એગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા (lat માંથી. સંચય- ગ્લુઇંગ) - ઇલેક્ટ્રોલાઇટ્સની હાજરીમાં એન્ટિબોડીઝ દ્વારા કોર્પસ્કલ્સ (બેક્ટેરિયા, લાલ રક્ત કોશિકાઓ, વગેરે) નું ગ્લુઇંગ.
એગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાએન્ટિબોડીઝ (ફિગ. 7.37) દ્વારા "એકસાથે ગુંદર ધરાવતા" કોર્પસકલ્સ (ઉદાહરણ તરીકે, બેક્ટેરિયા) નો સમાવેશ થતો ફ્લેક્સ અથવા કાંપના સ્વરૂપમાં પોતાને પ્રગટ કરે છે. એગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ આ માટે થાય છે: દર્દીથી અલગ પેથોજેન નક્કી કરવા; દર્દીના લોહીના સીરમમાં એન્ટિબોડીઝનું નિર્ધારણ; રક્ત જૂથોનું નિર્ધારણ.
ચોખા. 7.37 એ, બી. સાથે એગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાઆઇજીએમ- એન્ટિબોડીઝ (a) અનેઆઇજીજી- એન્ટિબોડીઝ (બી)
1. દર્દીથી અલગ પેથોજેનનું નિર્ધારણ અંદાજિત પ્રતિક્રિયાકાચ પર એગ્ગ્લુટિનેશન (ફિગ. 7.38). દર્દીથી અલગ કરાયેલા બેક્ટેરિયાનું સસ્પેન્શન એગ્લુટિનેટિંગ સીરમ (1:20 ડિલ્યુશન)ના ડ્રોપમાં ઉમેરવામાં આવે છે. એક flocculent અવક્ષેપ સ્વરૂપો.
ચોખા. 7.38.
દર્દીથી અલગ પડેલા પેથોજેન સાથે વ્યાપક એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા (ફિગ. 7.39). દર્દીથી અલગ કરાયેલા બેક્ટેરિયાનું સસ્પેન્શન એગ્લુટિનેટિંગ સીરમના મંદનમાં ઉમેરવામાં આવે છે.
ચોખા. 52
2. દર્દીના લોહીના સીરમમાં એન્ટિબોડીઝનું નિર્ધારણ
દર્દીના લોહીના સીરમ સાથે વિગતવાર એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા (ફિગ. 7.39). ડાયગ્નોસ્ટિકમ દર્દીના સીરમના ઘટાડામાં ઉમેરવામાં આવે છે.
- ઓ-ડાયગ્નોસ્ટિકમ (બેક્ટેરિયા ગરમીથી માર્યા જાય છે, ઓ-એન્ટિજન જાળવી રાખે છે) સાથે એગ્ગ્લુટિનેશન ફાઇન-ગ્રેઇન્ડ એગ્ગ્લુટિનેશનના સ્વરૂપમાં થાય છે.
- એચ-ડાયગ્નોસ્ટિકમ સાથે એગ્ગ્લુટિનેશન (ફોર્માલ્ડિહાઇડ દ્વારા માર્યા ગયેલા બેક્ટેરિયા, ફ્લેગેલર એચ-એન્ટિજેન જાળવી રાખે છે) મોટું છે અને ઝડપથી થાય છે.
3. રક્ત જૂથો નક્કી કરવા માટે એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયારક્ત જૂથો નક્કી કરવા માટે એગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ એબીઓ સિસ્ટમ (કોષ્ટક b) સ્થાપિત કરવા માટે થાય છે જે રક્ત જૂથ એન્ટિજેન્સ A (I), B (III) સામે રોગપ્રતિકારક સીરમ એન્ટિબોડીઝ સાથે એરિથ્રોસાઇટ્સના એકત્રીકરણનો ઉપયોગ કરે છે. નિયંત્રણ છે: સીરમ જેમાં એન્ટિબોડીઝ નથી, એટલે કે. સીરમ એબી (IV) રક્ત જૂથ; A (II), B (III) જૂથોના લાલ રક્ત કોશિકાઓમાં સમાયેલ એન્ટિજેન્સ. નકારાત્મક નિયંત્રણમાં એન્ટિજેન્સ નથી, એટલે કે, જૂથ O (I) એરિથ્રોસાઇટ્સનો ઉપયોગ થાય છે.
કોષ્ટક 7.6. ABO રક્ત જૂથોનું નિર્ધારણ
| પ્રતિક્રિયા પરિણામો |
સમૂહ |
|
|
સંબંધિત |
||
|
સંશોધન કર્યું |
||
|
સાથે લાલ રક્ત કોશિકાઓ |
સીરમ (પ્લાઝમા) |
|
|
ધોરણ |
ધોરણ સાથે |
|
|
સીરમ | ||
વિગતવાર એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા (આરએ). દર્દીના લોહીના સીરમમાં એટી નક્કી કરવા માટે, એ વ્યાપક એકત્રીકરણ પ્રતિક્રિયા (RA). આ કરવા માટે, બ્લડ સીરમના મંદનની શ્રેણીમાં ડાયગ્નોસ્ટિકમ ઉમેરવામાં આવે છે - માર્યા ગયેલા સુક્ષ્મસજીવોનું સસ્પેન્શન અથવા સોર્બ્ડ એજી સાથેના કણો. મહત્તમ મંદન આપવી એકત્રીકરણ Ag ને સીરમ ટાઇટર કહેવામાં આવે છે.
એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાના પ્રકાર (આરએ) એટી શોધવા માટે - તુલેરેમિયા માટે બ્લડ-ડ્રોપ ટેસ્ટ (લોહીના ટીપા પર ડાયગ્નોસ્ટિકમ લાગુ કરવામાં આવે છે અને દેખાતા સફેદ રંગના એગ્લુટિનેટ્સ દેખાય છે) અને બ્રુસેલોસિસ માટે હડલસન ટેસ્ટ (લોહીના ટીપા પર જેન્ટિયન વાયોલેટથી ડાઘવાળું ડાયગ્નોસ્ટિકમ લાગુ પડે છે. સીરમ).
અંદાજિત એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા (RA)
આઇસોલેટેડ સુક્ષ્મસજીવોને ઓળખવા માટે, કાચની સ્લાઇડ્સ પર અંદાજિત RA મૂકવામાં આવે છે. આ કરવા માટે, પ્રમાણભૂત ડાયગ્નોસ્ટિક એન્ટિસેરમ (1:10, 1:20 પાતળું) ના ડ્રોપમાં પેથોજેન કલ્ચર ઉમેરવામાં આવે છે. મુ હકારાત્મક પરિણામએન્ટિસેરમના વધતા મંદન સાથે વિગતવાર પ્રતિક્રિયા કરો.
પ્રતિક્રિયાજો ડાયગ્નોસ્ટિક સીરમના ટાઇટરની નજીકના મંદનમાં એગ્ગ્લુટિનેશન જોવા મળે તો તેને સકારાત્મક માનવામાં આવે છે.
OAS. સોમેટિક O-Agsગરમી સ્થિર હોય છે અને 2 કલાક સુધી ઉકળતાનો સામનો કરી શકે છે.એટી સાથે ક્રિયાપ્રતિક્રિયા કરતી વખતે, તેઓ ઝીણા દાણાવાળા એકંદર બનાવે છે.
એન-એજી. N-Ag (ફ્લેજલેટ્સ)તે થર્મોલેબિલ હોય છે અને 100 °C પર, તેમજ ઇથેનોલના પ્રભાવ હેઠળ ઝડપથી અધોગતિ પામે છે. એચ-એન્ટીસેરમ સાથેની પ્રતિક્રિયાઓમાં, સેવનના 2 કલાક પછી, છૂટક મોટા ટુકડાઓ રચાય છે (ફ્લેગેલા સાથે મળીને ચોંટેલા બેક્ટેરિયા દ્વારા રચાય છે).
વિ-અરટાઇફોઇડ બેક્ટેરિયા પ્રમાણમાં ગરમી-સ્થિર હોય છે (2 કલાક માટે 60-62 °C તાપમાનનો સામનો કરે છે); જ્યારે Vi antiserum સાથે સેવન કરવામાં આવે છે, ત્યારે ઝીણા દાણાવાળા એગ્લુટિનેટની રચના થાય છે.
