ആർഎസ്കെ നെഗറ്റീവ് ആണ്. പൂരക ഫിക്സേഷൻ പ്രതികരണം

ഒരു പ്രത്യേക ആൻ്റിജൻ-ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്സ് എല്ലായ്പ്പോഴും സ്വയം പൂരകമാക്കുന്നു (ബൈൻഡ് ചെയ്യുന്നു) എന്ന വസ്തുതയെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയാണ് കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഫിക്സേഷൻ റിയാക്ഷൻ (CFR).

ഈ പ്രതിപ്രവർത്തനം ആൻ്റിജനുകളെ തിരിച്ചറിയുന്നതിലും അണുബാധകളുടെ സെറോഡയഗ്നോസിസിലും വ്യാപകമായി ഉപയോഗിക്കുന്നു, പ്രത്യേകിച്ച് സ്പൈറോകെറ്റുകൾ (വാസർമാൻ പ്രതികരണം), റിക്കറ്റ്സിയ, വൈറസുകൾ എന്നിവ മൂലമുണ്ടാകുന്ന രോഗങ്ങൾ*.

ആർഎസ്‌സി ഒരു സങ്കീർണ്ണമായ സീറോളജിക്കൽ പ്രതികരണമാണ്. ഇതിൽ പൂരകവും രണ്ട് ആൻ്റിജൻ-ആൻ്റിബോഡി സിസ്റ്റങ്ങളും ഉൾപ്പെടുന്നു. അടിസ്ഥാനപരമായി, ഇവ രണ്ട് സീറോളജിക്കൽ പ്രതികരണങ്ങളാണ്.

ആദ്യത്തെ സിസ്റ്റം - പ്രധാനം ഒരു ആൻ്റിജനും ആൻ്റിബോഡിയും ഉൾക്കൊള്ളുന്നു (ഒന്ന് അറിയാം, മറ്റൊന്ന് അല്ല). ഒരു നിശ്ചിത അളവിലുള്ള പൂരകങ്ങൾ അതിൽ ചേർക്കുന്നു. ഈ സിസ്റ്റത്തിൻ്റെ ആൻ്റിജനും ആൻ്റിബോഡിയും പൊരുത്തപ്പെടുന്നുവെങ്കിൽ, അവ ബന്ധിപ്പിക്കുകയും പൂരകങ്ങളെ ബന്ധിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യും. തത്ഫലമായുണ്ടാകുന്ന സമുച്ചയം നന്നായി ചിതറുകയും ദൃശ്യമാകാതിരിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.

ഈ സമുച്ചയത്തിൻ്റെ രൂപീകരണം രണ്ടാമത്തെ ഹീമോലിറ്റിക് അല്ലെങ്കിൽ ഇൻഡിക്കേറ്റർ സിസ്റ്റം ഉപയോഗിച്ച് കണ്ടുപിടിക്കുന്നു. അതിൽ ആടുകളുടെ ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ (ആൻ്റിജൻ), അനുബന്ധ ഹീമോലിറ്റിക് സെറം (ആൻ്റിബോഡി), അതായത്, ഒരു റെഡിമെയ്ഡ് രോഗപ്രതിരോധ കോംപ്ലക്സ് എന്നിവ ഉൾപ്പെടുന്നു. ഈ സിസ്റ്റത്തിൽ, ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ ലിസിസ് പൂരകത്തിൻ്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ മാത്രമേ സംഭവിക്കൂ. പൂരകത്തെ ആദ്യ സിസ്റ്റത്തിൽ ബന്ധിപ്പിച്ചിട്ടുണ്ടെങ്കിൽ (ആൻ്റിജനും ആൻ്റിബോഡിയും അതിൽ യോജിക്കുന്നുവെങ്കിൽ), രണ്ടാമത്തെ സിസ്റ്റത്തിൽ ഹീമോലിസിസ് ഉണ്ടാകില്ല - കാരണം സ്വതന്ത്ര പൂരകമില്ല. ഹീമോലിസിസിൻ്റെ അഭാവം (ട്യൂബിൻ്റെ ഉള്ളടക്കം മേഘാവൃതമാണ് അല്ലെങ്കിൽ താഴെയുള്ള ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ ഒരു അവശിഷ്ടം ഉണ്ട്) പോസിറ്റീവ് RSC ഫലമായി രേഖപ്പെടുത്തുന്നു.

ആദ്യ സിസ്റ്റത്തിൽ ആൻ്റിജൻ ആൻ്റിബോഡിയുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നില്ലെങ്കിൽ, രോഗപ്രതിരോധ കോംപ്ലക്സ് രൂപപ്പെടില്ല, പൂരകങ്ങൾ സ്വതന്ത്രമായി തുടരും! സൌജന്യമായി അവശേഷിക്കുന്നു, പൂരകം രണ്ടാം സിസ്റ്റത്തിൽ പങ്കെടുക്കുന്നു, ഇത് ഹീമോലിസിസിന് കാരണമാകുന്നു, RSC ഫലം നെഗറ്റീവ് ആണ് (ട്യൂബുകളുടെ ഉള്ളടക്കം സുതാര്യമാണ് - "ലാക്വർ രക്തം").

പൂരക ഫിക്സേഷൻ പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ഘടകങ്ങൾ:

ആൻ്റിജൻ - സാധാരണയായി ലൈസേറ്റ്, എക്സ്ട്രാക്റ്റ്, ഹാപ്റ്റൻ; കുറവ് പലപ്പോഴും ഒരു സസ്പെൻഷൻ.

1. രോഗിയുടെ സിസ്റ്റത്തിൻ്റെ ആൻ്റിബോഡി-സെറം
2. കോംപ്ലിമെൻ്റ് - സെറം ഗിനി പന്നികൾ

3. ആൻ്റിജൻ - ചെമ്മരിയാടുകളുടെ ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ

4.ആൻ്റിബോഡി - ഹീമോലിസിൻ മുതൽ ചെമ്മരിയാടുകളുടെ ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ

5.ഐസോടോണിക് പരിഹാരം

ആർഎസ്‌സിയിൽ ധാരാളം സങ്കീർണ്ണ ഘടകങ്ങൾ ഉൾപ്പെട്ടിരിക്കുന്നതിനാൽ, അവ ആദ്യം ടൈറ്റേറ്റ് ചെയ്യുകയും കൃത്യമായ അളവിലും പ്രതികരണത്തിലും എടുക്കുകയും വേണം. തുല്യ വോള്യങ്ങൾ: 0.5 അല്ലെങ്കിൽ 0.25, കുറവ് പലപ്പോഴും 0.2 മില്ലി. അതനുസരിച്ച്, മുഴുവൻ പരീക്ഷണവും 2.5, 1.25 അല്ലെങ്കിൽ 1.0 മില്ലി വോള്യങ്ങളിലാണ് നടത്തുന്നത് (വലിയ വോള്യങ്ങൾ കൂടുതൽ കൃത്യമായ ഫലം നൽകുന്നു). പ്രതിപ്രവർത്തന ഘടകങ്ങളുടെ ടൈറ്ററേഷൻ പരീക്ഷണത്തിൻ്റെ അതേ അളവിലാണ് നടത്തുന്നത്, നഷ്ടപ്പെട്ട ചേരുവകൾ ഒരു ഐസോടോണിക് ലായനി ഉപയോഗിച്ച് മാറ്റിസ്ഥാപിക്കുന്നു.

ചേരുവകൾ തയ്യാറാക്കൽ

ഹീമോലിറ്റിക് സെറം (ഹീമോലിസിൻ). സെറം അതിൻ്റെ ടൈറ്ററിനേക്കാൾ 3 മടങ്ങ് കുറവാണ് നേർപ്പിച്ചിരിക്കുന്നത് (പേജ് 211 കാണുക). മുഴുവൻ പരീക്ഷണത്തിനും സെറത്തിൻ്റെ പൊതുവായ നേർപ്പിക്കൽ തയ്യാറാക്കുക, അതിൻ്റെ അളവ് നിർണ്ണയിക്കുന്നത് ഒരു ടെസ്റ്റ് ട്യൂബിലെ സെറത്തിൻ്റെ അളവ് (ഉദാഹരണത്തിന്, 0.5 മില്ലി) ടെസ്റ്റ് ട്യൂബുകളുടെ എണ്ണം കൊണ്ട് ഗുണിച്ചാണ്, ഇത് പരീക്ഷണത്തിലെ എണ്ണത്തേക്കാൾ ചെറുതായി കവിയുന്നു.

2. ആടുകളുടെ ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ. പരീക്ഷണത്തിലെ മുഴുവൻ ടെസ്റ്റ് ട്യൂബുകൾക്കുമായി കഴുകിയ ചെമ്മരിയാടുകളുടെ എറിത്രോസൈറ്റുകളുടെ 3% സസ്പെൻഷൻ തയ്യാറാക്കുക (പേജ് 211 കാണുക). ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റം തയ്യാറാക്കാൻ, പരീക്ഷണത്തിലേക്ക് ചേർക്കുന്നതിന് 30 മിനിറ്റ് മുമ്പ്, നേർപ്പിച്ച ഹീമോലിസിൻ തുല്യ അളവിലുള്ള ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ സസ്പെൻഷനും, ചുവന്ന രക്താണുക്കളിൽ സെറം ചേർത്ത്, നന്നായി കലർത്തി 37 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ 30 മിനിറ്റ് ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുക.

3.കോംപ്ലിമെൻ്റ് സാധാരണയായി 1:10 നേർപ്പിച്ചതാണ്. ഓരോ പരീക്ഷണത്തിനും മുമ്പായി ഇത് ടൈട്രേറ്റ് ചെയ്യണം. കോംപ്ലിമെൻ്റ് ടൈറ്റർ അതിൻ്റെ ഏറ്റവും ചെറിയ തുകയാണ്, ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റത്തിലേക്ക് ചേർക്കുമ്പോൾ, 37˚C താപനിലയിൽ 1 മണിക്കൂറിനുള്ളിൽ പൂർണ്ണമായ ഹീമോലിസിസ് സംഭവിക്കുന്നു. കോംപ്ലിമെൻ്റ് ടൈറ്ററേഷൻ സ്കീം പട്ടിക 21 ൽ അവതരിപ്പിച്ചിരിക്കുന്നു.

ശ്രദ്ധ! പ്രധാന പരീക്ഷണത്തിൻ്റെ അതേ വോളിയത്തിൽ അഭിനന്ദനം ടൈറ്റേറ്റ് ചെയ്യുക, നഷ്ടപ്പെട്ട ചേരുവകൾ ഒരു ഐസോടോണിക് പരിഹാരം ഉപയോഗിച്ച് മാറ്റിസ്ഥാപിക്കുക.

