कॉम्ब्स प्रतिक्रिया प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष है। नवजात शिशु के हेमोलिटिक रोग के निदान के लिए कॉम्ब्स परीक्षण

कूम्ब्स परीक्षण एक विधि है प्रयोगशाला अनुसंधान, रक्तगुल्म को प्रभावित करके बनाया गया। यह इम्युनोग्लोबुलिन और एंजाइम तत्वों के प्रति एंटीबॉडी की संवेदनशीलता के साथ-साथ सी3 या एलजी से लेपित एरिथ्रोसाइट्स को एग्लूटीनेट करने की उनकी क्षमता पर आधारित है।

प्रत्यक्ष कॉम्ब्स निदान

कोशिकाओं के बाहर स्थापित एंटीबॉडी या पूरक घटकों का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है। प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण निम्नानुसार किया जाता है।

ऐसे नमूने का उपयोग

डायरेक्ट कॉम्ब्स डायग्नोसिस का उपयोग कुछ मामलों में किया जाता है, जैसे:

• आधान प्रभाव;
• ऑटोइम्यून हेमोलिसिस;
• औषधीय हीमोलिटिक अरक्तता.

अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण

यह निदान सीरम में कोशिकाओं के प्रति एंटीबॉडी का पता लगाना संभव बनाता है, जिसे एक नियम के रूप में, टाइप 0 दाता लाल रक्त कोशिकाओं के साथ इनक्यूबेट किया जाता है, और फिर एक सीधा परीक्षण किया जाता है। आवेदन करना अप्रत्यक्ष निदाननिम्नलिखित मामलों में कॉम्ब्स:

विश्लेषण की तैयारी कैसे करें

परीक्षा की तैयारी के लिए कुछ नियम हैं।

1. यदि रोगी नवजात है, तो माता-पिता को यह जानना होगा कि परीक्षण नवजात शिशु के हेमोलिटिक रोग का निदान करने में मदद करेगा।
2. यदि रोगी को हेमोलिटिक एनीमिया का संदेह है, तो उसे समझाया जाना चाहिए कि विश्लेषण उसे यह पता लगाने की अनुमति देगा कि क्या यह सुरक्षात्मक विकारों, दवाओं या अन्य कारकों के कारण होता है।
3. कॉम्ब्स परीक्षण, प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष रूप से, पोषण या आहार पर कोई प्रतिबंध नहीं लगाता है।
4. रोगी को सूचित करना आवश्यक है कि जांच के लिए नस से रक्त लेने की आवश्यकता होगी, और उसे यह भी बताना होगा कि वेनिपंक्चर कब किया जाएगा।
5. आपको इस संभावना के बारे में भी आगाह किया जाना चाहिए असहजताबांह पर पट्टी लगाने की अवधि और प्रक्रिया के दौरान ही।
6. जो दवाएं नमूना परिणाम को प्रभावित कर सकती हैं उन्हें बंद कर देना चाहिए।

इन दवाओं में शामिल हैं:

• "स्ट्रेप्टोमाइसिन";
• "मेथिल्डोपा";
• "प्रोकेनामाइड";
• सल्फोनामाइड्स;
• "मेलफ़लान";
• "क्विनिडाइन";
• "रिफ़ैम्पिन";
• "आइसोनियाज़िड";
• सेफलोस्पोरिन;
• "हाइड्रालज़ीन";
• "क्लोरप्रोमेज़िन";
• "लेवोडोपा";
• "टेट्रासाइक्लिन";
• "डिफेनिलहाइडेंटोइन";
• "एथोसुक्सिमाइड";
• "पेनिसिलिन";
• मेफ़ानामिक एसिड।

रक्त का नमूना सुबह खाली पेट लिया जाता है।

आयोजन कैसे होता है

कॉम्ब्स परीक्षण निम्नलिखित क्रम में किया जाता है:

1. किसी वयस्क रोगी में निदान करते समय, वेनिपंक्चर के बाद, रक्त को EDTA (एथिलीनडायमिनेटेट्रासेटेट) के साथ ट्यूबों में ले जाया जाता है।
2. नवजात शिशु का रक्त गर्भनाल से EDTA युक्त बीकर में निकाला जाता है।
3. रक्तस्राव बंद होने तक पंचर क्षेत्र को रुई के फाहे से दबाएं।
4. यदि वेनिपंक्चर स्थल पर चोट दिखाई देती है, तो गर्म सेक निर्धारित किया जाता है।
5. रक्त संग्रह के बाद, रोगी को दवाएँ लेने के लिए वापस जाने की अनुमति दी जाती है।
6. नवजात शिशु के माता-पिता को सूचित करना आवश्यक है कि एनीमिया की गतिशीलता की निगरानी के लिए माध्यमिक विश्लेषण की आवश्यकता हो सकती है।

कॉम्ब्स परीक्षण के लाभ

इस तरह के शोध के कुछ फायदे हैं, अर्थात्:

विश्लेषण के नुकसान

सकारात्मक कॉम्ब्स परीक्षण एक श्रम-गहन परीक्षा पद्धति है, जिसके निष्पादन की एक विशिष्ट सटीकता की आवश्यकता होती है। इसका उपयोग करते समय, आपको कुछ कठिनाइयों का सामना करना पड़ सकता है, विशेष रूप से कमजोर सकारात्मक प्रभावों की व्याख्या से संबंधित।

यह स्थापित किया गया है कि कॉम्ब्स परीक्षणों के उत्पादन के दौरान गलत नकारात्मक या कमजोर सकारात्मक प्रतिक्रियाएं असंतोषजनक रूप से सक्रिय सेल धोने, सीरम अवशेषों द्वारा एंटीग्लोबुलिन अभिकर्मक को कमजोर करने के साथ-साथ गैर-वसा वाले बाहरी के साथ कनेक्शन के परिणाम हो सकती हैं, जिस पर एंटीग्लोबुलिन हो सकता है संलग्न करें, जिससे इसकी प्रभावशीलता समाप्त हो जाती है।

कॉम्ब्स परीक्षण में एक और खामी है - एंटीग्लोबुलिन अभिकर्मक की कम स्थिरता, जिसका अधिग्रहण और भंडारण व्यक्तिगत विशेषताएं, जो इसी तरह हेमग्लूटीनेशन पर एंटीग्लोबुलिन सीरम के प्रभाव का संख्यात्मक रूप से आकलन करना मुश्किल बना देता है।

जांच के दौरान जिन बीमारियों का पता लगाया जा सकता है

कॉम्ब्स डायग्नोस्टिक्स कुछ प्रकार की बीमारियों का पता लगाना संभव बनाता है, जैसे:

• नवजात शिशु की हेमोलिटिक अस्वस्थता;
• विभिन्न आधान प्रतिक्रियाएं;
• ऑटोइम्यून हेमोलिसिस;
• दवा-प्रेरित हेमोलिटिक एनीमिया।

