೈರಸ್ಗಳಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ ರೋಗಗಳು*.
RSC ಒಂದು ಸಂಕೀರ್ಣ ಸೆರೋಲಾಜಿಕಲ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿದೆ. ಇದು ಪೂರಕ ಮತ್ತು ಎರಡು ಪ್ರತಿಜನಕ-ಪ್ರತಿಕಾಯ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ. ಮೂಲಭೂತವಾಗಿ, ಇವು ಎರಡು ಸೆರೋಲಾಜಿಕಲ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳು.
ಮೊದಲ ವ್ಯವಸ್ಥೆ - ಮುಖ್ಯವಾದದ್ದು ಪ್ರತಿಜನಕ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ (ಒಂದು ತಿಳಿದಿದೆ, ಇನ್ನೊಂದು ಅಲ್ಲ). ಇದಕ್ಕೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರಮಾಣದ ಪೂರಕವನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಪ್ರತಿಜನಕ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯಾದರೆ, ಅವು ಸಂಪರ್ಕಗೊಳ್ಳುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಪೂರಕವನ್ನು ಬಂಧಿಸುತ್ತವೆ. ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ ಸಂಕೀರ್ಣವು ನುಣ್ಣಗೆ ಚದುರಿಹೋಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಗೋಚರಿಸುವುದಿಲ್ಲ.
ಈ ಸಂಕೀರ್ಣದ ರಚನೆಯನ್ನು ಎರಡನೇ ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಅಥವಾ ಸೂಚಕ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಕಂಡುಹಿಡಿಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದು ಕುರಿ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳು (ಪ್ರತಿಜನಕ) ಮತ್ತು ಅನುಗುಣವಾದ ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್ (ಪ್ರತಿಕಾಯ), ಅಂದರೆ, ಸಿದ್ಧ-ತಯಾರಿಸಿದ ಪ್ರತಿರಕ್ಷಣಾ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ. ಈ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ, ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳ ಲೈಸಿಸ್ ಪೂರಕ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಮಾತ್ರ ಸಂಭವಿಸಬಹುದು. ಪೂರಕವು ಮೊದಲ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಿಂದ ಬದ್ಧವಾಗಿದ್ದರೆ (ಪ್ರತಿಜನಕ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕಾಯವು ಅದರಲ್ಲಿ ಅನುರೂಪವಾಗಿದ್ದರೆ), ನಂತರ ಎರಡನೇ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ ಇರುವುದಿಲ್ಲ - ಏಕೆಂದರೆ ಉಚಿತ ಪೂರಕವಿಲ್ಲ. ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ನ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯು (ಟ್ಯೂಬ್ನ ವಿಷಯಗಳು ಮೋಡವಾಗಿರುತ್ತದೆ ಅಥವಾ ಕೆಳಭಾಗದಲ್ಲಿ ಎರಿಥ್ರೋಸೈಟ್ಗಳ ಸೆಡಿಮೆಂಟ್ ಇದೆ) ಧನಾತ್ಮಕ RSC ಫಲಿತಾಂಶವಾಗಿ ದಾಖಲಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಮೊದಲ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಜನಕವು ಪ್ರತಿಕಾಯಕ್ಕೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗದಿದ್ದರೆ, ಪ್ರತಿರಕ್ಷಣಾ ಸಂಕೀರ್ಣವು ರೂಪುಗೊಳ್ಳುವುದಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಪೂರಕವು ಮುಕ್ತವಾಗಿ ಉಳಿಯುತ್ತದೆ! ಉಚಿತ ಉಳಿದಿದೆ, ಪೂರಕವು ಎರಡನೇ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ಭಾಗವಹಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಹೆಮೋಲಿಸಿಸ್ಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ, RSC ಫಲಿತಾಂಶವು ಋಣಾತ್ಮಕವಾಗಿರುತ್ತದೆ (ಟ್ಯೂಬ್ಗಳ ವಿಷಯಗಳು ಪಾರದರ್ಶಕವಾಗಿರುತ್ತವೆ - "ಲ್ಯಾಕ್ವೆರ್ ರಕ್ತ").
ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಅಂಶಗಳು:
ಪ್ರತಿಜನಕ - ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಲೈಸೇಟ್, ಸಾರ, ಹ್ಯಾಪ್ಟೆನ್; ಕಡಿಮೆ ಬಾರಿ ಅಮಾನತು.
1.ರೋಗಿ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಪ್ರತಿಕಾಯ-ಸೀರಮ್
2. ಪೂರಕ - ಸೀರಮ್ ಗಿನಿಯಿಲಿಗಳು
3. ಪ್ರತಿಜನಕ - ಕುರಿ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳು
4.ಪ್ರತಿಕಾಯ - ಕುರಿ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳಿಗೆ ಹೆಮೋಲಿಸಿನ್
5.ಐಸೊಟೋನಿಕ್ ಪರಿಹಾರ
ಆರ್‌ಎಸ್‌ಸಿಯಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂಖ್ಯೆಯ ಸಂಕೀರ್ಣ ಘಟಕಗಳು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಕಾರಣ, ಅವುಗಳನ್ನು ಮೊದಲು ಟೈಟ್ರೇಟ್ ಮಾಡಬೇಕು ಮತ್ತು ನಿಖರವಾದ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗೆ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಬೇಕು. ಸಮಾನ ಪರಿಮಾಣಗಳು: 0.5 ಅಥವಾ 0.25, ಕಡಿಮೆ ಬಾರಿ 0.2 ಮಿಲಿ. ಅಂತೆಯೇ, ಸಂಪೂರ್ಣ ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು 2.5, 1.25 ಅಥವಾ 1.0 ಮಿಲಿ ಸಂಪುಟಗಳಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ (ದೊಡ್ಡ ಸಂಪುಟಗಳು ಹೆಚ್ಚು ನಿಖರವಾದ ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ನೀಡುತ್ತವೆ). ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಘಟಕಗಳ ಟೈಟರೇಶನ್ ಅನ್ನು ಪ್ರಯೋಗದಂತೆಯೇ ಅದೇ ಪರಿಮಾಣದಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಕಾಣೆಯಾದ ಪದಾರ್ಥಗಳನ್ನು ಐಸೊಟೋನಿಕ್ ಪರಿಹಾರದೊಂದಿಗೆ ಬದಲಾಯಿಸುತ್ತದೆ.
ಪದಾರ್ಥಗಳನ್ನು ತಯಾರಿಸುವುದು
ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್ (ಹೆಮೊಲಿಸಿನ್). ಸೀರಮ್ ಅದರ ಟೈಟರ್ಗಿಂತ 3 ಪಟ್ಟು ಕಡಿಮೆ ದುರ್ಬಲಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ (ಪುಟ 211 ನೋಡಿ). ಸಂಪೂರ್ಣ ಪ್ರಯೋಗಕ್ಕಾಗಿ ಸೀರಮ್ನ ಸಾಮಾನ್ಯ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ತಯಾರಿಸಿ, ಅದರ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಒಂದು ಪರೀಕ್ಷಾ ಟ್ಯೂಬ್ನಲ್ಲಿನ ಸೀರಮ್ನ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು (ಉದಾಹರಣೆಗೆ, 0.5 ಮಿಲಿ) ಪರೀಕ್ಷಾ ಟ್ಯೂಬ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯಿಂದ ಗುಣಿಸುವ ಮೂಲಕ ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಪ್ರಯೋಗದಲ್ಲಿನ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಸ್ವಲ್ಪಮಟ್ಟಿಗೆ ಮೀರುತ್ತದೆ.
2. ಕುರಿ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳು. ಪ್ರಯೋಗದಲ್ಲಿ ಸಂಪೂರ್ಣ ಸಂಖ್ಯೆಯ ಪರೀಕ್ಷಾ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳಿಗೆ ತೊಳೆದ ಕುರಿ ಎರಿಥ್ರೋಸೈಟ್ಗಳ 3% ಅಮಾನತು (ಪುಟ 211 ನೋಡಿ) ತಯಾರಿಸಿ. ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ತಯಾರಿಸಲು, ಪ್ರಯೋಗಕ್ಕೆ ಸೇರಿಸುವ 30 ನಿಮಿಷಗಳ ಮೊದಲು, ಸಮಾನ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿದ ಹಿಮೋಲಿಸಿನ್ ಮತ್ತು ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳ ಅಮಾನತು ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ, ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳಿಗೆ ಸೇರಿಸಿ, ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಮಿಶ್ರಣ ಮಾಡಿ ಮತ್ತು 37 ° C ನಲ್ಲಿ 30 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಕಾವುಕೊಡಿ.
3.ಕಾಂಪ್ಲಿಮೆಂಟ್ ಅನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ 1:10 ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿ ಪ್ರಯೋಗದ ಮೊದಲು ಅದನ್ನು ಟೈಟ್ರೇಟ್ ಮಾಡಬೇಕು. ಪೂರಕ ಟೈಟರ್ ಅದರ ಚಿಕ್ಕ ಮೊತ್ತವಾಗಿದೆ, ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗೆ ಸೇರಿಸಿದಾಗ, ಸಂಪೂರ್ಣ ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ 37˚C ನಲ್ಲಿ 1 ಗಂಟೆಯೊಳಗೆ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ. ಪೂರಕ ಟೈಟರೇಶನ್ ಯೋಜನೆಯನ್ನು ಕೋಷ್ಟಕ 21 ರಲ್ಲಿ ಪ್ರಸ್ತುತಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ.
ಗಮನ! ಮುಖ್ಯ ಪ್ರಯೋಗದಂತೆಯೇ ಅದೇ ಪರಿಮಾಣದಲ್ಲಿ ಅಭಿನಂದನೆಯನ್ನು ಟೈಟ್ರೇಟ್ ಮಾಡಿ, ಕಾಣೆಯಾದ ಪದಾರ್ಥಗಳನ್ನು ಐಸೊಟೋನಿಕ್ ಪರಿಹಾರದೊಂದಿಗೆ ಬದಲಿಸಿ.
ಫಲಿತಾಂಶಗಳಿಗಾಗಿ ಲೆಕ್ಕಪತ್ರ ನಿರ್ವಹಣೆ. ನಿಯಂತ್ರಣಗಳಲ್ಲಿ ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ನ ಕುರುಹುಗಳು ಸಹ ಇರಬಾರದು, ಏಕೆಂದರೆ ಅವುಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದು ಪೂರಕವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವುದಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಇನ್ನೊಂದು ಹೆಮೋಲಿಸಿನ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುವುದಿಲ್ಲ. ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಘಟಕಗಳು ಹೆಮೋಟಾಕ್ಸಿಸಿಟಿಯನ್ನು ಹೊಂದಿಲ್ಲ ಎಂದು ನಿಯಂತ್ರಣಗಳು ಸೂಚಿಸುತ್ತವೆ (ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳನ್ನು ಸ್ವಯಂಪ್ರೇರಿತವಾಗಿ ಲೈಸ್ ಮಾಡುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯ).
