Первым исследованием всегда является подсчет лейкоцитарной формулы (см. главу «Гематологические исследования»). Оцениваются как относительные, так и абсолютные значения количества клеток периферической крови.
Определение основных популяций (Т-клетки, В-клетки, натуральные киллеры) и субпопуляций Т-лимфоцитов (Т-хелперы, Т-ЦТЛ). Для первичного исследования иммунного статуса и выявления выраженных нарушений иммунной системы ВОЗ рекомендовано определение CD3, CD4, CD8, CD19, CD16+56, соотношение CD4/CD8. Исследование позволяет определить относительное и абсолютное количество основных популяций лимфоцитов: Т-клетки – CD3, В-клетки – CD19, натуральные киллеры (NK) – CD3- CD16++56+, субпопуляции Т лимфоцитов (Т-хелперы CD3+ CD4+, Т-цитотоксические CD3+ CD8+ и их соотношение).
Метод исследования
Иммунофенотипирование лимфоцитов проводится c использованием моноклональных антител к поверхностным дифференцировочным ангинам на клетках иммунной системы, методом проточной лазерной цитофлуорометрии на проточных цитофлуориметрах.
Выбор зоны анализа лимфоцитов производится по дополнительному маркеру CD45, который представлен на поверхности всех лейкоцитов.
Условия взятия и хранения образцов
Венозная кровь, взятая из локтевой вены, утром, строго натощак, в вакуумную систему до указанной на пробирке метки. В качестве антикоагулянта используется К2ЭДТА. После взятия пробирку с образцом медленно переворачивают 8-10 раз для перемешивония крови с антикоагулянтом. Хранение и транспортировка строго при 18–23°С в вертикальном положении не более 24 ч.
Невыполнение этих условий приводит к некорректным результатам.
Интерпретация результатов
Т-лимфоциты (CD3+ клетки). Повышенное количество свидетельствует о гиперактивности иммунитета, наблюдается при острых и хронических лимфолейкозах. Увеличение относительного показателя встречается при некоторых вырусных и бактериальных инфекциях в начале заболевания, обострениях хронических заболеваний.
Снижение абсолютного количества Т-лимфоцитов свидетельствует о недостаточности клеточного иммунитета, а именно о недостаточности клеточно-эффекторного звена иммунитета. Выявляется при воспалениях разнообразной этиологии, злокачественных новообразованиях, после травмы, операций, инфаркта, при курении, приеме цитостатиков. Повышение их числа в динамике заболевания – клинически благоприятный признак.
В-лимфоциты (CD19+ клетки) Снижение наблюдается при физиологических и врожденных гипогаммаглобулинемиях и агаммаглобулинемиях, при новообразованиях иммунной системы, лечении иммунодепрессантами, острой вирусной и хронической бактериальной инфекциях, состоянии после удаления селезенки.
NK-лимфоциты с фенотипом CD3-CD16++56+ Натуральные киллеры (NK-клетки) – популяция больших гранулярных лимфоцитов. Они способны лизировать клетки-мишени, инфицированные вирусами и другими внутриклеточными антигенами, опухолевые клетки, а также другие клетки аллогенного и ксеногенного происхождения.
Увеличение количества NK-клеток связано с активацией антитрансплантационного иммунитета, в некоторых случаях отмечается при бронхиальной астме, встречается при вирусных заболеваниях, повышается при злокачественных новообразованиях и лейкозах, в периоде реконвалесценции.
Т-лимфоциты хелперы с фенотипом CD3+CD4+ Увеличение абсолютного и относительного количества наблюдается при аутоиммунных заболеваниях, может быть при аллергических реакциях, некоторых инфекционных заболеваниях. Это увеличение свидетельствует о стимуляции иммунной системы на антиген и служит подтверждением гиперреактивных синдромов.
Снижение абсолютного и относительного количества Т-клеток свидетельствует о гипореактивном синдроме с нарушением регуляторного звена иммунитета, является патогномичным признаком для ВИЧ-инфекции; встречается при хронических заболеваниях (бронхитах, пневмониях и т.д.), солидных опухолях.
Т-цитотоксические лимфоциты с фенотипом CD3+ CD8+ Повышение выявляется практически при всех хронических инфекциях, вирусных, бактериальных, протозойных инфекциях. Является характерным для ВИЧ-инфекции. Снижение наблюдается при вирусных гепатитах, герпесе, аутоиммунных заболеваниях.
Соотношение CD4+/CD8+ Исследование соотношения CD4+/CD8+ (CD3, CD4, CD8, CD4/CD8) рекомендовано только для мониторинга ВИЧ-инфекции и контроля эффективности АРВ терапии. Позволяет определить абсолютное и относительное количество Т-лимфоцитов, субпопуляций Т-хелперов, ЦТЛ и их соотношение.
Диапазон значений – 1,2–2,6. Снижение наблюдается при врожденных иммунодефицитах (синдром Ди-Джоржи, Незелофа, Вискотта-Олдрича), при вирусных и бактериальных инфекциях, хронических процессах, воздействии радиации и токсических химических веществ, множественной миеломе, стрессе, снижается с возрастом, при эндокринных заболеваниях, солидных опухолях. Является патогномичным признаком для ВИЧ-инфекции (менее 0,7).
Увеличение значения более 3 – при аутоиммунных заболеваниях, остром Т-лимфобластном лейкозе, тимоме, хроническом Т-лейкозе.
Изменение соотношения может быть связано с количеством хелперов и ЦТЛ у данного пациента. Например, снижение количества CD4+ Т-клеток при острой пневмонии в начале заболевания ведет к снижению индекса, а ЦТЛ при этом могут не измениться.
Для дополнительного исследования и выявления изменений иммунной системы при патологиях требующих оценки наличия острого или хронического воспалительного процесса и степени его активности, рекомендуется включать подсчет количества активированных Т-лимфоцитов с фенотипом CD3+HLA-DR+ и ТNK–клеток с фенотипом CD3+CD16++56+.