ഫലങ്ങൾക്കുള്ള അക്കൗണ്ടിംഗ്. നിയന്ത്രണങ്ങളിൽ ഹീമോലിസിസിൻ്റെ അടയാളങ്ങൾ പോലും ഉണ്ടാകരുത്, കാരണം അവയിലൊന്നിൽ പൂരകങ്ങൾ അടങ്ങിയിട്ടില്ല, മറ്റൊന്ന് - ഹീമോലിസിൻ. പ്രതികരണ ഘടകങ്ങൾക്ക് ഹീമോടോക്സിസിറ്റി ഇല്ലെന്ന് നിയന്ത്രണങ്ങൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നു (ചുവന്ന രക്താണുക്കളെ സ്വയമേവ ലിസ് ചെയ്യാനുള്ള കഴിവ്).

നൽകിയ പട്ടികയിൽ 21 ഉദാഹരണത്തിൽ, 1:10 നേർപ്പിക്കുമ്പോൾ പൂരക ടൈറ്റർ 0.15 മില്ലി ആണ്. ഒരു പരീക്ഷണത്തിൽ, പ്രതികരണത്തിൻ്റെ മറ്റ് ഘടകങ്ങളാൽ നിർദ്ദിഷ്ടമല്ലാത്ത അഡോർപ്ഷൻ കാരണം പൂരകത്തിൻ്റെ പ്രവർത്തനം കുറയാം, അതിനാൽ, പരീക്ഷണത്തിനായി, പൂരകത്തിൻ്റെ അളവ് വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു: ടൈറ്ററിന് ശേഷമുള്ള ഡോസ് എടുക്കുന്നു. ഇതാണ് പ്രവർത്തന ഡോസ്. നൽകിയിരിക്കുന്ന ഉദാഹരണത്തിൽ, ഇത് 1:10 നേർപ്പിക്കുമ്പോൾ 0.2 പൂരകത്തിന് തുല്യമാണ്. RSC-യിൽ ഉൾപ്പെട്ടിരിക്കുന്ന എല്ലാ ഘടകങ്ങളും തുല്യ അളവിൽ എടുക്കേണ്ടതിനാൽ (ഞങ്ങളുടെ ഉദാഹരണത്തിൽ ഇത് 0: 5 മില്ലി ആണ്), പൂരകത്തിൻ്റെ പ്രവർത്തന അളവിൽ (0.2 ml1:10) ഒരു ഐസോടോണിക് ലായനിയുടെ 0.3 മില്ലി ചേർക്കേണ്ടത് ആവശ്യമാണ്. മുഴുവൻ പരീക്ഷണത്തിനും, അവയിൽ ഓരോന്നിൻ്റെയും അളവ് (പൂരകവും ഐസോടോണിക് പരിഹാരവും.

മുഴുവൻ പരീക്ഷണത്തിനും, അവയിൽ ഓരോന്നിൻ്റെയും അളവ് (പൂരകവും ഐസോടോണിക് സൊല്യൂഷനും) RSC-യിൽ പങ്കെടുക്കുന്ന ടെസ്റ്റ് ട്യൂബുകളുടെ എണ്ണം കൊണ്ട് ഗുണിക്കുന്നു. ഉദാഹരണത്തിന്, 50 ടെസ്റ്റ് ട്യൂബുകളിൽ ഒരു പരീക്ഷണം നടത്താൻ, നിങ്ങൾ 10 മില്ലി കോംപ്ലിമെൻ്റ് 1:10 (0.2 mlx50), 15 മില്ലി ഐസോടോണിക് ലായനി (0.3 mlx50) എന്നിവ എടുക്കേണ്ടതുണ്ട്.

4. ആൻ്റിജൻ സാധാരണയായി റെഡിമെയ്ഡ് അതിൻ്റെ ടൈറ്റർ സൂചിപ്പിച്ചു കൊണ്ട് ലഭിക്കും, അതായത്. ആൻ്റിജനെ നേർപ്പിച്ച ശേഷം 1 മില്ലിയിൽ അടങ്ങിയിരിക്കേണ്ട തുക. ഉദാഹരണത്തിന്, 0.4 എന്ന ടൈറ്റർ ഉപയോഗിച്ച്, ഇത് 0.96 മില്ലി ഐസോടോണിക് ലായനിയിൽ ലയിപ്പിക്കുന്നു. പരീക്ഷണത്തിനായി, ഞാൻ പകുതി ടൈറ്ററിന് (0.5 മില്ലി) തുല്യമായ ആൻ്റിജൻ്റെ അളവ് എടുക്കുന്നു. ഇതാണ് അവൻ്റെ പ്രവർത്തന ഡോസ്. പരീക്ഷണത്തിലെ ടെസ്റ്റ് ട്യൂബുകളുടെ എണ്ണം കൊണ്ട് 0.5 മില്ലി ഗുണിച്ച് മുഴുവൻ പരീക്ഷണത്തിനും മൊത്തം ആൻ്റിജൻ നേർപ്പിക്കൽ കണക്കാക്കുക.

5. ആൻ്റിബോഡി - രോഗിയുടെ സെറം. പരീക്ഷണത്തിന് മുമ്പ്, അതിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന പൂരകത്തെ നശിപ്പിക്കാൻ ഫ്രഷ് സെറം നിർജ്ജീവമാക്കുന്നു. ഇത് ചെയ്യുന്നതിന്, ഒരു വാട്ടർ ബാത്തിൽ അല്ലെങ്കിൽ ഒരു തെർമോസ്റ്റാറ്റ് ഉള്ള ഒരു ഇൻക്റ്റിവേറ്ററിൽ 56˚C താപനിലയിൽ 30 മിനിറ്റ് ചൂടാക്കുന്നു. പിന്നീടുള്ള രീതി അഭികാമ്യമാണ്: ഇത് whey അമിതമായി ചൂടാക്കാനുള്ള സാധ്യത ഇല്ലാതാക്കുന്നു, അതായത്, അതിൻ്റെ denaturation. ഡീനാച്ചർഡ് സെറ പരിശോധനയ്ക്ക് അനുയോജ്യമല്ല. രോഗിയുടെ സെറം സാധാരണയായി 1:10 മുതൽ 1:160 വരെ നേർപ്പിച്ച് ഉപയോഗിക്കുന്നു.

പട്ടിക നമ്പർ 14

ചേരുവകൾ, മില്ലി	ടെസ്റ്റ് ട്യൂബുകൾ
അനുഭവം	നിയന്ത്രണം
										ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റം	ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ
ഐസോടോണിക് പരിഹാരം	1,45	1,4	1,35	1,3	1,25	1,2	1,15	1,1	1,05	1,0	1,5	1,5
പൂരക 1:10	0,05	0,1	0,15	0,2	0,25	0,3	0,35	0,4	0,45	0,5	―	0,5
ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റം	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0	―
ആടുകളുടെ ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ 3% സസ്പെൻഷൻ	―	―	―	―	―	―	―	―	―	―	―	0,5
ട്യൂബുകൾ നന്നായി കുലുക്കി 37˚C താപനിലയിൽ 1 മണിക്കൂർ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുന്നു.
ഫലമായി	ഹീമോലിസിസ് ഇല്ല	ഹീമോലിസിസ്	ഹീമോലിസിസ് ഇല്ല

ഇമ്മ്യൂൺ സെറ മിക്കപ്പോഴും ഉൽപാദന സാഹചര്യങ്ങളിൽ തയ്യാറാക്കുകയും നിർജ്ജീവമാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. അവ 1:50 ഉം അതിൽ കൂടുതലും നേർപ്പിച്ചതാണ്.

എല്ലാ ചേരുവകളും അല്പം അധികമായി തയ്യാറാക്കിയിട്ടുണ്ട്.

ചേരുവകൾ, മില്ലി	ടെസ്റ്റ് ട്യൂബുകൾ
അനുഭവ നിയന്ത്രണം
	സെറം	ആൻ്റിജൻ	ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റം	ഒരു വർക്കിംഗ് ഡോസിൽ പൂരിപ്പിക്കുക
½
ഘട്ടം 1 ഐസോടോണിക് പരിഹാരം	―	0,5	0,5	1,5	1,25	1,0	0,5
ടെസ്റ്റ് സെറം 1:10 നേർപ്പിച്ചു	0,5	0,5	―	―	―	―	―
പ്രവർത്തന അളവിൽ ആൻ്റിജൻ	0,5		0,5	―	―	―	―
പ്രവർത്തന അളവിൽ 1:10 പൂരിപ്പിക്കുക	0,5	0,5	0,5	―	0,25	0,5	1,0
ട്യൂബുകൾ നന്നായി കുലുക്കി 37 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ 45 മിനിറ്റ് 1 മണിക്കൂർ അല്ലെങ്കിൽ 4 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ 18 മണിക്കൂർ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുന്നു.
ഘട്ടം 2 ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റം	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0	1,0
2, 3, 6, 7 ട്യൂബുകളിൽ പൂർണ്ണമായ ഹീമോലിസിസ് വരെ ട്യൂബുകൾ നന്നായി കുലുക്കുകയും 37˚C താപനിലയിൽ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുകയും ചെയ്യുന്നു.
ഫലമായി	പോസിറ്റീവ് അല്ലെങ്കിൽ നെഗറ്റീവ്	―	―	++++	(+)	―	―

പട്ടിക നമ്പർ 15

പ്രധാന പരീക്ഷണം നടത്തുന്നത്

പരീക്ഷണം സജ്ജീകരിക്കുമ്പോൾ, അത് അങ്ങേയറ്റം; ഘടകങ്ങൾ ചേർക്കുന്ന ക്രമം പ്രധാനമാണ്. രണ്ട് ഘട്ടങ്ങളിലായാണ് പരീക്ഷണം നടത്തുന്നത്.

ഘട്ടം I. ആവശ്യമായ അളവിലുള്ള ഐസോടോണിക് സോഡിയം ക്ലോറൈഡ് ലായനി ടെസ്റ്റ് ട്യൂബുകളിലേക്ക് ഒഴിക്കുന്നു, തുടർന്ന് ആവശ്യമായ അളവിൽ നേർപ്പിച്ച സെറം, ആൻ്റിജൻ്റെ പ്രവർത്തന ഡോസുകൾ എന്നിവ അതേ അളവിൽ പൂരകമാക്കുന്നു. പരീക്ഷണം അതിൽ ഉൾപ്പെട്ടിരിക്കുന്ന എല്ലാ ചേരുവകളുടെയും നിയന്ത്രണം ഉണ്ടായിരിക്കണം: സെറം, ആൻ്റിജൻ, ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റം, കോംപ്ലിമെൻ്റ്.

ട്യൂബുകൾ നന്നായി കുലുക്കി 37 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ 45 മിനിറ്റ്-1 മണിക്കൂർ അല്ലെങ്കിൽ 4 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ ("തണുപ്പിൽ RSC") 18 മണിക്കൂർ ഈ സമയത്ത്, ഒരു പ്രത്യേക സമുച്ചയത്തിൻ്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ, പൂരക ബൈൻഡിംഗ് സംഭവിക്കുന്നു. "തണുപ്പിൽ" പ്രതികരണം നടത്തുന്നത് അതിൻ്റെ സംവേദനക്ഷമതയും പ്രത്യേകതയും ഗണ്യമായി വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു.