आज, कॉम्ब्स परीक्षण को वयस्कों और नवजात शिशुओं दोनों के लिए काफी लोकप्रिय रक्त परीक्षण प्रणाली माना जाता है। इससे कई अलग-अलग बीमारियों की पहचान करना संभव हो जाता है।

एंटीबॉडी, एरिथ्रोसाइट्स की सतह पर स्थित, या तो स्थिर या मुक्त अवस्था में हो सकता है रक्त प्लाज़्मा. एंटीबॉडी की स्थिति के आधार पर, प्रत्यक्ष या अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स प्रतिक्रिया की जाती है। यदि यह मानने का कारण है कि एंटीबॉडी लाल रक्त कोशिकाओं की सतह पर स्थिर हैं, तो प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण किया जाता है। इस मामले में, परीक्षण एक चरण में होता है - जोड़ना एंटीग्लोबुलिन सीरम. यदि लाल रक्त कोशिकाओं की सतह पर अपूर्ण एंटीबॉडी मौजूद हैं, भागों का जुड़नालाल रक्त कोशिकाओं

अप्रत्यक्ष प्रतिक्रिया

अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स प्रतिक्रिया 2 चरणों में होती है। सबसे पहले आपको कृत्रिम रूप से लागू करने की आवश्यकता है संवेदीकरणलाल रक्त कोशिकाओं ऐसा करने के लिए, लाल रक्त कोशिकाओं और परीक्षण किए जा रहे रक्त सीरम को इनक्यूबेट किया जाता है, जिससे एंटीबॉडी लाल रक्त कोशिकाओं की सतह पर स्थिर हो जाती हैं। जिसके बाद कॉम्ब्स परीक्षण का दूसरा चरण किया जाता है - एंटीग्लोबुलिन सीरम जोड़ना।

शीघ्र प्रतिक्रिया - आरपी (लैटिन प्रिसिपिलो से अवक्षेप तक) बादल के रूप में एंटीबॉडी के साथ घुलनशील आणविक एंटीजन के एक परिसर का गठन और अवक्षेपण है, जिसे कहा जाता है तलछट. यह तब बनता है जब एंटीजन और एंटीबॉडी समान मात्रा में मिश्रित होते हैं; उनमें से एक की अधिकता प्रतिरक्षा परिसर के गठन के स्तर को कम कर देती है। अवक्षेपण प्रतिक्रिया परीक्षण ट्यूबों (रिंग अवक्षेपण प्रतिक्रिया), जैल, पोषक तत्व मीडिया आदि में की जाती है। अर्ध-तरल अगर या एगरोज़ जेल में अवक्षेपण प्रतिक्रिया की किस्में, डबल इम्युनोडिफ्यूजन द्वारा ऑचटरलोनी, रेडिएप इम्यूनोडिफ्यूजन, इम्यूनोएपेक्ट्रोफोरेसिसऔर आदि।

वलय अवक्षेपण प्रतिक्रिया. प्रतिक्रिया संकीर्ण अवक्षेपण नलिकाओं में की जाती है: एक घुलनशील एंटीजन को प्रतिरक्षा सीरम पर स्तरित किया जाता है। एंटीजन और एंटीबॉडी के इष्टतम अनुपात के साथ, एक अपारदर्शी अवक्षेपित वलय. यदि उबले हुए और फ़िल्टर किए गए ऊतक के अर्क को प्रतिक्रिया में एंटीजन के रूप में उपयोग किया जाता है, तो इस प्रतिक्रिया को पहली थर्मोप्रेसिपिटेशन प्रतिक्रिया (वह प्रतिक्रिया जिसमें एंथ्रेक्स हैप्टेन का पता लगाया जाता है) कहा जाता है।
ऑचटरलोनी डबल इम्युनोडिफ्यूजन प्रतिक्रिया. प्रतिक्रिया स्थापित करने के लिए पिघले हुए अगर जेल की एक पतली परत कांच की प्लेट पर डाली जाती है और सख्त होने के बाद इसमें छेद कर दिए जाते हैं। एंटीजन और प्रतिरक्षा सीरा को जेल के कुओं में अलग-अलग रखा जाता है, जो एक दूसरे की ओर फैलते हैं। मिलन बिंदु पर, समान अनुपात में, वे एक सफेद धारी के रूप में अवक्षेप बनाते हैं। बहुघटक प्रणालियों में, एंटीजन और एंटीबॉडी वाले कुओं के बीच अवक्षेप की कई रेखाएँ दिखाई देती हैं; समान एजी में, अवक्षेप रेखाएं विलीन हो जाती हैं; गैर-समान एजी में वे प्रतिच्छेद करते हैं।
रेडियल इम्युनोडिफ्यूजन प्रतिक्रिया।पिघले हुए अगर जेल के साथ प्रतिरक्षा सीरम को गिलास पर समान रूप से डाला जाता है। जेल में जमने के बाद, कुएँ बनाए जाते हैं जिनमें एंटीजन को विभिन्न तनुकरणों में रखा जाता है। एंटीजन, जेल में फैलकर, एंटीबॉडी वाले कुओं के चारों ओर अंगूठी के आकार के वर्षा क्षेत्र बनाता है। अवक्षेपण वलय का व्यास प्रतिजन सांद्रता के समानुपाती होता है। प्रतिक्रिया का उपयोग रक्त सीरम में इम्युनोग्लोबुलिन निर्धारित करने के लिए किया जाता है विभिन्न वर्ग, पूरक प्रणाली के घटक, आदि।
इम्यूनोइलेक्ट्रोफोरेसिस- वैद्युतकणसंचलन और इम्यूनोप्रेसिपिटेशन का एक संयोजन: एंटीजन के मिश्रण को जेल के कुओं में पेश किया जाता है और वैद्युतकणसंचलन का उपयोग करके जेल में अलग किया जाता है, फिर इम्यूनोसेरम को वैद्युतकणसंचलन क्षेत्रों के समानांतर खांचे में जोड़ा जाता है, जिसके एंटीबॉडी जेल में फैल जाते हैं और एंटीजन के साथ "मिलन" स्थल पर अवक्षेपण रेखाएँ बनाएँ।
फ़्लोक्यूलेशन प्रतिक्रिया(रेमन के अनुसार) (लैटिन f1oecus से - ऊन के टुकड़े) - प्रतिक्रिया विष - एंटीटॉक्सिन या टॉक्सोइड - एंटीटॉक्सिन के दौरान एक टेस्ट ट्यूब में ओपेलेसेंस या फ्लोकुलेंट द्रव्यमान (इम्यूनोप्रेसिपिटेशन) की उपस्थिति। इसका उपयोग एंटीटॉक्सिक सीरम या टॉक्सोइड की गतिविधि को निर्धारित करने के लिए किया जाता है।

