Rumah Stomatitis Sel jantina ikan. Mendapatkan pemijah sturgeon matang

Sel jantina ikan. Mendapatkan pemijah sturgeon matang

PERKEMBANGAN SEL KUMAN IKAN

    Cyclostomes tidak mempunyai saluran pembiakan khas. Dari gonad yang pecah, produk seksual jatuh ke dalam rongga badan, daripadanya - melalui liang kemaluan - ke dalam sinus urogenital, dan kemudian melalui pembukaan urogenital mereka dilepaskan keluar.

    Dalam ikan rawan sistem pembiakan dikaitkan dengan perkumuhan. Pada betina kebanyakan spesies, telur dilepaskan dari ovari melalui terusan Müllerian, yang bertindak sebagai saluran oviduk dan membuka ke dalam kloaka; Terusan Wolffian ialah ureter. Pada serigala jantan, saluran berfungsi sebagai vas deferens dan juga membuka ke kloaka melalui papila urogenital.

    Dalam ikan bertulang, terusan Wolffian berfungsi sebagai ureter, terusan Müllerian dikurangkan dalam kebanyakan spesies, dan produk pembiakan dikumuhkan melalui saluran kemaluan bebas yang membuka ke dalam genitouriner atau pembukaan alat kelamin.

    Pada wanita (kebanyakan spesies), telur matang dilepaskan dari ovari melalui saluran pendek yang dibentuk oleh membran ovari. Pada lelaki, tubul testis bersambung ke vas deferens (tidak bersambung dengan buah pinggang), yang terbuka ke luar melalui lubang genitouriner atau genital.

    Kelenjar seks, gonad - testis pada lelaki dan ovari atau ovari pada wanita - pembentukan seperti reben atau kantung yang tergantung pada lipatan peritoneum - mesenterium - dalam rongga badan, di atas usus, di bawah pundi kencing berenang. Struktur gonad, serupa di pangkal, kumpulan yang berbeza ikan mempunyai beberapa ciri.Dalam cyclostomes gonad tidak berpasangan, dalam ikan sebenar gonad kebanyakannya berpasangan. Variasi dalam bentuk gonad dalam spesies yang berbeza terutamanya dinyatakan dalam gabungan separa atau lengkap kelenjar berpasangan menjadi satu yang tidak berpasangan (kod betina, hinggap, eelpout, gerbil jantan) atau dalam asimetri pembangunan yang dinyatakan dengan jelas: selalunya gonad berbeza. dalam jumlah dan berat (capelin, ikan mas crucian perak, dll.), sehingga kehilangan sepenuhnya salah satu daripada mereka. Dari bahagian dalam dinding ovari, plat yang mengandungi telur melintang memanjang ke dalam rongga seperti celah, di mana sel-sel kuman berkembang. Asas plat terdiri daripada tali tisu penghubung dengan banyak cabang. Salur darah bercabang tinggi berjalan di sepanjang helai. Sel pembiakan matang jatuh dari plat bertelur ke dalam rongga ovari, yang boleh terletak di tengah (contohnya, hinggap) atau di sisi (contohnya, cyprinids).

    Ovari secara langsung bergabung dengan oviduk, yang membawa telur keluar. Dalam beberapa bentuk (salmon, bau, belut), ovari tidak ditutup dan telur matang jatuh ke dalam rongga badan, dan dari sana melalui saluran khas ia dikeluarkan dari badan. Testis kebanyakan ikan berpasangan struktur seperti kantung. Sel-sel pembiakan matang dilepaskan ke persekitaran luar melalui saluran perkumuhan - vas deferens - melalui bukaan alat kelamin khas (pada salmon jantan, herring, pike dan beberapa yang lain) atau melalui bukaan urogenital yang terletak di belakang dubur (pada jantan kebanyakan ikan bertulang). .

    Jerung, pari, dan chimera mempunyai kelenjar seks aksesori (bahagian anterior buah pinggang, yang menjadi organ Leydig); rembesan kelenjar bercampur dengan sperma.

    Dalam sesetengah ikan, hujung vas deferens mengembang dan membentuk vesikel mani (tidak homolog dengan organ dengan nama yang sama pada vertebrata yang lebih tinggi).

    Ia diketahui tentang fungsi kelenjar vesikel mani dalam beberapa wakil ikan bertulang. Dari dinding dalam testis, tubul seminiferus memanjang ke dalam, menumpu ke saluran perkumuhan. Berdasarkan lokasi tubulus, testis ikan bertulang dibahagikan kepada dua kumpulan: cyprinoid, atau acinous, - dalam ikan mas, herring, salmon, ikan keli, pike, sturgeon, ikan kod, dll.; percoid, atau radial - dalam perciformes, sticklebacks, dll. (Gamb. 24).

nasi. 24. Jenis struktur testis ikan bertulang . A – percoid; B - cyprinoid

    Dalam testis jenis cyprinoid, tubul seminiferus berpusing dalam satah yang berbeza dan tanpa sistem tertentu. Akibatnya, kawasan individu mereka yang berbentuk tidak teratur (yang dipanggil ampul) boleh dilihat pada bahagian histologi melintang. Saluran perkumuhan terletak di bahagian atas testis. Tepi testis dibulatkan.

    Dalam testis jenis perkoid, tubul seminiferus memanjang secara jejari dari dinding testis. Mereka lurus, saluran perkumuhan terletak di tengah testis. Testis dalam keratan rentas mempunyai bentuk segi tiga.

    Di sepanjang dinding tubulus (ampul) terletak sel-sel besar - sel mani asal, spermatogonia primer, dan spermatozoa masa depan.

    Sel-sel kuman muncul pada awal perkembangan embrio dalam lipatan kemaluan yang memanjang sepanjang rongga badan. Dalam salmon juvana (salmon merah jambu, salmon chum, salmon sockeye, salmon masu, salmon coho dan salmon Atlantik), sel kuman primer ditemui pada peringkat pembentukan saluran renal primer. Dalam embrio salmon Atlantik, sel kuman primordial telah dikenalpasti pada usia 26 hari. Dalam anak ikan, gonad sudah boleh didapati dalam bentuk tali seperti rambut.

    Oogonia - telur masa depan - terbentuk akibat pembahagian sel asas epitelium germinal; ini adalah sel bulat, sangat kecil, tidak dapat dilihat dengan mata kasar. Selepas pembahagian ovogonial, oogonia bertukar menjadi oosit. Selepas itu, semasa oogenesis - perkembangan sel telur - tiga tempoh dibezakan: tempoh laluan sinaptik, tempoh pertumbuhan (kecil - protoplasmik dan besar - trophoplasmic) dan tempoh pematangan.

    Setiap tempoh ini dibahagikan kepada beberapa fasa. Tempoh laluan sinaptik dicirikan terutamanya oleh transformasi nukleus sel (oosit). Kemudian datang tempoh pertumbuhan protoplasma kecil, apabila peningkatan saiz oosit berlaku disebabkan oleh pengumpulan sitoplasma. Di sini, perkembangan oosit dibahagikan kepada fasa juvana dan fasa folikel satu lapisan.

    Dalam fasa juvana, oosit masih agak kecil, selalunya berbentuk bulat, dengan kulit yang nipis, tidak berstruktur, yang dipanggil primer (dihasilkan oleh telur itu sendiri), di mana sel-sel folikel individu bersebelahan, dan di luar - penghubung. sel tisu. Nukleus oosit mempunyai cangkang nipis yang jelas kelihatan; Ia bulat dan besar dan hampir selalu terletak di tengah. Di sepanjang pinggiran nukleus terdapat banyak nukleolus, kebanyakannya bersebelahan dengan cangkang. Dalam fasa folikel satu lapisan, membran sendiri menjadi lebih tebal, dan membran folikel dengan sel tisu penghubung individu bersebelahan terbentuk di atasnya.

    Dalam fasa yang sama, zon vitelogenik selalunya boleh dikesan dalam oosit. Zon ini mempunyai struktur selular, berbuih dan muncul dalam sitoplasma di sekeliling nukleus, pada jarak tertentu darinya (zon circumnuklear). Menjelang akhir fasa (dan tempoh), oosit telah membesar dengan begitu banyak sehingga ia boleh dibezakan dengan kaca pembesar atau bahkan dengan mata kasar.

    Semasa pembentukan sel telur, bersama-sama dengan transformasi nukleus, nutrien terbentuk dan terkumpul di dalamnya, tertumpu dalam kuning telur (protein dan lipid) dan kemasukan lipid semata-mata, yang kemudiannya, semasa perkembangan embrio, digunakan untuk plastik dan keperluan tenaganya. Proses ini bermula semasa tempoh pertumbuhan besar oosit, apabila vakuol yang mengandungi karbohidrat muncul di pinggirnya. Oleh itu, tempoh pertumbuhan besar (trophoplasmic) oosit dicirikan oleh peningkatan bukan sahaja dalam jumlah protoplasma, tetapi juga dalam pengumpulan nutrien dan bahan trofik - protein dan lemak.

    Semasa tempoh pertumbuhan yang hebat, vakuolasi sitoplasma berlaku, penampilan kuning telur dan pengisian oosit dengannya. Tempoh pertumbuhan yang hebat juga terdiri daripada beberapa fasa. Dalam fasa vakuolisasi sitoplasma, oosit, diperbesarkan berbanding fasa sebelumnya, mempunyai bentuk yang agak bersudut kerana tekanan sel-sel jiran. Membran oosit - tisu penghubung folikelnya sendiri - telah menjadi lebih jelas. Di pinggir oosit, vakuol kecil tunggal terbentuk, yang, semakin meningkat jumlahnya, mencipta lapisan yang lebih atau kurang padat. Ini adalah alveoli kortikal masa depan, atau butiran. Kandungan vakuol terdiri daripada karbohidrat (polisakarida), yang, selepas persenyawaan telur, menyumbang kepada penyerapan air di bawah cangkang dan pembentukan ruang perivitelline. Dalam sesetengah spesies (salmon, karp), kemasukan lemak muncul dalam sitoplasma sebelum vakuol. Dalam nukleus, nukleolus memanjang lebih dalam dari cangkang. Dalam fasa seterusnya - pengumpulan awal kuning telur - sfera kuning kecil yang berasingan muncul di pinggir oosit antara vakuol, bilangan yang meningkat dengan cepat, sehingga pada akhir fasa mereka menduduki hampir keseluruhan plasma oosit. .

    Tubul nipis muncul dalam tunika propria, memberikannya striations jejari (Zona radiata); Nutrien menembusi mereka ke dalam oosit. Atas cangkerang sendiri dalam sesetengah ikan, membran sekunder lain terbentuk - membran (turunan sel folikel yang mengelilingi oosit). Cangkang ini, berbeza dalam struktur (seperti jeli, sarang lebah atau villous), selepas oosit meninggalkan folikel, berfungsi untuk melekatkan telur pada substrat. Membran folikel menjadi dua lapis. Sempadan teras adalah berbeza, tetapi telah menjadi berliku-liku, "berjari."

    Fasa seterusnya - mengisi oosit dengan kuning telur - dicirikan oleh peningkatan yang sangat kuat dalam jumlah kuning telur, zarah-zarahnya memperoleh bentuk yang pelbagai rupa, seperti ketulan dan bukannya sfera. Vakuol ditekan ke arah permukaan oosit.

    Disebabkan oleh penguasaan perubahan kuantitatif pada masa ini (tanpa anjakan morfologi yang ketara), sesetengah penyelidik menganggap ia tidak sesuai untuk membezakan fasa ini sebagai fasa bebas. Menjelang akhir fasa, oosit mencapai saiz muktamadnya. Perubahan dalam kuning telur dan nukleus adalah ketara: nukleus mula beralih (ke arah kutub haiwan), konturnya menjadi kurang jelas; Zarah kuning mula bergabung. Pembentukan cangkerang sekunder selesai.

    Fasa terakhir perkembangan ialah fasa oosit matang. Zarah kuning dalam kebanyakan ikan (kecuali loach, makropod, dan beberapa cyprinid) bergabung menjadi jisim homogen, oosit menjadi telus, sitoplasma tertumpu pada pinggiran oosit, dan nukleus kehilangan konturnya. Transformasi nukleus memasuki peringkat akhir mereka.