ഘട്ടം II. ഇൻകുബേഷൻ്റെ അവസാനം, എല്ലാ ടെസ്റ്റ് ട്യൂബുകളിലും 1 മില്ലി ഹെമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റം ചേർക്കുന്നു, ഇത് പ്രാഥമികമായി 30 മിനിറ്റ് നേരത്തേക്ക് ഒരു തെർമോസ്റ്റാറ്റിൽ സൂക്ഷിക്കുന്നു (സെൻസിറ്റൈസ്ഡ്). ടെസ്റ്റ് ട്യൂബുകൾ കുലുക്കി വീണ്ടും തെർമോസ്റ്റാറ്റിൽ സ്ഥാപിക്കുന്നു.

അക്കൗണ്ടിംഗ് ഫലം ഏകദേശം. 2, 3, 6, 7 എന്നീ ട്യൂബുകളിൽ പൂർണ്ണമായ ഹീമോലിസിസ് വരെ ട്യൂബുകൾ തെർമോസ്റ്റാറ്റിൽ അവശേഷിക്കുന്നു (സെറം, ആൻ്റിജൻ്റെ നിയന്ത്രണം, ഒന്ന്, രണ്ട് ഡോസുകൾക്കുള്ള കോംപ്ലിമെൻ്റ്). 7-ാമത്തെ ടെസ്റ്റ് ട്യൂബിൽ ആദ്യം ഹീമോലിസിസ് സംഭവിക്കും, അതിൽ ഇരട്ടി പൂരകങ്ങൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. ഈ ട്യൂബിൽ ഹീമോലിസിസ് സംഭവിക്കുകയും അതിൻ്റെ ഉള്ളടക്കം പൂർണ്ണമായും സുതാര്യമാവുകയും ചെയ്ത ശേഷം, ശേഷിക്കുന്ന നിയന്ത്രണങ്ങൾ നിങ്ങൾ പ്രത്യേകം ശ്രദ്ധാപൂർവ്വം നിരീക്ഷിക്കേണ്ടതുണ്ട്. 2, 3, 6 ടെസ്റ്റ് ട്യൂബുകളിലെ ദ്രാവകം സുതാര്യമാകുമ്പോൾ, നിങ്ങൾ ഉടൻ തന്നെ തെർമോസ്റ്റാറ്റിൽ നിന്ന് ടെസ്റ്റ് ട്യൂബുകൾ ഉപയോഗിച്ച് റാക്ക് നീക്കം ചെയ്യണം. പരീക്ഷണം ആവശ്യമുള്ളതിലും കൂടുതൽ സമയം തെർമോസ്റ്റാറ്റിൽ സൂക്ഷിച്ചിട്ടില്ല എന്ന വസ്തുത അഞ്ചാമത്തെ ടെസ്റ്റ് ട്യൂബിൽ നേരിയ പ്രക്ഷുബ്ധത (അപൂർണ്ണമായ ഹീമോലിസിസ്) സാന്നിധ്യത്താൽ സൂചിപ്പിക്കുന്നു - അതിൽ പൂരകത്തിൻ്റെ പകുതി മാത്രമേ അടങ്ങിയിട്ടുള്ളൂ, പരീക്ഷണം ആണെങ്കിൽ പൂർണ്ണമായ ഹീമോലിസിസ് സംഭവിക്കില്ല. ശരിയായി സജ്ജമാക്കുക.

സെറം, ആൻ്റിജൻ കൺട്രോൾ (ട്യൂബുകൾ 2, 3) എന്നിവയിലെ ഹീമോലിസിസ് സൂചിപ്പിക്കുന്നത് അവയുടെ ഡോസുകൾ ശരിയായി തിരഞ്ഞെടുത്തിട്ടുണ്ടെന്നും സെറമോ ആൻ്റിജനോ സ്വയം പൂരകമാക്കുന്നില്ലെന്നും സൂചിപ്പിക്കുന്നു.

ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റത്തിൻ്റെ (ടെസ്റ്റ് ട്യൂബ് 4) നിയന്ത്രണത്തിൽ, അത് ശരിയായി പ്രവർത്തിക്കുന്നുണ്ടെങ്കിൽ, ഹീമോലിസിസിൻ്റെ ട്രെയ്സ് പോലും ഉണ്ടാകരുത് - അതിൽ ഒരു പൂരകവുമില്ല.

നിയന്ത്രണങ്ങൾ ശരിയായി പൂർത്തിയാക്കി എന്ന് നിങ്ങൾക്ക് ഉറപ്പുണ്ടെങ്കിൽ, നിങ്ങൾക്ക് അനുഭവം കണക്കിലെടുക്കാവുന്നതാണ്. ടെസ്റ്റ് ട്യൂബുകളിൽ ഹീമോലിസിസിൻ്റെ അഭാവം പ്രതികരണത്തിൻ്റെ നല്ല ഫലമായി കണക്കാക്കപ്പെടുന്നു. എടുത്ത ആൻ്റിജനുമായി ബന്ധപ്പെട്ട ആൻ്റിബോഡികൾ സെറത്തിൽ ഉണ്ടെന്ന് ഇത് സൂചിപ്പിക്കുന്നു. സമുച്ചയം അവർ ബന്ധിപ്പിച്ച പൂരകമായി രൂപപ്പെടുകയും ഹീമോലിസിസ് പ്രതികരണത്തിൽ അതിൻ്റെ പങ്കാളിത്തം തടയുകയും ചെയ്തു. ടെസ്റ്റ് ട്യൂബുകളിൽ ഹീമോലിസിസ് സംഭവിക്കുകയാണെങ്കിൽ, പ്രതികരണ ഫലം നെഗറ്റീവ് ആയി വിലയിരുത്തപ്പെടുന്നു. IN ഈ സാഹചര്യത്തിൽആൻ്റിജനും ആൻറിബോഡിയും തമ്മിൽ യാതൊരു ബന്ധവുമില്ല, പൂരകങ്ങൾ ബന്ധിപ്പിച്ചിട്ടില്ല കൂടാതെ ഹീമോലിസിസ് പ്രതികരണത്തിൽ ഉൾപ്പെടുന്നു.

രോഗിയുടെ സെറത്തിന് സമാന്തരമായി, അതേ പരീക്ഷണം വ്യക്തമായ പോസിറ്റീവ് സെറം ഉപയോഗിച്ചും (അതായത്, നൽകിയിരിക്കുന്ന ആൻ്റിജനിലേക്ക് ആൻ്റിബോഡികൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന സെറം ഉപയോഗിച്ചും) നിർദ്ദിഷ്ട ആൻ്റിബോഡികൾ അടങ്ങിയിട്ടില്ലാത്ത നെഗറ്റീവ് സെറം ഉപയോഗിച്ചും നടത്തുന്നു. പരീക്ഷണം ശരിയായി സജ്ജീകരിച്ചിട്ടുണ്ടെങ്കിൽ, ആദ്യ കേസിൽ ഹീമോലിസിസ് കാലതാമസം ഉണ്ടാകണം, രണ്ടാമത്തെ കേസിൽ ഹീമോലിസിസ് ഉണ്ടാകും.

പ്രതികരണത്തിൻ്റെ തീവ്രത ഇനിപ്പറയുന്ന രീതിയിൽ പ്രകടിപ്പിക്കുന്നു:

ഹീമോലിസിസിൻ്റെ പൂർണ്ണമായ കാലതാമസം. ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ ഏകീകൃത പ്രക്ഷുബ്ധത ഉണ്ടാക്കുന്നു അല്ലെങ്കിൽ അടിയിൽ സ്ഥിരതാമസമാക്കുന്നു. ഈ സാഹചര്യത്തിൽ, ടെസ്റ്റ് ട്യൂബിലെ ദ്രാവകം നിറമില്ലാത്തതായിത്തീരുന്നു;

ഏകദേശം 25% ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ ലൈസ് ചെയ്യപ്പെടുന്നു. അവശിഷ്ടം കുറവാണ്, അതിന് മുകളിലുള്ള ദ്രാവകം ചെറുതായി പിങ്ക് നിറമാണ്. RSC യുടെ ഫലവും ശക്തമായി പോസിറ്റീവ് ആയി വിലയിരുത്തപ്പെടുന്നു;

ഏകദേശം 50% ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ ലൈസ് ചെയ്യപ്പെടുന്നു. അവശിഷ്ടം ചെറുതാണ്, ദ്രാവകം പിങ്ക് ആണ്. പോസിറ്റീവ് RSC ഫലം;

ഏകദേശം 75% ചുവന്ന രക്താണുക്കളും ലൈസ് ചെയ്യപ്പെടുന്നു. ഒരു ചെറിയ അവശിഷ്ടം, അതിന് മുകളിൽ തീവ്രമായ നിറമുള്ള ദ്രാവകമുണ്ട്. സംശയാസ്പദമായ RSC ഫലം;

എല്ലാ ചുവന്ന രക്താണുക്കളും ലൈസ് ചെയ്തു. ദ്രാവകം തീവ്രമായ നിറമുള്ളതും പൂർണ്ണമായും സുതാര്യവുമാണ്. നെഗറ്റീവ് RSK ഫലം.

ബാക്ടീരിയ, വൈറൽ, പ്രോട്ടോസോൾ അണുബാധയുള്ള രോഗികളുടെ രക്തത്തിലെ സെറമിലെ ആൻ്റിബോഡികൾ കണ്ടെത്തുന്നതിനും രോഗികളിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ച വൈറസുകളെ തിരിച്ചറിയുന്നതിനും ടൈപ്പ് ചെയ്യുന്നതിനും ഈ പ്രതികരണം ഉപയോഗിക്കുന്നു.

