– ujian antiglobulin yang bertujuan untuk mengenal pasti dalam darah Rh-negatif antibodi anti-eritrosit yang tidak lengkap kepada faktor Rh - protein khusus yang terletak pada permukaan eritrosit darah Rh-positif. Terdapat dua jenis ujian ini: langsung - pengesanan antibodi pada permukaan sel darah merah, tidak langsung - pengesanan antibodi dalam serum darah. Ujian langsung dijalankan dalam diagnosis dan pemantauan rawatan penyakit darah: anemia hemolitik, penyakit hemolitik bayi baru lahir dan lain-lain. Ujian tidak langsung dilakukan untuk menilai keserasian darah penderma dan penerima semasa pemindahan, serta untuk menentukan kehadiran dan risiko konflik Rh semasa merancang dan menguruskan kehamilan. Bahan untuk ujian Coombs adalah darah vena; kajian dijalankan menggunakan kaedah berdasarkan tindak balas aglutinasi. Biasanya, kedua-dua ujian memberikan keputusan negatif. Analisis selesai dalam masa satu hari.
ujian Coombs - percubaan klinikal Darah Rh-negatif, bertujuan untuk mengesan antibodi kepada faktor Rh. Ujian ini digunakan untuk mengenal pasti risiko mengembangkan konflik Rh dan tindak balas hemolitik. Dalam setiap orang, permukaan sel darah merah mengandungi set antigen atau aglutinogen tertentu - sebatian pelbagai sifat, kehadiran atau ketiadaannya digunakan untuk menentukan jenis darah dan faktor Rh. Terdapat banyak jenis antigen, termasuk latihan perubatan Aglutinogen A dan B, yang menentukan kumpulan darah, dan aglutinogen D, faktor Rh, adalah kepentingan praktikal yang paling besar. Dengan faktor Rh positif, antigen D dikesan pada membran luar eritrosit, tetapi dengan faktor negatif, mereka tidak.
Ujian Coombs, juga dipanggil ujian antiglobulin, bertujuan untuk mengesan antibodi anti-eritrosit yang tidak lengkap kepada sistem faktor Rh dalam darah. Antibodi kepada faktor Rh ialah imunoglobulin khusus yang dihasilkan dalam darah Rh-negatif apabila sel darah merah dengan aglutinogen D memasukinya Ini boleh berlaku apabila darah janin dan wanita hamil bercampur, semasa pemindahan darah dijalankan tanpa darah sebelumnya menaip. Ujian Coombs wujud dalam dua versi - langsung dan tidak langsung. Apabila melakukan ujian Coombs langsung, antibodi yang melekat pada permukaan sel darah merah dikesan. Kajian ini digunakan untuk menentukan punca tindak balas hemolitik. Ujian Coombs tidak langsung bertujuan untuk mengesan antibodi anti-eritrosit dalam plasma darah. Ia adalah perlu untuk menentukan keserasian darah antara penderma dan penerima atau ibu dan janin, dan membantu mencegah perkembangan konflik Rh dan hemolisis sel darah merah berikutnya.
Darah untuk kedua-dua versi ujian Coombs diambil dari vena. Analisis dilakukan secara aglutinasi menggunakan serum antiglobulin. Hasil kajian digunakan dalam hematologi untuk mengenal pasti punca tindak balas hemolitik, dalam pembedahan dan resusitasi semasa menjalankan pemindahan darah, dalam obstetrik dan ginekologi apabila memantau kehamilan pada wanita dengan darah Rh-negatif.
Petunjuk
Ujian Coombs langsung, yang mengesan antibodi yang melekat pada permukaan sel darah merah, ditetapkan untuk tindak balas hemolitik (pemusnahan sel darah merah) dari pelbagai asal usul. Kajian ini ditunjukkan untuk anemia hemolitik autoimun primer, anemia hemolitik selepas transfusi, penyakit hemolitik bayi baru lahir, hemolisis eritrosit yang disebabkan oleh autoimun, tumor atau penyakit berjangkit, serta penerimaan tetamu ubat-ubatan, sebagai contoh, quinidine, methyldopa, procainamide. Ujian Coombs tidak langsung, yang menentukan antibodi dalam plasma darah, digunakan untuk mencegah perkembangan konflik Rh. Ia ditunjukkan untuk pesakit sebagai persediaan untuk pemindahan darah, serta untuk wanita hamil dengan faktor Rh negatif, dengan syarat bahawa bapa masa depan kanak-kanak itu mempunyai faktor Rh positif.