    Dua bahagian kematangan mengikuti satu demi satu. Akibatnya, nukleus oosit matang dengan bilangan kromosom haploid dan tiga badan pengurangan terbentuk, yang tidak mengambil bahagian dalam pembangunan selanjutnya, terpisah daripada telur dan merosot. Selepas bahagian pematangan kedua, perkembangan mitosis nukleus mencapai metafasa dan kekal dalam keadaan ini sehingga persenyawaan.

    Perkembangan selanjutnya (pembentukan pronukleus wanita dan pemisahan badan kutub) berlaku selepas persenyawaan.

    Saluran (micropyle) melalui membrannya sendiri (Z. radiata) dan seperti jeli, yang melaluinya sperma menembusi telur semasa persenyawaan. Teleost mempunyai satu mikropil, sturgeon mempunyai beberapa: sturgeon stellate - sehingga 13, beluga - sehingga 33, sturgeon Laut Hitam-Azov - sehingga 52. Oleh itu, polyspermy hanya mungkin dalam sturgeon, tetapi tidak dalam teleosts. Semasa ovulasi, membran tisu folikel dan penghubung pecah dan kekal pada plat yang mengandungi telur, dan oosit yang dikeluarkan daripadanya, dikelilingi oleh membrannya sendiri dan seperti jeli, jatuh ke dalam rongga ovari atau rongga badan. Di sini, telur ovulasi berada di dalam rongga (ovari) cecair, disimpan secara relatif masa yang lama keupayaan persenyawaan (Jadual 3). Di dalam air atau di luar cecair rongga, mereka dengan cepat kehilangan keupayaan ini.

    Dalam jerung dan pari, yang dicirikan oleh persenyawaan dalaman, telur yang disenyawakan, bergerak bersama saluran kemaluan, dikelilingi oleh satu lagi – tertier – cangkerang. Bahan seperti tanduk cangkerang ini membentuk kapsul keras yang melindungi embrio dalam persekitaran luaran dengan pasti (lihat Rajah 34).

    Semasa perkembangan oosit, bersama-sama dengan perubahan lain, peningkatan besar dalam saiznya berlaku: oleh itu, berbanding dengan oogonia yang terbentuk semasa pembahagian oogonia terakhir, jumlah oosit matang meningkat dalam hinggap sebanyak 1,049,440 kali, dalam kecoak - sebanyak 1,271,400 kali.

Jadual 3 Pemeliharaan keupayaan telur untuk menyuburkan (selepas Ginzburg, 1968, disingkatkan)

Beluga Huso huso

Pike Esox lucius

3,5 10 24

Walleye Lucioperca lucioperca

    Dalam satu wanita, oosit (dan selepas ovulasi, telur) tidak sama saiznya: yang terbesar boleh menjadi 1.5-2 kali lebih besar daripada yang terkecil. Ini bergantung pada lokasinya pada plat ovipar: oosit yang terletak berhampiran saluran darah lebih baik dibekalkan dengan nutrien dan capaian. saiz besar.

    Ciri tersendiri proses perkembangan sperma - spermatogenesis - ialah pengurangan berganda sel. Setiap spermatogonia asal membahagi beberapa kali, mengakibatkan pengumpulan spermatogonia di bawah satu membran, dipanggil sista (peringkat pembiakan). Spermatogonia yang terbentuk semasa pembahagian terakhir meningkat sedikit, transformasi meiotik berlaku dalam nukleusnya dan spermatogonia bertukar menjadi spermatosit peringkat pertama (peringkat pertumbuhan). Kemudian dua pembahagian berturut-turut berlaku (peringkat pematangan): spermatosit urutan pertama dibahagikan kepada dua spermatosit urutan kedua, disebabkan oleh pembahagian yang mana dua spermatid terbentuk. Pada peringkat seterusnya - akhir - pembentukan, spermatid bertukar menjadi spermatozoa. Oleh itu, daripada setiap spermatosit empat spermatid terbentuk dengan set separuh (haploid) kromosom. Cangkang sista pecah, dan sperma memenuhi tubul seminiferus. Sperma matang meninggalkan testis melalui vas deferens, dan kemudian keluar melalui saluran.

    Ciri ciri perkembangan testis adalah ketidaksamaan yang kuat (tak segerak) perkembangan organ secara keseluruhan. Ketidaksamaan ini amat ketara pada ikan yang pertama kali matang, tetapi juga jelas dinyatakan dalam pemijahan, individu yang matang semula. Akibatnya, hampir semua jantan bertelur dalam bahagian dan dalam tempoh yang lama Anda boleh mendapatkan sperma daripada mereka.

    Proses pematangan sel kuman ikan yang berbeza umumnya mengikut corak yang sama. Apabila sel-sel seks di dalam ovari dan testis berkembang, kedua-dua rupa dan saiz gonad berubah. Ini mendorong penciptaan skala kematangan gonad yang dipanggil, yang boleh digunakan tanda-tanda luaran gonad untuk menentukan tahap kematangan produk pembiakan, yang sangat penting dalam penyelidikan saintifik dan komersial. Lebih kerap daripada yang lain, skala 6 mata sejagat digunakan, yang berdasarkan ciri sepunya untuk spesies ikan yang berbeza (Jadual 4, 5; Rajah 25, 26). Penimbang lain juga telah dicadangkan yang mengambil kira ciri kematangan kumpulan ikan tertentu. Oleh itu, untuk ovari ikan mas dan hinggap, V. M. Meyen mencadangkan skala 6 mata, dan untuk testis S. I. Kulaev - skala 8 mata.

nasi. 25. Peringkat (I – VI) kematangan gonad pada ikan bertulang betina

nasi. 26. Peringkat kematangan gonad ikan bertulang jantan (menurut Sakun, Butskaya, 1968) : A – peringkat I (1 – spermatogonia, 2 – membahagikan spermatogonia, 3 – saluran darah dengan sel darah merah, 4 - membran testis); B – peringkat II (1 – spermatogonia, 2 – membahagikan spermatogonia, 3 - saluran darah, 4 - membran testis, 5 - sista dengan spermatogonia kecil); DALAM - Peringkat III(1 – spermatogonia, 2 – sista dengan spermatosit urutan pertama, 3 – sista dengan spermatosit pembahagi urutan pertama, 4 – sista dengan spermatosit pembahagi urutan kedua, 5 – sista dengan spermatid, 6 – sista dengan spermatozoa matang, 7 - membran testis, 8 - epitelium folikel); Peringkat D - IV (1 - spermatogonia, 2 - spermatozoa, 3 - membran testis, 4 - epitelium folikel); Peringkat D – VI (1 – spermatogonia, 2 saluran darah, 3 – membran testis, 4 – sisa sperma, 5 – epitelium folikel)

Sperma matang ialah sel dengan sedikit plasma. Ia terdiri daripada kepala, bahagian tengah dan ekor. Bentuk kepala adalah berbeza: dalam bentuk bola, telur, acorn (dalam kebanyakan ikan bertulang), tongkat (dalam sturgeon dan beberapa ikan bertulang), lembing (dalam lungfishes), silinder (dalam jerung, ikan bersirip cuping). Kepala menempatkan inti.

Akrosom terletak di hadapan nukleus pada jerung, sturgeon dan beberapa ikan lain; teleost tidak mempunyai akrosom. Bahagian nuklear kepala sperma terdiri terutamanya daripada deoxyribonucleoprotein (garam neutral DNA dengan protein utama - protamin) dan sejumlah kecil RNA. Kepekatan DNA dalam kepala (nukleus) ialah 38.1% (carp), 48.4% (salmon) dan mencerminkan jumlah DNA dalam set haploid kromosom. Protamin terdiri daripada 6-8 asid amino, antaranya arginin mendominasi. Mitokondria terdapat di bahagian tengah sperma, yang memainkan peranan utama dalam membekalkan sel dengan tenaga. Protein, lesitin, lemak dan kolesterol dikenal pasti di bahagian ekor.

Spermatozoa kebanyakan ikan bertulang mempunyai panjang keseluruhan 40-60 µm (kepala 2-3 µm).

· Sperma yang dirembeskan oleh lelaki terdiri daripada sperma yang direndam dalam cecair sperma yang serupa dengan komposisi garam. Pada saat meninggalkan badan, sperma masih tidak bergerak, metabolisme mereka berkurangan.

· Dalam satu dan lelaki yang sama, spermatozoa berbeza secara kualitatif. Pertama sekali, mereka berbeza dalam saiz: dalam ejakulasi, menggunakan sentrifugasi, tiga kumpulan sperma boleh dibezakan - kecil (ringan), besar (berat), perantaraan (sederhana).

Mereka juga berbeza dalam sifat biologinya, khususnya dalam sifat gamet: di antara spermatozoa besar terdapat sejumlah besar X-gametes, di antara sperma kecil terdapat Y-gametes. Akibatnya, dari telur yang disenyawakan oleh spermatozoa besar, kebanyakannya perempuan dilahirkan, dan dari spermatozoa kecil, lelaki dilahirkan.

    Dalam kebanyakan ikan, inseminasi adalah luaran. Ikan carilaginous, yang dicirikan oleh inseminasi dalaman dan viviparity, mempunyai perubahan yang sepadan dalam struktur alat pembiakan. Perkembangan embrio mereka berlaku di bahagian posterior oviduk, dipanggil rahim. Daripada ikan bertulang, viviparity adalah tipikal untuk gambusia, siakap, dan banyak ikan akuarium. Anak-anak mereka berkembang di dalam ovari.

Jadual 4 Skala kematangan gonad. perempuan ..

Peringkat itu tidak berulang (berlaku sekali seumur hidup)

Dalam ikan yang belum matang, peringkat ini mengikuti peringkat I; dalam ovari betina matang secara seksual, peringkat II berlaku selepas tanda-tanda pemijahan lepas hilang, iaitu selepas peringkat VI

Ovari berbentuk bulat, berwarna jingga kekuningan, menempati kira-kira 1/3–1/2 daripada panjang rongga badan. Mereka dipenuhi dengan telur kekuningan atau keputihan legap kecil, jelas kelihatan dengan mata kasar. Apabila ovari dipotong, telur dipegang dalam ketulan; piring bertelur masih kelihatan. Salur darah bercabang besar berjalan di sepanjang dinding ovari

Oosit terletak lebih padat kerana peningkatan saiznya. Mereka berada pada permulaan tempoh pertumbuhan besar (trophoplasmic): sebahagian besar oosit melalui fasa vakuolisasi sitoplasma dan permulaan pembentukan kuning telur. Ada generasi muda. Pada betina yang telah bertelur, telur yang boleh diserap semula, tidak bertelur mungkin berlaku.

Ovari sangat besar dalam jumlah dan menduduki lebih daripada separuh - kadang-kadang sehingga 2/3 daripada rongga badan. Ia berwarna oren muda, padat dengan telur legap. Dinding ovari adalah telus. Apabila dipotong, telur individu akan keluar. Pinggan bertelur tidak dapat dibezakan. Secara makroskopik, mudah untuk melihat peralihan oosit generasi yang lebih tua ke fasa seterusnya: dalam ovari hampir matang, telur tunggal yang lebih besar dan lebih telus muncul di kalangan oosit mendung kuning. Bilangan telur tersebut semakin meningkat.

Oosit generasi yang lebih tua berada pada akhir tempoh pertumbuhan trofoplasma, iaitu, dalam fasa pengisian dengan kuning telur. Terdapat oosit generasi muda. Kadang-kadang terdapat sisa telur matang yang merosot (dalam ikan matang)

Ovari mencapai saiz maksimumnya; ia dipenuhi dengan telur, yang mengalir keluar apabila perut diusap lembut (dan selepas suntikan pituitari, walaupun tanpa sebarang tekanan). Telur ovulasi adalah telus dan sfera

Oosit generasi yang lebih tua telah mencapai saiz muktamadnya. Gumpalan kuning telur bergabung (dalam kebanyakan spesies). Intinya tidak dapat dibezakan. Oosit muncul dari folikel. Oosit generasi muda hadir

Pengekstrakan, ovari selepas bertelur. Dinding ovari runtuh, menjadi lembik, legap, berlipat, dan berwarna kebiruan kemerahan. Ovari kosong sangat berkurangan dalam jumlah

Folikel kosong, telur matang yang merosot kekal tidak bertelur, oosit generasi muda

Lebih masa keradangan hilang, ovari beransur cerah, menjadi merah jambu muda dan memasuki peringkat II.

Jadual 5 Skala kematangan gonad. jantan .

