கண்டறியும் திரட்டல் எதிர்வினை. திரட்டுதல் எதிர்வினை

மொத்த நுண்ணுயிர் அல்லது பிற உயிரணுக்களுடன் ஆன்டிபாடிகளின் (அக்லூட்டினின்கள்) குறிப்பிட்ட தொடர்புகளின் அடிப்படையில் திரட்டுதல் எதிர்வினை. இந்த இடைவினையின் விளைவாக, திரட்டப்பட்ட துகள்கள் உருவாகின்றன, அவை வீழ்படிவு (அக்லூட்டினேட்). பாக்டீரியா, புரோட்டோசோவா, பூஞ்சை, ஈஸ்ட், ரிக்கெட்சியா, எரித்ரோசைட்டுகள் மற்றும் பிற உயிரணுக்கள், வாழும் மற்றும் கொல்லப்பட்ட இரண்டும், திரட்டல் எதிர்வினையில் பங்கேற்கலாம். எதிர்வினை இரண்டு கட்டங்களில் நிகழ்கிறது: முதலாவது ஆன்டிஜென் மற்றும் ஆன்டிபாடியின் ஒரு குறிப்பிட்ட கலவையாகும், இரண்டாவது குறிப்பிட்டதல்ல, அதாவது ஒரு புலப்படும் aglutinate உருவாக்கம். சோடியம் குளோரைடு போன்ற எலக்ட்ரோலைட்டுகளின் முன்னிலையில் அக்லூட்டினேட்டின் மழைப்பொழிவு ஏற்படுகிறது. அக்லூட்டினேட்டில் உள்ள நுண்ணுயிரிகள் உயிருடன் இருக்கின்றன, ஆனால் அவற்றின் இயக்கத்தை இழக்கின்றன.

தொற்று நோய்களின் செரோலாஜிக்கல் நோயறிதல் மற்றும் தனிமைப்படுத்தப்பட்ட நுண்ணுயிரிகளின் ஆன்டிஜெனிக் கட்டமைப்பை நிர்ணயம் செய்வதற்கு திரட்டுதல் எதிர்வினை பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது. ஒரு நோயாளி அல்லது ஒரு கேரியரின் உடலில் இருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்ட நோய்க்கிருமியின் ஆன்டிஜெனிக் கட்டமைப்பைத் தீர்மானிக்க, குறிப்பிட்ட நோயெதிர்ப்பு சீரம் பயன்படுத்தப்படுகிறது, சில நுண்ணுயிரிகளுடன் விலங்குகளை (முயல், கழுதை, செம்மறி ஆடு) நோய்த்தடுப்பு மூலம் பெறப்படுகிறது. நுண்ணுயிரியின் அடையாளம் கண்ணாடி மீது உறிஞ்சப்பட்ட அல்லது மோனோரெசெப்டர் செரா அல்லது குறிப்பிட்ட திரட்டும் செராவுடன் சோதனைக் குழாய்களில் ஒரு திரட்டுதல் எதிர்வினையில் மேற்கொள்ளப்படுகிறது. அட்ஸார்பட் செராவில் கொடுக்கப்பட்ட நுண்ணுயிரிகளுக்கு குறிப்பிட்ட ஆன்டிஜென்களுக்கு மட்டுமே ஆன்டிபாடிகள் உள்ளன, மேலும் மோனோரெசெப்டர் செரா நோய்க்கிருமியின் ஒரு குறிப்பிட்ட ஆன்டிஜெனுக்கு மட்டுமே ஆன்டிபாடிகளைக் கொண்டுள்ளது.

ஒரு குறிப்பிட்ட நுண்ணுயிரியின் அனைத்து ஆன்டிஜென்களுக்கும் செரா இனங்கள் ஆன்டிபாடிகளைக் கொண்டுள்ளன.