Untuk menentukan keserasian Rh, ujian Coombs tidak ditetapkan kepada pesakit dengan darah Rh-positif. Dalam kes ini, sudah ada antigen pada permukaan sel darah merah pengeluaran antibodi tidak boleh diprovokasi oleh pemindahan darah atau kemasukan darah janin ke dalam aliran darah wanita hamil. Juga, kajian itu tidak ditunjukkan untuk wanita hamil jika kedua-dua ibu bapa mempunyai faktor Rh negatif - sifat resesif yang diwarisi. Kanak-kanak dalam pasangan sedemikian sentiasa mempunyai darah Rh-negatif konflik imunologi dengan ibu adalah mustahil. Dalam patologi hemolitik, ujian antiglobulin tidak digunakan untuk memantau kejayaan terapi, kerana hasilnya tidak mencerminkan aktiviti proses pemusnahan sel darah merah.
Batasan ujian Coombs adalah kepayahan prosedur penyelidikan - untuk mendapatkan hasil yang boleh dipercayai, adalah perlu untuk mematuhi syarat suhu dan masa, peraturan untuk penyediaan reagen dan biomaterial. Kelebihan ujian Coombs termasuk sensitiviti yang tinggi. Dalam anemia hemolitik, keputusan ujian ini kekal positif, walaupun tahap hemoglobin, bilirubin dan retikulosit dinormalisasi.
Persediaan untuk analisis dan pengumpulan bahan
Bahan yang digunakan untuk melakukan ujian Coombs ialah darah vena. Tiada keperluan khas untuk masa prosedur pensampelan darah dan untuk penyediaan pesakit. Seperti mana-mana kajian, disyorkan untuk berehat selepas makan sekurang-kurangnya 4 jam, dan berhenti merokok dalam 30 minit terakhir. aktiviti fizikal, elakkan tekanan perasaan. Ia juga patut dibincangkan dengan doktor anda terlebih dahulu tentang keperluan untuk berhenti mengambil ubat - sesetengah ubat boleh memutarbelitkan keputusan ujian Coombs. Darah diambil menggunakan picagari dari vena cubital, atau kurang kerap dari vena di belakang tangan. Dalam masa beberapa jam, bahan dihantar ke makmal.
Apabila melakukan ujian Coombs langsung, serum antiglobulin ditambah pada serum darah pesakit. Selepas beberapa lama, campuran diperiksa untuk kehadiran aglutinat - ia terbentuk jika terdapat antibodi pada sel darah merah. Jika hasilnya positif, titer aglutinasi ditentukan. Ujian Coombs tidak langsung terdiri daripada lebih banyak langkah. Pertama, antibodi yang terdapat dalam serum ditetapkan pada sel darah merah yang disuntik semasa pengeraman. Kemudian serum antiglobulin ditambah kepada sampel, selepas beberapa lama kehadiran dan titer aglutinat ditentukan. Tempoh analisis adalah 1 hari.
Keputusan biasa
Biasanya, keputusan ujian Coombs langsung adalah negatif (-). Ini bermakna tiada antibodi yang dikaitkan dengan sel darah merah dalam darah, dan ia tidak boleh menyebabkan hemolisis. Hasil normal ujian tidak langsung Coombs juga negatif (-), iaitu, tiada antibodi kepada faktor Rh dalam plasma darah. Apabila bersiap untuk pemindahan darah untuk penerima, ini bermakna keserasian dengan darah penderma apabila memantau kehamilan, ini bermakna ketiadaan pemekaan Rh ibu, risiko rendah untuk mengembangkan konflik imunologi. Faktor fisiologi, seperti tabiat pemakanan atau aktiviti fizikal, tidak boleh menjejaskan keputusan ujian. Oleh itu, jika hasilnya positif, perundingan doktor adalah perlu.
Nilai diagnostik analisis
Keputusan ujian Coombs positif dinyatakan secara kualitatif, dari (+) hingga (++++), atau secara kuantitatif, dengan titer dari 1:16 hingga 1:256. Penentuan kepekatan antibodi pada sel darah merah dan dalam serum darah dilakukan dalam kedua-dua jenis sampel. Jika ujian langsung Coombs positif, antibodi dikesan pada membran luar sel darah merah, yang membawa kepada pemusnahan sel darah ini. Puncanya mungkin pemindahan darah tanpa menaip terlebih dahulu - tindak balas hemolitik selepas pemindahan, serta erythroblastosis bayi yang baru lahir, reaksi hemolitik akibat penggunaan ubat-ubatan, anemia hemolitik autoimun primer atau sekunder. Pemusnahan sekunder sel darah merah boleh disebabkan oleh lupus erythematosus sistemik, sindrom Evans, Waldenström macroglobulinemia, hemoglobinuria sejuk paroxysmal, leukemia limfositik kronik, limfoma, mononukleosis berjangkit, sifilis, mycoplasma pneumonia.