एचएलए टाइपिंग- मानव प्रमुख हिस्टोकम्पैटिबिलिटी कॉम्प्लेक्स - एचएलए कॉम्प्लेक्स का अध्ययन। इस गठन में गुणसूत्र 6 पर जीन का एक क्षेत्र शामिल है जो विभिन्न प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं में शामिल एचएलए एंटीजन को एनकोड करता है।

के लिए कार्य एचएलए टाइपिंगबहुत भिन्न हो सकते हैं - जैविक पहचान (एचएलए प्रकार माता-पिता के जीन के साथ विरासत में मिला है), पूर्वसूचना का निर्धारण विभिन्न रोग, अंग प्रत्यारोपण के लिए दाताओं का चयन - इसमें दाता और प्राप्तकर्ता के ऊतकों की एचएलए टाइपिंग के परिणामों की तुलना करना शामिल है। एचएलए टाइपिंग का उपयोग करके, यह निर्धारित किया जाता है कि बांझपन के मामलों का निदान करने के लिए हिस्टोकम्पैटिबिलिटी एंटीजन के संदर्भ में पति-पत्नी कितने समान या भिन्न हैं।

एचएलए टाइपिंग सुझाव देती है एचएलए बहुरूपता विश्लेषणऔर दो तरीकों से किया जाता है - सीरोलॉजिकल और आणविक आनुवंशिक। एचएलए टाइपिंग की क्लासिक सीरोलॉजिकल विधि माइक्रोलिम्फोसाइटोटॉक्सिक परीक्षण पर आधारित है, और आणविक विधि पीसीआर (पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन) का उपयोग करती है।

सीरम विज्ञानी एचएलए टाइपिंगपृथक कोशिका आबादी पर किया गया। प्रमुख हिस्टोकम्पैटिबिलिटी कॉम्प्लेक्स एंटीजन मुख्य रूप से लिम्फोसाइटों द्वारा ले जाए जाते हैं। इसलिए, टी लिम्फोसाइटों के निलंबन का उपयोग वर्ग I एंटीजन के मुख्य वाहक के रूप में किया जाता है, और बी लिम्फोसाइटों के निलंबन का उपयोग एचएलए वर्ग II एंटीजन को निर्धारित करने के लिए किया जाता है। पूरे रक्त से आवश्यक कोशिका आबादी को अलग करने के लिए, सेंट्रीफ्यूजेशन या इम्यूनोमैग्नेटिक पृथक्करण का उपयोग किया जाता है। ऐसा माना जाता है कि पहली विधि गलत-सकारात्मक डेटा का कारण बन सकती है, क्योंकि इसके परिणामस्वरूप कुछ कोशिकाएं मर जाती हैं। दूसरी विधि को अधिक विशिष्ट माना जाता है - 95% से अधिक कोशिकाएँ व्यवहार्य रहती हैं।

लेकिन लिम्फोसाइटोटॉक्सिक परीक्षण करने का आधार एचएलए टाइपिंगएक विशिष्ट सीरम है जिसमें एचएलए वर्ग I और II एंटीजन के विभिन्न एलील वैरिएंट के प्रति एंटीबॉडी होते हैं। एक सीरोलॉजिकल परीक्षण यह जांच कर एचएलए प्रकार का निर्धारण कर सकता है कि कौन सा सीरा लिम्फोसाइटों के साथ प्रतिक्रिया करता है और कौन सा नहीं।

यदि कोशिकाओं और सीरम के बीच प्रतिक्रिया होती है, तो इसका परिणाम कोशिका की सतह पर एक एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स का निर्माण होता है। पूरक युक्त समाधान जोड़ने के बाद, कोशिका लसीका और मृत्यु होती है। सीरोलॉजिकल एचएलए टाइपिंग टेस्ट का मूल्यांकन सकारात्मक (लाल प्रतिदीप्ति) और नकारात्मक (हरा प्रतिदीप्ति) प्रतिक्रियाओं का आकलन करने के लिए प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी या मृत कोशिकाओं के नाभिक को दागने के लिए चरण-विपरीत माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके किया जाता है। एचएलए टाइपिंग का परिणाम प्रतिक्रियाशील सीरा और एंटीजन के क्रॉस-रिएक्टिंग समूहों की विशिष्टता और साइटोटॉक्सिसिटी प्रतिक्रिया की तीव्रता को ध्यान में रखकर निकाला जाता है।

सीरोलॉजिकल के नुकसान एचएलए टाइपिंगक्रॉस-प्रतिक्रियाओं की उपस्थिति, कमजोर एंटीबॉडी संबंध या एचएलए एंटीजन की कम अभिव्यक्ति, कई एचएलए जीनों में प्रोटीन उत्पादों की अनुपस्थिति हैं।

अधिक आधुनिक, आणविक विधियाँ एचएलए टाइपिंगवे पहले से ही मानकीकृत सिंथेटिक नमूनों का उपयोग करते हैं जो ल्यूकोसाइट्स की सतह पर एंटीजन के साथ नहीं, बल्कि डीएनए के साथ प्रतिक्रिया करते हैं और सीधे संकेत देते हैं कि नमूने में कौन से एंटीजन मौजूद हैं। आणविक विधियों के लिए जीवित ल्यूकोसाइट्स की आवश्यकता नहीं होती है; मानव कोशिकाअध्ययन किया जा सकता है, और कुछ माइक्रोलीटर रक्त काम करने के लिए पर्याप्त है, या आप स्वयं को मौखिक म्यूकोसा से खुरचना तक सीमित कर सकते हैं।

आणविक आनुवंशिक एचएलए टाइपिंगपीसीआर विधि का उपयोग करता है, जिसका पहला चरण शुद्ध जीनोमिक डीएनए (संपूर्ण रक्त, ल्यूकोसाइट निलंबन, ऊतकों से) प्राप्त करना है।

फिर डीएनए नमूने की प्रतिलिपि बनाई जाती है - एक विशिष्ट एचएलए लोकस के लिए विशिष्ट प्राइमरों (लघु एकल-फंसे डीएनए) का उपयोग करके इन विट्रो में प्रवर्धित किया जाता है। प्रत्येक प्राइमर जोड़ी के सिरे एक विशिष्ट एलील के अनुरूप अद्वितीय अनुक्रम के सख्ती से पूरक होने चाहिए, अन्यथा प्रवर्धन नहीं होगा।