தனிமைப்படுத்தப்பட்ட நுண்ணுயிரிகளின் கலாச்சாரம் சேர்ந்ததா இந்த இனம்சீரம் ஆம்பூலின் லேபிளில் சுட்டிக்காட்டப்பட்ட ஆன்டிபாடி டைட்டருக்கு அறியப்பட்ட சீரம் மூலம் திரட்டுவதன் மூலம் தீர்மானிக்கப்படுகிறது. ஒரு சீரம் ஆன்டிபாடி டைட்டர் அதன் கடைசி நீர்த்தலாகக் கருதப்படுகிறது, இதில் விலங்குக்கு நோய்த்தடுப்புக்கு பயன்படுத்தப்படும் நுண்ணுயிரிகளின் கலாச்சாரத்தின் ஒருங்கிணைப்பு இன்னும் காணப்படுகிறது. உறிஞ்சப்பட்ட மற்றும் மோனோரெசெப்டர் செரா பொதுவாக கண்ணாடி திரட்டல் எதிர்வினையில் நீர்த்தப்படாமல் பயன்படுத்தப்படுகிறது.

நோயாளியின் இரத்த சீரம் உள்ள ஆன்டிபாடிகள் இருப்பதை தீர்மானிக்கும் போது, ​​​​அது 1: 50 முதல் 1: 800 அல்லது அதற்கு மேற்பட்ட நீர்த்தலில் இருந்து தொடங்கி ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு கரைசலில் நீர்த்தப்படுகிறது. உயிருள்ள அல்லது கொல்லப்பட்ட நுண்ணுயிரிகளின் இடைநீக்கம் ஒவ்வொரு நீர்த்தத்திலும் சேர்க்கப்படுகிறது. வெப்பம் அல்லது ஃபார்மால்டிஹைட் மூலம் கொல்லப்படும் நுண்ணுயிரிகளைக் கொண்ட தயாரிப்புகள் கண்டறியும் முறைகள் என்று அழைக்கப்படுகின்றன. நுண்ணுயிரிகளின் கலாச்சாரங்களை சூடாக்குவதன் மூலம் பெறப்பட்ட நோயறிதல்களில் சோமாடிக் ஆன்டிஜென்கள் மட்டுமே உள்ளன. ஃபார்மால்டிஹைடை மட்டும் பயன்படுத்தும் போது, ​​நுண்ணுயிரிகள் தங்கள் கொடிய ஆன்டிஜென்களைத் தக்கவைத்துக் கொள்கின்றன.

நோயாளியின் இரத்தத்தில் உள்ள ஆன்டிபாடிகள் முன்னிலையில், எதிர்வினையில் எடுக்கப்பட்ட நோயறிதல் ஒன்றாக ஒட்டிக்கொண்டது மற்றும் இரண்டு சோதனைக் குழாய்களில் ஒரு வண்டல் (அக்லூட்டினேட்) உருவாகிறது. இந்த வழக்கில், திரட்டல் எதிர்வினையின் முடிவுகள் நேர்மறையானதாகக் கருதப்படுகின்றன. ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு கரைசல் மற்றும் நோயறிதல் ஆகியவை சேர்க்கப்படும் கட்டுப்பாட்டுக் குழாயில், நுண்ணுயிரிகளின் இடைநீக்கம் ஒரே மாதிரியாக இருக்க வேண்டும் (எதிர்மறை திரட்டல் எதிர்வினை).

லெப்டோஸ்பிரோசிஸ் போன்ற சில நோய்களில் திரட்டுதல் எதிர்வினையின் முடிவுகள், நுண்ணோக்கியின் (மைக்ரோஅக்ளூட்டினேஷன்) இருண்ட புலத்தில் நுண்ணோக்கி மூலம் மட்டுமே கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ளப்படுகின்றன. ஒரு நோயின் செரோலாஜிக்கல் நோயறிதலைச் செய்ய, கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ளுங்கள் கண்டறியும் நோய். இது பொதுவாக 1:100 அல்லது 1:200 என்ற சீரம் நீர்த்தலுக்கு ஒத்திருக்கும்.