Peringkat itu tidak berulang

Testis diwakili oleh helai nipis berwarna putih atau sedikit merah jambu. Pembuluh darah di permukaannya tidak kelihatan

Bersama dengan spermatogonia, spermatosit urutan pertama ditemui

Testis diratakan di seluruh, menyempit di bahagian terminal, padat, elastik, berwarna keputihan atau merah jambu dari banyak saluran darah kecil. Pada keratan rentas, testis kelihatan bersudut akut, tepinya tidak bercantum; susu tidak dikeluarkan

Gambar mikroskopik sangat beraneka ragam. Dalam testis, sebagai contoh, jenis cyprinoid, bersama dengan ampul yang diisi dengan spermatosit urutan pertama dan kedua dan spermatid, terdapat ampul yang mengandungi spermatozoa. Terdapat juga spermatogonia - di pinggir.

Testis besar, bersusu putih, kurang anjal. Apabila menekan pada perut, titisan kecil susu dikeluarkan. Apabila testis dipotong, bahagian tepi meleleh dari sperma yang dilepaskan.

Bilangan ampul dengan sperma yang terbentuk meningkat secara mendadak. Ampul lain mengandungi spermatid, iaitu, asynchrony berterusan dalam perkembangan sel yang disediakan untuk pemijahan.

Keadaan bertelur; sperma dilepaskan dengan banyaknya dengan sedikit mengusap perut atau bahkan tanpa menyentuh testis saiz terbesar, ia adalah anjal, putih susu atau berwarna sedikit berkrim

Ampula testis di pinggir dan bahagian tengah dipenuhi dengan spermatozoa yang terletak di pinggir seolah-olah dalam gelombang

Keluar, keadaan selepas bertelur. Testis, dibebaskan daripada sperma, adalah kecil, lembut, merah jambu dengan warna coklat, dan bersudut tajam di bahagian.

Dinding tubul seminiferus runtuh dan menebal. Lumen tubulus adalah sempit, dan spermatozoa individu yang tidak disapu terdapat di dalamnya. Spermatogonia terletak di kawasan dinding

Pada ikan yang bertelur berulang kali, besi kemudiannya masuk ke peringkat II

resit pengeluar matang, yang telur dan spermanya sesuai untuk persenyawaan, - elemen penting bekerja pada pembiakan tiruan sturgeon.

Sebelum ini, mendapatkan ikan sebegitu hanya boleh dilakukan berhampiran tapak pemijahan semula jadi atau terus di kawasan pemijahan, di mana memancing khas perlu dianjurkan. Daripada ikan yang ditangkap, hanya sebahagian kecil (tidak lebih daripada 1-4%) mempunyai kaviar matang dan sperma.

Dengan kaedah yang tidak boleh dipercayai untuk mendapatkan produk matang, menganjurkan pembiakan buatan secara besar-besaran menjadi sangat sukar.

Kaedah ekologi dan fisiologi untuk merangsang kematangan produk pembiakan

Untuk memindahkan pembiakan sturgeon secara terancang, adalah perlu untuk menguasai proses memindahkan pengeluar ke keadaan pemijahan untuk mendapatkan telur matang dan sperma yang sama.

Terdapat dua cara untuk menyelesaikan masalah ini. Salah satunya - alam sekitar - telah dibangunkan oleh Ahli Akademik Akademi Sains AzSSR A. N. Derzhavin. Beliau percaya bahawa apabila membiak induk, keadaan persekitaran harus dicipta yang sesuai dengan keadaan semula jadi di mana perkembangan produk pembiakan berlaku. Oleh kerana secara semula jadi, telur dan sperma masak semasa pemijahan ikan berjalan melawan aliran air, A. N. Derzhavin menganggap faktor ini sebagai faktor utama yang mempengaruhi pecutan pematangan produk pembiakan. Beliau mengesyorkan menggunakan sangkar bujur 25 m panjang, 6 m lebar dan sehingga 1.2 m dalam untuk mengekalkan dan mendapatkan pemijah matang, di mana arus dicipta dan keadaan sungai disimulasikan (arus deras, dsb.). Batu kerikil diletakkan di bahagian bawah sangkar tersebut. Bekalan air dalam sangkar adalah mekanikal, aliran air ialah 20 l/s. Meningkatkan peredaran air dicapai dengan memasang dinding konkrit sepanjang 19 m di bahagian tengah sangkar sepanjang panjangnya.50 ekor ikan diletakkan di dalam setiap sangkar; perempuan dan lelaki secara berasingan. Seiring dengan arus, keadaan suhu dan oksigen yang menggalakkan dicipta di dalam sangkar. Walau bagaimanapun, pengalaman dengan sangkar sedemikian telah menunjukkan bahawa hanya satu pertiga daripada pemijah yang matang di dalamnya, dan juga sukar untuk menentukan masa untuk mengambil kaviar.

Kaedah fisiologi merangsang pematangan produk pembiakan, yang dibangunkan oleh Profesor N. L. Gerbilsky, tidak mempunyai kekurangan ini. Ia adalah berdasarkan pengenalan penyediaan kelenjar pituitari berasetonasi ke dalam otot badan wanita dan lelaki dari mana mereka ingin mendapatkan telur atau sperma matang.

Kajian telah menunjukkan bahawa dalam badan ikan pengawal selia penting pematangan sel kuman adalah lampiran otak - kelenjar pituitari, yang menghubungkan sistem saraf badan dengan gonad. Kelenjar pituitari, kelenjar endokrin, menghasilkan bahan khas - hormon, di bawah pengaruh yang mana pengeluar beralih ke keadaan pemijahan.

Kelenjar pituitari terdiri daripada dua bahagian: otak - neurohypophysis dan kelenjar - adenohypophysis. Hormon gonadotropik dihasilkan oleh sel kelenjar adenohipofisis.

Keputusan terbaik diperoleh dengan menggabungkan kaedah ekologi dan fisiologi untuk merangsang fungsi seksual pengeluar sturgeon. Gabungan dijalankan dalam urutan berikut: pertama, penternak disimpan di dalam takungan khas, dan kemudian suntikan pituitari dilakukan.

Ladang jigging untuk mengekalkan pengeluar

Pengeluar disimpan di dalam takungan khas yang bertujuan untuk ikan jigging. Terdapat dua jenis utama ladang jigging. Salah satunya direka oleh prof. B. N. Kazansky, yang kedua - oleh penternak ikan Kura (penternakan sangkar jenis Kurin).

Beregovoe ladang jigging reka bentuk oleh B. N. Kazansky. Ladang sangkar yang direka oleh B. N. Kazansky mempunyai kolam tanah untuk simpanan jangka panjang dan kolam sangkar konkrit yang terletak berhampiran mereka, bertujuan untuk penyelenggaraan jangka pendek penternak.

Betina dan jantan disimpan secara berasingan.

Kolam tanah terdiri daripada dua bahagian: yang utama, yang diperluas, dengan kedalaman sehingga 2.5 m, dan bahagian yang sempit dan cetek dengan kedalaman 0.5-1 m. Di bahagian kolam ini, keadaan dicipta yang menyerupai pendekatan kepada jangkauan pemijahan. Di bahagian yang mengembang dengan kedalaman yang lebih besar, keadaan menghampiri lubang musim sejuk.

Kolam untuk wanita mempunyai dimensi berikut: panjang 130 m (bahagian melebar 100 m dan menyempit 30 m), lebar 20-25 m di bahagian melebar dan 4-6 m di bahagian menyempit. Bahagian bawah bahagian yang diperluaskan adalah tanah, dan di bahagian yang sempit ia diturap dengan batu bulat licin kecil pada konkrit yang telah habis; Batu kerikil bertaburan di persimpangan bahagian yang melebar dan menyempit.

Bekalan air ke kolam adalah mekanikal; saluran masuk air adalah dalam bentuk dulang konkrit bertetulang atau paip. Air dialirkan melalui struktur saliran, yang memastikan kedua-dua saliran lengkap kolam dan keupayaan untuk mengalirkan pelbagai paras air. Paras air dikawal oleh sander. Aliran air malar 30 l/s boleh ditingkatkan kepada 300 l/s.

Penternakan sangkar jenis kura. Ia adalah kolam tanah berukuran 75x12 m, dibahagikan kepada tiga bahagian menggunakan struktur partition konkrit, di tengah-tengahnya terdapat lubang untuk memasang pengatup.

Di bahagian pertama, 105 m panjang dan 3 m dalam, pengeluar disimpan untuk masa yang lama - dari 1 hingga 1.5 bulan. Pengisian dengan air berlangsung 10-12 jam, dan pembuangan berlangsung 5-6 jam.

Apabila suhu pemijahan menghampiri, pemijah dipindahkan ke kawasan kedua, iaitu kolam konkrit bujur dengan dinding menegak. Dalam kolam 7 m panjang, 5 m lebar dan 1 m dalam, pegangan jangka pendek awal wanita dan lelaki dijalankan sebelum suntikan (1-3 hari). Peralihan dari bahagian pertama ke bahagian kedua dilakukan dalam bentuk pendakian yang lancar: peralatan memancing - seretan, yang digunakan untuk menangkap pemijah, ditarik bersama panduan khas oleh win elektrik dengan alat kawalan jauh. Bahagian kedua diisi dengan air dalam masa 30 minit.

Di tapak ketiga, pengeluar disuntik dan dikekalkan selepas suntikan pituitari. Kawasan ini mempunyai 2 kolam konkrit dengan dinding menegak. Panjang kolam ialah 5 m, lebar 3.5, kedalaman 1 m. Ia mengambil masa 15 minit untuk mengisi dan membuang air. Terdapat kanopi di atas kolam. Pemindahan penternak dari bahagian kedua ke bahagian ketiga, serta penghantaran mereka ke jabatan operasi, di mana kaviar diperoleh, dilakukan oleh angkat elektrik yang digerakkan sendiri dalam buaian.

Pada awal musim bunga, air suam dibekalkan dari tangki pengendapan, yang membolehkan ikan disuntik pada tarikh yang lebih awal. Pengeluar tinggal di kolam selama 1-3 hari. Bekalan dan pelepasan air dari kolam adalah bebas. Air dibekalkan menggunakan paip (seruling) yang terletak di seberang kolam. Pancutan air dari seruling diarahkan ke arah yang bertentangan. Hasil daripada bekalan air ini, rejim oksigen bertambah baik.

50 penternak beluga, 80 sturgeon atau sturgeon, dan 100 sturgeon stellate ditanam di kolam. Penggunaan air di dalam kolam ialah 30 l/s. Plot ketiga dikelilingi oleh pagar piket, di sekelilingnya ditanam pokok.

Pengilang penuaian

Untuk penggunaan pengeluar yang lebih cekap dalam penternakan ikan sangat penting mempunyai pengetahuan tentang kumpulan biologi intraspesifik.

Kajian stok spesies ikan individu membolehkan Acad. L. S. Berg mewujudkan kehadiran kumpulan biologi intraspesifik dalam sesetengah daripada mereka. Perkembangan selanjutnya isu ini adalah milik prof. N. L. Gerbilsky.

Doktrin kumpulan biologi intraspesifik adalah berdasarkan pengiktirafan fakta kepelbagaian biologi intraspesifik yang wujud dalam semua spesies haiwan dan tumbuhan. Dalam ikan, ia dikaitkan terutamanya dengan proses pembiakan dan boleh ditubuhkan dengan mengetahui masa dan lokasi pemijahan, perbezaan dalam kitaran seksual, suhu pemijahan, keadaan pemijah semasa tempoh mereka masuk ke dalam sungai, dan tempoh tinggal pemijah di sungai sebelum bertelur.

Analisis biologi stok sturgeon memungkinkan untuk memilih lokasi penetasan ikan yang betul, membantu menentukan masa jigging dan menjaga pemijah, dan juga untuk menyelesaikan masalah kemungkinan mendapatkan produk pembiakan matang daripada mereka di kawasan yang lebih rendah. sungai dan penggunaan dua kali kolam untuk menternak anak ikan dalam satu musim penanaman. Mengetahui kumpulan biologi intraspesifik, adalah mungkin untuk mewujudkan jadual bermusim yang membolehkan penggunaan takungan dan peralatan yang paling rasional bagi perusahaan penternakan ikan.

Sebagai contoh, mari kita berikan kumpulan biologi ikan sturgeon Kura.