ಕೊಟ್ಟಿರುವ ಕೋಷ್ಟಕದಲ್ಲಿ 21 ಉದಾಹರಣೆಯಲ್ಲಿ, 1:10 ರಷ್ಟು ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಪೂರಕ ಟೈಟರ್ 0.15 ಮಿಲಿ. ಪ್ರಯೋಗದಲ್ಲಿ, ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಇತರ ಘಟಕಗಳಿಂದ ಅದರ ಅನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಹೊರಹೀರುವಿಕೆಯಿಂದಾಗಿ ಪೂರಕದ ಚಟುವಟಿಕೆಯು ಕಡಿಮೆಯಾಗಬಹುದು, ಆದ್ದರಿಂದ, ಪ್ರಯೋಗಕ್ಕಾಗಿ, ಪೂರಕದ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ: ಟೈಟರ್ ನಂತರದ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದು ಕೆಲಸದ ಪ್ರಮಾಣವಾಗಿದೆ. ನೀಡಿರುವ ಉದಾಹರಣೆಯಲ್ಲಿ, ಇದು 1:10 ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯಲ್ಲಿ 0.2 ಪೂರಕಕ್ಕೆ ಸಮಾನವಾಗಿರುತ್ತದೆ. RSC ಯಲ್ಲಿ ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಎಲ್ಲಾ ಘಟಕಗಳನ್ನು ಸಮಾನ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಬೇಕು (ನಮ್ಮ ಉದಾಹರಣೆಯಲ್ಲಿ ಇದು 0: 5 ಮಿಲಿ), ಪೂರಕದ ಕೆಲಸದ ಪ್ರಮಾಣಕ್ಕೆ 0.3 ಮಿಲಿ ಐಸೊಟೋನಿಕ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಸೇರಿಸುವುದು ಅವಶ್ಯಕ (0.2 ಮಿಲಿ 1:10). ಸಂಪೂರ್ಣ ಪ್ರಯೋಗಕ್ಕಾಗಿ, ಅವುಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಯೊಂದರ ಪರಿಮಾಣ (ಪೂರಕ ಮತ್ತು ಐಸೊಟೋನಿಕ್ ಪರಿಹಾರ.
ಸಂಪೂರ್ಣ ಪ್ರಯೋಗಕ್ಕಾಗಿ, ಅವುಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಯೊಂದರ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು (ಪೂರಕ ಮತ್ತು ಐಸೊಟೋನಿಕ್ ಪರಿಹಾರ) RSC ಯಲ್ಲಿ ಭಾಗವಹಿಸುವ ಪರೀಕ್ಷಾ ಟ್ಯೂಬ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯಿಂದ ಗುಣಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, 50 ಪರೀಕ್ಷಾ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ನಡೆಸಲು, ನೀವು 10 ಮಿಲಿ ಪೂರಕ 1:10 (0.2 mlx50) ಮತ್ತು 15 ಮಿಲಿ ಐಸೊಟೋನಿಕ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು (0.3 mlx50) ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ.
4. ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಅದರ ಟೈಟರ್ ಅನ್ನು ಸೂಚಿಸುವುದರೊಂದಿಗೆ ರೆಡಿಮೇಡ್ ಪಡೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ, ಅಂದರೆ. ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿದ ನಂತರ, 1 ಮಿಲಿಯಲ್ಲಿ ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಮೊತ್ತ. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, 0.4 ರ ಟೈಟರ್ನೊಂದಿಗೆ, ಇದನ್ನು 0.96 ಮಿಲಿ ಐಸೊಟೋನಿಕ್ ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರಯೋಗಕ್ಕಾಗಿ, ನಾನು ಅರ್ಧ ಟೈಟರ್ (0.5 ಮಿಲಿ) ಗೆ ಸಮಾನವಾದ ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುತ್ತೇನೆ. ಇದು ಅವನ ಕೆಲಸದ ಪ್ರಮಾಣ. ಪ್ರಯೋಗದಲ್ಲಿನ ಪರೀಕ್ಷಾ ಟ್ಯೂಬ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯಿಂದ 0.5 ಮಿಲಿಯನ್ನು ಗುಣಿಸುವ ಮೂಲಕ ಸಂಪೂರ್ಣ ಪ್ರಯೋಗಕ್ಕಾಗಿ ಒಟ್ಟು ಪ್ರತಿಜನಕ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಲೆಕ್ಕಾಚಾರ ಮಾಡಿ.
5. ಪ್ರತಿಕಾಯ - ರೋಗಿಯ ಸೀರಮ್. ಅದರಲ್ಲಿರುವ ಪೂರಕವನ್ನು ನಾಶಮಾಡಲು ಪ್ರಯೋಗದ ಮೊದಲು ತಾಜಾ ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದನ್ನು ಮಾಡಲು, ಇದನ್ನು ನೀರಿನ ಸ್ನಾನದಲ್ಲಿ ಅಥವಾ ಥರ್ಮೋಸ್ಟಾಟ್ನೊಂದಿಗೆ ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಲ್ಲಿ 56˚C ನಲ್ಲಿ 30 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಬಿಸಿಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ನಂತರದ ವಿಧಾನವು ಯೋಗ್ಯವಾಗಿದೆ: ಇದು ಹಾಲೊಡಕು ಮಿತಿಮೀರಿದ ಸಾಧ್ಯತೆಯನ್ನು ನಿವಾರಿಸುತ್ತದೆ, ಅಂದರೆ, ಅದರ ಡಿನಾಟರೇಶನ್. ಡಿನಾಚರ್ಡ್ ಸೆರಾ ಪರೀಕ್ಷೆಗೆ ಸೂಕ್ತವಲ್ಲ. ರೋಗಿಯ ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ 1:10 ರಿಂದ 1:160 ರ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಕೋಷ್ಟಕ ಸಂಖ್ಯೆ 14
| ಪದಾರ್ಥಗಳು, ಮಿಲಿ | ಪರೀಕ್ಷಾ ಕೊಳವೆಗಳು | |||||||||||
| ಅನುಭವ | ನಿಯಂತ್ರಣ | |||||||||||
| ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆ | ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳು | |||||||||||
| ಐಸೊಟೋನಿಕ್ ಪರಿಹಾರ | 1,45 | 1,4 | 1,35 | 1,3 | 1,25 | 1,2 | 1,15 | 1,1 | 1,05 | 1,0 | 1,5 | 1,5 |
| ಪೂರಕ 1:10 | 0,05 | 0,1 | 0,15 | 0,2 | 0,25 | 0,3 | 0,35 | 0,4 | 0,45 | 0,5 | ― | 0,5 |
| ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆ | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | ― |
| ಕುರಿ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳ 3% ಅಮಾನತು | ― | ― | ― | ― | ― | ― | ― | ― | ― | ― | ― | 0,5 |
| ಟ್ಯೂಬ್ಗಳನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಅಲ್ಲಾಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು 37˚C ನಲ್ಲಿ 1 ಗಂಟೆಗೆ ಕಾವುಕೊಡಲಾಗುತ್ತದೆ. | ||||||||||||
| ಫಲಿತಾಂಶ | ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ ಇಲ್ಲ | ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ | ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ ಇಲ್ಲ |
ಇಮ್ಯೂನ್ ಸೆರಾವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಉತ್ಪಾದನಾ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ತಯಾರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ನಿಷ್ಕ್ರಿಯವಾಗಿ ಬಿಡುಗಡೆ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಅವುಗಳನ್ನು 1:50 ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಎಲ್ಲಾ ಪದಾರ್ಥಗಳನ್ನು ಸ್ವಲ್ಪ ಹೆಚ್ಚಿನ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ತಯಾರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
| ಪದಾರ್ಥಗಳು, ಮಿಲಿ | ಪರೀಕ್ಷಾ ಕೊಳವೆಗಳು | |||||||
| ಅನುಭವ ನಿಯಂತ್ರಣ | ||||||||
| ಸೀರಮ್ | ಪ್ರತಿಜನಕ | ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆ | ಕೆಲಸದ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ಪೂರಕ | |||||
| ½ | ||||||||
| ಹಂತ 1 ಐಸೊಟೋನಿಕ್ ಪರಿಹಾರ | ― | 0,5 | 0,5 | 1,5 | 1,25 | 1,0 | 0,5 | |
| ಟೆಸ್ಟ್ ಸೀರಮ್ 1:10 ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ | 0,5 | 0,5 | ― | ― | ― | ― | ― | |
| ಕೆಲಸದ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಜನಕ | 0,5 | 0,5 | ― | ― | ― | ― | ||
| ಕೆಲಸದ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ 1:10 ಅನ್ನು ಪೂರಕಗೊಳಿಸಿ | 0,5 | 0,5 | 0,5 | ― | 0,25 | 0,5 | 1,0 | |
| ಟ್ಯೂಬ್ಗಳನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಅಲ್ಲಾಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು 37 ° C ನಲ್ಲಿ 45 ನಿಮಿಷಗಳು 1 ಗಂಟೆ ಅಥವಾ 4 ° C ನಲ್ಲಿ 18 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ ಕಾವುಕೊಡಲಾಗುತ್ತದೆ | ||||||||
| ಹಂತ 2 ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆ | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | |
| ಟ್ಯೂಬ್ಗಳು 2, 3, 6 ಮತ್ತು 7 ರಲ್ಲಿ ಸಂಪೂರ್ಣ ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ ಆಗುವವರೆಗೆ ಟ್ಯೂಬ್ಗಳನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಅಲ್ಲಾಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು 37˚C ನಲ್ಲಿ ಕಾವುಕೊಡಲಾಗುತ್ತದೆ. | ||||||||
| ಫಲಿತಾಂಶ | ಧನಾತ್ಮಕ ಅಥವಾ ಋಣಾತ್ಮಕ | ― | ― | ++++ | (+) | ― | ― | |
ಕೋಷ್ಟಕ ಸಂಖ್ಯೆ 15
ಮುಖ್ಯ ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ನಡೆಸುವುದು
ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ಹೊಂದಿಸುವಾಗ, ಇದು ಅತ್ಯಂತ ಹೆಚ್ಚು; ಘಟಕಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸುವ ಅನುಕ್ರಮವು ಮುಖ್ಯವಾಗಿದೆ. ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ಎರಡು ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಹಂತ I. ಅಗತ್ಯ ಪ್ರಮಾಣದ ಐಸೊಟೋನಿಕ್ ಸೋಡಿಯಂ ಕ್ಲೋರೈಡ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಾ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಸುರಿಯಲಾಗುತ್ತದೆ, ನಂತರ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿದ ಸೀರಮ್ನ ಅಗತ್ಯವಿರುವ ಪರಿಮಾಣ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಜನಕದ ಕೆಲಸದ ಪ್ರಮಾಣಗಳು ಮತ್ತು ಅದೇ ಪರಿಮಾಣದಲ್ಲಿ ಪೂರಕವಾಗಿರುತ್ತವೆ. ಪ್ರಯೋಗವು ಅದರಲ್ಲಿ ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಎಲ್ಲಾ ಪದಾರ್ಥಗಳ ನಿಯಂತ್ರಣದೊಂದಿಗೆ ಇರಬೇಕು: ಸೀರಮ್, ಪ್ರತಿಜನಕ, ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆ ಮತ್ತು ಪೂರಕ.