Keputusan positif ujian Coombs tidak langsung menunjukkan kehadiran antibodi kepada faktor Rh dalam plasma. Dalam amalan, ini bermakna bahawa pemekaan Rh telah berlaku, dan terdapat kemungkinan untuk mengembangkan konflik Rh selepas infusi darah penderma semasa kehamilan. Untuk mengelakkan komplikasi kehamilan, wanita dengan keputusan ujian Coombs yang positif diletakkan pada daftar khas.
Rawatan keabnormalan
Ujian Coombs merujuk kepada kajian isoserologi. Keputusannya memungkinkan untuk mengenal pasti reaksi hemolitik, serta menentukan keserasian darah penderma dan penerima, ibu dan janin, untuk mencegah perkembangan konflik Rh. Sekiranya keputusan ujian positif, maka anda perlu mendapatkan nasihat daripada doktor yang hadir - pakar obstetrik-pakar sakit puan, pakar hematologi, pakar bedah.
Ujian Coombs ialah satu kaedah penyelidikan makmal, dibuat dengan mempengaruhi hemagglutinasi. Ia berdasarkan kepada kerentanan antibodi kepada imunoglobulin dan unsur enzim, serta keupayaan mereka untuk mengaglutinasi eritrosit yang disalut dengan C3 atau Lg.
Diagnosis Coombs Langsung
Digunakan untuk mengesan antibodi atau komponen pelengkap yang dipasang di luar sel. Ujian Coombs langsung dilakukan seperti berikut.
Penggunaan sampel sedemikian
Diagnosis Direct Coombs digunakan dalam kes tertentu, seperti:
- kesan transfusi;
- hemolisis autoimun;
- anemia hemolitik akibat dadah.
Ujian Coombs tidak langsung
Diagnosis ini memungkinkan untuk mengesan antibodi kepada sel dalam serum, yang diinkubasi, sebagai peraturan, dengan sel darah merah penderma jenis 0, dan kemudian ujian langsung dijalankan. Mohon diagnosis tidak langsung Coombs dalam kes berikut:
Bagaimana untuk menyediakan analisis
Terdapat beberapa peraturan untuk menyediakan peperiksaan.
- Sekiranya pesakit baru lahir, ibu bapa perlu sedar bahawa ujian itu akan membantu mendiagnosis penyakit hemolitik bayi yang baru lahir.
- Sekiranya pesakit mempunyai syak wasangka anemia hemolitik, dia harus dijelaskan bahawa analisis akan membolehkan dia mengetahui sama ada ia disebabkan oleh gangguan perlindungan, ubat-ubatan, atau faktor lain.
- Ujian Coombs, secara langsung dan tidak langsung, tidak membuat sebarang sekatan ke atas pemakanan atau diet.
- Ia adalah perlu untuk memberitahu pesakit bahawa pemeriksaan akan memerlukan pengambilan darah dari vena, dan juga memberitahunya dengan tepat bila venipuncture akan dilakukan.
- Anda juga harus diberi amaran tentang kemungkinan itu ketidakselesaan semasa tempoh memakai pembalut pada lengan dan prosedur itu sendiri.
- Dadah yang boleh menjejaskan keputusan sampel hendaklah dihentikan.
Ubat-ubatan ini termasuk:
- "Streptomycin";
- "Methyldopa";
- "Procainamide";
- sulfonamida;
- "Melphalan";
- "Quinidine";
- "Rifampin";
- "Isoniazid";
- sefalosporin;
- "Hydralazine";
- "Chlorpromazine";
- "Levodopa";
- "Tetracycline";
- "Diphenylhydantoin";
- "Ethosuximide";
- "Penisilin";
- asid mefenamik.
Pensampelan darah dilakukan pada waktu pagi semasa perut kosong.
Bagaimana acara itu diadakan
Ujian Coombs dijalankan mengikut urutan berikut:
- Apabila melakukan diagnostik pada pesakit dewasa, selepas venipuncture, darah dibawa ke dalam tiub dengan EDTA (ethylenediaminetetraacetate).
- Darah bayi yang baru lahir diambil dari tali pusat ke dalam bikar yang mengandungi EDTA.