Profesor N.L. Gerbilsky dan B.N. Kazansky mendapati bahawa apabila induk sturgeon dari kumpulan biologi yang berbeza diseberang, daya hidupnya semasa tempoh embrio meningkat.

Pengarang mendapati bahawa juvana yang diperoleh daripada menyeberang induk sturgeon kumpulan biologi yang berbeza adalah lebih baik daripada juvana daripada ibu bapa yang tergolong dalam kumpulan biologi yang sama dalam banyak petunjuk penternakan ikan yang penting: mereka memberi makan dengan lebih intensif dan membesar dengan lebih cepat, mereka mempunyai indeks kegemukan yang lebih tinggi, lebih tinggi. kandungan protein dan unsur abu.

Perolehan pemijah sturgeon kepunyaan kumpulan biologi yang berbeza untuk tujuan ternakan ikan dijalankan pada masa yang berbeza.

Oleh itu, sturgeon awal musim bunga dituai di delta Volga pada separuh kedua April - awal Mei dan digunakan untuk mendapatkan produk seksual matang selepas rizab jangka pendek pada bulan Mei. Sturgeon musim sejuk dari larian musim luruh dituai pada bulan Oktober, dan kaviar dan sperma diperoleh daripadanya selepas tempoh penuaan yang panjang pada separuh kedua April tahun berikutnya.

  • betina yang hampir dengan ovulasi mempunyai badan yang kurus, manakala pada ikan yang kurang matang ia sangat tebal dan berminyak;
  • dalam ikan matang, tangkai ekor (dari tepi posterior sirip punggung hingga permulaan bilah ekor) mempunyai keratan rentas bujur, iaitu ketinggiannya jauh lebih besar daripada lebarnya, yang menunjukkan bahawa ikan itu kehilangan berat badan. Dalam ikan yang kurang matang, tangkai ekor lebih tebal dan kurang tinggi;
  • pada individu yang matang moncongnya runcing akibat penurunan berat badan, pada ikan yang kurang matang moncong dan keseluruhan kepala lebih tebal;
  • Pepijat ikan matang kurang tajam, kulit lebih banyak lendir tebal.

Untuk memberi tumpuan kepada tanda-tanda ini, anda perlu mempunyai pengalaman yang luas bekerja dengan pengeluar.

A.E. Andronov (1979) membangunkan kaedah untuk memilih sturgeon betina, berdasarkan pengukuran telur. Di antara sturgeon stellate betina yang berhijrah ke sungai, terdapat banyak ikan yang tidak cukup matang, di dalam gonadnya terdapat banyak kaviar kecil berkualiti rendah, jadi perlu memilih betina dengan kaviar terbesar. Telur disukat menggunakan probe yang mempunyai skala dengan nilai bahagi 2 mm dan tanda sifar pada jarak 31 mm dari permulaan slot dengan diameter 3 mm. Dalam betina yang dipilih untuk tujuan penternakan ikan, 15 telur harus membentuk barisan yang berakhir sekurang-kurangnya pada bahagian kedua pada skala siasatan.

Pilihan kedua untuk memilih betina sturgeon stellate adalah untuk menentukan tahap polarisasi (kedudukan melampau) nukleus. Kaviar yang dikeluarkan dengan probe diletakkan dalam cecair Serra (6 bahagian formaldehid, 3 bahagian alkohol, 1 bahagian ais asid asetik), dibasuh dengan air dan dipotong dengan pisau cukur keselamatan di sepanjang paksi haiwan-vegetatif.

Kedudukan nukleus dalam telur dinilai di bawah kaca pembesar 7×10 dengan jarak dari nukleus ke cangkang tiang haiwan. Sturgeon stellate betina dianggap baik jika nukleus mereka telah berpindah dari kedudukan asalnya ke jarak yang tidak melebihi jejari telur.

Penyelidik di Institut Penyelidikan Perikanan Azov L.V. Badenko telah membangunkan kaedah untuk memilih pengeluar berdasarkan penunjuk fisiologi, yang memungkinkan untuk menilai secara lebih objektif nilai pengeluar untuk tujuan penternakan ikan. Kaedah ini berdasarkan fakta bahawa sturgeon semasa migrasi pemijahan memasuki sungai dalam keadaan fisiologi yang berbeza. Ini dijelaskan oleh kematangan produk pembiakan yang tidak sama rata dan oleh tahap pengumpulan bahan rizab yang berbeza dalam badan mereka. Oleh itu, menurut L.F. Golovanenko, penternak yang letih yang tidak sesuai untuk mendapatkan kaviar dan sperma, serta individu yang mempunyai produk seksual dalam peringkat kematangan IV yang tidak lengkap, perlu dikhaskan, dan ikan dalam peringkat IV siap boleh disuntik. sejurus selepas menuai di tapak perlombongan.

Jelas betapa pentingnya menilai stok induk yang dipilih untuk ternakan ikan. Ini paling mudah dilakukan melalui ujian darah. Ternyata jawapan yang paling jelas kepada soalan tentang kualiti pengeluar boleh diberikan oleh penunjuk seperti kandungan hemoglobin dan komposisi protein serum. Berdasarkan mereka, L.V. Badenko mengesyorkan memilih pengeluar.

Pada permulaan larian bertelur, betina mempunyai tahap lemak dan protein yang ketara, mereka mempunyai kadar metabolisme dan pernafasan yang tinggi, jadi ikan tersebut mesti dituai terlebih dahulu. Mereka biasanya mempunyai tahap lemak, protein, metabolisme dan ciri pernafasan ikan yang menghasilkan telur matang sepenuhnya.

Penyediaan dibuat daripada tangkapan pukat, memilih pengeluar dengan berat optimum untuk kerja (tidak lebih daripada 15-20 kg untuk sturgeon dan stellate dan 100 kg untuk beluga), tanpa kecederaan, lebam, dll.

Apabila menentukan jisim ikan, adalah dilarang untuk menimbang pengeluar terpilih pada skala perpuluhan di titik penerimaan, kerana menimbang tanpa air memberi kesan negatif kepada keadaan ikan. Berat harus ditentukan menggunakan jadual khas yang menyediakan data mengenai nisbah panjang dan berat badan.

Pemilihan umur pengeluar juga sangat penting. Menurut A.A. Popova, anak terbaik dihasilkan oleh sturgeon yang datang untuk bertelur untuk kali kedua dan ketiga.

Pemijah dituai sedemikian rupa untuk mempunyai rizab sekiranya berlaku sisa semasa pengangkutan dan penuaan: untuk beluga dan sturgeon stellate dari 20 hingga 30% dan untuk sturgeon dari 10 hingga 30% daripada jumlah pemijah yang dituai.

Pengeluar dipilih terus dari pukat pendaratan. Satu demi satu, mereka diletakkan dengan berhati-hati di atas pengusung kanvas dan dipindahkan ke kapal penangkap ikan hidup kecil (mattenka), di mana tidak lebih daripada 10 individu boleh dikumpulkan. Ibu dihantar ke kapal ikan hidup yang besar, di mana pengeluar diangkut ke tempat penetasan sturgeon. Dalam slot ikan hidup bukan gerak sendiri jenis Astrakhan, 5 beluga atau 10 sturgeon, bilangan duri yang sama atau 16 sturgeon stellate ditanam. Panjang slot jenis Astrakhan ialah 13 m, lebar 5 m dan kedalaman 0.8 m, kadar pemuatan: satu sturgeon setiap 1.5-2 m 3, satu sturgeon setiap 1 m 3 dan satu beluga setiap 5-7 m 3. Untuk mengelakkan kecederaan pada ikan, bingkai slot ditutup dengan papan bertapak.

Pengeluar yang dihantar ke tempat penetasan ikan diangkat ke jeti menggunakan kren khas dengan kapasiti mengangkat 500 kg. Ikan diangkut dalam buaian kanvas yang diisi dengan air, digantung dari bingkai tiub logam. Ia ditutup dari atas dengan apron kanvas.

Setelah diangkat ke jeti, buaian segera dipasang pada dirian tiub di belakang kereta atau casis gerak sendiri dan diangkut ke kolam. Buaian juga boleh digerakkan dengan pengangkutan monorel elektrik. Kemudian buaian bersama ikan diturunkan di sepanjang satah condong ke dalam takungan. Ikan juga boleh diangkut dan dipunggah menggunakan monorel dan angkat kargo. Dengan kaedah pengangkutan ini, buaian dengan pengeluar dikeluarkan dari casis dengan pengangkat, dipindahkan ke atas kolam dan kemudian diturunkan. Trek monorel dengan pengangkat elektrik juga digunakan untuk pengangkutan intra-kilang pengeluar.

Dari kolam pemijah, mereka menangkapnya dengan alat seret (alat pancing yang menegang) yang dilengkapi dengan pelampung dan benam. Pelampung terdiri daripada pelampung buih yang diletakkan di atas. Sinker yang diperbuat daripada tanah liat yang dibakar dilekatkan pada bingkai bawah. Bongkah kayu yang dipanggil nags diikat pada hujung sayap. Panjang seretan adalah 40-50% lebih besar daripada lebar kolam, dan ketinggian adalah 30-40% lebih besar daripada kedalaman terbesar takungan.

Ikan biasanya ditangkap dalam satu tuangan membujur. Mereka menarik pukat ke tepi di kedua-dua belah takungan. Penenggelaman dilakukan di kawasan cetek di kepala kolam. Tempat tenggelam diperkuat dengan timbunan batu dan kerikil. Trek overhed angkat disambungkan ke bahagian ini untuk mekanisma pengangkatan pengeluar.

Pemijah yang ditangkap diletakkan di dalam buaian atau di atas pengusung dan dibawa ke angkat, yang menghantar ikan ke sangkar tempat pemijah disuntik.

Selepas digunakan, seretan digantung pada penyangkut untuk kering.

Penyediaan kelenjar pituitari

Kelenjar pituitari paling baik dituai pada musim bunga, semasa musim pembiakan. Pada masa ini, hasil pembiakan ikan berada di peringkat IV selesai dan jumlah maksimum hormon terkumpul dalam kelenjar pituitari.

Tidak mustahil untuk menuai kelenjar pituitari daripada ikan yang bertelur, kerana hormon yang terkandung di dalamnya sebelum ini dimakan sepenuhnya semasa musim pembiakan. Kelenjar pituitari daripada ikan yang belum matang tidak boleh digunakan untuk penuaian. Pada masa yang sama, T.I. Faleeva menyatakan bahawa kelenjar pituitari boleh dituai pada musim luruh dan musim sejuk.

Untuk mengeluarkan kelenjar pituitari, tengkorak ikan hidup atau segar dibuka dengan trephine yang diperbuat daripada keluli, iaitu batang logam yang dilengkapi dengan pemegang. Sebuah silinder dipasang pada hujung bawah rod, yang boleh digerakkan secara menegak di sepanjang rod dan diikat dengan skru. Di dasar silinder terdapat gigi yang diasah dan tersusun yang memotong ke dalam tisu apabila trephine berputar. Diameternya ialah 30 mm. Untuk mendapatkan kelenjar pituitari dari beluga, trefin besar dengan diameter 35-40 mm digunakan.

Trephine diletakkan di tengah-tengah kepala ikan, di belakang mata. Untuk memasang trephine dengan tepat, silinder dinaikkan sehingga kapasiti penuh, akibatnya hujung runcing bawah rod melepasi tepi silinder. Selepas ini, putar pemegang dan, selepas membuat beberapa pusingan, angkat rod untuk mengelakkan kemusnahan kelenjar pituitari. Kemudian trephine diskrukan sepenuhnya dan palam yang dipotong, yang terdiri daripada tulang dan rawan, dikeluarkan. Lubang terbentuk di penutup tengkorak, yang, jika trephine dipasang dengan betul, terletak di atas fossa pituitari. Untuk mendapatkan kelenjar pituitari, electrotrephine, yang merupakan gerudi elektrik, juga digunakan, yang sangat memudahkan dan mempercepat penyediaan kelenjar pituitari.

Otak dan cecair dikeluarkan dari rongga tengkorak. Operasi persediaan berakhir di sini dan anda boleh mula mengeluarkan kelenjar pituitari.