ആർഎസ്‌സി സങ്കീർണ്ണമായ സീറോളജിക്കൽ പ്രതിപ്രവർത്തനങ്ങളെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു, അതിൽ ആൻ്റിജൻ, ആൻ്റിബോഡി, കോംപ്ലിമെൻ്റ് എന്നിവ കൂടാതെ, ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റവും പങ്കെടുക്കുന്നു, ഇത് പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ഫലങ്ങൾ വെളിപ്പെടുത്തുന്നു. ആർഎസ്‌സി രണ്ട് ഘട്ടങ്ങളിലായാണ് മുന്നോട്ട് പോകുന്നത്: ആദ്യത്തേത് പൂരകത്തിൻ്റെ പങ്കാളിത്തത്തോടെ ആൻ്റിബോഡിയുമായുള്ള ആൻ്റിജൻ്റെ പ്രതിപ്രവർത്തനമാണ്, രണ്ടാമത്തേത് ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റം ഉപയോഗിച്ച് കോംപ്ലിമെൻ്റ് ബൈൻഡിംഗിൻ്റെ അളവ് തിരിച്ചറിയുന്നതാണ്. ഈ സംവിധാനത്തിൽ ആടുകളുടെ ചുവന്ന രക്താണുക്കളും ലബോറട്ടറി മൃഗങ്ങളെ ചുവന്ന രക്താണുക്കളുമായി പ്രതിരോധ കുത്തിവയ്പ്പിലൂടെ ലഭിക്കുന്ന ഹീമോലിറ്റിക് സെറവും അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. എറിത്രോസൈറ്റുകൾ പ്രോസസ്സ് ചെയ്യുന്നു - 30 മിനിറ്റ് നേരത്തേക്ക് 37 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസ് താപനിലയിൽ സെറം ചേർത്ത് സംവേദനക്ഷമത നൽകുന്നു. സെൻസിറ്റൈസ്ഡ് ആടുകളുടെ എറിത്രോസൈറ്റുകളുടെ ലിസിസ്, അവ ഹീമോലിറ്റിക് കോംപ്ലിമെൻ്റ് സിസ്റ്റത്തിൽ ചേരുകയാണെങ്കിൽ മാത്രമേ സംഭവിക്കുകയുള്ളൂ. അതിൻ്റെ അഭാവത്തിൽ ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ മാറില്ല. ആർഎസ്‌സിയുടെ ഫലങ്ങൾ ടെസ്റ്റ് സെറത്തിലെ ആൻ്റിബോഡികളുടെ സാന്നിധ്യത്തെ ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നു. സെറമിൽ പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിൽ ഉപയോഗിക്കുന്ന ആൻ്റിജനുമായി ഏകീകൃതമായ ആൻ്റിബോഡികൾ അടങ്ങിയിട്ടുണ്ടെങ്കിൽ, തത്ഫലമായുണ്ടാകുന്ന ആൻ്റിജൻ-ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്സ് ബന്ധിപ്പിക്കുകയും ബന്ധിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. ഒരു ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റം ചേർക്കുമ്പോൾ, ഈ സാഹചര്യത്തിൽ, ഹീമോലിസിസ് സംഭവിക്കില്ല, കാരണം എല്ലാ പൂരകങ്ങളും ആൻ്റിജൻ-ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്സിൻ്റെ പ്രത്യേക ബോണ്ടിൽ ചെലവഴിക്കുന്നു.

ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ മാറ്റമില്ലാതെ തുടരുന്നു, അതിനാൽ ടെസ്റ്റ് ട്യൂബിലെ ഹീമോലിസിസിൻ്റെ അഭാവം പോസിറ്റീവ് RBC ആയി രേഖപ്പെടുത്തുന്നു. സെറമിലെ ആൻ്റിജനുമായി ബന്ധപ്പെട്ട ആൻ്റിബോഡികളുടെ അഭാവത്തിൽ, ഒരു പ്രത്യേക ആൻ്റിജൻ-ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്സ് രൂപപ്പെടുന്നില്ല, കൂടാതെ പൂരകങ്ങൾ സ്വതന്ത്രമായി തുടരുന്നു. ഒരു ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റം ചേർക്കുമ്പോൾ, പൂരകങ്ങൾ അതിനോട് ചേർന്ന് ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ ഹീമോലിസിസിന് കാരണമാകുന്നു. ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ നാശവും അവയുടെ ഹീമോലിസിസും നെഗറ്റീവ് പ്രതികരണത്തിൻ്റെ സവിശേഷതയാണ്.

RSC ഘട്ടത്തിൽ, ഇനിപ്പറയുന്നവ ആവശ്യമാണ്: രോഗിയുടെ സെറം, കോംപ്ലിമെൻ്റ്, ആടുകളുടെ എറിത്രോസൈറ്റുകൾ, ഹീമോലിറ്റിക് സെറം എന്നിവ അടങ്ങിയ ഒരു ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റം, അതുപോലെ ഒരു ഐസോടോണിക് സോഡിയം ക്ലോറൈഡ് ലായനി.

സെറോളജിക്കൽ ട്യൂബുകളിലാണ് പ്രതികരണം നടത്തുന്നത്. ഐസോടോണിക് സോഡിയം ക്ലോറൈഡ് ലായനി ഉപയോഗിച്ച് മൂന്ന് പ്രാവശ്യം കഴുകി ഡീഫൈബ്രിനേറ്റ് ചെയ്ത ആടുകളുടെ രക്തത്തിൽ നിന്നാണ് ആടുകളുടെ ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ ലഭിക്കുന്നത്. ഹീമോലിറ്റിക് സെറം ആംപ്യൂളുകളിൽ റെഡിമെയ്ഡ് ആയി നിർമ്മിക്കപ്പെടുന്നു, ഇതിൻ്റെ ലേബൽ അതിൻ്റെ ടൈറ്ററിനെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു, അതായത്, സെറത്തിൻ്റെ പരമാവധി നേർപ്പിക്കൽ, ഇത് പൂരകത്തിൻ്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ ചുവന്ന രക്താണുക്കളിൽ ചേർക്കുമ്പോൾ ഇപ്പോഴും ഹീമോലിസിസിന് കാരണമാകുന്നു. ആടുകളുടെ ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ ഉപയോഗിച്ച് മുയലുകൾ പോലുള്ള മൃഗങ്ങൾക്ക് പ്രതിരോധ കുത്തിവയ്പ്പ് നടത്തിയാണ് ഹീമോലിറ്റിക് സെറം ലഭിക്കുന്നത്. പ്രതികരണം സജ്ജീകരിക്കുമ്പോൾ, സെറം ട്രിപ്പിൾ ടൈറ്ററിൽ ഉപയോഗിക്കുന്നു. ഉദാഹരണത്തിന്, ഹീമോലിറ്റിക് സെറമിൻ്റെ ടൈറ്റർ 1: 1200 ആണ്, പ്രവർത്തന നേർപ്പിക്കൽ 1: 400 ആണ്. ഫ്രഷ് ഗിനിയ പിഗ് ബ്ലഡ് സെറം (24-48 മണിക്കൂറിനുള്ളിൽ) അല്ലെങ്കിൽ ആംപ്യൂളുകളിൽ ഡ്രൈ കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഉപയോഗിക്കുന്നു.

ആർഎസ്‌സി നടത്തുന്നതിന് മുമ്പ്, കോംപ്ലിമെൻ്റ് 1:10 നേർപ്പിച്ച് ടൈറ്റർ സ്ഥാപിക്കാൻ ടൈട്രേറ്റ് ചെയ്യുന്നു - ഈ പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിൽ ഉപയോഗിക്കുന്ന ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റവുമായി സംയോജിപ്പിക്കുമ്പോൾ ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ ഹീമോലിസിസ് ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്ന ഏറ്റവും ചെറിയ പൂരകമാണ്. ആൻ്റിജൻ്റെ സാധ്യമായ ആൻ്റി-കോംപ്ലിമെൻ്ററി പ്രോപ്പർട്ടികൾ കണക്കിലെടുക്കുമ്പോൾ, ഒരു പ്രതികരണം നടത്തുമ്പോൾ, 20-30% വർദ്ധനവ് സ്ഥാപിതമായ വർക്കിംഗ് ടൈറ്ററിലേക്ക് വരുത്തുന്നു.

RSC-യുടെ ആൻ്റിജൻ കൊല്ലപ്പെട്ട ബാക്ടീരിയയുടെ സസ്പെൻഷനുകൾ, ഈ സസ്പെൻഷനുകളിൽ നിന്ന് തയ്യാറാക്കിയ എക്സ്ട്രാക്റ്റുകൾ, സൂക്ഷ്മാണുക്കളുടെ വ്യക്തിഗത രാസഘടകങ്ങൾ എന്നിവയാണ്. ഒരു ആൻ്റിജൻ്റെ പ്രധാന ആവശ്യം പൂരക പ്രവർത്തനത്തിൻ്റെ തടസ്സത്തിൻ്റെ അഭാവമാണ്. ഇതിന് പൂരക വിരുദ്ധ ഗുണങ്ങൾ ഉണ്ടാകരുത്. ആൻ്റിജൻ്റെ ഈ ഗുണങ്ങൾ തിരിച്ചറിയുന്നതിന്, പ്രതികരണത്തിൽ ഉപയോഗിക്കുന്ന ആൻ്റിജൻ്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ കോംപ്ലിമെൻ്റ് അധികമായി ടൈട്രേറ്റ് ചെയ്യുന്നു. ആർഎസ്‌സി നടത്തുന്നതിന് ചില പദ്ധതികളുണ്ട്. ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റത്തിൽ ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ ഹീമോലിസിസിൻ്റെ സാന്നിധ്യം അല്ലെങ്കിൽ അഭാവം മൂലം പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ഫലങ്ങൾ കണക്കിലെടുക്കുന്നു. സിഫിലിസ് (വാസ്സർമാൻ പ്രതിപ്രവർത്തനം), ഗൊണോറിയ (ബോർഡെറ്റ്-ഗെങ്കൗ പ്രതികരണം), ടോക്സോപ്ലാസ്മോസിസ്, റിക്കറ്റ്‌സിയൽ എന്നിവയുടെ രോഗനിർണയത്തിൽ RSC ഉപയോഗിക്കുന്നു. വൈറൽ രോഗങ്ങൾ.

കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഫിക്സേഷൻ റിയാക്ഷൻ (CFR) എന്നത് ആൻ്റിജനുകളും ആൻ്റിബോഡികളും പരസ്പരം പൊരുത്തപ്പെടുമ്പോൾ, അവ ഒരു രോഗപ്രതിരോധ സമുച്ചയം ഉണ്ടാക്കുന്നു, അതിൽ ആൻ്റിബോഡികളുടെ എഫ്‌സി ശകലത്തിലൂടെ കോംപ്ലിമെൻ്റ് (സി) ഘടിപ്പിച്ചിരിക്കുന്നു, അതായത്, പൂരകത്തെ ആൻ്റിജൻ-ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്‌സ് ബന്ധിപ്പിച്ചിരിക്കുന്നു. ആൻ്റിജൻ-ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്സ് രൂപപ്പെട്ടില്ലെങ്കിൽ, പൂരകങ്ങൾ സ്വതന്ത്രമായി തുടരും.