पीसीआर के बाद, बार-बार नकल के दौरान, बड़ी संख्या में डीएनए टुकड़े प्राप्त होते हैं, जिनका दृष्टिगत मूल्यांकन किया जा सकता है। ऐसा करने के लिए, प्रतिक्रिया मिश्रण को इलेक्ट्रोलिसिस या संकरण के अधीन किया जाता है, और क्या विशिष्ट प्रवर्धन हुआ है यह एक प्रोग्राम या तालिका का उपयोग करके निर्धारित किया जाता है। एचएलए टाइपिंग का परिणाम जीन और एलील स्तरों पर एक व्यापक रिपोर्ट के रूप में प्रस्तुत किया जाता है। प्रयुक्त नमूनों के मानकीकरण के कारण, आणविक एचएलए टाइपिंगअधिक सटीक रूप से सीरोलॉजिकल। इसके अलावा, यह अधिक जानकारी (अधिक नए डीएनए एलील) और भी बहुत कुछ प्रदान करता है उच्च स्तरइसका विवरण, क्योंकि यह न केवल एंटीजन, बल्कि एलील्स की भी पहचान करना संभव बनाता है, जो यह निर्धारित करते हैं कि कोशिका पर कौन सा एंटीजन मौजूद है।

प्रतिरक्षा लसीका प्रतिक्रिया.प्रतिक्रिया एरिथ्रोसाइट्स और बैक्टीरिया समेत कोशिकाओं के साथ प्रतिरक्षा परिसरों को बनाने के लिए विशिष्ट एंटीबॉडी की क्षमता पर आधारित होती है, जो शास्त्रीय मार्ग और सेल लसीका के साथ पूरक प्रणाली की सक्रियता की ओर ले जाती है। प्रतिरक्षा लसीका प्रतिक्रियाओं में से, हेमोलिसिस प्रतिक्रिया का सबसे अधिक उपयोग किया जाता है और बैक्टीरियोलिसिस प्रतिक्रिया का उपयोग शायद ही कभी किया जाता है (मुख्य रूप से हैजा और हैजा जैसे विब्रियोस के भेदभाव में)।

हेमोलिसिस प्रतिक्रिया.पूरक की उपस्थिति में एंटीबॉडी के साथ प्रतिक्रिया के प्रभाव में, हीमोग्लोबिन की रिहाई के कारण लाल रक्त कोशिकाओं का एक बादल निलंबन एक चमकदार लाल पारदर्शी तरल - "लाह रक्त" में बदल जाता है। डायग्नोस्टिक पूरक निर्धारण प्रतिक्रिया (एफएफआर) स्थापित करते समय, हेमोलिसिस प्रतिक्रिया का उपयोग संकेतक के रूप में किया जाता है: मुक्त पूरक की उपस्थिति या अनुपस्थिति (निर्धारण) का परीक्षण करने के लिए।

जेल में स्थानीय हेमोलिसिस प्रतिक्रिया(एर्न प्रतिक्रिया) हेमोलिसिस प्रतिक्रिया के प्रकारों में से एक है। यह आपको एंटीबॉडी बनाने वाली कोशिकाओं की संख्या निर्धारित करने की अनुमति देता है। एंटीबॉडी - हेमोलिसिन - स्रावित करने वाली कोशिकाओं की संख्या हेमोलिसिस सजीले टुकड़े की संख्या से निर्धारित होती है जो एरिथ्रोसाइट्स युक्त एगर जेल में दिखाई देती है, जो अध्ययन और पूरक लिम्फोइड ऊतक की कोशिकाओं का एक निलंबन है।

इम्यूनोफ्लोरेसेंस विधि

(आरआईएफ, इम्यूनोफ्लोरेसेंस प्रतिक्रिया) फ्लोरोक्रोम से संयुग्मित एबीएस (एजीएस) का उपयोग करके विशिष्ट एजी (एबीएस) का पता लगाने की एक विधि है। इसमें उच्च संवेदनशीलता और विशिष्टता है। संक्रमण के स्पष्ट निदान के लिए उपयोग किया जाता है। रोग (अनुसंधान सामग्री में रोगज़नक़ की पहचान), साथ ही एबी और सतह रिसेप्टर्स और ल्यूकोसाइट्स (इम्यूनोफेनोटाइपिंग) और अन्य कोशिकाओं के मार्करों के निर्धारण के लिए। प्रत्यक्ष I. एम.इसमें ऊतक के एक भाग का प्रसंस्करण या पैथोलॉजिकल सामग्री या माइक्रोबियल क्रस्ट से एक स्मीयर शामिल होता है जिसमें फ्लोरोक्रोम के साथ संयुग्मित विशिष्ट एबीएस होता है; तैयारी को अनबाउंड एब्स से मुक्त करने के लिए धोया जाता है और एक प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप के तहत जांच की जाती है। सकारात्मक मामलों में, वस्तु की परिधि के आसपास एक चमकता हुआ प्रतिरक्षा परिसर दिखाई देता है। गैर विशिष्ट ल्यूमिनसेंस को बाहर करने के लिए नियंत्रण आवश्यक है। पर अप्रत्यक्ष. उन्हें।पहले चरण में, एक ऊतक अनुभाग या स्मीयर को गैर-फ्लोरोसेंट विशिष्ट एजेंट के साथ इलाज किया जाता है, दूसरे में - जानवर के -ग्लोबुलिन के खिलाफ एक ल्यूमिनसेंट एजेंट के साथ जिसका उपयोग पहले चरण में किया गया था। सकारात्मक स्थिति में, एक चमकदार कॉम्प्लेक्स बनता है, जिसमें Ar, At और At बनाम At (सैंडविच विधि) शामिल होते हैं। फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप के अलावा, कोशिकाओं की फेनोटाइपिंग करते समय आरआईएफ को भी ध्यान में रखा जाता है। लेजर सेल सॉर्टर .

फ़्लो साइटॉमेट्री- किसी कोशिका के मापदंडों, उसके अंगों और उसमें होने वाली प्रक्रियाओं के ऑप्टिकल माप की एक विधि।

तकनीक में लेजर बीम से प्रकाश के प्रकीर्णन का पता लगाना शामिल है क्योंकि एक कोशिका तरल की धारा में इसके माध्यम से गुजरती है, और प्रकाश फैलाव की डिग्री किसी को कोशिका के आकार और संरचना का अंदाजा लगाने की अनुमति देती है। इसके अलावा, विश्लेषण उन रासायनिक यौगिकों के प्रतिदीप्ति के स्तर को ध्यान में रखता है जो कोशिका का हिस्सा हैं (ऑटोफ्लोरेसेंस) या फ्लो साइटोमेट्री से पहले नमूने में जोड़े गए हैं।

सेल सस्पेंशन, फ्लोरोसेंट मोनोक्लोनल एंटीबॉडी या फ्लोरोसेंट रंगों के साथ पूर्व-लेबल, प्रवाह सेल से गुजरने वाले द्रव प्रवाह में प्रवेश करता है। स्थितियों का चयन इस प्रकार किया जाता है कि कोशिकाएँ तथाकथित के कारण एक के बाद एक पंक्तिबद्ध हो जाती हैं। जेट में जेट का हाइड्रोडायनामिक फ़ोकसिंग। जिस समय कोई कोशिका लेज़र किरण को पार करती है, डिटेक्टर रिकॉर्ड करते हैं:

छोटे कोणों पर प्रकाश का प्रकीर्णन (1° से 10° तक) ( यह विशेषतासेल आकार निर्धारित करने के लिए उपयोग किया जाता है)।

90° के कोण पर प्रकाश का प्रकीर्णन (हमें नाभिक/साइटोप्लाज्म अनुपात, साथ ही कोशिकाओं की विविधता और ग्रैन्युलैरिटी का न्याय करने की अनुमति देता है)।

कई प्रतिदीप्ति चैनलों (2 से 18-20 तक) के माध्यम से प्रतिदीप्ति तीव्रता - आपको सेल निलंबन आदि की उप-जनसंख्या संरचना निर्धारित करने की अनुमति देती है।

कॉम्ब्स परीक्षण

प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण एक एंटीग्लोबुलिन परीक्षण (एक जेल में एग्लूटिनेशन जो पूर्ण डाइवेलेंट एंटीबॉडी का पता लगाने की अनुमति देता है) है, जो आईजीजी वर्ग के एंटीबॉडी और लाल रक्त कोशिकाओं की सतह पर पूरक के सी 3 घटक का पता लगाता है। आमतौर पर, प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण द्वारा पता लगाए गए एंटीबॉडी में एक व्यापक विशिष्टता होती है जो एक अच्छी तरह से स्थापित एंटीजन से जुड़ी नहीं होती है। एक सकारात्मक प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण स्पष्ट रूप से इंगित करता है कि रोगी को हेमोलिटिक एनीमिया है, हालांकि सकारात्मक प्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षण वाले सभी रोगी इस बीमारी से पीड़ित नहीं हैं। लगभग 10% रोगियों में, लाल रक्त कोशिका झिल्ली पर एंटीबॉडी या पूरक घटकों को प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण (परीक्षण नकारात्मक है) द्वारा निर्धारित नहीं किया जा सकता है, लेकिन, फिर भी, वे ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया से पीड़ित हैं। ऐसे मामलों में एंटीबॉडी की विशिष्टता को स्पष्ट करने के लिए, उनके निस्पंदन के साथ परीक्षणों का उपयोग किया जाता है। एक प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण, जो केवल पूरक के लिए सकारात्मक है, आमतौर पर आईजीएम प्रकार के ठंडे एंटीबॉडी को संदर्भित करता है। इस मामले में आईजीएम एंटीबॉडीजजब लाल रक्त कोशिकाओं पर मौजूद नहीं होता बेसल तापमानशव. हालांकि, इस तथ्य के कारण कि आईजीएम एंटीबॉडी सक्रिय रूप से पूरक को ठीक करते हैं, और पूरक लाल रक्त कोशिकाओं पर रहता है, ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया (कोल्ड एगुटिनिन रोग) के इस रूप के साथ, कॉम्ब्स परीक्षण केवल पूरक के लिए सकारात्मक होगा।

प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण गर्म एंटीबॉडी के कारण होने वाले ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया, ऑटोइम्यून दवा-प्रेरित एनीमिया (मिथाइलडोपा लेते समय, 20% तक रोगियों में होता है) में सकारात्मक है सकारात्मक प्रतिक्रिया), दवा-अवशोषण प्रकार के हेमोलिटिक एनीमिया, इम्यूनोकॉम्पलेक्स प्रकार के हेमोलिटिक एनीमिया (परीक्षण केवल C3 के लिए सकारात्मक है), शीत एंटीबॉडी के कारण होने वाले ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया के साथ - शीत एग्लूटीनिन रोग (परीक्षण केवल C3 के लिए सकारात्मक है)। पैरॉक्सिस्मल कोल्ड हीमोग्लोबिनुरिया में, प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण नकारात्मक होता है।
में तीव्र अवधिलाल रक्त कोशिकाओं के विनाश के कारण होने वाली बीमारियाँ, जिन पर हेमोलिटिक संकट के दौरान बड़ी संख्या में एंटीबॉडी दर्ज की गईं, साथ ही साथ एंटीबॉडी की अपर्याप्त संख्या भी दर्ज की गई। क्रोनिक कोर्सरोग, एक नकारात्मक प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण देखा जा सकता है।

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• प्रयोगशाला रक्त परीक्षणों की गुणवत्ता सुनिश्चित करने के लिए एक महत्वपूर्ण शर्त सामग्री को सुबह खाली पेट (12:00 बजे से पहले) लेना है।
• परीक्षण से 12 घंटे पहले, आपको शराब पीने, धूम्रपान करने, खाने और शारीरिक गतिविधि को सीमित करने से बचना चाहिए।
• रक्त परीक्षण की सुबह आप पानी पी सकते हैं।
• दवाएँ लेने से बचें; यदि दवा लेना बंद करना संभव नहीं है, तो प्रयोगशाला को सूचित किया जाना चाहिए।
• किसी भी चिकित्सीय निदान प्रक्रिया को करने से पहले सामग्री लेने की सलाह दी जाती है।
• महिलाओं में हार्मोन के स्तर का आकलन करते समय, दिन पर विचार करना महत्वपूर्ण है मासिक धर्मकुछ हार्मोन निर्धारित करने का सबसे अच्छा समय कब है? आप यह जानकारी अपने डॉक्टर से प्राप्त कर सकते हैं।

अनुक्रमणिका	विशेषता
विश्लेषक और परीक्षण प्रणाली	जेल कार्ड; डायमेड एजी (स्विट्जरलैंड)
संदर्भ मूल्य	नकारात्मक परिणाम / सकारात्मक परिणाम
हस्तक्षेप करने वाले कारक. दवाइयाँ
निम्नलिखित दवाएँ लेने पर सकारात्मक परीक्षण संभव है: एसिटामिनोफेन, चिरायता का तेजाब, एमिनोपाइरिन, एंटिहिस्टामाइन्स, कार्बोमल, सेफलोस्पोरिन, क्लोरप्रोमाज़िन, क्लोरप्रोपामाइड, सिस्प्लैटिन, क्लोनिडाइन, डिपाइरोन, एथोसक्सिमाइड, फेनफ्लुरमाइन, फुआडिन, हाइड्रैलाज़िन, हाइड्रोक्लोरोथियाज़ाइड, इबुप्रोफेन, इंसुलिन, आइसोनियाज़िड, लेवोडोपा, मेफेनैमिक एसिड, मेल्फ़ालान, मेथाडोन, मिथाइलडोपा, मिथाइलसेर्गाइड, नॉमीफेन्सिन, पेनिसिलिन , हम, फेनासेटिन, फेनिलबुटाज़ोन, प्रोबेनेसिड, प्रोकेनामाइड, क्विनिडाइन, क्विनाइन, रिफैम्पिन, स्ट्रेप्टोमाइसिन, सल्फोनामाइड्स, सल्फोनील्यूरिया डेरिवेटिव, टेट्रासाइक्लिन, ट्रायमटेरिन, ट्रिमेलिटिक एनहाइड्राइड
उपयोग के संकेत
प्रतिरक्षा हेमोलिटिक एनीमिया का निदान, हेमोलिटिक रोगनवजात शिशु, दवा-प्रेरित प्रतिरक्षा हेमोलिटिक एनीमिया, हेमोलिटिक आधान प्रतिक्रियाएं
परिणामों की व्याख्या
आम तौर पर, प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण नकारात्मक होता है। सकारात्मक परीक्षणकॉम्ब्स: ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया; नवजात शिशुओं के हेमोलिटिक रोग; दवा-प्रेरित प्रतिरक्षा हेमोलिटिक एनीमिया; हेमोलिटिक आधान प्रतिक्रियाएं