டைபாய்டு காய்ச்சல் மற்றும் பாரடைபாய்டு காய்ச்சல் (வைடல் ரியாக்ஷன்), புருசெல்லோசிஸ் (ரைட் ரியாக்ஷன்), துலரேமியா போன்றவற்றில் நோயாளியின் இரத்த சீரம் உள்ள ஆன்டிபாடிகளை திரட்டுதல் எதிர்வினை மூலம் கண்டறியலாம்.
காஸ்டெல்லானியின் எதிர்வினை. சிலருக்கு தொற்று நோய்கள்அல்லது குழு ஆன்டிஜென்கள் கொண்ட நுண்ணுயிரிகளுடன் நோய்த்தடுப்பு, இரத்த சீரம், கொடுக்கப்பட்ட வகைக்கு குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடிகள் கூடுதலாக, குழு ஆன்டிபாடிகள் தோன்றும். இந்த வழக்கில், தொடர்புடைய பாக்டீரியா இனங்கள் விளைவாக செரா மூலம் திரட்டப்படும்.

காஸ்டெல்லானி, குழு ஆன்டிஜென்களைக் கொண்ட ஆனால் குறிப்பிட்டவை இல்லாத தொடர்புடைய உயிரினங்களின் நுண்ணுயிரிகளின் உதவியுடன் அவற்றை அகற்றுவதன் அடிப்படையில், நோயெதிர்ப்பு செராவிலிருந்து குழு ஆன்டிபாடிகளை உறிஞ்சுவதற்கான ஒரு முறையை முன்மொழிந்தார். சீரத்தில் சேர்க்கப்படும் அத்தகைய நுண்ணுயிரிகளின் கலாச்சாரம் குறிப்பிட்ட அல்லாத குழு ஆன்டிபாடிகளை உறிஞ்சுகிறது, மேலும் ஆன்டிஜென்-ஆன்டிபாடி வளாகத்தை மையவிலக்கு மூலம் அகற்றிய பிறகு, குறிப்பிட்ட இம்யூனோகுளோபுலின்கள் மட்டுமே சீரத்தில் இருக்கும். காஸ்டெல்லானி முறையின்படி பதப்படுத்தப்பட்ட செராவை, திரட்டல் வினையில் மிகவும் குறிப்பிட்டதாகப் பயன்படுத்தலாம்.

அக்லூட்டினேஷன் என்பது குறிப்பிட்ட ஏடிகளின் தொடர்புகளின் விளைவாக பாக்டீரியாவை ஒட்டுதல் ஆகும். RA ஐ செயல்படுத்த, மூன்று கூறுகள் தேவை: 1) AG (agglutinogen); 2) AT (aglutinin); 3) எலக்ட்ரோலைட் கரைசல் (ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு கரைசல்). கார்பஸ்குலர் ஆன்டிஜென்கள் (பாக்டீரியா, சிவப்பு ரத்த அணுக்கள், ஆன்டிஜென் ஏற்றப்பட்ட லேடெக்ஸ் துகள்கள்) மட்டுமே திரட்டல் எதிர்வினையில் பங்கேற்கின்றன.

கண்ணாடி மீது திரட்டுதல் எதிர்வினை. ஒரு பைப்பெட்டைப் பயன்படுத்தி கிரீஸ் இல்லாத கண்ணாடி ஸ்லைடில் ஒரு துளியை வைக்கவும். கண்டறியும் சீரம்(சீரம் நீர்த்தல் 1:10 - 1:20). ஒரு பாக்டீரியாவியல் வளையத்தைப் பயன்படுத்தி, ஆய்வின் கீழ் உள்ள நுண்ணுயிரிகளின் தூய கலாச்சாரம் சாய்ந்த அகாரின் மேற்பரப்பில் இருந்து எடுக்கப்பட்டு, சீரம் ஒரு துளிக்கு மாற்றப்பட்டு கலக்கப்படுகிறது. எதிர்வினையின் விளைவு 3-5 நிமிடங்களுக்குப் பிறகு நிர்வாணக் கண்ணால் கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ளப்படுகிறது. எதிர்வினை நேர்மறையாக இருந்தால், செதில்களின் தோற்றம் (பெரிய அல்லது சிறிய) சீரம் ஒரு துளியில் குறிப்பிடப்பட்டுள்ளது, ஸ்லைடு அசைக்கப்படும் போது இருண்ட பின்னணியில் தெளிவாகத் தெரியும். எதிர்மறையான எதிர்வினை ஏற்பட்டால், திரவம் ஒரே மாதிரியான மேகமூட்டமாக இருக்கும்.

