Coombs પ્રતિક્રિયા પ્રત્યક્ષ અને પરોક્ષ છે. નવજાત શિશુના હેમોલિટીક રોગના નિદાન માટે કોમ્બ્સ ટેસ્ટ

Coombs ટેસ્ટ એક પદ્ધતિ છે પ્રયોગશાળા સંશોધન, હેમાગ્ગ્લુટિનેશનને પ્રભાવિત કરીને બનાવવામાં આવે છે. તે ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન અને એન્ઝાઇમ તત્વો માટે એન્ટિબોડીઝની સંવેદનશીલતા, તેમજ C3 અથવા Lg સાથે કોટેડ એરિથ્રોસાઇટ્સને એકત્રિત કરવાની તેમની ક્ષમતા પર આધારિત છે.

ડાયરેક્ટ કોમ્બ્સ નિદાન

કોષોની બહાર સ્થાપિત એન્ટિબોડીઝ અથવા પૂરક ઘટકો શોધવા માટે વપરાય છે. ડાયરેક્ટ કોમ્બ્સ ટેસ્ટ નીચે પ્રમાણે કરવામાં આવે છે.

આવા નમૂનાનો ઉપયોગ

ડાયરેક્ટ કોમ્બ્સ નિદાનનો ઉપયોગ અમુક કિસ્સાઓમાં થાય છે, જેમ કે:

• ટ્રાન્સફ્યુઝન અસરો;
• સ્વયંપ્રતિરક્ષા હેમોલિસિસ;
• ઔષધીય હેમોલિટીક એનિમિયા.

પરોક્ષ કોમ્બ્સ પરીક્ષણ

આ નિદાન સીરમમાં કોશિકાઓ માટે એન્ટિબોડીઝ શોધવાનું શક્ય બનાવે છે, જે એક નિયમ તરીકે, પ્રકાર 0 ના દાતા લાલ રક્ત કોશિકાઓ સાથે ઉકાળવામાં આવે છે, અને પછી સીધો પરીક્ષણ હાથ ધરવામાં આવે છે. અરજી કરો પરોક્ષ નિદાનનીચેના કેસોમાં કોમ્બ્સ:

વિશ્લેષણ માટે કેવી રીતે તૈયારી કરવી

પરીક્ષાની તૈયારી માટે કેટલાક નિયમો છે.

1. જો દર્દી નવજાત છે, તો માતા-પિતાએ ધ્યાન રાખવું જરૂરી છે કે પરીક્ષણ નવજાત શિશુના હેમોલિટીક રોગનું નિદાન કરવામાં મદદ કરશે.
2. જો દર્દીને હેમોલિટીક એનિમિયાની શંકા હોય, તો તેને સમજાવવું જોઈએ કે વિશ્લેષણ તેને શોધવા માટે પરવાનગી આપશે કે શું તે રક્ષણાત્મક વિકૃતિઓ, દવાઓ અથવા અન્ય પરિબળોને કારણે છે.
3. Coombs પરીક્ષણ, પ્રત્યક્ષ અને પરોક્ષ, પોષણ અથવા આહાર પર કોઈ નિયંત્રણો મૂકતું નથી.
4. દર્દીને જાણ કરવી જરૂરી છે કે પરીક્ષામાં નસમાંથી લોહી લેવાની જરૂર પડશે, અને વેનિપંક્ચર ક્યારે કરવામાં આવશે તે પણ તેને બરાબર જણાવો.
5. તમને શક્યતા વિશે પણ ચેતવણી આપવી જોઈએ અગવડતાહાથ પર પાટો લાગુ કરવાના સમયગાળા દરમિયાન અને પ્રક્રિયા પોતે.
6. નમૂનાના પરિણામને અસર કરી શકે તેવી દવાઓ બંધ કરવી જોઈએ.

આ દવાઓમાં શામેલ છે:

• "સ્ટ્રેપ્ટોમાસીન";
• "મેથિલ્ડોપા";
• "પ્રોકેનામાઇડ";
• sulfonamides;
• "મેલફાલન";
• "ક્વિનીડાઇન";
• "રિફામ્પિન";
• "આઇસોનિયાઝિડ";
• સેફાલોસ્પોરીન્સ;
• "હાઇડ્રેલાઝિન";
• "ક્લોરપ્રોમેઝિન";
• "લેવોડોપા";
• "ટેટ્રાસાયક્લાઇન";
• "ડિફેનિલહાઇડેન્ટોઇન";
• "ઇથોસુક્સિમાઇડ";
• "પેનિસિલિન";
• મેફેનામિક એસિડ.

બ્લડ સેમ્પલિંગ સવારે ખાલી પેટ પર કરવામાં આવે છે.

ઇવેન્ટ કેવી રીતે યોજાય છે

Coombs પરીક્ષણ નીચેના ક્રમમાં હાથ ધરવામાં આવે છે:

1. પુખ્ત દર્દીમાં ડાયગ્નોસ્ટિક્સ કરતી વખતે, વેનિપંક્ચર પછી, રક્તને EDTA (ઇથિલેનેડિયામિનેટેટ્રાસેટેટ) સાથેની નળીઓમાં લેવામાં આવે છે.
2. નવજાતનું લોહી નાળમાંથી EDTA ધરાવતા બીકરમાં ખેંચવામાં આવે છે.
3. રક્તસ્રાવ બંધ ન થાય ત્યાં સુધી પંચર વિસ્તારને કપાસના સ્વેબથી દબાવવામાં આવે છે.
4. જો વેનિપંક્ચર સાઇટ પર ઉઝરડો દેખાય છે, તો ગરમ કોમ્પ્રેસ સૂચવવામાં આવે છે.
5. રક્ત એકત્ર કર્યા પછી, દર્દીને દવાઓ લેવા પર પાછા ફરવાની છૂટ છે.
6. નવજાત શિશુના માતાપિતાને જાણ કરવી જરૂરી છે કે એનિમિયાની ગતિશીલતાને મોનિટર કરવા માટે ગૌણ વિશ્લેષણની જરૂર પડી શકે છે.

Coombs ટેસ્ટના ફાયદા

આવા સંશોધનના કેટલાક ફાયદા છે, એટલે કે:

વિશ્લેષણના ગેરફાયદા

પોઝિટિવ કોમ્બ્સ ટેસ્ટ એ એક જગ્યાએ શ્રમ-સઘન પરીક્ષા પદ્ધતિ છે, જેને અમલીકરણની લાક્ષણિક ચોકસાઈની જરૂર છે. તેનો ઉપયોગ કરતી વખતે, તમને કેટલીક મુશ્કેલીઓનો સામનો કરવો પડી શકે છે, ખાસ કરીને નબળા હકારાત્મક અસરોના અર્થઘટનથી સંબંધિત.

તે સ્થાપિત કરવામાં આવ્યું છે કે Coombs પરીક્ષણોના ઉત્પાદન દરમિયાન ખોટી નકારાત્મક અથવા નબળી હકારાત્મક પ્રતિક્રિયાઓ અસંતોષકારક રીતે સક્રિય કોષ ધોવાનું પરિણામ હોઈ શકે છે, સીરમ અવશેષો દ્વારા એન્ટિગ્લોબ્યુલિન રીએજન્ટને નબળું પાડવું, તેમજ બિન-ચરબી સપાટીઓ સાથે જોડાણ, જેના પર એન્ટિગ્લોબ્યુલિન હોઈ શકે છે. નિશ્ચિત થવું, ત્યાં તેની અસરકારકતા ગુમાવવી.

કોમ્બ્સ ટેસ્ટમાં બીજી ખામી છે - એન્ટિગ્લોબ્યુલિન રીએજન્ટની ઓછી સ્થિરતા, જેનું સંપાદન અને સંગ્રહ વ્યક્તિગત લાક્ષણિકતાઓ, જે તે જ રીતે હિમેગ્ગ્લુટિનેશન પર એન્ટિગ્લોબ્યુલિન સીરમની અસરનું આંકડાકીય રીતે મૂલ્યાંકન કરવાનું મુશ્કેલ બનાવે છે.

પરીક્ષા દરમિયાન શોધી શકાય તેવા રોગો

કોમ્બ્સ ડાયગ્નોસ્ટિક્સ ચોક્કસ પ્રકારના રોગોને શોધવાનું શક્ય બનાવે છે, જેમ કે:

• નવજાત શિશુની હેમોલિટીક અસ્વસ્થતા;
• વિવિધ ટ્રાન્સફ્યુઝન પ્રતિક્રિયાઓ;
• સ્વયંપ્રતિરક્ષા હેમોલિસિસ;
• ડ્રગ-પ્રેરિત હેમોલિટીક એનિમિયા.