कॉम्ब्स प्रतिक्रिया - प्रभावी तरीकामानव रक्त में एरिथ्रोसाइट एंटीजन और एंटी-एरिथ्रोसाइट एंटीबॉडी का पता लगाना अप्रत्यक्ष प्रतिक्रियासमूहन. परीक्षण का आधार एरिथ्रोसाइट एंटीजन टाइप करने के लिए क्लास जी इम्युनोग्लोबुलिन (आईजीजी) पर आधारित विशिष्ट मोनोक्लोनल अभिकर्मकों का उपयोग है, इसके बाद दूसरे चरण में कॉम्ब्स एंटीग्लोबुलिन सीरम (एजीएस) का उपयोग होता है।

एजीएस का निर्माण मानव इम्युनोग्लोबुलिन जी और मोनोक्लोनल एंटीबॉडी से प्रतिरक्षित प्रयोगशाला जानवरों के रक्त से सीरम को एक घटक - मानव सीरम के सी3डी पूरक में मिलाकर किया जाता है। एजीएस विशिष्ट एंटीबॉडी के साथ संवेदनशील लाल रक्त कोशिकाओं के एकत्रीकरण का कारण बनता है। एजीएस के प्रभाव में लाल रक्त कोशिकाओं पर एंटीबॉडी की अनुपस्थिति में सकारात्मक प्रतिक्रिया नहीं होती है।

अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स प्रतिक्रिया आपको इसकी उपस्थिति निर्धारित करने की अनुमति देती है:

• आईजीजी अभिकर्मकों द्वारा पता लगाए गए एरिथ्रोसाइट एंटीजन ("अपूर्ण" एंटीबॉडी, उदाहरण के लिए, मोनोक्लोनल अभिकर्मक एंटी-डी, एंटी-एफवाई ए, एंटी-एफवाईबी);
• आईजीजी वर्ग के एंटी-एरिथ्रोसाइट एंटीबॉडी।

अप्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षण: लाल रक्त कोशिका एंटीजन का पता लगाना

हम एंटी-डी आईजीजी कोलिक्लोन के उदाहरण का उपयोग करके अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स प्रतिक्रिया की विधि प्रस्तुत करते हैं।

1. एक साफ टेस्ट ट्यूब पर लेबल लगाएं: जिस व्यक्ति का परीक्षण किया जा रहा है उसका नाम बताएं।
2. टेस्ट ट्यूब में एंटी-डी आईजीजी ज़ोलिक्लोन की 2 बूंदें (लगभग 0.1 मिली) डालें।
3. विश्लेषण किए गए एरिथ्रोसाइट्स के 5% निलंबन की 2 बूंदें जोड़ें, जिन्हें पहले शारीरिक समाधान से धोया गया था। परीक्षण नमूनों को ज़ोलिक्लोन के साथ मिलाएं।
4. मिश्रण को पानी के स्नान में या थर्मोस्टेट में 37 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट के लिए रखें।
5. पाश्चर पिपेट का उपयोग करके टेस्ट ट्यूब में 5 - 10 मिलीलीटर खारा घोल डालें।
6. एक मिनट के लिए 18 - 25 डिग्री सेल्सियस पर 1200 ग्राम के केन्द्रापसारक त्वरण के साथ ट्यूब को अपकेंद्रित्र करें।
7. खारा घोल हटा दें.
8. सेंट्रीफ्यूजेशन का उपयोग करके लाल रक्त कोशिकाओं को धोने की प्रक्रिया को 2 - 3 बार और दोहराएं।
9. रक्त कोशिका तलछट में एंटीग्लोबुलिन सीरम की 2 बूंदें डालें और मिलाएं।
10. 18 - 25 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर एक मिनट के लिए 1200 ग्राम के केन्द्रापसारक त्वरण के साथ ट्यूब को अपकेंद्रित्र करें।
11. एक डिस्पेंसर या पाश्चर पिपेट का उपयोग करके, सेलाइन घोल की 3 से 5 बूंदें डालें।
12. तलछट को पुनः निलंबित करें और एग्लूटीनेशन के लिए दृष्टिगत रूप से आकलन करें। पृष्ठभूमि के विरुद्ध टेस्ट ट्यूब के निचले भाग में उच्चारण एग्लूटिनेट होता है स्पष्ट समाधानएरिथ्रोसाइट एंटीजन का पता लगाने का संकेत दें। रक्त कोशिकाओं का अपारदर्शी निलंबन एंटीजन की अनुपस्थिति को इंगित करता है।

कॉम्ब्स परीक्षण: आइसोइम्यून एंटी-एरिथ्रोसाइट एंटीबॉडी के लिए स्क्रीनिंग

यह अध्ययन दाता और प्राप्तकर्ता के सभी लाल रक्त कोशिका प्रतिजनों के लिए एक व्यक्तिगत अनुकूलता परीक्षण के भाग के रूप में किया जाता है। के बारे में निष्कर्ष पूर्ण अनुकूलताविश्लेषण के सभी चरणों में हेमोलिसिस और/या एग्लूटिनेशन की अनुपस्थिति के आधार पर दाता एरिथ्रोसाइट्स के साथ प्राप्तकर्ता सीरा का उत्पादन किया जाता है। परीक्षण के किसी भी चरण में हेमोलिसिस और/या एग्लूटिनेशन के लक्षण रक्त के नमूनों की असंगति का संकेत देते हैं।