சோதனைக் குழாய்களில் திரட்டுதல் எதிர்வினை. சோதனைக் குழாய்களின் வரிசையில் 1 மில்லி உடலியல் தீர்வு சேர்க்கப்படுகிறது. பரிசோதிக்கப்படும் இரத்த சீரம் சம அளவு முதல் சோதனைக் குழாயில் சேர்க்கப்படுகிறது. சீரம் இரண்டு மடங்கு நீர்த்துப்போகும் சீரம் தயாரிக்கப்படுகிறது (சீரம் டைட்ரேஷன்), அதன் பிறகு செயலிழந்த பாக்டீரியாவின் இடைநீக்கத்தின் 2 சொட்டுகள் (கண்டறிதல்) ஒவ்வொரு சோதனைக் குழாயிலும் சேர்க்கப்படுகின்றன. குழாய்கள் 37 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 2 மணி நேரம் தெர்மோஸ்டாட்டில் வைக்கப்படுகின்றன. நிர்வாணக் கண்ணுக்குத் தெரியாத சிறிய செதில்களை உருவாக்குவதன் மூலம் எதிர்வினை தொடர்கிறது, எனவே முடிவுகள் ஒரு சிறப்பு சாதனத்தில் சிறிய உருப்பெருக்கத்தின் கீழ் பதிவு செய்யப்படுகின்றன - ஒரு அக்லூட்டினோஸ்கோப். "நான்கு கூட்டல்" அமைப்பின் படி திரட்டலின் தீவிரம் கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ளப்படுகிறது: முழுமையான திரட்டல் - 4+, பகுதி திரட்டல் - 3+ அல்லது 2+, கேள்விக்குரிய முடிவு - +. 2+ திரட்சியைக் காணும் கடைசி நீர்த்தம் சோதனை சீரத்தில் ஆன்டிபாடி டைட்டராக எடுத்துக் கொள்ளப்படுகிறது.

டைபாய்டு மற்றும் பாரடைபாய்டு காய்ச்சல் (வைடல் ரியாக்ஷன்), புருசெல்லோசிஸ் (ரைட் ரியாக்ஷன்) மற்றும் டைபஸ் (வெய்கல் ரியாக்‌ஷன்) ஆகியவற்றின் காரணமான முகவர்களுக்கு ஆன்டிபாடிகளின் டைட்டரை தீர்மானிக்க சோதனைக் குழாய்களில் ஒரு திரட்டுதல் எதிர்வினை (விரிவான திரட்டுதல் எதிர்வினை) மேற்கொள்ளப்படுகிறது.