- Kawasan tusukan ditekan dengan kapas sehingga pendarahan berhenti.
- Jika lebam muncul di tapak venipuncture, kompres hangat ditetapkan.
- Selepas pengumpulan darah, pesakit dibenarkan kembali mengambil ubat.
- Adalah perlu untuk memaklumkan ibu bapa bayi yang baru lahir bahawa analisis sekunder mungkin diperlukan untuk memantau dinamika anemia.
Kelebihan ujian Coombs
Penyelidikan sedemikian mempunyai beberapa kelebihan, iaitu:
Kelemahan analisis
Ujian Coombs positif ialah kaedah peperiksaan yang agak intensif buruh, yang memerlukan ketepatan pelaksanaan ciri. Apabila menggunakannya, anda mungkin menghadapi kesukaran tertentu, terutamanya yang berkaitan dengan tafsiran kesan positif yang lemah.
Ia telah ditubuhkan bahawa salah negatif atau lemah tindak balas positif semasa pengeluaran sampel Coombs boleh menjadi akibat daripada pencucian sel yang tidak memuaskan secara aktif, melemahkan reagen antiglobulin oleh sisa serum, serta sambungan dengan bahagian luar bukan lemak, di mana antiglobulin boleh melekat, dengan itu kehilangan keberkesanannya.
Ujian Coombs mempunyai satu lagi kelemahan - kestabilan rendah reagen antiglobulin, pemerolehan dan penyimpanan yang ciri individu, yang juga menyukarkan untuk menilai secara numerik kesan serum antiglobulin pada hemaglutinasi.
Penyakit yang boleh dikesan semasa penyelidikan
Diagnostik Coombs membolehkan untuk mengesan jenis penyakit tertentu, seperti:
- malaise hemolitik bayi baru lahir;
- pelbagai tindak balas transfusi;
- hemolisis autoimun;
- anemia hemolitik akibat dadah.
Hari ini, ujian Coombs dianggap sebagai sistem ujian darah yang agak popular untuk orang dewasa dan bayi baru lahir. Ia memungkinkan untuk mengenal pasti pelbagai penyakit.
Sapukan 1 titis besar serum O(I), A(II), B(III) ke atas pinggan atau slaid kaca menggunakan pipet (berbeza!). Selepas mencatat masa, gunakan batang kaca bersih atau sudut bersih slaid kaca untuk menggabungkan titisan serum dengan titisan darah. Penentuan berlangsung selama 5 minit, goncangkan pinggan, kemudian tambahkan 1 titis larutan garam pada setiap campuran titisan dan nilaikan hasilnya. Lagi bagus kalau serum datang dalam 2 series berbeza. Keputusan kumpulan darah mesti sepadan dalam kedua-dua lot serum.
Penilaian keputusan isohemagglutinasi:
jika kesemua 3 sera memberikan tindak balas negatif, iaitu campuran berwarna merah jambu seragam - ini adalah jenis darah O(I);
Jika reaksi negatif hanya serum kumpulan A(II) yang diberikan, dan sera O(I) dan B(III) memberikan reaksi positif, iaitu bijirin muncul - ini adalah kumpulan darah A(II);
serum kumpulan B(II) memberi tindak balas negatif, dan sera kumpulan O(I) dan A(II) memberi tindak balas positif - ini adalah kumpulan darah B(III).
isohemagglutinasi. Jika tindak balas positif, butir merah kecil sel darah merah pelekat muncul dalam campuran. Bijirin bergabung menjadi butiran yang lebih besar, dan yang terakhir menjadi kepingan. Serum hampir berubah warna;
jika tindak balas negatif, campuran kekal berwarna seragam selama 5 minit warna merah jambu dan tiada bijirin ditemui;
Apabila bekerja dengan 3 sera kumpulan O(I), A(II), B(III), 4 kombinasi tindak balas adalah mungkin:
kesemua 3 sera memberikan reaksi positif - darah yang diuji adalah kumpulan AB(IV). Dalam kes ini, kajian dijalankan dengan serum kumpulan AB(IV).
Catatan! Titisan darah yang diuji hendaklah 5-10 kali lebih kecil daripada titisan serum.
Ralat isohemagglutinasi.
Kegagalan untuk melakukan aglutinasi di tempat yang sepatutnya dan kehadiran aglutinasi di tempat yang tidak sepatutnya. Ini mungkin disebabkan oleh titer serum yang lemah ditambah dengan penggumpalan sel darah merah yang lemah.