ડાયરેક્ટ હેમેગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાઓ
આમાંથી સૌથી સરળ પ્રતિક્રિયાઓ - એકત્રીકરણલાલ રક્ત કોશિકાઓ, અથવા હેમાગ્ગ્લુટિનેશન, ABO સિસ્ટમમાં રક્ત જૂથો નક્કી કરવા માટે વપરાય છે. નક્કી કરવા માટે એકત્રીકરણ(અથવા તેનો અભાવ) એન્ટિ-એ અને એન્ટિ-બી એગ્ગ્લુટીનિન સાથે પ્રમાણભૂત એન્ટિસેરાનો ઉપયોગ કરો. પ્રતિક્રિયાને પ્રત્યક્ષ કહેવામાં આવે છે, કારણ કે જે Agsનો અભ્યાસ કરવામાં આવે છે તે લાલ રક્ત કોશિકાઓના કુદરતી ઘટકો છે.
સાથે સામાન્ય ડાયરેક્ટ હેમેગ્ગ્લુટિનેશનવાયરલ હેમેગ્ગ્લુટિનેશનમાં મિકેનિઝમ હોય છે. ઘણા વાયરસ પક્ષીઓ અને સસ્તન પ્રાણીઓના એરિથ્રોસાઇટ્સને સ્વયંભૂ રીતે એકત્ર કરવામાં સક્ષમ હોય છે; એરિથ્રોસાઇટ્સના સસ્પેન્શનમાં તેમનો ઉમેરો તેમનામાંથી એકત્રીકરણનું કારણ બને છે.
એગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા એગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા
(આરએ) - ઓળખવાની પદ્ધતિ અને પ્રમાણીકરણ Ag અને At, નરી આંખે જોઈ શકાય તેવા એગ્લોમેરેટ્સ બનાવવાની તેમની ક્ષમતાના આધારે. ચેપી રોગો વિભાગમાં. રોગો અથવા અન્ય હેતુઓ માટે અજ્ઞાત સૂક્ષ્મજીવાણુઓ અને કોષોને ઓળખવા, રક્ત અને અન્ય પ્રવાહીમાં Abની હાજરી અને માત્રા નક્કી કરવા માટે વપરાય છે. નિર્ધારણ સિદ્ધાંત Ag અને Ab વચ્ચેની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાની વિશિષ્ટતા પર આધારિત છે અને તે અજાણ્યામાંથી જાણીતાને શોધવાનો સમાવેશ કરે છે. આરએ માટે ઘણા વિકલ્પો છે: માત્રાત્મક અને ગુણાત્મક, ટેસ્ટ ટ્યુબ અને કાચ, વોલ્યુમેટ્રિક અને ટીપું, પરંપરાગત, પ્રવેગિત અને એક્સપ્રેસ પદ્ધતિઓ. સ્ટેજ RA માટે તમારે આની જરૂર છે: 1) s-ka લોહી.બેક્ટેરિયાના પ્રકાર (var) ને નિર્ધારિત કરવાના પ્રકારમાં, ઔદ્યોગિક એગ્લુટિનેટિંગ પરીક્ષણોનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે, જે સસલાને રોગપ્રતિરક્ષા દ્વારા બનાવવામાં આવે છે. એબના પ્રકારના નિર્ધારણ સાથેના પ્રકારમાં, પરીક્ષણમાંથી લોહીનો નમૂનો લેવામાં આવે છે. લોકો અથવા પ્રાણીઓ. સોલ્યુશન જંતુરહિત અને સસ્પેન્ડેડ કણોથી મુક્ત હોવું જોઈએ. ખારા ઉકેલમાં મૂળભૂત મંદન તૈયાર કરો. તે આ રોગ માટે ડાયગ્નોસ્ટિક ટાઇટર કરતાં 2-4 ગણું ઓછું હોવું જોઈએ; 2) એજી.એબ પ્રકારના નિર્ધારણ સાથેની પ્રતિક્રિયાના સંસ્કરણમાં, ઔદ્યોગિક ડાયગ્નોસ્ટિક કિટ્સનો ઉપયોગ થાય છે; એજીના નિર્ધારણ સાથેના પ્રકારમાં, ડાયગ્નોસ્ટિકમ 18-20-કલાકના અગર (ઓછી વાર સૂપ) પરીક્ષણના ખારા દ્રાવણમાં 1-3 બિલિયન સસ્પેન્શનના સ્વરૂપમાં તૈયાર કરવામાં આવે છે. પાણીના સ્નાનમાં 1 કલાક માટે 70 ડિગ્રી સેલ્સિયસ પર ગરમ કરીને અથવા ફોર્માલ્ડિહાઇડ (અંતિમ સાંદ્રતા 0.2%) સાથે 37 ડિગ્રી સેલ્સિયસ પર 24-કલાકના સેવનથી સૂક્ષ્મજીવાણુ નિષ્ક્રિય થાય છે; 3) ખારા ઉકેલના સ્વરૂપમાં ઇલેક્ટ્રોલાઇટ.સ્ટેજીંગ તકનીક વોલ્યુમેટ્રિક સીરીયલ ટ્યુબએસ-કીમાં એબ ટાઇટર નક્કી કરવા માટે આરએ: એસ-કીના મુખ્ય મંદનમાંથી વર્કિંગ ડિલ્યુશનની ઘણી પંક્તિઓ તૈયાર કરવામાં આવે છે. પંક્તિઓની સંખ્યા પ્રયોગમાં લેવામાં આવેલા ડાયગ્નોસ્ટિકમ્સની સંખ્યા પર આધારિત છે; સંખ્યા અને મંદન પરિબળો શંકાસ્પદ રોગના ડાયગ્નોસ્ટિક ટાઇટર દ્વારા નક્કી કરવામાં આવે છે. શ્રેણીમાં ઓછામાં ઓછું ડાયગ્નોસ્ટિક એબ ટાઇટરને અનુરૂપ મંદન હોવું જોઈએ, નીચે બે મંદન અને તેની ઉપર બે મંદન. ઉદાહરણ તરીકે, જો ડાયગ્નોસ્ટિક ટાઇટર 1:100 છે, તો પછી સ્ટેજીંગ આરએની વોલ્યુમેટ્રિક પદ્ધતિ સાથે નીચેના ડિલ્યુશન તૈયાર કરવા જોઈએ: 1:25, 1:50, 1:100, 1:200, 1"400; ટપક સાથે પદ્ધતિ, પ્રથમ મંદન (1:25) જરૂરી નથી, પરંતુ અન્ય ઉચ્ચ મંદન જરૂરી છે - 1:800. વૈજ્ઞાનિક સંશોધન s-ku ને ટાઇટરેટ કરેલ છે નકારાત્મક પ્રતિક્રિયા. તે નીચે પ્રમાણે પાતળું કરવામાં આવે છે: 0.25 મિલી ક્ષારયુક્ત દ્રાવણ તમામ ટેસ્ટ ટ્યુબમાં રેડવામાં આવે છે, પ્રથમ એક સિવાય, જ્યારે પ્રતિક્રિયા 0.5 મિલીના જથ્થામાં કરવામાં આવે છે, અને જ્યારે પ્રતિક્રિયા 1 ની માત્રામાં કરવામાં આવે છે ત્યારે 0.5 મિલી. મિલી 0.25 (0.5) મિલી મુખ્ય મંદન 1લી અને 2જી ટેસ્ટ ટ્યુબમાં, 2જી ટેસ્ટ ટ્યુબમાંથી, કટ વોલ્યુમમાં રેડો અને સંવર્ધન s-kઅને 2 ગણો વધારો થયો છે, 0.25 (0.5) મિલી 3જી, 3જીથી 4જી, વગેરેમાં ટ્રાન્સફર કરવામાં આવે છે. છેલ્લે સુધી, કટમાંથી 0.25 (0.5) મિલી બધું જ વોલ્યુમને સંતુલિત કરવા માટે રેડવામાં આવે છે. દરેક