AG, AT എന്നിവയുടെ പ്രത്യേക ഇടപെടൽ പൂരകത്തിൻ്റെ അഡോർപ്ഷൻ (ബൈൻഡിംഗ്) ഒപ്പമുണ്ട്. കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഫിക്സേഷൻ പ്രക്രിയ ദൃശ്യപരമായി ദൃശ്യമാകാത്തതിനാൽ, ജെ. ബോർഡറ്റും ഒ. ഷാംഗും ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റം (ആടുകളുടെ ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ + ഹീമോലിറ്റിക് സെറം) ഒരു സൂചകമായി ഉപയോഗിക്കാൻ നിർദ്ദേശിച്ചു, ഇത് എജി-എടി കോംപ്ലക്‌സ് പൂരകങ്ങൾ ഉറപ്പിച്ചിട്ടുണ്ടോ എന്ന് കാണിക്കുന്നു. AG ഉം AT ഉം പരസ്പരം യോജിക്കുന്നുവെങ്കിൽ, അതായത് ഒരു രോഗപ്രതിരോധ സമുച്ചയം രൂപപ്പെട്ടിട്ടുണ്ടെങ്കിൽ, ഈ സമുച്ചയത്താൽ പൂരകവും ഹീമോലിസിസ് സംഭവിക്കുന്നില്ല. AT AG യുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നില്ലെങ്കിൽ, സമുച്ചയം രൂപപ്പെടുന്നില്ല, പൂരകമായി അവശേഷിക്കുന്നു, രണ്ടാമത്തെ സിസ്റ്റവുമായി കൂടിച്ചേർന്ന് ഹീമോലിസിസിന് കാരണമാകുന്നു.

പ്രതികരണ പുരോഗതി

രണ്ട് സംവിധാനങ്ങൾ ഉൾപ്പെടുന്ന രണ്ട് ഘട്ടങ്ങളിലായാണ് പ്രതികരണം സംഭവിക്കുന്നത്; ബാക്ടീരിയയും ഹീമോലിറ്റിക്. ആദ്യ പ്രതികരണത്തിൽ (നിർദ്ദിഷ്ട) ആൻ്റിജൻ 4-+ ആൻ്റിബോഡി + കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഉൾപ്പെടുന്നു. ആൻ്റിബോഡികൾ ഒരു ആൻ്റിജനുമായി പൊരുത്തപ്പെടുമ്പോൾ സംഭവിക്കുന്ന ഒരു പോസിറ്റീവ് പ്രതികരണ ഫലം, ഒരു പ്രത്യേക ബാക്ടീരിയൽ ആൻ്റിജൻ-ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്‌സിൻ്റെ രൂപവത്കരണത്താൽ അഡ്‌സോർബഡ് അല്ലെങ്കിൽ അവർ പറയുന്നതുപോലെ "ബൗണ്ട്" കോംപ്ലിമെൻ്റ് ആണ്. അദൃശ്യമായി അവശേഷിക്കുന്നു, സമുച്ചയം അത് രൂപപ്പെട്ട പരിസ്ഥിതിയിൽ ബാഹ്യമായ മാറ്റങ്ങളൊന്നും ഉണ്ടാക്കുന്നില്ല. ആൻ്റിജനും സെറം ആൻ്റിബോഡിയും തമ്മിലുള്ള പ്രത്യേക ബന്ധത്തിൻ്റെ അഭാവത്തിൽ ഒരു നെഗറ്റീവ് RSC ഫലം സംഭവിക്കുന്നു, കൂടാതെ സ്വതന്ത്ര സജീവ പൂരകത്തിൻ്റെ സംരക്ഷണം ഇതിൻ്റെ സവിശേഷതയാണ്. RSC യുടെ ആദ്യ ഘട്ടം ഒരു തെർമോസ്റ്റാറ്റിൽ 37 ° C (1-2 മണിക്കൂർ) അല്ലെങ്കിൽ ഒരു റഫ്രിജറേറ്ററിൽ 3-4 ° C (18-20 മണിക്കൂർ) നടത്താം. തണുപ്പിൽ ആൻ്റിജൻ-ആൻ്റിബോഡി രോഗപ്രതിരോധ സമുച്ചയത്തിൻ്റെ നീണ്ട രൂപീകരണത്തോടെ, പൂരകത്തിൻ്റെ കൂടുതൽ പൂർണ്ണമായ ബൈൻഡിംഗ് സംഭവിക്കുന്നു, അതിൻ്റെ ഫലമായി, പ്രതികരണത്തിൻ്റെ സംവേദനക്ഷമത വർദ്ധിക്കുന്നു. താരതമ്യ പരീക്ഷണങ്ങൾ നടത്തുമ്പോൾ, സോവിയറ്റ് ഇമ്മ്യൂണോളജിസ്റ്റ് അക്കാദമിഷ്യൻ. വി.ഐ.ഐ.ഓഫും അദ്ദേഹത്തിൻ്റെ വിദ്യാർത്ഥികളും, തണുപ്പിൽ ദീർഘനേരം പൂരകമാക്കുന്ന സാഹചര്യത്തിൽ, 100-500 മടങ്ങ് ചെറിയ അളവിൽ ആൻ്റിജൻ പിടിച്ചെടുക്കാനും നേടാനും കഴിയുമെന്ന് കാണിച്ചു. നല്ല ഫലങ്ങൾ 1-2 മണിക്കൂർ 37 ° C താപനിലയിൽ പൂരക ഫിക്സേഷൻ പരീക്ഷണത്തേക്കാൾ ഉയർന്ന പ്രതിരോധ സെറം നേർപ്പിക്കുമ്പോൾ, പ്രതികരണത്തിൻ്റെ രണ്ടാം ഘട്ടം (സൂചകം) ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റത്തിൻ്റെ റിയാക്ടറുകൾക്കിടയിൽ സംഭവിക്കുന്നു (3% സസ്പെൻഷൻ്റെ മിശ്രിതം. 37 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസ് താപനിലയിൽ ചുവന്ന രക്താണുക്കളും ഹീമോലിറ്റിക് സെറവും തുല്യ അളവിൽ) പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ആദ്യ ഘട്ടത്തിൽ നിന്ന് സ്വതന്ത്രമായി നിലകൊള്ളുന്ന പൂരകത്തിൻ്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ മാത്രം (നെഗറ്റീവ് പ്രതികരണം). സ്വതന്ത്ര സജീവ പൂരകത്തിൻ്റെ അഭാവത്തിൽ, പ്രത്യേക ഹീമോലിസിനുകളുടെ സ്വാധീനത്തിൽ ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ ഹീമോലിസിസ് സംഭവിക്കുന്നില്ല (പ്രതികരണം പോസിറ്റീവ് ആണ്).

ഘടകങ്ങൾ

കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഫിക്സേഷൻ റിയാക്ഷൻ (സിഎഫ്ആർ) ഒരു സങ്കീർണ്ണമായ സീറോളജിക്കൽ പ്രതികരണമാണ്. ഇത് നടപ്പിലാക്കാൻ, 5 ചേരുവകൾ ആവശ്യമാണ്, അതായത്: എജി, എടി, കോംപ്ലിമെൻ്റ് (ആദ്യത്തെ സിസ്റ്റം), ആടുകളുടെ എറിത്രോസൈറ്റുകൾ, ഹീമോലിറ്റിക് സെറം (രണ്ടാമത്തെ സിസ്റ്റം).

RSC-യുടെ ആൻ്റിജൻ, കൊല്ലപ്പെട്ട വിവിധ സൂക്ഷ്മാണുക്കളുടെ സംസ്കാരങ്ങൾ, അവയുടെ ലൈസറ്റുകൾ, ബാക്ടീരിയയുടെ ഘടകങ്ങൾ, രോഗശാസ്ത്രപരമായി മാറ്റം വരുത്തിയതും സാധാരണ അവയവങ്ങൾ, ടിഷ്യു ലിപിഡുകൾ, വൈറസുകൾ, വൈറസ് അടങ്ങിയ വസ്തുക്കൾ.

പുതിയതോ ഉണങ്ങിയതോ ആയ ഗിനിയ പിഗ് സെറം ഒരു പൂരകമായി ഉപയോഗിക്കുന്നു.

പ്രതികരണ സംവിധാനം

RSK രണ്ട് ഘട്ടങ്ങളിലായാണ് നടത്തുന്നത്: 1st ഘട്ടം - മൂന്ന് ഘടകങ്ങൾ ആൻ്റിജൻ + ആൻ്റിബോഡി + പൂരകങ്ങൾ അടങ്ങിയ മിശ്രിതത്തിൻ്റെ ഇൻകുബേഷൻ; രണ്ടാം ഘട്ടം (സൂചകം) - ആടുകളുടെ എറിത്രോസൈറ്റുകളും അവയിലേക്കുള്ള ആൻ്റിബോഡികൾ അടങ്ങിയ ഹീമോലിറ്റിക് സെറവും അടങ്ങുന്ന ഒരു ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റം ചേർത്ത് മിശ്രിതത്തിലെ സ്വതന്ത്ര പൂരകത്തിൻ്റെ കണ്ടെത്തൽ. പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിൻ്റെ ആദ്യ ഘട്ടത്തിൽ, ആൻ്റിജൻ-ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്സ് രൂപപ്പെടുമ്പോൾ, പൂരകങ്ങൾ ബന്ധിപ്പിക്കുന്നു, തുടർന്ന് രണ്ടാം ഘട്ടത്തിൽ, ആൻ്റിബോഡികളാൽ സംവേദനക്ഷമതയുള്ള എറിത്രോസൈറ്റുകളുടെ ഹീമോലിസിസ് സംഭവിക്കില്ല; പ്രതികരണം പോസിറ്റീവ് ആണ്. ആൻ്റിജനും ആൻ്റിബോഡിയും പരസ്പരം പൊരുത്തപ്പെടുന്നില്ലെങ്കിൽ (ടെസ്റ്റ് സാമ്പിളിൽ ആൻ്റിജനോ ആൻ്റിബോഡിയോ ഇല്ല), കോംപ്ലിമെൻ്റ് സ്വതന്ത്രമായി തുടരുകയും രണ്ടാം ഘട്ടത്തിൽ ചുവന്ന രക്താണുക്കളിൽ ചേരുകയും ചെയ്യും - ആൻ്റി-എറിത്രോസൈറ്റ് ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്സ്, ഇത് ഹീമോലിസിസിന് കാരണമാകുന്നു; പ്രതികരണം നെഗറ്റീവ് ആണ്.

അപേക്ഷ

പൂരക ഫിക്സേഷൻ പ്രതികരണം ഇതിനായി ഉപയോഗിക്കാം:
1) അറിയപ്പെടുന്ന സ്വഭാവമുള്ള ഒരു ആൻ്റിജനുമായുള്ള പ്രതിപ്രവർത്തനത്തെ അടിസ്ഥാനമാക്കി അജ്ഞാത സെറമിലെ നിർദ്ദിഷ്ട ആൻ്റിബോഡികളുടെ തിരിച്ചറിയൽ;
2) അറിയപ്പെടുന്ന ഒരു പ്രത്യേക സെറം പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിൽ ആൻ്റിജൻ്റെ ഗുണങ്ങൾ പഠിക്കുന്നു. RSC നടത്തുന്നതിനുള്ള ചേരുവകൾ തയ്യാറാക്കൽ.

