Ախտորոշիչ ագլյուտինացիոն ռեակցիա. Ագլյուտինացման ռեակցիա

Ագլյուտինացիոն ռեակցիան հիմնված է հակամարմինների (ագլյուտինինների) հատուկ փոխազդեցության վրա ամբողջ մանրէաբանական կամ այլ բջիջների հետ։ Այս փոխազդեցության արդյունքում առաջանում են ագլոմերատային մասնիկներ, որոնք նստվածք են առաջացնում (ագլյուտինատվում)։ Բակտերիաները, նախակենդանիները, սնկերը, խմորիչները, ռիկետցիան, էրիթրոցիտները և այլ բջիջներ՝ ինչպես կենդանի, այնպես էլ սպանված, կարող են մասնակցել ագլյուտինացիայի ռեակցիային: Ռեակցիան տեղի է ունենում երկու փուլով. առաջինը հակագենի և հակամարմինների սպեցիֆիկ համակցություն է, երկրորդը՝ ոչ սպեցիֆիկ, այսինքն՝ տեսանելի ագլյուտինատի ձևավորում։ Ագլյուտինատի տեղումները տեղի են ունենում էլեկտրոլիտների առկայության դեպքում, ինչպիսիք են նատրիումի քլորիդը: Ագլյուտինատի միկրոօրգանիզմները մնում են կենդանի, բայց կորցնում են իրենց շարժունակությունը:

Ագլյուտինացիոն ռեակցիան լայնորեն կիրառվում է վարակիչ հիվանդությունների շճաբանական ախտորոշման և մեկուսացված մանրէների հակագենային կառուցվածքի որոշման համար։ Հիվանդի կամ կրողի մարմնից մեկուսացված հարուցչի հակագենիկ կառուցվածքը որոշելու համար օգտագործվում է հատուկ իմունային շիճուկ, որը ստացվում է կենդանիների (նապաստակ, էշ, ոչխար) որոշակի միկրոօրգանիզմներով իմունիզացիայի միջոցով: Մանրէների նույնականացումն իրականացվում է ապակու վրա ագլյուտինացիոն ռեակցիայի միջոցով՝ կլանված կամ մոնոընկալիչ շիճուկներով կամ փորձանոթներում՝ հատուկ ագլյուտինացնող շիճուկներով: Ադսորբացված շիճուկները պարունակում են հակամարմիններ միայն տվյալ միկրոբին հատուկ անտիգենների նկատմամբ, իսկ մոնոռեցեպտորների շիճուկները պարունակում են հակամարմիններ միայն հարուցիչի մեկ հատուկ հակագենի նկատմամբ:

Տեսակների շիճուկները պարունակում են հակամարմիններ որոշակի միկրոբի բոլոր անտիգենների նկատմամբ:

Արդյոք մեկուսացված միկրոօրգանիզմի մշակույթը պատկանում է այս տեսակըորոշվում է շիճուկի ամպուլայի պիտակի վրա նշված հակամարմինների տիտրին հայտնի շիճուկով ագլյուտինացիայով: Շիճուկի հակամարմինների տիտրը համարվում է վերջին նոսրացումը, որում դեռևս նկատվում է կենդանու իմունիզացիայի համար օգտագործվող մանրէների կուլտուրայի ագլյուտինացիա: Adsorbed և monoreceptor շիճուկները սովորաբար օգտագործվում են չնոսրացված ապակու ագլյուտինացման ռեակցիայի մեջ:

Հիվանդի արյան շիճուկում հակամարմինների առկայությունը որոշելիս այն նոսրացվում է նատրիումի քլորիդի իզոտոնիկ լուծույթով՝ սկսած 1:50-ից մինչև 1:800 կամ ավելի նոսրացումից: Յուրաքանչյուր նոսրացմանը ավելացվում է կենդանի կամ սպանված մանրէների կասեցում: Ջերմությունից կամ ֆորմալդեհիդից սպանված մանրէներ պարունակող պատրաստուկները կոչվում են դիագնոստիկ: Միկրոօրգանիզմների կուլտուրաների տաքացման արդյունքում ստացված ախտորոշիչները պարունակում են միայն սոմատիկ անտիգեններ: Միայն ֆորմալդեհիդ օգտագործելու դեպքում մանրէները պահպանում են իրենց դրոշակակիր անտիգենները:

Հիվանդի արյան մեջ հակամարմինների առկայության դեպքում ռեակցիայի մեջ վերցված ախտորոշիչ թեստը կպչում է իրար և երկու փորձանոթների վրա ձևավորվում է նստվածք (ագլյուտինատ): Այս դեպքում ագլյուտինացիոն ռեակցիայի արդյունքները համարվում են դրական: Հսկիչ խողովակում, որի մեջ ավելացվում են նատրիումի քլորիդի իզոտոնիկ լուծույթ և դիագնոստիկա, մանրէների կասեցումը պետք է լինի միատարր (բացասական ագլյուտինացիոն ռեակցիա):

Որոշ հիվանդությունների, օրինակ՝ լեպտոսպիրոզի դեպքում, ագլյուտինացիոն ռեակցիայի արդյունքները հաշվի են առնվում միայն մանրադիտակի միջոցով՝ մանրադիտակի մութ տեսադաշտում (միկրոագլյուտինացիա)։ Հիվանդության շճաբանական ախտորոշում կատարելու համար հաշվի առեք ախտորոշիչ հիվանդություն. Այն սովորաբար համապատասխանում է շիճուկի նոսրացմանը 1:100 կամ 1:200:

Հիվանդի արյան շիճուկում հակամարմինները կարող են հայտնաբերվել ագլյուտինացիոն ռեակցիայի միջոցով տիֆի և պարատիֆային տենդի (Վիդալ ռեակցիա), բրուցելոզի (Ռայթի ռեակցիա), տուլարեմիայի և այլնի դեպքում:
Կաստելանիի արձագանքը. Ոմանց համար վարակիչ հիվանդություններկամ իմունիզացիա խմբային անտիգեններ պարունակող միկրոօրգանիզմներով, արյան շիճուկում, բացի տվյալ տեսակին հատուկ հակամարմիններից, հայտնվում են նաև խմբային հակամարմիններ։ Այս դեպքում հարակից բակտերիաների տեսակները կագլյուտինացվեն ստացված շիճուկներով:

Կաստելլանին առաջարկել է իմունային շիճուկներից խմբային հակամարմինների կլանման մեթոդ՝ հիմնված դրանց հեռացման վրա հարակից տեսակների միկրոօրգանիզմների օգնությամբ, որոնք ունեն խմբային անտիգեններ, սակայն չունեն հատուկ: Շիճուկին ավելացված նման միկրոօրգանիզմների մշակույթը ներծծում է ոչ սպեցիֆիկ խմբի հակամարմինները, և հակագեն-հակամարմին համալիրը ցենտրիֆուգմամբ հեռացնելուց հետո շիճուկում մնում են միայն հատուկ իմունոգլոբուլիններ: Կաստելանիի մեթոդով մշակված շիճուկները կարող են օգտագործվել ագլյուտինացման ռեակցիայի մեջ՝ որպես խիստ սպեցիֆիկ:

Ագլյուտինացիան բակտերիաների սոսնձումն է նրանց հետ կոնկրետ ԱԹ-ների փոխազդեցության արդյունքում։ ՌԱ-ն իրականացնելու համար անհրաժեշտ է երեք բաղադրիչ՝ 1) AG (ագլյուտինոգեն); 2) AT (ագլյուտինին); 3) էլեկտրոլիտային լուծույթ (իզոտոնիկ նատրիումի քլորիդի լուծույթ). Ագլուտինացման ռեակցիային մասնակցում են միայն կորպուսուլյար անտիգենները (բակտերիաներ, կարմիր արյան բջիջներ, անտիգենով բեռնված լատեքսային մասնիկներ):

Ագլյուտինացման ռեակցիա ապակու վրա. Մի կաթիլ դրեք յուղազերծ ապակու սլայդի վրա՝ օգտագործելով pipette: ախտորոշիչ շիճուկ(շիճուկի նոսրացում 1:10 - 1:20): Մանրէաբանական օղակի միջոցով թեք ագարի մակերևույթից վերցվում է ուսումնասիրվող միկրոօրգանիզմի մաքուր կուլտուրան, տեղափոխվում շիճուկի մի կաթիլ և խառնվում։ Ռեակցիայի արդյունքը հաշվի է առնվում անզեն աչքով 3-5 րոպե անց։ Եթե ​​արձագանքը դրական է, ապա փաթիլների տեսքը (մեծ կամ փոքր) նշվում է շիճուկի մի կաթիլում, որը հստակ տեսանելի է մուգ ֆոնի վրա, երբ սլայդը թափահարում է: Բացասական ռեակցիայի դեպքում հեղուկը մնում է միատեսակ պղտոր։

Ագլյուտինացման ռեակցիա փորձանոթներում. Փորձանոթների շարքում ավելացվում է 1 մլ ֆիզիոլոգիական լուծույթ։ Փորձարկվող արյան շիճուկի հավասար ծավալը ավելացվում է առաջին փորձանոթին: Պատրաստվում են շիճուկի սերիական կրկնակի նոսրացումներ (շիճուկի տիտրացիա), որից հետո յուրաքանչյուր փորձանոթին ավելացվում է 2 կաթիլ ինակտիվացված բակտերիաների (diagnosticum) կասեցում։ Խողովակները տեղադրվում են 37 °C ջերմաստիճանի թերմոստատի մեջ 2 ժամով։ Ռեակցիան ընթանում է անզեն աչքով անտեսանելի փոքր փաթիլների ձևավորմամբ, ուստի արդյունքները գրանցվում են մի փոքր խոշորացմամբ հատուկ սարքում՝ ագլյուտինոսկոպում: Ագլյուտինացիայի ինտենսիվությունը հաշվի է առնվում ըստ «չորս պլյուս» համակարգի՝ ամբողջական ագլյուտինացիա՝ 4+, մասնակի ագլյուտինացիա՝ 3+ կամ 2+, կասկածելի արդյունք՝ +։ Վերջին նոսրացումը, որում նկատվում է 2+ ագլյուտինացիա, վերցվում է որպես հակամարմինների տիտր փորձարկման շիճուկում:

Փորձանոթներում ագլյուտինացիոն ռեակցիա է իրականացվում (ընդարձակ ագլյուտինացիոն ռեակցիա)՝ որոշելու հակամարմինների տիտրը տիֆի և պարատիֆային տենդի (Վիդալ ռեակցիա), բրուցելոզի (Ռայթի ռեակցիա) և տիֆի (Վեյգլի ռեակցիա) հարուցիչների նկատմամբ:

Ագլյուտինացիան (լատիներեն agglutinatio - սոսնձում) հակագեն կրող կորպուսուլյար մասնիկների (ամբողջական բջիջներ, լատեքսային մասնիկներ և այլն) սոսնձումն (միացումն) է հատուկ հակամարմինների մոլեկուլների հետ՝ էլեկտրոլիտների առկայությամբ, որն ավարտվում է փաթիլների կամ նստվածքի առաջացմամբ։ (aglutinate) տեսանելի է անզեն աչքով. Նստվածքի բնույթը կախված է անտիգենի բնույթից. դրոշակավոր բակտերիաները արտադրում են կոպիտ ծալքավոր նստվածք, դրոշակավոր և ոչ պարկուճային բակտերիաները՝ մանրահատիկ նստվածք, իսկ պարկուճային բակտերիաները՝ լարային նստվածք: Տարբերակվում է ուղղակի ագլյուտինացիայի միջև, որի դեպքում բակտերիալ կամ որևէ այլ բջիջի սեփական անտիգենները, օրինակ՝ էրիթրոցիտները, անմիջականորեն մասնակցում են հատուկ հակամարմինների հետ փոխազդեցությանը. և անուղղակի կամ պասիվ, որոնցում բակտերիալ բջիջները կամ էրիթրոցիտները կամ լատեքսի մասնիկները կրողներ են ոչ թե իրենց, այլ օտար անտիգենների (կամ հակամարմինների) վրա, որոնք ներծծվում են դրանց վրա՝ բացահայտելու իրենց հատուկ հակամարմինները (կամ անտիգենները): Ագլյուտինացիոն ռեակցիան հիմնականում ներառում է IgG և IgM դասերին պատկանող հակամարմիններ։ Այն տեղի է ունենում երկու փուլով. նախ՝ տեղի է ունենում հակամարմինների ակտիվ կենտրոնի հատուկ փոխազդեցություն անտիգենի որոշիչի հետ, այս փուլը կարող է առաջանալ էլեկտրոլիտների բացակայության դեպքում և չի ուղեկցվում։ տեսանելի փոփոխություններարձագանքման համակարգ. Երկրորդ փուլի՝ ագլյուտինատի առաջացման համար անհրաժեշտ է էլեկտրոլիտների առկայությունը, որոնք նվազեցնում են էլեկտրական լիցքավորումանտիգեն + հակամարմին բարդույթներ և արագացնում են դրանց սոսնձման գործընթացը։ Այս փուլն ավարտվում է ագլյուտինատի ձևավորմամբ։