Т-активированные лимфоциты с фенотипом CD3+HLA-DR+ Маркер поздней активации, показатель гиперреактивности иммунитета. По экспрессии данного маркера можно судить о выраженности и силе иммунного ответа. Появляется на Т-лимфоцитах после 3-го дня острого заболевания. При благоприятном течении заболевания снижается до нормы. Увеличение экспрессии на Т-лимфоцитах может быть при многих заболеваниях, связанных с хроническим воспалением. Отмечено его повышение у пациентов с гепатитом С, пневмониями, ВИЧ-инфекцией, солидными опухолями, аутоиммунными заболеваниями.
ТNK-лимфоциты с фенотипом CD3+CD16++CD56+ Т-лимфоциты, несущие на своей поверхности маркеры CD16++ CD 56+. Эти клетки имеют свойства как Т-, так и NK-клеток. Исследование рекомендовано как дополнительный маркер при острых и хронических заболеваниях.
Снижение их в периферической крови может наблюдаться при различных органоспецифических заболеваниях и системных аутоиммунных процессах. Увеличение отмечено при воспалительных заболеваниях разной этиологии, опухолевых процессах.
Исследование ранних и поздних маркеров активации Т-лимфоцитов (CD3+CD25+, CD3-CD56+, CD95, CD8+CD38+) дополнительно назначают для оценки изменений ИС при острых и хронических заболеваниях, для диагностики, прогноза, мониторинга течения заболевания и проводимой терапии.
Т-активированные лимфоциты с фенотипом CD3+CD25+, рецeптор к ИЛ2 CD25+ – маркер ранней активации. О функциональном состоянии Т-лимфоцитов (CD3+) свидетельствует количество экспрессирующих рецепторов к ИЛ2 (CD25+). При гиперактивных синдромах количество этих клеток возрастает (острые и хронические лимфолейкозы, тимома, отторжение трансплантата), кроме того, повышение их может свидетельствовать о ранней стадии воспалительного процесса. В периферической крови их можно выявить в первые три дня болезни. Снижение числа этих клеток может наблюдаться при врожденных иммунодефицитах, аутоиммунных процессах, ВИЧ-инфекции, грибковых и бактериальных инфекциях, ионизирующей радиации, старении, отравлении тяжелыми металлами.
Т-цитотоксические лимфоциты с фенотипом CD8+CD38+ Присутствие CD38+ на ЦТЛ лимфоцитах отмечено у пациентов с разными заболеваниями. Информативный показатель при ВИЧ-инфекции, ожоговой болезни. Увеличение числа ЦТЛ с фенотипом CD8+CD38+ наблюдается при хронических воспалительных процессах, онкологических и некоторых эндокринных заболеваниях. При проведении терапии показатель снижается.
Субпопуляция натуральных киллеров с фенотипом CD3- CD56+ Молекула CD56 – адгезивная молекула, широко представленная в нервной ткани. Кроме натуральных киллеров, экспрессируется на многих типах клеток, в том число на Т-лимфоцитах.
Увеличение данного показателя свидетельствуют о расширении активности специфического клона клеток киллеров, которые имеют меньшую цитолитическую активность, чем NK-клетки с фенотипом CD3- CD16+. Количество этой популяции возрастает при гематологических опухолях (ЕК-клеточная или Т-клеточная лимфома, плазмоклеточная миелома, апластическая крупноклеточная лимфома), хронических заболеваниях, некоторых вырусных инфекциях.
Снижение отмечается при первичных иммунодефицитах, вирусных инфекциях, системных хронических заболеваниях, стрессе, лечении цитостатиками и кортикостероидами.
Рецептор CD95+ – один из рецепторов апоптоза. Апоптоз – сложный биологический процесс, необходимый для удаления из организма поврежденных, старых и инфицированных клеток. Рецептор CD95 экспрессируется на всех клетках иммунной системы. Он играет важную роль в контроле функционирования иммунной системы, так как является одним из рецепторов апоптоза. Его экспрессия на клетках определяет готовность клеток к апоптозу.
Снижение доли CD95+-лимфоцитов в крови пациентов свидетельствует о нарушении эффективности последнего этапа выбраковки дефектных и инфицированных собственных клеток, что может привести к рецидиву заболевания, хронизации патологического процесса, развитию аутоиммунных заболеваний и повышению вероятности опухолевой трансформации (к примеру, рака шейки матки при папилломотозной инфекции). Определение экспрессии CD95 имеет прогностическое значение при миело- и лимфопролифератиных заболеваниях.
Повышение интенсивности апоптоза наблюдается при вирусных заболеваниях, септических состояниях, при употреблении наркотических средств.
Активированные лимфоциты CD3+CDHLA-DR+, CD8+CD38+, CD3+CD25+, CD95. Тест отражает функциональное состояние Т-лимфоцитов и рекомендован для контроля за течением заболевания и контроля иммунотерапии при воспалительных заболеваниях разной этиологии.
Т-лимфоциты – многочисленный подтип агранулоцитов. Участвуют в клеточном и гуморальном иммунитете, обеспечивая защиту организма от патогенных воздействий.
Т-лимфоциты
Внимание! Первый анализ в общеклиническом исследовании крови – подсчет лейкоцитарной формулы. В общем анализе крови оценивается относительное и абсолютное содержание лимфоцитов в крови. Отклонения от нормальных показателей указывают на патологии.
Что такое T-лимфоциты, и где они образуются?
Предшественники агранулоцитов появляются в костном мозге. В вилочковой железе происходит процесс созревания. Определенные гормоны и ткани на конечном этапе созревания оказывают влияние на дифференциацию лимфоцитов. Каждый тип Т-клеток отличается структурно и функционально друг от друга. Лимфоциты вырабатываются в костном мозге и в малых количествах в селезенке и лимфоузлах. При нарушениях в работе костного мозга или лейкозах различной этиологии увеличиваются лимфоузлы, что является первым признаком патологических состояний.
