நிரப்பு நிலைப்படுத்தல் எதிர்வினை (CFR) என்பது ஒரு குறிப்பிட்ட ஆன்டிஜென்-ஆன்டிபாடி காம்ப்ளக்ஸ் எப்பொழுதும் தன்னைத்தானே உறிஞ்சிக் கொள்கிறது (பிணைக்கிறது) என்ற உண்மையை அடிப்படையாகக் கொண்டது.
இந்த எதிர்வினை ஆன்டிஜென்களை அடையாளம் காணவும், நோய்த்தொற்றுகளின் செரோடயாக்னோசிஸ், குறிப்பாக ஸ்பைரோசெட்கள் (வாஸர்மேன் எதிர்வினை), ரிக்கெட்சியா மற்றும் வைரஸ்கள் ஆகியவற்றால் ஏற்படும் நோய்கள் * பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது.
RSC என்பது ஒரு சிக்கலான செரோலாஜிக்கல் எதிர்வினை. இது நிரப்பு மற்றும் இரண்டு ஆன்டிஜென்-ஆன்டிபாடி அமைப்புகளை உள்ளடக்கியது. அடிப்படையில், இவை இரண்டு செரோலாஜிக்கல் எதிர்வினைகள்.
முதல் அமைப்பு - முக்கியமானது ஆன்டிஜென் மற்றும் ஆன்டிபாடி (ஒன்று அறியப்படுகிறது, மற்றொன்று இல்லை). ஒரு குறிப்பிட்ட அளவு நிரப்பு அதில் சேர்க்கப்படுகிறது. இந்த அமைப்பின் ஆன்டிஜென் மற்றும் ஆன்டிபாடி பொருந்தினால், அவை இணைக்கப்பட்டு நிரப்பப்படும். இதன் விளைவாக சிக்கலானது நன்றாக சிதறடிக்கப்பட்டு, தெரியவில்லை.
இந்த வளாகத்தின் உருவாக்கம் இரண்டாவது ஹீமோலிடிக் அல்லது காட்டி அமைப்பைப் பயன்படுத்தி கண்டறியப்படுகிறது. இது செம்மறி இரத்த சிவப்பணுக்கள் (ஆன்டிஜென்) மற்றும் தொடர்புடைய ஹீமோலிடிக் சீரம் (ஆன்டிபாடி), அதாவது, ஆயத்தமான நோயெதிர்ப்பு வளாகத்தை உள்ளடக்கியது. இந்த அமைப்பில், சிவப்பு இரத்த அணுக்களின் சிதைவு நிரப்பு முன்னிலையில் மட்டுமே ஏற்படும். நிரப்புதல் முதல் அமைப்பால் பிணைக்கப்பட்டிருந்தால் (ஆன்டிஜென் மற்றும் ஆன்டிபாடி அதில் ஒத்திருந்தால்), இரண்டாவது அமைப்பில் ஹீமோலிசிஸ் இருக்காது - இலவச நிரப்பு இல்லாததால். ஹீமோலிசிஸ் இல்லாதது (குழாயின் உள்ளடக்கங்கள் மேகமூட்டமாக இருக்கும் அல்லது கீழே எரித்ரோசைட்டுகளின் வண்டல் உள்ளது) நேர்மறையான RSC விளைவாக பதிவு செய்யப்படுகிறது.
முதல் அமைப்பில் ஆன்டிஜென் ஆன்டிபாடியுடன் பொருந்தவில்லை என்றால், நோயெதிர்ப்பு வளாகம் உருவாகாது மற்றும் நிரப்பு இலவசமாக இருக்கும்! இலவசமாக மீதமுள்ள, நிரப்பு இரண்டாவது அமைப்பில் பங்கேற்கிறது, இது ஹீமோலிசிஸை ஏற்படுத்துகிறது; RSC முடிவு எதிர்மறையானது (குழாய்களின் உள்ளடக்கங்கள் வெளிப்படையானவை - "அரக்கு இரத்தம்").
நிரப்பு நிலைப்படுத்தல் எதிர்வினையின் கூறுகள்:
ஆன்டிஜென் - பொதுவாக லைசேட், எக்ஸ்ட்ராக்ட், ஹேப்டன்; குறைவாக அடிக்கடி ஒரு இடைநீக்கம்.
1.நோயாளி அமைப்பின் ஆன்டிபாடி-சீரம்
2. நிரப்பு - சீரம் கினிப் பன்றிகள்
3. ஆன்டிஜென் - செம்மறி சிவப்பு இரத்த அணுக்கள்
4.ஆன்டிபாடி - ஹீமோலிசின் செம்மறி இரத்த சிவப்பணுக்கள்
5.ஐசோடோனிக் தீர்வு
ஆர்எஸ்சியில் அதிக எண்ணிக்கையிலான சிக்கலான கூறுகள் ஈடுபட்டுள்ளதால், அவை முதலில் டைட்ரேட் செய்யப்பட்டு சரியான அளவுகளில் எதிர்வினைக்கு எடுத்துக்கொள்ளப்பட வேண்டும். சம அளவுகள்: 0.5 அல்லது 0.25, குறைவாக அடிக்கடி 0.2 மி.லி. அதன்படி, முழு பரிசோதனையும் 2.5, 1.25 அல்லது 1.0 மில்லி அளவுகளில் மேற்கொள்ளப்படுகிறது (பெரிய தொகுதிகள் மிகவும் துல்லியமான முடிவைக் கொடுக்கும்). எதிர்வினை கூறுகளின் டைட்ரேஷன் பரிசோதனையின் அதே அளவிலேயே மேற்கொள்ளப்படுகிறது, காணாமல் போன பொருட்களை ஒரு ஐசோடோனிக் தீர்வுடன் மாற்றுகிறது.
தேவையான பொருட்கள் தயாரித்தல்
ஹீமோலிடிக் சீரம் (ஹீமோலிசின்). சீரம் அதன் டைட்டரை விட 3 மடங்கு குறைவாக நீர்த்தப்படுகிறது (பக். 211 ஐப் பார்க்கவும்). முழு பரிசோதனைக்கும் சீரம் ஒரு பொதுவான நீர்த்தலைத் தயாரிக்கவும், ஒரு சோதனைக் குழாயில் உள்ள சீரம் அளவை (உதாரணமாக, 0.5 மில்லி) சோதனைக் குழாய்களின் எண்ணிக்கையால் பெருக்குவதன் மூலம் அதன் அளவு தீர்மானிக்கப்படுகிறது, இது பரிசோதனையின் எண்ணிக்கையை விட சற்று அதிகமாகும்.
2. செம்மறி இரத்த சிவப்பணுக்கள். சோதனையில் உள்ள சோதனைக் குழாய்களின் முழு எண்ணிக்கையிலும் கழுவப்பட்ட செம்மறி எரித்ரோசைட்டுகளின் 3% இடைநீக்கத்தைத் தயாரிக்கவும் (பக். 211 ஐப் பார்க்கவும்). ஹீமோலிடிக் அமைப்பைத் தயாரிக்க, பரிசோதனையில் சேர்ப்பதற்கு 30 நிமிடங்களுக்கு முன், சம அளவு நீர்த்த ஹீமோலிசின் மற்றும் இரத்த சிவப்பணுக்களின் இடைநீக்கம் ஆகியவற்றைக் கலந்து, இரத்த சிவப்பணுக்களுடன் சீரம் சேர்த்து, நன்கு கலந்து 30 நிமிடங்கள் 37˚C வெப்பநிலையில் அடைகாக்கவும்.
3. நிரப்பு பொதுவாக 1:10 நீர்த்தப்படுகிறது. ஒவ்வொரு பரிசோதனைக்கும் முன் அது டைட்ரேட் செய்யப்பட வேண்டும். நிரப்பு டைட்டர் அதன் மிகச்சிறிய அளவு, ஹீமோலிடிக் அமைப்பில் சேர்க்கப்படும் போது, முழுமையான ஹீமோலிசிஸ் 1 மணி நேரத்திற்குள் 37˚C இல் நிகழ்கிறது. நிரப்பு டைட்ரேஷன் திட்டம் அட்டவணை 21 இல் வழங்கப்பட்டுள்ளது.
கவனம்! முக்கிய பரிசோதனையின் அதே தொகுதியில் பாராட்டை டைட்ரேட் செய்யவும், காணாமல் போன பொருட்களை ஐசோடோனிக் கரைசலுடன் மாற்றவும்.