1. ഗവേഷണത്തിനായി ലഭിച്ച രക്ത സെറം, പ്രതികരണത്തിൻ്റെ തലേന്ന്, സ്വന്തം പൂരകത്തെ നിർജ്ജീവമാക്കുന്നതിന് 30 മിനിറ്റ് നേരത്തേക്ക് 56 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ വാട്ടർ ബാത്തിൽ ചൂടാക്കുന്നു. നിർജ്ജീവമാക്കിയ സെറം 3-4 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ 5-6 ദിവസത്തേക്ക് സൂക്ഷിക്കാം. പരീക്ഷണ ദിവസം, സെറം ഐസോടോണിക് സോഡിയം ക്ലോറൈഡ് ലായനിയിൽ 1: 5 എന്ന അനുപാതത്തിൽ ലയിപ്പിക്കുന്നു (0.1 മില്ലി ടെസ്റ്റ് സെറം + 0.4 മില്ലി ഐസോടോണിക് സോഡിയം ക്ലോറൈഡ് ലായനി).

2. CSC ഉൽപ്പാദിപ്പിക്കുന്നതിനുള്ള ആൻ്റിജൻ വിവിധ സൂക്ഷ്മാണുക്കളുടെ സംസ്കാരങ്ങൾ, ബാക്ടീരിയൽ പ്രോട്ടീനുകൾ, സൂക്ഷ്മജീവ സംസ്കാരങ്ങളിൽ നിന്ന് ലഭിച്ച സത്തകൾ, പാത്തോളജിക്കൽ മാറ്റം വരുത്തിയതും സാധാരണ അവയവങ്ങളും ടിഷ്യൂകളും ആകാം. ആൻ്റിജൻ തയ്യാറാക്കലിൻ്റെ പ്രത്യേകതകൾ നിർണ്ണയിക്കുന്നത് പകർച്ചവ്യാധി പ്രക്രിയയുടെ സ്വഭാവവും അതിൻ്റെ രോഗകാരിയുടെ സവിശേഷതകളുമാണ്.

3. ആരോഗ്യമുള്ള 3-5 ഗിനി പന്നികളിൽ നിന്ന് ലഭിക്കുന്ന സെറം അല്ലെങ്കിൽ ആംപ്യൂളുകളിലെ ഡ്രൈ കോംപ്ലിമെൻ്റ് മിശ്രിതമാണ് കോംപ്ലിമെൻ്റ്.

ഉപയോഗിക്കുന്നതിന് തൊട്ടുമുമ്പ്, ഗിനിയ പിഗ് സെറം സോഡിയം ക്ലോറൈഡിൻ്റെ ഐസോടോണിക് ലായനിയിൽ 1:10 എന്ന അനുപാതത്തിൽ ലയിപ്പിച്ച് ഒരു സ്റ്റോക്ക് ലായനി ലഭിക്കും.

4. പരീക്ഷണം നടത്തുന്നതിന് മുമ്പ്, 56 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസ് താപനിലയിൽ 30 മിനിറ്റ് ചൂടാക്കി ഹീമോലിറ്റിക് സെറം നിർജ്ജീവമാക്കുന്നു. പ്രധാന RSC പരീക്ഷണം നടത്തുന്നതിനും, പൂരകവും ആൻ്റിജനും ടൈറ്ററേറ്റ് ചെയ്യുന്നതിനും, ട്രിപ്പിൾ ടൈറ്ററിൽ ഹെമോലിറ്റിക് സെറം ഉപയോഗിക്കുന്നു. ഉദാഹരണത്തിന്, ഹീമോലിറ്റിക് സെറത്തിൻ്റെ ടൈറ്റർ 1: 1800 ആണെങ്കിൽ, പ്രതികരണത്തിൽ 1: 600 എന്ന സെറം നേർപ്പിക്കൽ ഉപയോഗിക്കുന്നു.

5. ഡീഫിബ്രിനേറ്റഡ് ആടുകളുടെ രക്തത്തിൽ നിന്നാണ് എറിത്രോസൈറ്റുകൾ ലഭിക്കുന്നത്. ഫൈബ്രിൻ ഫിലിമുകൾ നീക്കംചെയ്യാൻ, മൂന്ന് പാളികളുള്ള നെയ്തെടുത്ത ഫിൽട്ടറിലൂടെ രക്തം ഫിൽട്ടർ ചെയ്യുന്നു. തത്ഫലമായുണ്ടാകുന്ന ഫിൽട്രേറ്റ് സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്യുകയും സെറം വലിച്ചെടുക്കുകയും വറ്റിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു, കൂടാതെ ഐസോടോണിക് സോഡിയം ക്ലോറൈഡ് ലായനി ഉപയോഗിച്ച് 3-4 തവണ സെൻട്രിഫ്യൂഗേഷൻ വഴി എറിത്രോസൈറ്റുകൾ കഴുകുന്നു. ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ അവസാനമായി കഴുകുമ്പോൾ, ദ്രാവകത്തിൻ്റെ സൂപ്പർനറ്റൻ്റ് പാളി പൂർണ്ണമായും സുതാര്യമായിരിക്കണം. ഐസോടോണിക് സോഡിയം ക്ലോറൈഡ് ലായനിയിൽ കഴുകിയ ചുവന്ന രക്താണുക്കളിൽ നിന്ന് 3% സസ്പെൻഷൻ തയ്യാറാക്കപ്പെടുന്നു. മേൽപ്പറഞ്ഞ രീതിയിൽ ആർഎസ്‌സിയിൽ ഉൾപ്പെട്ടിരിക്കുന്ന ചേരുവകൾ തയ്യാറാക്കിയ ശേഷം, ഹീമോലിറ്റിക് സെറം, കോംപ്ലിമെൻ്റ്, ആൻ്റിജൻ എന്നിവയുടെ ടൈറ്ററേഷനിലേക്ക് പോകുക.



പാഠപുസ്തകത്തിൽ ഏഴ് ഭാഗങ്ങളാണുള്ളത്. ഭാഗം ഒന്ന് - "ജനറൽ മൈക്രോബയോളജി" - ബാക്ടീരിയയുടെ രൂപശാസ്ത്രത്തെയും ശരീരശാസ്ത്രത്തെയും കുറിച്ചുള്ള വിവരങ്ങൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. ഭാഗം രണ്ട് ബാക്ടീരിയയുടെ ജനിതകശാസ്ത്രത്തിന് നീക്കിവച്ചിരിക്കുന്നു. ഭാഗം മൂന്ന് - "ബയോസ്ഫിയറിൻ്റെ മൈക്രോഫ്ലോറ" - മൈക്രോഫ്ലോറ പരിശോധിക്കുന്നു പരിസ്ഥിതി, പ്രകൃതിയിലെ പദാർത്ഥങ്ങളുടെ ചക്രത്തിൽ അതിൻ്റെ പങ്ക്, അതുപോലെ മനുഷ്യ മൈക്രോഫ്ലോറയും അതിൻ്റെ പ്രാധാന്യവും. ഭാഗം നാല് - "അണുബാധയുടെ സിദ്ധാന്തം" - സൂക്ഷ്മാണുക്കളുടെ രോഗകാരി ഗുണങ്ങൾ, അവയുടെ പങ്ക് എന്നിവയ്ക്കായി നീക്കിവച്ചിരിക്കുന്നു. പകർച്ചവ്യാധി പ്രക്രിയ, കൂടാതെ ആൻറിബയോട്ടിക്കുകളെയും അവയുടെ പ്രവർത്തനരീതികളെയും കുറിച്ചുള്ള വിവരങ്ങളും അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. അഞ്ചാം ഭാഗം - "പ്രതിരോധശേഷിയുടെ സിദ്ധാന്തം" - പ്രതിരോധശേഷിയെക്കുറിച്ചുള്ള ആധുനിക ആശയങ്ങൾ ഉൾക്കൊള്ളുന്നു. ആറാമത്തെ ഭാഗം - "വൈറസുകളും അവ ഉണ്ടാക്കുന്ന രോഗങ്ങളും" - വൈറസുകളുടെ അടിസ്ഥാന ജൈവ ഗുണങ്ങളെക്കുറിച്ചും അവ ഉണ്ടാക്കുന്ന രോഗങ്ങളെക്കുറിച്ചും വിവരങ്ങൾ നൽകുന്നു. ഭാഗം ഏഴ് - “പ്രൈവറ്റ് മെഡിക്കൽ മൈക്രോബയോളജി” - പലരുടെയും രോഗകാരികളുടെ രൂപശാസ്ത്രം, ശരീരശാസ്ത്രം, രോഗകാരി ഗുണങ്ങൾ എന്നിവയെക്കുറിച്ചുള്ള വിവരങ്ങൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. പകർച്ചവ്യാധികൾ, കൂടാതെ ഏകദേശം ആധുനിക രീതികൾഅവരുടെ രോഗനിർണയം, പ്രത്യേക പ്രതിരോധംതെറാപ്പിയും.

പാഠപുസ്തകം വിദ്യാർത്ഥികൾക്കും ബിരുദ വിദ്യാർത്ഥികൾക്കും ഉന്നത മെഡിക്കൽ അധ്യാപകർക്കും വേണ്ടിയുള്ളതാണ് വിദ്യാഭ്യാസ സ്ഥാപനങ്ങൾ, സർവ്വകലാശാലകൾ, എല്ലാ സ്പെഷ്യാലിറ്റികളുടെയും മൈക്രോബയോളജിസ്റ്റുകളും പ്രാക്ടീസ് ചെയ്യുന്ന ഡോക്ടർമാരും.

അഞ്ചാം പതിപ്പ്, പുതുക്കിയതും വിപുലീകരിച്ചതും

പുസ്തകം:

<<< Назад

മുന്നോട്ട് >>>

പൂരക ഫിക്സേഷൻ പ്രതികരണം

വ്യത്യസ്ത സ്വഭാവമുള്ള ആൻ്റിജൻ + ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്സുകളുമായി പ്രത്യേകമായി ബന്ധിപ്പിക്കുന്നതിനുള്ള പൂരകത്തിൻ്റെ അതുല്യമായ കഴിവ് കണ്ടെത്തി. വിശാലമായ ആപ്ലിക്കേഷൻപൂരക ഫിക്സേഷൻ പ്രതികരണത്തിൽ (CFR). ആർഎസ്‌സിയുടെ ഒരു പ്രത്യേക നേട്ടം, അതിൽ ഉൾപ്പെട്ടിരിക്കുന്ന ആൻ്റിജൻ്റെ സ്വഭാവം (കോർപ്പസ്‌കുലർ അല്ലെങ്കിൽ ലയിക്കുന്നവ) പ്രശ്നമല്ല, കാരണം ഐജിജി, ഐജിഎം എന്നിവയുമായി ബന്ധപ്പെട്ട ഏതൊരു ആൻ്റിബോഡിയുടെയും എഫ്‌സി ശകലവുമായി കോംപ്ലിമെൻ്റ് ബന്ധിപ്പിക്കുന്നു, അതിൻ്റെ ആൻ്റിബോഡി പ്രത്യേകത പരിഗണിക്കാതെ തന്നെ. കൂടാതെ, ആർഎസ്എ വളരെ സെൻസിറ്റീവ് ആണ്: ആൻ്റിബോഡികളുടെ അളവ് 10 മടങ്ങ് കുറവ് കണ്ടെത്താൻ ഇത് നിങ്ങളെ അനുവദിക്കുന്നു, ഉദാഹരണത്തിന്, മഴ പ്രതികരണത്തിൽ. 1901-ൽ J. ബോർഡെറ്റും O. Zhang ഉം ചേർന്ന് RSC നിർദ്ദേശിച്ചു. ഇത് പൂരകത്തിൻ്റെ രണ്ട് ഗുണങ്ങളെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ളതാണ്:

1) ആൻ്റിജൻ + ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്സുമായി ബന്ധിപ്പിക്കാനുള്ള കഴിവ്;

2) ഹീമോലിറ്റിക് സെറം ലഭിക്കാൻ ഉപയോഗിക്കുന്ന ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ ലിസിസ്.