મંદન એક અલગ પાઇપેટનો ઉપયોગ કરીને હાથ ધરવામાં આવે છે. જો ઘણા ડાયગ્નોસ્ટિકમ્સને પ્રયોગમાં લેવામાં આવે છે, તો તે દરેક માટે તે જ રીતે તેની પોતાની પાતળી શ્રેણી તૈયાર કરવામાં આવે છે. ડાયગ્નોસ્ટિકમ ટેસ્ટ ટ્યુબના દરેક મંદન માટે ટેસ્ટ ટ્યુબના જથ્થાના સમાન વોલ્યુમમાં ઉમેરવામાં આવે છે, જેના પરિણામે દરેક ટેસ્ટ ટ્યુબમાં મંદન બમણું થાય છે. પ્રયોગ s-ki નિયંત્રણ (s-ki ના મુખ્ય મંદનનું 0.25 - 0.5 મિલી અને ખારા દ્રાવણની સમાન માત્રા) અને Ag નિયંત્રણ (0.25 - 0.5 મિલી ડાયગ્નોસ્ટિકમ અને સમાન પ્રમાણમાં ખારા દ્રાવણ) ને અનુરૂપ છે. જો પ્રયોગમાં અનેક ડાયગ્નોસ્ટિકમનો ઉપયોગ કરવામાં આવે, તો દરેકનું પોતાનું એન્ટિજેન નિયંત્રણ હોય છે. ટેસ્ટ ટ્યુબ સાથેના રેકને સારી રીતે હલાવવામાં આવે છે અને થર્મોસ્ટેટમાં 4 કલાક માટે 37 ડિગ્રી સેલ્સિયસ પર મૂકવામાં આવે છે, અને પછી બીજા દિવસ સુધી ઓરડાના તાપમાને છોડી દેવામાં આવે છે, ત્યારબાદ કાંપની માત્રા અને ક્લિયરિંગની ડિગ્રીના આધારે PA રેકોર્ડ કરવામાં આવે છે. પ્રવાહી. આ સૂચકાંકોનું નિર્ધારણ, એગ્લુટિનેટ્સની પ્રકૃતિના આધારે, નરી આંખે કાળી પૃષ્ઠભૂમિ પર, એગ્ગ્લુટિનોસ્કોપમાં અથવા માઇક્રોસ્કોપ મિરરની અંતર્મુખ સપાટી પર કરવામાં આવે છે. એકાઉન્ટિંગ નિયંત્રણોથી શરૂ થાય છે: નિયંત્રણ C પારદર્શક હોવું જોઈએ, Ag એકસરખું વાદળછાયું હોવું જોઈએ (ટ્યુબને હલાવી લીધા પછી). જો નિયંત્રણો સારા હોય, તો તમામ ટેસ્ટ ટ્યુબમાં એગ્ગ્લુટિનેશનની હાજરી અને ડિગ્રી સ્થાપિત કરો, જે પ્લીસસ દ્વારા નિયુક્ત કરવામાં આવે છે: મોટા કાંપ અને પ્રવાહીનું સંપૂર્ણ ક્લિયરિંગ - 4 પ્લીસસ; મોટા કાંપ અને પ્રવાહીની અપૂર્ણ ક્લિયરિંગ - 3 પ્લીસસ; નોંધનીય કાંપ અને પ્રવાહીનું ધ્યાનપાત્ર ક્લિયરિંગ એ 2 પ્લીસસ છે. આ પછી, ટાઇટર નક્કી કરવામાં આવે છે: ઓછામાં ઓછા 2 પ્લીસસની એગ્ગ્લુટિનેશન તીવ્રતા સાથે સૌથી વધુ મંદન. ટાઇટ્રે સંશોધન s-ki ની સરખામણી આ રોગ માટે ડાયગ્નોસ્ટિક ટાઇટર સાથે કરવામાં આવે છે. જો ટાઇટરની તપાસ કરવામાં આવે તો. s-ki ડાયગ્નોસ્ટિક મૂલ્ય કરતાં 2 ગણું ઓછું છે, પ્રતિક્રિયાને શંકાસ્પદ તરીકે મૂલ્યાંકન કરવામાં આવે છે; જો ટાઇટર સમાન હોય ડાયગ્નોસ્ટિક - કેવી રીતેનબળા હકારાત્મક; જો તે 2-4 ગણું વધારે હોય, તો તે હકારાત્મક માનવામાં આવે છે; જો તે 8 કે તેથી વધુ ગણું વધારે હોય, તો તે તીવ્ર હકારાત્મક માનવામાં આવે છે. અબના વ્યાપક વિતરણ સાથે સ્વસ્થ લોકો RA નું મૂલ્યાંકન કરવા માટે, Ab titer માં વધારાનો ઉપયોગ થાય છે. સીરીયલ RA માં Ar નો પ્રકાર નક્કી કરવા માટે, પંક્તિઓની સંખ્યા ઓળખ માટે લેવામાં આવેલી સંખ્યાને અનુરૂપ હોવી જોઈએ ડાયગ્નોસ્ટિક પરીક્ષણો. ડાયગ્નોસ્ટિક ટેસ્ટના મુખ્ય મંદનમાંથી, એબ ટાઇટર નક્કી કરવા માટે RA ની જેમ જ ક્રમિક બે-ગણા ડિલ્યુશનની શ્રેણી તૈયાર કરવામાં આવે છે. મંદન પરિબળો એગ્ગ્લુટિનેટિંગ ટેસ્ટના ટાઇટર પર આધાર રાખે છે. પ્રયોગમાં, પરીક્ષણના ટાઇટરની સમાન મંદીની હાજરી જરૂરી છે, તેમજ તેના કરતા 2, 4, 6, 8 ગણી ઓછી છે. ઉદાહરણ તરીકે, જો ડાયગ્નોસ્ટિક ટેસ્ટનું ટાઇટર 1 3200 છે, તો તમારે 1 3200, 1 1600, 1 800, 1 400, 1 200 મંદનનો ઉપયોગ કરવો જોઈએ, પરીક્ષણના મંદન માટે પરીક્ષણ કરેલ એજીનું સમાન વોલ્યુમ ઉમેરવામાં આવે છે, પરિણામે, મંદન પરીક્ષણ 2 ગણો વધે છે. પ્રયોગમાં પરીક્ષણ અને Ag ના 2 નિયંત્રણો ઉમેરવામાં આવે છે. જો પ્રયોગમાં ઘણા s-k સામેલ હોય, તો તેમાંથી દરેકને તેના પોતાના નિયંત્રણની જરૂર હોય છે. પ્રતિક્રિયા પૂર્ણ થયા પછી, સ્ટેન્ડને જોરશોરથી હલાવવામાં આવે છે અને મૂકવામાં આવે છે. થર્મોસ્ટેટમાં 37 ° સે. ઉપર વર્ણવ્યા પ્રમાણે પરિણામોને ધ્યાનમાં લેવામાં આવે છે. પ્રતિક્રિયાના મૂલ્યાંકનમાં વિશેષતાઓ હોય છે. અભ્યાસના અનુપાલન વિશે નિષ્કર્ષ કાઢવા માટે. પ્રયોગમાં લેવામાં આવેલ એજી, પ્રતિક્રિયાનું ટાઇટર પ્રમાણભૂત ડાયગ્નોસ્ટિક ટેસ્ટના ઓછામાં ઓછા અડધા ટાઇટરને અનુરૂપ હોવું જોઈએ. 1 4 અને નીચેના ટાઇટર્સને જૂથ પ્રતિક્રિયા તરીકે ગણવામાં આવે છે. ટપક એમ.ડી RA નું સ્ટેજીંગ વોલ્યુમેટ્રિકથી અલગ છે જેમાં s-ku 1 મિલીના જથ્થામાં ભળે છે, એજીનો ઉપયોગ વધુ સાંદ્રતામાં થાય છે (10 બિલિયન/ml) અને તેને 1 ઉમેરવામાં આવે છે. - 2 ટેસ્ટ ટ્યુબમાં ડ્રોપ્સ એજી ઉમેર્યા પછી દવાના મંદનને અપરિવર્તિત ગણવામાં આવે છે. અન્યથા, સેટિંગ, રેકોર્ડિંગ અને મૂલ્યાંકનની પદ્ધતિ વોલ્યુમેટ્રિક પદ્ધતિ જેવી જ છે.