Kelenjar pituitari dikeluarkan menggunakan sudu Volkmann, yang mempunyai tepi tajam dan pemegang panjang, digunakan dalam pembedahan. Dalam apa jua keadaan, anda tidak boleh mengambil tisu kelenjar dengan pinset, kerana ini boleh memusnahkan kelenjar pituitari dan menjadikannya tidak sesuai untuk suntikan. Menggunakan sudu Volkmann, kelenjar pituitari boleh dikeluarkan dengan mudah dan dipindahkan ke dalam kapal. Kelenjar pituitari yang dikeluarkan adalah degreased dan dehidrasi, yang mana aseton dituangkan ke dalam bekas dengan penutup yang menutup dengan baik (jug). Selepas mengeluarkan setiap kelenjar pituitari, penuai meletakkannya dalam aseton. Selepas semua kelenjar pituitari dikeluarkan, ia diletakkan dalam bahagian baru aseton selama 12 jam, kemudian ia disalirkan semula dan bahagian baru dituangkan, di mana degreasing berlaku selepas 6-8 jam. Kelenjar pituitari yang dikeluarkan dari botol dikeringkan di atas kertas penapis.

Untuk merawat kelenjar pituitari, hanya aseton tulen secara kimia yang boleh digunakan. Jumlah aseton harus 10-15 kali lebih besar daripada jisim kelenjar pituitari yang terkandung di dalamnya. Menggunakan semula aseton tepu air tidak boleh diterima.

Untuk penyimpanan jangka panjang, kelenjar pituitari yang kering diletakkan di dalam beg plastik dan dilabel.

Adalah dinasihatkan untuk memilih kelenjar pituitari dengan jisim yang sama ke dalam beg berasingan supaya dalam keadaan lapangan di tempat penetasan ikan adalah mungkin untuk mengira dengan tepat dos yang digunakan.

Perolehan kelenjar pituitari perlu dijalankan secara berpusat untuk beberapa tumbuhan sekaligus dengan penentuan aktiviti gonadotropik ubat yang dihasilkan menggunakan objek ujian.

Perolehan berpusat oleh pakar berpengalaman membolehkan kami memastikan kelenjar pituitari berkualiti tinggi dan kemungkinan menggunakan dos optimum.

Penentuan kualiti kelenjar pituitari

Untuk menentukan jumlah hormon yang terletak di kelenjar pituitari dan kualiti ubat yang terhasil, ujian biologi dijalankan, yang bermuara kepada menjelaskan pelbagai reaksi organ haiwan yang menerima suntikan ubat yang dikaji. Lazimnya, loach dan katak digunakan untuk ujian biologi.

Selepas suntikan kelenjar pituitari, loach sentiasa memberikan reaksi yang boleh diukur dan jelas. Penentuan unit aktiviti kelenjar pituitari ikan dijalankan menggunakan konsep unit loach (v.u.) yang ditubuhkan oleh B.N. Kazansky.

Unit Loach- ini adalah jumlah hormon gonadotropik yang perlu untuk menyebabkan, 50-80 jam selepas suntikan, kematangan telur dan ovulasi pada loach betina musim sejuk peringkat IV kematangan seberat 35-45 g pada suhu air 16-18 ° C dalam keadaan makmal.

Untuk menentukan aktiviti penyediaan pituitari ujian dalam unit loach, beberapa kumpulan wanita secara serentak diberikan suntikan pituitari dengan dos kelenjar pituitari yang berbeza. Dos terkecil yang menyebabkan kematangan sepadan dengan unit loach. Mengetahuinya, anda boleh membandingkan kandungan hormon gonadotropik dalam kelenjar pituitari yang berbeza.

Penggunaan loach sebagai objek ujian adalah sukar kerana pengedarannya terhad dalam badan air semula jadi.

Objek yang lebih mudah diakses ialah katak. Mereka boleh didapati dengan mudah dalam kuantiti yang diperlukan pada bila-bila masa sepanjang tahun. Reaksi positif pada katak, penampilan sperma motil dalam kloaka berlaku selepas suntikan penggantungan kelenjar pituitari ke dalam kantung limfa dorsal. Reaksi ini berlaku sangat cepat - selepas 40-50 minit. Ini adalah kelebihan kedua bekerja dengan katak berbanding loach.

Katak jantan dituai pada akhir musim luruh di tempat-tempat di mana ia tertumpu untuk musim sejuk. Mereka disimpan di dalam air pada suhu 1.5°C, aliran rendah dan cahaya rendah.

Ujian dadah perlu dijalankan setiap tahun pada masa yang sama. Jadi, di delta Volga mereka melakukan ini pada separuh pertama bulan Mac.

Katak dibawa keluar dari keadaan musim sejuk dengan menaikkan suhu air secara perlahan-lahan dan membawanya selepas seminggu kepada 16-18°C. Pengujian memberikan hasil terbaik pada suhu 18-23°C.

Semakan dijalankan seperti berikut. Pertama, kumpulan 8-10 kelenjar pituitari, berbeza dalam warna dan saiz, dipilih. Mereka kemudian ditimbang pada neraca analitik dengan ketepatan 0.1 mg. Penyediaan yang ditimbang dikisar dalam mortar, dibasahi secara beransur-ansur sehingga konsistensi berkrim homogen diperolehi. Kemudian larutan garam ditambah kepada penyediaan, dan penggantungan sedia untuk suntikan.

Suntikan dilakukan serentak dalam 5 ekor katak. Sebanyak 3 kumpulan katak diuji. Setiap kumpulan disuntik dengan dos tertentu: 0.2; 0.3 dan 0.4 mg penyediaan kering kelenjar pituitari.

Penunjuk aktiviti biologi penyediaan pituitari ujian ialah dos berat minimum yang menyebabkan tindak balas sperma pada lebih separuh daripada katak yang disuntik. Aktiviti biologi ubat dikira dengan membahagikan unit dengan penunjuk berat dos berkesan minimum.

Satu unit katak(iaitu) ialah aktiviti dos berat minimum ubat yang menyebabkan sperma dalam katak jantan.

Penyediaan kelenjar pituitari berasetonasi harus mempunyai aktiviti standard yang diketahui sebelum ini, iaitu bersamaan dengan 3.3 unit katak.

Menggunakan dadah akan membolehkan anda menggunakan kelenjar pituitari yang dituai secara lebih ekonomik. Di samping itu, dalam kes di mana, selepas suntikan pituitari, kematangan pengeluar tidak diperhatikan, analisis punca fenomena ini dipermudahkan.

Ia juga harus diingat bahawa dos ubat yang ditadbir per unit jisim pengeluar mesti dikira dengan mengambil kira aktiviti biologi setiap kelompok kelenjar pituitari yang diberikan.

Sebagai tambahan kepada kaedah di atas untuk menentukan aktiviti kelenjar pituitari berasetonasi, terdapat beberapa kaedah lain untuk ujian tersebut. Khususnya, B.F. Goncharov mencadangkan menggunakan sistem pematangan telur di luar badan untuk menentukan kualiti kelenjar pituitari. Semakan dijalankan seperti berikut. Sampel kaviar diambil dengan probe dan diletakkan dalam larutan fisiologi dengan larutan 0.1% albumin kristal. Penggantungan kelenjar pituitari juga ditambah di sana. Sekiranya betina bersedia untuk matang, maka vesikel embrio larut.

Kelebihan kaedah yang dicadangkan ialah ia sensitif, memungkinkan untuk mendapatkan bahan digital yang besar, dan ia boleh digunakan terus di tempat penetasan ikan semasa musim bekerja dengan pengeluar.

Dengan kaedah ini, dos kelenjar pituitari yang disuntik dikira dalam miligram kelenjar pituitari aseton setiap 1 kg berat pengeluar atau dalam miligram setiap lelaki atau perempuan.

Dos yang betul sebahagian besarnya menentukan kualiti produk seksual yang terhasil. Sekiranya dos tidak mencukupi, kematangan penternak tidak akan berlaku. Dengan peningkatan dos ubat hormon, kualiti kaviar atau sperma berkurangan.

Pada suhu yang lebih rendah (dalam julat suhu pemijahan), dos ubat yang lebih tinggi diperlukan untuk pematangan pemijah; pada suhu yang hampir dengan had atas suhu pemijahan, jumlah ubat hormon berkurangan. Untuk lelaki yang matang, berbanding dengan wanita, kurang ubat hormon mesti diberikan.

Penetasan Sturgeon menerima kelenjar pituitari berasetonasi dengan aktiviti gonadotropik yang telah ditetapkan. Walau bagaimanapun, ia tidak selalu kekal. Apabila kelenjar pituitari disimpan selama lebih daripada setahun, aktiviti gonadotropiknya berkurangan. Proses kemerosotan kualiti kelenjar pituitari diperlahankan apabila ia disimpan dalam bekas tertutup rapat di dalam bilik kering pada suhu rendah.

Suntikan pituitari

Kelenjar pituitari yang kering dikisar menjadi serbuk dengan alu dalam kaca bersih atau mortar porselin, kemudian dos yang diperlukan ditimbang pada neraca analitik atau kilasan untuk setiap kumpulan pengeluar yang disuntik secara berasingan untuk wanita dan lelaki.

Dos yang ditimbang ditambah kepada larutan fisiologi (6.5 g garam meja tulen kimia yang dilarutkan dalam 1 liter air suling) dan dikisar sedikit lagi. Kemudian satu lagi bahagian larutan fisiologi ditambah kepada jisim ini dalam kuantiti sedemikian sehingga terdapat 2 cm 3 ampaian bagi setiap pengeluar. Kemudian ia digoncang dengan teliti beberapa kali menggunakan picagari dan dipindahkan ke botol dengan leher lebar dan penyumbat tanah.

Sebelum memulakan suntikan, kandungan botol dicampur dengan teliti beberapa kali. Suspensi disuntik ke dalam otot belakang dengan picagari. Selepas suntikan, jarum dikeluarkan dengan teliti. Tempat tusukan kulit ditekan dengan jari kemudian diurut sedikit. Ini mesti dilakukan untuk mengelakkan kebocoran ubat yang disuntik.

Apabila suhu air 2-3°C lebih rendah daripada suhu pemijahan, dos kelenjar pituitari meningkat sebanyak 30-50%.

Suntikan pituitari memberikan hasil yang positif hanya apabila pengeluar telah melengkapkan peringkat IV kematangan pembiakan. Penunjuk keadaan telur ini ialah anjakan nukleus sedia ada ke arah saluran (mikropil), di mana sperma menembusi ke dalam telur.

Peringkat keempat pada lelaki dicirikan oleh selesainya proses pembentukan sperma. Dalam lelaki sedemikian, sperma matang dan terbentuk sepenuhnya mendominasi.

Keputusan yang baik diperoleh dengan suntikan tunggal ubat aseton. Walau bagaimanapun, kadang-kadang mereka tidak cukup berkesan. Keadaan ini berlaku apabila keadaan umum pengeluar merosot atau pembangunan telur tidak selesai sepenuhnya. Dalam keadaan sedemikian, kadang-kadang dinasihatkan untuk melakukan suntikan berulang dos kecil ubat. Walau bagaimanapun, seseorang mesti sentiasa ingat bahawa dos penyediaan kelenjar pituitari meningkat berbanding dengan yang berasaskan saintifik membawa kepada penurunan kualiti sel kuman matang yang terhasil. Ini dijelaskan oleh fakta bahawa serbuk kelenjar pituitari berasetonasi juga mengandungi hormon yang tidak diperlukan secara langsung untuk pematangan sel kuman. Akibatnya, kesan sampingan tercipta dan badan menjadi sangat tegang (tekanan).

Kejayaan suntikan pituitari sebahagian besarnya bergantung pada bagaimana pembiak baka disimpan. Pada semua peringkat operasi ini - sebelum, semasa dan selepas pengenalan penyediaan kelenjar pituitari ke dalam badan ikan - betina dan lelaki harus dikendalikan dengan berhati-hati untuk mengelakkan kecederaan. Dalam takungan yang dimaksudkan untuk penternak, mesti ada rejim oksigen yang baik; betina dan jantan hendaklah disimpan secara berasingan. Sebelum suntikan, mereka dipindahkan ke kolam atau sangkar konkrit kecil, di mana keadaan optimum dicipta untuk memastikan kematangan produk pembiakan selepas pengenalan ubat hormon ke dalam badan.

Menentukan masa kematangan pengeluar

Selepas pengenalan kelenjar pituitari, ikan memulakan tempoh matang (sehingga telur matang diperolehi), tempohnya bergantung pada suhu air dan keadaan awal betina.