ആർഎസ്‌കെ രണ്ട് ഘട്ടങ്ങളിലായാണ് നടത്തുന്നത്, രണ്ട് സിസ്റ്റങ്ങൾ യഥാക്രമം അതിൽ ഉൾപ്പെടുന്നു - പരീക്ഷണാത്മക, അല്ലെങ്കിൽ ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്, സൂചകം. ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് സിസ്റ്റത്തിൽ ടെസ്റ്റ് (അല്ലെങ്കിൽ ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്) സെറം അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, അതിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന കോംപ്ലിമെൻ്റും ആൻ്റിജനും നിർജ്ജീവമാക്കുന്നതിന് പ്രതികരണം നടത്തുന്നതിന് മുമ്പ് 56 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ 30 മിനിറ്റ് ചൂടാക്കുന്നു. ഈ സിസ്റ്റത്തിലേക്ക് സ്റ്റാൻഡേർഡ് കോംപ്ലിമെൻ്റ് ചേർത്തിരിക്കുന്നു. പുതിയതോ ഉണങ്ങിയതോ ആയ ഗിനിയ പിഗ് whey ആണ് ഇതിൻ്റെ ഉറവിടം. മിശ്രിതം 37 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ ഒരു മണിക്കൂർ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുന്നു. ടെസ്റ്റ് സെറമിൽ ആൻ്റിബോഡികൾ അടങ്ങിയിട്ടുണ്ടെങ്കിൽ, അവ കൂട്ടിച്ചേർത്ത ആൻ്റിജനുമായി ഇടപഴകുകയും തത്ഫലമായുണ്ടാകുന്ന ആൻ്റിജൻ + ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്സുകൾ അധിക പൂരകത്തെ ബന്ധിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യും. സെറമിൽ ആൻ്റിബോഡികൾ ഇല്ലെങ്കിൽ, ഒരു ആൻ്റിജൻ + ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്‌സിൻ്റെ രൂപീകരണം സംഭവിക്കില്ല, കൂടാതെ പൂരകങ്ങൾ സ്വതന്ത്രമായി തുടരും. പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ഈ ഘട്ടത്തിൽ പൂരക ഫിക്സേഷൻ്റെ ദൃശ്യമായ പ്രകടനങ്ങളൊന്നും സാധാരണയായി ഉണ്ടാകില്ല. അതിനാൽ, കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഫിക്സേഷൻ നടന്നിട്ടുണ്ടോ ഇല്ലയോ എന്ന ചോദ്യം വ്യക്തമാക്കുന്നതിന്, രണ്ടാമത്തെ ഇൻഡിക്കേറ്റർ സിസ്റ്റം (ഇൻക്ടിവേറ്റഡ് ഹീമോലിറ്റിക് സെറം + ഷീപ്പ് എറിത്രോസൈറ്റുകൾ) ചേർക്കുന്നു, കൂടാതെ എല്ലാ RSC ഘടകങ്ങളുടെയും മിശ്രിതം 30 - 60 മിനിറ്റ് നേരത്തേക്ക് 37 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ വീണ്ടും ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുന്നു. ഏത് പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ഫലങ്ങൾ വിലയിരുത്തപ്പെടുന്നു. ആദ്യ ഘട്ടത്തിൽ, ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് സിസ്റ്റത്തിൽ, അതായത് രോഗിയുടെ സെറമിൽ ആൻ്റിബോഡികൾ ഉണ്ടെങ്കിൽ, പൂരകങ്ങൾ ആൻ്റിബോഡി ++ ആൻ്റിജൻ കോംപ്ലക്സുമായി ബന്ധിപ്പിച്ചിട്ടുണ്ടെങ്കിൽ, എറിത്രോസൈറ്റുകളുടെ ലിസിസ് ഉണ്ടാകില്ല - ആർബിസി പോസിറ്റീവ് ആണ്: ദ്രാവകം നിറമില്ലാത്ത, ട്യൂബിൻ്റെ അടിയിൽ ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ ഒരു അവശിഷ്ടമുണ്ട്. സെറമിൽ പ്രത്യേക ആൻ്റിബോഡികൾ ഇല്ലെങ്കിൽ, ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് സിസ്റ്റത്തിൽ കോംപ്ലിമെൻ്റ് ബൈൻഡിംഗ് സംഭവിക്കുന്നില്ലെങ്കിൽ, അതായത് ആർഎസ്‌സി നെഗറ്റീവ് ആണെങ്കിൽ, ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് സിസ്റ്റത്തിൽ ചെലവഴിക്കാത്ത കോംപ്ലിമെൻ്റ് ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ സമുച്ചയവുമായി ബന്ധിപ്പിക്കുന്നു + ഇൻഡിക്കേറ്റർ സിസ്റ്റത്തിൻ്റെ ആൻ്റിബോഡികളും ഹീമോലിസിസും. സംഭവിക്കുന്നത്: ടെസ്റ്റ് ട്യൂബിൽ "ലാക്വർഡ് ബ്ലഡ്", ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ അവശിഷ്ടം നമ്പർ. ഹീമോലിസിസ് കാലതാമസത്തിൻ്റെ അളവും എറിത്രോസൈറ്റ് അവശിഷ്ടത്തിൻ്റെ സാന്നിധ്യവും അനുസരിച്ച് ഫോർ-ക്രോസ് സിസ്റ്റം ഉപയോഗിച്ച് RSC യുടെ തീവ്രത വിലയിരുത്തുന്നു. പ്രതികരണത്തിന് ഉചിതമായ നിയന്ത്രണങ്ങൾ ഉണ്ട്: സെറം നിയന്ത്രണം (ആൻ്റിജൻ ഇല്ലാതെ), ആൻ്റിജൻ നിയന്ത്രണം (സെറം ഇല്ലാതെ), കാരണം ചില സെറകൾക്കും ചില ആൻ്റിജനുകൾക്കും ആൻ്റി-കോംപ്ലിമെൻ്ററി പ്രഭാവം ഉണ്ട്. ആർഎസ്‌സി നടത്തുന്നതിന് മുമ്പ്, ടെസ്റ്റ് സെറം അല്ലെങ്കിൽ ആൻ്റിജൻ ഒഴികെയുള്ള എല്ലാ ഘടകങ്ങളും ശ്രദ്ധാപൂർവ്വം ടൈറ്ററേഷന് വിധേയമാണ്. പ്രതികരണത്തിലേക്ക് പൂരകത്തിൻ്റെ കൃത്യമായ ഡോസ് അവതരിപ്പിക്കേണ്ടത് വളരെ പ്രധാനമാണ്, കാരണം അതിൻ്റെ അഭാവം അല്ലെങ്കിൽ അധികവും തെറ്റായ ഫലങ്ങൾ. ഹീമോലിറ്റിക് സെറത്തിൻ്റെ പ്രവർത്തന ഡോസിൻ്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ പൂർണ്ണമായ പിരിച്ചുവിടൽ ഉറപ്പാക്കുന്ന ഏറ്റവും കുറഞ്ഞ തുകയാണ് കോംപ്ലിമെൻ്റ് ടൈറ്റർ. പ്രധാന പരീക്ഷണം സജ്ജീകരിക്കുന്നതിന്, സ്ഥാപിതമായ ടൈറ്ററുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ 20-25% വർദ്ധിപ്പിച്ച പൂരകത്തിൻ്റെ ഒരു ഡോസ് എടുക്കുക. ഹീമോലിറ്റിക് സെറത്തിൻ്റെ ടൈറ്റർ അതിൻ്റെ പരമാവധി നേർപ്പിക്കലാണ്, ഇത് തുല്യ അളവിലുള്ള 10% കോംപ്ലിമെൻ്റ് ലായനിയുമായി കലർത്തുമ്പോൾ, 37 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസ് താപനിലയിൽ 1 മണിക്കൂറിനുള്ളിൽ ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ അനുബന്ധ ഡോസ് പൂർണ്ണമായും ഹീമോലൈസ് ചെയ്യുന്നു. അതിൻ്റെ ടൈറ്ററിൻ്റെ 1/3 വരെ നേർപ്പിച്ച സെറം എടുക്കുന്നതാണ് പ്രധാന പരീക്ഷണം.

കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഫിക്സേഷൻ പ്രതികരണം പരമ്പരാഗതമായ ഒന്നാണ് സീറോളജിക്കൽ പ്രതികരണങ്ങൾ, പല വൈറൽ രോഗങ്ങളും നിർണ്ണയിക്കാൻ ഉപയോഗിക്കുന്നു, കൂടാതെ മറ്റ് ചില കണ്ടെത്തൽ രീതികളുടെ അടിസ്ഥാനവും ആൻറിവൈറൽ ആൻ്റിബോഡികൾ. ന്യൂട്രലൈസേഷൻ്റെ പ്രതികരണമാണെങ്കിലും, ഹീമാഗ്ലൂട്ടിനേഷൻ തടയുന്നു, പരോക്ഷ ഹേമഗ്ലൂട്ടിനേഷൻ, ലിങ്ക്ഡ് ഇമ്മ്യൂണോസോർബൻ്റ് അസ്സെസംവേദനക്ഷമതയിലെ കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഫിക്സേഷൻ റിയാക്ഷനേക്കാൾ മികച്ചത്, എന്നിരുന്നാലും, സാങ്കേതികതയുടെ ലാളിത്യം, ആൻ്റിബോഡികൾ നേരത്തേ കണ്ടെത്തൽ, അതുപോലെ തന്നെ ഹെമാഗ്ലൂട്ടിനേറ്റിംഗ് ഗുണങ്ങളില്ലാത്ത വൈറൽ ആൻ്റിജനുകളുടെ കണ്ടെത്തൽ എന്നിവ വൈറോളജിക്കൽ പഠനങ്ങളിൽ അതിൻ്റെ വ്യാപകമായ ഉപയോഗത്തെ വിശദീകരിക്കുന്നു.