Т-клетки можно отличить от других лимфоцитов наличием специального рецептора на мембране. Большинство Т-лимфоцитов несут на мембране клеточный рецептор, состоящий из альфа- и бета-цепей. Такие лимфоциты принято называть альфа-β-Т-клетками. Они – часть приобретенной иммунной системы. Специализированные гамма-дельта-Т-клетки (менее распространенный тип Т-лимфоцитов в организме человека) имеют инвариантные Т-клеточные рецепторы с ограниченным разнообразием.
Виды Т-лимфоцитов и их функции
Существует несколько видов Т-клеток:
- Эффекторы.
- Хелперы.
- Цитотоксические
- Регуляторные.
- Киллеры.
- Гамма-дельта.
- Памяти.
Важно! Главной функцией Т-лимфоцитов является выявление и уничтожение патогенного микроорганизма или инородной частицы.
Т-хелперы помогают другим лейкоцитам в иммунологических процессах, в превращении В-лимфоцитов в плазматические клетки. Т-хелперы известны как CD4 Т-лимфоциты, поскольку имеют гликопротеин CD4 на мембране. Т-хелперы активируются, когда связываются с молекулярными антигенами ГКГ класса II, которые располагаются на поверхности антигенпрезентативных клеток. После активации Т-лимфоциты делятся и выделяют белки, называемые цитокинами, которые регулируют активный иммунный ответ. Клетки могут дифференцировать в один из нескольких подтипов лимфоцитов – TH1, TH2, TH3, TH17, TH9 или TFH. Т-лимфоциты этого вида могут быть представлены фенотипом CD3. Данные гликопротеиды (CD4 и CD3) помогают мобилизовать иммунную систему и уничтожить патогенный микроорганизм.
Цитотоксические Т-лимфоциты (ЦТЛ) уничтожают раковые или инфицированные вирусом клетки, участвуют в отторжении трансплантата. Известны как CD8 Т-клетки, поскольку имеют гликопротеин CD8 на мембране. Распознают мишени путем связывания с пептидными молекулами ГКГ класса I, которые присутствуют на мембране зародышевых клеток.
Регуляторные Т-лимфоциты играют ключевую роль в поддержании иммунологической толерантности. Их основная задача – вовремя отключить иммунную реакцию при уничтожении патогенного микроорганизма. Эту функцию совместно выполняют Т-киллеры и Т-хелперы.
Нормальные значения Т-лимфоцитов в анализе крови
Нормальные показатели лимфоцитов различаются у разных возрастных групп. Связано с индивидуальными особенностями иммунной системы. Объем вилочковой железы, в которой находится основная часть агранулоцитов, в процессе старения уменьшается. До шестилетнего возраста в кровеносном русле преобладают лимфоциты, а с 6 лет – нейтрофилы.
Процентное соотношение количества Т-лимфоцитов в крови у разных возрастных групп:
- У новорожденных показатель составляет 14-36% от общего числа лейкоцитов.
- У грудных детей варьируется в пределах 41-78%.
- У детей от 12 месяцев до 15 лет постепенно снижается до 23-50%.
- У взрослых варьируется в диапазоне 18-36%.
Анализ количества Т-лимфоцитов является частным случаем общеклинического исследования крови. Данное исследование позволяет определить относительное и абсолютное содержание лимфоцитов в кровеносном русле. (иммунограмму) проводят для выявления концентрации лимфоцитов. Иммунограмма отображает показатели В и Т-клеток. Нормой Т-лимфоцитов принято считать 48-68%, а В-клеток – 4-18%. Соотношение Т-хелперов и Т-киллеров не должно в норме превышать 2.0.
Иммунологическое исследование крови (иммунограмма) Показания к проведению иммунограммы
Врачи назначают иммунограмму для исследования статуса иммунной системы. В первую очередь данное обследование крови необходимо больным ВИЧ-инфекцией или другими инфекционными заболеваниями.
Распространенные болезни, при которых показано прохождение иммунологического исследования:
- Заболевания ЖКТ.
- Непрекращающиеся или хронические инфекционные заболевания.
- Аллергические реакции неясного происхождения.
- Анемия различной этиологии (железодефицитная, гемолитическая).
- Хронические заболевания печени вирусной или идиопатической природы (гепатиты, цирроз).
- Постоперационные осложнения.
- Подозрение на онкозаболевания.
- Сильные воспалительные процессы, которые продолжаются несколько недель.
- Оценка эффективности иммуностимулирующих препаратов.
- Подозрение на аутоиммунные болезни (ревматоидный артрит, миастения).
В зависимости от лечащего врача могут быть и другие показания к проведению иммунологического обследования.
Интерпретация результатов анализов
Общее содержание лимфоцитов в крови
Чрезмерное повышение уровня лимфоцитов (CD3+ Т-клеток) в крови может указывать на инфекционные или воспалительные процессы. Такое состояние наблюдается при хронических лейкозах или бактериальных инфекциях. Снижение абсолютного числа Т-клеток указывает на дефицит клеточно-эффекторного иммунитета. Пониженное количество Т-лимфоцитов наблюдается при злокачественных новообразованиях, сердечном приступе, применении цитостатических препаратов или травмах различной этиологии.
В-клетки
Повышенные показатели В-лимфоцитов (CD19+ Т-клетки) наблюдаются при аутоиммунных заболеваниях, болезнях печени, бронхиальной астме, грибковых или бактериальных инфекциях. Хронический лимфолейкоз может стать причиной повышенного содержания В-лимфоцитов в кровеносном русле. Пониженные показатели В-лимфоцитов появляются при доброкачественных новообразованиях, агаммаглобулинемии или после удаления селезенки.
Т-хелперы
Если повышаются показатели абсолютного и относительного содержания Т-клеток с фенотипом СД3+CД4 (Т-хелперов), то это указывает на наличие аутоиммунных заболеваний, аллергических реакций или инфекционных болезней. Если чрезмерно понижаются показатели содержания Т-клеток в крови, то это признак ВИЧ, пневмонии, злокачественных новообразований или лейкоза.