આજે, પુખ્ત વયના લોકો અને નવજાત શિશુઓ બંને માટે કોમ્બ્સ પરીક્ષણ એકદમ લોકપ્રિય રક્ત પરીક્ષણ પદ્ધતિ માનવામાં આવે છે. તે ઘણા વિવિધ રોગોને ઓળખવાનું શક્ય બનાવે છે.

એન્ટિબોડીઝ, એરિથ્રોસાઇટ્સની સપાટી પર સ્થિત છે, તે સ્થિર અથવા મુક્ત સ્થિતિમાં હોઈ શકે છે રક્ત પ્લાઝ્મા. એન્ટિબોડીઝની સ્થિતિ પર આધાર રાખીને, પ્રત્યક્ષ અથવા પરોક્ષ કોમ્બ્સ પ્રતિક્રિયા કરવામાં આવે છે. જો લાલ રક્ત કોશિકાઓની સપાટી પર એન્ટિબોડીઝ નિશ્ચિત છે એવું માનવાનું કારણ હોય, તો ડાયરેક્ટ કોમ્બ્સ ટેસ્ટ કરવામાં આવે છે. આ કિસ્સામાં, પરીક્ષણ એક તબક્કામાં થાય છે - ઉમેરી રહ્યા છે એન્ટિગ્લોબ્યુલિન સીરમ. જો લાલ રક્ત કોશિકાઓની સપાટી પર અપૂર્ણ એન્ટિબોડીઝ હાજર હોય, એકત્રીકરણલાલ રક્ત કોશિકાઓ

પરોક્ષ પ્રતિક્રિયા

પરોક્ષ કોમ્બ્સ પ્રતિક્રિયા 2 તબક્કામાં થાય છે. પ્રથમ તમારે કૃત્રિમ રીતે અમલ કરવાની જરૂર છે સંવેદનાલાલ રક્ત કોશિકાઓ આ કરવા માટે, લાલ રક્ત કોશિકાઓ અને રક્ત સીરમનું પરીક્ષણ કરવામાં આવે છે, જેના કારણે એન્ટિબોડીઝ લાલ રક્ત કોશિકાઓની સપાટી પર સ્થિર થાય છે. જે પછી કોમ્બ્સ ટેસ્ટનો બીજો તબક્કો હાથ ધરવામાં આવે છે - એન્ટિગ્લોબ્યુલિન સીરમનો ઉમેરો.

વરસાદની પ્રતિક્રિયા - આરપી (લેટિન પ્રેસિપિલોથી અવક્ષેપ સુધી) એ દ્રાવ્ય પરમાણુ એન્ટિજેનના સંકુલની રચના અને અવક્ષેપ છે જેમાં એન્ટિબોડીઝ સાથે વાદળછાયું કહેવાય છે. અવક્ષેપ. તે સમાન જથ્થામાં એન્ટિજેન્સ અને એન્ટિબોડીઝના મિશ્રણ દ્વારા રચાય છે; તેમાંથી એકની વધુ માત્રા રોગપ્રતિકારક સંકુલની રચનાનું સ્તર ઘટાડે છે. વરસાદની પ્રતિક્રિયા ટેસ્ટ ટ્યુબમાં (રિંગ રેસિપિટેશન રિએક્શન), જેલ્સ, પોષક માધ્યમો વગેરેમાં કરવામાં આવે છે. અર્ધ-પ્રવાહી અગર અથવા એગેરોઝ જેલમાં વરસાદની પ્રતિક્રિયાની વિવિધતા, ડબલ ઇમ્યુનોડિફ્યુઝન દ્વારા Ouchterlony, radiap immunodiffusion, immunoepectrophoresisઅને વગેરે

રિંગ વરસાદની પ્રતિક્રિયા. પ્રતિક્રિયા સાંકડી વરસાદની નળીઓમાં કરવામાં આવે છે: દ્રાવ્ય એન્ટિજેન રોગપ્રતિકારક સીરમ પર સ્તરવાળી હોય છે. એન્ટિજેન અને એન્ટિબોડીઝના શ્રેષ્ઠ ગુણોત્તર સાથે, આ બે ઉકેલોની સરહદ પર એક અપારદર્શક સ્તર રચાય છે. અવક્ષેપ રિંગ. જો બાફેલી અને ફિલ્ટર કરેલ પેશીના અર્કનો ઉપયોગ પ્રતિક્રિયામાં એન્ટિજેન્સ તરીકે કરવામાં આવે છે, તો આ પ્રતિક્રિયાને પ્રથમ થર્મોપ્રેસીપીટેશન પ્રતિક્રિયા કહેવામાં આવે છે (જે પ્રતિક્રિયામાં એન્થ્રેક્સ હેપ્ટન જોવા મળે છે).
Ouchterlony ડબલ ઇમ્યુનોડિફ્યુઝન પ્રતિક્રિયા. પ્રતિક્રિયા સુયોજિત કરવા માટે, કાચની પ્લેટ પર ઓગાળેલા અગર જેલનો પાતળો પડ રેડવામાં આવે છે અને સખત થયા પછી, તેમાં કૂવાઓ કાપવામાં આવે છે. એન્ટિજેન્સ અને રોગપ્રતિકારક સેરા જેલના કુવાઓમાં અલગથી મૂકવામાં આવે છે, જે એકબીજા તરફ ફેલાય છે. મીટિંગ પોઇન્ટ પર, સમાન પ્રમાણમાં, તેઓ સફેદ પટ્ટાના રૂપમાં અવક્ષેપ બનાવે છે. મલ્ટિકોમ્પોનન્ટ સિસ્ટમ્સમાં, એન્ટિજેન્સ અને એન્ટિબોડીઝવાળા કુવાઓ વચ્ચે અવક્ષેપની ઘણી રેખાઓ દેખાય છે; સમાન AGs માં, અવક્ષેપ રેખાઓ મર્જ થાય છે; બિન-સમાન AG માં તેઓ છેદે છે.
રેડિયલ ઇમ્યુનોડિફ્યુઝન પ્રતિક્રિયા.પીગળેલા અગર જેલ સાથે ઇમ્યુન સીરમ કાચ પર સમાનરૂપે રેડવામાં આવે છે. જેલમાં નક્કરતા પછી, કુવાઓ બનાવવામાં આવે છે જેમાં એન્ટિજેનને વિવિધ ડિલ્યુશન્સમાં મૂકવામાં આવે છે. એન્ટિજેન, જેલમાં વિખરાઈને, એન્ટિબોડીઝ સાથે કુવાઓની આસપાસ રિંગ રેસીપીટેશન ઝોન બનાવે છે. વરસાદની રીંગનો વ્યાસ એન્ટિજેન સાંદ્રતાના પ્રમાણસર છે. પ્રતિક્રિયાનો ઉપયોગ રક્ત સીરમમાં ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન નક્કી કરવા માટે થાય છે વિવિધ વર્ગો, પૂરક સિસ્ટમના ઘટકો, વગેરે.
ઇમ્યુનોઈલેક્ટ્રોફોરેસીસ- ઇલેક્ટ્રોફોરેસિસ અને ઇમ્યુનોપ્રિસિપિટેશનની પદ્ધતિનું સંયોજન: એન્ટિજેન્સનું મિશ્રણ જેલના કૂવાઓમાં દાખલ કરવામાં આવે છે અને ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસનો ઉપયોગ કરીને જેલમાં અલગ કરવામાં આવે છે, પછી ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ ઝોનની સમાંતર ખાંચમાં ઇમ્યુનોસેરમ ઉમેરવામાં આવે છે, જેમાંથી એન્ટિબોડીઝ ફેલાય છે. જેલ અને એન્ટિજેન સાથે "મીટિંગ" ના સ્થળે વરસાદની રેખાઓ બનાવે છે.
ફ્લોક્યુલેશન પ્રતિક્રિયા(રેમન મુજબ) (લેટિન f1oecus - વૂલ ફ્લેક્સમાંથી) - પ્રતિક્રિયા ઝેર - એન્ટિટોક્સિન અથવા ટોક્સોઇડ - એન્ટિટોક્સિન દરમિયાન ટેસ્ટ ટ્યુબમાં અસ્પષ્ટતા અથવા ફ્લોક્યુલન્ટ માસ (ઇમ્યુનોપ્રિસિપિટેશન) નો દેખાવ. તેનો ઉપયોગ એન્ટિટોક્સિક સીરમ અથવા ટોક્સોઇડની પ્રવૃત્તિ નક્કી કરવા માટે થાય છે.