Kehadiran aglutinasi di mana tidak sepatutnya ada- Ini adalah pseudoagglutination, apabila timbunan sel darah merah membentuk "lajur syiling". Menggoncang pinggan atau menambah garam memusnahkannya.
Panagglutination, apabila serum melekat bersama semua sel darah merah, termasuk sel darah merahnya sendiri. Pada minit ke-5, tanda-tanda aglutinasi hilang.
Terdapat juga yang dipanggil panagglutination sejuk, apabila sel darah merah melekat bersama kerana suhu udara rendah (di bawah 15 ° C) di dalam bilik.
Dalam semua kes ini, sama ada tindak balas berulang dilakukan, atau menggunakan sel darah merah standard.
Penentuan darah Rh
Untuk menentukan status Rh, iaitu, untuk mengesan kehadiran atau ketiadaan antigen sistem Rh dalam darah manusia, sera (reagen) anti-Rh standard digunakan, berbeza dalam kekhususan, iaitu, mengandungi antibodi kepada pelbagai antigen sistem ini. Untuk menentukan antigen Rh 0 (D), serum anti-Rhesus paling kerap digunakan dengan penambahan larutan gelatin 10%, atau reagen anti-Rhesus standard yang disediakan terlebih dahulu dengan larutan polyglucin 33% digunakan. Untuk mendapatkan hasil penyelidikan yang lebih tepat, serta untuk mengenal pasti antigen sistem serologi lain, ujian Coombs digunakan (ia juga sangat sensitif dalam menentukan keserasian darah yang ditransfusikan). Untuk penyelidikan, darah asli atau darah yang disediakan dengan beberapa bahan pengawet digunakan. Dalam kes ini, darah perlu dibasuh daripada bahan pengawet dengan jumlah sepuluh kali ganda larutan natrium klorida isotonik. Apabila menentukan status Rh- Rh 0 (D) dua sampel serum atau reagen anti-Rhesus daripada dua siri berbeza hendaklah digunakan dan pada masa yang sama sel darah merah standard diperoleh daripada darah daripada Rh-positif (Rh +) dan Rh-negatif (Rh -) individu harus digunakan untuk kawalan. Apabila menentukan isoantigen lain, kawal sel darah merah yang mengandungi atau kekurangan antigen yang melawannya antibodi dalam serum standard harus digunakan dengan sewajarnya.
Aglutinin haba separa adalah jenis antibodi yang paling biasa yang boleh menyebabkan perkembangan anemia hemolitik autoimun. Antibodi ini tergolong dalam IgG, jarang kepada IgM, IgA.
UJIAN COOMBS
Ujian Coombs: pengenalan. Ujian Coombs ialah kaedah diagnostik makmal berdasarkan tindak balas hemagglutinasi.
Kaedah utama untuk mendiagnosis anemia hemolitik autoimun ialah ujian Coombs. Ia berdasarkan keupayaan antibodi khusus untuk imunoglobulin (terutama IgG) atau komponen pelengkap (terutama S3) untuk mengaglutinasi eritrosit yang disalut dengan IgG atau S3.
Pengikatan IgG dan C3b kepada eritrosit diperhatikan dalam anemia hemolitik autoimun dan anemia hemolitik imun yang disebabkan oleh ubat. Ujian Coombs langsung. Ujian Coombs langsung digunakan untuk mengesan antibodi atau komponen pelengkap yang ditetapkan pada permukaan sel darah merah. Ia dijalankan seperti berikut:
Untuk mendapatkan antibodi kepada imunoglobulin manusia (serum antiglobulin) atau pelengkap (serum antipelengkap), haiwan itu diimunisasi dengan serum manusia, imunoglobulin atau pelengkap manusia. Serum yang diperoleh daripada haiwan itu disucikan daripada antibodi kepada protein lain.
Sel darah merah pesakit dibasuh dengan garam untuk mengeluarkan sepenuhnya serum, yang meneutralkan antibodi kepada imunoglobulin dan melengkapi dan boleh menyebabkan hasil negatif palsu.
Jika antibodi atau komponen pelengkap ditetapkan pada permukaan sel darah merah, penambahan antiglobulin atau serum anti-pelengkap menyebabkan aglutinasi sel darah merah.
Ujian Coombs langsung digunakan dalam kes berikut:
Hemolisis autoimun.
Penyakit hemolitik bayi baru lahir.
Anemia hemolitik imun yang disebabkan oleh ubat.