ಟ್ಯೂಬ್ಗಳನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಅಲ್ಲಾಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು 37 ° C ನಲ್ಲಿ 45 ನಿಮಿಷ -1 ಗಂಟೆ ಅಥವಾ 4 ° C ನಲ್ಲಿ ("ಶೀತದಲ್ಲಿ RSC") 18 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ, ಈ ಸಮಯದಲ್ಲಿ, ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಸಂಕೀರ್ಣದ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ, ಪೂರಕ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ. "ಶೀತದಲ್ಲಿ" ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ನಡೆಸುವುದು ಅದರ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆ ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯನ್ನು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ.
ಹಂತ II. ಕಾವುಕೊಡುವ ಕೊನೆಯಲ್ಲಿ, ಎಲ್ಲಾ ಪರೀಕ್ಷಾ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳಿಗೆ 1 ಮಿಲಿ ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇದನ್ನು ಪ್ರಾಥಮಿಕವಾಗಿ ಥರ್ಮೋಸ್ಟಾಟ್ನಲ್ಲಿ 30 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ (ಸಂವೇದನಾಶೀಲ). ಪರೀಕ್ಷಾ ಟ್ಯೂಬ್ಗಳನ್ನು ಅಲ್ಲಾಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಥರ್ಮೋಸ್ಟಾಟ್ನಲ್ಲಿ ಮತ್ತೆ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಲೆಕ್ಕಪರಿಶೋಧಕ ಫಲಿತಾಂಶದ ಬಗ್ಗೆ. ಟ್ಯೂಬ್ಗಳು 2, 3, 6 ಮತ್ತು 7 (ಸೀರಮ್, ಪ್ರತಿಜನಕದ ನಿಯಂತ್ರಣ ಮತ್ತು ಒಂದು ಮತ್ತು ಎರಡು ಡೋಸ್ಗಳಿಗೆ ಪೂರಕ) ಸಂಪೂರ್ಣ ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ ತನಕ ಥರ್ಮೋಸ್ಟಾಟ್ನಲ್ಲಿ ಟ್ಯೂಬ್ಗಳನ್ನು ಬಿಡಲಾಗುತ್ತದೆ. 7 ನೇ ಪರೀಕ್ಷಾ ಟ್ಯೂಬ್ನಲ್ಲಿ ಹೆಮೋಲಿಸಿಸ್ ಮೊದಲು ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಎರಡು ಪ್ರಮಾಣದ ಪೂರಕವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ. ಈ ಟ್ಯೂಬ್ನಲ್ಲಿ ಹೆಮೋಲಿಸಿಸ್ ಸಂಭವಿಸಿದ ನಂತರ ಮತ್ತು ಅದರ ವಿಷಯಗಳು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಪಾರದರ್ಶಕವಾದ ನಂತರ, ನೀವು ವಿಶೇಷವಾಗಿ ಉಳಿದ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳನ್ನು ಎಚ್ಚರಿಕೆಯಿಂದ ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆ ಮಾಡಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ. 2 ನೇ, 3 ನೇ ಮತ್ತು 6 ನೇ ಪರೀಕ್ಷಾ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳಲ್ಲಿನ ದ್ರವವು ಪಾರದರ್ಶಕವಾದ ತಕ್ಷಣ, ನೀವು ತಕ್ಷಣ ಥರ್ಮೋಸ್ಟಾಟ್‌ನಿಂದ ಪರೀಕ್ಷಾ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳೊಂದಿಗೆ ರ್ಯಾಕ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಬೇಕು. ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ಅಗತ್ಯಕ್ಕಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಸಮಯ ಥರ್ಮೋಸ್ಟಾಟ್ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ ಎಂಬ ಅಂಶವನ್ನು 5 ನೇ ಪರೀಕ್ಷಾ ಟ್ಯೂಬ್ನಲ್ಲಿ ಸ್ವಲ್ಪ ಪ್ರಕ್ಷುಬ್ಧತೆ (ಅಪೂರ್ಣ ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್) ಇರುವಿಕೆಯಿಂದ ಸೂಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ - ಇದು ಪೂರಕದ ಅರ್ಧದಷ್ಟು ಕೆಲಸದ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಮಾತ್ರ ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರಯೋಗವು ಸಂಪೂರ್ಣ ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ ಸಂಭವಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ಸರಿಯಾಗಿ ಹೊಂದಿಸಿ.
ಸೀರಮ್ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಜನಕ ನಿಯಂತ್ರಣದಲ್ಲಿ (ಟ್ಯೂಬ್ಗಳು 2 ಮತ್ತು 3) ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ ಅವುಗಳ ಪ್ರಮಾಣಗಳನ್ನು ಸರಿಯಾಗಿ ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಸೀರಮ್ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಜನಕವು ಸ್ವತಃ ಪೂರಕವಾಗಿಲ್ಲ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.
ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ (ಟೆಸ್ಟ್ ಟ್ಯೂಬ್ 4) ನಿಯಂತ್ರಣದಲ್ಲಿ, ಅದು ಸರಿಯಾಗಿ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತಿದ್ದರೆ, ಹೆಮೋಲಿಸಿಸ್ನ ಕುರುಹುಗಳು ಸಹ ಇರಬಾರದು - ಅದರಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಪೂರಕವಿಲ್ಲ.
ನಿಯಂತ್ರಣಗಳು ಸರಿಯಾಗಿ ಪೂರ್ಣಗೊಂಡಿವೆ ಎಂದು ನೀವು ಒಮ್ಮೆ ವಿಶ್ವಾಸ ಹೊಂದಿದ್ದರೆ, ನೀವು ಅನುಭವವನ್ನು ಗಣನೆಗೆ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಬಹುದು. ಪರೀಕ್ಷಾ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ನ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಸಕಾರಾತ್ಮಕ ಫಲಿತಾಂಶವೆಂದು ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ತೆಗೆದುಕೊಂಡ ಪ್ರತಿಜನಕಕ್ಕೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾದ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಸೀರಮ್ ಹೊಂದಿದೆ ಎಂದು ಇದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಅವರು ರಚಿಸಲಾದ ಸಂಕೀರ್ಣವು ಪೂರಕ ಪೂರಕವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಅದರ ಭಾಗವಹಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತದೆ. ಪರೀಕ್ಷಾ ಕೊಳವೆಗಳಲ್ಲಿ ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ ಸಂಭವಿಸಿದಲ್ಲಿ, ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ಋಣಾತ್ಮಕವಾಗಿ ನಿರ್ಣಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. IN ಈ ವಿಷಯದಲ್ಲಿಪ್ರತಿಜನಕ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕಾಯದ ನಡುವೆ ಯಾವುದೇ ಪತ್ರವ್ಯವಹಾರವಿಲ್ಲ, ಪೂರಕವು ಬಂಧಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ ಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ತೊಡಗಿದೆ.
ರೋಗಿಯ ಸೀರಮ್‌ಗೆ ಸಮಾನಾಂತರವಾಗಿ, ಅದೇ ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ನಿಸ್ಸಂಶಯವಾಗಿ ಧನಾತ್ಮಕ ಸೀರಮ್‌ನೊಂದಿಗೆ ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ (ಅಂದರೆ, ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳಿಗೆ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಸೀರಮ್‌ನೊಂದಿಗೆ) ಮತ್ತು ನಿಸ್ಸಂಶಯವಾಗಿ ಋಣಾತ್ಮಕ ಸೀರಮ್, ಇದು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವುದಿಲ್ಲ. ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ಸರಿಯಾಗಿ ಹೊಂದಿಸಿದರೆ, ಮೊದಲ ಪ್ರಕರಣದಲ್ಲಿ ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ನಲ್ಲಿ ವಿಳಂಬವಾಗಬೇಕು, ಮತ್ತು ಎರಡನೆಯ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ, ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ ಇರುತ್ತದೆ.
ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ತೀವ್ರತೆಯನ್ನು ಈ ಕೆಳಗಿನಂತೆ ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ:
ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ನ ಸಂಪೂರ್ಣ ವಿಳಂಬ. ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳು ಏಕರೂಪದ ಪ್ರಕ್ಷುಬ್ಧತೆಯನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತವೆ ಅಥವಾ ಕೆಳಭಾಗದಲ್ಲಿ ನೆಲೆಗೊಳ್ಳುತ್ತವೆ. ಈ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ, ಪರೀಕ್ಷಾ ಟ್ಯೂಬ್ನಲ್ಲಿನ ದ್ರವವು ಬಣ್ಣರಹಿತವಾಗಿರುತ್ತದೆ;
ಸರಿಸುಮಾರು 25% ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳು ಲೈಸ್ಡ್ ಆಗಿರುತ್ತವೆ. ಕಡಿಮೆ ಕೆಸರು ಇದೆ, ಅದರ ಮೇಲಿನ ದ್ರವವು ಸ್ವಲ್ಪ ಗುಲಾಬಿ ಬಣ್ಣದ್ದಾಗಿದೆ. RSC ಯ ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ಸಹ ಬಲವಾಗಿ ಧನಾತ್ಮಕವಾಗಿ ನಿರ್ಣಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ;
ಸರಿಸುಮಾರು 50% ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳು ಲೈಸ್ಡ್ ಆಗಿರುತ್ತವೆ. ಕೆಸರು ಚಿಕ್ಕದಾಗಿದೆ, ದ್ರವವು ಗುಲಾಬಿ ಬಣ್ಣದ್ದಾಗಿದೆ. ಧನಾತ್ಮಕ RSC ಫಲಿತಾಂಶ;
ಸರಿಸುಮಾರು 75% ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳು ಲೈಸ್ಡ್ ಆಗಿರುತ್ತವೆ. ಸ್ವಲ್ಪ ಕೆಸರು, ಅದರ ಮೇಲೆ ತೀವ್ರವಾದ ಬಣ್ಣದ ದ್ರವವಿದೆ. ಪ್ರಶ್ನಾರ್ಹ RSC ಫಲಿತಾಂಶ;
ಎಲ್ಲಾ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳನ್ನು ಲೈಸ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ದ್ರವವು ತೀವ್ರ ಬಣ್ಣ ಮತ್ತು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಪಾರದರ್ಶಕವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಋಣಾತ್ಮಕ RSK ಫಲಿತಾಂಶ.
ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ, ವೈರಲ್, ಪ್ರೊಟೊಜೋಲ್ ಸೋಂಕುಗಳ ರೋಗಿಗಳ ರಕ್ತದ ಸೀರಮ್ನಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಈ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಜೊತೆಗೆ ರೋಗಿಗಳಿಂದ ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲಾದ ವೈರಸ್ಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಮತ್ತು ಟೈಪ್ ಮಾಡಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
RSC ಸಂಕೀರ್ಣ ಸಿರೊಲಾಜಿಕಲ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ, ಇದರಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಜನಕ, ಪ್ರತಿಕಾಯ ಮತ್ತು ಪೂರಕ ಜೊತೆಗೆ, ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ಸಹ ಭಾಗವಹಿಸುತ್ತದೆ, ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸುತ್ತದೆ. RSC ಎರಡು ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ ಮುಂದುವರಿಯುತ್ತದೆ: ಮೊದಲನೆಯದು ಪೂರಕದ ಭಾಗವಹಿಸುವಿಕೆಯೊಂದಿಗೆ ಪ್ರತಿಕಾಯದೊಂದಿಗೆ ಪ್ರತಿಜನಕದ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಎರಡನೆಯದು ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪೂರಕ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಗುರುತಿಸುವುದು. ಈ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ಕುರಿಗಳ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳು ಮತ್ತು ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳೊಂದಿಗೆ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯ ಪ್ರಾಣಿಗಳನ್ನು ಪ್ರತಿರಕ್ಷಿಸುವ ಮೂಲಕ ಪಡೆದ ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ. ಎರಿಥ್ರೋಸೈಟ್ಗಳನ್ನು ಸಂಸ್ಕರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ - 30 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 37 ° C ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸುವ ಮೂಲಕ ಸಂವೇದನಾಶೀಲವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಸಂವೇದನಾಶೀಲ ಕುರಿ ಎರಿಥ್ರೋಸೈಟ್ಗಳ ಲೈಸಿಸ್ ಅವರು ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಪೂರಕ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗೆ ಸೇರಿದರೆ ಮಾತ್ರ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ. ಅದರ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ, ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳು ಬದಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. RSC ಯ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಪರೀಕ್ಷಾ ಸೀರಮ್ನಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುತ್ತದೆ. ಸೀರಮ್ ಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಬಳಸುವ ಪ್ರತಿಜನಕಕ್ಕೆ ಹೋಮೋಲಾಜಸ್ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದರೆ, ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ ಪ್ರತಿಜನಕ-ಪ್ರತಿಕಾಯ ಸಂಕೀರ್ಣವು ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ. ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಸೇರಿಸುವಾಗ, ಈ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ, ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ ಸಂಭವಿಸುವುದಿಲ್ಲ, ಏಕೆಂದರೆ ಎಲ್ಲಾ ಪೂರಕವನ್ನು ಪ್ರತಿಜನಕ-ಪ್ರತಿಕಾಯ ಸಂಕೀರ್ಣದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಬಂಧದಲ್ಲಿ ಖರ್ಚು ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳು ಬದಲಾಗದೆ ಉಳಿಯುತ್ತವೆ, ಆದ್ದರಿಂದ ಪರೀಕ್ಷಾ ಟ್ಯೂಬ್ನಲ್ಲಿ ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ನ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯು ಧನಾತ್ಮಕ ಆರ್ಬಿಸಿ ಎಂದು ದಾಖಲಿಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ. ಸೀರಮ್ನಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಜನಕಕ್ಕೆ ಅನುಗುಣವಾದ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ, ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಜನಕ-ಪ್ರತಿಕಾಯ ಸಂಕೀರ್ಣವು ರೂಪುಗೊಳ್ಳುವುದಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಪೂರಕವು ಮುಕ್ತವಾಗಿ ಉಳಿಯುತ್ತದೆ. ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಸೇರಿಸಿದಾಗ, ಪೂರಕವು ಅದಕ್ಕೆ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳ ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳ ನಾಶ ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ ನಕಾರಾತ್ಮಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ನಿರೂಪಿಸುತ್ತದೆ.
RSC ಹಂತಕ್ಕೆ, ಈ ಕೆಳಗಿನವುಗಳು ಅಗತ್ಯವಿದೆ: ರೋಗಿಯ ಸೀರಮ್, ಪೂರಕ, ಕುರಿ ಎರಿಥ್ರೋಸೈಟ್ಗಳು ಮತ್ತು ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸಿಸ್ಟಮ್, ಹಾಗೆಯೇ ಐಸೊಟೋನಿಕ್ ಸೋಡಿಯಂ ಕ್ಲೋರೈಡ್ ದ್ರಾವಣ.
ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಸೆರೋಲಾಜಿಕಲ್ ಟ್ಯೂಬ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಐಸೊಟೋನಿಕ್ ಸೋಡಿಯಂ ಕ್ಲೋರೈಡ್ ದ್ರಾವಣದಿಂದ ಮೂರು ಬಾರಿ ತೊಳೆಯುವ ಮೂಲಕ ಕುರಿಗಳ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳನ್ನು ಡಿಫೈಬ್ರಿನೇಟೆಡ್ ಕುರಿ ರಕ್ತದಿಂದ ಪಡೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ampoules ನಲ್ಲಿ ರೆಡಿಮೇಡ್ ಉತ್ಪಾದಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಅದರ ಲೇಬಲ್ ಅದರ ಟೈಟರ್ ಅನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ, ಅಂದರೆ, ಸೀರಮ್ನ ಗರಿಷ್ಠ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಿಕೆ, ಇದು ಪೂರಕ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳಿಗೆ ಸೇರಿಸಿದಾಗ ಇನ್ನೂ ಹೆಮೋಲಿಸಿಸ್ಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. ಕುರಿಗಳ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳೊಂದಿಗೆ ಮೊಲಗಳಂತಹ ಪ್ರಾಣಿಗಳಿಗೆ ಪ್ರತಿರಕ್ಷಣೆ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ಪಡೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿಸುವಾಗ, ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ಟ್ರಿಪಲ್ ಟೈಟರ್ನಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್ನ ಟೈಟರ್ 1: 1200, ಮತ್ತು ಕೆಲಸದ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಿಕೆ 1: 400. ತಾಜಾ ಗಿನಿಯಿಲಿ ರಕ್ತದ ಸೀರಮ್ (24-48 ಗಂಟೆಗಳ ಒಳಗೆ) ಅಥವಾ ಆಂಪೂಲ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಒಣ ಪೂರಕವನ್ನು ಪೂರಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
RSC ಮಾಡುವ ಮೊದಲು, ಪೂರಕವನ್ನು 1:10 ರಷ್ಟು ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಟೈಟರ್ ಅನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸಲು ಟೈಟ್ರೇಟ್ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ - ಈ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಬಳಸಿದ ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸಿಸ್ಟಮ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸಿದಾಗ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳ ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್‌ನಿಂದ ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾಗುವ ಅತ್ಯಂತ ಚಿಕ್ಕ ಪ್ರಮಾಣದ ಪೂರಕವಾಗಿದೆ. ಪ್ರತಿಜನಕದ ಸಂಭವನೀಯ ಆಂಟಿ-ಕಾಂಪ್ಲಿಮೆಂಟರಿ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಗಣನೆಗೆ ತೆಗೆದುಕೊಂಡು, ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ನಡೆಸುವಾಗ, ಸ್ಥಾಪಿತವಾದ ಪೂರಕದ ಟೈಟರ್‌ಗೆ 20-30% ಹೆಚ್ಚಳವನ್ನು ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ.
RSC ಗಾಗಿ ಪ್ರತಿಜನಕವು ಕೊಲ್ಲಲ್ಪಟ್ಟ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಅಮಾನತುಗಳು, ಈ ಅಮಾನತುಗಳಿಂದ ತಯಾರಿಸಿದ ಸಾರಗಳು ಮತ್ತು ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ರಾಸಾಯನಿಕ ಭಿನ್ನರಾಶಿಗಳಾಗಿವೆ. ಪ್ರತಿಜನಕಕ್ಕೆ ಮುಖ್ಯ ಅವಶ್ಯಕತೆಯು ಪೂರಕ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಪ್ರತಿಬಂಧದ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯಾಗಿದೆ. ಇದು ಪೂರಕ ವಿರೋಧಿ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರಬಾರದು. ಪ್ರತಿಜನಕದ ಈ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು, ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಬಳಸುವ ಪ್ರತಿಜನಕದ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಪೂರಕವನ್ನು ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ ಟೈಟ್ರೇಟ್ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. RSC ಅನ್ನು ನಡೆಸಲು ಕೆಲವು ಯೋಜನೆಗಳಿವೆ. ಹಿಮೋಲಿಟಿಕ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳ ಹೆಮೋಲಿಸಿಸ್ನ ಉಪಸ್ಥಿತಿ ಅಥವಾ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯಿಂದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ಗಣನೆಗೆ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಗುತ್ತದೆ. RSC ಅನ್ನು ಸಿಫಿಲಿಸ್ (ವಾಸ್ಸೆರ್ಮನ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ), ಗೊನೊರಿಯಾ (ಬೋರ್ಡೆಟ್-ಗೆಂಗೌ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ), ಟೊಕ್ಸೊಪ್ಲಾಸ್ಮಾಸಿಸ್, ರಿಕೆಟ್ಸಿಯಲ್ ಮತ್ತು ರೋಗನಿರ್ಣಯದಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ವೈರಲ್ ರೋಗಗಳು.
ಕಾಂಪ್ಲಿಮೆಂಟ್ ಫಿಕ್ಸೇಶನ್ ರಿಯಾಕ್ಷನ್ (CFR) ಎಂದರೆ ಪ್ರತಿಜನಕಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು ಒಂದಕ್ಕೊಂದು ಹೊಂದಿಕೊಂಡಾಗ, ಅವು ಪ್ರತಿರಕ್ಷಣಾ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತವೆ, ಇದಕ್ಕೆ ಪೂರಕ (C) ಅನ್ನು ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳ ಎಫ್‌ಸಿ ತುಣುಕಿನ ಮೂಲಕ ಜೋಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಅಂದರೆ, ಪೂರಕವು ಪ್ರತಿಜನಕ-ಪ್ರತಿಕಾಯ ಸಂಕೀರ್ಣದಿಂದ ಬಂಧಿತವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಜನಕ-ಪ್ರತಿಕಾಯ ಸಂಕೀರ್ಣವು ರೂಪುಗೊಳ್ಳದಿದ್ದರೆ, ಪೂರಕವು ಮುಕ್ತವಾಗಿ ಉಳಿಯುತ್ತದೆ.