HLA ટાઇપિંગ- માનવ મુખ્ય હિસ્ટોકોમ્પેટિબિલિટી કોમ્પ્લેક્સનો અભ્યાસ - HLA સંકુલ. આ રચનામાં રંગસૂત્ર 6 પર જનીનોનો વિસ્તાર શામેલ છે જે વિવિધ રોગપ્રતિકારક પ્રતિક્રિયાઓમાં સામેલ HLA એન્ટિજેન્સને એન્કોડ કરે છે.

માટે કાર્યો HLA ટાઇપિંગખૂબ જ અલગ હોઈ શકે છે - જૈવિક ઓળખ (HLA પ્રકાર પેરેંટલ જનીનો સાથે વારસામાં મળે છે), વલણનું નિર્ધારણ વિવિધ રોગો, અંગ પ્રત્યારોપણ માટે દાતાઓની પસંદગી - આમાં દાતા અને પ્રાપ્તકર્તા પેશીઓના HLA ટાઇપિંગના પરિણામોની સરખામણીનો સમાવેશ થાય છે. એચએલએ ટાઈપિંગનો ઉપયોગ કરીને, વંધ્યત્વના કેસોનું નિદાન કરવા માટે હિસ્ટોકોમ્પેટિબિલિટી એન્ટિજેન્સની દ્રષ્ટિએ પતિ-પત્ની કેટલા સમાન અથવા અલગ છે તે નિર્ધારિત કરવામાં આવે છે.

HLA ટાઈપિંગ સૂચવે છે એચએલએ પોલીમોર્ફિઝમ વિશ્લેષણઅને તે બે પદ્ધતિઓ દ્વારા હાથ ધરવામાં આવે છે - સેરોલોજીકલ અને મોલેક્યુલર આનુવંશિક. એચએલએ ટાઇપિંગની ક્લાસિક સેરોલોજીકલ પદ્ધતિ માઇક્રોલિમ્ફોસાયટોટોક્સિક પરીક્ષણ પર આધારિત છે, અને મોલેક્યુલર પદ્ધતિ પીસીઆર (પોલિમરેઝ ચેઇન રિએક્શન) નો ઉપયોગ કરે છે.

સેરોલોજીકલ HLA ટાઇપિંગઅલગ કોષોની વસ્તી પર હાથ ધરવામાં આવે છે. મુખ્ય હિસ્ટોકોમ્પેટિબિલિટી જટિલ એન્ટિજેન્સ મુખ્યત્વે લિમ્ફોસાઇટ્સ દ્વારા વહન કરવામાં આવે છે. તેથી, T લિમ્ફોસાઇટ્સનું સસ્પેન્શન વર્ગ I એન્ટિજેન્સના મુખ્ય વાહક તરીકે અને B લિમ્ફોસાઇટ્સનું સસ્પેન્શન HLA વર્ગ II એન્ટિજેન્સ નક્કી કરવા માટે વપરાય છે. આખા રક્તમાંથી જરૂરી કોષોની વસ્તીને અલગ કરવા માટે, કાં તો સેન્ટ્રીફ્યુગેશન અથવા ઇમ્યુનોમેગ્નેટિક વિભાજનનો ઉપયોગ થાય છે. એવું માનવામાં આવે છે કે પ્રથમ પદ્ધતિ ખોટા-સકારાત્મક ડેટા તરફ દોરી શકે છે, કારણ કે આના પરિણામે કેટલાક કોષો મૃત્યુ પામે છે. બીજી પદ્ધતિને વધુ ચોક્કસ તરીકે ઓળખવામાં આવે છે - 95% થી વધુ કોષો સધ્ધર રહે છે.

પરંતુ લિમ્ફોસાયટોટોક્સિક પરીક્ષણ કરવા માટેનો આધાર HLA ટાઇપિંગએચએલએ વર્ગ I અને II એન્ટિજેન્સના વિવિધ એલેલિક વેરિઅન્ટ્સ માટે એન્ટિબોડીઝ ધરાવતું ચોક્કસ સીરમ છે. સીરોલોજિકલ ટેસ્ટ એ તપાસ કરીને HLA પ્રકાર નક્કી કરી શકે છે કે કઈ સેરા લિમ્ફોસાઇટ્સ સાથે પ્રતિક્રિયા આપે છે અને કઈ નથી.

જો કોષો અને સીરમ વચ્ચે પ્રતિક્રિયા થાય છે, તો પરિણામ કોષની સપાટી પર એન્ટિજેન-એન્ટિબોડી સંકુલની રચના છે. પૂરક ધરાવતું સોલ્યુશન ઉમેર્યા પછી, સેલ લિસિસ અને મૃત્યુ થાય છે. સકારાત્મક (લાલ ફ્લોરોસેન્સ) અને નકારાત્મક (ગ્રીન ફ્લોરોસેન્સ) પ્રતિક્રિયાઓનું મૂલ્યાંકન કરવા અથવા મૃત કોશિકાઓના ન્યુક્લીને ડાઘ કરવા માટે ફેઝ-કોન્ટ્રાસ્ટ માઇક્રોસ્કોપીનું મૂલ્યાંકન કરવા માટે સેરોલોજીકલ HLA ટાઇપિંગ ટેસ્ટનું મૂલ્યાંકન ફ્લોરોસેન્સ માઇક્રોસ્કોપીનો ઉપયોગ કરીને કરવામાં આવે છે. HLA ટાઈપિંગનું પરિણામ પ્રતિસાદિત સેરા અને એન્ટિજેન્સના ક્રોસ-રિએક્ટિંગ જૂથોની વિશિષ્ટતા અને સાયટોટોક્સિસિટી પ્રતિક્રિયાની તીવ્રતાને ધ્યાનમાં લઈને મેળવવામાં આવે છે.

સેરોલોજીકલના ગેરફાયદા HLA ટાઇપિંગક્રોસ-પ્રતિક્રિયાઓની હાજરી, નબળી એન્ટિબોડી એફિનિટી અથવા HLA એન્ટિજેન્સની ઓછી અભિવ્યક્તિ, સંખ્યાબંધ HLA જનીનોમાં પ્રોટીન ઉત્પાદનોની ગેરહાજરી છે.

વધુ આધુનિક, મોલેક્યુલર પદ્ધતિઓ HLA ટાઇપિંગતેઓ પહેલેથી જ પ્રમાણિત કૃત્રિમ નમૂનાઓનો ઉપયોગ કરે છે જે લ્યુકોસાઇટ્સની સપાટી પર એન્ટિજેન્સ સાથે નહીં, પરંતુ ડીએનએ સાથે પ્રતિક્રિયા આપે છે અને સીધા જ સૂચવે છે કે નમૂનામાં કયા એન્ટિજેન્સ હાજર છે. પરમાણુ પદ્ધતિઓને જીવંત લ્યુકોસાઇટ્સની જરૂર નથી; કોઈપણ માનવ કોષઅભ્યાસ કરી શકાય છે, અને લોહીના થોડા માઇક્રોલિટર કામ કરવા માટે પૂરતા છે, અથવા તમે તમારી જાતને મૌખિક શ્વૈષ્મકળામાંથી સ્ક્રેપિંગ સુધી મર્યાદિત કરી શકો છો.

મોલેક્યુલર આનુવંશિક HLA ટાઇપિંગપીસીઆર પદ્ધતિનો ઉપયોગ કરે છે, જેનું પ્રથમ પગલું શુદ્ધ જીનોમિક ડીએનએ (સંપૂર્ણ રક્ત, લ્યુકોસાઇટ સસ્પેન્શન, પેશીઓમાંથી) મેળવવાનું છે.

પછી ડીએનએ નમૂનાની નકલ કરવામાં આવે છે - ચોક્કસ એચએલએ લોકસ માટે વિશિષ્ટ પ્રાઇમર્સ (ટૂંકા સિંગલ-સ્ટ્રેન્ડેડ ડીએનએ) નો ઉપયોગ કરીને વિટ્રોમાં વિસ્તૃત કરવામાં આવે છે. દરેક પ્રાઈમર જોડીના છેડા ચોક્કસ એલીલને અનુરૂપ અનન્ય ક્રમ માટે સખત રીતે પૂરક હોવા જોઈએ, અન્યથા એમ્પ્લીફિકેશન થશે નહીં.