திரட்டுதல் (லத்தீன் agglutinatio - gluing) என்பது எலக்ட்ரோலைட்டுகளின் முன்னிலையில் குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடிகளின் மூலக்கூறுகளுடன் ஆன்டிஜென்-தாங்கி கார்பஸ்குலர் துகள்களின் (முழு செல்கள், லேடெக்ஸ் துகள்கள், முதலியன) ஒட்டுதல் (இணைப்பு) ஆகும், இது செதில்கள் அல்லது வண்டல் உருவாக்கத்தில் முடிவடைகிறது. (agglutinate) நிர்வாணக் கண்ணுக்குத் தெரியும். வண்டலின் தன்மை ஆன்டிஜெனின் இயல்பைச் சார்ந்தது: கொடியுடைய பாக்டீரியாக்கள் கரடுமுரடான ஃப்ளோக்குலண்ட் படிவுகளை உருவாக்குகின்றன, கொடி மற்றும் காப்சுலர் அல்லாத பாக்டீரியாக்கள் நுண்ணிய வண்டலை உருவாக்குகின்றன, மற்றும் காப்ஸ்யூலர் பாக்டீரியா ஒரு சரமான வண்டலை உருவாக்குகிறது. ஒரு பாக்டீரியா அல்லது எரித்ரோசைட்டுகள் போன்ற வேறு எந்த உயிரணுக்களின் சொந்த ஆன்டிஜென்கள், குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடிகளுடனான தொடர்புகளில் நேரடியாக பங்கேற்கும் நேரடி திரட்டலுக்கு இடையே ஒரு வேறுபாடு உள்ளது; மற்றும் மறைமுக, அல்லது செயலற்ற, இதில் பாக்டீரியா செல்கள் அல்லது எரித்ரோசைட்டுகள் அல்லது லேடெக்ஸ் துகள்கள் தங்களுடையவை அல்ல, ஆனால் அவற்றிற்கு குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடிகளை (அல்லது ஆன்டிஜென்கள்) அடையாளம் காண வெளிநாட்டு ஆன்டிஜென்கள் (அல்லது ஆன்டிபாடிகள்) உறிஞ்சப்படுகின்றன. திரட்டல் எதிர்வினை முக்கியமாக IgG மற்றும் IgM வகுப்புகளைச் சேர்ந்த ஆன்டிபாடிகளை உள்ளடக்கியது. இது இரண்டு கட்டங்களில் நிகழ்கிறது: முதலில், ஆன்டிபாடிகளின் செயலில் உள்ள மையத்தின் ஒரு குறிப்பிட்ட தொடர்பு ஆன்டிஜெனின் நிர்ணயிப்புடன் நிகழ்கிறது, இந்த நிலை எலக்ட்ரோலைட்டுகள் இல்லாத நிலையில் ஏற்படலாம் காணக்கூடிய மாற்றங்கள்எதிர்வினை அமைப்பு. இரண்டாவது கட்டத்திற்கு - அக்லூட்டினேட் உருவாக்கம் - எலக்ட்ரோலைட்டுகளின் இருப்பு அவசியம், இது குறைக்கிறது மின் கட்டணம்ஆன்டிஜென் + ஆன்டிபாடி வளாகங்கள் மற்றும் அவற்றின் ஒட்டுதல் செயல்முறையை துரிதப்படுத்துகின்றன. இந்த கட்டம் ஒரு aglutinate உருவாக்கத்துடன் முடிவடைகிறது.