Ագլյուտինացման ռեակցիաները կատարվում են կամ ապակյա կամ հարթ ստվարաթղթե թիթեղների վրա, կամ ստերիլ ագլյուտինացիոն խողովակներում։ Ապակու վրա ագլյուտինացման ռեակցիաները (ուղղակի և պասիվ) սովորաբար օգտագործվում են որպես արագացված մեթոդհիվանդի շիճուկում հատուկ հակամարմինների հայտնաբերում (օրինակ՝ բրուցելյոզով) կամ հարուցիչի սերոլոգիական նույնականացման համար։ Վերջին դեպքում սովորաբար օգտագործվում են լավ մաքրված (ադսորբացված) ախտորոշիչ շիճուկներ, որոնք պարունակում են միայն մոնոընկալիչ հակամարմիններ կամ դրանց մի շարք տարբեր անտիգենների նկատմամբ։ Ապակու վրա ագլյուտինացիայի ռեակցիայի անկասկած առավելությունը դրա իրականացման պարզությունն է և այն, որ այն տևում է մի քանի րոպե կամ նույնիսկ վայրկյան, քանի որ երկու բաղադրիչներն էլ օգտագործվում են կենտրոնացված ձևով: Այնուամենայնիվ, այն ունի միայն որակական արժեք և ավելի քիչ զգայուն է, քան փորձանոթը: Փորձանոթներում լայնածավալ ագլյուտինացիոն ռեակցիան ավելի ճշգրիտ արդյունքներ է տալիս, քանի որ թույլ է տալիս որոշել հակամարմինների քանակական պարունակությունը շիճուկում (սահմանել դրա տիտրը) և, անհրաժեշտության դեպքում, գրանցել հակամարմինների տիտրի բարձրացման փաստը, որն ունի ախտորոշիչ նշանակություն։ . Ռեակցիան կարգավորելու համար շիճուկը, որը որոշակի ձևով նոսրացված է 0,85% NaCl լուծույթով և 1 մլ-ում 1 միլիարդ բակտերիա պարունակող ստանդարտ ախտորոշիչի (կամ թեստային մշակույթի) կասեցման հավասար ծավալ (սովորաբար 0,5 մլ) ավելացվում է: ագլյուտինացիոն խողովակներ. Ագլյուտինացման ռեակցիայի արդյունքները գրանցվում են նախ 37 °C-ում խողովակների ինկուբացիայից 2 ժամ հետո, իսկ վերջում՝ 20-24 ժամ հետո՝ ըստ երկու չափանիշների՝ նստվածքի առկայության և չափի և վերին հեղուկի թափանցիկության աստիճանի: Գնահատումն իրականացվում է չորս խաչաձեւ համակարգով։ Արձագանքը պարտադիր ուղեկցվում է շիճուկի և հակագենի հսկողությամբ։ Այն դեպքերում, երբ փորձանոթում կատարվում է մանրակրկիտ ագլյուտինացիոն ռեակցիա՝ պաթոգենի շճաբանական նույնականացման համար, այն ունի ախտորոշիչ արժեք, եթե արձագանքը գնահատվում է որպես դրական, երբ ախտորոշիչ շիճուկը նոսրացվում է մինչև իր տիտրի առնվազն կեսը:

Պետք է հաշվի առնել, որ հոմոլոգ անտիգենների և հակամարմինների լուծույթները խառնելիս միշտ չէ, որ նկատվում են ագլյուտինացիոն ռեակցիայի տեսանելի դրսևորումներ։ Նստվածք ձևավորվում է միայն ռեակցիայի երկու բաղադրիչների որոշակի օպտիմալ հարաբերակցությամբ: Այս սահմաններից դուրս, հակագենի կամ հակամարմինների զգալի ավելցուկով, ռեակցիա չի նկատվում: Այս երևույթը կոչվում է «պրոզոնային ֆենոմեն»։ Այն դիտվում է ինչպես ագլյուտինացիայի, այնպես էլ տեղումների ռեակցիայի ժամանակ։ Իմունային ռեակցիաներում պրոզոնի հայտնվելը բացատրվում է նրանով, որ դրանցում ներգրավված անտիգենները, որպես կանոն, բազմորոշիչ են, իսկ մոլեկուլները. IgG հակամարմիններունեն երկու ակտիվ կենտրոններ. Հակամարմինների ավելցուկով, յուրաքանչյուր անտիգեն մասնիկի մակերեսը ծածկված է հակամարմինների մոլեկուլներով, այնպես որ ազատ որոշիչ խմբեր չեն մնացել, ուստի հակամարմինների երկրորդ, չկապված ակտիվ կենտրոնը չի կարող փոխազդել մեկ այլ անտիգեն մասնիկի հետ և կապել դրանք միմյանց հետ: Տեսանելի ագլյուտինատի կամ նստվածքի ձևավորումը նույնպես ճնշվում է, երբ կա անտիգենի ավելցուկ, երբ հակամարմինների ոչ մի ազատ ակտիվ կենտրոն չի մնում, և, հետևաբար, հակագեն + հակամարմին + հակագեն համալիրները այլևս չեն կարող մեծանալ:

Արագացված ագլյուտինացիոն ռեակցիաների տարբերակներ: Ռեակցիա պասիվ հեմագլյուտինացիաև դրա տարբերակները

Դասական ագլյուտինացիոն ռեակցիան ներառում է կորպուսուլյար անտիգենների օգտագործումը: Այնուամենայնիվ, լուծելի անտիգենները նույնպես կարող են ներգրավվել: Դա հնարավոր դարձնելու համար նման անտիգենները ներծծվում են իմունոլոգիապես իներտ մասնիկների վրա: Լատեքսի կամ բենտոնիտի մասնիկները կարող են օգտագործվել որպես կրող, սակայն ներկայումս առավել հաճախ օգտագործվում են կենդանիների կամ մարդու էրիթրոցիտները՝ բարելավելով դրանց կլանող հատկությունները՝ դրանք մշակելով տանինի, ֆորմալինի կամ բենզիդինի լուծույթներով: Արյան կարմիր բջիջները, որոնք իրենց վրա հակագեն են ներծծել, կոչվում են զգայուն այս անտիգենով, և իմունային ռեակցիաորին նրանք մասնակցում են անուղղակի կամ պասիվ հեմագլյուտինացման ռեակցիա (IRHA կամ RPHA), քանի որ արյան կարմիր բջիջները պասիվ են մասնակցում դրան:

RPGA-ն տեղադրվում է հատուկ պոլիստիրոլե թիթեղների մեջ՝ կիսագնդաձև հատակ ունեցող անցքերով: Օգտագործելիս այն սերոլոգիական ախտորոշումԱյս հորերում փորձնական շիճուկի կրկնակի նոսրացումները պատրաստվում են ֆիզիոլոգիական լուծույթում, այնուհետև դրան որպես ախտորոշիչ միջոց ավելացվում է զգայուն էրիթրոցիտների կասեցում: Արդյունքները գրանցվում են 37 °C ջերմաստիճանում 2 ժամ ինկուբացիայից հետո՝ օգտագործելով չորս խաչաձեւ համակարգը: Դրական ռեակցիայի դեպքում ագլյուտինացված կարմիր արյան բջիջները նստում են անցքի հատակին և հավասարապես ծածկում են այն շրջված հովանոցի տեսքով: ժամը բացասական արձագանքկարմիր արյան բջիջները նույնպես նստում են, հեղուկը դառնում է թափանցիկ, նստվածքը փոսի կենտրոնում փոքրիկ «սկավառակի» տեսք ունի։ RPHA-ում շիճուկի տիտրը համարվում է նրա վերջին նոսրացումը, որը դեռևս տալիս է ընդգծված հեմագլյուտինացիա՝ առանց «սկավառակի» առկայության էական նշանների:

RPGA-ն կարող է օգտագործվել նաև որպես մանրէաբանական ախտորոշման արագացված մեթոդ՝ փորձարկման նյութում անմիջապես հայտնաբերելու անհայտ բակտերիաներ, վիրուսներ, տոքսիններ, օրինակ՝ ժանտախտի հարուցիչներ, ստաֆիլոկոկային էնտերոտոքսիններ և այլն: սպեցիֆիկությունը օգտագործվում են որպես ռեակցիայի հակամարմինների հայտնի բաղադրիչ՝ հակամարմինների էրիթրոցիտ diagnosticum: Եթե ​​փորձարկման նյութը պարունակում է բավարար քանակությամբ հայտնի անտիգեն, ապա RPGA-ն դրական կլինի:

RPHA-ի օգտագործման տարբերակներն են՝ հակագենի չեզոքացման ռեակցիա (RNAg), հակամարմինների չեզոքացման ռեակցիա (RNAb), պասիվ հեմագլյուտինացման արգելակման ռեակցիա (PHA): Այս ռեակցիաների համար օգտագործվում են հակագենային և հակամարմինների էրիթրոցիտների ախտորոշում: Միաժամանակ կարող են օգտագործվել երկու փոխադարձ վերահսկվող միակողմանի ռեակցիաներ, օրինակ՝ RPHA՝ հակագենային ախտորոշմամբ և RNAg՝ հակամարմին էրիթրոցիտային դիագնոստիկումով:

Հակամարմինների չեզոքացման ռեակցիան (RNAb) բաղկացած է ցանկալի հակագեն պարունակող կախոցը համապատասխան ծավալներով հայտնի հակամարմիններ պարունակող հատուկ իմունային շիճուկի հետ խառնելուց և 37 °C-ում երկու ժամ ինկուբացիայից: Դրանից հետո ավելացվում է հակագենային էրիթրոցիտային դիագնոստիկ: Խառնուրդը թափահարում են և թողնում սենյակային ջերմաստիճանում։ Արդյունքները հաշվի են առնվում 3-4 ժամ հետո և վերջապես 18-24 ժամ հետո, եթե փորձարկման նյութը պարունակում է անտիգեն, ապա այն կկապի հակամարմինները (չեզոքացնի դրանք), հետևաբար հեմագլյուտինացիա չի առաջանա։

Հակագենի չեզոքացման ռեակցիան (RNAg) կատարվում է նույն սկզբունքով։ Միայն այս դեպքում են հայտնաբերվում հակամարմիններ փորձարկման նյութում: Նման փորձարկման նյութին ավելացված սպեցիֆիկ հակագենը կկապվի դրանում պարունակվող հակամարմինների հետ, այսինքն՝ տեղի կունենա անտիգենի չեզոքացում հակամարմիններով, և, հետևաբար, հեմագլյուտինացիա չի առաջանա հակամարմինների էրիթրոցիտային ախտորոշում ավելացնելիս:

Կոագգլուտինացման ռեակցիա. Սա պասիվ, այսինքն՝ արագացված ագլյուտինացման ռեակցիայի տարբերակներից մեկն է ապակու վրա՝ միջնորդավորված հակամարմիններ կրող բջիջներով: Այս ռեակցիան հիմնված է յուրահատուկ հատկության վրա Staphylococcus aureus, որն իր բջջային պատում պարունակում է A սպիտակուց, կապվում է IgG-ի և IgM-ի Fc բեկորների հետ։ Այս դեպքում հակամարմինների ակտիվ կենտրոնները մնում են ազատ և կարող են փոխազդել անտիգենների հատուկ որոշիչների հետ: Ստաֆիլոկոկի 2% կասեցման կաթիլը, որը զգայուն է համապատասխան հակամարմիններով, կիրառվում է ապակե սլայդի վրա և ավելացվում է ուսումնասիրվող բակտերիաների կախույթի կաթիլը: Եթե ​​հակագենը համապատասխանում է հակամարմիններին, ապա 30-60 վայրկյանում տեղի է ունենում հակամարմիններով բեռնված ստաֆիլոկոկների հստակ ագլյուտինացիա:

Լատեքսային ագլյուտինացիայի ռեակցիա (LAR): Այս ախտորոշիչ համակարգում հակամարմինների կրողը փոքր ստանդարտ լատեքսային մասնիկներն են: Ռեակցիան իրականացվում է միկրոմեթոդով ապակու վրա գտնվող հորերում: PAH-ի հաջող փուլավորման հիմնական պայմանը համակարգի բաղադրիչների քանակական հարաբերակցության խստիվ պահպանումն է. 50 մկլ փորձարկման նյութին ավելացվում է հակամարմիններով զգայուն լատեքսային պատրաստուկի 10 մկլ: PAH-ի առանձնահատկությունը վերահսկվում է՝ օգտագործելով առևտրային թեստային համակարգերում պարունակվող երեք հսկիչ թեստեր դրական արձագանք, ակնհայտորեն բացասական ռեակցիա և լատեքսային կասեցման որակի վերահսկում PAH-չզգայուն (հակամարմիններ չպարունակող) լատեքսների համար փորձարկման նյութի հետ: Մեր երկրում որպես հատուկ հակամարմինների կրողներ օգտագործվում են տարբեր մասնիկների տրամագծերով (0,3; 0,66; 0,75; 0,8 մկմ) պոլիստիրոլային մոնոդիսպերս լատեքսներ: LAG-ն օգտագործվում է փորձարկման նյութում միկրոօրգանիզմների կամ դրանց անտիգենների արագ հայտնաբերման համար:

Հակագենների իմունամագնիսական հայտնաբերում: Ապակու վրա արագացված ագլյուտինացիայի ռեակցիայի տարբերակներից մեկը կապված է հատուկ հակամարմիններով պատված գերմագնիսական պոլիմերային մասնիկների օգտագործման հետ: Նման մեկ մասնիկը կապում է միկրոօրգանիզմների մինչև 107-108 բջիջ, ինչի պատճառով զգայունությունը. այս մեթոդըհասնում է 5 CFU/ml-ի: Միկրոօրգանիզմների իմունամագնիսական հայտնաբերումը կարող է օգտագործվել CPR-ի հետ համատեղ:

Հեմագլյուտինացման ագրեգատային ռեակցիա (AHA): Թույլ է տալիս արագ հայտնաբերել հիվանդների արյան մեջ ինչպես ազատ շրջանառվող անտիգենները (հակագենեմիա), այնպես էլ հակամարմինների հետ կապված անտիգեններ՝ շրջանառվող իմունային համալիրներ (CIC): RAHA-ի համար օգտագործվում են համապատասխան հակամարմիններով զգայուն արյան կարմիր բջիջներ: Հիվանդի արյան շիճուկի ավելացումը, որը պարունակում է անտիգեններ, զգայուն էրիթրոցիտներին, որոնց վրա ամրացված են հակամարմինները, հանգեցնում է էրիթրոցիտների և իմունային բարդույթների սոսնձման (ագլյուտինացման):

Antiglobulin Coombs թեստ (R. Coombs ռեակցիա): Ամբողջական (երկվալենտ) հակամարմինները որոշվում են ուղղակի և պասիվ ագլյուտինացիոն ռեակցիաների միջոցով։ Թերի (միավալենտ, արգելափակող) հակամարմինները չեն հայտնաբերվում այս մեթոդներով, քանի որ, երբ դրանք միավորվում են անտիգենի հետ, նրանք արգելափակում են այն, բայց չեն կարող առաջացնել անտիգենի ագրեգացիա խոշոր կոնգլոմերատների մեջ: Անավարտ (արգելափակող) հակամարմիններն են, որոնցում գործում է միայն մեկ ակտիվ կենտրոն. երկրորդ ակտիվ կենտրոնն անհայտ պատճառով չի աշխատում. Անավարտ հակամարմինները հայտնաբերելու համար օգտագործվում է հատուկ Coombs ռեակցիա (նկ. 72): Ռեակցիան ներառում է՝ հիվանդի շիճուկ, որում որոշվում են թերի հակամարմինները, կորպուսկուլյար հակագեն-ախտորոշիչ, հակագլոբուլինային շիճուկ, որը պարունակում է հակամարմիններ մարդու գլոբուլինին: Ռեակցիան տեղի է ունենում երկու փուլով.

Անտիգենի փոխազդեցությունը թերի հակամարմինների հետ: Տեսանելի դրսեւորումներ չկան։ Առաջին փուլն ավարտվում է հիվանդի մնացած շիճուկից անտիգենը լվանալով:

Անտիգլոբուլինային շիճուկի փոխազդեցությունը, որը ստացվել է կենդանու մարդու գլոբուլինով իմունիզացիայի արդյունքում անտիգենի վրա ներծծված թերի հակամարմինների հետ: Հակագլոբուլինային հակամարմինները երկվալենտ լինելու պատճառով կապում են առանձին AG + համալիրների երկու միավալենտ հակամարմիններ։ թերի հակամարմին, ինչը հանգեցնում է դրանց սոսնձման և տեսանելի նստվածքի առաջացմանը։

Ագլյուտինացիան միկրոբների կամ այլ բջիջների սոսնձումն ու նստեցումն է հակամարմինների ազդեցության տակ էլեկտրոլիտի առկայության դեպքում (նատրիումի քլորիդի իզոտոնիկ լուծույթ):Սոսնձված բակտերիաների (բջիջների) խմբերը կոչվում են ագլյուտինատ։ Ագլուտինացման ռեակցիայի համար անհրաժեշտ են հետևյալ բաղադրիչները.

1. Հակամարմիններ (ագլյուտինիններ), որոնք հայտնաբերված են հիվանդ կամ իմունային կենդանու շիճուկում։

2. Հակագեն - կենդանի կամ սպանված միկրոբների, կարմիր արյան բջիջների կամ այլ բջիջների կասեցում:

3. Իզոտոնիկ (0,9%) նատրիումի քլորիդի լուծույթ:

Սերոախտորոշման համար օգտագործվում է ագլյուտինացիոն թեստը որովայնային տիֆև պարատիֆային տենդ (Վիդալի ռեակցիա), բրուցելոզ (Ռայթի և Հեդլսոնի ռեակցիա), տուլարեմիա և այլն։ Հակամարմինը հիվանդի շիճուկն է, իսկ անտիգենը՝ հայտնի միկրոբ։ Մանրէների կամ այլ բջիջների նույնականացման ժամանակ դրանց կասեցումն օգտագործվում է որպես հակագեն, իսկ հայտնի իմունային շիճուկը՝ որպես հակամարմին: Այս ռեակցիան լայնորեն կիրառվում է ախտորոշման համար աղիքային վարակներ, կապույտ հազ և այլն։

ՌՀ բեմադրության մեթոդներ

Մոտավոր ՀՀ ապակու վրա

Տեղակայված ՀՀ

(ծավալի մեթոդ)

Կոագգլուտինացման ռեակցիա

Ապակու վրա բացված ՀՀ (սերոիդենտիֆիկացում)

Ագլյուտինացման ռեակցիա ապակու վրա.Երկու կաթիլ սպեցիֆիկ (ներծծված) շիճուկ և մեկ կաթիլ նատրիումի քլորիդի իզոտոնիկ լուծույթ կիրառվում են ճարպազուրկ ապակե սլայդի վրա: Չկլանված շիճուկները նախապես նոսրացվում են 1:5 - 1:100 հարաբերակցությամբ: Կաթիլները պետք է քսվեն ապակու վրա, որպեսզի նրանց միջև հեռավորություն լինի: Մշակույթը մանրակրկիտ մանրացնում են ապակու վրա օղակով կամ պիպետտով, այնուհետև ավելացնում են նատրիումի քլորիդի իզոտոնիկ լուծույթի մի կաթիլ և շիճուկի կաթիլներից մեկին՝ խառնելով յուրաքանչյուրը մինչև միատարր կախույթի ձևավորումը: Առանց կուլտուրայի շիճուկի կաթիլը շիճուկի հսկողություն է:

Ուշադրություն.Դուք չեք կարող մշակույթը շիճուկից տեղափոխել մի կաթիլ նատրիումի քլորիդի իզոտոնիկ լուծույթ, որը ծառայում է որպես հակագենի հսկողություն: Ռեակցիան տեղի է ունենում սենյակային ջերմաստիճանում 1-3 րոպե։ Եթե ​​շիճուկի կոնտրոլը մնում է թափանցիկ, անտիգենային հսկողության մեջ նկատվում է միատեսակ պղտորություն, և կաթիլում հայտնվում են ագլյուտինատային փաթիլներ, որտեղ մշակույթը խառնվում է շիճուկի հետ թափանցիկ հեղուկի ֆոնի վրա, ռեակցիայի արդյունքը համարվում է դրական:

Ախտորոշիչ ֆիզիոլոգիական

շիճուկ + կուլտուրայի լուծույթ + կուլտուրա

Մանրամասն ագլյուտինացիոն ռեակցիա (ծավալային մեթոդ):Պատրաստվում են շիճուկի սերիական, առավել հաճախ կրկնակի նոսրացումներ։ Մեթոդը կոչվում է ծավալային։ Արյան շիճուկում հակամարմինների տիտրը որոշելու համար վերցրեք 6 խողովակ։ Լցնել 1 մլ սկզբնական շիճուկ 1:50 նոսրացում առաջին փորձանոթի մեջ և ավելացնել 1 մլ աղի լուծույթ բոլոր 6 փորձանոթների մեջ՝ օգտագործելով աստիճանավոր պիպետ: Առաջին փորձանոթը կտա 1:100 շիճուկի նոսրացում 2 մլ ծավալով: Առաջին փորձանոթից 1 մլ տեղափոխում ենք երկրորդ փորձանոթ, որտեղ նոսրացումը դառնում է 1:200: Այսպիսով, կատարեք շիճուկի սերիական նոսրացումներ առաջին 5 փորձանոթներում (1:100, 1:200, 1:400, 1:800, 1:1600): Հինգերորդ փորձանոթից 1 մլ լցնել ախտահանիչ լուծույթի մեջ։ Բոլոր 6 փորձանոթներին ավելացրեք 2 կաթիլ դիագնոստիկ: Վեցերորդ խողովակը կուլտուրայի հսկողություն է, քանի որ այն պարունակում է միայն աղի լուծույթ և դիագնոստիկ:

Նման վերահսկողությունն անհրաժեշտ է մշակույթի ինքնաբուխ ագլյուտինացիան բացառելու համար: Խողովակները թափահարում են և 2 ժամով դնում 37°C ջերմաստիճանի թերմոստատի մեջ, այնուհետև մեկ օր թողնում սենյակային ջերմաստիճանում, որից հետո գրանցվում են ագլյուտինացիայի ռեակցիայի արդյունքները։ Կյանքի առաջին ամիսների երեխաների շիճուկների հետ ագլյուտինացիոն ռեակցիա իրականացնելիս, հակամարմինների ձևավորման ֆունկցիոնալ թերարժեքության պատճառով, անհրաժեշտ է բացահայտել հակամարմինների ավելի ցածր տիտրերը, ինչը հաշվի է առնվում շիճուկը նոսրացնելիս: Շիճուկի սկզբնական նոսրացումը 1:25 է: Առաջին փորձանոթում ստացվում է նոսրացում 1։50, ապա՝ 1։100 և այլն։

ժամը դրական արդյունքռեակցիաները փորձանոթներում, կպչուն բջիջներում հատիկների կամ փաթիլների տեսքով տեսանելի են թափանցիկ հեղուկի ֆոնի վրա։Ագլյուտինատը աստիճանաբար նստում է հատակը՝ «հովանոցի» տեսքով, իսկ նստվածքի վերևում գտնվող հեղուկը դառնում է թափանցիկ։ Հակագենի հսկողությունը միատեսակ պղտոր է:

Ելնելով նստվածքի բնույթից՝ առանձնանում են մանր և խոշորահատիկ (շերտավոր) ագլյուտինացիան։ O-sera-ի հետ աշխատելիս ստացվում է մանրահատիկ ագլյուտինացիա։ Կոպիտ հատիկավոր - երբ շարժական մանրէները փոխազդում են դրոշակակիր H-շիճուկների հետ: Այն առաջանում է ավելի արագ, քան մանրահատիկ, և ստացված նստվածքը շատ ազատ է և հեշտությամբ կոտրվում է:

Ռեակցիայի ինտենսիվությունը արտահայտվում է հետևյալ կերպ.

Բոլոր բջիջները նստել են, փորձանոթի հեղուկը լիովին թափանցիկ է։ Ռեակցիայի արդյունքը կտրուկ դրական է.

Նստվածքն ավելի քիչ է, հեղուկի ամբողջական մաքրում չկա։ Ռեակցիայի արդյունքը դրական է.

Նստվածքն էլ ավելի քիչ է, հեղուկն ավելի ամպամած է։ Ռեակցիայի արդյունքը կասկածելի է.

Փորձանոթի հատակին մի փոքր նստվածք կա, հեղուկը պղտոր է։ Կասկածելի ռեակցիայի արդյունք;

Նստվածք չկա, հեղուկը միատեսակ պղտոր է, ինչպես հակագենի կոնտրոլում։ Բացասական ռեակցիայի արդյունք