(સ્રોત: માઇક્રોબાયોલોજી ટર્મ્સનો શબ્દકોશ)
ઇમ્યુનોમાઇક્રોબાયોલોજીકલ સ્ટડીઝ
ઘણી સમસ્યાઓ હલ કરવા માટે રોગપ્રતિકારક પદ્ધતિઓનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે:
1. સ્થિતિનું મૂલ્યાંકન રોગપ્રતિકારક તંત્રવ્યક્તિ ( રોગપ્રતિકારક સ્થિતિ) જથ્થાત્મક અને વ્યાખ્યા દ્વારા કાર્યાત્મક લાક્ષણિકતાઓરોગપ્રતિકારક તંત્રના કોષો અને તેમના ઉત્પાદનો.
2. માનવ પેશીઓની રચના અને લાક્ષણિકતાઓનું નિર્ધારણ: રક્ત જૂથો, આરએચ પરિબળ, ટ્રાન્સપ્લાન્ટેશન એન્ટિજેન્સ.
3. ચેપી રોગોનું નિદાન અને એન્ટિબોડી ટાઇટર્સ (સેરોડાયગ્નોસિસ), શરીરમાં પેથોજેન એન્ટિજેન્સને ઓળખવા અને આ એન્ટિજેન્સ પ્રત્યે સેલ્યુલર પ્રતિક્રિયાઓ નક્કી કરીને અને તેની સ્થાપના કરીને તેમની સામે પ્રતિકાર.
4. મનુષ્યો અને પ્રાણીઓના શરીરમાંથી અલગ બેક્ટેરિયા અને વાયરસની સંસ્કૃતિની સેરોઇડ ઓળખ.
5. માનવ શરીરમાં તપાસ અને માં બાહ્ય વાતાવરણએન્ટિજેનિક અથવા હેપ્ટેન ગુણધર્મો ધરાવતા કોઈપણ પદાર્થો (હોર્મોન્સ, ઉત્સેચકો, ઝેર, દવાઓ, દવાઓ, વગેરે).
6. ઇમ્યુનોપેથોલોજીકલ પરિસ્થિતિઓ, એલર્જી, ટ્રાન્સપ્લાન્ટેશન અને એન્ટિટ્યુમર પ્રતિક્રિયાઓની ઓળખ.
એન્ટિજેન અને એન્ટિબોડી વચ્ચેની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાની પ્રક્રિયા સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાઓબે તબક્કામાં થાય છે:
1) ચોક્કસ- ક્રિયાપ્રતિક્રિયાનો તબક્કો જેમાં એન્ટિબોડીઝ (પેરાટોપ્સ) અને એન્ટિજેન એપિટોપ્સના સક્રિય કેન્દ્રોનું પૂરક સંયોજન થાય છે. સામાન્ય રીતે આ તબક્કો થોડીક સેકન્ડો કે મિનિટો સુધી ચાલે છે;
2) અવિશિષ્ટ- અભિવ્યક્તિનો તબક્કો, લાક્ષણિકતા બાહ્ય ચિહ્નોરોગપ્રતિકારક સંકુલની રચના. આ તબક્કો થોડી મિનિટોથી કેટલાક કલાકો સુધી વિકસી શકે છે.
એન્ટિજેન સાથે એન્ટિબોડીઝની શ્રેષ્ઠ ચોક્કસ ક્રિયાપ્રતિક્રિયા તટસ્થની નજીક pH સાથે આઇસોટોનિક દ્રાવણમાં થાય છે. ઇન વિટ્રો સિસ્ટમમાં એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી પ્રતિક્રિયા અનેક ઘટનાઓની ઘટના સાથે હોઇ શકે છે.
· એકત્રીકરણ,
· વરસાદ,
· લિસિસ.
બાહ્ય અભિવ્યક્તિઓપ્રતિક્રિયાઓ એન્ટિજેનના ભૌતિક રાસાયણિક ગુણધર્મો પર આધાર રાખે છે (કણોનું કદ, શારીરિક સ્થિતિ), વર્ગ અને એન્ટિબોડીઝનો પ્રકાર (સંપૂર્ણ અને અપૂર્ણ), તેમજ પ્રાયોગિક પરિસ્થિતિઓ (મધ્યમ સુસંગતતા, મીઠાની સાંદ્રતા, પીએચ, તાપમાન).
એન્ટિજેન્સ અને એન્ટિબોડીઝની પોલીવેલન્સી નરી આંખે દેખાતા એકંદરની રચનાને સુનિશ્ચિત કરે છે. આ નેટવર્ક રચનાના સિદ્ધાંત અનુસાર થાય છે, જે મુજબ અન્ય એન્ટિબોડી અને એન્ટિજેન પરમાણુઓ પરિણામી એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી સંકુલ સાથે અનુક્રમે જોડાયેલા હોય છે. પરિણામે, નેટવર્ક સ્ટ્રક્ચર્સ રચાય છે, જે અવક્ષેપમાં પરિવર્તિત થાય છે. પ્રતિક્રિયાની પ્રકૃતિ અને તીવ્રતા એન્ટિજેન્સ અને એન્ટિબોડીઝના જથ્થાત્મક ગુણોત્તર પર આધારિત છે. જ્યારે રીએજન્ટ્સ સમાન પ્રમાણમાં હોય ત્યારે સૌથી તીવ્ર પ્રતિક્રિયાઓ થાય છે.
પૂર્વશરતજાળી રચના (નેટવર્ક) - દરેક એન્ટિજેન પરમાણુ માટે ત્રણ કરતાં વધુ એન્ટિજેનિક નિર્ધારકોની હાજરી અને પ્રત્યેક એન્ટિબોડી પરમાણુ માટે બે સક્રિય કેન્દ્રો. એન્ટિજેન પરમાણુઓ જાળી ગાંઠો છે, અને એન્ટિબોડી અણુઓ કનેક્ટિંગ લિંક્સ છે. એન્ટિજેન અને એન્ટિબોડી સાંદ્રતાના શ્રેષ્ઠ ગુણોત્તર (સમાનતા ઝોન) નો પ્રદેશ, જ્યારે કાંપની રચના પછી સુપરનેટન્ટમાં મુક્ત એન્ટિજેન્સ અથવા મુક્ત એન્ટિબોડીઝ મળી આવતા નથી.
જ્યારે એન્ટિજેન્સ સંપૂર્ણ એન્ટિબોડીઝ સાથે સંયોજિત થાય છે ત્યારે અવક્ષેપ કરી શકે તેવા એગ્રીગેટ્સ રચાય છે. અપૂર્ણ એન્ટિબોડીઝ(મોનોવેલેન્ટ) નેટવર્ક સ્ટ્રક્ચર્સ અને મોટા એકંદરની રચનાનું કારણ નથી. આવા એન્ટિબોડીઝને શોધવા માટે, ઉપયોગ કરો ખાસ પદ્ધતિઓએન્ટિગ્લોબ્યુલિન (કોમ્બ્સ પ્રતિક્રિયા) ના ઉપયોગ પર આધારિત છે.
સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાઓ, તેમની ઉચ્ચ વિશિષ્ટતા અને સંવેદનશીલતાને કારણે, એન્ટિજેન્સ અને એન્ટિબોડીઝની શોધ અને પ્રમાણીકરણ માટે વપરાય છે. પ્રતિક્રિયાઓમાં ઇમ્યુનોરેજેન્ટ્સની માત્રા ટાઇટર દ્વારા વ્યક્ત કરવામાં આવે છે - સીરમ અથવા એન્ટિજેનનું મહત્તમ મંદન કે જેના પર પ્રતિક્રિયા હજુ પણ જોવા મળે છે.
માઇક્રોબાયોલોજીકલ અને ઇમ્યુનોલોજિકલ પ્રયોગશાળાઓમાં સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાઓનો ઉપયોગ બે હેતુઓ માટે થાય છે:
1) જાણીતા એન્ટિબોડી (રોગપ્રતિકારક ડાયગ્નોસ્ટિક સીરમ) નો ઉપયોગ કરીને સામાન્ય રીતે સુક્ષ્મસજીવો, ઝેર, એન્ટિજેન્સની સીરોઓડેન્ટિફિકેશન માટે,
2) સેરોડાયગ્નોસિસ માટે - જાણીતા એન્ટિજેન (ડાયગ્નોસ્ટિકમ) નો ઉપયોગ કરીને બેક્ટેરિયલ, વાયરલ અને ઓછી વાર અન્ય ચેપી રોગો માટે દર્દીના લોહીના સીરમમાં એન્ટિબોડીની પ્રકૃતિ નક્કી કરવી.