AB0 प्रणाली का उपयोग करके अनुकूलता मूल्यांकन, "ठंडे" एंटीबॉडी का पता लगाना

1. दाता रक्त का नमूना तैयार करें:
   • एक स्वचालित डिस्पेंसर का उपयोग करके टेस्ट ट्यूब में 0.2 मिलीलीटर रक्त डालें;
   • लाल रक्त कोशिकाओं को 5.0 मिली सलाइन में 3 बार धोएं;
   • कम आयनिक शक्ति वाले LISS समाधान के 3 से 4 एमएल में गोली को फिर से निलंबित करें।
2. दूसरी स्वच्छ ट्यूब पर लेबल लगाएं: प्राप्तकर्ता का नाम और दाता का नाम बताएं।
3. एक स्वचालित डिस्पेंसर का उपयोग करके, प्राप्तकर्ता के सीरम का 0.1 मिलीलीटर एक लेबल वाली ट्यूब में डालें।
4. LISS घोल में 5% लाल रक्त कोशिका सस्पेंशन की 2 बूंदें मिलाएं।
5. मिश्रण को तुरंत 1200 ग्राम के केन्द्रापसारक त्वरण के साथ 18 - 25 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 15 - 20 सेकंड के लिए अपकेंद्रित्र करें।
6. टेस्ट ट्यूब को धीरे से हिलाकर नीचे से तलछट को अलग करें। एग्लूटीनेट्स की उपस्थिति का आकलन करें। हेमोलिसिस और/या एग्लूटीनेट्स की उपस्थिति का अर्थ है:
   • AB0 प्रणाली के अनुसार असंगति;
   • रोगी के सीरम में IgM या IgA वर्ग के "ठंडे" एंटीबॉडी की उपस्थिति, जो AB0 एंटीजन के लिए विशिष्ट नहीं है।

"गर्म" एंटीबॉडी का पता लगाना

1. यदि कोई हेमोलिसिस और/या एग्लूटीनेट नहीं है, तो ट्यूब को 37 डिग्री सेल्सियस पर 10-15 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें।
2. कमरे के तापमान पर ट्यूब को 1200 ग्राम पर 15-20 सेकंड के लिए सेंट्रीफ्यूज करें।
3. ट्यूब को हिलाएं और सतह पर तैरनेवाला में हेमोलिसिस और/या एग्लूटीनेट्स की जांच करें। एक सकारात्मक परिणाम रोगी के सीरम में दाता एरिथ्रोसाइट एंटीजन के खिलाफ "गर्म" आईजीएम एंटीबॉडी का पता लगाने का संकेत देता है।

कॉम्ब्स परीक्षण में आईजीजी एंटीबॉडी का पता लगाना

1. यदि अध्ययन के पिछले चरण में परिणाम नकारात्मक है, तो पाश्चर पिपेट का उपयोग करके टेस्ट ट्यूब में 0.9% NaCl समाधान के 5 मिलीलीटर जोड़ें।
2. 1200 ग्राम ट्यूब को 18 - 25 डिग्री सेल्सियस के वायु तापमान पर 15 - 20 सेकंड के लिए सेंट्रीफ्यूज करें। सतह पर तैरनेवाला को सावधानीपूर्वक हटाने के लिए पाश्चर पिपेट का उपयोग करें।
3. लाल रक्त कोशिका की धुलाई को 2-3 बार और दोहराएँ।
4. टेस्ट ट्यूब में एंटीग्लोबुलिन सीरम की 1 - 2 बूंदें डालें। पूरी तरह से मिश्रण करें.
5. ट्यूब को 1200 ग्राम पर 15-20 सेकंड के लिए सेंट्रीफ्यूज करें।
6. लाल रक्त कोशिका तलछट को सावधानीपूर्वक तोड़ें और प्रतिक्रिया परिणाम का दृष्टिगत रूप से आकलन करें। एग्लूटिनेशन का पता लगाने का अर्थ है दाता के एरिथ्रोसाइट एंटीजन के खिलाफ रोगी के सीरम में आईजीजी एंटीबॉडी की उपस्थिति।

हीमोलिटिक अरक्ततास्वप्रतिरक्षी निकायों के कारण, जो उनके स्वयं के लाल रक्त कोशिकाओं के विरुद्ध निर्देशित होते हैं, ठीक से समझ में नहीं आते हैं। हालाँकि, यह माना जाता है कि कुछ कारक (उदाहरण के लिए, एक वायरस, एक असामान्य प्रोटीन) लाल रक्त कोशिकाओं को इस तरह से बदलते हैं कि शरीर उन्हें "कुछ विदेशी" मानता है और एंटीबॉडी की मदद से उनसे लड़ता है। एक अन्य सिद्धांत के अनुसार, कुछ बीमारियों में असामान्य प्लाज्मा प्रोटीन निकायों के निर्माण के दौरान लाल रक्त कोशिकाओं के खिलाफ निर्देशित एंटीबॉडी लगभग आकस्मिक रूप से उत्पन्न होती हैं। ऐसे प्रोटीन निकाय, "यादृच्छिक रूप से" ऐसी प्रतिक्रियाएं दे सकते हैं जिनका उपयोग निदान करने के लिए किया जा सकता है (उदाहरण के लिए, वायरल निमोनिया, जैसा कि ज्ञात है, एक सकारात्मक वासरमैन प्रतिक्रिया, एक सकारात्मक पॉल-बनेल प्रतिक्रिया और एक ठंडा एग्लूटीनेशन प्रतिक्रिया देता है) .

वहाँ दो हैं स्वप्रतिपिंडों के मुख्य प्रकारहेमोलिटिक एनीमिया के लिए, अर्थात्: गर्म एंटीबॉडी (37 डिग्री सेल्सियस पर प्रतिक्रिया करते हैं) और ठंडे एंटीबॉडी (जिनकी प्रतिक्रियाशीलता तापमान शून्य के करीब पहुंचने पर बढ़ जाती है)। गर्म एंटीबॉडी ठंडे एंटीबॉडी की तुलना में अधिक आम हैं। डेसी ने पाया कि ठंडे हेमोलिसिन की तुलना में गर्म हेमोलिसिन 2 गुना अधिक होता है। हेमोलिसिन और एग्लूटीनिन मौलिक रूप से भिन्न एंटीबॉडी नहीं हैं: वे केवल उनकी क्रिया की प्रकृति में भिन्न होते हैं। एग्लूटीनिन लाल रक्त कोशिकाओं को एकत्रित करते हैं, और हेमोलिसिन उन्हें हेमोलिसिस (पूरक!) की जटिल प्रक्रिया के प्रति अधिक संवेदनशील बनाते हैं। स्वप्रतिपिंड, एरिथ्रोसाइट्स पर स्थिर होकर, एरिथ्रोसाइट-ग्लोबिन कॉम्प्लेक्स बनाते हैं। कॉम्ब्स एंटीग्लोबिन परीक्षण का उपयोग करके इस कॉम्प्लेक्स का पता लगाया जाता है।