ЦТЛ
Естественные (N) киллеры
Снижение общего количества натуральных киллеров с фенотипом CD16 ведет к развитию онкологических, вирусных, аутоиммунных заболеваний. Повышение приводит к отторжению трансплантата и осложнениям различной этиологии.
Совет! Вышеуказанные данные предоставлены в ознакомительных целях. Выполнять анализ показателей может только квалифицированный специалист. Для подтверждения или исключения диагноза необходимы дополнительные обследования. Не занимайтесь самодиагностикой или лечением – обратитесь за консультацией к лечащему врачу.
Еще:
Причины повышения и понижения лимфоцитов в крови, общепризнанные нормы
Их основной функцией является обеспечение защитной реакции организма на раздражители (патогенные микроорганизмы, гистамины, паразиты и т.д.). Лимфоциты также отвечают за «иммунную память» организма. В отличие от других видов лейкоцитов, они сражаются больше не с внешними агентами, а с внутренними, например, с собственными пораженными клетками (мутирующими, раковыми, вирусными и т.д.).
Виды лимфоцитов и их функция
Попадая в кровь, лимфоциты проживают в «базовом» виде пару суток, затем железы организма распределяют их на различные функциональные подвиды, что позволяет лимфоцитам более точно реагировать на патогенные микроорганизмы.
Т-лимфоциты
Вилочковая железа (тимус) отвечает за создание Т-лимфоцитов из 80% базовых. После «обучения» Т-лимфоциты, в свою очередь, распределяются на подвиды:
- Т-хелперы (помощники);
- Т-киллеры (убийцы);
- Т-супрессоры (ограничители).
Убийцы, естественно, обучены атаковать инородные агенты и устранять их. Помощники вырабатывают специальные компоненты, которые поддерживают и улучшают функцию киллеров. Супрессоры буквально ограничивают ответ иммунитета на вторжение, чтобы предотвратить активное расщепление здоровых клеток собственного организма.
В-лимфоциты
Из базового набора до 15% белых клеток становятся В-лимфоцитами. Они считаются одними из самых важных клеток иммунитета. Им достаточно один раз встретится с чужеродным агентом (бактерия, гистамин, грибок, вирус и т.д.), чтобы навсегда запомнить и его, и способ борьбы с ним, что делает реакцию иммунитета в будущем более быстрой и точной. Благодаря функции приспособления В-лимфоцитов появляется иммунная устойчивость на всю жизнь, а также повышается эффективность прививания.
NK-лимфоциты
Naturalkiller (NK) с английского переводится как «естественные (природные) убийцы», что максимально точно соответствует назначению этих агентов. Только 5% базовых лимфоцитов перерождаются в NK-лимфоциты. Этот подвид полностью отвечает за устранение собственных клеток, если в них образуются маркеры поражений вирусами или раком.
Показания к анализу
Анализ на лимфоциты проводят в рамках клинического (общего) исследования крови с лейкоцитарной формулой . Назначают его при диагностике следующих патологий:
- общие воспалительные процессы в острой и хронической форме;
- аутоиммунные заболевания;
- инфекционные, вирусные или грибковые поражения;
- нагноение и сепсис;
- внутреннее кровотечение;
- онкология;
- аллергическая реакция;
- патологическое протекание беременности;
- заболевания кроветворной и кровеносной системы;
- патологии лимфатической системы;
- лучевая болезнь;
- контроль эффективности лечения.
Норма лимфоцитов
Белые клетки оценивают так же, как и лейкоциты, на основании абсолютного (LYM#) и относительного (LYM%) показателей.
В случае выявления аномальных значений назначаются дополнительные анализы, которые позволяют точно определить количество подвидов лимфоцитов. Как правило, такая потребность возникает для оценки активности иммунного процесса, ответа и памяти.
Лимфоциты повышены (лимфоцитоз)
В результате анализа может быть выявлено превышение нормы лимфоцитов, положенной по возрасту и индивидуальным физиологическим показателям. Такое отклонение называется лимфоцитоз и свидетельствует о следующем:
- в организме присутствуют воспалительные или инфекционные процессы, вирусные, бактериальные патологии;
- в патогенезе заболевания наблюдается пик или переход на раннюю стадию выздоровления;
- наличие болезни, которая, как правило, встречается один раз в жизни и вырабатывает стойкий иммунитет (ветрянка, мононуклеоз, краснуха, корь и другие);
- отравление организма тяжелыми металлами (свинец), химическими компонентами (мышьяк, тетрахлорэтан), некоторыми медицинскими препаратами. Уровень лимфоцитов в этом случае позволит оценить величину и опасность принятой дозы;
- онкологические процессы.
Лимфоциты понижены (лимфопения)
Количество лимфоцитов может сокращаться в трех случаях:
Были поражены органы и системы, ответственные за кроветворение и конкретно за образования лимфоцитов. В этом случае причиной низкого уровня лимфоцитов могут стать:
- все виды анемии (железодефицитная, фолиеводефицитная, апластическая);
- болезни крови (лейкозы);
- лимфосаркома, лимфогранулематоз;
- раковые опухоли и методы их лечения (химио- и лучевая терапия);
- болезнь Иценко-Кушинга.
Организм произвел выброс лимфоцитов для устранения инородного агента, белые клетки погибли, и анализ был произведен именно в этот момент (еще до созревания новых «защитников»). Это могло произойти в процессе болезни на ранней стадии (до наступления пика). Иногда низкие лимфоциты дают и «продолжительные» патологии, такие как СПИД, ВИЧ и туберкулез.
Лечение некоторыми группами препаратов, например, кортикостероидами, цитостатиками и пр.
Низкий уровень лимфоцитов зачастую свидетельствует о серьезных и даже неизлечимых патологиях.
Расшифровку анализа проводит врач-гематолог, консультируясь с диагностом, инфекционистом и онкологом. Чем раньше будет проведен анализ, тем больше вероятность определить заболевание на ранней стадии и обеспечить эффективное лечение пациента.