முடிவுகளுக்கான கணக்கியல். கட்டுப்பாடுகளில் ஹீமோலிசிஸின் தடயங்கள் கூட இருக்கக்கூடாது, ஏனெனில் அவற்றில் ஒன்று நிரப்புதலைக் கொண்டிருக்கவில்லை, மற்றொன்று ஹீமோலிசின் இல்லை. எதிர்வினை கூறுகளுக்கு ஹீமோடாக்சிசிட்டி இல்லை என்று கட்டுப்பாடுகள் குறிப்பிடுகின்றன (சிவப்பு அணுக்களை தன்னிச்சையாக குறைக்கும் திறன்).
கொடுக்கப்பட்ட அட்டவணையில் 21 எடுத்துக்காட்டில், 1:10 நீர்த்துப்போகும்போது நிரப்பு டைட்டர் 0.15 மில்லி ஆகும். ஒரு பரிசோதனையில், வினையின் பிற கூறுகளால் அதன் குறிப்பிடப்படாத உறிஞ்சுதல் காரணமாக நிரப்பியின் செயல்பாடு குறையலாம், எனவே, சோதனைக்கு, நிரப்பு அளவு அதிகரிக்கப்படுகிறது: டைட்டரைத் தொடர்ந்து டோஸ் எடுக்கப்படுகிறது. இது வேலை செய்யும் அளவு. கொடுக்கப்பட்ட எடுத்துக்காட்டில், இது 1:10 நீர்த்தலில் 0.2 நிரப்புதலுக்கு சமம். RSC இல் உள்ள அனைத்து கூறுகளும் சம அளவுகளில் எடுக்கப்பட வேண்டும் என்பதால் (எங்கள் எடுத்துக்காட்டில் இது 0: 5 மிலி), 0.3 மில்லி ஐசோடோனிக் கரைசலை நிரப்புதலின் வேலை டோஸில் (0.2 மில்லி 1:10) சேர்க்க வேண்டும். முழு பரிசோதனைக்கும், அவை ஒவ்வொன்றின் அளவு (முழுமை மற்றும் ஐசோடோனிக் தீர்வு.
முழு பரிசோதனைக்கும், அவை ஒவ்வொன்றின் அளவும் (நிறைவு மற்றும் ஐசோடோனிக் தீர்வு) RSC இல் பங்கேற்கும் சோதனைக் குழாய்களின் எண்ணிக்கையால் பெருக்கப்படுகிறது. எடுத்துக்காட்டாக, 50 சோதனைக் குழாய்களில் ஒரு பரிசோதனையை நடத்த, நீங்கள் 10 மில்லி நிரப்பு 1:10 (0.2 mlx50) மற்றும் 15 மில்லி ஐசோடோனிக் கரைசல் (0.3 mlx50) எடுக்க வேண்டும்.
4. ஆன்டிஜென் பொதுவாக அதன் டைட்டர் குறிக்கப்பட்ட ஆயத்தமாக பெறப்படுகிறது, அதாவது. ஆன்டிஜெனை நீர்த்துப்போகச் செய்த பிறகு, 1 மில்லியில் இருக்க வேண்டிய அளவு. எடுத்துக்காட்டாக, 0.4 என்ற டைட்டருடன், இது 0.96 மில்லி ஐசோடோனிக் கரைசலில் நீர்த்தப்படுகிறது. பரிசோதனைக்காக, பாதி டைட்டருக்கு (0.5 மில்லி) சமமான ஆன்டிஜெனின் அளவை நான் எடுத்துக்கொள்கிறேன். இது அவரது வேலை அளவு. பரிசோதனையில் உள்ள சோதனைக் குழாய்களின் எண்ணிக்கையால் 0.5 மில்லி பெருக்குவதன் மூலம் முழு பரிசோதனைக்கான மொத்த ஆன்டிஜென் நீர்த்தலைக் கணக்கிடவும்.
5. ஆன்டிபாடி - நோயாளியின் சீரம். புதிய சீரம் சோதனைக்கு முன் செயலிழக்கச் செய்யப்பட்டு, அதில் இருக்கும் நிரப்பியை அழிக்கிறது. இதைச் செய்ய, நீர் குளியல் அல்லது தெர்மோஸ்டாட் கொண்ட செயலிழந்த நிலையில் 56˚C வெப்பநிலையில் 30 நிமிடங்கள் சூடுபடுத்தப்படுகிறது. பிந்தைய முறை விரும்பத்தக்கது: இது மோர் அதிக வெப்பமடைவதற்கான சாத்தியத்தை நீக்குகிறது, அதாவது, அதன் சிதைவு. டெனாச்சர் செய்யப்பட்ட செரா சோதனைக்கு ஏற்றது அல்ல. நோயாளியின் சீரம் பொதுவாக 1:10 முதல் 1:160 வரை நீர்த்தலில் பயன்படுத்தப்படுகிறது.
அட்டவணை எண். 14
| தேவையான பொருட்கள், மி.லி | சோதனை குழாய்கள் | |||||||||||
| அனுபவம் | கட்டுப்பாடு | |||||||||||
| ஹீமோலிடிக் அமைப்பு | சிவப்பு இரத்த அணுக்கள் | |||||||||||
| ஐசோடோனிக் தீர்வு | 1,45 | 1,4 | 1,35 | 1,3 | 1,25 | 1,2 | 1,15 | 1,1 | 1,05 | 1,0 | 1,5 | 1,5 |
| நிரப்பு 1:10 | 0,05 | 0,1 | 0,15 | 0,2 | 0,25 | 0,3 | 0,35 | 0,4 | 0,45 | 0,5 | ― | 0,5 |
| ஹீமோலிடிக் அமைப்பு | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | ― |
| செம்மறி இரத்த சிவப்பணுக்களின் 3% இடைநீக்கம் | ― | ― | ― | ― | ― | ― | ― | ― | ― | ― | ― | 0,5 |
| குழாய்கள் நன்கு அசைக்கப்பட்டு 37˚C வெப்பநிலையில் 1 மணி நேரம் அடைகாக்கப்படும். | ||||||||||||
| விளைவாக | ஹீமோலிசிஸ் இல்லை | ஹீமோலிசிஸ் | ஹீமோலிசிஸ் இல்லை |
இம்யூன் செரா பெரும்பாலும் உற்பத்தி நிலைகளில் தயாரிக்கப்பட்டு செயலிழந்து வெளியிடப்படுகிறது. அவை 1:50 மற்றும் அதற்கு மேல் நீர்த்தப்படுகின்றன.
அனைத்து பொருட்களும் சற்று அதிகமாக தயாரிக்கப்படுகின்றன.
| தேவையான பொருட்கள், மி.லி | சோதனை குழாய்கள் | |||||||
| அனுபவம் கட்டுப்பாடு | ||||||||
| சீரம் | ஆன்டிஜென் | ஹீமோலிடிக் அமைப்பு | ஒரு வேலை அளவு பூர்த்தி | |||||
| ½ | ||||||||
| கட்டம் 1 ஐசோடோனிக் தீர்வு | ― | 0,5 | 0,5 | 1,5 | 1,25 | 1,0 | 0,5 | |
| சோதனை சீரம் 1:10 நீர்த்த | 0,5 | 0,5 | ― | ― | ― | ― | ― | |
| வேலை செய்யும் டோஸில் ஆன்டிஜென் | 0,5 | 0,5 | ― | ― | ― | ― | ||
| வேலை அளவு 1:10 பூர்த்தி | 0,5 | 0,5 | 0,5 | ― | 0,25 | 0,5 | 1,0 | |
| குழாய்கள் நன்கு அசைக்கப்பட்டு, 37°C வெப்பநிலையில் 45 நிமிடங்கள் 1 மணிநேரம் அல்லது 4°C வெப்பநிலையில் 18 மணி நேரம் அடைக்கப்படுகிறது. | ||||||||
| கட்டம் 2 ஹீமோலிடிக் அமைப்பு | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | |
| குழாய்கள் 2, 3, 6 மற்றும் 7 குழாய்களில் முழுமையான ஹீமோலிசிஸ் வரை 37˚C வெப்பநிலையில் முழுமையாக அசைக்கப்பட்டு அடைகாக்கப்படுகிறது. | ||||||||
| விளைவாக | நேர்மறை அல்லது எதிர்மறை | ― | ― | ++++ | (+) | ― | ― | |
அட்டவணை எண். 15
முக்கிய பரிசோதனையை நடத்துதல்
சோதனை அமைக்கும் போது, அது மிகவும் உள்ளது; கூறுகள் சேர்க்கப்படும் வரிசை முக்கியமானது. சோதனை இரண்டு கட்டங்களில் மேற்கொள்ளப்படுகிறது.