A. S. Ginzburg dan T. A. Detlaf menetapkan bahawa pada suhu purata yang sama, tempoh masak sentiasa lebih pendek daripada tempoh perkembangan embrio (4-6 kali). Ia berikutan bahawa dengan peningkatan atau penurunan suhu, tempoh tempoh kematangan dan perkembangan embrio berubah dengan sewajarnya. Pengenalpastian corak sedemikian membolehkan A. S. Ginzburg dan T. A. Detlaff membina graf kemungkinan masa matang sturgeon betina pada suhu yang berbeza bergantung pada tempoh perkembangan embrio mereka.

Graf menunjukkan lengkung yang menunjukkan masa apabila betina boleh dijangka matang selepas suntikan pituitari. Menggunakan graf, anda juga boleh menentukan masa melihat betina dan mengambil sampel dengan terlebih dahulu mengira suhu purata semasa tempoh matang.

Pengiraan dibuat seperti berikut. Pada pukul 19:00 pada malam hari penerimaan telur dan pada pukul 7:00 pada hari pengumpulan telur, suhu purata dikira, bermula dari masa suntikan pemijah. Kemudian pada paksi mendatar cari titik yang sepadan dengan suhu purata semasa tempoh masak dan pulihkan serenjang daripadanya sehingga ia bersilang dengan lengkung. Titik persilangan dengan lengkung menunjukkan berapa jam kemudian betina pertama matang. Bilangan jam yang terhasil ditambah pada masa suntikan dan masa mula melihat wanita ditentukan. Titik persilangan dengan lengkung memungkinkan untuk menentukan masa kematangan banyak betina dengan cara yang sama.

Menggunakan jadual ini, adalah mungkin untuk menentukan masa suntikan penggantungan kelenjar pituitari ke dalam sturgeon wanita untuk mendapatkan kaviar pada masa yang sesuai untuk bekerja. Akibatnya, kerja dengan pengeluar difasilitasi, bilangan tontonan wanita yang diperlukan dikurangkan, kualiti kaviar bertambah baik, dan kerugian akibat terlalu masak atau kurang masak berkurangan.

Apabila mengira penunjuk yang diperlukan, mula-mula tentukan suhu purata sehari sebelum suntikan. Kemudian, pada paksi mendatar graf pematangan wanita, satu titik yang sepadan dengan suhu ini ditemui, dan serenjang dipulihkan daripadanya sehingga ia bersilang dengan lengkung. Dari titik persilangan, serenjang diturunkan ke paksi menegak dan bilangan jam yang akan berlalu pada suhu purata tertentu dari suntikan hingga kematangan betina pertama ditentukan daripadanya. Bilangan jam yang dikira dengan cara ini ditolak dari masa mula hari bekerja dan masa apabila wanita perlu disuntik diperolehi.

Kaedah untuk menentukan tahap kematangan gonad betina tanpa membuka ikan juga dicadangkan oleh V.Z. Trusov. Kaedah ini bermula dengan mengeluarkan beberapa telur dari ovari wanita menggunakan probe. Mereka dipindahkan dengan pinset ke dalam tabung uji dengan formaldehid. Tiub dibawa ke dalam bilik di mana mikrotom beku dipasang. Telur diletakkan di atas meja supaya bahagian pisau cukur mikrotom melalui tiang haiwan dan vegetatifnya. Kemudian telur dituangkan dengan air dari pipet mata, selepas itu meja ditutup dengan penutup logam dan bahagiannya dibekukan dengan menambah karbon dioksida dari belon.

Bahagian dibuat sehingga teras kelihatan jelas dengan mata kasar atau di bawah kaca pembesar muncul. Jika ia terletak berhampiran dengan membran, maka keadaan gonad wanita berada dalam peringkat kematangan IV yang lengkap.

Kaedah untuk menentukan tahap kematangan gonad wanita, yang dicadangkan oleh V.Z. Trusov, agak mudah, boleh dipercayai dan mengambil sedikit masa: analisis satu sampel boleh dijalankan dalam 5-8 minit.

Kematangan betina juga dipantau oleh pemerhatian langsung. Kawalan dipergiatkan dalam tempoh enam jam terakhir - tempoh masak yang paling mungkin pada suhu tertentu.

Kaedah ekspres yang lebih mudah untuk menentukan kematangan gonad dalam penternak sturgeon telah dibangunkan oleh Prof. B. N. Kazansky, Yu. A. Feklov, S. B. Podushka dan A. N. Molodtsov. Intipati kaedah ini ialah menggunakan probe, sampel kaviar diambil dari belakang ovari; probe dimasukkan ke dalam rongga badan pada sudut 30°, yang membolehkannya mengelak daripada menyentuh organ penting. Dipstick mempunyai hujung yang diisi dengan telur dan batang yang membolehkan ia dikosongkan.

Jumlah panjang siasatan ialah 125 mm, hujungnya ialah 65 mm, termasuk bahagian runcing - 20 mm. Diameter luar rod ialah 4.5 mm. Siasatan berakhir dengan pemegang yang terletak berserenjang dengan rod. Untuk menentukan tahap penyiapan peringkat keempat kematangan, telur yang diekstrak dengan probe direbus selama 2 minit. Telur yang mengeras dipotong dengan pisau cukur keselamatan di sepanjang paksi dari tiang haiwan ke tiang vegetatif. Bahagian diperiksa di bawah kaca pembesar atau teropong. Tahap polarisasi telur ditentukan oleh kedudukan nukleus berbanding kutub haiwan. Indeks polarisasi ditentukan oleh formula yang dicadangkan oleh Yu. A. Feklov: l = A/B, dengan l ialah indeks polarisasi; A ialah jarak dari teras ke cangkerang; B ialah jarak paling jauh sepanjang paksi dari haiwan ke kutub vegetatif.

Bagaimana kurang nilai l, semakin terpolarisasi telur dan semakin besar penyiapan peringkat IV kematangan gonad. Polarisasi terbesar oosit diperhatikan pada l = l/30: l/40.

Jika perut wanita, apabila diraba, ternyata lebih lembut daripada sebelum suntikan, maka ini menunjukkan kemungkinan kematangan telur dalam individu ini. Untuk memastikan ini, anda harus membawa pengusung ikan dengan air di bawah betina, angkat dan letakkan di atas tiang. Pada masa ini, ikan membuat pergerakan secara tiba-tiba, dan jika telurnya masak, maka telur yang dilepaskan pada pengusung dapat dilihat. Selepas perempuan itu tenang, dia berpaling ke sisinya dan perutnya dirasai. Dalam individu yang matang, apabila sepertiga belakang perut diurut, kaviar mengalir keluar dengan bebas dalam aliran.

Oleh itu, seperti yang dinyatakan oleh A. S. Ginzburg dan T. A. Detlaf, penunjuk untuk membuka betina adalah perut yang lembut, telur dikeluarkan dalam aliran yang kuat, dan tenggelam. dinding perut apabila betina bangkit.

Ia perlu segera mendapatkan telur daripada betina yang matang sepenuhnya.

Mendapatkan kaviar matang

Usaha untuk mendapatkan produk pembiakan matang, termasuk pengumpulan, pembajaan dan pencucian telur, dijalankan di jabatan operasi, yang biasanya terletak di tempat penetasan. Ia mempunyai peralatan untuk mendapatkan produk pembiakan, seperti winch, pengapit, dan peti sejuk (KX-6B), di mana pengeluar disimpan tanpa kaviar dan sperma (kaviar dan sperma diperoleh sebelum ia dihantar ke tempat perolehan. ). Di jabatan operasi terdapat jadual pengeluaran berukuran 126x84x90 cm, taip SPSM-4.

Seekor betina matang terpegun dengan pukulan kuat ke hidung dengan palu kayu, selepas itu dia dikeringkan dengan memotong arteri ekor atau insang, dibasuh dengan air dan dikeringkan. Untuk mengelakkan darah daripada masuk ke dalam besen dengan kaviar, tapak hirisan dibalut. Ikan, sedia untuk dibuka, diangkat oleh kepala melalui palang atau blok dan diikat. Perut dihiris dari bawah ke atas dari bukaan kemaluan sebanyak 15-20 cm.Senggatan dibuat cetek dan sedikit ke tepi garis tengah. Untuk mengelakkan kemungkinan kehilangan telur, ekor betina dipegang di atas pelvis. Sebahagian daripada kaviar masak mengalir bebas ke dalam lembangan di sepanjang tepinya. Selepas ini, perut dipotong ke sirip dada dan baki telur yang dipisahkan secara bebas dipindahkan ke pelvis. Anda juga boleh menggunakan telur jinak yang terdapat dalam oviduk untuk persenyawaan.

Jumlah telur yang diperoleh bergantung pada berat betina.

Telur dari betina yang berbeza tidak dicampur. Semua operasi dengan kaviar dijalankan dengan sangat berhati-hati. Kaviar hanya boleh dikumpulkan dalam besen dengan enamel utuh. Tidak lebih daripada 2 kg kaviar diletakkan di dalam besen dengan kapasiti 12-15 liter.

Hanya telur matang penuh yang disenyawakan, yang mesti dapat dikenal pasti.

Telur yang belum masak berbeza dengan yang matang dengan mempunyai warna yang sama di semua kawasan. Telur masak berubah warna dengan sangat perlahan larutan air metilena biru. Penyelesaian ini tidak menghilangkan warna telur yang belum masak sama sekali, tetapi telur yang terlalu masak berubah warna lebih cepat daripada yang masak. Kaedah ini untuk menentukan kualiti pembiakan ikan kaviar sturgeon telah dibangunkan oleh M. F. Vernidub, profesor bersekutu Universiti Negeri Leningrad. Ia bermuara kepada yang berikut: 2 cm 3 kaviar (tanpa cecair rongga) diletakkan di dalam botol atau tabung uji bertutup rapat yang diisi dengan 10 cm 3 larutan metilena biru yang baru disediakan (satu titis larutan akueus 0.05% cat setiap 10 cm 3 air), beberapa kali Goncangkan sekali dan ambil kira masa larutan berubah warna.

Dalam sesetengah kes, perubahan warna tidak berlaku dalam jangka masa biasa untuk kaviar kualiti ini.

Menentukan kesediaan telur untuk persenyawaan

L. T. Gorbacheva, seorang pekerja Institut Penyelidikan Perikanan Azov, mencadangkan menilai kesediaan telur untuk persenyawaan di kilang dengan kadar di mana kulit telur menjadi melekit selepas persenyawaan.

Untuk menentukan masa untuk memulakan inseminasi telur yang telah dikeluarkan dari rongga badan wanita, 100-150 telur diambil, disemai dengan sperma, dan masa di mana telur dalam sampel melekat pada piring Petri ditentukan. Selepas ini, mengikut jadual khas, masa ditetapkan apabila semua telur perlu disemai. Untuk kaviar sturgeon, keadaan terbaik untuk persenyawaan dianggap di mana sekurang-kurangnya 90-95% daripada semua telur yang disenyawakan melekat dalam 9-16 minit; untuk kaviar sevruga keadaan ini sepadan dengan masa 6-10 minit. Kaviar sedemikian berkembang secara normal.

Kaviar sturgeon yang terlalu masak mula melekat selepas 4-6 minit, dan sturgeon stellate - selepas 2-4 minit. Telur sedemikian menghasilkan peningkatan kematian semasa tempoh inkubasi.

Untuk persenyawaan, hanya kaviar berkualiti tinggi digunakan, penunjuknya ialah:

  • kehadiran pada tiang embrio bintik warna yang berbeza daripada separuh lagi telur;
  • bentuk bulat biasa dan saiz telur yang sama, serta blastomer berwarna terbentuk selepas penampilan dua alur belahan;
  • penampilan selepas 6-12 minit dalam sturgeon dan selepas 5-10 minit dalam sturgeon stellate jurang sempit antara kulit luar dan telur dari sampel telur cepat dibasuh dari cecair rongga (dalam telur terlalu masak proses ini bermula lebih awal, dalam telur belum masak - kemudian);
  • jisim telur tertentu; 1 g kaviar beluga matang harus mengandungi 35-40 telur, sturgeon - 45-50 telur, sturgeon stellate - 75-90 telur.

Jika anda mendapati ralat, sila serlahkan sekeping teks dan klik Ctrl+Enter.

Produk seksual dikumpul daripada ikan dalam tiga cara: kaedah meneran, kaedah pembedahan, dan kaedah gabungan.