Подготовка к процедуре
Подготовка к анализу предполагает следующие действия:
- перед сдачей крови в течение 10-12 часов нельзя употреблять пищу. Поэтому анализ назначают на утреннее время (обычно до 12 часов), кроме случаев, когда уровень лимфоцитов необходимо контролировать регулярно. У грудничков процедуру проводят через 1,5-2 часа после кормления.
- воду можно пить только без газа, а за 1-2 часа до процедуры воздержаться и от нее. Соки, горячие напитки, газировка и т.д. запрещены.
- за 24 часа до процедуры необходимо исключить алкоголь, острую и тяжелую пищу, а за 2 часа отказаться от курения или использования никотинозаменителей.
- перед сдачей крови нужно сообщить врачу о приеме лекарств и прохождении физиотерапевтических или других лечебных курсов. Желательно делать анализ до или через 2 недели после лечения.
- рекомендуется сдавать анализ (в том числе повторный) в лаборатории той больницы, где будет проходить дальнейшее обследование и лечение.
Для стандартного микроскопического исследования берут капиллярную кровь из пальца или из вены. У новорожденных забор крови может производиться из пятки.
Если в лаборатории применяются современные счетчики-цитометры, то для исследования необходимо не менее 5 мл материала. В этом случае забор крови осуществляется из вены.
Что может повлиять на результат
- Ошибка медсестры в процессе забора крови, а также нарушение правил хранения и транспортировки биоматериала;
- Ошибка лаборанта при изучении материала;
- Недобросовестность пациента, который нарушил правила подготовки к анализу;
- Любой, даже незначительный, стресс или физическая нагрузка непосредственно перед сдачей анализа;
- Медицинские манипуляции, проведенные накануне процедуры (рентгенография, физиотерапия, пункция, МРТ, КТ, массаж и т.д.);
- Резкое изменение положения тела перед сдачей крови также может дать ложноположительный результат;
- Менструации у женщин. Врачи советуют проводить анализ не раньше, чем на 4 день после окончания менструального кровотечения;
- Беременность. Пациентка должна предупредить врача перед забором крови о ранних сроках беременности.
Какова норма лимфоцитов в крови? Есть ли разница в их количестве у мужчин и женщин, детей и взрослых? Сейчас все расскажем. Уровень лимфоцитов в крови определяется в ходе общеклинических анализов с целью первичной диагностики наличия инфекционных заболеваний, аллергических реакций, а также при необходимости оценки побочных эффектов от лекарств и эффективности выбранного лечения.
Определение величины активированных лимфоцитов не является рутинным лабораторным исследованием и проводится исключительно при наличии показаний.
Данный анализ не выполняется отдельно от общего иммунологического обследования пациента или определения других лейкоцитарных клеток (эозинофилов, моноцитов, лимфоцитов в крови и т.д.) поскольку изолировано не имеет диагностической ценности.
Лимфоциты lymph – это белые кровяные клетки (разновидность лейкоцитов), посредствам которых реализуется защитная функция организма человека от чужеродных инфекционных агентов и собственных мутантных клеток.
Лимфоциты абс – это абсолютное число данного вида клеток, определяемое по формуле:
Общее количество лейкоцитов * Содержание лимфоцитов (%)/100
Активированные лимфоциты подразделяются на 3 субпопуляции:
- Т-лимфоциты – созревают в тимусе, ответственны за реализацию клеточного типа иммунного ответа (непосредственное взаимодействие иммунных клеток с патогенами). Они подразделяются на Т-хелперы (принимают участие в антигенпрезентации клеток, степени выраженности иммунной реакции и в синтезе цитокинов) и цитотоксические Т-лимфоциты (распознают чужеродные антигены и уничтожают их за счёт выброса токсинов или внедрения перфоринов, которые повреждают целостность цитоплазматической мембраны);
- В-лимфоциты — обеспечивают гуморальный иммунитет посредством выработки специфических белковых молекул – антител;
- NK-лимфоциты (натуральные киллеры) – растворяют клетки, зараженные вирусами или подвергшиеся злокачественному перерождению.
Известно, что лимфоциты в крови способны синтезировать на своей поверхности ряд антигенов, при этом, каждый из них уникален для своей субпопуляции и этапа формирования клетки. Функциональная активность подобных клеток различна. В большинстве случаев они являются мишенью для других лейкоцитов на этапе иммунофенотипирования.
Кластер дифференциации и его типы
Кластер дифференциации (cluster designation) – искусственно созданная номенклатура с присвоением номера различных антигенов, которые вырабатываются на поверхности лимфоцитов в крови. Синонимы термина: CD, CD-антиген или CD-маркер.
Во время лабораторной диагностики наличие меченых клеток в общей субпопуляции белых кровяных телец определяется при помощи моноклональных (одинаковых) антител с метками (на основе флюорохрома). При взаимодействии антител со строго специфичными CD-антигенами образуется устойчивый комплекс «антиген-антитело», при этом можно произвести подсчёт оставшихся свободными антител с меткой и определить количество лимфоцитов в крови.
Выделяют 6 типов кластеров CD-антигенов:
- 3 – характерен для Т-лимфоцитов, принимает участие в образовании комплекса передачи сигнала по мембране;
- 4 – идентифицируется на нескольких типах лейкоцитов, способствует облегчению процесса распознавания чужеродных антигенов при взаимодействии с MHC (главный комплекс гистосовестимости) 2 класса;
- 8 – представлен на поверхности цитотоксичных Т-, NK-клеток, функционал аналогичен предыдущему типу кластеров, только распознаются антигены связанные с MHC 1 класса;
- 16 – присутствует на различных видах белых кровяных телец, входит в состав рецепторов, отвечающих за активацию фагоцитоза и цитотоксичного ответа;
- 19 – компонент В-лимфоцитов, необходим для их правильной дифференциации и активации;
- 56 – вырабатывается на поверхности NK- и некоторых Т-клеток, необходим для обеспечения их прикрепления к тканям, поражённых злокачественными опухолями.