கட்டம் I. தேவையான அளவு ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு கரைசல் சோதனைக் குழாய்களில் ஊற்றப்படுகிறது, பின்னர் தேவையான அளவு நீர்த்த சீரம் மற்றும் ஆன்டிஜெனின் வேலை அளவுகள் மற்றும் அதே அளவு நிரப்பப்படும். சோதனையானது அதில் உள்ள அனைத்து பொருட்களின் கட்டுப்பாட்டுடன் இருக்க வேண்டும்: சீரம், ஆன்டிஜென், ஹீமோலிடிக் அமைப்பு மற்றும் நிரப்பு.
குழாய்கள் நன்கு அசைக்கப்பட்டு, 37°C வெப்பநிலையில் 45 நிமிடம்-1 மணிநேரம் அல்லது 4°C ("குளிர்நிலையில் RSC") 18 மணிநேரத்திற்கு அடைக்கப்படுகிறது.இந்த நேரத்தில், ஒரு குறிப்பிட்ட வளாகத்தின் முன்னிலையில், நிரப்பு பிணைப்பு ஏற்படுகிறது. "குளிர்காலத்தில்" எதிர்வினையை மேற்கொள்வது அதன் உணர்திறன் மற்றும் தனித்தன்மையை கணிசமாக அதிகரிக்கிறது.
இரண்டாம் கட்டம். அடைகாக்கும் முடிவில், அனைத்து சோதனைக் குழாய்களிலும் 1 மில்லி ஹீமோலிடிக் அமைப்பு சேர்க்கப்படுகிறது, இது ஒரு தெர்மோஸ்டாட்டில் 30 நிமிடங்கள் (உணர்திறன்) வைக்கப்படுகிறது. சோதனைக் குழாய்கள் அசைக்கப்பட்டு மீண்டும் தெர்மோஸ்டாட்டில் வைக்கப்படுகின்றன.
கணக்கியல் முடிவு பற்றி. குழாய்கள் 2, 3, 6 மற்றும் 7 குழாய்களில் முழுமையான ஹீமோலிசிஸ் வரை தெர்மோஸ்டாட்டில் விடப்படும் (சீரம், ஆன்டிஜெனின் கட்டுப்பாடு மற்றும் ஒன்று மற்றும் இரண்டு டோஸ்களுக்கு நிரப்புதல்). 7 வது சோதனைக் குழாயில் முதலில் ஹீமோலிசிஸ் ஏற்படும், இதில் இரட்டை அளவு நிரப்பு உள்ளது. இந்த குழாயில் ஹீமோலிசிஸ் ஏற்பட்டு அதன் உள்ளடக்கங்கள் முற்றிலும் வெளிப்படையானதாக மாறிய பிறகு, மீதமுள்ள கட்டுப்பாடுகளை நீங்கள் குறிப்பாக கவனமாக கண்காணிக்க வேண்டும். 2வது, 3வது மற்றும் 6வது சோதனைக் குழாய்களில் உள்ள திரவம் வெளிப்படையானதாக மாறியவுடன், தெர்மோஸ்டாட்டில் இருந்து சோதனைக் குழாய்கள் கொண்ட ரேக்கை உடனடியாக அகற்ற வேண்டும். சோதனையானது தேவையானதை விட அதிக நேரம் தெர்மோஸ்டாட்டில் வைக்கப்படவில்லை என்பது 5 வது சோதனைக் குழாயில் லேசான கொந்தளிப்பு (முழுமையற்ற ஹீமோலிசிஸ்) இருப்பதன் மூலம் குறிக்கப்படுகிறது - இது நிரப்புதலின் வேலை டோஸில் பாதி மட்டுமே உள்ளது மற்றும் பரிசோதனை என்றால் முழுமையான ஹீமோலிசிஸ் ஏற்படாது. சரியாக அமைக்க.
சீரம் மற்றும் ஆன்டிஜென் கட்டுப்பாட்டில் உள்ள ஹீமோலிசிஸ் (குழாய்கள் 2 மற்றும் 3) அவற்றின் டோஸ்கள் சரியாக தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டதையும், சீரம் அல்லது ஆன்டிஜென் தாமாகவே பிணைக்கவில்லை என்பதையும் குறிக்கிறது.
ஹீமோலிடிக் அமைப்பின் கட்டுப்பாட்டில் (சோதனை குழாய் 4), அது சரியாக வேலை செய்தால், ஹீமோலிசிஸின் தடயங்கள் கூட இருக்கக்கூடாது - அதில் நிரப்பு இல்லை.
கட்டுப்பாடுகள் சரியாக முடிக்கப்பட்டதாக நீங்கள் உறுதியாக நம்பினால், அனுபவத்தை நீங்கள் கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ளலாம். சோதனைக் குழாய்களில் ஹீமோலிசிஸ் இல்லாதது எதிர்வினையின் நேர்மறையான விளைவாகக் கருதப்படுகிறது. சீரம் எடுக்கப்பட்ட ஆன்டிஜெனுக்கு குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடிகள் இருப்பதை இது குறிக்கிறது. சிக்கலான அவை பிணைக்கப்பட்ட நிரப்பியை உருவாக்கியது மற்றும் ஹீமோலிசிஸ் எதிர்வினையில் அதன் பங்கேற்பைத் தடுத்தது. சோதனைக் குழாய்களில் ஹீமோலிசிஸ் ஏற்பட்டால், எதிர்வினை முடிவு எதிர்மறையாக மதிப்பிடப்படுகிறது. IN இந்த வழக்கில்ஆன்டிஜென் மற்றும் ஆன்டிபாடிக்கு இடையே எந்த தொடர்பும் இல்லை, நிரப்பு பிணைக்கப்படவில்லை மற்றும் ஹீமோலிசிஸ் எதிர்வினையில் ஈடுபட்டுள்ளது.
நோயாளியின் சீரம் உடன் இணையாக, அதே பரிசோதனையானது வெளிப்படையாக நேர்மறை சீரம் (அதாவது, கொடுக்கப்பட்ட ஆன்டிஜெனுக்கு ஆன்டிபாடிகளைக் கொண்ட சீரம்) மற்றும் குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடிகள் இல்லாத எதிர்மறை சீரம் ஆகியவற்றுடன் செய்யப்படுகிறது. பரிசோதனை சரியாக அமைக்கப்பட்டால், முதல் வழக்கில் ஹீமோலிசிஸில் தாமதம் இருக்க வேண்டும், இரண்டாவது வழக்கில், ஹீமோலிசிஸ் இருக்கும்.
எதிர்வினையின் தீவிரம் பின்வருமாறு வெளிப்படுத்தப்படுகிறது:
ஹீமோலிசிஸின் முழுமையான தாமதம். சிவப்பு இரத்த அணுக்கள் ஒரே மாதிரியான கொந்தளிப்பை உருவாக்குகின்றன அல்லது கீழே குடியேறுகின்றன. இந்த வழக்கில், சோதனைக் குழாயில் உள்ள திரவம் நிறமற்றதாக மாறும்;
தோராயமாக 25% இரத்த சிவப்பணுக்கள் லைஸ் செய்யப்படுகின்றன. குறைந்த வண்டல் உள்ளது, அதற்கு மேலே உள்ள திரவம் சற்று இளஞ்சிவப்பு. RSC யின் முடிவும் மிகவும் நேர்மறையானதாக மதிப்பிடப்படுகிறது;
தோராயமாக 50% இரத்த சிவப்பணுக்கள் லைஸ் செய்யப்படுகின்றன. வண்டல் சிறியது, திரவம் இளஞ்சிவப்பு. நேர்மறையான RSC முடிவு;
தோராயமாக 75% இரத்த சிவப்பணுக்கள் லைஸ் செய்யப்படுகின்றன. ஒரு சிறிய வண்டல், அதன் மேலே ஒரு தீவிர நிற திரவம் உள்ளது. கேள்விக்குரிய RSC முடிவு;
அனைத்து சிவப்பு இரத்த அணுக்களும் லைஸ் செய்யப்பட்டன. திரவமானது தீவிர நிறமுடையது மற்றும் முற்றிலும் வெளிப்படையானது. எதிர்மறையான RSK முடிவு.
பாக்டீரியா, வைரஸ், புரோட்டோசோல் நோய்த்தொற்றுகள் உள்ள நோயாளிகளின் இரத்த சீரம் உள்ள ஆன்டிபாடிகளைக் கண்டறியவும், நோயாளிகளிடமிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்ட வைரஸ்களை அடையாளம் காணவும் வகை செய்யவும் இந்த எதிர்வினை பயன்படுத்தப்படுகிறது.