પીસીઆર પછી, પુનરાવર્તિત નકલ દરમિયાન, મોટી સંખ્યામાં ડીએનએ ટુકડાઓ પ્રાપ્ત થાય છે, જે દૃષ્ટિની આકારણી કરી શકાય છે. આ કરવા માટે, પ્રતિક્રિયા મિશ્રણો વિદ્યુત વિચ્છેદન-વિશ્લેષણ અથવા વર્ણસંકરને આધિન છે, અને ચોક્કસ એમ્પ્લીફિકેશન થયું છે કે કેમ તે પ્રોગ્રામ અથવા ટેબલનો ઉપયોગ કરીને નક્કી કરવામાં આવે છે. એચએલએ ટાઈપિંગનું પરિણામ જનીન અને એલેલિક સ્તર પર વ્યાપક અહેવાલના સ્વરૂપમાં રજૂ કરવામાં આવે છે. વપરાયેલ નમૂનાઓના માનકીકરણને કારણે, મોલેક્યુલર HLA ટાઇપિંગવધુ ચોક્કસપણે સેરોલોજીકલ. વધુમાં, તે વધુ માહિતી (વધુ નવા ડીએનએ એલીલ્સ) અને વધુ પ્રદાન કરે છે ઉચ્ચ સ્તરતેની વિગતો, કારણ કે તે માત્ર એન્ટિજેન્સ જ નહીં, પણ એલીલ્સને પણ ઓળખવાનું શક્ય બનાવે છે, જે કોષ પર કયો એન્ટિજેન હાજર છે તે નિર્ધારિત કરે છે.

રોગપ્રતિકારક લિસિસ પ્રતિક્રિયા.પ્રતિક્રિયા એરિથ્રોસાઇટ્સ અને બેક્ટેરિયા સહિત કોશિકાઓ સાથે રોગપ્રતિકારક સંકુલ બનાવવાની ચોક્કસ એન્ટિબોડીઝની ક્ષમતા પર આધારિત છે, જે ક્લાસિકલ પાથવે અને સેલ લિસિસ સાથે પૂરક સિસ્ટમના સક્રિયકરણ તરફ દોરી જાય છે. રોગપ્રતિકારક લિસિસ પ્રતિક્રિયાઓમાંથી, હેમોલિસિસ પ્રતિક્રિયાનો મોટાભાગે ઉપયોગ થાય છે અને બેક્ટેરિઓલિસિસ પ્રતિક્રિયાનો ભાગ્યે જ ઉપયોગ થાય છે (મુખ્યત્વે કોલેરા અને કોલેરા જેવા વાઇબ્રિઓસના તફાવતમાં).

હેમોલિસિસ પ્રતિક્રિયા.પૂરકની હાજરીમાં એન્ટિબોડીઝ સાથેની પ્રતિક્રિયાના પ્રભાવ હેઠળ, લાલ રક્ત કોશિકાઓનું વાદળછાયું સસ્પેન્શન હિમોગ્લોબિનના પ્રકાશનને કારણે તેજસ્વી લાલ પારદર્શક પ્રવાહી - "રોગાન રક્ત" માં ફેરવાય છે. ડાયગ્નોસ્ટિક કોમ્પ્લિમેન્ટ ફિક્સેશન રિએક્શન (FFR) સેટ કરતી વખતે, હેમોલિસિસ રિએક્શનનો ઉપયોગ સૂચક તરીકે થાય છે: ફ્રી કોમ્પ્લિમેન્ટની હાજરી અથવા ગેરહાજરી (ફિક્સેશન) ચકાસવા માટે.

જેલમાં સ્થાનિક હેમોલિસિસ પ્રતિક્રિયા(એર્ને પ્રતિક્રિયા) એ હેમોલિસિસ પ્રતિક્રિયાના પ્રકારોમાંનું એક છે. તે તમને એન્ટિબોડી બનાવતા કોષોની સંખ્યા નક્કી કરવા દે છે. એન્ટિબોડીઝ સ્ત્રાવતા કોષોની સંખ્યા - હેમોલિસીન - એરીથ્રોસાઇટ્સ ધરાવતા અગર જેલમાં દેખાય છે તે હેમોલિસીસ તકતીઓની સંખ્યા દ્વારા નક્કી કરવામાં આવે છે, જે લિમ્ફોઇડ પેશીઓના કોષોનું સસ્પેન્શન અભ્યાસ કરવામાં આવે છે અને પૂરક છે.

ઇમ્યુનોફ્લોરોસન્ટ પદ્ધતિ

(RIF, ઇમ્યુનોફ્લોરોસેન્સ પ્રતિક્રિયા) એ ફ્લોરોક્રોમ સાથે સંયોજિત Abs (Ags) નો ઉપયોગ કરીને ચોક્કસ Ags (Abs) ને શોધવા માટેની એક પદ્ધતિ છે. તે ઉચ્ચ સંવેદનશીલતા અને વિશિષ્ટતા ધરાવે છે. ચેપના સ્પષ્ટ નિદાન માટે વપરાય છે. રોગો (સંશોધન સામગ્રીમાં પેથોજેનની ઓળખ), તેમજ એબી અને સપાટી રીસેપ્ટર્સ અને લ્યુકોસાઈટ્સ (ઇમ્યુનોફેનોટાઇપિંગ) અને અન્ય કોષોના માર્કર્સના નિર્ધારણ માટે. ડાયરેક્ટ આઇ.એમ.પેથોલોજીકલ સામગ્રી અથવા માઇક્રોબાયલ પોપડામાંથી પેશીઓના એક વિભાગ અથવા સ્મીયર પર પ્રક્રિયા કરવામાં આવે છે જેમાં ફ્લોરોક્રોમ સાથે સંયોજિત ચોક્કસ એબ્સ હોય છે; તૈયારીને અનબાઉન્ડ એબ્સથી મુક્ત કરવા માટે ધોવાઇ જાય છે અને ફ્લોરોસેન્સ માઇક્રોસ્કોપ હેઠળ તપાસવામાં આવે છે. સકારાત્મક કેસોમાં, પદાર્થની પરિઘની આસપાસ એક ઝગઝગતું રોગપ્રતિકારક સંકુલ દેખાય છે. બિન-વિશિષ્ટ લ્યુમિનેસેન્સને બાકાત રાખવા માટે નિયંત્રણ જરૂરી છે. મુ પરોક્ષ તેમને.પ્રથમ તબક્કે, પેશી વિભાગ અથવા સમીયરને બિન-ફ્લોરોસન્ટ વિશિષ્ટ એજન્ટ સાથે સારવાર આપવામાં આવે છે, બીજા તબક્કે - પ્રથમ તબક્કે ઉપયોગમાં લેવાતા પ્રાણીના -ગ્લોબ્યુલિન સામે લ્યુમિનેસન્ટ એજન્ટ સાથે. સકારાત્મક કિસ્સામાં, એક તેજસ્વી સંકુલ રચાય છે, જેમાં Ar, At to it અને At સામે At (સેન્ડવીચ પદ્ધતિ) નો સમાવેશ થાય છે. ફ્લોરોસન્ટ માઈક્રોસ્કોપ ઉપરાંત, કોષોને ફેનોટાઈપ કરતી વખતે RIF ધ્યાનમાં લેવામાં આવે છે. લેસર સેલ સોર્ટર .

ફ્લો સાયટોમેટ્રી- કોષ, તેના ઓર્ગેનેલ્સ અને તેમાં થતી પ્રક્રિયાઓના પરિમાણોના ઓપ્ટિકલ માપનની પદ્ધતિ.

આ તકનીકમાં લેસર બીમમાંથી પ્રકાશના વિખેરાઈને શોધવાનો સમાવેશ થાય છે કારણ કે કોષ પ્રવાહીના પ્રવાહમાં તેમાંથી પસાર થાય છે, અને પ્રકાશ વિખેરવાની ડિગ્રી વ્યક્તિને કોષના કદ અને બંધારણનો ખ્યાલ મેળવવા માટે પરવાનગી આપે છે. વધુમાં, વિશ્લેષણ રાસાયણિક સંયોજનોના ફ્લોરોસેન્સના સ્તરને ધ્યાનમાં લે છે જે કોષનો ભાગ છે (ઓટોફ્લોરેસેન્સ) અથવા ફ્લો સાયટોમેટ્રી પહેલાં નમૂનામાં ઉમેરવામાં આવે છે.