Reaksi transfusi hemolitik. Ujian Coombs tidak langsung. Ujian Coombs tidak langsung mengesan antibodi kepada sel darah merah dalam serum. Untuk melakukan ini, serum pesakit diinkubasi dengan sel darah merah penderma kumpulan 0, dan kemudian ujian Coombs langsung dilakukan.
Ujian Coombs tidak langsung digunakan dalam kes berikut:
Penentuan keserasian individu darah penderma dan penerima.
Pengesanan alloantibodies, termasuk antibodi yang menyebabkan tindak balas transfusi hemolitik.
Penentuan antigen eritrosit permukaan dalam genetik perubatan dan perubatan forensik.
Pengesahan kembar seiras semasa pemindahan sumsum tulang.
Untuk menjalankan ujian biologi, darah mula ditransfusikan secepat mungkin (sebaik-baiknya dalam aliran). Selepas pemindahan 25 ml darah, tiub sistem diapit dengan pengapit. Kemudian ada jeda selama 3 minit, di mana keadaan penerima dipantau. Untuk melakukan ujian biologi, 25 ml darah disuntik tiga kali. Pada akhir ujian (selepas pemindahan 75 ml darah pertama dalam dos pecahan 25 ml pada selang 3 minit), sistem diselaraskan kepada kadar pemindahan yang diperlukan. Apabila memindahkan lebih daripada satu botol darah kepada pesakit, perlu mengeluarkan jarum dari urat. Dalam kes ini, jarum dikeluarkan dari tabung uji vial di mana darah telah habis dan dimasukkan ke dalam vial seterusnya. Tiub sistem (getah atau plastik) diapit pada masa ini dengan pengapit. Jika semasa pemindahan darah adalah perlu untuk mentadbir sebarang ubat lain secara intravena kepada penerima, ini dilakukan dengan menindik tiub getah sistem. Tusukan tiub plastik tidak boleh diterima, kerana ia tidak jatuh. Selepas setiap pemindahan darah, pesakit mesti dipantau untuk mengenal pasti dan menghapuskan segera komplikasi yang mungkin berlaku, termasuk tindak balas alahan. 2 jam selepas tamat pemindahan darah, suhu badan perlu diukur. Jika ia meningkat, pengukuran mesti diulang setiap jam untuk 4 jam berikutnya. Sama pentingnya ialah memantau kencing dan komposisi air kencing, yang memungkinkan untuk mewujudkan kehadiran tindak balas selepas pemindahan toksik. Permulaan oliguria dan anuria selepas pemindahan darah, kehadiran sel darah dan protein dalam air kencing adalah petunjuk langsung perkembangan hemolisis selepas pemindahan.
REAKSI COMBES(R. R. A. Coombs, ahli imunologi Inggeris, lahir pada tahun 1921; sinonim: Ujian Coombs, ujian antiglobulin) - tindak balas imunologi untuk mengesan antibodi yang tidak lengkap kepada auto- dan isoantigen eritrosit.
Reaksi itu dibangunkan pada tahun 1908 oleh S. Moreschi, tetapi diterima aplikasi yang luas hanya sejak 1945 selepas Coombs menunjukkan peranannya dalam menentukan keserasian semasa pemindahan darah, konflik Rh, diagnosis keadaan autoalahan dan autoimun, dsb.
Reaksi Coombs adalah berdasarkan penggunaan ubat yang disediakan khas - serum antiglobulin. Dengan kehadiran serum antiglobulin, sel darah merah yang sarat dengan antibodi yang tidak lengkap beraglutinasi. Sel darah merah yang tidak mengandungi antibodi pada permukaannya kekal tidak teraglutinasi.
K.r. digunakan secara meluas untuk: a) mewujudkan keadaan isosensitisasi, iaitu, mengesan isoantibodi yang berlaku semasa pemindahan darah berulang (lihat pemindahan darah) atau kehamilan (lihat Kehamilan); b) menjalankan ujian keserasian semasa pemindahan darah; c) penentuan jenis faktor Rh dalam eritrosit (lihat); d) pengesanan antibodi autoimun pada sel darah merah pesakit dengan anemia hemolitik yang diperolehi (lihat) dan penyakit autoallergik lain (lihat), serta dalam beberapa jangkitan yang berlaku dengan komponen alahan; e) pengesanan antibodi isoimun yang ditetapkan pada sel darah merah kanak-kanak yang menderita penyakit hemolitik bayi baru lahir (lihat). K.r. juga digunakan dalam penyelidikan forensik dan antropologi.