ഇതിൻ്റെ ഉൽപാദനത്തിന് ആൻ്റിജനിക് മരുന്നുകളുടെ ഉയർന്ന അളവിലുള്ള ഏകാഗ്രതയും പരിശുദ്ധിയും ആവശ്യമില്ല, ഇത് മറ്റ് നിരവധി രോഗപ്രതിരോധ പ്രതിപ്രവർത്തനങ്ങൾക്ക് ആവശ്യമാണ്. കൂടാതെ, പല വൈറസുകളുടെയും കോംപ്ലിമെൻ്റ്-ഫിക്സിംഗ് ആൻ്റിജനുകളുടെ ഗ്രൂപ്പ് പ്രത്യേകത, മാസ് ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്സിൽ കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഫിക്സേഷൻ റിയാക്ഷൻ ഉപയോഗിക്കുന്നത് സാധ്യമാക്കുന്നു: ഈ പ്രതികരണം സ്ട്രെയിൻ വ്യത്യാസങ്ങൾ വെളിപ്പെടുത്തുന്നില്ല, വൈറസുകൾ തമ്മിലുള്ള ആൻ്റിജനിക് ബന്ധങ്ങൾ പഠിക്കുമ്പോൾ പ്രത്യേക മൂല്യമുണ്ട്.

രണ്ട് വ്യത്യസ്ത പ്രതികരണങ്ങൾ ഉൾക്കൊള്ളുന്ന രീതിയുടെ സത്തയെ പേര് തന്നെ പ്രതിഫലിപ്പിക്കുന്നു. ആദ്യ ഘട്ടത്തിൽ, പ്രതികരണത്തിൽ ആൻ്റിജനുകളും ആൻ്റിബോഡികളും ഉൾപ്പെടുന്നു (ഈ ഘടകങ്ങളിലൊന്ന് മുൻകൂട്ടി അറിയപ്പെടുന്നു), അതുപോലെ തന്നെ ടൈട്രേറ്റഡ് അളവിൽ പൂർത്തീകരിക്കുന്നു. ആൻ്റിജനും ആൻ്റിബോഡികളും പൊരുത്തപ്പെടുന്നുവെങ്കിൽ, അവയുടെ സങ്കീർണ്ണമായ ബൈൻഡുകൾ പൂർത്തീകരിക്കുന്നു, ഇത് ഒരു സൂചക സംവിധാനം ഉപയോഗിച്ച് രണ്ടാം ഘട്ടത്തിൽ കണ്ടെത്തുന്നു (ആടുകളുടെ ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെയും അവയ്ക്കുള്ള ആൻ്റിസെറത്തിൻ്റെയും മിശ്രിതം). ആൻ്റിജൻ്റെയും ആൻ്റിബോഡികളുടെയും പ്രതിപ്രവർത്തന സമയത്ത് പൂരകങ്ങൾ ബന്ധിപ്പിച്ചിട്ടുണ്ടെങ്കിൽ, ആടുകളുടെ ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ വിഘടനം സംഭവിക്കുന്നില്ല ( നല്ല പ്രതികരണംപൂരക ഫിക്സേഷൻ). നെഗറ്റീവ് കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഫിക്സേഷൻ പ്രതികരണത്തിൻ്റെ കാര്യത്തിൽ, അൺഫിക്സ്ഡ് കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഹീമോലിസിസിനെ പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നു, ഇത് പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ഫലങ്ങൾ വിലയിരുത്താൻ ഉപയോഗിക്കുന്നു.

കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഫിക്സേഷൻ പ്രതികരണത്തിൻ്റെ പ്രധാന ഘടകങ്ങൾ ആൻ്റിജനുകൾ (അറിയപ്പെടുന്നതോ കണ്ടെത്താവുന്നതോ ആയ), ആൻ്റിബോഡികൾ (അറിയപ്പെടുന്ന ആൻ്റിസെറ അല്ലെങ്കിൽ ടെസ്റ്റ് സെറ), കോംപ്ലിമെൻ്റ്, ഹീമോലിറ്റിക് സെറം, ആടുകളുടെ ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ എന്നിവയാണ്; ഐസോടോണിക് സോഡിയം ക്ലോറൈഡ് ലായനി (pH 7.2-7.4) അല്ലെങ്കിൽ വിവിധ ബഫർ ലായനികൾ ഒരു നേർപ്പിക്കുന്നതായി ഉപയോഗിക്കുന്നു. ആൻ്റിജനുകളും സെറയും ആൻ്റി-കോംപ്ലിമെൻ്ററി ആയിരിക്കാം, അതായത്. പൂരകത്തെ ആഗിരണം ചെയ്യാനുള്ള കഴിവ്, ഇത് ഹീമോലിസിസ് വൈകിപ്പിക്കുകയും പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ഫലത്തെ വികലമാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.

രോഗബാധിതരായ മൃഗങ്ങളുടെ അവയവങ്ങൾ, രോഗബാധിതമായ ചിക്കൻ ഭ്രൂണങ്ങളുടെ അലാൻ്റൊയിക് അല്ലെങ്കിൽ അമ്നിയോട്ടിക് ദ്രാവകം, ടിഷ്യൂ സെൽ കൾച്ചറുകളിൽ വൈറസുകൾ നട്ടുവളർത്തിയതിന് ശേഷമുള്ള കൾച്ചർ ദ്രാവകം എന്നിവയിൽ നിന്നാണ് സിഎസ്‌സിക്കുള്ള ആൻ്റിജനുകൾ തയ്യാറാക്കുന്നത്. ആൻ്റിജനിക് തയ്യാറെടുപ്പുകളിൽ എല്ലായ്പ്പോഴും മൃഗകോശങ്ങളിൽ നിന്നോ ടിഷ്യു കൾച്ചറുകളിൽ നിന്നോ ധാരാളം ബലാസ്റ്റ് പദാർത്ഥങ്ങൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, ഇത് പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ഫലങ്ങളെ വികലമാക്കുകയും ചെയ്യും.

തത്ഫലമായുണ്ടാകുന്ന വൈറൽ ആൻ്റിജനുകൾ നിർജ്ജീവമാക്കപ്പെടുന്നു, പ്രവർത്തന ഡോസ്, അതുപോലെ ആൻ്റി-കോംപ്ലിമെൻ്ററി, ഹീമോലിറ്റിക് പ്രോപ്പർട്ടികൾ നിർണ്ണയിക്കപ്പെടുന്നു. പൂരകത്തിൻ്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ ആൻ്റിജൻ ടൈട്രേറ്റ് ചെയ്യപ്പെടുന്നു.

പ്രതികരണം നടത്തുന്നതിനുള്ള രണ്ടാമത്തെ പ്രധാന ഘടകം പൂരകമാണ്. ഈ പദത്തിൻ്റെ അർത്ഥം സങ്കീർണ്ണമായ സംവിധാനംമൃഗങ്ങളുടെയും മനുഷ്യരുടെയും രക്തത്തിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന പ്രോട്ടീനുകളും ഘടകങ്ങളും. സാധാരണഗതിയിൽ, ഗിനിയ പിഗ് ബ്ലഡ് സെറം കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഫിക്സേഷൻ റിയാക്ഷനിൽ ഉപയോഗിക്കുന്നു. പൂരകത്തിൻ്റെ പ്രവർത്തനം (ടൈറ്റർ) അതിൻ്റെ ഏറ്റവും ചെറിയ തുകയാണ്, ഇതിൻ്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ ഹീമോലിസിൻ ഉപയോഗിക്കുന്ന ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റത്തിൻ്റെ പൂർണ്ണമായ ഹീമോലിസിസിന് കാരണമാകുന്നു.

വൈറസുകൾക്കുള്ള കോംപ്ലിമെൻ്റ്-ഫിക്സിംഗ് ആൻ്റിബോഡികൾ തിരിച്ചറിയാൻ, 30 മിനിറ്റ് നേരത്തേക്ക് 560C-ൽ കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഇല്ലാതാക്കാൻ സെറം നിർജ്ജീവമാക്കേണ്ടതുണ്ട്. പ്രതിരോധ കുത്തിവയ്പ് എടുത്ത മൃഗങ്ങളിൽ നിന്നുള്ള സെറ സാധാരണയായി റഫറൻസ് സെറയായി ഉപയോഗിക്കുന്നു. മാത്രമല്ല, പ്രതിരോധ കുത്തിവയ്പ്പിനായി, ടിഷ്യു മാലിന്യങ്ങളിൽ നിന്ന് നന്നായി ശുദ്ധീകരിക്കപ്പെടുന്ന വൈറൽ ആൻ്റിജനുകൾ ഉപയോഗിക്കുന്നു, അല്ലാത്തപക്ഷം ഒരു വ്യക്തമായ വ്യക്തമല്ലാത്ത പ്രതികരണം സംഭവിക്കുന്നു.

കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഫിക്സേഷൻ പ്രതികരണത്തിൻ്റെ നിർബന്ധിത ഘടകം ഹെമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റമാണ്, അതിൽ ആടുകളുടെ എറിത്രോസൈറ്റുകളും മുയലുകളെ ഹൈപ്പർ ഇമ്മ്യൂണൈസേഷൻ വഴി ലഭിക്കുന്ന ഹെമോലിറ്റിക് സെറവും ഉൾപ്പെടുന്നു.

പൂരക ഫിക്സേഷൻ പ്രതികരണം നടത്താൻ, ഇനിപ്പറയുന്ന പരിഷ്കാരങ്ങൾ ഉപയോഗിക്കുന്നു: തകാച്ചി സിസ്റ്റം മൈക്രോടിട്രേറ്ററിലെ കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഫിക്സേഷൻ പ്രതികരണത്തിൻ്റെ മൈക്രോമെത്തഡ്, ദീർഘകാല പൂരക ഫിക്സേഷൻ പ്രതികരണം, പരോക്ഷ പൂരക ഫിക്സേഷൻ പ്രതികരണം, ഒരു ജെല്ലിലെ കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഫിക്സേഷൻ പ്രതികരണം, മൈക്രോഡ്രോപ്ലെറ്റ്. കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഫിക്സേഷൻ റിയാക്ഷൻ, സോളിഡ്-ബേസ്ഡ് കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഫിക്സേഷൻ റിയാക്ഷൻ.

പൂരക ഫിക്സേഷൻ പ്രതികരണത്തിൻ്റെ സംവേദനക്ഷമത കുറവാണെങ്കിലും, ഇതിന് ഉയർന്ന പ്രത്യേകതയുണ്ട്. ഇക്കാര്യത്തിൽ, യുവ കന്നുകാലികളിൽ വൈറൽ ന്യൂമോഎൻറൈറ്റിസ് രോഗനിർണ്ണയത്തിനായി ഇത് വ്യാപകമായി ഉപയോഗിക്കുന്നു.