સેલ સસ્પેન્શન, ફ્લોરોસન્ટ મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડીઝ અથવા ફ્લોરોસન્ટ ડાયઝ સાથે પ્રી-લેબલ, ફ્લો સેલમાંથી પસાર થતા પ્રવાહી પ્રવાહમાં પ્રવેશ કરે છે. શરતો એવી રીતે પસંદ કરવામાં આવે છે કે કહેવાતા કારણે કોષો એક પછી એક લાઇન કરે છે. જેટમાં જેટનું હાઇડ્રોડાયનેમિક ફોકસિંગ. આ ક્ષણે કોષ લેસર બીમને પાર કરે છે, ડિટેક્ટર રેકોર્ડ કરે છે:

નાના ખૂણા પર પ્રકાશ વિખેરવું (1° થી 10° સુધી) ( આ લાક્ષણિકતાકોષનું કદ નક્કી કરવા માટે વપરાય છે).

90°ના ખૂણા પર પ્રકાશ સ્કેટરિંગ (અમને ન્યુક્લિયસ/સાયટોપ્લાઝમ રેશિયો, તેમજ કોષોની વિજાતીયતા અને ગ્રેન્યુલારિટીનો નિર્ણય કરવાની મંજૂરી આપે છે).

ઘણી ફ્લોરોસેન્સ ચેનલો દ્વારા ફ્લોરોસેન્સની તીવ્રતા (2 થી 18-20 સુધી) - તમને સેલ સસ્પેન્શનની પેટા-વસ્તી રચના, વગેરે નક્કી કરવાની મંજૂરી આપે છે.

કોમ્બ્સ ટેસ્ટ

ડાયરેક્ટ કોમ્બ્સ ટેસ્ટ એ એન્ટિગ્લોબ્યુલિન ટેસ્ટ છે (જેલમાં એગ્ગ્લુટિનેશન જે સંપૂર્ણ દ્વિભાષી એન્ટિબોડીઝને શોધવા માટે પરવાનગી આપે છે), જે લાલ રક્ત કોશિકાઓની સપાટી પરના IgG વર્ગના એન્ટિબોડીઝ અને પૂરકના C3 ઘટકને શોધી કાઢે છે. સામાન્ય રીતે, ડાયરેક્ટ કોમ્બ્સ ટેસ્ટ દ્વારા શોધાયેલ એન્ટિબોડીઝ વ્યાપક વિશિષ્ટતા ધરાવે છે જે સારી રીતે સ્થાપિત એન્ટિજેન સાથે સંકળાયેલ નથી. સકારાત્મક ડાયરેક્ટ કોમ્બ્સ ટેસ્ટ સ્પષ્ટપણે સૂચવે છે કે દર્દીને હેમોલિટીક એનિમિયા છે, જો કે હકારાત્મક ડાયરેક્ટ એન્ટિગ્લોબ્યુલિન ટેસ્ટ ધરાવતા તમામ દર્દીઓ આ રોગથી પીડાતા નથી. આશરે 10% દર્દીઓમાં, લાલ રક્ત કોશિકા પટલ પર એન્ટિબોડીઝ અથવા પૂરક ઘટકો સીધા કોમ્બ્સ પરીક્ષણ દ્વારા નક્કી કરી શકાતા નથી (પરીક્ષણ નકારાત્મક છે), પરંતુ, તેમ છતાં, તેઓ સ્વયંપ્રતિરક્ષા હેમોલિટીક એનિમિયાથી પીડાય છે. આવા કિસ્સાઓમાં એન્ટિબોડીઝની વિશિષ્ટતાને સ્પષ્ટ કરવા માટે, તેમના ઉત્સર્જન સાથેના પરીક્ષણોનો ઉપયોગ કરવામાં આવે છે. ડાયરેક્ટ કોમ્બ્સ ટેસ્ટ, માત્ર પૂરક માટે સકારાત્મક, સામાન્ય રીતે IgM પ્રકારના કોલ્ડ એન્ટિબોડીઝનો સંદર્ભ આપે છે. આ બાબતે આઇજીએમ એન્ટિબોડીઝજ્યારે લાલ રક્ત કોશિકાઓ પર હાજર નથી મૂળભૂત તાપમાનશરીરો. જો કે, આઇજીએમ એન્ટિબોડીઝ સક્રિયપણે પૂરકને ઠીક કરે છે અને લાલ રક્ત કોશિકાઓ પર પૂરક રહે છે તે હકીકતને કારણે, સ્વયંપ્રતિરક્ષા હેમોલિટીક એનિમિયા (કોલ્ડ એગ્યુટીનિન રોગ) ના આ સ્વરૂપ સાથે, કોમ્બ્સ ટેસ્ટ માત્ર પૂરક માટે હકારાત્મક રહેશે.

ગરમ એન્ટિબોડીઝના કારણે ઓટોઇમ્યુન હેમોલિટીક એનિમિયા, ઓટોઇમ્યુન ડ્રગ-પ્રેરિત એનિમિયામાં ડાયરેક્ટ કોમ્બ્સ ટેસ્ટ સકારાત્મક છે (જ્યારે મેથાઇલડોપા લેતી વખતે, 20% દર્દીઓ સુધી હકારાત્મક પ્રતિક્રિયા), હેમોલિટીક એનિમિયાનો ડ્રગ-શોષણ પ્રકાર, ઇમ્યુનોકોમ્પ્લેક્સ પ્રકારનો હેમોલિટીક એનિમિયા (પરીક્ષણ ફક્ત C3 માટે હકારાત્મક છે), ઠંડા એન્ટિબોડીઝના કારણે સ્વયંપ્રતિરક્ષા હેમોલિટીક એનિમિયા સાથે - કોલ્ડ એગ્ગ્લુટીનિન રોગ (પરીક્ષણ ફક્ત C3 માટે હકારાત્મક છે). પેરોક્સિસ્મલ કોલ્ડ હિમોગ્લોબિન્યુરિયામાં, ડાયરેક્ટ કોમ્બ્સ ટેસ્ટ નકારાત્મક છે.
IN તીવ્ર સમયગાળોરોગો, લાલ રક્ત કોશિકાઓના વિનાશને કારણે, જેના પર હેમોલિટીક કટોકટી દરમિયાન, તેમજ એન્ટિબોડીઝની અપૂરતી સંખ્યા સાથે, મોટી સંખ્યામાં એન્ટિબોડીઝ રેકોર્ડ કરવામાં આવી હતી. ક્રોનિક કોર્સરોગ, નકારાત્મક ડાયરેક્ટ કોમ્બ્સ પરીક્ષણ અવલોકન કરી શકાય છે.

:

• પ્રયોગશાળા રક્ત પરીક્ષણોની ગુણવત્તાને સુનિશ્ચિત કરવા માટેની એક મહત્વપૂર્ણ સ્થિતિ એ છે કે સામગ્રીને ખાલી પેટ પર, સવારે (12:00 પહેલાં).
• પરીક્ષણના 12 કલાક પહેલા, તમારે આલ્કોહોલ પીવાનું, ધૂમ્રપાન કરવાનું, ખાવાનું અને શારીરિક પ્રવૃત્તિને મર્યાદિત કરવાનું ટાળવું જોઈએ.
• રક્ત પરીક્ષણની સવારે, તમે પાણી પી શકો છો.
• દવાઓ લેવાનું ટાળો; જો દવા લેવાનું બંધ કરવું શક્ય ન હોય, તો તમારે પ્રયોગશાળાને જાણ કરવી આવશ્યક છે.
• કોઈપણ તબીબી નિદાન પ્રક્રિયાઓ કરવા પહેલાં સામગ્રી લેવાની સલાહ આપવામાં આવે છે.
• સ્ત્રીઓમાં હોર્મોનના સ્તરનું મૂલ્યાંકન કરતી વખતે, દિવસને ધ્યાનમાં લેવો મહત્વપૂર્ણ છે માસિક ચક્રચોક્કસ હોર્મોન્સ નક્કી કરવા માટે શ્રેષ્ઠ સમય ક્યારે છે? તમે તમારા ડૉક્ટર પાસેથી આ માહિતી મેળવી શકો છો.