એન્ટિજેનનો સામાન્ય, પ્રજાતિ અને પ્રકાર નક્કી કરવા માટે, જાણીતા રોગપ્રતિકારક પરીક્ષણો જરૂરી છે. ડાયગ્નોસ્ટિક સેરા. તેઓ માર્યા ગયેલા અથવા જીવંત સૂક્ષ્મજીવો, તેમના સડો ઉત્પાદનો, તટસ્થ અથવા સ્થાનિક ઝેરના વધતા ડોઝમાં પ્રાણીઓ (સામાન્ય રીતે સસલા) ને વારંવાર વહીવટ દ્વારા મેળવવામાં આવે છે. પ્રાણીઓના રસીકરણના ચોક્કસ ચક્ર પછી, મોટા પ્રમાણમાં રક્તસ્રાવ અથવા પ્રાણીનું સંપૂર્ણ રક્તસ્રાવ કરવામાં આવે છે. જંતુરહિત કન્ટેનરમાં એકત્રિત થયેલ લોહીને થર્મોસ્ટેટમાં 37 ° સે તાપમાને 4 - 6 કલાક માટે ગંઠાઈ જવાને વેગ આપવા માટે, પછી એક દિવસ માટે આઇસબોક્સમાં મૂકવામાં આવે છે. પરિણામી પારદર્શક સીરમને જંતુરહિત કન્ટેનરમાં ચૂસવામાં આવે છે, પ્રિઝર્વેટિવ્સ ઉમેરવામાં આવે છે, એન્ટિબોડી ટાઇટર નક્કી કરવામાં આવે છે, વંધ્યત્વ માટે તપાસવામાં આવે છે અને એમ્પ્યુલ્સમાં રેડવામાં આવે છે.
ઉપયોગ કરવામાં આવે છે અશોષિતઅને શોષાય છેડાયગ્નોસ્ટિક સેરા. અશોષિત સીરમ હોય છે ઉચ્ચ ટાઇટર્સએન્ટિબોડીઝ, પરંતુ જૂથ (ક્રોસ) પ્રતિક્રિયાઓ આપવા સક્ષમ છે.
શોષિત સેરા ક્રિયાની કડક વિશિષ્ટતા દ્વારા વર્ગીકૃત થયેલ છે (તેઓ માત્ર હોમોલોગસ એન્ટિજેન સાથે પ્રતિક્રિયા આપે છે). માત્ર એક ચોક્કસ એન્ટિજેન માટે એન્ટિબોડીઝ ધરાવતી સેરા કહેવામાં આવે છે મોનોરેસેપ્ટર
તેઓ ફ્લોરોક્રોમ્સ, એન્ઝાઇમ્સ અને રેડિયોઆઇસોટોપ્સ સાથે લેબલવાળા સીરમ્સ પણ ઉત્પન્ન કરે છે, જે ઉચ્ચ સ્તરની ચોકસાઈ સાથે એન્ટિજેનના નિશાનોને પણ શોધવાનું શક્ય બનાવે છે.
જીવંત અથવા માર્યા ગયેલા બેક્ટેરિયાના સસ્પેન્શન, તેમના ભંગાણના ઉત્પાદનો, ઝેર અને વાયરસનો ઉપયોગ સેરોલોજીકલ પ્રતિક્રિયાઓમાં એન્ટિજેન્સ (ડાયગ્નોસ્ટિકમ) તરીકે થાય છે. કેટલાક કિસ્સાઓમાં, સૂક્ષ્મજીવો અને પ્રાણીઓના પેશીઓમાંથી અર્ક અથવા રાસાયણિક રીતે અલગ એન્ટિજેન્સનો ઉપયોગ થાય છે.
તમામ ઇમ્યુનોમાઇક્રોબાયોલોજીકલ પદ્ધતિઓને 3 જૂથોમાં વિભાજિત કરી શકાય છે:
1) પર આધારિત એન્ટિબોડી સાથે એન્ટિજેનની સીધી ક્રિયાપ્રતિક્રિયા(એગ્ગ્લુટિનેશન, વરસાદ, હેમાગ્ગ્લુટિનેશન, સ્થિરતા, વગેરેની ઘટના);
2) પર આધારિત એન્ટિબોડી સાથે એન્ટિજેનની મધ્યસ્થી ક્રિયાપ્રતિક્રિયા(પ્રતિક્રિયાઓ પરોક્ષ હિમેગ્ગ્લુટિનેશન, કોએગ્ગ્લુટિનેશન, લેટેક્ષ એગ્ગ્લુટિનેશન, કાર્બન એગ્ગ્લોમેરેશન, બેન્ટોનાઇટ એગ્ગ્લુટિનેશન, કોમ્પ્લીમેન્ટ ફિક્સેશન, વગેરે);
3) ઉપયોગ કરીને લેબલ થયેલ એન્ટિબોડીઝ અથવા એન્ટિજેન્સ(ફ્લોરોસન્ટ એન્ટિબોડી પદ્ધતિ, એન્ઝાઇમ-લિંક્ડ ઇમ્યુનોસોર્બેન્ટ અને રેડિયો ઇમ્યુનોસેસ અને અન્ય પદ્ધતિઓ).
એગ્લુટીનેશન પ્રતિક્રિયાઓ
આ પ્રતિક્રિયાઓમાં કણો (માઇક્રોબાયલ કોશિકાઓ, લાલ રક્ત કોશિકાઓ અને અન્ય કોર્પસ્ક્યુલર એન્ટિજેન્સ) ના સ્વરૂપમાં એન્ટિજેન્સનો સમાવેશ થાય છે, જે એન્ટિબોડીઝ અને અવક્ષેપ દ્વારા એકસાથે ગુંદર ધરાવતા હોય છે.
એક એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા કરવા માટે(આરએ) ત્રણ ઘટકોની જરૂર છે: 1) એન્ટિજેન (એગ્ગ્લુટિનોજેન);
2) એન્ટિબોડી (એગ્ગ્લુટીનિન)
3) ઇલેક્ટ્રોલાઇટ (આઇસોટોનિક સોડિયમ ક્લોરાઇડ સોલ્યુશન).
અંદાજિત એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા (RA)
એક સૂચક અથવા પ્લેટ, RA ઓરડાના તાપમાને કાચની સ્લાઇડ પર મૂકવામાં આવે છે. આ કરવા માટે, 1:10 થી 1:20 ના મંદન પર સીરમનું એક ટીપું અને કાચ પર અલગથી આઇસોટોનિક સોડિયમ ક્લોરાઇડ દ્રાવણનું નિયંત્રણ ડ્રોપ લાગુ કરવા માટે પાશ્ચર પીપેટનો ઉપયોગ કરો. વસાહતો અથવા બેક્ટેરિયાની દૈનિક સંસ્કૃતિ (ડાયગ્નોસ્ટિકમનું એક ટીપું) બંને બેક્ટેરિયોલોજિકલ લૂપ્સમાં દાખલ કરવામાં આવે છે અને સંપૂર્ણ રીતે મિશ્રિત થાય છે. પ્રતિક્રિયાઓ થોડી મિનિટો પછી દૃષ્ટિની રીતે ધ્યાનમાં લેવામાં આવે છે, કેટલીકવાર બૃહદદર્શક કાચ (x5) નો ઉપયોગ કરીને. સકારાત્મક આરએ સાથે, સીરમ ડ્રોપમાં મોટા અને નાના ટુકડાઓનો દેખાવ નોંધવામાં આવે છે; નેગેટિવ આરએ સાથે, સીરમ સમાનરૂપે વાદળછાયું રહે છે.
વિગતવાર એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાદર્દીમાં ચોક્કસ એન્ટિબોડીઝના ટાઇટરને ઓળખવા માટે.