திரட்டுதல் எதிர்வினைகள் கண்ணாடி அல்லது மென்மையான அட்டை தகடுகளில் அல்லது மலட்டுத் திரட்டல் குழாய்களில் செய்யப்படுகின்றன. கண்ணாடி மீது திரட்டுதல் எதிர்வினைகள் (நேரடி மற்றும் செயலற்றவை) பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன துரிதப்படுத்தப்பட்ட முறைநோயாளியின் சீரத்தில் குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடிகளைக் கண்டறிதல் (உதாரணமாக, புருசெல்லோசிஸ் உடன்) அல்லது நோய்க்கிருமியின் செரோலாஜிக்கல் அடையாளத்திற்காக. பிந்தைய வழக்கில், மோனோரெசெப்டர் ஆன்டிபாடிகள் அல்லது பல்வேறு ஆன்டிஜென்களுக்கு அவற்றின் தொகுப்பை மட்டுமே கொண்ட நன்கு சுத்திகரிக்கப்பட்ட (உறிஞ்சப்பட்ட) கண்டறியும் செரா பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது. கண்ணாடி மீது திரட்டுதல் எதிர்வினையின் சந்தேகத்திற்கு இடமில்லாத நன்மை அதன் செயல்பாட்டின் எளிமை மற்றும் இரண்டு கூறுகளும் செறிவூட்டப்பட்ட வடிவத்தில் பயன்படுத்தப்படுவதால் பல நிமிடங்கள் அல்லது வினாடிகள் கூட ஆகும். இருப்பினும், இது ஒரு தரமான மதிப்பை மட்டுமே கொண்டுள்ளது மற்றும் சோதனைக் குழாயை விட குறைவான உணர்திறன் கொண்டது. சோதனைக் குழாய்களில் ஒரு விரிவான திரட்டல் எதிர்வினை மிகவும் துல்லியமான முடிவுகளைத் தருகிறது, ஏனெனில் இது சீரத்தில் உள்ள ஆன்டிபாடிகளின் அளவு உள்ளடக்கத்தை தீர்மானிக்க உங்களை அனுமதிக்கிறது (அதன் டைட்டரை நிறுவவும்) மற்றும் தேவைப்பட்டால், கண்டறியும் மதிப்பைக் கொண்ட ஆன்டிபாடி டைட்டரின் அதிகரிப்பு உண்மையை பதிவு செய்யவும். . எதிர்வினையை அமைக்க, 0.85% NaCl கரைசலுடன் ஒரு குறிப்பிட்ட வழியில் நீர்த்த சீரம் மற்றும் 1 மில்லியில் 1 பில்லியன் பாக்டீரியாவைக் கொண்ட நிலையான கண்டறியும் (அல்லது சோதனை கலாச்சாரம்) இடைநீக்கத்தின் சம அளவு (பொதுவாக 0.5 மில்லி) சேர்க்கப்படுகிறது. திரட்டல் குழாய்கள். திரட்டல் வினையின் முடிவுகள் முதலில் 37 டிகிரி செல்சியஸ் குழாய்களின் அடைகாக்கும் 2 மணி நேரத்திற்குப் பிறகும், இறுதியாக 20-24 மணி நேரத்திற்குப் பிறகும் இரண்டு அளவுகோல்களின்படி பதிவு செய்யப்படுகின்றன: வீழ்படிவின் இருப்பு மற்றும் அளவு மற்றும் சூப்பர்நேட்டன்ட் திரவத்தின் வெளிப்படைத்தன்மையின் அளவு. நான்கு குறுக்கு அமைப்பின் படி மதிப்பீடு மேற்கொள்ளப்படுகிறது. எதிர்வினை சீரம் மற்றும் ஆன்டிஜென் கட்டுப்பாட்டுடன் அவசியம். நோய்க்கிருமியின் செரோலாஜிக்கல் அடையாளத்திற்காக ஒரு சோதனைக் குழாயில் ஒரு விரிவான திரட்டுதல் எதிர்வினை செய்யப்படும் சந்தர்ப்பங்களில், கண்டறியும் சீரம் அதன் டைட்டரில் குறைந்தது பாதியாக நீர்த்தப்படும்போது எதிர்வினை நேர்மறையானதாக மதிப்பிடப்பட்டால், அது கண்டறியும் மதிப்பைக் கொண்டுள்ளது.

ஹோமோலோகஸ் ஆன்டிஜென்கள் மற்றும் ஆன்டிபாடிகளின் தீர்வுகளை கலக்கும்போது, ​​திரட்டுதல் எதிர்வினையின் புலப்படும் வெளிப்பாடுகள் எப்போதும் கவனிக்கப்படுவதில்லை என்பதை கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ள வேண்டும். இரண்டு எதிர்வினை கூறுகளின் சில உகந்த விகிதங்களில் மட்டுமே ஒரு வீழ்படிவு உருவாகிறது. இந்த வரம்புகளுக்கு வெளியே, ஆன்டிஜென் அல்லது ஆன்டிபாடிகளின் குறிப்பிடத்தக்க அளவு அதிகமாக இருப்பதால், எந்த எதிர்வினையும் காணப்படவில்லை. இந்த நிகழ்வு "புரோசோன் நிகழ்வு" என்று அழைக்கப்படுகிறது. இது திரட்டல் வினையிலும் மழைப்பொழிவு வினையிலும் காணப்படுகிறது. நோயெதிர்ப்பு எதிர்வினைகளில் புரோசோனின் தோற்றம், அவற்றில் உள்ள ஆன்டிஜென்கள், ஒரு விதியாக, பாலிடெர்மினன்ட் மற்றும் மூலக்கூறுகள் என்பதன் மூலம் விளக்கப்படுகிறது. IgG ஆன்டிபாடிகள்இரண்டு செயலில் மையங்கள் உள்ளன. அதிகப்படியான ஆன்டிபாடிகளுடன், ஒவ்வொரு ஆன்டிஜென் துகள்களின் மேற்பரப்பும் ஆன்டிபாடி மூலக்கூறுகளால் மூடப்பட்டிருக்கும், இதனால் இலவச நிர்ணய குழுக்கள் எதுவும் இல்லை, எனவே ஆன்டிபாடிகளின் இரண்டாவது, கட்டற்ற செயலில் உள்ள ஆன்டிபாடிகள் மற்றொரு ஆன்டிஜென் துகளுடன் தொடர்பு கொண்டு அவற்றை ஒன்றோடொன்று பிணைக்க முடியாது. ஆன்டிபாடிகளின் ஒரு இலவச செயலில் உள்ள மையம் கூட இல்லாதபோது, ​​ஆன்டிஜென் அதிகமாக இருக்கும்போது, ​​காணக்கூடிய திரட்டு அல்லது வீழ்படிவு உருவாக்கம் ஒடுக்கப்படுகிறது, எனவே ஆன்டிஜென் + ஆன்டிபாடி + ஆன்டிஜென் வளாகங்கள் பெரிதாக்க முடியாது.