અનુક્રમણિકા	લાક્ષણિકતા
વિશ્લેષક અને પરીક્ષણ સિસ્ટમ	જેલ કાર્ડ્સ; DiaMed AG (સ્વિટ્ઝર્લેન્ડ)
સંદર્ભ મૂલ્યો	નકારાત્મક પરિણામ / હકારાત્મક પરિણામ
દખલકારી પરિબળો. દવાઓ
નીચેની દવાઓ લેતી વખતે હકારાત્મક પરીક્ષણ શક્ય છે: એસિટામિનોફેન, સેલિસિલિક એસિડ, એમિનોપાયરિન, એન્ટિહિસ્ટેમાઈન્સ, carbromal, cephalosporins, chlorpromazine, chlorpropamide, cisplatin, clonidine, dipyrone, ethosuximide, fenfluramine, fuadin, hydralazine, hydrochlorothiazide, ibuprofen, insulin, isoniazid, mevodoclamide, melodicet, melody, methylpan, hydrochlorothiazide. ide, nomifensine, penicillamine, penicillins , ફેનાસેટિન, ફિનાઇલબુટાઝોન, પ્રોબેનેસીડ, પ્રોકેનામાઇડ, ક્વિનીડાઇન, ક્વિનાઇન, રિફામ્પિન, સ્ટ્રેપ્ટોમાસીન, સલ્ફોનામાઇડ્સ, સલ્ફોનીલ્યુરિયા ડેરિવેટિવ્ઝ, ટેટ્રાસાયક્લાઇન, ટ્રાયમટેરીન, ટ્રિમેલિટીક એનહાઇડ્રાઇડ
ઉપયોગ માટે સંકેતો
રોગપ્રતિકારક હેમોલિટીક એનિમિયાનું નિદાન, હેમોલિટીક રોગનવજાત, ડ્રગ-પ્રેરિત રોગપ્રતિકારક હેમોલિટીક એનિમિયા, હેમોલિટીક ટ્રાન્સફ્યુઝન પ્રતિક્રિયાઓ
પરિણામોનું અર્થઘટન
સામાન્ય રીતે, ડાયરેક્ટ કોમ્બ્સ ટેસ્ટ નકારાત્મક હોય છે. પોઝિટિવ ટેસ્ટઅહીં કોમ્બ્સ: સ્વયંપ્રતિરક્ષા હેમોલિટીક એનિમિયા; નવજાત શિશુના હેમોલિટીક રોગ; દવા પ્રેરિત રોગપ્રતિકારક હેમોલિટીક એનિમિયા; હેમોલિટીક ટ્રાન્સફ્યુઝન પ્રતિક્રિયાઓ

કોમ્બ્સ પ્રતિક્રિયા - અસરકારક પદ્ધતિમાનવ રક્તમાં એરિથ્રોસાઇટ એન્ટિજેન્સ અને એન્ટિ-એરિથ્રોસાઇટ એન્ટિબોડીઝની શોધ પરોક્ષ પ્રતિક્રિયાએકત્રીકરણ ટેસ્ટનો આધાર એરિથ્રોસાઇટ એન્ટિજેન્સ ટાઇપ કરવા માટે વર્ગ G ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન (IgG) પર આધારિત ચોક્કસ મોનોક્લોનલ રીએજન્ટ્સનો ઉપયોગ છે, ત્યારબાદ બીજા તબક્કામાં કોમ્બ્સ એન્ટિગ્લોબ્યુલિન સીરમ (AGS) નો ઉપયોગ.

AGS એ માનવીય ઇમ્યુનોગ્લોબ્યુલિન જી અને મોનોક્લોનલ એન્ટિબોડીઝ સાથે રોગપ્રતિકારક પ્રયોગશાળાના પ્રાણીઓના લોહીમાંથી સીરમનું મિશ્રણ કરીને બનાવવામાં આવે છે - માનવ સીરમના C3D પૂરક. AGS ચોક્કસ એન્ટિબોડીઝ સાથે સંવેદનશીલ લાલ રક્ત કોશિકાઓના એકત્રીકરણનું કારણ બને છે. AGS ના પ્રભાવ હેઠળ લાલ રક્ત કોશિકાઓ પર એન્ટિબોડીઝની ગેરહાજરીમાં, હકારાત્મક પ્રતિક્રિયા થતી નથી.

પરોક્ષ કોમ્બ્સ પ્રતિક્રિયા તમને આની હાજરી નક્કી કરવા દે છે:

• આઇજીજી રીએજન્ટ્સ દ્વારા શોધાયેલ એરિથ્રોસાઇટ એન્ટિજેન્સ ("અપૂર્ણ" એન્ટિબોડીઝ, ઉદાહરણ તરીકે, મોનોક્લોનલ રીએજન્ટ્સ એન્ટિ-ડી, એન્ટિ-એફ વાય એ, એન્ટિ-એફ વાય b);
• IgG વર્ગની એન્ટિ-એરિથ્રોસાઇટ એન્ટિબોડીઝ.

પરોક્ષ એન્ટિગ્લોબ્યુલિન ટેસ્ટ: રેડ બ્લડ સેલ એન્ટિજેન્સની શોધ

અમે એન્ટિ-ડી આઇજીજી કોલિકલોનના ઉદાહરણનો ઉપયોગ કરીને પરોક્ષ કોમ્બ્સ પ્રતિક્રિયાની પદ્ધતિ રજૂ કરીએ છીએ.

1. સ્વચ્છ ટેસ્ટ ટ્યુબનું લેબલ લગાવો: જે વ્યક્તિનું પરીક્ષણ કરવામાં આવે છે તેનું નામ સૂચવો.
2. ટેસ્ટ ટ્યુબમાં એન્ટિ-ડી આઇજીજી ઝોલિકલોનના 2 ટીપાં (આશરે 0.1 મિલી) ઉમેરો.
3. વિશ્લેષિત એરિથ્રોસાઇટ્સના 5% સસ્પેન્શનના 2 ટીપાં ઉમેરો, જે અગાઉ શારીરિક દ્રાવણથી ધોવાઇ ગયા હતા. ઝોલિકોન સાથે પરીક્ષણ નમૂનાઓ મિક્સ કરો.
4. મિશ્રણને પાણીના સ્નાનમાં અથવા થર્મોસ્ટેટમાં 37 °C તાપમાને 30 મિનિટ માટે ઉકાળો.
5. પાશ્ચર પીપેટનો ઉપયોગ કરીને ટેસ્ટ ટ્યુબમાં 5 - 10 મિલી ખારા દ્રાવણ ઉમેરો.
6. એક મિનિટ માટે 18 - 25 ° સે તાપમાને 1200 ગ્રામના કેન્દ્રત્યાગી પ્રવેગ સાથે ટ્યુબને સેન્ટ્રીફ્યુજ કરો.
7. ખારા ઉકેલ દૂર કરો.
8. સેન્ટ્રીફ્યુગેશનનો ઉપયોગ કરીને લાલ રક્ત કોશિકાઓ ધોવાની પ્રક્રિયાને 2 - 3 વધુ વખત પુનરાવર્તિત કરો.
9. રક્ત કોશિકાઓના કાંપમાં એન્ટિગ્લોબ્યુલિન સીરમના 2 ટીપાં ઉમેરો અને મિશ્રણ કરો.
10. 18 - 25 ° સે તાપમાને એક મિનિટ માટે 1200 ગ્રામના કેન્દ્રત્યાગી પ્રવેગ સાથે ટ્યુબને સેન્ટ્રીફ્યુજ કરો.
11. ડિસ્પેન્સર અથવા પાશ્ચર પીપેટનો ઉપયોગ કરીને, ખારા ઉકેલના 3 થી 5 ટીપાં ઉમેરો.
12. કાંપને ફરીથી ગોઠવો અને એગ્ગ્લુટિનેશન માટે દૃષ્ટિની આકારણી કરો. પૃષ્ઠભૂમિ સામે ટેસ્ટ ટ્યુબના તળિયે ઉચ્ચારિત એગ્લુટિનેટ્સ સ્પષ્ટ ઉકેલએરિથ્રોસાઇટ એન્ટિજેનની શોધ સૂચવે છે. રક્ત કોશિકાઓનું અપારદર્શક સસ્પેન્શન એન્ટિજેનની ગેરહાજરી સૂચવે છે.

કોમ્બ્સ ટેસ્ટ: આઇસોઇમ્યુન એન્ટિ-એરિથ્રોસાઇટ એન્ટિબોડીઝ માટે સ્ક્રીનીંગ

દાતા અને પ્રાપ્તકર્તાના તમામ લાલ રક્તકણોના એન્ટિજેન્સ માટે વ્યક્તિગત સુસંગતતા પરીક્ષણના ભાગ રૂપે અભ્યાસ હાથ ધરવામાં આવે છે. વિશે નિષ્કર્ષ સંપૂર્ણ સુસંગતતાદાતા એરિથ્રોસાઇટ્સ સાથે પ્રાપ્તકર્તા સેરા વિશ્લેષણના તમામ તબક્કે હેમોલિસિસ અને/અથવા એગ્ગ્લુટિનેશનની ગેરહાજરીના આધારે બનાવવામાં આવે છે. પરીક્ષણના કોઈપણ તબક્કે હેમોલિસિસ અને/અથવા એગ્ગ્લુટિનેશનના ચિહ્નો લોહીના નમૂનાઓની અસંગતતા દર્શાવે છે.