સીરોડાયગ્નોસિસ માટે સંપૂર્ણ વિકસિત RA દર્દીઓના સીરમમાં બનાવવામાં આવે છે. તેને 1:50 - 1:100 થી 1:800 અથવા 1:1600 સુધીના આઇસોટોનિક સોડિયમ ક્લોરાઇડના દ્રાવણમાં પણ પાતળું કરવામાં આવે છે. કારણ કે નીચલા સીરમ ટાઇટર્સ તંદુરસ્ત લોકો અથવા અન્ય નિદાન (ડાયગ્નોસ્ટિક ટાઇટર) ધરાવતા દર્દીઓમાં જોવા મળતા સામાન્ય એગ્ગ્લુટીનિન ધરાવે છે. આ પ્રતિક્રિયામાં એન્ટિજેન તરીકે, ડાયગ્નોસ્ટિકમનો ઉપયોગ થાય છે - જાણીતા સસ્પેન્શન, સામાન્ય રીતે માર્યા ગયેલા બેક્ટેરિયાના.
1 મિલી આઇસોટોનિક સોડિયમ ક્લોરાઇડ સોલ્યુશન સૌપ્રથમ એગ્લુટિનેશન ટ્યુબમાં રેડવામાં આવે છે. 1 મિલી સીરમ 1:100 પાતળું તેમાંથી પ્રથમમાં ઉમેરવામાં આવે છે, અને તેને મિશ્રિત કર્યા પછી, 1 મિલી બીજામાં, બીજાથી ત્રીજામાં, વગેરેમાં સ્થાનાંતરિત થાય છે. બેક્ટેરિયલ સસ્પેન્શનના 1-2 ટીપાં જેમાં 1 મિલીમાં 3 બિલિયન માઇક્રોબાયલ બોડી હોય છે, પરિણામી સેરાના બે ગણા મંદન (1:100 થી 1:1600 અથવા વધુ સુધી) માં ઉમેરવામાં આવે છે. ટ્યુબને હલાવવામાં આવે છે અને થર્મોસ્ટેટમાં 2 કલાક માટે 37 ° સે પર મૂકવામાં આવે છે, પછી 24 કલાક માટે ઓરડાના તાપમાને રાખવામાં આવે છે.
દરેક ટેસ્ટ ટ્યુબનું ક્રમિક રીતે મૂલ્યાંકન કરીને, કંટ્રોલ ટ્યુબથી શરૂ કરીને, હળવા ધ્રુજારી સાથે વિગતવાર એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાને ધ્યાનમાં લેવામાં આવે છે. કંટ્રોલ ટ્યુબમાં કોઈ એગ્લુટિનેશન ન હોવું જોઈએ. એગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયાની તીવ્રતા નીચેના ચિહ્નો સાથે ચિહ્નિત થયેલ છે: ++++ - સંપૂર્ણ એગ્લુટિનેશન (એક સંપૂર્ણ પારદર્શક પ્રવાહીમાં એગ્ગ્લુટિનેટ ફ્લેક્સ); +++ - અપૂર્ણ એગ્ગ્લુટિનેશન (સહેજ અપારદર્શક પ્રવાહીમાં ફ્લેક્સ); ++ - આંશિક એગ્ગ્લુટિનેશન (ફ્લેક્સ સ્પષ્ટપણે દૃશ્યમાન છે, પ્રવાહી સહેજ વાદળછાયું છે); + - નબળા, શંકાસ્પદ એગ્ગ્લુટિનેશન - પ્રવાહી ખૂબ જ વાદળછાયું છે, તેમાં ફ્લેક્સને અલગ પાડવું મુશ્કેલ છે; - - એકત્રીકરણની ગેરહાજરી (પ્રવાહી સમાનરૂપે વાદળછાયું છે).
સીરમ ટાઇટરને તેનું છેલ્લું મંદન માનવામાં આવે છે, જેમાં એગ્ગ્લુટિનેશનની તીવ્રતાનું મૂલ્યાંકન બે પ્લીસસ (++) કરતાં ઓછું નથી.
વ્યાખ્યાન નં. 16
શબ્દકોશ
ડાયરેક્ટ -કોઈ પણ વસ્તુ વિના સીધું આગળ, અનુગામી લિંક્સ વિના.
પરોક્ષ રીતે- અન્ય કોષો દ્વારા, સીધા નહીં.
ઘટાડો ≠ વધારો (કોષ પ્રવૃત્તિ).
નકારો -સ્વીકારવું નહીં, નકારવું. શરીર ટ્રાન્સપ્લાન્ટ કરેલા અંગને નકારી કાઢે છે.
રોગપ્રતિકારક પ્રતિક્રિયાઓ.
રોગપ્રતિકારક પ્રતિક્રિયાઓ એ એન્ટિજેન અને એન્ટિબોડી અથવા એન્ટિજેન અને સંવેદનશીલ ટી-લિમ્ફોસાઇટની ચોક્કસ ક્રિયાપ્રતિક્રિયા (બંધનકર્તા) ની પ્રતિક્રિયાઓ છે.
આ પ્રતિક્રિયાઓ વિટ્રો (ટેસ્ટ ટ્યુબમાં) અને વિવોમાં (જીવંત જીવતંત્રમાં) થાય છે.
આ પ્રતિક્રિયાઓમાં સીરમ (સીરમ) નો સમાવેશ થાય છે, તેથી જ તેને કહેવામાં આવે છે સેરોલોજિકલ.
રોગપ્રતિકારક પ્રતિક્રિયાઓ માટે વપરાય છે ચેપી રોગોનું નિદાન.આ કિસ્સામાં, અજાણ્યા ઘટક જાણીતા ઘટક દ્વારા નક્કી કરવામાં આવે છે, જે એન્ટિબોડી સાથે એન્ટિજેનની ક્રિયાપ્રતિક્રિયાની વિશિષ્ટતા પર આધારિત છે. જો જાણીતી એન્ટિબોડી, પછી તમે કરી શકો છો અજાણ્યા એન્ટિજેનને ઓળખો (શોધો).. જો જાણીતા એન્ટિજેન, પછી તમે તેનો ઉપયોગ કરી શકો છો અજાણ્યા એન્ટિબોડીઝ શોધો.
આમ, રોગપ્રતિકારક પ્રતિક્રિયાઓનો ઉપયોગ થાય છે:
1) માટે સેરોલોજીકલ ડાયગ્નોસ્ટિક્સ(સેરોડાયગ્નોસિસ) રોગો -ચેપી રોગ (જાણીતા એન્ટિજેન) ના ચોક્કસ કારક એજન્ટ માટે એન્ટિબોડીઝના બીમાર લોકોના લોહીના સીરમમાં શોધ; જો બીમાર વ્યક્તિના લોહીના સીરમમાં કોઈપણ પેથોજેન માટે એન્ટિબોડીઝ હાજર હોય, તો તે આ પેથોજેન છે જે આનું કારણ બને છે. ચેપ;
2) માટે સૂક્ષ્મજીવાણુઓની સેરોલોજિકલ ઓળખ (સેરોઓઇડેન્ટિફિકેશન) -રોગપ્રતિકારક ડાયગ્નોસ્ટિક સેરા (જાણીતા એન્ટિબોડીઝ) નો ઉપયોગ કરીને પેથોજેનનો પ્રકાર નક્કી કરવા માટે; જો એન્ટિબોડીઝ બીમાર વ્યક્તિમાંથી અલગ પડેલા પેથોજેનને જોડે છે, તો આ સૂક્ષ્મ જીવાણુ તે જ છે જેની સાથે પ્રાણીને રસી આપવામાં આવી હતી. પ્રાપ્તરોગપ્રતિકારક ડાયગ્નોસ્ટિક સીરમ .
રોગપ્રતિકારક પ્રતિક્રિયાઓ 2 તબક્કામાં થાય છે:
1) ચોક્કસ તબક્કો- એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી સંકુલની રચના સાથે એન્ટિજેનના નિર્ણાયક જૂથ સાથે એન્ટિબોડીના સક્રિય કેન્દ્રનું જોડાણ; આ તબક્કો ઝડપથી આગળ વધે છે, પરંતુ ત્યાં કોઈ દૃશ્યમાન અસર નથી;
2) અચોક્કસ તબક્કો- દેખાવ દૃશ્યમાન અસરએન્ટિજેન અને એન્ટિબોડીની ક્રિયાપ્રતિક્રિયા - નુકશાન ડ્રાફ્ટ(એગ્લુટિનેશન) અથવા વાદળછાયું(વરસાદ), જે પરવાનગી આપે છે જુઓશિક્ષણ એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી સંકુલઅને વિશે નિષ્કર્ષ દોરો અનુપાલનએન્ટિજેન અને એન્ટિબોડી એકબીજા માટે.