AG ಮತ್ತು AT ಯ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯು ಪೂರಕದ ಹೊರಹೀರುವಿಕೆ (ಬೈಂಡಿಂಗ್) ಜೊತೆಗೆ ಇರುತ್ತದೆ. ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣದ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯು ದೃಷ್ಟಿಗೋಚರವಾಗಿ ಗೋಚರಿಸದ ಕಾರಣ, J. ಬೋರ್ಡೆಟ್ ಮತ್ತು O. ಝಾಂಗು ಅವರು ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ (ಕುರಿ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳು + ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್) ಅನ್ನು ಸೂಚಕವಾಗಿ ಬಳಸಲು ಪ್ರಸ್ತಾಪಿಸಿದರು, ಇದು AG-AT ಸಂಕೀರ್ಣದಿಂದ ಪೂರಕವನ್ನು ನಿಗದಿಪಡಿಸಲಾಗಿದೆಯೇ ಎಂದು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. AG ಮತ್ತು AT ಪರಸ್ಪರ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ್ದರೆ, ಅಂದರೆ ಪ್ರತಿರಕ್ಷಣಾ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ರಚಿಸಲಾಗಿದೆ, ನಂತರ ಪೂರಕವು ಈ ಸಂಕೀರ್ಣದಿಂದ ಬದ್ಧವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ ಸಂಭವಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ಎಟಿ ಎಜಿಗೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗದಿದ್ದರೆ, ಸಂಕೀರ್ಣವು ರಚನೆಯಾಗುವುದಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ಪೂರಕವಾಗಿದೆ, ಮುಕ್ತವಾಗಿ ಉಳಿದಿದೆ, ಎರಡನೇ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಹೆಮೋಲಿಸಿಸ್ಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ.
ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಪ್ರಗತಿ
ಎರಡು ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಎರಡು ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ; ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾ ಮತ್ತು ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್. ಮೊದಲ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ (ನಿರ್ದಿಷ್ಟ) ಪ್ರತಿಜನಕ 4-+ ಪ್ರತಿಕಾಯ + ಪೂರಕವನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು ಪ್ರತಿಜನಕಕ್ಕೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾದಾಗ ಸಂಭವಿಸುವ ಧನಾತ್ಮಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಫಲಿತಾಂಶವು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಪ್ರತಿಜನಕ-ಪ್ರತಿಕಾಯ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ಹೊರಹೀರುವಿಕೆಯೊಂದಿಗೆ ರಚನೆಯಿಂದ ನಿರೂಪಿಸುತ್ತದೆ, ಅಥವಾ ಅವರು ಹೇಳಿದಂತೆ, "ಬೌಂಡ್" ಪೂರಕವಾಗಿದೆ. ಅದೃಶ್ಯವಾಗಿ ಉಳಿದಿದೆ, ಸಂಕೀರ್ಣವು ರೂಪುಗೊಂಡ ಪರಿಸರದಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಬಾಹ್ಯ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುವುದಿಲ್ಲ. ಪ್ರತಿಜನಕ ಮತ್ತು ಸೀರಮ್ ಪ್ರತಿಕಾಯದ ನಡುವಿನ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಸಂಬಂಧದ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಋಣಾತ್ಮಕ RSC ಫಲಿತಾಂಶವು ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಉಚಿತ ಸಕ್ರಿಯ ಪೂರಕದ ಸಂರಕ್ಷಣೆಯಿಂದ ನಿರೂಪಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ. RSC ಯ ಮೊದಲ ಹಂತವನ್ನು ಥರ್ಮೋಸ್ಟಾಟ್ನಲ್ಲಿ 37 ° C (1-2 ಗಂಟೆಗಳು) ಅಥವಾ ರೆಫ್ರಿಜರೇಟರ್‌ನಲ್ಲಿ 3-4 ° C (18-20 ಗಂಟೆಗಳು) ನಲ್ಲಿ ನಡೆಸಬಹುದು. ಶೀತದಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಜನಕ-ಪ್ರತಿಕಾಯ ಪ್ರತಿರಕ್ಷಣಾ ಸಂಕೀರ್ಣದ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ರಚನೆಯೊಂದಿಗೆ, ಪೂರಕವನ್ನು ಹೆಚ್ಚು ಸಂಪೂರ್ಣ ಬಂಧಿಸುವುದು ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ, ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯು ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತದೆ. ತುಲನಾತ್ಮಕ ಪ್ರಯೋಗಗಳನ್ನು ನಡೆಸುವಾಗ, ಸೋವಿಯತ್ ಇಮ್ಯುನೊಲೊಜಿಸ್ಟ್ ಅಕಾಡೆಮಿಶಿಯನ್. V.I. Ioffe ಮತ್ತು ಅವರ ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳು ಶೀತದಲ್ಲಿ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣದ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ, 100-500 ಪಟ್ಟು ಕಡಿಮೆ ಪ್ರಮಾಣದ ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ಸೆರೆಹಿಡಿಯಲು ಸಾಧ್ಯವಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದರು. ಧನಾತ್ಮಕ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು 1-2 ಗಂಟೆಗಳ ಕಾಲ 37 ° C ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಪ್ರಯೋಗಕ್ಕಿಂತ ಪ್ರತಿರಕ್ಷಣಾ ಸೀರಮ್ನ ಹೆಚ್ಚಿನ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಿಕೆಗಳಲ್ಲಿ, ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಎರಡನೇ ಹಂತವು (ಸೂಚಕ) ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಕಾರಕಗಳ ನಡುವೆ ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ (3% ಅಮಾನತು ಮಿಶ್ರಣವಾಗಿದೆ. ಎರಿಥ್ರೋಸೈಟ್ಗಳು ಮತ್ತು ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್ ಸಮಾನ ಸಂಪುಟಗಳಲ್ಲಿ) 37 °C ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ಮಾತ್ರ ಪೂರಕ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಮೊದಲ ಹಂತದಿಂದ ಮುಕ್ತವಾಗಿ ಉಳಿಯುತ್ತದೆ (ಋಣಾತ್ಮಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ). ಉಚಿತ ಸಕ್ರಿಯ ಪೂರಕ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ, ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಹೆಮೋಲಿಸಿನ್ಗಳ ಪ್ರಭಾವದ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳ ಹೆಮೋಲಿಸಿಸ್ ಸಂಭವಿಸುವುದಿಲ್ಲ (ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯು ಧನಾತ್ಮಕವಾಗಿರುತ್ತದೆ).
ಘಟಕಗಳು
ಕಾಂಪ್ಲಿಮೆಂಟ್ ಫಿಕ್ಸೇಶನ್ ರಿಯಾಕ್ಷನ್ (CFR) ಒಂದು ಸಂಕೀರ್ಣ ಸೆರೋಲಾಜಿಕಲ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿದೆ. ಅದನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಲು, 5 ಪದಾರ್ಥಗಳು ಅಗತ್ಯವಿದೆ, ಅವುಗಳೆಂದರೆ: ಎಜಿ, ಎಟಿ ಮತ್ತು ಪೂರಕ (ಮೊದಲ ವ್ಯವಸ್ಥೆ), ಕುರಿ ಎರಿಥ್ರೋಸೈಟ್ಗಳು ಮತ್ತು ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್ (ಎರಡನೇ ವ್ಯವಸ್ಥೆ).
RSC ಯ ಪ್ರತಿಜನಕವು ವಿವಿಧ ಕೊಲ್ಲಲ್ಪಟ್ಟ ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಗಳ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳಾಗಿರಬಹುದು, ಅವುಗಳ ಲೈಸೇಟ್‌ಗಳು, ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಘಟಕಗಳು, ರೋಗಶಾಸ್ತ್ರೀಯವಾಗಿ ಬದಲಾದ ಮತ್ತು ಸಾಮಾನ್ಯ ಅಂಗಗಳು, ಅಂಗಾಂಶ ಲಿಪಿಡ್ಗಳು, ವೈರಸ್ಗಳು ಮತ್ತು ವೈರಸ್-ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ವಸ್ತುಗಳು.
ತಾಜಾ ಅಥವಾ ಒಣಗಿದ ಗಿನಿಯಿಲಿ ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ಪೂರಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಯಾಂತ್ರಿಕತೆ
RSK ಅನ್ನು ಎರಡು ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ: 1 ನೇ ಹಂತ - ಮೂರು ಘಟಕಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಮಿಶ್ರಣದ ಕಾವು ಪ್ರತಿಜನಕ + ಪ್ರತಿಕಾಯ + ಪೂರಕ; 2 ನೇ ಹಂತ (ಸೂಚಕ) - ಕುರಿ ಎರಿಥ್ರೋಸೈಟ್ಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ ಮತ್ತು ಅವುಗಳಿಗೆ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸುವ ಮೂಲಕ ಮಿಶ್ರಣದಲ್ಲಿ ಉಚಿತ ಪೂರಕವನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿಯುವುದು. ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ 1 ನೇ ಹಂತದಲ್ಲಿ, ಪ್ರತಿಜನಕ-ಪ್ರತಿಕಾಯ ಸಂಕೀರ್ಣವು ರೂಪುಗೊಂಡಾಗ, ಪೂರಕ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ನಂತರ 2 ನೇ ಹಂತದಲ್ಲಿ, ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳಿಂದ ಸಂವೇದನಾಶೀಲವಾಗಿರುವ ಎರಿಥ್ರೋಸೈಟ್ಗಳ ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ ಸಂಭವಿಸುವುದಿಲ್ಲ; ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಧನಾತ್ಮಕವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಜನಕ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು ಪರಸ್ಪರ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗದಿದ್ದರೆ (ಪರೀಕ್ಷಾ ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಪ್ರತಿಜನಕ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಕಾಯವಿಲ್ಲ), ಪೂರಕವು ಮುಕ್ತವಾಗಿ ಉಳಿಯುತ್ತದೆ ಮತ್ತು 2 ನೇ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಎರಿಥ್ರೋಸೈಟ್ - ವಿರೋಧಿ ಎರಿಥ್ರೋಸೈಟ್ ಪ್ರತಿಕಾಯ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ಸೇರುತ್ತದೆ, ಇದು ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ; ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಋಣಾತ್ಮಕವಾಗಿರುತ್ತದೆ.
ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್
ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಇದಕ್ಕಾಗಿ ಬಳಸಬಹುದು:
1) ತಿಳಿದಿರುವ ಪ್ರಕೃತಿಯ ಪ್ರತಿಜನಕದೊಂದಿಗೆ ಅವುಗಳ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಅಜ್ಞಾತ ಸೀರಮ್ನಲ್ಲಿ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ;
2) ತಿಳಿದಿರುವ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಸೀರಮ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ಪ್ರತಿಜನಕದ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡುವುದು. RSC ಅನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸಲು ಪದಾರ್ಥಗಳ ತಯಾರಿಕೆ.
1. ಸಂಶೋಧನೆಗಾಗಿ ಪಡೆದ ರಕ್ತದ ಸೀರಮ್, ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಮುನ್ನಾದಿನದಂದು, ತನ್ನದೇ ಆದ ಪೂರಕವನ್ನು ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಲು 30 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 56 ° C ನಲ್ಲಿ ನೀರಿನ ಸ್ನಾನದಲ್ಲಿ ಬಿಸಿಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಂಡ ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು 5-6 ದಿನಗಳವರೆಗೆ 3-4 ° C ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಬಹುದು. ಪ್ರಯೋಗದ ದಿನದಂದು, ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು 1: 5 ಅನುಪಾತದಲ್ಲಿ ಐಸೊಟೋನಿಕ್ ಸೋಡಿಯಂ ಕ್ಲೋರೈಡ್ ದ್ರಾವಣದೊಂದಿಗೆ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ (0.1 ಮಿಲಿ ಪರೀಕ್ಷಾ ಸೀರಮ್ + 0.4 ಮಿಲಿ ಐಸೊಟೋನಿಕ್ ಸೋಡಿಯಂ ಕ್ಲೋರೈಡ್ ಪರಿಹಾರ).
2. CSC ಉತ್ಪಾದನೆಗೆ ಪ್ರತಿಜನಕವು ವಿವಿಧ ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಗಳ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳು, ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಮತ್ತು ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಯ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳಿಂದ ಪಡೆದ ಸಾರಗಳು, ರೋಗಶಾಸ್ತ್ರೀಯವಾಗಿ ಬದಲಾದ ಮತ್ತು ಸಾಮಾನ್ಯ ಅಂಗಗಳು ಮತ್ತು ಅಂಗಾಂಶಗಳಾಗಿರಬಹುದು. ಪ್ರತಿಜನಕ ತಯಾರಿಕೆಯ ನಿಶ್ಚಿತಗಳು ಸಾಂಕ್ರಾಮಿಕ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯ ಸ್ವಭಾವ ಮತ್ತು ಅದರ ರೋಗಕಾರಕದ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳಿಂದ ನಿರ್ಧರಿಸಲ್ಪಡುತ್ತವೆ.
3. ಪೂರಕವು 3-5 ಆರೋಗ್ಯಕರ ಗಿನಿಯಿಲಿಗಳಿಂದ ಪಡೆದ ಸೀರಮ್‌ಗಳ ಮಿಶ್ರಣವಾಗಿದೆ, ಅಥವಾ ಆಂಪೂಲ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಒಣ ಪೂರಕವಾಗಿದೆ.
ಬಳಕೆಗೆ ತಕ್ಷಣವೇ ಮೊದಲು, ಸ್ಟಾಕ್ ಪರಿಹಾರವನ್ನು ಪಡೆಯಲು 1:10 ಅನುಪಾತದಲ್ಲಿ ಸೋಡಿಯಂ ಕ್ಲೋರೈಡ್ನ ಐಸೊಟೋನಿಕ್ ದ್ರಾವಣದೊಂದಿಗೆ ಗಿನಿಯಿಲಿ ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
4. ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ನಡೆಸುವ ಮೊದಲು, 30 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 56 ° C ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ ಬಿಸಿ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಮುಖ್ಯ RSC ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಲು, ಜೊತೆಗೆ ಟೈಟ್ರೇಟ್ ಪೂರಕ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ಮಾಡಲು, ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ಟ್ರಿಪಲ್ ಟೈಟರ್ನಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್ನ ಟೈಟರ್ 1: 1800 ಆಗಿದ್ದರೆ, ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ 1: 600 ರ ಸೀರಮ್ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
5. ಎರಿಥ್ರೋಸೈಟ್ಗಳನ್ನು ಡಿಫಿಬ್ರಿನೇಟೆಡ್ ಕುರಿ ರಕ್ತದಿಂದ ಪಡೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಫೈಬ್ರಿನ್ ಫಿಲ್ಮ್ಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು, ರಕ್ತವನ್ನು ಮೂರು-ಪದರದ ಗಾಜ್ ಫಿಲ್ಟರ್ ಮೂಲಕ ಫಿಲ್ಟರ್ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ ಫಿಲ್ಟ್ರೇಟ್ ಅನ್ನು ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಬರಿದುಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಐಸೊಟೋನಿಕ್ ಸೋಡಿಯಂ ಕ್ಲೋರೈಡ್ ದ್ರಾವಣದೊಂದಿಗೆ ಎರಿಥ್ರೋಸೈಟ್ಗಳನ್ನು 3-4 ಬಾರಿ ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಮೂಲಕ ತೊಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳನ್ನು ಕೊನೆಯ ಬಾರಿಗೆ ತೊಳೆದಾಗ, ದ್ರವದ ಸೂಪರ್ನಾಟಂಟ್ ಪದರವು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಪಾರದರ್ಶಕವಾಗಿರಬೇಕು. ಐಸೊಟೋನಿಕ್ ಸೋಡಿಯಂ ಕ್ಲೋರೈಡ್ ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ತೊಳೆದ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳಿಂದ 3% ಅಮಾನತು ತಯಾರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಮೇಲಿನ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಆರ್‌ಎಸ್‌ಸಿಯಲ್ಲಿ ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಪದಾರ್ಥಗಳನ್ನು ಸಿದ್ಧಪಡಿಸಿದ ನಂತರ, ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್, ಪೂರಕ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಜನಕದ ಟೈಟರೇಶನ್ಗೆ ಮುಂದುವರಿಯಿರಿ.
ಪಠ್ಯಪುಸ್ತಕವು ಏಳು ಭಾಗಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ. ಭಾಗ ಒಂದು - "ಜನರಲ್ ಮೈಕ್ರೋಬಯಾಲಜಿ" - ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನ ಮತ್ತು ಶರೀರಶಾಸ್ತ್ರದ ಬಗ್ಗೆ ಮಾಹಿತಿಯನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ. ಭಾಗ ಎರಡು ಬ್ಯಾಕ್ಟೀರಿಯಾದ ತಳಿಶಾಸ್ತ್ರಕ್ಕೆ ಮೀಸಲಾಗಿದೆ. ಭಾಗ ಮೂರು - "ಜೀವಗೋಳದ ಮೈಕ್ರೋಫ್ಲೋರಾ" - ಮೈಕ್ರೋಫ್ಲೋರಾವನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸುತ್ತದೆ ಪರಿಸರ, ಪ್ರಕೃತಿಯಲ್ಲಿನ ವಸ್ತುಗಳ ಚಕ್ರದಲ್ಲಿ ಅದರ ಪಾತ್ರ, ಹಾಗೆಯೇ ಮಾನವ ಮೈಕ್ರೋಫ್ಲೋರಾ ಮತ್ತು ಅದರ ಮಹತ್ವ. ಭಾಗ ನಾಲ್ಕು - "ಸೋಂಕಿನ ಸಿದ್ಧಾಂತ" - ಸೂಕ್ಷ್ಮಜೀವಿಗಳ ರೋಗಕಾರಕ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳಿಗೆ ಮೀಸಲಾಗಿರುತ್ತದೆ, ಅವುಗಳ ಪಾತ್ರ ಸಾಂಕ್ರಾಮಿಕ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆ, ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಜೀವಕಗಳು ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ಕ್ರಿಯೆಯ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳ ಬಗ್ಗೆ ಮಾಹಿತಿಯನ್ನು ಸಹ ಒಳಗೊಂಡಿದೆ. ಭಾಗ ಐದು - "ಪ್ರತಿರಕ್ಷೆಯ ಸಿದ್ಧಾಂತ" - ವಿನಾಯಿತಿ ಬಗ್ಗೆ ಆಧುನಿಕ ವಿಚಾರಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ. ಆರನೇ ಭಾಗ - "ವೈರಸ್ಗಳು ಮತ್ತು ಅವು ಉಂಟುಮಾಡುವ ರೋಗಗಳು" - ವೈರಸ್ಗಳ ಮೂಲಭೂತ ಜೈವಿಕ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳು ಮತ್ತು ಅವು ಉಂಟುಮಾಡುವ ರೋಗಗಳ ಬಗ್ಗೆ ಮಾಹಿತಿಯನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ. ಭಾಗ ಏಳು - “ಖಾಸಗಿ ವೈದ್ಯಕೀಯ ಸೂಕ್ಷ್ಮ ಜೀವವಿಜ್ಞಾನ” - ಅನೇಕ ರೋಗಕಾರಕಗಳ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನ, ಶರೀರಶಾಸ್ತ್ರ, ರೋಗಕಾರಕ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳ ಬಗ್ಗೆ ಮಾಹಿತಿಯನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ ಸಾಂಕ್ರಾಮಿಕ ರೋಗಗಳು, ಮತ್ತು ಸುಮಾರು ಆಧುನಿಕ ವಿಧಾನಗಳುಅವರ ರೋಗನಿರ್ಣಯ, ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ತಡೆಗಟ್ಟುವಿಕೆಮತ್ತು ಚಿಕಿತ್ಸೆ.
ಪಠ್ಯಪುಸ್ತಕವು ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳು, ಪದವಿ ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳು ಮತ್ತು ಉನ್ನತ ವೈದ್ಯಕೀಯ ಶಿಕ್ಷಕರಿಗೆ ಉದ್ದೇಶಿಸಲಾಗಿದೆ ಶೈಕ್ಷಣಿಕ ಸಂಸ್ಥೆಗಳು, ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾನಿಲಯಗಳು, ಎಲ್ಲಾ ವಿಶೇಷತೆಗಳ ಸೂಕ್ಷ್ಮ ಜೀವಶಾಸ್ತ್ರಜ್ಞರು ಮತ್ತು ಅಭ್ಯಾಸ ಮಾಡುವ ವೈದ್ಯರು.