AB0 સિસ્ટમનો ઉપયોગ કરીને સુસંગતતા મૂલ્યાંકન, "કોલ્ડ" એન્ટિબોડીઝની શોધ

1. દાતાના લોહીના નમૂના તૈયાર કરો:
   • ઓટોમેટિક ડિસ્પેન્સરનો ઉપયોગ કરીને ટેસ્ટ ટ્યુબમાં 0.2 મિલી રક્ત ઉમેરો;
   • લાલ રક્ત કોશિકાઓને 5.0 મિલી ખારામાં 3 વખત ધોવા;
   • 3 થી 4 એમએલ ઓછી આયનીય તાકાત LISS સોલ્યુશનમાં પેલેટને ફરીથી લો.
2. બીજી સ્વચ્છ ટ્યુબને લેબલ કરો: પ્રાપ્તકર્તાનું નામ અને દાતાનું નામ સૂચવો.
3. સ્વચાલિત ડિસ્પેન્સરનો ઉપયોગ કરીને, લેબલવાળી ટ્યુબમાં પ્રાપ્તકર્તાના સીરમનું 0.1 મિલી ઉમેરો.
4. LISS સોલ્યુશનમાં 5% રેડ બ્લડ સેલ સસ્પેન્શનના 2 ટીપાં ઉમેરો.
5. 15 - 20 સેકન્ડ માટે 18 - 25 ° સે તાપમાને 1200 ગ્રામના સેન્ટ્રીફ્યુગલ પ્રવેગ સાથે મિશ્રણને તાત્કાલિક સેન્ટ્રીફ્યુજ કરો.
6. ટેસ્ટ ટ્યુબને હળવા હાથે હલાવીને, કાંપને નીચેથી અલગ કરો. એગ્લુટિનેટ્સની હાજરીનું મૂલ્યાંકન કરો. હેમોલિસિસ અને/અથવા એગ્લુટિનેટ્સની હાજરીનો અર્થ છે:
   • AB0 સિસ્ટમ અનુસાર અસંગતતા;
   • દર્દીના સીરમમાં IgM અથવા IgA વર્ગના "કોલ્ડ" એન્ટિબોડીઝની હાજરી, જે AB0 એન્ટિજેન્સ માટે વિશિષ્ટ નથી.

"ગરમ" એન્ટિબોડીઝની શોધ

1. જો ત્યાં કોઈ હેમોલિસિસ અને/અથવા એગ્લુટિનેટ્સ ન હોય, તો ટ્યુબને 37 °C તાપમાને 10 - 15 મિનિટ માટે ઉકાળો.
2. ઓરડાના તાપમાને 15 - 20 સેકન્ડ માટે 1200 ગ્રામ પર ટ્યુબને સેન્ટ્રીફ્યુજ કરો.
3. ટ્યુબને હલાવો અને સુપરનેટન્ટમાં હેમોલિસિસ અને/અથવા એગ્ગ્લુટિનેટ્સ તપાસો. સકારાત્મક પરિણામ દર્દીના સીરમમાં દાતા એરિથ્રોસાઇટ એન્ટિજેન્સ સામે "ગરમ" આઇજીએમ એન્ટિબોડીઝની શોધ સૂચવે છે.

Coombs ટેસ્ટમાં IgG એન્ટિબોડીઝની તપાસ

1. જો અભ્યાસના અગાઉના તબક્કે પરિણામ નકારાત્મક હોય, તો પાશ્ચર પીપેટનો ઉપયોગ કરીને ટેસ્ટ ટ્યુબમાં 0.9% NaCl સોલ્યુશનના 5 મિલી ઉમેરો.
2. 18 - 25 °C ના હવાના તાપમાને 15 - 20 સેકન્ડ માટે 1200 ગ્રામ પર ટ્યુબને સેન્ટ્રીફ્યુજ કરો. સુપરનેટન્ટને કાળજીપૂર્વક કાઢી નાખવા માટે પાશ્ચર પીપેટનો ઉપયોગ કરો.
3. લાલ રક્તકણો ધોવાનું 2 - 3 વધુ વખત પુનરાવર્તન કરો.
4. ટેસ્ટ ટ્યુબમાં એન્ટિગ્લોબ્યુલિન સીરમના 1 - 2 ટીપાં ઉમેરો. સંપૂર્ણ મિશ્રણ કરો.
5. ટ્યુબને 1200 ગ્રામ પર 15 - 20 સેકન્ડ માટે સેન્ટ્રીફ્યુજ કરો.
6. લાલ રક્ત કોશિકાના કાંપને કાળજીપૂર્વક તોડી નાખો અને પ્રતિક્રિયા પરિણામનું દૃષ્ટિની આકારણી કરો. એગ્ગ્લુટિનેશનની તપાસ એટલે દર્દીના સીરમમાં દાતાના એરિથ્રોસાઇટ એન્ટિજેન્સ સામે આઇજીજી એન્ટિબોડીઝની હાજરી.

હેમોલિટીક એનિમિયા, સ્વયંપ્રતિરક્ષા સંસ્થાઓને કારણે થાય છે જે તેમના પોતાના લાલ રક્ત કોશિકાઓ સામે નિર્દેશિત થાય છે, તે ચોક્કસપણે સમજી શકાતું નથી. જો કે, એવું માનવામાં આવે છે કે કેટલાક પરિબળો (ઉદાહરણ તરીકે, વાયરસ, અસામાન્ય પ્રોટીન) લાલ રક્ત કોશિકાઓને એવી રીતે બદલી નાખે છે કે શરીર તેમને "કંઈક વિદેશી તરીકે" માને છે અને એન્ટિબોડીઝની મદદથી તેમની સામે લડે છે. અન્ય સિદ્ધાંત મુજબ, કેટલાક રોગોમાં અસામાન્ય પ્લાઝ્મા પ્રોટીન સંસ્થાઓની રચના દરમિયાન લાલ રક્ત કોશિકાઓ સામે નિર્દેશિત એન્ટિબોડીઝ લગભગ આકસ્મિક રીતે ઉદ્ભવે છે. આવા પ્રોટીન શરીર, જેમ કે "રેન્ડમલી" પ્રતિક્રિયાઓ આપી શકે છે જેનો ઉપયોગ નિદાન કરવા માટે થઈ શકે છે (ઉદાહરણ તરીકે, વાયરલ ન્યુમોનિયા, જેમ કે જાણીતું છે, સકારાત્મક વાસરમેન પ્રતિક્રિયા આપે છે, હકારાત્મક પૉલ-બનલ પ્રતિક્રિયા અને કોલ્ડ એગ્લુટિનેશન પ્રતિક્રિયા આપે છે) .

બે છે ઓટોએન્ટિબોડીઝના મુખ્ય પ્રકારહેમોલિટીક એનિમિયા માટે, એટલે કે: ગરમ એન્ટિબોડીઝ (37 ડિગ્રી સેલ્સિયસ પર પ્રતિક્રિયા આપે છે) અને ઠંડા એન્ટિબોડીઝ (જેની પ્રતિક્રિયાશીલતા તાપમાન શૂન્યની નજીક આવે છે તેમ વધે છે). ઠંડા એન્ટિબોડીઝ કરતાં ગરમ ​​એન્ટિબોડીઝ વધુ સામાન્ય છે. ડેસીએ શોધી કાઢ્યું કે ગરમ હેમોલિસિન્સ ઠંડા કરતાં 2 ગણી વધુ વાર જોવા મળે છે. હેમોલિસિન અને એગ્ગ્લુટીનિન મૂળભૂત રીતે અલગ એન્ટિબોડીઝ નથી: તેઓ ફક્ત તેમની ક્રિયાની પ્રકૃતિમાં અલગ પડે છે. એગ્ગ્લુટીનિન્સ લાલ રક્ત કોશિકાઓનું સંકલન કરે છે, અને હેમોલિસિન તેમને હેમોલિસિસની જટિલ પ્રક્રિયા માટે વધુ સંવેદનશીલ બનાવે છે (પૂરક!). ઑટોએન્ટિબોડીઝ, એરિથ્રોસાઇટ્સ પર ફિક્સિંગ, એરિથ્રોસાઇટ-ગ્લોબિન સંકુલ બનાવે છે. આ સંકુલ Coombs એન્ટિગ્લોબિન ટેસ્ટનો ઉપયોગ કરીને શોધી કાઢવામાં આવે છે.