રોગપ્રતિકારક પ્રતિક્રિયાઓનો સમાવેશ થાય છે એગ્ગ્લુટિનેશન રિએક્શન (RA), રેસિપિટેશન રિએક્શન (RP), કોમ્પ્લિમેન્ટ ફિક્સેશન રિએક્શન (CFR).
એગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા- આ ઇલેક્ટ્રોલાઇટની હાજરીમાં એન્ટિબોડીઝના પ્રભાવ હેઠળ માઇક્રોબાયલ અથવા અન્ય કોષો (એરિથ્રોસાઇટ્સ) નું ગ્લુઇંગ અને અવક્ષેપ છે. પ્રતિક્રિયાની દૃશ્યમાન અસર (એગ્ગ્લુટિનેશન ઘટના) એ એક અવક્ષેપની રચના છે જેને કહેવાય છે. એગ્લુટિનેટ
આ પ્રતિક્રિયા માટે વપરાય છે સેરોડાયગ્નોસિસઅને સીરોઓઇડેન્ટિફિકેશન. આરએનો ઉપયોગ સેરોડાયગ્નોસિસ (દર્દીઓના લોહીના સીરમમાં એન્ટિબોડીઝની શોધ) માટે થાય છે. ટાઇફોઈડ નો તાવઅને પેરાટાઇફોઇડ(વિડલ પ્રતિક્રિયા), બ્રુસેલોસિસ(રાઈટની પ્રતિક્રિયા) તુલારેમિયા અને લેપ્ટોસ્પાઇરોસિસ. આરએનો ઉપયોગ સીરોઓડેન્ટિફિકેશન માટે થાય છે (દર્દીમાંથી અલગ પેથોજેનનો પ્રકાર નક્કી કરવા) જ્યારે આંતરડાના ચેપ, ડાળી ઉધરસ, કોલેરાઅને વગેરે
ઘટકોપ્રતિક્રિયાઓ
1. એ એનટીજેન (એગ્ગ્લુટીનોજેન) -આ સંપૂર્ણ (નાશ નથી) માઇક્રોબાયલ અથવા અન્ય કોષો છે ( કોર્પસ્ક્યુલર, અદ્રાવ્ય એન્ટિજેન). એગ્ગ્લુટીનોજેન્સ- આ સસ્પેન્શન છે જીવંતઅથવા માર્યા ગયામાઇક્રોબાયલ કોષો અથવા અન્ય કોઈપણ કોષો. એન્ટિજેન્સ અજાણ્યા અથવા જાણીતા હોઈ શકે છે. અજ્ઞાત એગ્લુટિનોજેન એ દર્દીના શરીરમાંથી અલગ પડેલી માઇક્રોબાયલ કલ્ચર છે જેને નક્કી કરવાની જરૂર છે. જાણીતા એન્ટિજેન - નિદાન- ડાયગ્નોસ્ટિક દવા - મૃતકોનું સસ્પેન્શનસૂક્ષ્મજીવાણુઓ જાણીતી પ્રજાતિઓખારા ઉકેલમાં. આ સસ્પેન્શન વાદળછાયું (અપારદર્શક), કારણ કે માઇક્રોબાયલ કોષો ઓગળતા નથી, પરંતુ અકબંધ રહે છે. દર્દીઓના લોહીના સીરમમાં અજાણ્યા એન્ટિબોડીઝ શોધવા માટે જાણીતા એગ્લુટિનોજેનનો ઉપયોગ કરવામાં આવશે.
2. એન્ટિબોડી (એગ્ગ્લુટીનિન)- લોહીના સીરમમાં જોવા મળે છે. એન્ટિબોડીઝ અજાણી અથવા જાણીતી પણ હોઈ શકે છે. નક્કી કરવા માટે અજાણ્યા એન્ટિબોડીઝ લોહીના સીરમમાં છે બીમાર વ્યક્તિ. માં જાણીતા એન્ટિબોડીઝ જોવા મળે છે રોગપ્રતિકારક ડાયગ્નોસ્ટિક સેરાજેને કહેવામાં આવે છે એગ્લુટિનેટિંગ સેરા. તેઓ સીરો-ઓળખ માટે વપરાય છે, એટલે કે. અજાણ્યા એન્ટિજેન નક્કી કરવા માટે - માઇક્રોબાયલ કલ્ચરનો એક પ્રકાર.
3. ઇલેક્ટ્રોલાઇટ- 0.9% સોડિયમ ક્લોરાઇડ સોલ્યુશન.
ડાયગ્નોસ્ટિક ટેસ્ટ મેળવવી.
ત્રાંસી અગર (ઉદાહરણ તરીકે, ટાઇફોઇડ તાવનું કારણભૂત એજન્ટ) પર ઉગાડવામાં આવતી જાણીતી પ્રજાતિના પેથોજેનની શુદ્ધ સંસ્કૃતિને 3-4 મિલી આઇસોટોનિક દ્રાવણથી ધોવાઇ જાય છે, તેને જંતુરહિત ટ્યુબમાં મૂકવામાં આવે છે, કેટલાકમાં સૂક્ષ્મજીવાણુઓ માર્યા જાય છે. માર્ગ (ઉદાહરણ તરીકે, ઉકાળીને અને ઘનતા નક્કી કરવામાં આવે છે (1 મિલીમાં 3 અબજ માઇક્રોબાયલ કોષો હોવા જોઈએ). જો માઇક્રોબાયલ કોષો માર્યા જાય છે સખત તાપમાન, પછી તેઓને O-diagnosticum (O-antigen) મળે છે, પરંતુ જો તેની સારવાર ફોર્માલ્ડીહાઈડથી કરવામાં આવે, તો તેઓ H-diagnosticum (H-antigen) મેળવે છે.
ડાયગ્નોસ્ટિક્સના ઉદાહરણો: સૅલ્મોનેલા ડાયગ્નોસ્ટિકમ, બ્રુસેલોસિસ ડાયગ્નોસ્ટિકમ, તુલેરેમિયા ડાયગ્નોસ્ટિકમ.
એગ્લુટિનેટિંગ સેરાની તૈયારી.
પ્રાણીઓ (સામાન્ય રીતે સસલા) ને અંતરાલમાં 5-7 વખત વધેલા ડોઝમાં માઇક્રોબાયલ ડાયગ્નોસ્ટિકમ્સ સાથે પેરેન્ટેરલી ઇન્જેક્ટ કરવામાં આવે છે ( હાયપરઇમ્યુનાઇઝેશન હાથ ધરવા), અને પછી તેમનું રક્ત સીરમ લેવામાં આવે છે, જેમાં સૂક્ષ્મજીવાણુઓ માટે એન્ટિબોડીઝ હોય છે જેમાંથી ડાયગ્નોસ્ટિકમ તૈયાર કરવામાં આવે છે. જો ઓ-ડાયગ્નોસ્ટિકમ સાથે ઇમ્યુનાઇઝેશન હાથ ધરવામાં આવે છે, તો ઓ-એગ્ગ્લુટિનેટિંગ સેરા (ઓ-એન્ટિબોડીઝ ધરાવે છે) મેળવવામાં આવે છે, જો એચ-ડાયગ્નોસ્ટિકમ સાથે, એચ-એગ્ગ્લુટિનેટિંગ સેરા મેળવવામાં આવે છે.
Agglutinating sera હોઈ શકે છે અશોષિતઅથવા મૂળ અને શોષાય છે.
અશોષિત સીરમસૂક્ષ્મજીવાણુઓની ઘણી નજીકથી સંબંધિત પ્રજાતિઓ માટે જૂથ એન્ટિબોડીઝ ધરાવે છે.
શોષિત સીરમએક પ્રકારના સૂક્ષ્મજીવાણુઓના એક અથવા વધુ એન્ટિજેન્સ માટે એન્ટિબોડીઝ ધરાવે છે. જો સેરામાં માત્ર એક જ એન્ટિજેન માટે એન્ટિબોડીઝ હોય, તો તેને કહેવામાં આવે છે મોનોરેસેપ્ટરઅથવા એકવિધજો ઘણા એન્ટિજેન્સ માટે - જૂથશોષિત સીરમ .