5 ನೇ ಆವೃತ್ತಿ, ಪರಿಷ್ಕರಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ವಿಸ್ತರಿಸಲಾಗಿದೆ
ಪುಸ್ತಕ:
| <<< Назад
|
ಫಾರ್ವರ್ಡ್ >>> |
ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ
ವಿಭಿನ್ನ ಸ್ವಭಾವದ ಪ್ರತಿಜನಕ + ಪ್ರತಿಕಾಯ ಸಂಕೀರ್ಣಗಳಿಗೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಬಂಧಿಸುವ ಪೂರಕತೆಯ ವಿಶಿಷ್ಟ ಸಾಮರ್ಥ್ಯ ಕಂಡುಬಂದಿದೆ ವ್ಯಾಪಕ ಅಪ್ಲಿಕೇಶನ್ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ (CFR). RSC ಯ ವಿಶೇಷ ಪ್ರಯೋಜನವೆಂದರೆ ಅದರಲ್ಲಿ ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಪ್ರತಿಜನಕದ (ಕಾರ್ಪಸ್ಕುಲರ್ ಅಥವಾ ಕರಗುವ) ಸ್ವರೂಪವು ಅಪ್ರಸ್ತುತವಾಗುತ್ತದೆ, ಏಕೆಂದರೆ IgG ಮತ್ತು IgM ಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಯಾವುದೇ ಪ್ರತಿಕಾಯದ Fc ತುಣುಕಿಗೆ ಪೂರಕವು ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ, ಅದರ ಪ್ರತಿಕಾಯದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯನ್ನು ಲೆಕ್ಕಿಸದೆ. ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ, RSA ಬಹಳ ಸೂಕ್ಷ್ಮವಾಗಿರುತ್ತದೆ: ಇದು ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು 10 ಪಟ್ಟು ಕಡಿಮೆ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ನಿಮಗೆ ಅನುಮತಿಸುತ್ತದೆ, ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಮಳೆಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ. RSC ಅನ್ನು 1901 ರಲ್ಲಿ J. ಬೋರ್ಡೆಟ್ ಮತ್ತು O. ಜಾಂಗ್ ಪ್ರಸ್ತಾಪಿಸಿದರು. ಇದು ಪೂರಕದ ಎರಡು ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಆಧರಿಸಿದೆ:
1) ಪ್ರತಿಜನಕ + ಪ್ರತಿಕಾಯ ಸಂಕೀರ್ಣಕ್ಕೆ ಬಂಧಿಸುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯ;
2) ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್ ಪಡೆಯಲು ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳ ಲೈಸಿಸ್.
RSK ಅನ್ನು ಎರಡು ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ಎರಡು ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳು ಕ್ರಮವಾಗಿ ಅದರಲ್ಲಿ ತೊಡಗಿಕೊಂಡಿವೆ - ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ, ಅಥವಾ ರೋಗನಿರ್ಣಯ ಮತ್ತು ಸೂಚಕ. ರೋಗನಿರ್ಣಯದ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ಪರೀಕ್ಷೆ (ಅಥವಾ ರೋಗನಿರ್ಣಯ) ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ, ಅದರಲ್ಲಿರುವ ಪೂರಕ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಲು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸುವ ಮೊದಲು 30 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 56 °C ನಲ್ಲಿ ಬಿಸಿಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗೆ ಪ್ರಮಾಣಿತ ಪೂರಕವನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಇದರ ಮೂಲವು ತಾಜಾ ಅಥವಾ ಒಣಗಿದ ಗಿನಿಯಿಲಿ ಹಾಲೊಡಕು. ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು 37 ° C ನಲ್ಲಿ ಒಂದು ಗಂಟೆಯವರೆಗೆ ಕಾವುಕೊಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪರೀಕ್ಷಾ ಸೀರಮ್ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದ್ದರೆ, ಅವು ಸೇರಿಸಿದ ಪ್ರತಿಜನಕದೊಂದಿಗೆ ಸಂವಹನ ನಡೆಸುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ ಪ್ರತಿಜನಕ + ಪ್ರತಿಕಾಯ ಸಂಕೀರ್ಣಗಳು ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಪೂರಕವನ್ನು ಬಂಧಿಸುತ್ತವೆ. ಸೀರಮ್ನಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳಿಲ್ಲದಿದ್ದರೆ, ಪ್ರತಿಜನಕ + ಪ್ರತಿಕಾಯ ಸಂಕೀರ್ಣದ ರಚನೆಯು ಸಂಭವಿಸುವುದಿಲ್ಲ, ಮತ್ತು ಪೂರಕವು ಮುಕ್ತವಾಗಿ ಉಳಿಯುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಈ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣದ ಯಾವುದೇ ಗೋಚರ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಗಳು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಇರುವುದಿಲ್ಲ. ಆದ್ದರಿಂದ, ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣವು ಸಂಭವಿಸಿದೆಯೇ ಅಥವಾ ಇಲ್ಲವೇ ಎಂಬ ಪ್ರಶ್ನೆಯನ್ನು ಸ್ಪಷ್ಟಪಡಿಸಲು, ಎರಡನೇ ಸೂಚಕ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು (ನಿಷ್ಕ್ರಿಯವಾದ ಹಿಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್ + ಕುರಿ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳು) ಸೇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಎಲ್ಲಾ RSC ಘಟಕಗಳ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಮತ್ತೆ 37 ° C ನಲ್ಲಿ 30 - 60 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಕಾವುಕೊಡಲಾಗುತ್ತದೆ. , ಅದರ ನಂತರ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಮೊದಲ ಹಂತದಲ್ಲಿ, ರೋಗನಿರ್ಣಯ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ಪೂರಕವನ್ನು ಬಂಧಿಸಿದರೆ, ಅಂದರೆ ರೋಗಿಯ ಸೀರಮ್ನಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳಿದ್ದರೆ ಮತ್ತು ಪೂರಕವು ಪ್ರತಿಕಾಯ + + ಪ್ರತಿಜನಕ ಸಂಕೀರ್ಣದಿಂದ ಬಂಧಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿದ್ದರೆ, ಎರಿಥ್ರೋಸೈಟ್ಗಳ ಲೈಸಿಸ್ ಇರುವುದಿಲ್ಲ - ಆರ್ಬಿಸಿ ಧನಾತ್ಮಕವಾಗಿರುತ್ತದೆ: ದ್ರವವು ಬಣ್ಣರಹಿತ, ಕೊಳವೆಯ ಕೆಳಭಾಗದಲ್ಲಿ ಎರಿಥ್ರೋಸೈಟ್ಗಳ ಕೆಸರು ಇರುತ್ತದೆ. ಸೀರಮ್ನಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳಿಲ್ಲದಿದ್ದರೆ ಮತ್ತು ರೋಗನಿರ್ಣಯ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ಪೂರಕ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಸಂಭವಿಸದಿದ್ದರೆ, ಅಂದರೆ ಆರ್‌ಎಸ್‌ಸಿ ನಕಾರಾತ್ಮಕವಾಗಿದ್ದರೆ, ರೋಗನಿರ್ಣಯ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ಖರ್ಚು ಮಾಡದ ಪೂರಕವು ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳ ಸಂಕೀರ್ಣಕ್ಕೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ + ಸೂಚಕ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು ಮತ್ತು ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್. ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ: ಪರೀಕ್ಷಾ ಟ್ಯೂಬ್ನಲ್ಲಿ "ಮೆರುಗೆಣ್ಣೆ ರಕ್ತ", ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳ ಕೆಸರು ಸಂಖ್ಯೆ. ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ ವಿಳಂಬದ ಮಟ್ಟ ಮತ್ತು ಎರಿಥ್ರೋಸೈಟ್ ಸೆಡಿಮೆಂಟ್ ಇರುವಿಕೆಯನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿ ನಾಲ್ಕು-ಅಡ್ಡ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು RSC ಯ ತೀವ್ರತೆಯನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯು ಸೂಕ್ತವಾದ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳೊಂದಿಗೆ ಇರುತ್ತದೆ: ಸೀರಮ್ ನಿಯಂತ್ರಣ (ಆಂಟಿಜೆನ್ ಇಲ್ಲದೆ) ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಜನಕ ನಿಯಂತ್ರಣ (ಸೀರಮ್ ಇಲ್ಲದೆ), ಏಕೆಂದರೆ ಕೆಲವು ಸೆರಾ ಮತ್ತು ಕೆಲವು ಪ್ರತಿಜನಕಗಳು ವಿರೋಧಿ ಪೂರಕ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ. RSC ಅನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸುವ ಮೊದಲು, ಅದರಲ್ಲಿ ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಎಲ್ಲಾ ಘಟಕಗಳು, ಪರೀಕ್ಷಾ ಸೀರಮ್ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ಹೊರತುಪಡಿಸಿ, ಎಚ್ಚರಿಕೆಯಿಂದ ಟೈಟರೇಶನ್ಗೆ ಒಳಪಟ್ಟಿರುತ್ತವೆ. ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗೆ ಪೂರಕದ ನಿಖರವಾದ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಪರಿಚಯಿಸುವುದು ಮುಖ್ಯವಾಗಿದೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಅದರ ಕೊರತೆ ಅಥವಾ ಅಧಿಕವು ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು ತಪ್ಪು ಫಲಿತಾಂಶಗಳು. ಪೂರಕ ಟೈಟರ್ ಕನಿಷ್ಠ ಮೊತ್ತವಾಗಿದ್ದು, ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್ನ ಕೆಲಸದ ಡೋಸ್ನ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ, ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳ ಸಂಪೂರ್ಣ ವಿಸರ್ಜನೆಯನ್ನು ಖಾತ್ರಿಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ. ಮುಖ್ಯ ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ಹೊಂದಿಸಲು, ಸ್ಥಾಪಿತ ಟೈಟರ್‌ಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ 20-25% ರಷ್ಟು ಹೆಚ್ಚಿದ ಪೂರಕ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ. ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್ನ ಟೈಟರ್ ಅದರ ಗರಿಷ್ಠ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯಾಗಿದೆ, ಇದು 10% ಪೂರಕ ದ್ರಾವಣದ ಸಮಾನ ಪರಿಮಾಣದೊಂದಿಗೆ ಬೆರೆಸಿದಾಗ, 37 ° C ತಾಪಮಾನದಲ್ಲಿ 1 ಗಂಟೆಯೊಳಗೆ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳ ಅನುಗುಣವಾದ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಹಿಮೋಲೈಸ್ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಮುಖ್ಯ ಪ್ರಯೋಗವು ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ಅದರ ಟೈಟರ್ನ 1/3 ರಷ್ಟು ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವುದನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ.
ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯು ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕವಾಗಿದೆ ಸೆರೋಲಾಜಿಕಲ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳು, ಅನೇಕ ವೈರಲ್ ರೋಗಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ಕೆಲವು ಇತರ ಪತ್ತೆ ವಿಧಾನಗಳ ಆಧಾರವಾಗಿದೆ ಆಂಟಿವೈರಲ್ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು. ತಟಸ್ಥೀಕರಣದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ, ಹೆಮಾಗ್ಗ್ಲುಟಿನೇಶನ್ ಪ್ರತಿಬಂಧ, ಪರೋಕ್ಷ hemagglutination, ಲಿಂಕ್ಡ್ ಇಮ್ಯುನೊಸರ್ಬೆಂಟ್ ಅಸ್ಸೇಸಂವೇದನಾಶೀಲತೆಯಲ್ಲಿ ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಿಂತ ಉತ್ತಮವಾಗಿದೆ, ಆದಾಗ್ಯೂ, ತಂತ್ರದ ಸರಳತೆ, ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳ ಆರಂಭಿಕ ಪತ್ತೆ, ಹಾಗೆಯೇ ಹೆಮಾಗ್ಗ್ಲುಟಿನೇಟಿಂಗ್ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರದ ವೈರಲ್ ಪ್ರತಿಜನಕಗಳ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುವಿಕೆ ವೈರಾಣು ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ ಅದರ ವ್ಯಾಪಕ ಬಳಕೆಯನ್ನು ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ.
ಇದರ ಉತ್ಪಾದನೆಗೆ ಅಂತಹ ಹೆಚ್ಚಿನ ಮಟ್ಟದ ಸಾಂದ್ರತೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಜನಕ ಔಷಧಗಳ ಶುದ್ಧತೆಯ ಅಗತ್ಯವಿರುವುದಿಲ್ಲ, ಇದು ಹಲವಾರು ಇತರ ರೋಗನಿರೋಧಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳಿಗೆ ಅಗತ್ಯವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ, ಅನೇಕ ವೈರಸ್ಗಳ ಪೂರಕ-ಫಿಕ್ಸಿಂಗ್ ಪ್ರತಿಜನಕಗಳ ಗುಂಪಿನ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯು ಸಾಮೂಹಿಕ ರೋಗನಿರ್ಣಯದಲ್ಲಿ ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಬಳಸಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗಿಸುತ್ತದೆ: ಈ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯು ಸ್ಟ್ರೈನ್ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳನ್ನು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸುವುದಿಲ್ಲ ಮತ್ತು ವೈರಸ್ಗಳ ನಡುವಿನ ಪ್ರತಿಜನಕ ಸಂಬಂಧಗಳನ್ನು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡುವಾಗ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ.
ಹೆಸರು ಸ್ವತಃ ಎರಡು ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ವಿಧಾನದ ಸಾರವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಾಗಿ ಪ್ರತಿಬಿಂಬಿಸುತ್ತದೆ. ಮೊದಲ ಹಂತದಲ್ಲಿ, ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯು ಪ್ರತಿಜನಕಗಳು ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ (ಈ ಘಟಕಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದನ್ನು ಮುಂಚಿತವಾಗಿ ಕರೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ), ಜೊತೆಗೆ ಟೈಟ್ರೇಟೆಡ್ ಪ್ರಮಾಣದಲ್ಲಿ ಪೂರಕವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಜನಕ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯಾದರೆ, ಅವುಗಳ ಸಂಕೀರ್ಣವು ಪೂರಕವಾಗಿದೆ, ಇದು ಸೂಚಕ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಎರಡನೇ ಹಂತದಲ್ಲಿ ಪತ್ತೆಯಾಗುತ್ತದೆ (ಕುರಿ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳ ಮಿಶ್ರಣ ಮತ್ತು ಅವುಗಳಿಗೆ ಆಂಟಿಸೆರಮ್). ಪ್ರತಿಜನಕ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಪೂರಕವು ಬದ್ಧವಾಗಿದ್ದರೆ, ಕುರಿಗಳ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳ ವಿಘಟನೆಯು ಸಂಭವಿಸುವುದಿಲ್ಲ ( ಧನಾತ್ಮಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ). ನಕಾರಾತ್ಮಕ ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ, ಸ್ಥಿರವಲ್ಲದ ಪೂರಕವು ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ ಅನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುತ್ತದೆ, ಇದನ್ನು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಕ್ರಿಯೆಯ ಮುಖ್ಯ ಅಂಶಗಳು ಪ್ರತಿಜನಕಗಳು (ತಿಳಿದಿರುವ ಅಥವಾ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಬಹುದಾದ), ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು (ತಿಳಿದಿರುವ ಆಂಟಿಸೆರಾ ಅಥವಾ ಟೆಸ್ಟ್ ಸೆರಾ), ಪೂರಕ, ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್ ಮತ್ತು ಕುರಿ ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳು; ಐಸೊಟೋನಿಕ್ ಸೋಡಿಯಂ ಕ್ಲೋರೈಡ್ ದ್ರಾವಣ (pH 7.2-7.4) ಅಥವಾ ವಿವಿಧ ಬಫರ್ ದ್ರಾವಣಗಳನ್ನು ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸುವಂತೆ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಜನಕಗಳು ಮತ್ತು ಸೆರಾ ವಿರೋಧಿ ಪೂರಕವಾಗಿರಬಹುದು, ಅಂದರೆ. ಪೂರಕವನ್ನು ಹೀರಿಕೊಳ್ಳುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯ, ಇದು ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ ಅನ್ನು ವಿಳಂಬಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ವಿರೂಪಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.
CSC ಗಾಗಿ ಪ್ರತಿಜನಕಗಳನ್ನು ಸೋಂಕಿತ ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಅಂಗಗಳಿಂದ ತಯಾರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಸೋಂಕಿತ ಕೋಳಿ ಭ್ರೂಣಗಳ ಅಲಾಂಟೊಯಿಕ್ ಅಥವಾ ಆಮ್ನಿಯೋಟಿಕ್ ದ್ರವ, ಹಾಗೆಯೇ ಅಂಗಾಂಶ ಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳಲ್ಲಿ ವೈರಸ್ಗಳನ್ನು ಬೆಳೆಸಿದ ನಂತರ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ದ್ರವ. ಆಂಟಿಜೆನಿಕ್ ಸಿದ್ಧತೆಗಳು ಯಾವಾಗಲೂ ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಜೀವಕೋಶಗಳು ಅಥವಾ ಅಂಗಾಂಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳಿಂದ ಬಹಳಷ್ಟು ನಿಲುಭಾರ ಪದಾರ್ಥಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ, ಇದು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ವಿರೂಪಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.
ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ ವೈರಲ್ ಪ್ರತಿಜನಕಗಳನ್ನು ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಕೆಲಸದ ಪ್ರಮಾಣ, ಹಾಗೆಯೇ ವಿರೋಧಿ ಪೂರಕ ಮತ್ತು ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿಜನಕವನ್ನು ನಂತರ ಪೂರಕ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಟೈಟ್ರೇಟ್ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸುವಲ್ಲಿ ಎರಡನೇ ಮುಖ್ಯ ಅಂಶವು ಪೂರಕವಾಗಿದೆ. ಈ ಪದದ ಅರ್ಥ ಸಂಕೀರ್ಣ ವ್ಯವಸ್ಥೆಪ್ರಾಣಿಗಳು ಮತ್ತು ಮಾನವರ ರಕ್ತದಲ್ಲಿ ಇರುವ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳು ಮತ್ತು ಅಂಶಗಳು. ವಿಶಿಷ್ಟವಾಗಿ, ಗಿನಿಯಿಲಿ ರಕ್ತದ ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪೂರಕದ ಚಟುವಟಿಕೆ (ಟೈಟರ್) ಅದರ ಚಿಕ್ಕ ಮೊತ್ತವಾಗಿದೆ, ಅದರ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಹೆಮೋಲಿಸಿನ್ ಬಳಸಿದ ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ನ ಸಂಪೂರ್ಣ ಹಿಮೋಲಿಸಿಸ್ಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ.
ವೈರಸ್‌ಗಳಿಗೆ ಪೂರಕ-ಫಿಕ್ಸಿಂಗ್ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು, 30 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 560C ನಲ್ಲಿ ಪೂರಕತೆಯನ್ನು ತೊಡೆದುಹಾಕಲು ಸೀರಮ್ ಅನ್ನು ನಿಷ್ಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಬೇಕಾಗುತ್ತದೆ. ರೋಗನಿರೋಧಕ ಪ್ರಾಣಿಗಳಿಂದ ಸೆರಾವನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಉಲ್ಲೇಖ ಸೆರಾ ಎಂದು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಇದಲ್ಲದೆ, ಪ್ರತಿರಕ್ಷಣೆಗಾಗಿ, ಅಂಗಾಂಶದ ಕಲ್ಮಶಗಳಿಂದ ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಲ್ಪಟ್ಟ ವೈರಲ್ ಪ್ರತಿಜನಕಗಳನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಇಲ್ಲದಿದ್ದರೆ ಒಂದು ಉಚ್ಚಾರಣೆ ಅನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯು ಸಂಭವಿಸುತ್ತದೆ.
ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಕ್ರಿಯೆಯ ಕಡ್ಡಾಯ ಅಂಶವೆಂದರೆ ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆ, ಇದರಲ್ಲಿ ಕುರಿ ಎರಿಥ್ರೋಸೈಟ್ಗಳು ಮತ್ತು ಕುರಿ ಎರಿಥ್ರೋಸೈಟ್‌ಗಳೊಂದಿಗೆ ಮೊಲಗಳನ್ನು ಹೈಪರ್ಇಮ್ಯುನೈಸಿಂಗ್ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ ಪಡೆದ ಹೆಮೋಲಿಟಿಕ್ ಸೀರಮ್ ಸೇರಿವೆ.
ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಲು, ಈ ಕೆಳಗಿನ ಮಾರ್ಪಾಡುಗಳನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ: ತಕಾಚಿ ಸಿಸ್ಟಮ್ ಮೈಕ್ರೊಟೈಟ್ರೇಟರ್ನಲ್ಲಿ ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಕ್ರಿಯೆಯ ಮೈಕ್ರೋಮೆಥಡ್, ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ, ಪರೋಕ್ಷ ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ, ಜೆಲ್ನಲ್ಲಿನ ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ, ಮೈಕ್ರೋಡ್ರಾಪ್ಲೆಟ್ ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಕ್ರಿಯೆ, ಘನ-ಆಧಾರಿತ ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ.
ಪೂರಕ ಸ್ಥಿರೀಕರಣ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯು ಕಡಿಮೆಯಾದರೂ, ಇದು ಹೆಚ್ಚಿನ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ. ಈ ನಿಟ್ಟಿನಲ್ಲಿ, ಯುವ ಜಾನುವಾರುಗಳಲ್ಲಿ ವೈರಲ್ ನ್ಯುಮೋಎಂಟೆರಿಟಿಸ್ ರೋಗನಿರ್ಣಯಕ್ಕೆ ಇದನ್ನು ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.