RSC என்பது சிக்கலான செரோலாஜிக்கல் எதிர்வினைகளைக் குறிக்கிறது, இதில் ஆன்டிஜென், ஆன்டிபாடி மற்றும் நிரப்பு ஆகியவற்றுடன் கூடுதலாக, ஹீமோலிடிக் அமைப்பும் பங்கேற்கிறது, எதிர்வினை முடிவுகளை வெளிப்படுத்துகிறது. RSC இரண்டு கட்டங்களில் தொடர்கிறது: முதலாவது, ஆன்டிபாடியுடன் ஆன்டிபாடியின் தொடர்பு, நிரப்பு பங்கேற்பு மற்றும் இரண்டாவது ஹீமோலிடிக் முறையைப் பயன்படுத்தி நிரப்பு பிணைப்பின் அளவை அடையாளம் காண்பது. இந்த அமைப்பு செம்மறி சிவப்பு இரத்த அணுக்கள் மற்றும் சிவப்பு இரத்த அணுக்கள் கொண்ட ஆய்வக விலங்குகளுக்கு நோய்த்தடுப்பு மூலம் பெறப்பட்ட ஹீமோலிடிக் சீரம் ஆகியவற்றைக் கொண்டுள்ளது. எரித்ரோசைட்டுகள் செயலாக்கப்படுகின்றன - 30 நிமிடங்களுக்கு 37 ° C வெப்பநிலையில் சீரம் சேர்ப்பதன் மூலம் உணர்திறன். உணர்திறன் கொண்ட செம்மறி எரித்ரோசைட்டுகளின் சிதைவு அவை ஹீமோலிடிக் நிரப்பு அமைப்பில் சேர்ந்தால் மட்டுமே ஏற்படுகிறது. அது இல்லாத நிலையில், இரத்த சிவப்பணுக்கள் மாறாது. RSC இன் முடிவுகள் சோதனை சீரம் உள்ள ஆன்டிபாடிகள் இருப்பதைப் பொறுத்தது. சீரம் எதிர்வினையில் பயன்படுத்தப்படும் ஆன்டிஜெனுடன் ஒரே மாதிரியான ஆன்டிபாடிகளைக் கொண்டிருந்தால், இதன் விளைவாக வரும் ஆன்டிஜென்-ஆன்டிபாடி வளாகம் பிணைக்கிறது மற்றும் பிணைக்கிறது. ஒரு ஹீமோலிடிக் அமைப்பைச் சேர்க்கும்போது, இந்த விஷயத்தில், ஹீமோலிசிஸ் ஏற்படாது, ஏனெனில் அனைத்து நிரப்புகளும் ஆன்டிஜென்-ஆன்டிபாடி வளாகத்தின் குறிப்பிட்ட பிணைப்பில் செலவிடப்படுகின்றன.
சிவப்பு இரத்த அணுக்கள் மாறாமல் இருக்கும், எனவே சோதனைக் குழாயில் ஹீமோலிசிஸ் இல்லாதது நேர்மறை RBC ஆக பதிவு செய்யப்படுகிறது. சீரத்தில் உள்ள ஆன்டிஜெனுடன் தொடர்புடைய ஆன்டிபாடிகள் இல்லாத நிலையில், ஒரு குறிப்பிட்ட ஆன்டிஜென்-ஆன்டிபாடி வளாகம் உருவாகாது மற்றும் நிரப்பு இலவசம். ஒரு ஹீமோலிடிக் அமைப்பு சேர்க்கப்படும்போது, பூரணமானது அதனுடன் இணைகிறது மற்றும் இரத்த சிவப்பணுக்களின் ஹீமோலிசிஸை ஏற்படுத்துகிறது. இரத்த சிவப்பணுக்களின் அழிவு மற்றும் அவற்றின் ஹீமோலிசிஸ் எதிர்மறையான எதிர்வினையை வகைப்படுத்துகிறது.
RSCயை நிலைநிறுத்த, பின்வருபவை தேவைப்படுகின்றன: நோயாளியின் சீரம், நிரப்பு, செம்மறி எரித்ரோசைட்டுகள் மற்றும் ஹீமோலிடிக் சீரம், அத்துடன் ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு கரைசல் ஆகியவற்றைக் கொண்ட ஒரு ஹீமோலிடிக் அமைப்பு.
எதிர்வினை செரோலாஜிக்கல் குழாய்களில் மேற்கொள்ளப்படுகிறது. ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு கரைசலில் மூன்று முறை கழுவுவதன் மூலம் செம்மறி ஆடுகளின் இரத்த சிவப்பணுக்கள் பெறப்படுகின்றன. ஹீமோலிடிக் சீரம் ஆம்பூல்களில் ஆயத்தமாக தயாரிக்கப்படுகிறது, இதன் லேபிள் அதன் டைட்டரைக் குறிக்கிறது, அதாவது, சீரம் அதிகபட்ச நீர்த்தலைக் குறிக்கிறது, இது இரத்த சிவப்பணுக்களில் நிரப்பப்பட்ட நிலையில் சேர்க்கப்படும்போது ஹீமோலிசிஸை ஏற்படுத்துகிறது. ஹீமோலிடிக் சீரம் முயல்கள் போன்ற விலங்குகளுக்கு செம்மறி இரத்த சிவப்பணுக்கள் மூலம் தடுப்பூசி மூலம் பெறப்படுகிறது. எதிர்வினை அமைக்கும் போது, சீரம் டிரிபிள் டைட்டரில் பயன்படுத்தப்படுகிறது. எடுத்துக்காட்டாக, ஹீமோலிடிக் சீரம் டைட்டர் 1: 1200, மற்றும் வேலை நீர்த்தல் 1: 400. புதிய கினிப் பன்றி இரத்த சீரம் (24-48 மணி நேரத்திற்குள்) அல்லது ஆம்பூல்களில் உள்ள உலர்ந்த நிரப்பு நிரப்பியாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது.
RSC ஐச் செய்வதற்கு முன், நிரப்பு 1:10 நீர்த்த மற்றும் டைட்டரை நிறுவ டைட்ரேட் செய்யப்படுகிறது - இந்த எதிர்வினையில் பயன்படுத்தப்படும் ஹீமோலிடிக் அமைப்புடன் இணைந்து இரத்த சிவப்பணுக்களின் ஹீமோலிசிஸ் மூலம் உற்பத்தி செய்யப்படும் மிகச்சிறிய அளவு நிரப்பு. ஆன்டிஜெனின் சாத்தியமான ஆன்டி-கம்ப்ளெமெண்டரி பண்புகளை கணக்கில் எடுத்துக்கொள்வது, ஒரு எதிர்வினையை நடத்தும் போது, 20-30% அதிகரிப்பு நிறுவப்பட்ட வேலை நிரப்புதலுக்கு செய்யப்படுகிறது.
RSCக்கான ஆன்டிஜென் என்பது கொல்லப்பட்ட பாக்டீரியாவின் இடைநீக்கங்கள், இந்த இடைநீக்கங்களிலிருந்து தயாரிக்கப்பட்ட சாறுகள் மற்றும் நுண்ணுயிரிகளின் தனிப்பட்ட வேதியியல் பின்னங்கள் ஆகும். ஒரு ஆன்டிஜெனின் முக்கிய தேவை, நிரப்பு செயல்பாட்டின் தடுப்பு இல்லாதது. இது நிரப்பு எதிர்ப்பு பண்புகளைக் கொண்டிருக்கக்கூடாது. ஆன்டிஜெனின் இந்த பண்புகளை அடையாளம் காண, எதிர்வினையில் பயன்படுத்தப்படும் ஆன்டிஜெனின் முன்னிலையில் நிரப்பு கூடுதலாக டைட்ரேட் செய்யப்படுகிறது. ஆர்எஸ்சியை நடத்துவதற்கு சில திட்டங்கள் உள்ளன. ஹீமோலிடிக் அமைப்பில் இரத்த சிவப்பணுக்களின் ஹீமோலிசிஸின் இருப்பு அல்லது இல்லாமையால் எதிர்வினையின் முடிவுகள் கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ளப்படுகின்றன. சிபிலிஸ் (வாஸ்ர்மேன் எதிர்வினை), கோனோரியா (போர்டெட்-கெங்கோ எதிர்வினை), டாக்ஸோபிளாஸ்மோசிஸ், ரிக்கெட்சியல் மற்றும் வைரஸ் நோய்கள்.
நிரப்பு நிலைப்படுத்தல் எதிர்வினை (CFR) என்பது ஆன்டிஜென்கள் மற்றும் ஆன்டிபாடிகள் ஒன்றுக்கொன்று ஒத்துப்போகும் போது, அவை ஒரு நோயெதிர்ப்பு வளாகத்தை உருவாக்குகின்றன, அதில் நிரப்பு (C) ஆன்டிபாடிகளின் Fc துண்டு மூலம் இணைக்கப்படுகிறது, அதாவது, நிரப்பு ஆன்டிஜென்-ஆன்டிபாடி வளாகத்தால் பிணைக்கப்பட்டுள்ளது. ஆன்டிஜென்-ஆன்டிபாடி வளாகம் உருவாகவில்லை என்றால், நிரப்பு இலவசம்.