Meneran.

Sebelum meneran, perut dan sirip dubur disapu dengan kain kering (Rajah 1), dan kemudian kepala ikan dan sirip duburnya dibalut dengan kain kering yang lain. Jika ikan kecil, maka penyaringan boleh dilakukan oleh seorang. Kepala ikan ditekan dengan siku tangan kiri ke badan, dan dengan tangan ini tangkai ekor dipegang dalam kedudukan sedemikian rupa sehingga lubang kemaluan berada di atas pinggir pinggan yang bersih (enamel atau plastik). besen), dan perut sedikit melengkung ke luar. Oleh kerana tekanan dinding rongga perut, sebahagian daripada kaviar dilepaskan dari pembukaan alat kelamin, jatuh di pinggir hidangan dan mengalir ke bahagian bawah. Jangan biarkan telur jatuh terus di bahagian bawah hidangan, kerana ia mudah rosak. Selepas aliran bebas telur berhenti, perut betina diramas sedikit dan diurut dengan jari tangan kanan ke sirip dubur. Apabila ketulan kaviar dan titisan darah muncul, ketegangan dihentikan. Sekiranya betina itu besar, maka telur itu ditapis oleh dua orang: satu memegang kepala ikan, yang lain memegang tangkai ekor di atas pinggir hidangan dan pada masa yang sama menapis telur dengan tangan bebasnya. Kaedah penyaringan telah berjaya digunakan pada salmon, ikan mas, ikan putih dan beberapa sturgeon (sterlet).

Dari ikan pemijahan bahagian, kaviar diambil dengan menapis.

Rajah 1. Menapis kaviar

Sperma juga ditapis dengan cara yang sama. Seorang lelaki matang dipegang di atas pinggan dan perutnya diurut sehingga sperma mula mengalir keluar dari lubang kemaluan. Pada lelaki besar, sperma ditapis menggunakan probe getah yang dimasukkan ke dalam lubang kemaluan. Sperma matang dalam bahagian, jadi jika perlu, ia boleh diambil dari lelaki beberapa kali. Menggunakan kaedah meneran, sperma diambil daripada jantan dari semua jenis ikan yang dibiakkan secara buatan.

Pembukaan(Gamb. 2). Kaedah pembedahan digunakan untuk mengumpul kaviar daripada ikan tidak hidup. Kaedah mengumpul kaviar dari sturgeon ini adalah yang paling biasa.

Ikan sturgeon betina yang matang tidak bergerak dengan pukulan dari palu kayu, selepas itu dia berdarah dengan memotong arteri ekor atau insang, dibasuh dengan air dan dikeringkan. Untuk mengelakkan darah daripada masuk ke dalam besen dengan kaviar, tapak hirisan dibalut. Betina, bersedia untuk pembedahan, digantung oleh kepala menggunakan lif khas dan diikat. Perut dipotong di bawah pembukaan alat kelamin sebanyak 15-20 cm.Senggatan dibuat cetek dan sedikit ke tepi garis tengah. Untuk mengelakkan kemungkinan kehilangan telur, ekor betina dipegang di atas pelvis, dan sebahagian daripada telur masak mengalir bebas ke dalam pelvis di sepanjang tepinya. Selepas ini, perut dipotong ke sirip tengah dan baki telur yang dipisahkan secara bebas dipindahkan ke besen. Anda juga boleh menggunakan telur jinak yang terdapat dalam oviduk untuk persenyawaan.



Rajah.2. Pemilihan kaviar dengan kaedah pembukaan

Kaedah gabungan. Dengan kaedah ini, semua operasi digabungkan, sebahagian daripada kaviar diambil dari ikan dengan menapis, dan bahagian yang tinggal dengan membuka, bahagian yang tidak boleh diperolehi atas sebab teknikal semata-mata.

DALAM Kebelakangan ini Kaedah baru untuk mengumpul kaviar dari sturgeon tersebar luas, ia dipanggil kaedah pengumpulan intravital produk pembiakan. I.A. Pada tahun 1969, Burtsev membangunkan kaedah pengumpulan kaviar intravital daripada ikan sturgeon; ia dipanggil "kaedah pembedahan caesarean" Mereka ditawarkan pembukaan separa rongga perut kacukan sturgeon betina, diikuti dengan jahitan pembedahan hirisan. Kaedah ini kemudiannya didapati digunakan secara meluas dalam penternakan ikan komersial. Potongan kecil (10-15 cm) dibuat di atas dubur betina dan telur boleh dikumpulkan melaluinya. Walau bagaimanapun, kaedah ini agak intensif buruh dan tidak semua pengeluar bertahan dalam operasi.

Pada masa ini, kaedah "incision of the oviduct" digunakan secara meluas (Podushka, 1986). Selepas kematangan ikan sturgeon betina, hirisan dibuat pada salah satu oviduk. Ovari ikan sturgeon tidak mempunyai rongga sendiri dan kaviar, selepas matang, masuk terus ke dalam rongga badan. Oviduk ialah dua tiub panjang yang terletak di bahagian dorsolateral rongga perut. Selepas hirisan dibuat di bahagian ekor salah satu oviduk, telur ovulasi boleh mengalir ke pembukaan alat kelamin terus dari rongga badan, memintas oviduk. Kedalaman kemasukan pisau bedah ke dalam oviduk bergantung pada saiz ikan, dari satu hingga beberapa sentimeter. Telur mengalir bebas dari lubang kemaluan. Memotong oviduk adalah agak operasi mudah dan kadar kemandirian ikan di ladang adalah hampir 100%. Kaedah ini digunakan secara meluas di banyak ladang sturgeon (Rajah 3).

BAB I
STRUKTUR DAN BEBERAPA CIRI FISIOLOGI IKAN

SISTEM AURAT

Perkembangan sistem genitouriner dalam evolusi ikan membawa kepada pemisahan saluran pembiakan daripada saluran perkumuhan.

Cyclostomes tidak mempunyai saluran pembiakan khas. Dari gonad yang pecah, produk seksual jatuh ke dalam rongga badan, daripadanya - melalui liang kemaluan - ke dalam sinus urogenital, dan kemudian melalui pembukaan urogenital mereka dilepaskan keluar.

Dalam ikan rawan, sistem pembiakan disambungkan ke sistem perkumuhan. Pada betina kebanyakan spesies, telur dilepaskan dari ovari melalui terusan Müllerian, yang bertindak sebagai saluran oviduk dan membuka ke dalam kloaka; Terusan Wolffian ialah ureter. Pada serigala jantan, saluran berfungsi sebagai vas deferens dan juga membuka ke kloaka melalui papila urogenital.

Dalam ikan bertulang, terusan Wolffian berfungsi sebagai ureter, terusan Müllerian dikurangkan dalam kebanyakan spesies, dan produk pembiakan dikumuhkan melalui saluran kemaluan bebas yang membuka ke dalam genitouriner atau pembukaan alat kelamin.

Pada wanita (kebanyakan spesies), telur matang dilepaskan dari ovari melalui saluran pendek yang dibentuk oleh membran ovari. Pada lelaki, tubul testis bersambung ke vas deferens (tidak bersambung dengan buah pinggang), yang terbuka ke luar melalui lubang genitouriner atau genital.

Kelenjar seks, gonad - testis pada lelaki dan ovari atau ovari pada wanita - pembentukan seperti reben atau kantung yang tergantung pada lipatan peritoneum - mesenterium - dalam rongga badan, di atas usus, di bawah pundi kencing berenang. Struktur gonad, yang serupa pada inti, mempunyai beberapa keanehan dalam kumpulan ikan yang berbeza. Dalam siklostomes, gonad tidak berpasangan; dalam ikan sejati, gonad kebanyakannya berpasangan. Variasi dalam bentuk gonad dalam spesies yang berbeza terutamanya dinyatakan dalam gabungan separa atau lengkap kelenjar berpasangan menjadi satu yang tidak berpasangan (kod betina, hinggap, eelpout, gerbil jantan) atau dalam asimetri pembangunan yang dinyatakan dengan jelas: selalunya gonad berbeza. dalam jumlah dan berat (capelin, ikan mas crucian perak, dll.), sehingga kehilangan sepenuhnya salah satu daripada mereka. Dari bahagian dalam dinding ovari, plat yang mengandungi telur melintang memanjang ke dalam rongga seperti celah, di mana sel-sel kuman berkembang. Asas plat terdiri daripada tali tisu penghubung dengan banyak cabang. Salur darah bercabang tinggi berjalan di sepanjang kord. Sel pembiakan matang jatuh dari plat bertelur ke dalam rongga ovari, yang boleh terletak di tengah (contohnya, hinggap) atau di sisi (contohnya, cyprinids).

Ovari secara langsung bergabung dengan oviduk, yang membawa telur keluar. Dalam beberapa bentuk (salmon, bau, belut), ovari tidak ditutup dan telur matang jatuh ke dalam rongga badan, dan dari sana melalui saluran khas ia dikeluarkan dari badan. Testis kebanyakan ikan berpasangan struktur seperti kantung. Sel-sel pembiakan matang dilepaskan ke persekitaran luar melalui saluran perkumuhan - vas deferens - melalui bukaan alat kelamin khas (pada salmon jantan, herring, pike dan beberapa yang lain) atau melalui bukaan urogenital yang terletak di belakang dubur (pada jantan kebanyakan ikan bertulang). .

Jerung, pari, dan chimera mempunyai kelenjar seks aksesori (bahagian anterior buah pinggang, yang menjadi organ Leydig); rembesan kelenjar bercampur dengan sperma.

Dalam sesetengah ikan, hujung vas deferens mengembang dan membentuk vesikel mani (tidak homolog dengan organ dengan nama yang sama pada vertebrata yang lebih tinggi).

Ia diketahui tentang fungsi kelenjar vesikel mani dalam beberapa wakil ikan bertulang. Dari dinding dalam testis, tubul seminiferus memanjang ke dalam, menumpu ke saluran perkumuhan. Berdasarkan lokasi tubulus, testis ikan bertulang dibahagikan kepada dua kumpulan: cyprinoid, atau acinous, - dalam ikan mas, herring, salmon, ikan keli, pike, sturgeon, ikan kod, dll.; percoid, atau radial - dalam perciformes, sticklebacks, dll. (Gamb. 24).

nasi. 24. Jenis struktur testis ikan bertulang
A – percoid; B - cyprinoid

Dalam testis jenis cyprinoid, tubul seminiferus berpusing dalam satah yang berbeza dan tanpa sistem tertentu. Akibatnya, kawasan individu mereka yang berbentuk tidak teratur (yang dipanggil ampul) boleh dilihat pada bahagian histologi melintang. Saluran perkumuhan terletak di bahagian atas testis. Tepi testis dibulatkan.

Dalam testis jenis perkoid, tubul seminiferus memanjang secara jejari dari dinding testis. Mereka lurus, saluran perkumuhan terletak di tengah testis. Testis dalam keratan rentas mempunyai bentuk segi tiga.

Di sepanjang dinding tubulus (ampul) terletak sel-sel besar - sel mani asal, spermatogonia primer, dan spermatozoa masa depan.

Sel-sel kuman muncul pada awal perkembangan embrio dalam lipatan kemaluan yang memanjang sepanjang rongga badan. Dalam salmon juvana (salmon merah jambu, salmon chum, salmon sockeye, salmon masu, salmon coho dan salmon Atlantik), sel kuman primer ditemui pada peringkat pembentukan saluran renal primer. Dalam embrio salmon Atlantik, sel kuman primordial telah dikenalpasti pada usia 26 hari. Dalam anak ikan, gonad sudah boleh didapati dalam bentuk tali seperti rambut.

Oogonia - telur masa depan - terbentuk akibat pembahagian sel asas epitelium germinal; ini adalah sel bulat, sangat kecil, tidak dapat dilihat dengan mata kasar. Selepas pembahagian ovogonial, oogonia bertukar menjadi oosit. Selepas itu, semasa oogenesis - perkembangan sel telur - tiga tempoh dibezakan: tempoh laluan sinaptik, tempoh pertumbuhan (kecil - protoplasmik dan besar - trophoplasmic) dan tempoh pematangan.