એગ્લુટિનેટિંગ સેરાના ઉદાહરણો:સાલ્મોનેલા મોનોરેસેપ્ટર એચ-એગ્ગ્લુટિનેટિંગ સીરમ, સાલ્મોનેલા જૂથ શોષિત ઓ-એગ્ગ્લુટિનેટિંગ સીરમ, એન્ટિકોલેરા ઓ-એગ્ગ્લુટિનેટિંગ સીરમ, વગેરે..
ટાઇટરએગ્ગ્લુટિનેટિંગ સીરમ - સીરમનું સૌથી વધુ મંદન કે જેના પર એન્ટિજેન સાથે એગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા હજી પણ શોધી કાઢવામાં આવે છે (ટાઇટર લોહીમાં એન્ટિબોડીઝની માત્રા પર આધાર રાખે છે: વધુ એન્ટિબોડીઝ, સીરમ ટાઇટર વધારે).
સ્ટેજીંગ આરએ માટેની પદ્ધતિઓ.
1. અંદાજિત (લેમેલર) આરએ- કાચ પર હાથ ધરવામાં. ગ્લાસ સ્લાઇડ પર સીરમના 2 ટીપાં અને આઇસોટોનિક સોલ્યુશનના 1 ટીપાં લાગુ કરો. માઇક્રોબાયલ કલ્ચર સીરમના એક ટીપામાં અને લૂપમાં આઇસોટોનિક સોલ્યુશનના ટીપામાં દાખલ કરવામાં આવે છે અને મિશ્રિત થાય છે. આઇસોટોનિક સોલ્યુશનનું એક ટીપું જંતુઓ સાથે – એન્ટિજેન નિયંત્રણ, એક બુંદ જંતુમુક્ત સીરમ – એન્ટિબોડી નિયંત્રણ, એક બુંદ સૂક્ષ્મજીવાણુઓ સાથે સીરમ – અનુભવજો સીરમમાં માઇક્રોબાયલ એન્ટિજેન્સને અનુરૂપ એન્ટિબોડીઝ હોય છે જે તેની સાથે ભળે છે, તો એન્ટિબોડીઝ અને એન્ટિજેન્સ ખાસ કરીને એકબીજા સાથે જોડાઈ જશે અને 1-3 મિનિટ પછી એગ્લુટિનેટ ફ્લેક્સ ટેસ્ટ ડ્રોપમાં દેખાશે. એન્ટિજેન નિયંત્રણ વાદળછાયું હોવું જોઈએ અને એન્ટિબોડી નિયંત્રણ સ્પષ્ટ હોવું જોઈએ. પ્રતિક્રિયાના પરિણામો એગ્લુટિનેટ ફ્લેક્સના દેખાવના આધારે રેકોર્ડ કરવામાં આવે છે . જો ફ્લેક્સ બહાર પડે છે, તો પ્રતિક્રિયા હકારાત્મક છે, એટલે કે. એન્ટિજેન એન્ટિબોડીને અનુલક્ષે છે અને એન્ટિજેનનો ઉપયોગ એન્ટિબોડી અથવા તેનાથી વિરુદ્ધ નક્કી કરવા માટે થઈ શકે છે. જો વાદળછાયું રહે છે, તો પ્રતિક્રિયા નકારાત્મક છે.
2. વિગતવાર એકત્રીકરણ પ્રતિક્રિયા -ટેસ્ટ ટ્યુબમાં હાથ ધરવામાં આવે છે. પ્રથમ, 1:50 થી 1:1600 સુધી બીમાર વ્યક્તિના લોહીના સીરમના 2-ગણા પાતળું તૈયાર કરો. 1 મિલી આઇસોટોનિક સોડિયમ ક્લોરાઇડ સોલ્યુશન 6 ટેસ્ટ ટ્યુબમાં રેડવામાં આવે છે. દર્દીના લોહીના સીરમના 1 મિલી 1:50 ના મંદન પર પ્રથમ ટેસ્ટ ટ્યુબમાં ઉમેરવામાં આવે છે, મિશ્રિત થાય છે અને 1:100 નું મંદન મેળવવામાં આવે છે, પછી 1:100 ના મંદનનું 1 મિલી બીજી ટેસ્ટ ટ્યુબમાં સ્થાનાંતરિત થાય છે. અને 1:200 નું મંદન પ્રાપ્ત થાય છે, વગેરે. એન્ટિજેન અને સીરમ નિયંત્રણ માટે બે ટ્યુબ રાખવામાં આવે છે. સીરમ કંટ્રોલમાં 1:50 ના મંદન પર માત્ર સીરમ ઉમેરો, એન્ટિજેન નિયંત્રણમાં - માત્ર એન્ટિજેન. અન્ય તમામ ટેસ્ટ ટ્યુબમાં 0.1 મિલી એન્ટિજેન - ડાયગ્નોસ્ટિકમ (O- અથવા H-) ઉમેરો અને તમામ ટેસ્ટ ટ્યુબને થર્મોસ્ટેટમાં 18-20 કલાક માટે 37°C પર મૂકો. પ્રતિક્રિયાના પરિણામો પ્રકૃતિ, રચાયેલા અવક્ષેપ (એગ્લુટિનેટ) ની માત્રા અને ટર્બિડિટીની ડિગ્રી અનુસાર રેકોર્ડ કરવામાં આવે છે. નિયંત્રણોમાં નીચેના પરિણામો સાથે જ એકાઉન્ટિંગ હાથ ધરવામાં આવે છે: સીરમ નિયંત્રણ - પારદર્શક, એન્ટિજેન નિયંત્રણ - વાદળછાયું. ઓ-એન્ટિબોડી ઝીણા દાણાવાળા અવક્ષેપ આપે છે. એચ-એન્ટિબોડીઝ - બરછટ દાણાદાર. છેલ્લી ટેસ્ટ ટ્યુબના આધારે જેમાં એગ્ગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા હજુ પણ દેખાય છે, તે સ્થાપિત થાય છે ડાયગ્નોસ્ટિક ટાઇટર.
serodiagnosis દરમિયાનરોગો માટે, તે માત્ર ચોક્કસ પેથોજેન માટે ચોક્કસ એન્ટિબોડીઝને શોધવા માટે જ નહીં, પણ તેમના જથ્થાને ઓળખવા માટે પણ મહત્વપૂર્ણ છે, એટલે કે. માટે આવા એન્ટિબોડી ટાઇટરની સ્થાપના કરોઆ પેથોજેનથી થતા રોગની હાજરી વિશે આપણે ક્યારે વાત કરી શકીએ? . આ ટાઇટરને ડાયગ્નોસ્ટિક ટાઇટર કહેવામાં આવે છે.ઉદાહરણ તરીકે, ટાઇફોઇડ તાવનું નિદાન કરવા માટે, તમારે 1:400 નું એન્ટિબોડી ટાઇટર ઓળખવું જરૂરી છે, પરંતુ ઓછું નહીં. વધુ સચોટ પરિણામો આપે છે જોડી કરેલ સેરામાં એન્ટિબોડીઝમાં વધારાની શોધ.દર્દીનું સીરમ રોગની શરૂઆતમાં અને 3 થી 5 અથવા વધુ દિવસો પછી એકત્રિત કરવામાં આવે છે. જો એન્ટિબોડી ટાઇટર ઓછામાં ઓછા 4 વખત વધે છે, તેથી, અમે તેના વિશે વાત કરી શકીએ છીએ વર્તમાન બીમારી.
જો સીરોઓડેન્ટિફિકેશન માટે વિગતવાર એગ્ગ્લુટિનેટિંગ પ્રતિક્રિયા કરવામાં આવે છે, તો પછી એગ્ગ્લુટિનેટિંગ ડાયગ્નોસ્ટિક સેરાનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે, ટાઇટર અથવા તેના અડધા ટાઇટરમાં પાતળું. જો ડાયગ્નોસ્ટિક સીરમના ટાઇટરની નજીકના મંદન પર એગ્ગ્લુટિનેશન જોવા મળે તો RA હકારાત્મક માનવામાં આવે છે.