Ագլյուտինացման ռեակցիա Ագլյուտինացման ռեակցիա

(ՀՀ) - նույնականացման մեթոդ և քանակականացում Ag և At՝ հիմնվելով անզեն աչքով տեսանելի ագլոմերատներ ձևավորելու իրենց կարողության վրա: Վարակիչ հիվանդությունների բաժանմունքում։ հիվանդությունների կամ այլ նպատակների համար օգտագործվում է անհայտ միկրոբների և բջիջների նույնականացման, արյան և այլ հեղուկների մեջ Ab-ի առկայությունը և քանակը որոշելու համար: Որոշման սկզբունքը հիմնված է Ag-ի և Ab-ի փոխազդեցության առանձնահատկությունների վրա և բաղկացած է անհայտից հայտնիը գտնելուց: ՀՀ-ի համար կան բազմաթիվ տարբերակներ՝ քանակական և որակական, փորձանոթային և ապակի, ծավալային և կաթիլային, պայմանական, արագացված և էքսպրես մեթոդներ։ RA բեմադրելու համար անհրաժեշտ է՝ 1) ս-կա արյուն.Բակտերիաների (var) տեսակի որոշման տարբերակում օգտագործվում են արդյունաբերական ագլյուտինացիոն թեստեր՝ արտադրված ճագարների իմունիզացիայի միջոցով։ Աբի տեսակի որոշման տարբերակում թեստից արյան նմուշ են վերցվում։ մարդիկ կամ կենդանիներ. Լուծույթը պետք է լինի ստերիլ և առանց կասեցված մասնիկների: Պատրաստեք հիմնական նոսրացումը աղի լուծույթում: Այն պետք է լինի 2-4 անգամ ցածր այս հիվանդության ախտորոշիչ տիտրից; 2) Ագ.Աբ տիպի որոշմամբ ռեակցիայի տարբերակում օգտագործվում են արդյունաբերական ախտորոշիչ փաթեթներ. Ag-ի որոշման տարբերակում ախտորոշիչները պատրաստվում են ինքնուրույն 1-3 միլիարդ կախոցի տեսքով 18-20-ժամյա ագարի (ավելի հաճախ արգանակ) փորձարկման աղի լուծույթում: միկրոբն ապաակտիվացված է 70°C ջրային բաղնիքում 1 ժամ տաքացնելով կամ 37°C-ում 24-ժամյա ինկուբացիայից ֆորմալդեհիդով (վերջնական կոնցենտրացիան 0,2%); 3) էլեկտրոլիտ աղի լուծույթի տեսքով:Բեմադրության տեխնիկա ծավալային սերիական խողովակՀՀ-ն որոշել Ab titer-ը s-ki-ում. s-ki-ի հիմնական նոսրացումից պատրաստվում են աշխատանքային նոսրացումների մի քանի շարք: Տողերի քանակը կախված է փորձի մեջ ընդունված ախտորոշիչների քանակից, քանակը և նոսրացման գործակիցները որոշվում են կասկածելի հիվանդության ախտորոշիչ տիտրով: Շարքը պետք է առնվազն պարունակի նոսրացում, որը համապատասխանում է ախտորոշիչ Ab տիտրին, երկու նոսրացում ներքևում և երկու նոսրացում դրա վերևում: օրինակ, եթե ախտորոշիչ տիտրը 1:100 է, ապա ՌԱ բեմադրման ծավալային մեթոդով պետք է պատրաստել հետևյալ նոսրացումները՝ 1:25, 1:50, 1:100, 1:200, 1"400, կաթիլային. մեթոդով, առաջին նոսրացումը (1:25) անհրաժեշտ չէ, բայց անհրաժեշտ է մեկ այլ ավելի բարձր նոսրացում՝ 1:800: գիտական ​​հետազոտություն s-ku-ն տիտրվում է բացասական ռեակցիայի: Այն նոսրացվում է հետևյալ կերպ. բոլոր փորձանոթների մեջ լցնում են 0,25 մլ աղի լուծույթ, բացառությամբ 1-ին, երբ ռեակցիան իրականացվում է 0,5 մլ ծավալով, և 0,5 մլ, երբ ռեակցիան իրականացվում է 1 ծավալով։ մլ. 1-ին և 2-րդ փորձանոթների մեջ լցնել 0,25 (0,5) մլ հիմնական նոսրացում, 2-րդ փորձանոթից կտրված ծավալի մեջ և բուծման ս-կեւ ավելացել է 2 անգամ, 0,25 (0,5) մլ տեղափոխվում է 3-րդ, 3-ից 4-րդ եւ այլն։ մինչև վերջինը, կտրվածքից 0,25 (0,5) մլ լցնում են ամեն ինչի մեջ՝ ծավալները հավասարակշռելու համար։ Յուրաքանչյուր նոսրացում իրականացվում է առանձին խողովակի միջոցով: Եթե ​​մի քանի դիագնոստիկա են վերցվում փորձի մեջ, ապա դրանցից յուրաքանչյուրի համար նույն կերպ պատրաստվում է նոսրացումների իր շարքը։ Փորձանոթի յուրաքանչյուր նոսրացմանը Diagnosticum ավելացվում է փորձանոթի ծավալին հավասար ծավալով, որի արդյունքում յուրաքանչյուր փորձանոթում նոսրացումը կրկնապատկվում է: Փորձը համապատասխանում է s-ki կոնտրոլին (0,25 - 0,5 մլ s-ki-ի հիմնական նոսրացման և նույն քանակությամբ աղի լուծույթի) և Ag կոնտրոլին (0,25 - 0,5 մլ դիագնոստիկ և նույն քանակությամբ աղի լուծույթ): Եթե ​​փորձի ժամանակ օգտագործվում են մի քանի ախտորոշիչներ, ապա յուրաքանչյուրն ունի իր հակագենային հսկողությունը: Փորձանոթներով դարակը լավ թափահարում են և տեղադրում 37°C ջերմաստիճանի թերմոստատի մեջ 4 ժամ, այնուհետև թողնում սենյակային ջերմաստիճանում մինչև հաջորդ օրը, որից հետո PA-ն գրանցվում է՝ ելնելով նստվածքի քանակից և մաքրման աստիճանից: հեղուկը։ Այս ցուցանիշների որոշումը, կախված ագլյուտինատների բնույթից, իրականացվում է անզեն աչքով՝ մուգ ֆոնի վրա, ագլյուտինոսկոպով կամ մանրադիտակի հայելու գոգավոր մակերեսի վրա։ Հաշվապահական հաշվառումը սկսվում է հսկիչներից. C հսկողությունը պետք է լինի թափանցիկ, Ag-ը պետք է լինի միատեսակ պղտոր (խողովակը թափահարելուց հետո): Եթե ​​հսկիչները լավ են, հաստատեք ագլյուտինացիայի առկայությունը և աստիճանը բոլոր փորձանոթներում, որոնք նշանակված են պլյուսներով. մեծ նստվածք և հեղուկի ամբողջական մաքրում - 4 պլյուս; մեծ նստվածք և հեղուկի թերի մաքրում - 3 պլյուս; նկատելի նստվածքը և հեղուկի նկատելի մաքրումը 2 պլյուս են: Դրանից հետո որոշվում է տիտրը. ամենաբարձր նոսրացումը առնվազն 2 պլյուս ագլյուտինացիայի ինտենսիվությամբ: Տիտրային հետազոտություն s-ki-ն համեմատվում է այս հիվանդության ախտորոշիչ տիտրի հետ: Եթե ​​տիտրը հետազոտվի. s-ki-ն ախտորոշիչ արժեքից 2 անգամ ցածր է, ռեակցիան գնահատվում է որպես կասկածելի. եթե տիտրը հավասար է ախտորոշիչ - ինչպեսթույլ դրական; եթե 2-4 անգամ ավելի է, ապա համարվում է դրական, եթե 8 կամ ավելի անգամ՝ կտրուկ դրական։ Աբի լայն տարածումով առողջ մարդիկՌԱ-ն գնահատելու համար օգտագործվում է Աբ տիտրի բարձրացում։ Սերիական ՀՀ-ում Ar-ի տեսակը որոշելու համար տողերի թիվը պետք է համապատասխանի նույնականացման համար վերցված թվին. ախտորոշիչ թեստեր. Ախտորոշիչ թեստի հիմնական նոսրացումից Աբ տիտրը որոշելու համար պատրաստվում են մի շարք հաջորդական երկակի նոսրացումներ, ինչպես ՀՀ-ում: Նոսրացման գործակիցները կախված են ագլյուտինացման թեստի տիտրից: Փորձի ժամանակ անհրաժեշտ է թեստի տիտրին հավասար նոսրացման առկայությունը, ինչպես նաև դրանից 2, 4, 6, 8 անգամ ցածր: Օրինակ, եթե Ախտորոշիչ թեստի տիտրը 1 3200 է, այնուհետև պետք է օգտագործել նոսրացումներ 1 3200, 1 1600, 1 800, 1 400, 1 200 Փորձարկված Ag-ի նույն ծավալը ավելացվում է թեստի նոսրացումներին, արդյունքում՝ նոսրացում: թեստն ավելանում է 2 անգամ։ Փորձին ավելացվում են թեստի 2 հսկիչ և Ag։ Եթե փորձին մի քանի s-k ներգրավված է, ապա դրանցից յուրաքանչյուրը իր վերահսկողության կարիքն ունի։ Ռեակցիայի ավարտից հետո ստենդը ուժեղ թափահարում և տեղադրում են։ 37 ° C ջերմաստիճանում թերմոստատում: Արդյունքները հաշվի են առնվում ինչպես նկարագրված է վերևում: Ռեակցիայի գնահատումն ունի առանձնահատկություններ: Հետազոտության համապատասխանության վերաբերյալ եզրակացություն անելու համար: Փորձի մեջ ընդունված Ag, ռեակցիայի տիտրը պետք է համապատասխանի ստանդարտ ախտորոշիչ թեստի տիտրի առնվազն կեսին: 1 4 և ցածր տիտրերը համարվում են խմբային ռեակցիա: Կաթել մդՀՀ-ի փուլավորումը տարբերվում է ծավալայինից նրանով, որ s-ku-ն նոսրացվում է 1 մլ ծավալով, Ag օգտագործվում է ավելի բարձր կոնցենտրացիայով (10 մլրդ/մլ) և ավելացվում է 1. - 2 կաթիլներ փորձանոթի մեջ Ag ավելացնելուց հետո դեղամիջոցի նոսրացումը համարվում է անփոփոխ, հակառակ դեպքում սահմանման, գրանցման և գնահատման եղանակը նման է ծավալային մեթոդին:

(Աղբյուր՝ Dictionary of Microbiology Terms)

Ագլյուտինացման ռեակցիա (լատ. ագլյուտինացիա- սոսնձում) - դիակների (բակտերիաներ, կարմիր արյան բջիջներ և այլն) սոսնձում հակամարմիններով էլեկտրոլիտների առկայության դեպքում:

Ագլյուտինացման ռեակցիադրսևորվում է փաթիլների կամ նստվածքի տեսքով, որը բաղկացած է հակամարմիններով «սոսնձված» դիակներից (օրինակ՝ բակտերիաներից) (նկ. 7.37): Ագլյուտինացման ռեակցիան օգտագործվում է. որոշելու հիվանդից մեկուսացված հարուցիչը. հիվանդի արյան շիճուկում հակամարմինների որոշում; արյան խմբերի որոշում.

Բրինձ. 7.37 ա, բ. Ագլյուտինացման ռեակցիա հետIgM- հակամարմիններ (ա) ևIgG- հակամարմիններ (բ)

1. Հիվանդից մեկուսացված հարուցչի որոշում Մոտավոր ռեակցիաագլյուտինացիա ապակու վրա (նկ. 7.38): Հիվանդից մեկուսացված բակտերիաների կասեցումը ավելացվում է ագլյուտինացնող շիճուկի կաթիլին (1:20 նոսրացում): Առաջանում է ճկուն նստվածք։

Բրինձ. 7.38.

Ընդարձակ ագլյուտինացիոն ռեակցիա հիվանդից մեկուսացված պաթոգենով (նկ. 7.39): Հիվանդից մեկուսացված բակտերիաների կասեցումը ավելացվում է ագլուտինացնող շիճուկի նոսրացումներին:

Բրինձ. 52

2. Հիվանդի արյան շիճուկում հակամարմինների որոշում
Մանրամասն ագլյուտինացիոն ռեակցիա հիվանդի արյան շիճուկով (նկ. 7.39): Diagnosticum-ը ավելացվում է հիվանդի շիճուկի նոսրացումներին:
- O-diagnosticum-ով (ջերմությունից սպանված բակտերիաներ, որոնք պահպանում են O-անտիգենը) ագլյուտինացիան տեղի է ունենում մանրահատիկ ագլյուտինացիայի տեսքով:
- Ագլյուտինացիան H-diagnosticum-ով (մանրէներ, որոնք սպանվում են ֆորմալդեհիդով, պահպանելով դրոշակակիր H-հակագինը) մեծ է և տեղի է ունենում ավելի արագ:
3. Ագլյուտինացիոն ռեակցիա արյան խմբերի որոշման համարԱրյան խմբերը որոշելու համար ագլյուտինացիոն ռեակցիան օգտագործվում է ABO համակարգը հաստատելու համար (Աղյուսակ բ)՝ օգտագործելով էրիթրոցիտների ագլյուտինացիա իմունային շիճուկի հակամարմիններով՝ արյան A (I), B (III) անտիգենների դեմ: Վերահսկիչն է՝ շիճուկ, որը չի պարունակում հակամարմիններ, այսինքն. շիճուկ AB (IV) արյան խումբ; հակագեններ, որոնք պարունակվում են A (II), B (III) խմբերի կարմիր արյան բջիջներում: Բացասական վերահսկողությունը չի պարունակում անտիգեններ, այսինքն՝ օգտագործվում են O (I) խմբի էրիթրոցիտներ:

Աղյուսակ 7.6. ABO արյան խմբերի որոշում

Ռեակցիայի արդյունքները		Խումբ
		պատկանող
		հետազոտվել է արյուն
կարմիր արյան բջիջների հետ	շիճուկ (պլազմա)
ստանդարտ	ստանդարտով
շիճուկներ