कॉम्ब्स परीक्षणकॉम्ब्स सीरम के साथ किया जाता है, जिसकी तैयारी के लिए खरगोश को मानव सीरम के साथ संवेदनशील बनाया जाता है, जिसके खिलाफ खरगोश सीरम में एंटीबॉडी का निर्माण होता है। जब ऐसा संवेदनशील सीरम मानव एरिथ्रोसाइट्स पर कार्य करता है, तो वे एग्लूटीनेटेड हो जाते हैं यदि एरिथ्रोसाइट रिसेप्टर्स एंटीबॉडी को अवरुद्ध करके कब्जा कर लेते हैं। चूंकि ये अवरोधक एंटीबॉडी मानव सीरम से प्राप्त होते हैं, इसलिए वे मानव प्लाज्मा के प्रति संवेदनशील और प्रीसिपिटिन युक्त खरगोश सीरम के साथ जुड़ जाते हैं। इस प्रतिक्रिया को कॉम्ब्स परीक्षण कहा जाता है; ऑटोइम्यून निकायों (लो टाइट) के कारण हेमोलिटिक एनीमिया के लिए यह लगभग विशिष्ट है (विवरण के लिए, मैयर देखें)।

सामान्य तौर पर हेमोलिटिक एनीमिया के लिएएरिथ्रोसाइट्स के प्राथमिक विकार के साथ, कॉम्ब्स परीक्षण नकारात्मक है, और अधिग्रहित लोगों के साथ, यह सकारात्मक है। हालाँकि, इस नियम के कुछ अपवाद हैं: संवैधानिक हेमोलिटिक एनीमिया के संकट के दौरान और में एक गलत-सकारात्मक कॉम्ब्स परीक्षण पाया गया था। कमजोर डिग्री- कभी-कभी स्प्लेनेक्टोमी के बाद, आमवाती गठिया, सारकॉइडोसिस के साथ, बार-बार रक्त आधान के बाद और प्रणालीगत ल्यूपस एरिथेमेटोसस के साथ भी। स्वाभाविक रूप से, ऑटोइम्यून निकायों के गठन के बिना अधिग्रहित हेमोलिटिक एनीमिया में, यह नकारात्मक है।

हीमोलिटिक अरक्तताऑटोइम्यून निकायों के कारण होने वाले कारणों को इसमें विभाजित किया जा सकता है:
ए) एक्यूट, सबस्यूट और जीर्ण रूप, साथ ही साथ
बी) अज्ञात एटियलजि के साथ अज्ञातहेतुक और सी) रोगसूचक [वायरल निमोनिया (केवल ठंडा एग्लूटीनिन), क्रोनिक लिम्फैटिक ल्यूकेमिया, रेटिकुलोसारकोमा, लिम्फोसार्कोमा, प्रणालीगत ल्यूपस एरिथेमेटोसस (मुख्य रूप से गर्म, कम अक्सर ठंडा एग्लूटीनिन), सिफलिस (ठंडा एग्लूटीनिन), डिम्बग्रंथि ट्यूमर (मिशर) कर्मचारियों के साथ))।
ग) रोगसूचक [वायरल निमोनिया (केवल ठंडा एग्लूटीनिन), क्रोनिक लिम्फैटिक ल्यूकेमिया, रेटिकुलोसारकोमा, लिम्फोसारकोमा, सिस्टमिक ल्यूपस एरिथेमेटोसस (मुख्य रूप से गर्म, कम अक्सर ठंडा एग्लूटीनिन), सिफलिस (ठंडा एग्लूटीनिन), डिम्बग्रंथि ट्यूमर (मिशर और सहकर्मी))।

हेमोलिटिक एनीमिया का क्लिनिक, ऑटोइम्यून निकायों के प्रभाव में विकसित होना, बहुत विविध है, और इसलिए उनके सामान्य को आकर्षित करना शायद ही संभव है नैदानिक ​​तस्वीर. सभी उम्र और दोनों लिंगों के व्यक्ति समान रूप से प्रभावित होते हैं। फिर भी, महिलाओं में अज्ञातहेतुक रूप अधिक देखे जाते हैं (सैक्स और वर्कमैन)।

अज्ञातहेतुक रूप की नैदानिक ​​तस्वीररोग की गंभीरता के आधार पर भिन्न होता है। में पुराने मामलेशुरुआत धीरे-धीरे होती है, बार-बार बढ़ने के साथ यह बीमारी कई वर्षों तक चलती रहती है। एनीमिया की गंभीरता हेमोलिसिस की डिग्री के आधार पर भिन्न होती है। हीमोग्लोबिन में 10% तक की गिरावट देखी गई है, अन्य मामलों में, हीमोग्लोबिन लंबे समय तक 50-60% पर रहता है। रेटिकुलोसाइटोसिस की तीव्रता और त्वचा और सीरम का प्रतिष्ठित रंग हेमोलिसिस की डिग्री से मेल खाता है। बिलीरुबिन मूत्र में बहुत कम पाया जाता है, क्योंकि यह गुर्दे से नहीं गुजरता है, लेकिन हीमोग्लोबिनुरिया देखा जाता है। पुराने मामलों में, प्लीहा अक्सर बढ़ जाती है और बहुत महत्वपूर्ण आकार तक भी पहुंच सकती है, लेकिन अन्य मामलों में इसे अभी भी महसूस किया जा सकता है। लीवर शायद ही कभी बढ़ा हुआ हो।

अधिकांश मामलों में रक्त मेंमैक्रोसाइटोसिस मनाया जाता है, में तीव्र चरणकई माइक्रोसाइट्स भी हैं, नॉर्मोब्लास्टोसिस और पॉलीक्रोमेसिया शायद ही कभी अनुपस्थित हैं, ल्यूकोसाइटोसिस 30,000 तक पहुंच सकता है, प्लेटलेट्स सामान्य हैं। हालाँकि, कुछ मामलों में, गंभीर थ्रोम्बोसाइटोपेनिया होता है। इवांस इन मामलों को प्लेटलेट्स के खिलाफ एंटीबॉडी की एक साथ उपस्थिति से समझाते हैं, ताकि ऑटोइम्यून निकायों की कार्रवाई के कारण हेमोलिटिक एनीमिया और थ्रोम्बोसाइटोपेनिया दोनों हो - इवांस सिंड्रोम। ऑस्मोटिक प्रतिरोध थोड़ा कम हो जाता है, लेकिन उसी हद तक नहीं और संवैधानिक गोलाकार कोशिका एनीमिया की तरह स्थायी रूप से नहीं। 6 घंटे के बाद ताप प्रतिरोध परीक्षण (हेग्लिन-मायर) भी मामूली हेमोलिसिस (स्वयं का अवलोकन) दे सकता है, लेकिन मार्चियाफावा एनीमिया की तुलना में कुछ हद तक। हेमोसाइडरिन मूत्र में भी पाया जाता है (स्वयं का अवलोकन)।