Setiap tempoh ini dibahagikan kepada beberapa fasa. Tempoh laluan sinaptik dicirikan terutamanya oleh transformasi nukleus sel (oosit). Kemudian datang tempoh pertumbuhan protoplasma kecil, apabila peningkatan saiz oosit berlaku disebabkan oleh pengumpulan sitoplasma. Di sini, perkembangan oosit dibahagikan kepada fasa juvana dan fasa folikel satu lapisan.

Dalam fasa juvana, oosit masih agak kecil, selalunya berbentuk bulat, dengan membran nipis, tidak berstruktur, yang dipanggil primer (dihasilkan oleh telur itu sendiri), di mana sel-sel folikel individu bersebelahan, dan di luar - sel. tisu penghubung. Nukleus oosit mempunyai cangkang nipis yang jelas kelihatan; Ia bulat dan besar dan hampir selalu terletak di tengah. Di sepanjang pinggiran nukleus terdapat banyak nukleolus, kebanyakannya bersebelahan dengan cangkang. Dalam fasa folikel satu lapisan, membran sendiri menjadi lebih tebal, dan membran folikel dengan sel tisu penghubung individu bersebelahan terbentuk di atasnya.

Dalam fasa yang sama, zon vitelogenik selalunya boleh dikesan dalam oosit. Zon ini mempunyai struktur selular, berbuih dan muncul dalam sitoplasma di sekeliling nukleus, pada jarak tertentu darinya (zon circumnuklear). Menjelang akhir fasa (dan tempoh), oosit telah membesar dengan begitu banyak sehingga ia boleh dibezakan dengan kaca pembesar atau bahkan dengan mata kasar.

Semasa pembentukan sel telur, bersama-sama dengan transformasi nukleus, nutrien terbentuk dan terkumpul di dalamnya, tertumpu dalam kuning telur (protein dan lipid) dan kemasukan lipid semata-mata, yang kemudiannya, semasa perkembangan embrio, digunakan untuk plastik dan keperluan tenaganya. Proses ini bermula semasa tempoh pertumbuhan besar oosit, apabila vakuol yang mengandungi karbohidrat muncul di pinggirnya. Oleh itu, tempoh pertumbuhan besar (trophoplasmic) oosit dicirikan oleh peningkatan bukan sahaja dalam jumlah protoplasma, tetapi juga dalam pengumpulan nutrien dan bahan trofik - protein dan lemak.

Semasa tempoh pertumbuhan yang hebat, vakuolasi sitoplasma berlaku, penampilan kuning telur dan pengisian oosit dengannya. Tempoh pertumbuhan yang hebat juga terdiri daripada beberapa fasa. Dalam fasa vakuolisasi sitoplasma, oosit, diperbesarkan berbanding fasa sebelumnya, mempunyai bentuk yang agak bersudut kerana tekanan sel-sel jiran. Membran oosit - tisu penghubung folikelnya sendiri - telah menjadi lebih jelas. Di pinggir oosit, vakuol kecil tunggal terbentuk, yang, semakin meningkat jumlahnya, mencipta lapisan yang lebih atau kurang padat. Ini adalah alveoli kortikal masa depan, atau butiran. Kandungan vakuol terdiri daripada karbohidrat (polisakarida), yang, selepas persenyawaan telur, menyumbang kepada penyerapan air di bawah cangkang dan pembentukan ruang perivitelline. Dalam sesetengah spesies (salmon, karp), kemasukan lemak muncul dalam sitoplasma sebelum vakuol. Dalam nukleus, nukleolus memanjang lebih dalam dari cangkang. Dalam fasa seterusnya - pengumpulan awal kuning telur - sfera kuning kecil yang berasingan muncul di pinggir oosit antara vakuol, bilangan yang meningkat dengan cepat, sehingga pada akhir fasa mereka menduduki hampir keseluruhan plasma oosit. .

Tubul nipis muncul dalam tunika propria, memberikannya striations jejari (Zona radiata); Nutrien menembusi mereka ke dalam oosit. Di atas membrannya sendiri, dalam sesetengah ikan, membran sekunder lain terbentuk - membran (turunan sel folikel yang mengelilingi oosit). Cangkang ini, berbeza dalam struktur (seperti jeli, sarang lebah atau villous), selepas oosit meninggalkan folikel, berfungsi untuk melekatkan telur pada substrat. Membran folikel menjadi dua lapis. Sempadan teras adalah berbeza, tetapi telah menjadi berliku-liku, "berjari."

Fasa seterusnya - mengisi oosit dengan kuning telur - dicirikan oleh peningkatan yang sangat kuat dalam jumlah kuning telur, zarah-zarahnya memperoleh bentuk yang pelbagai rupa, seperti ketulan dan bukannya sfera. Vakuol ditekan ke arah permukaan oosit.

Disebabkan oleh penguasaan perubahan kuantitatif pada masa ini (tanpa anjakan morfologi yang ketara), sesetengah penyelidik menganggap ia tidak sesuai untuk membezakan fasa ini sebagai fasa bebas. Menjelang akhir fasa, oosit mencapai saiz muktamadnya. Perubahan dalam kuning telur dan nukleus adalah ketara: nukleus mula beralih (ke arah kutub haiwan), konturnya menjadi kurang jelas; Zarah kuning mula bergabung. Pembentukan cangkerang sekunder selesai.

Fasa terakhir perkembangan ialah fasa oosit matang. Zarah kuning dalam kebanyakan ikan (kecuali loach, makropod, dan beberapa cyprinid) bergabung menjadi jisim homogen, oosit menjadi telus, sitoplasma tertumpu pada pinggiran oosit, dan nukleus kehilangan konturnya.

Transformasi teras sedang memasuki peringkat akhir.

Dua bahagian kematangan mengikuti satu demi satu. Akibatnya, nukleus oosit matang dengan bilangan kromosom haploid dan tiga badan pengurangan terbentuk, yang tidak mengambil bahagian dalam pembangunan selanjutnya, terpisah daripada telur dan merosot. Selepas bahagian pematangan kedua, perkembangan mitosis nukleus mencapai metafasa dan kekal dalam keadaan ini sehingga persenyawaan.

Perkembangan selanjutnya (pembentukan pronukleus wanita dan pemisahan badan kutub) berlaku selepas persenyawaan.

Saluran (micropyle) melalui membrannya sendiri (Z. radiata) dan seperti jeli, yang melaluinya sperma menembusi telur semasa persenyawaan. Ikan bertulang mempunyai satu mikropil, sturgeon mempunyai beberapa: sturgeon stellate - sehingga 13, beluga - sehingga 33, sturgeon Laut Hitam-Azov - sehingga 52. Oleh itu, polyspermy hanya mungkin dalam sturgeon, tetapi tidak dalam teleosts.

Semasa ovulasi, membran tisu folikel dan penghubung pecah dan kekal pada plat yang mengandungi telur, dan oosit yang dikeluarkan daripadanya, dikelilingi oleh membrannya sendiri dan seperti jeli, jatuh ke dalam rongga ovari atau rongga badan. Di sini, telur ovulasi berada di dalam cecair rongga (ovari), mengekalkan keupayaan untuk menyuburkan untuk masa yang agak lama (Jadual 3). Di dalam air atau di luar cecair rongga, mereka dengan cepat kehilangan keupayaan ini.

Dalam jerung dan pari, yang dicirikan oleh persenyawaan dalaman, telur yang disenyawakan, bergerak di sepanjang saluran kemaluan, dikelilingi oleh membran lain - tertier. Bahan seperti tanduk cangkerang ini membentuk kapsul keras yang melindungi embrio dengan pasti semasa persekitaran luaran(lihat Rajah 34).

Semasa perkembangan oosit, bersama-sama dengan perubahan lain, peningkatan besar dalam saiznya berlaku: oleh itu, berbanding dengan oogonia yang terbentuk semasa pembahagian oogonia terakhir, jumlah oosit matang meningkat dalam hinggap sebanyak 1,049,440 kali, dalam kecoak - sebanyak 1,271,400 kali.

Dalam satu wanita, oosit (dan selepas ovulasi, telur) tidak sama saiznya: yang terbesar boleh menjadi 1.5-2 kali lebih besar daripada yang terkecil. Ini bergantung pada lokasinya pada plat ovipar: oosit yang terletak berhampiran saluran darah lebih baik dibekalkan nutrien dan mencapai saiz yang besar.

Ciri tersendiri proses perkembangan sperma - spermatogenesis - ialah pengurangan berganda sel. Setiap spermatogonia asal membahagi beberapa kali, mengakibatkan pengumpulan spermatogonia di bawah satu membran, dipanggil sista (peringkat pembiakan). Spermatogonia yang terbentuk semasa pembahagian terakhir meningkat sedikit, transformasi meiotik berlaku dalam nukleusnya dan spermatogonia bertukar menjadi spermatosit peringkat pertama (peringkat pertumbuhan). Kemudian dua pembahagian berturut-turut berlaku (peringkat pematangan): spermatosit urutan pertama dibahagikan kepada dua spermatosit urutan kedua, disebabkan oleh pembahagian yang mana dua spermatid terbentuk. Pada peringkat seterusnya - akhir - pembentukan, spermatid bertukar menjadi spermatozoa. Oleh itu, daripada setiap spermatosit empat spermatid terbentuk dengan set separuh (haploid) kromosom. Cangkang sista pecah, dan sperma memenuhi tubul seminiferus. Sperma matang meninggalkan testis melalui vas deferens, dan kemudian keluar melalui saluran.

Ciri ciri perkembangan testis adalah ketidaksamaan yang kuat (tak segerak) perkembangan organ secara keseluruhan. Ketidaksamaan ini amat ketara pada ikan yang pertama kali matang, tetapi juga jelas dinyatakan dalam pemijahan, individu yang matang semula. Akibatnya, hampir semua jantan bertelur dalam bahagian dan sperma boleh diperoleh daripada mereka dalam tempoh yang lama.

Proses pematangan sel kuman dalam ikan yang berbeza mengikut, secara umum, corak yang sama. Apabila sel-sel seks di dalam ovari dan testis berkembang, kedua-dua rupa dan saiz gonad berubah. Ini mendorong penciptaan apa yang dipanggil skala kematangan gonad, yang boleh digunakan untuk menentukan tahap kematangan produk pembiakan berdasarkan tanda-tanda luar gonad, yang sangat penting dalam penyelidikan saintifik dan komersial. Lebih kerap daripada yang lain, skala 6 mata sejagat digunakan, yang berdasarkan ciri sepunya untuk spesies ikan yang berbeza (Jadual 4, 5; Rajah 25, 26).

Penimbang lain juga telah dicadangkan yang mengambil kira ciri kematangan kumpulan ikan tertentu. Oleh itu, untuk ovari ikan mas dan hinggap, V. M. Meyen mencadangkan skala 6 mata, dan untuk testis S. I. Kulaev - skala 8 mata.

nasi. 25. Peringkat (I – VI) kematangan gonad pada ikan bertulang betina


nasi. 26. Peringkat kematangan gonad ikan bertulang jantan (menurut Sakun, Butskaya, 1968):
A - peringkat I (1 - spermatogonia, 2 - membahagikan spermatogonia, 3 - saluran darah dengan sel darah merah, 4 - membran testis); B - peringkat II (1 - spermatogonia, 2 - membahagikan spermatogonia, 3 - saluran darah, 4 - membran testis, 5 - sista dengan spermatogonia kecil); B – Peringkat III (1 – spermatogonia, 2 – sista dengan spermatosit tertib pertama, 3 – sista dengan spermatosit tertib pertama membahagi, 4 – sista dengan spermatosit pembahagi urutan kedua, 5 – sista dengan spermatid, 6 – sista dengan spermatozoa matang, 7 – membran testis, 8 - epitelium folikel); Peringkat D - IV (1 - spermatogonia, 2 - spermatozoa, 3 - membran testis, 4 - epitelium folikel); Peringkat D – VI (1 – spermatogonia, 2 saluran darah, 3 – membran testis, 4 – sisa sperma, 5 – epitelium folikel)

Dalam kebanyakan ikan, inseminasi adalah luaran. Ikan carilaginous, yang dicirikan oleh inseminasi dalaman dan viviparity, mempunyai perubahan yang sepadan dalam struktur alat pembiakan. Perkembangan embrio mereka berlaku di bahagian posterior oviduk, dipanggil rahim. Daripada ikan bertulang, viviparity adalah tipikal untuk gambusia, siakap, dan banyak lagi ikan akuarium. Anak-anak mereka berkembang di dalam ovari.



Baru di tapak

>

Paling popular