AG மற்றும் AT இன் குறிப்பிட்ட தொடர்பு நிரப்புதலின் உறிஞ்சுதலுடன் (பிணைப்பு) சேர்ந்துள்ளது. நிரப்பு பொருத்துதல் செயல்முறை பார்வைக்கு வெளிப்படையாகத் தெரியவில்லை என்பதால், J. Bordet மற்றும் O. Zhangu ஆகியோர் ஹீமோலிடிக் அமைப்பை (செம்மறியாடு சிவப்பு இரத்த அணுக்கள் + ஹீமோலிடிக் சீரம்) ஒரு குறிகாட்டியாகப் பயன்படுத்த முன்மொழிந்தனர், இது AG-AT வளாகத்தால் நிரப்பப்பட்டதா என்பதைக் காட்டுகிறது. AG மற்றும் AT ஆகியவை ஒருவருக்கொருவர் ஒத்திருந்தால், அதாவது ஒரு நோயெதிர்ப்பு வளாகம் உருவாகியிருந்தால், இந்த வளாகத்தால் நிரப்புதல் பிணைக்கப்பட்டுள்ளது மற்றும் ஹீமோலிசிஸ் ஏற்படாது. AT AG உடன் ஒத்துப்போகவில்லை என்றால், சிக்கலானது உருவாக்கப்படவில்லை மற்றும் நிரப்புகிறது, இலவசமாக மீதமுள்ளது, இரண்டாவது அமைப்புடன் இணைந்து ஹீமோலிசிஸை ஏற்படுத்துகிறது.
எதிர்வினை முன்னேற்றம்
எதிர்வினை இரண்டு அமைப்புகளை உள்ளடக்கிய இரண்டு கட்டங்களில் நிகழ்கிறது; பாக்டீரியா மற்றும் ஹீமோலிடிக். முதல் எதிர்வினை (குறிப்பிட்டது) ஆன்டிஜென் 4-+ ஆன்டிபாடி + நிரப்புதலை உள்ளடக்கியது. ஆன்டிபாடிகள் ஒரு ஆன்டிஜெனுடன் பொருந்தும்போது ஏற்படும் ஒரு நேர்மறையான எதிர்வினை முடிவு, ஒரு குறிப்பிட்ட பாக்டீரியா ஆன்டிஜென்-ஆன்டிபாடி வளாகத்தை உறிஞ்சியுடன் உருவாக்குவதன் மூலம் வகைப்படுத்தப்படுகிறது, அல்லது அவர்கள் சொல்வது போல், "பிணைக்கப்பட்ட" நிரப்பு. கண்ணுக்குத் தெரியாத நிலையில், வளாகம் அது உருவான சூழலில் எந்த வெளிப்புற மாற்றங்களையும் ஏற்படுத்தாது. ஆன்டிஜென் மற்றும் சீரம் ஆன்டிபாடிக்கு இடையே குறிப்பிட்ட தொடர்பு இல்லாத நிலையில் எதிர்மறையான RSC முடிவு ஏற்படுகிறது மற்றும் இலவச செயலில் நிரப்பியைப் பாதுகாப்பதன் மூலம் வகைப்படுத்தப்படுகிறது. RSC இன் முதல் கட்டத்தை 37°C (1-2 மணிநேரம்) வெப்பநிலையில் அல்லது குளிர்சாதனப் பெட்டியில் 3-4°C (18-20 மணிநேரம்) வெப்பநிலையில் மேற்கொள்ளலாம். குளிரில் ஆன்டிஜென்-ஆன்டிபாடி நோயெதிர்ப்பு வளாகத்தின் நீண்டகால உருவாக்கத்துடன், நிரப்புதலின் முழுமையான பிணைப்பு ஏற்படுகிறது, இதன் விளைவாக, எதிர்வினையின் உணர்திறன் அதிகரிக்கிறது. ஒப்பீட்டு பரிசோதனைகளை நடத்தும் போது, சோவியத் நோயெதிர்ப்பு நிபுணர் கல்வியாளர். V.I. Ioffe மற்றும் அவரது மாணவர்கள் குளிரில் நீடித்த நிரப்பு நிலைப்பாட்டின் நிலைமைகளின் கீழ், 100-500 மடங்கு சிறிய அளவிலான ஆன்டிஜெனைப் பிடிக்கவும் பெறவும் முடியும் என்பதைக் காட்டியது. நேர்மறையான முடிவுகள் 1-2 மணி நேரம் 37 ° C வெப்பநிலையில் நிரப்பு நிலைப்படுத்தல் பரிசோதனையை விட நோயெதிர்ப்பு சீரம் அதிக நீர்த்துப்போகும்போது, இரண்டாவது கட்ட எதிர்வினை (காட்டி) ஹீமோலிடிக் அமைப்பின் வினைகளுக்கு இடையில் ஏற்படுகிறது (3% இடைநீக்கத்தின் கலவை எரித்ரோசைட்டுகள் மற்றும் சம அளவுகளில் ஹீமோலிடிக் சீரம்) 37 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில், வினையின் முதல் கட்டத்திலிருந்து (எதிர்மறை எதிர்வினை) இருந்து விடுபட்ட நிரப்பு முன்னிலையில் மட்டுமே. இலவச செயலில் நிரப்பு இல்லாத நிலையில், குறிப்பிட்ட ஹீமோலிசின்களின் செல்வாக்கின் கீழ் சிவப்பு இரத்த அணுக்களின் ஹீமோலிசிஸ் ஏற்படாது (எதிர்வினை நேர்மறை).
கூறுகள்
நிரப்பு நிலைப்படுத்தல் எதிர்வினை (CFR) என்பது ஒரு சிக்கலான செரோலாஜிக்கல் எதிர்வினை. அதை செயல்படுத்த, 5 பொருட்கள் தேவை, அதாவது: ஏஜி, ஏடி மற்றும் நிரப்பு (முதல் அமைப்பு), செம்மறி எரித்ரோசைட்டுகள் மற்றும் ஹீமோலிடிக் சீரம் (இரண்டாவது அமைப்பு).
RSCக்கான ஆன்டிஜென் பல்வேறு கொல்லப்பட்ட நுண்ணுயிரிகளின் கலாச்சாரங்கள், அவற்றின் லைசேட்டுகள், பாக்டீரியாவின் கூறுகள், நோயியல் ரீதியாக மாற்றப்பட்டது மற்றும் சாதாரண உறுப்புகள், திசு கொழுப்புகள், வைரஸ்கள் மற்றும் வைரஸ் கொண்ட பொருட்கள்.
புதிய அல்லது உலர்ந்த கினிப் பன்றி சீரம் ஒரு நிரப்பியாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது.
எதிர்வினை பொறிமுறை
RSK இரண்டு கட்டங்களில் மேற்கொள்ளப்படுகிறது: 1 வது கட்டம் - ஆன்டிஜென் + ஆன்டிபாடி + நிரப்பு மூன்று கூறுகளைக் கொண்ட கலவையின் அடைகாத்தல்; 2 வது கட்டம் (காட்டி) - செம்மறி எரித்ரோசைட்டுகள் மற்றும் அவற்றுக்கான ஆன்டிபாடிகளைக் கொண்ட ஹீமோலிடிக் சீரம் ஆகியவற்றைக் கொண்ட ஒரு ஹீமோலிடிக் அமைப்பைச் சேர்ப்பதன் மூலம் கலவையில் இலவச நிரப்புதலைக் கண்டறிதல். எதிர்வினையின் 1 வது கட்டத்தில், ஆன்டிஜென்-ஆன்டிபாடி வளாகம் உருவாகும்போது, நிரப்பு பிணைப்புகள், பின்னர் 2 வது கட்டத்தில், ஆன்டிபாடிகளால் உணர்திறன் கொண்ட எரித்ரோசைட்டுகளின் ஹீமோலிசிஸ் ஏற்படாது; எதிர்வினை நேர்மறையானது. ஆன்டிஜென் மற்றும் ஆன்டிபாடி ஒன்றுடன் ஒன்று பொருந்தவில்லை என்றால் (சோதனை மாதிரியில் ஆன்டிஜென் அல்லது ஆன்டிபாடி இல்லை), நிரப்பு இலவசம் மற்றும் 2 வது கட்டத்தில் எரித்ரோசைட் - எதிர்ப்பு எரித்ரோசைட் ஆன்டிபாடி காம்ப்ளக்ஸ், ஹீமோலிசிஸ் ஏற்படுத்தும்; எதிர்வினை எதிர்மறையானது.