Показания к исследованию
Активированные лимфоциты в крови у ребёнка и взрослых определяются при:
- диагностике аутоиммунных заболеваний, онкопатологий, аллергических реакций и степени их выраженности;
- диагностике и контроле лечения острых инфекционных патологий;
- проведении дифференциальной диагностики вирусных и бактериальных инфекций;
- оценке состояния иммунной системы (в том числе и при наличии иммунодефицитов);
- оценке напряжённости иммунного ответа в случае наличия тяжёлых инфекций, ставших хроническими;
- комплексном обследовании до и после обширного хирургического вмешательства;
- подозрении на угнетение иммунного статуса, вызванного генетической мутацией;
- контроле степени напряжённости иммунитета на фоне приёма иммунодепрессанов или иммуностимуляторов.
Норма лимфоцитов в крови
Количество лимфоцитов в крови определяется при помощи проточной цитофлуориметрии, сроки исследования 2-3 суток без учёта дня взятия биоматериала. Важно грамотно интерпретировать полученные результаты, желательно приложение к иммунограмме заключения врача-иммунолога. Окончательный диагноз устанавливается по совокупности данных лабораторных и инструментальных методов обследования, а также клинической картины пациента.
Отмечено, что диагностическая ценность значительно возрастает при оценке напряжённости иммунитета у человека в динамике при регулярных повторных анализах.
Активированные лимфоциты в анализе крови у ребенка и взрослого отличаются, поэтому при расшифровке результатов следует подбирать нормальные (референсные) значения с учётом возраста пациента.
Таблица нормального диапазона лимфоцитов по возрасту
В таблице представлены величины допустимых норм лимфоцитов (отдельных субпопуляций) в крови у детей и взрослых.
| Возраст | Доля от общего числа лимфоцитов, % | Абсолютное количество клеток, *10 6 /л |
| CD 3 + (Т-лимфоциты) | ||
| До 3 месяцев | 50 – 75 | 2065 – 6530 |
| До 1 года | 40 – 80 | 2275 – 6455 |
| 1 – 2 года | 52 – 83 | 1455 – 5435 |
| 2 – 5 лет | 61 – 82 | 1600 – 4220 |
| 5 – 15 лет | 64 – 77 | 1410 – 2020 |
| Старше 15 лет | 63 – 88 | 875 – 2410 |
| CD3+CD4+ (Т-хелперы) | ||
| До 3 месяцев | 38 – 61 | 1450 – 5110 |
| До 1 года | 35 – 60 | 1695 – 4620 |
| 1 – 2 года | 30 – 57 | 1010 – 3630 |
| 2 – 5 лет | 33 – 53 | 910- 2850 |
| 5 – 15 лет | 34 – 40 | 720 – 1110 |
| Старше 15 лет | 30 – 62 | 540 – 1450 |
| CD3+CD8+ (Т-цитотоксические лимфоциты) | ||
| До 3 месяцев | 17 – 36 | 660 – 2460 |
| До 1 года | 16 – 31 | 710 – 2400 |
| 1 – 2 года | 16 – 39 | 555 – 2240 |
| 2 – 5 лет | 23 – 37 | 620 – 1900 |
| 5 – 15 лет | 26 – 34 | 610 – 930 |
| Старше 15 лет | 14 – 38 | 230 – 1230 |
| CD19+ (В-лимфоциты) | ||
| До 2 лет | 17 – 29 | 490 — 1510 |
| 2 – 5 лет | 20 – 30 | 720 – 1310 |
| 5 – 15 лет | 10 – 23 | 290 – 455 |
| Старше 15 лет | 5 – 17 | 100 – 475 |
| CD3-CD16+CD56+ (NK-клетки) | ||
| До 1 года | 2 – 15 | 40 – 910 |
| 1 – 2 года | 4 – 18 | 40 – 915 |
| 2 – 5 лет | 4 – 23 | 95 – 1325 |
| 5 – 15 лет | 4 – 25 | 95 – 1330 |
| Старше 15 лет | 4 – 27 | 75 – 450 |
| Старше 15 лет | 1 – 15 | 20-910 |
Отклонение от референсных показателей
Пациенты задаются вопросом: что означает, если лимфоциты в крови выше или ниже нормы? Следует отметить, что незначительное отклонение от референсных значений может быть результатом неправильной подготовки к анализу. В этом случае рекомендуется повторить исследование.
Присутствие большого количества атипичных лимфоцитов в анализе крови у ребёнка или взрослого указывает на патологический процесс. Важно определить то, какой именно тип из общей субпопуляции белых кровяных телец отклоняется от нормы.
Т-лимфоциты
Повышение Т-лимфоцитов (CD3+CD19-) наблюдается на фоне лейкоза, острой или хронической стадии инфекционного процесса, гормонального сбоя, длительного употребления лекарств и биологических добавок, а также при высоких физических нагрузках и беременности. В случае снижения критерия выносится предположение о поражении печени (цирроз, рак), аутоиммунных патологиях, иммунодефицитах или угнетении иммунитета лекарственными препаратами.
T-хелперы
Концентрация T-хелперов (CD3 + CD4 + CD45 +) значительно повышается при интоксикации бериллием, ряде аутоиммунных заболеваний и некоторых инфекционных заражениях. Снижение величины является основным лабораторным признаком вторичного иммунодефицита, а также может наблюдаться при приёме стероидных препаратов и циррозе печени.
Повышение T-цитотоксических лимфоцитов
Причинами повышения T-цитотоксических лимфоцитов (CD3 + CD8 + CD45 +) являются:
- аллергическая реакция немедленного типа;
- аутоиммунные патологии;
- лимфоз;
- вирусная инфекция.
Отклонение от нормы в меньшую сторону указывает на угнетение естественного иммунитета человека.