કોમ્બ્સ ટેસ્ટકોમ્બ્સ સીરમ સાથે હાથ ધરવામાં આવે છે, જેની તૈયારી માટે સસલાને માનવ સીરમ સાથે સંવેદનશીલ બનાવવામાં આવે છે, જેની સામે સસલાના સીરમમાં એન્ટિબોડીઝ રચાય છે. જ્યારે આવા સંવેદનશીલ સીરમ માનવ એરિથ્રોસાઇટ્સ પર કાર્ય કરે છે, ત્યારે જો એરિથ્રોસાઇટ રીસેપ્ટર્સ અવરોધિત એન્ટિબોડીઝ દ્વારા કબજે કરવામાં આવે તો તેમનું એકત્રીકરણ થાય છે. કારણ કે આ અવરોધક એન્ટિબોડીઝ માનવ સીરમમાંથી મેળવવામાં આવે છે, તેઓ માનવ પ્લાઝ્મા પ્રત્યે સંવેદનશીલ સસલાના સીરમ સાથે સંકલિત થાય છે અને તેમાં પ્રીસિપિટિન હોય છે. આ પ્રતિક્રિયાને કોમ્બ્સ ટેસ્ટ કહેવામાં આવે છે; ઓટોઇમ્યુન બોડીઝ (લો ટાઇટ) ને કારણે હેમોલિટીક એનિમિયા માટે તે લગભગ ચોક્કસ છે (વિગતો માટે, માયર જુઓ).

સામાન્ય રીતે હેમોલિટીક એનિમિયા માટેએરિથ્રોસાઇટ્સના પ્રાથમિક ડિસઓર્ડર સાથે, કોમ્બ્સ પરીક્ષણ નકારાત્મક છે, અને હસ્તગત લોકો સાથે, તે હકારાત્મક છે. જો કે, આ નિયમમાં કેટલાક અપવાદો છે: બંધારણીય હેમોલિટીક એનિમિયાની કટોકટી દરમિયાન ખોટા-પોઝિટિવ કોમ્બ્સ પરીક્ષણ મળી આવ્યા હતા, અને નબળી ડિગ્રી- કેટલીકવાર સ્પ્લેનેક્ટોમી પછી, સંધિવા, સાર્કોઇડોસિસ, વારંવાર લોહી ચઢાવ્યા પછી અને પ્રણાલીગત લ્યુપસ એરિથેમેટોસસ સાથે. સ્વાભાવિક રીતે, સ્વયંપ્રતિરક્ષા સંસ્થાઓની રચના વિના હસ્તગત હેમોલિટીક એનિમિયામાં, તે નકારાત્મક છે.

હેમોલિટીક એનિમિયાસ્વયંપ્રતિરક્ષા સંસ્થાઓને કારણે વિભાજિત કરી શકાય છે:
એ) તીવ્ર, સબએક્યુટ અને ક્રોનિક સ્વરૂપો, તેમજ ચાલુ
b) અજાણ્યા ઇટીઓલોજી સાથે આઇડિયોપેથિક અને c) રોગનિવારક [વાયરલ ન્યુમોનિયા (માત્ર ઠંડા એગ્ગ્લુટીનિન્સ), ક્રોનિક લિમ્ફેટિક લ્યુકેમિયા, રેટિક્યુલોસારકોમા, લિમ્ફોસારકોમા, પ્રણાલીગત લ્યુપસ એરિથેમેટોસસ (મુખ્યત્વે ગરમ, ઓછી વાર ઠંડા એગ્ગ્લુટીનિન્સ), ડીસીસીસી (સીફ્યુલેટિન) કર્મચારીઓ સાથે)).
c) લાક્ષાણિક [વાયરલ ન્યુમોનિયા (માત્ર ઠંડા એગ્ગ્લુટીનિન્સ), ક્રોનિક લિમ્ફેટિક લ્યુકેમિયા, રેટિક્યુલોસારકોમા, લિમ્ફોસારકોમા, પ્રણાલીગત લ્યુપસ એરીથેમેટોસસ (મુખ્યત્વે ગરમ, ઓછી વાર ઠંડા એગ્ગ્લુટીનિન્સ), સિફિલિસ (ઠંડા એગ્ગ્લુટીનિન્સ) અને ઓવેરિઅન્સ (કોલ્ડ એગ્લુટીનિન્સ)

હેમોલિટીક એનિમિયાનું ક્લિનિક, સ્વયંપ્રતિરક્ષા સંસ્થાઓના પ્રભાવ હેઠળ વિકાસશીલ, ખૂબ જ વૈવિધ્યસભર છે, અને તેથી તેમના સામાન્ય દોરવાનું ભાગ્યે જ શક્ય છે. ક્લિનિકલ ચિત્ર. તમામ ઉંમરના અને બંને જાતિના લોકો સમાન રીતે અસરગ્રસ્ત છે. તેમ છતાં, સ્ત્રીઓ (સૅક્સ અને વર્કમેન) માં આઇડિયોપેથિક સ્વરૂપો વધુ વખત જોવા મળે છે.

આઇડિયોપેથિક સ્વરૂપનું ક્લિનિકલ ચિત્રરોગની તીવ્રતાના આધારે બદલાય છે. IN ક્રોનિક કેસોશરૂઆત ધીમે ધીમે થાય છે, રોગ ઘણા વર્ષો સુધી વારંવાર તીવ્રતા સાથે ખેંચે છે. એનિમિયાની તીવ્રતા હેમોલિસિસની ડિગ્રીના આધારે બદલાય છે. હિમોગ્લોબિનમાં 10% સુધીના ટીપાં જોવા મળે છે, અન્ય કિસ્સાઓમાં, હિમોગ્લોબિન લાંબા સમય સુધી 50-60% પર રહે છે. રેટિક્યુલોસાયટોસિસની તીવ્રતા અને ત્વચા અને સીરમના icteric રંગ હેમોલિસિસની ડિગ્રીને અનુરૂપ છે. બિલીરૂબિન પેશાબમાં ખૂબ જ ભાગ્યે જ જોવા મળે છે, કારણ કે તે કિડનીમાંથી પસાર થતું નથી, પરંતુ હિમોગ્લોબિન્યુરિયા જોવા મળે છે. ક્રોનિક કેસોમાં, બરોળ મોટાભાગે મોટું થાય છે અને તે ખૂબ જ નોંધપાત્ર કદ સુધી પણ પહોંચી શકે છે, પરંતુ અન્ય કિસ્સાઓમાં તે હજુ પણ અનુભવી શકાય છે. યકૃત ભાગ્યે જ મોટું થતું નથી.

મોટાભાગના કિસ્સાઓમાં લોહીમાંમેક્રોસાયટોસિસ જોવા મળે છે, માં તીવ્ર તબક્કાઓત્યાં ઘણા માઇક્રોસાયટ્સ પણ છે, નોર્મોબ્લાસ્ટોસિસ અને પોલીક્રોમિયા ભાગ્યે જ ગેરહાજર છે, લ્યુકોસાયટોસિસ 30,000 સુધી પહોંચી શકે છે, પ્લેટલેટ્સ સામાન્ય છે. કેટલાક કિસ્સાઓમાં, જો કે, ગંભીર થ્રોમ્બોસાયટોપેનિયા છે. ઇવાન્સ પ્લેટલેટ્સ સામે એન્ટિબોડીઝની એક સાથે હાજરી દ્વારા આ કેસોને સમજાવે છે, જેથી સ્વયંપ્રતિરક્ષા સંસ્થાઓની ક્રિયાને કારણે હેમોલિટીક એનિમિયા અને થ્રોમ્બોસાયટોપેનિયા બંને છે - ઇવાન્સ સિન્ડ્રોમ. ઓસ્મોટિક પ્રતિકાર થોડો ઘટાડો થયો છે, પરંતુ તે જ હદ સુધી નથી અને બંધારણીય ગ્લોબ્યુલર સેલ એનિમિયાની જેમ કાયમી ધોરણે નથી. 6 કલાક પછી હીટ રેઝિસ્ટન્સ ટેસ્ટ (હેગલીન-મેયર) પણ સહેજ હેમોલિસિસ (પોતાનું અવલોકન) આપી શકે છે, પરંતુ માર્ચિયાફાવા એનિમિયા કરતા ઓછા પ્રમાણમાં. હેમોસાઇડરિન પણ પેશાબ (પોતાના અવલોકન) માં જોવા મળે છે.