விண்ணப்பம்
நிரப்பு சரிசெய்தல் எதிர்வினை இதற்குப் பயன்படுத்தப்படலாம்:
1) அறியப்படாத சீரம் உள்ள குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடிகள் அறியப்பட்ட இயற்கையின் ஆன்டிஜெனுடன் அவற்றின் தொடர்புகளின் அடிப்படையில் அடையாளம் காணுதல்;
2) அறியப்பட்ட குறிப்பிட்ட சீரம் கொண்ட எதிர்வினையில் ஆன்டிஜெனின் பண்புகளை ஆய்வு செய்தல். ஆர்எஸ்சியை நடத்துவதற்கான பொருட்கள் தயாரித்தல்.
1. ஆராய்ச்சிக்காக பெறப்பட்ட இரத்த சீரம், எதிர்வினைக்கு முன்னதாக, அதன் சொந்த நிரப்பியை செயலிழக்க 30 நிமிடங்களுக்கு 56 ° C வெப்பநிலையில் தண்ணீர் குளியல் சூடாக்கப்படுகிறது. செயலிழந்த சீரம் 3-4 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 5-6 நாட்களுக்கு சேமிக்கப்படும். பரிசோதனையின் நாளில், சீரம் ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு கரைசலில் 1: 5 என்ற விகிதத்தில் நீர்த்தப்படுகிறது (0.1 மில்லி சோதனை சீரம் + 0.4 மில்லி ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு கரைசல்).
2. CSC இன் உற்பத்திக்கான ஆன்டிஜென் பல்வேறு நுண்ணுயிரிகளின் கலாச்சாரங்கள், பாக்டீரியா புரதங்கள் மற்றும் நுண்ணுயிர் கலாச்சாரங்களிலிருந்து பெறப்பட்ட சாறுகள், நோயியல் ரீதியாக மாற்றப்பட்ட மற்றும் சாதாரண உறுப்புகள் மற்றும் திசுக்களாக இருக்கலாம். ஆன்டிஜென் தயாரிப்பின் பிரத்தியேகங்கள் தொற்று செயல்முறையின் தன்மை மற்றும் அதன் நோய்க்கிருமியின் பண்புகள் ஆகியவற்றால் தீர்மானிக்கப்படுகின்றன.
3. நிரப்பு என்பது 3-5 ஆரோக்கியமான கினிப் பன்றிகளிலிருந்து பெறப்பட்ட சீரம் அல்லது ஆம்பூல்களில் உள்ள உலர் நிரப்பு கலவையாகும்.
பயன்பாட்டிற்கு முன், கினிப் பன்றி சீரம் 1:10 என்ற விகிதத்தில் சோடியம் குளோரைட்டின் ஐசோடோனிக் கரைசலுடன் நீர்த்தப்படுகிறது.
4. பரிசோதனையை மேற்கொள்வதற்கு முன், 56 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 30 நிமிடங்களுக்கு சூடாக்குவதன் மூலம் ஹீமோலிடிக் சீரம் செயலிழக்கச் செய்யப்படுகிறது. முக்கிய RSC பரிசோதனையைச் செய்ய, அதே போல் டைட்ரேட் நிரப்பு மற்றும் ஆன்டிஜென், ஹீமோலிடிக் சீரம் டிரிபிள் டைட்டரில் பயன்படுத்தப்படுகிறது. எடுத்துக்காட்டாக, ஹீமோலிடிக் சீரம் டைட்டர் 1: 1800 என்றால், 1: 600 என்ற சீரம் நீர்த்தம் எதிர்வினைக்கு பயன்படுத்தப்படுகிறது.
5. எரித்ரோசைட்டுகள் defibrinated செம்மறி இரத்தத்தில் இருந்து பெறப்படுகின்றன. ஃபைப்ரின் படலத்தை அகற்ற, மூன்று அடுக்கு காஸ் வடிகட்டி மூலம் இரத்தம் வடிகட்டப்படுகிறது. இதன் விளைவாக வரும் வடிகட்டி மையவிலக்கு செய்யப்படுகிறது, சீரம் உறிஞ்சப்பட்டு வடிகட்டியது, மேலும் எரித்ரோசைட்டுகள் ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு கரைசலுடன் 3-4 முறை மையவிலக்கு மூலம் கழுவப்படுகின்றன. இரத்த சிவப்பணுக்கள் கடைசியாக கழுவப்படும் போது, திரவத்தின் மேலோட்டமான அடுக்கு முற்றிலும் வெளிப்படையானதாக இருக்க வேண்டும். ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு கரைசலில் கழுவப்பட்ட இரத்த சிவப்பணுக்களிலிருந்து 3% சஸ்பென்ஷன் தயாரிக்கப்படுகிறது. மேற்கூறிய முறையில் ஆர்எஸ்சியில் உள்ள பொருட்களைத் தயாரித்த பிறகு, ஹீமோலிடிக் சீரம், நிரப்புதல் மற்றும் ஆன்டிஜெனின் டைட்ரேஷனுக்குச் செல்லவும்.
பாடநூல் ஏழு பகுதிகளைக் கொண்டது. பகுதி ஒன்று - "பொது நுண்ணுயிரியல்" - பாக்டீரியாவின் உருவவியல் மற்றும் உடலியல் பற்றிய தகவல்களைக் கொண்டுள்ளது. பகுதி இரண்டு பாக்டீரியாவின் மரபியலுக்கு அர்ப்பணிக்கப்பட்டுள்ளது. பகுதி மூன்று - "உயிர்க்கோளத்தின் மைக்ரோஃப்ளோரா" - மைக்ரோஃப்ளோராவை ஆராய்கிறது சூழல், இயற்கையில் உள்ள பொருட்களின் சுழற்சியில் அதன் பங்கு, அத்துடன் மனித மைக்ரோஃப்ளோரா மற்றும் அதன் முக்கியத்துவம். பகுதி நான்கு - "தொற்றுநோய் கோட்பாடு" - நுண்ணுயிரிகளின் நோய்க்கிருமி பண்புகள், அவற்றின் பங்கு தொற்று செயல்முறை, மற்றும் நுண்ணுயிர் எதிர்ப்பிகள் மற்றும் அவற்றின் செயல்பாட்டு வழிமுறைகள் பற்றிய தகவல்களையும் கொண்டுள்ளது. பகுதி ஐந்து - "நோய் எதிர்ப்பு சக்தியின் கோட்பாடு" - நோய் எதிர்ப்பு சக்தி பற்றிய நவீன யோசனைகளைக் கொண்டுள்ளது. ஆறாவது பகுதி - "வைரஸ்கள் மற்றும் அவை ஏற்படுத்தும் நோய்கள்" - வைரஸ்களின் அடிப்படை உயிரியல் பண்புகள் மற்றும் அவை ஏற்படுத்தும் நோய்கள் பற்றிய தகவல்களை வழங்குகிறது. பகுதி ஏழு - “தனியார் மருத்துவ நுண்ணுயிரியல்” - பல நோய்க்கிருமிகளின் உருவவியல், உடலியல், நோய்க்கிருமி பண்புகள் பற்றிய தகவல்களைக் கொண்டுள்ளது. தொற்று நோய்கள், மற்றும் பற்றி நவீன முறைகள்அவர்களின் நோய் கண்டறிதல், குறிப்பிட்ட தடுப்புமற்றும் சிகிச்சை.
பாடநூல் மாணவர்கள், பட்டதாரி மாணவர்கள் மற்றும் உயர் மருத்துவ ஆசிரியர்களுக்காக வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளது கல்வி நிறுவனங்கள், பல்கலைக்கழகங்கள், அனைத்து சிறப்பு நுண்ணுயிரியலாளர்கள் மற்றும் பயிற்சி மருத்துவர்கள்.