B-лимфоциты (CD19 + CD3 —) увеличиваются при сильном эмоциональном или физическом стрессе, лимфоме, аутоиммунных болезнях, а также в случае длительной интоксикации парами формальдегида. Реактивные лимфоциты В уменьшаются в случае их миграции в очаг воспалительного процесса.
Два типа натуральных киллеров: CD3 — CD56 + CD45 + и CD3 — CD16 + CD45 + достигают максимальных значений в фазе регенерации организма человека после гепатита и беременности, а также при некоторых онко-, аутоиммунных и печёночных патологиях. Их снижению способствует злоупотребление табакокурением и стероидными препаратами, а также некоторые инфекции.
Как подготовиться к анализу?
Для того чтобы получить максимально достоверные результаты необходимо строго следовать правилам подготовки перед сдачей биоматериала, поскольку лимфоциты в крови чувствительны ко многим внешним факторам (стресс, лекарства). Биоматериал для исследования – сыворотка венозной крови из локтевой вены.
За 1 сутки до сдачи крови пациенту следует отказаться от употребления алкоголя и любых спиртосодержащих продуктов, а также от всех медикаментозных препаратов. В случае невозможности отмены жизненно важных средств нужно сообщить об их приёме мед. персоналу. Кроме того, исключается физическая и эмоциональная нагрузка, что может вызвать повышение исследуемых критериев.
Кровь сдаётся натощак, минимальный интервал между процедурой взятия биоматериала и последним приёмом пищи – 12 часов. За полчаса нужно отказаться от курения.
Выводы
Подводя итог, следует выделить важные аспекты:
- исследование является основным компонентом при диагностике поражений иммунной системы;
- нормальные значения подбираются в соответствии с возрастом обследуемого пациента;
- точность полученных данных зависит не только от правильной реализации методики анализа, но и соблюдения всех правил подготовки самого человека;
- недопустимо отдельное применение иммунограммы для постановки окончательного диагноза, поскольку отклонение от нормы различных субпопуляций клеток иммунной системы может указывать на ряд схожих патологий. В этом случае назначается дополнительное обследование, включающее набор тестов: С3 и С4 компонента комплемента, циркулирующие иммунные комплексы, а также суммарные иммуноглобулины классов А, G и M. Подробнее
Наконец-то у меня на руках все результаты анализов на иммунный статус и пищевую аллергию. Если вы не смотрели первую часть статьи – просьба ознакомиться, во избежание возникновения лишних вопросов.
Признаться честно, увидев результаты, я сначала сильно огорчился, потом обрадовался, потом снова огорчился, но уже не так сильно как в первый раз:D Итак, приступим.
Не будем тянуть сами знаете кого за сами знаете что. Красным выделены показатели, результаты по которым превышают норму, зеленым – результаты ниже нормы.
| Исследование | Значение | Норма |
| 0-лимфоциты, % | 10,9 | 16 – 24 |
| 0-лимфоциты, х10*9/л | 0,119 | 0,3 – 0,5 |
| B1 лимфоциты CD19+5+, % | 0,8 | 0,5 – 2,1 |
| B1 лимфоциты CD19+5+, % от CD19+ | 35,242 | 4,1 – 17,5 |
| B1 лимфоциты CD19+5+, х10*9/л | 0,009 | 0,022 – 0,115 |
| B2 лимфоциты CD19+5-, % | 1,47 | 6,5 – 14,9 |
| B2 лимфоциты CD19+5-, % от CD19+ | 64,758 | 82,1 – 96,3 |
| B2 лимфоциты CD19+5-, х10*9/л | 0,016 | 0,081 – 0,323 |
| CD16+ CD56+ (NK-клетки), % | 2,46 | 5 – 20 |
| CD16+ CD56+ (NK-клетки), х10*9/л | 0,027 | 0,2 – 0,4 |
| CD16+ CD56- (NK-клетки), % | 3,79 | 1,1 – 2,9 |
| CD16- CD56+ (NK-клетки), % | 3,13 | 2,7 – 5 |
| CD19+ (В-лимфоциты), % | 2,4 | 8 – 19 |
| CD19+ (В-лимфоциты), х10*9/л | 0,026 | 0,19 – 0,38 |
| CD3+ (Т-лимфоциты), % | 86,7 | 58 – 76 |
| CD3+ (Т-лимфоциты), х10*9/л | 0,949 | 1,1 – 1,7 |
| CD3+CD25+(активированные T-лимфоциты), % | 5,45 | до 6 |
| CD3+HLA-DR+, % | 5,31 | 2 – 12 |
| CD3+HLA-DR+, x10*9/л | 0,058 | 0,03 – 0,2 |
| CD4+ (Т-хелперы), % | 47,3 | 36 – 55 |
| CD4+ (Т-хелперы), х10*9/л | 0,518 | 0,4 – 1,1 |
| CD4+ / CD8+ | 1,429 | 1,5 – 2,5 |
| CD4+25+127- bright (T-reg), % от CD4+ | 1,16 | 1,65 – 5,75 |
| CD4+25+127- bright (T-reg), х10*9/л | 0,006 | 0,009 – 0,078 |
| CD8+ (Т-супресс./цитотокс.), % | 33,1 | 17 – 37 |
| CD8+ (Т-супресс./цитотокс.), х10*9/л | 0,362 | 0,3 – 0,7 |
| КАФ (количество активных фагоцитов) | 2,692 | 1,6 – 5 |
| Фагоцитарная емкость крови | 24,228 | 12,5 – 25 |
| Фагоцитарное число | 7,2 | 5 – 10 |
| Фагоцитарный показатель, % | 80 | 65 – 95 |
Я не зря выделил показатель CD4+ / CD8+ . Что это такое, с чем его едят и почему он так важен – об этом ниже.
Чем характеризуется неспецифический язвенный колит? С точки зрения иммунной природы заболевания, НЯК возникает из-за чрезмерного объема антител против своих собственных клеток, принимая их за чужеродные. Далее по тексту будет много определений, я постараюсь представить их в более удобоваримой и понятной форме.