Bahan utama untuk pementasan K. r. adalah serum atau plasma sitrat dan sel darah merah pesakit. Terdapat dua varian K. r.: tidak langsung dan langsung. Dengan K. r tidak langsung. Serum pesakit dikaji dan antibodi yang beredar bebas ditentukan. Dengan langsung K. r. periksa sel darah merah untuk kehadiran antibodi yang ditetapkan pada ini unsur berbentuk darah.
Serum antiglobulin untuk K. r. diperolehi oleh makmal imunisasi. haiwan (arnab, kambing, biri-biri, dsb.) dengan globulin yang diasingkan daripada serum manusia melalui pecahan dengan etanol, ammonium sulfat atau penapisan gel pada Sephadex. Apabila mendapatkan serum antiglobulin, adalah perlu untuk mengeluarkan antibodi heteroagglutinating hasil daripada imunisasi haiwan dengan globulin manusia. Ini dicapai dengan penjerapan serum imun dengan campuran eritrosit daripada orang dengan kumpulan yang berbeza darah atau mencairkannya dengan larutan natrium klorida isotonik. Dalam kes kedua, titer hetero-aglutinin harus rendah (1: 16 - 1: 32), supaya serum antiglobulin, selepas pencairan, mengekalkan aktiviti yang baik dalam K. r.
Reaksi tidak langsung Coombs
Tindak balas Coombs tidak langsung dijalankan dalam dua peringkat. Peringkat pertama dijalankan dalam tabung uji kecil yang direka khas untuk tujuan ini, berukuran 4 X 0.5 cm Dalam setiap tabung uji, tambah satu titis kepada tiga titis serum (keseluruhan, 1: 2, dll.), di mana kehadirannya. antibodi disyaki sedimen eritrosit dengan komposisi antigen yang diketahui. Kandungan tabung uji dicampur dan diletakkan dalam termostat pada t° 37° selama 1 jam. Kemudian sel darah merah dibasuh tiga kali dengan larutan natrium klorida isotonik. Peringkat kedua terdiri daripada menyediakan penggantungan 5% eritrosit yang telah dibasuh dan menggabungkan satu titisan eritrosit dengan satu titisan serum antiglobulin pada plat putih (porselin) dengan permukaan yang basah. Keputusan diambil kira sehingga 10 minit. Pengecualian keputusan positif palsu dihasilkan dengan melakukan kajian kawalan. Penggunaan larutan natrium klorida isotonik dan bukannya serum antiglobulin tidak boleh disertai dengan aglutinasi sel darah merah. Melakukan K. r tidak langsung. terhadap eritrosit daripada fenotip isoantigen yang diketahui membolehkan seseorang untuk mewujudkan kekhususan antibodi. Sebagai contoh, kajian serum pesakit dengan sel darah merah 0(I), CDE, Kk, Fya; 0(1), CDe, Kk, Fya; 0(I), сDe, Kk, Fya; 0(I), cDE, Kk, Fya; 0(I), cde, kk, Fya tunjukkan hasil positif dengan sampel darah dalam kes 1 dan 4; sampel darah lain (kes 2, 3, 5) menunjukkan keputusan negatif. Serum mengandungi antibodi anti-E. Dengan bantuan K. r tidak langsung. antibodi yang tidak lengkap terhadap antigen boleh dikesan: C, D, E, c, e; K, k; Fya, Fyb; Lea, Leb; Jka, Jkb, dsb. (lihat Kumpulan darah).
Tindak balas Coombs langsung
Reaksi Coombs langsung dalam tekniknya sepadan dengan peringkat kedua K. R. tidak langsung: sel darah merah pesakit (5% penggantungan), dibasuh tiga kali dengan larutan natrium klorida isotonik, digabungkan dengan serum antiglobulin. Langsung K.r. dilakukan apabila terdapat sebab untuk mempercayai bahawa sel darah merah pesakit yang sedang dikaji sudah peka dengan antibodi dalam vivo. Garis lurus positif K. r. berfungsi sebagai tanda diagnostik untuk penyakit hemolitik bayi baru lahir, yang disebabkan oleh pemekaan badan wanita kepada antigen janin dan penembusan antibodi melalui plasenta ke dalam badan kanak-kanak, serta anemia hemolitik yang diperolehi.
belakang tahun lepas K.r. bertambah baik dengan ketara. Dengan bantuannya, adalah mungkin bukan sahaja untuk memastikan kehadiran antibodi pada sel darah merah, tetapi juga untuk menubuhkan kelas imunoglobulin (lihat). Untuk melakukan ini, gunakan serum terhadap kelas imunoglobulin tertentu: IgG, IgM, IgA. Antibodi isoimun terhadap Rhesus, antigen Kell, antigen Duffy dan antigen lain, serta antibodi autoimun hangat, biasanya dikelaskan sebagai IgG. Antibodi autoimun sejuk, serta antibodi isoimun terhadap Le dan beberapa antigen lain, biasanya tergolong dalam IgM. Hanya antibodi autoimun yang jarang berlaku adalah sifat IgA (lihat Autoantibodi).