5வது பதிப்பு, திருத்தப்பட்டு விரிவாக்கப்பட்டது
நூல்:
| <<< Назад
|
முன்னோக்கி >>> |
நிரப்பு நிர்ணய எதிர்வினை
வெவ்வேறு இயல்புடைய ஆன்டிஜென் + ஆன்டிபாடி காம்ப்ளக்ஸ்களுடன் குறிப்பாக பிணைக்கும் நிரப்பியின் தனித்துவமான திறன் கண்டறியப்பட்டுள்ளது. பரந்த பயன்பாடுநிரப்பு நிலைப்படுத்தல் எதிர்வினையில் (CFR). RSC இன் ஒரு சிறப்பு நன்மை என்னவென்றால், அதில் உள்ள ஆன்டிஜெனின் தன்மை (கார்பஸ்குலர் அல்லது கரையக்கூடியது) ஒரு பொருட்டல்ல, ஏனெனில் IgG மற்றும் IgM தொடர்பான எந்த ஆன்டிபாடியின் Fc துண்டையும் அதன் ஆன்டிபாடி குறிப்பிட்ட தன்மையைப் பொருட்படுத்தாமல் நிரப்புகிறது. கூடுதலாக, RSA மிகவும் உணர்திறன் கொண்டது: இது 10 மடங்கு குறைவான ஆன்டிபாடிகளின் அளவைக் கண்டறிய உங்களை அனுமதிக்கிறது, எடுத்துக்காட்டாக, மழைப்பொழிவு எதிர்வினை. RSC 1901 இல் ஜே. போர்டெட் மற்றும் ஓ. ஜாங் ஆகியோரால் முன்மொழியப்பட்டது. இது நிரப்புதலின் இரண்டு பண்புகளை அடிப்படையாகக் கொண்டது:
1) ஆன்டிஜென் + ஆன்டிபாடி வளாகத்துடன் பிணைக்கும் திறன்;
2) ஹீமோலிடிக் சீரம் பெற பயன்படுத்தப்படும் சிவப்பு இரத்த அணுக்களின் சிதைவு.
RSK இரண்டு நிலைகளில் மேற்கொள்ளப்படுகிறது, மேலும் இரண்டு அமைப்புகள் முறையே இதில் ஈடுபட்டுள்ளன - சோதனை, அல்லது கண்டறியும் மற்றும் காட்டி. நோயறிதல் அமைப்பானது சோதனை (அல்லது கண்டறியும்) சீரம் கொண்டது, இது 56 °C வெப்பநிலையில் 30 நிமிடங்களுக்கு சூடேற்றப்பட்டு அதில் உள்ள நிரப்பு மற்றும் ஆன்டிஜெனை செயலிழக்கச் செய்யும். இந்த அமைப்பில் நிலையான நிரப்பு சேர்க்கப்பட்டுள்ளது. அதன் மூலமானது புதிய அல்லது உலர்ந்த கினிப் பன்றி மோர் ஆகும். கலவை ஒரு மணி நேரத்திற்கு 37 ° C வெப்பநிலையில் அடைக்கப்படுகிறது. சோதனை சீரம் ஆன்டிபாடிகளைக் கொண்டிருந்தால், அவை சேர்க்கப்பட்ட ஆன்டிஜெனுடன் தொடர்பு கொள்ளும், இதன் விளைவாக வரும் ஆன்டிஜென் + ஆன்டிபாடி வளாகங்கள் சேர்க்கப்பட்ட நிரப்பியை பிணைக்கும். சீரம் உள்ள ஆன்டிபாடிகள் இல்லை என்றால், ஆன்டிஜென் + ஆன்டிபாடி வளாகம் உருவாக்கம் ஏற்படாது, மேலும் நிரப்பு இலவசமாக இருக்கும். எதிர்வினையின் இந்த கட்டத்தில் நிரப்பு நிலைப்படுத்தலின் வெளிப்படையான வெளிப்பாடுகள் பொதுவாக இல்லை. எனவே, நிரப்பு நிர்ணயம் நடந்ததா இல்லையா என்ற கேள்வியை தெளிவுபடுத்த, இரண்டாவது காட்டி அமைப்பு (செயலிழக்கப்படாத ஹீமோலிடிக் சீரம் + செம்மறி எரித்ரோசைட்டுகள்) சேர்க்கப்பட்டது, மேலும் அனைத்து RSC கூறுகளின் கலவையும் மீண்டும் 30 - 60 நிமிடங்களுக்கு 37 ° C வெப்பநிலையில் அடைக்கப்படுகிறது. எதிர்வினையின் முடிவுகள் மதிப்பிடப்படுகின்றன. முதல் கட்டத்தில், நோய் கண்டறிதல் அமைப்பில், அதாவது நோயாளியின் சீரத்தில் ஆன்டிபாடிகள் இருந்தால், மற்றும் நிரப்பு ஆன்டிபாடி ++ ஆன்டிஜென் வளாகத்தால் பிணைக்கப்பட்டிருந்தால், எரித்ரோசைட்டுகளின் சிதைவு இருக்காது - RBC நேர்மறை: திரவமானது நிறமற்றது, குழாயின் அடிப்பகுதியில் எரித்ரோசைட்டுகளின் வண்டல் உள்ளது. சீரத்தில் குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடிகள் இல்லாவிட்டால் மற்றும் நோயறிதல் அமைப்பில் நிரப்பு பிணைப்பு ஏற்படவில்லை என்றால், அதாவது RSC எதிர்மறையாக இருந்தால், கண்டறியும் அமைப்பில் செலவழிக்கப்படாத நிரப்பு இரத்த சிவப்பணுக்களின் சிக்கலானது + காட்டி அமைப்பு மற்றும் ஹீமோலிசிஸின் ஆன்டிபாடிகளுடன் பிணைக்கிறது. நிகழ்கிறது: சோதனைக் குழாயில் "அரக்கு இரத்தம்", சிவப்பு இரத்த அணுக்களின் படிவு எண். ஹீமோலிசிஸ் தாமதத்தின் அளவு மற்றும் இரத்த சிவப்பணு வண்டல் இருப்பதைப் பொறுத்து RSC இன் தீவிரம் நான்கு குறுக்கு அமைப்பைப் பயன்படுத்தி மதிப்பிடப்படுகிறது. எதிர்வினை பொருத்தமான கட்டுப்பாடுகளுடன் உள்ளது: சீரம் கட்டுப்பாடு (ஆன்டிஜென் இல்லாமல்) மற்றும் ஆன்டிஜென் கட்டுப்பாடு (சீரம் இல்லாமல்), ஏனெனில் சில செரா மற்றும் சில ஆன்டிஜென்கள் ஒரு நிரப்பு எதிர்ப்பு விளைவைக் கொண்டிருக்கின்றன. RSC ஐச் செய்வதற்கு முன், சோதனை சீரம் அல்லது ஆன்டிஜெனைத் தவிர, அதில் உள்ள அனைத்து கூறுகளும் கவனமாக டைட்ரேஷனுக்கு உட்பட்டவை. நிரப்பியின் சரியான அளவை எதிர்வினையில் அறிமுகப்படுத்துவது மிகவும் முக்கியம், ஏனெனில் அதன் பற்றாக்குறை அல்லது அதிகப்படியான தவறான முடிவுகள். நிரப்பு டைட்டர் என்பது ஹீமோலிடிக் சீரம் வேலை செய்யும் டோஸ் முன்னிலையில், இரத்த சிவப்பணுக்களின் முழுமையான கலைப்பை உறுதி செய்யும் குறைந்தபட்ச அளவு. முக்கிய பரிசோதனையை அமைக்க, நிறுவப்பட்ட டைட்டருடன் ஒப்பிடும்போது நிரப்பு அளவை 20-25% அதிகரிக்கவும். ஹீமோலிடிக் சீரம் டைட்டர் அதன் அதிகபட்ச நீர்த்தலாகும், இது சம அளவு 10% நிரப்பு கரைசலுடன் கலக்கும்போது, 37 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 1 மணி நேரத்திற்குள் சிவப்பு இரத்த அணுக்களின் அளவை முழுமையாக ஹீமோலிஸ் செய்கிறது. முக்கிய பரிசோதனையானது சீரம் அதன் டைட்டரில் 1/3க்கு நீர்த்தப்படுவதை உள்ளடக்கியது.
நிரப்பு நிலைப்படுத்தல் எதிர்வினை பாரம்பரியமான ஒன்றாகும் செரோலாஜிக்கல் எதிர்வினைகள், பல வைரஸ் நோய்களைக் கண்டறியப் பயன்படுகிறது, மேலும் வேறு சில கண்டறிதல் முறைகளின் அடிப்படையையும் உருவாக்குகிறது வைரஸ் எதிர்ப்பு ஆன்டிபாடிகள். நடுநிலைப்படுத்தலின் எதிர்வினை என்றாலும், ஹீமாக்ளூட்டினேஷன் தடுப்பு, மறைமுக ரத்தக்கசிவு, இணைக்கப்பட்ட இம்யூனோசார்பன்ட் மதிப்பீடுஉணர்திறனில் நிரப்பு நிலைப்படுத்தல் எதிர்வினைக்கு மேலானது, இருப்பினும், நுட்பத்தின் எளிமை, ஆன்டிபாடிகளை முன்கூட்டியே கண்டறிதல் மற்றும் ஹெமாக்ளூட்டினேட்டிங் பண்புகள் இல்லாத வைரஸ் ஆன்டிஜென்களைக் கண்டறிதல் ஆகியவை வைராலஜிக்கல் ஆய்வுகளில் அதன் பரவலான பயன்பாட்டை விளக்குகின்றன.