CD4 характерен для хелперных Т-клеток, представлен также на моноцитах, макрофагах, дендритных клетках. Т-хелперы – это индукторы иммунного ответа. Они регулируют силу ответа на враждебный антиген и контролируют антигенную саморегуляцию.
Причины повышения уровня CD4:
- Аутоиммунные заболевания.
- Цирроз печени, гепатиты.
- Болезнь Вальденстрема.
- Тиреоидит Хашимото.
Причины снижение уровня CD4:
- Врожденные иммунодефициты.
- Злокачественные опухоли.
- Ионизирующее излучение.
- Лечение цитостатиками, иммунодепрессантами.
- Недостаточность питания.
Отсеиваем лишнее и получаем возможную причину снижение уровня CD4: цитостатики ( , ).
CD8 характерен для супрессорных и/или цитотоксических Т-клеток, большей части тимоцитов. Задача Т-лимфоцитов-супрессоров – угнетение иммунного ответа организма. Они тормозят выработку антител различных классов вследствие задержки пролиферации и дифференцировки В-лимфоцитов, а также развитие гиперчувствительности замедленного типа. При нормальном иммунном ответе на попадание в организм чужеродного антигена максимальная активация Т-супрессоров отмечается спустя 3-4 недели.
Причины повышения уровня CD8:
- Инфекции с хроническим и затяжным течением.
- Туберкулез, лепра, ВИЧ-инфекция.
- Тяжелые ожоги, обширные травмы.
- Ионизирующее излучение.
- Недостаточность питания.
Причины снижения уровня CD8:
- Врожденные иммунодефициты.
- Аутоиммунные заболевания.
- Цирроз печени, гепатиты.
- Тромбоцитопения, приобретенная гемолитическая анемия.
- Болезнь Вальденстрема.
- Тиреоидит Хашимото.
- Активация антитрансплантационного иммунитета.
У меня CD8 в норме.
Ведущее значение в оценке состояния иммунной системы имеет соотношение Т-хелперов (CD4) и Т-супрессоров (CD8) в крови, так как от этого зависит интенсивность иммунного ответа. С нижение функции Т-супрессоров ведет к преобладанию стимулирующего влияния Т-хелперов, в том числе и на те В-лимфоциты, которые продуцируют аутоантитела (те самые избыточные). При этом их количество может достигнуть критического уровня, что способно вызвать повреждение собственных тканей организма.
О-лимфоциты (нулевые лимфоциты) – это лимфоциты, отличающиеся по своим поверхностным свойствам как от В-лимфоцитов, так и от Т-лимфоцитов. Часть этих клеток несут на своей поверхности рецепторы для , уничтожая любые клетки, на поверхности которых присутствует данного класса. К О-лимфоцитам относятся также естественные клетки-киллеры, действующие независимо от наличия антител.
Главные функции О-лимфоцитов:
- Обеспечение противоопухолевого иммунитета.
- Обеспечение противоинфекционного иммунитета.
О чем говорит снижение показателей? Правильно, о слабой защите от вышеупомянутых проблем с онкологией и инфекциями. Предполагаю, что причиной является Ремикейд, последняя капельница которого была мне установлена в ноябре 2015 года.
Следующие по списку – B-лимфоциты, а точнее группа CD19.
CD19 присутствует на B-клетках, их предшественниках, фолликулярных дендритных клетках и считается самым ранним маркером B-клеточной дифференциации. Регулирует развитие, дифференциацию и активацию B-лимфоцитов.
Причины снижения CD19:
- Новообразования иммунной системы.
- Лечение цитостатиками и иммунодепрессантами.
- Спленэктомия.
- Ионизирующее излучение.
- Недостаточность гуморального .
Что мы видим: из всех показателей CD19 (“B1 лимфоциты CD19+5+, %”, “B1 лимфоциты CD19+5+, % от CD19+”, “B1 лимфоциты CD19+5+, х10*9/л”, “B2 лимфоциты CD19+5-, %”, “B2 лимфоциты CD19+5-, % от CD19+”, “B2 лимфоциты CD19+5-, х10*9/л”, “CD19+ (В-лимфоциты), %” и “CD19+ (В-лимфоциты), х10*9/л”) у меня завышен, притом почти в два раза, только второй (“B1 лимфоциты CD19+5+, % от CD19+”). Да, это может косвенно подтверждать наличие у меня НЯК. Насчет показателей ниже нормы – опять же, привет Азатиоприну и Ремикейду.
CD3 – поверхностный маркер, специфичный для всех клеток субпопуляции Т-лимфоцитов. Зрелые Т-лимфоциты отвечают за реакции клеточного иммунитета и осуществляют иммунологический надзор за антигенной саморегуляцией в организме. Т-лимфоциты выполняют в организме две важные функции: эффекторную и регуляторную.
Эффекторная функция Т-лимфоцитов – специфическая цитотоксичность по отношению к чужеродным клеткам. Регуляторная функция (система Т-хелперы/Т-супрессоры) – контроль за интенсивностью развития специфической реакции иммунной системы на чужеродные антигены.
Причины повышения уровня CD3:
- Гиперактивность иммунитета.
- Острый и хронический лимфолейкоз.
- Синдром Сезари.
Причины снижения уровня CD3:
- Врожденные иммунодефициты.
- Инфекции с хроническим и затяжным течением.
- Туберкулез, лепра, ВИЧ-инфекция.
- Т-клеточная лимфома, волосатоклеточный лейкоз.
- Тяжелые ожоги, обширные травмы.
- Ионизирующее излучение.
- Лечение , иммунодепрессантами.
- Недостаточность .
Из пяти позиций с CD3 у меня один показатель завышен, один занижен, и другие в норме. О чем может говорить повышение “CD3+ (Т-лимфоциты), %”? В результате несложного отсеивания остается гиперактивный иммунитет.
Гиперактивность или гиперчувствительность иммунной системы – это нежелательная повышенная реакция иммунитета к какому-либо веществу. Иммунная система агрессивно и неадекватно реагирует на вполне безобидные вещества.