Bibliografi: Dygin V.P. Penyakit autoimun di klinik penyakit dalaman, L., 1970, bibliogr. ; Kassirsky I. A. dan Alekseev G. A. Hematologi klinikal, M., 1970; Kosyakov P. N. Isoantigen dan isoantibodi manusia dalam kesihatan dan penyakit, M., 1974, bibliogr.; Boivin P. e. a. Les anemia hemolytiques, hlm. 93, P., 1971, bibliogr.; Aspek klinikal imunologi, ed. oleh P. G. H. Geli a. o., Oxford, 1975; Coombs R. R. A., Mourant A. E. a. Race R. R. In-vivo isosensitization sel merah pada bayi dengan penyakit hemolitik, Lancet, v. 1, hlm. 264, 1946.
Ujian Coombs ialah analisis klinikal ujian darah, yang dilakukan untuk menentukan sama ada darah mengandungi antibodi tertentu yang mungkin tidak selamat. Antibodi ini melekat pada sel darah merah dan boleh menyerang sistem imun, serta menyebabkan kemudaratan dalam cara lain. Dalam istilah perubatan, kajian ini juga dipanggil ujian antiglobulin (AGT).
Jenis sampel Coombs
Terdapat dua jenis ujian Coombs - langsung dan tidak langsung.
Ujian Coombs langsung, juga dikenali sebagai langsung (DAT), mengesan auto-antibodi yang melekat pada permukaan sel darah merah. Antibodi ini kadangkala dihasilkan dalam badan disebabkan oleh penyakit tertentu atau apabila mengambil ubat tertentu, seperti procainamide, methyldopa, atau quinidine.
Antibodi ini berbahaya kerana kadangkala menyebabkan anemia dengan memusnahkan sel darah merah.
Ujian ini kadangkala diperintahkan untuk mendiagnosis punca jaundis atau anemia.
Biasanya, tindak balas Coombs adalah negatif.
Positif untuk:
- penyakit hemolitik bayi baru lahir;
- hemolisis autoimun;
- tindak balas transfusi hemolitik;
- anemia hemolitik imun yang disebabkan oleh dadah.
Ujian Coombs tidak langsung, juga dikenali sebagai , digunakan untuk mengesan antibodi kepada sel darah merah yang terdapat dalam serum darah (serum ialah cecair kuning jernih darah yang kekal selepas sel darah merah dan koagulan telah disingkirkan).
Ujian Coombs tidak langsung digunakan semasa pemindahan darah untuk menentukan sama ada darah penderma sepadan dengan darah penerima. Ini dipanggil ujian keserasian dan membantu mencegah sebarang tindak balas buruk terhadap darah penderma. analisis ini juga disyorkan untuk wanita hamil. Sesetengah wanita mempunyai antibodi IgG, yang boleh merentas plasenta ke dalam darah janin dan membahayakan bayi yang baru lahir, menyebabkan penyakit hemolitik yang dikenali sebagai anemia hemolitik.
Prosedur
Darah diambil menggunakan picagari dari vena, biasanya dengan bahagian belakang tapak tangan atau pada celah siku. Sebelum ini, tapak tusukan dibasmi kuman dengan teliti, dan selepas mengambil ujian darah, kain kasa bersih atau bulu kapas digunakan.
Darah yang terhasil disucikan di makmal dan sel darah merah diasingkan. Sampel kemudian diuji secara berurutan menggunakan pelbagai serum dan reagen Coombs, yang dikontraskan. Jika tiada aglutinasi (penggumpalan sel darah merah), ini bermakna hasil yang positif.
Walau bagaimanapun, jika ujian negatif, bermakna terdapat antibodi dalam darah yang bertindak melawan sel darah merah. Ini mungkin menunjukkan pelbagai penyakit, seperti anemia (semula jadi dan disebabkan oleh pengambilan ubat), sifilis, atau jangkitan mycoplasma. Selepas menerima keputusan, doktor yang hadir akan menetapkan rawatan yang sesuai.
Video