அதன் உற்பத்திக்கு ஆன்டிஜெனிக் மருந்துகளின் அதிக அளவு செறிவு மற்றும் தூய்மை தேவையில்லை, இது பல நோயெதிர்ப்பு எதிர்வினைகளுக்கு அவசியம். கூடுதலாக, பல வைரஸ்களின் நிரப்பு-சரிசெய்யும் ஆன்டிஜென்களின் குழு விவரக்குறிப்பு வெகுஜன நோயறிதலில் நிரப்பு பொருத்துதல் எதிர்வினையைப் பயன்படுத்துவதை சாத்தியமாக்குகிறது: இந்த எதிர்வினை திரிபு வேறுபாடுகளை வெளிப்படுத்தாது மற்றும் வைரஸ்களுக்கு இடையிலான ஆன்டிஜெனிக் உறவுகளைப் படிக்கும் போது குறிப்பிட்ட மதிப்புடையது.
பெயரே பெரும்பாலும் முறையின் சாரத்தை பிரதிபலிக்கிறது, இது இரண்டு தனித்தனி எதிர்வினைகளைக் கொண்டுள்ளது. முதல் கட்டத்தில், எதிர்வினை ஆன்டிஜென்கள் மற்றும் ஆன்டிபாடிகளை உள்ளடக்கியது (இந்த கூறுகளில் ஒன்று முன்கூட்டியே அறியப்படுகிறது), அத்துடன் டைட்ரேட்டட் அளவுடன் நிரப்புகிறது. ஆன்டிஜென் மற்றும் ஆன்டிபாடிகள் பொருந்தினால், அவற்றின் சிக்கலான பிணைப்புகள் நிரப்பப்படுகின்றன, இது இரண்டாவது கட்டத்தில் ஒரு காட்டி அமைப்பைப் பயன்படுத்தி கண்டறியப்படுகிறது (செம்மறியாடுகளின் சிவப்பு இரத்த அணுக்கள் மற்றும் அவற்றுக்கான ஆன்டிசெரம் கலவை). ஆன்டிஜென் மற்றும் ஆன்டிபாடிகளின் தொடர்புகளின் போது நிரப்பு பிணைக்கப்பட்டால், செம்மறி இரத்த சிவப்பணுக்களின் சிதைவு ஏற்படாது ( நேர்மறை எதிர்வினைநிரப்பு நிர்ணயம்). எதிர்மறை நிரப்பு நிலைப்படுத்தல் எதிர்வினை ஏற்பட்டால், நிலையான நிரப்பு ஹீமோலிசிஸை ஊக்குவிக்கிறது, இது எதிர்வினையின் முடிவுகளை தீர்மானிக்கப் பயன்படுகிறது.
நிரப்பு நிலைப்படுத்தல் எதிர்வினையின் முக்கிய கூறுகள் ஆன்டிஜென்கள் (தெரிந்த அல்லது கண்டறியக்கூடியவை), ஆன்டிபாடிகள் (அறியப்பட்ட ஆன்டிசெரா அல்லது சோதனை செரா), நிரப்பு, ஹீமோலிடிக் சீரம் மற்றும் செம்மறி சிவப்பு இரத்த அணுக்கள்; ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு கரைசல் (pH 7.2-7.4) அல்லது பல்வேறு இடையகக் கரைசல்கள் நீர்த்தப் பொருளாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. ஆன்டிஜென்கள் மற்றும் செரா ஆகியவை நிரப்பு-எதிர்ப்பாக இருக்கலாம், அதாவது. நிரப்பியை உறிஞ்சும் திறன், இது ஹீமோலிசிஸை தாமதப்படுத்துகிறது மற்றும் எதிர்வினையின் விளைவை சிதைக்கிறது.
CSCக்கான ஆன்டிஜென்கள் பாதிக்கப்பட்ட விலங்குகளின் உறுப்புகள், பாதிக்கப்பட்ட கோழி கருக்களின் அலன்டோயிக் அல்லது அம்னோடிக் திரவம் மற்றும் திசு உயிரணு வளர்ப்பில் வைரஸ்களை வளர்த்த பிறகு கலாச்சார திரவம் ஆகியவற்றிலிருந்து தயாரிக்கப்படுகின்றன. ஆன்டிஜெனிக் தயாரிப்புகளில் எப்பொழுதும் விலங்கு செல்கள் அல்லது திசு வளர்ப்புகளில் இருந்து நிறைய பேலஸ்ட் பொருட்கள் உள்ளன, அவை எதிர்வினையின் முடிவுகளை சிதைக்கும்.
இதன் விளைவாக வரும் வைரஸ் ஆன்டிஜென்கள் செயலிழக்கச் செய்யப்படுகின்றன, வேலை செய்யும் டோஸ், அத்துடன் எதிர்ப்பு நிரப்பு மற்றும் ஹீமோலிடிக் பண்புகள் தீர்மானிக்கப்படுகின்றன. ஆன்டிஜென் பின்னர் நிரப்பு முன்னிலையில் டைட்ரேட் செய்யப்படுகிறது.
எதிர்வினையை நிலைநிறுத்துவதில் இரண்டாவது முக்கிய கூறு நிரப்பு ஆகும். இந்த வார்த்தையின் அர்த்தம் சிக்கலான அமைப்புவிலங்குகள் மற்றும் மனிதர்களின் இரத்தத்தில் இருக்கும் புரதங்கள் மற்றும் காரணிகள். பொதுவாக, கினிப் பன்றியின் இரத்த சீரம் நிரப்பு நிர்ணய வினையில் பயன்படுத்தப்படுகிறது. நிரப்புதலின் செயல்பாடு (டைட்டர்) அதன் மிகச்சிறிய அளவு, ஹீமோலிசின் முன்னிலையில் பயன்படுத்தப்படும் ஹீமோலிடிக் அமைப்பின் முழுமையான ஹீமோலிசிஸ் ஏற்படுகிறது.
வைரஸ்களுக்கு நிரப்பு-நிலைப்படுத்தும் ஆன்டிபாடிகளை அடையாளம் காண, 30 நிமிடங்களுக்கு 560C இல் நிரப்புதலை அகற்ற சீரம் செயலிழக்க வேண்டும். நோய்த்தடுப்பு செய்யப்பட்ட விலங்குகளின் செரா பொதுவாக குறிப்பு செராவாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது. மேலும், நோய்த்தடுப்புக்கு, வைரஸ் ஆன்டிஜென்கள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, அவை திசு அசுத்தங்களிலிருந்து முழுமையாக சுத்திகரிக்கப்படுகின்றன, இல்லையெனில் ஒரு உச்சரிக்கப்படும் குறிப்பிடப்படாத எதிர்வினை ஏற்படுகிறது.
நிரப்பு நிலைப்படுத்தல் எதிர்வினையின் ஒரு கட்டாய கூறு ஹீமோலிடிக் அமைப்பு ஆகும், இதில் செம்மறி எரித்ரோசைட்டுகள் மற்றும் செம்மறி எரித்ரோசைட்டுகளுடன் கூடிய முயல்களை ஹைப்பர் இம்யூனிஸ் செய்வதன் மூலம் பெறப்பட்ட ஹீமோலிடிக் சீரம் ஆகியவை அடங்கும்.
நிரப்பு நிலைப்படுத்தல் எதிர்வினையைச் செய்ய, பின்வரும் மாற்றங்கள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன: தக்காச்சி சிஸ்டம் மைக்ரோடிட்ரேட்டரில் நிரப்பு நிலைப்படுத்தல் எதிர்வினையின் மைக்ரோமெத்தட், நீண்ட கால நிரப்பு நிலைப்படுத்தல் எதிர்வினை, மறைமுக நிரப்பு நிலைப்படுத்தல் எதிர்வினை, ஒரு ஜெல்லில் நிரப்பு நிலைப்படுத்தல் எதிர்வினை, நுண்துளி complement fixation reaction, திட அடிப்படையிலான நிரப்பு நிலைப்படுத்தல் வினை.
நிரப்பு நிலைப்படுத்தல் எதிர்வினையின் உணர்திறன் குறைவாக இருந்தாலும், அது அதிக தனித்தன்மையைக் கொண்டுள்ளது. இது சம்பந்தமாக, இளம் கால்நடைகளில் வைரஸ் நிமோஎன்டெரிடிஸ் நோயறிதலுக்கு இது பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது.