துரிதப்படுத்தப்பட்ட திரட்டல் எதிர்வினைகளின் மாறுபாடுகள். எதிர்வினை செயலற்ற ஹீமாக்ளூட்டினேஷன்மற்றும் அதன் மாறுபாடுகள்

உன்னதமான திரட்டல் எதிர்வினை கார்பஸ்குலர் ஆன்டிஜென்களின் பயன்பாட்டை உள்ளடக்கியது. இருப்பினும், கரையக்கூடிய ஆன்டிஜென்களும் இதில் ஈடுபடலாம். இதை சாத்தியமாக்க, அத்தகைய ஆன்டிஜென்கள் நோயெதிர்ப்பு ரீதியாக செயலற்ற துகள்களில் உறிஞ்சப்படுகின்றன. லேடெக்ஸ் அல்லது பெண்டோனைட்டின் துகள்கள் ஒரு கேரியராகப் பயன்படுத்தப்படலாம், ஆனால் தற்போது விலங்கு அல்லது மனித எரித்ரோசைட்டுகள் பெரும்பாலும் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, டானின், ஃபார்மலின் அல்லது பென்சிடின் கரைசல்களுடன் சிகிச்சையளிப்பதன் மூலம் அவற்றின் உறிஞ்சும் பண்புகளை மேம்படுத்துகிறது. ஆன்டிஜெனை உள்வாங்கிக் கொண்ட சிவப்பு இரத்த அணுக்கள் இந்த ஆன்டிஜெனால் உணர்திறன் என்று அழைக்கப்படுகின்றன, மேலும் நோய் எதிர்ப்பு எதிர்வினைஇதில் அவர்கள் பங்கேற்கும் மறைமுக அல்லது செயலற்ற ஹீமாக்ளூட்டினேஷன் எதிர்வினை (IRHA, அல்லது RPHA), ஏனெனில் சிவப்பு இரத்த அணுக்கள் செயலற்ற முறையில் அதில் பங்கேற்கின்றன.

RPGA ஒரு அரைக்கோள அடிப்பகுதி கொண்ட துளைகளுடன் சிறப்பு பாலிஸ்டிரீன் தட்டுகளில் வைக்கப்படுகிறது. அதை பயன்படுத்தும் போது serological நோய் கண்டறிதல்இந்த கிணறுகளில், சோதனை சீரம் இரண்டு மடங்கு நீர்த்தங்கள் உடலியல் கரைசலில் தயாரிக்கப்படுகின்றன, பின்னர் உணர்திறன் கொண்ட எரித்ரோசைட்டுகளின் இடைநீக்கம் ஒரு கண்டறியும் முகவராக அதில் சேர்க்கப்படுகிறது. நான்கு குறுக்கு அமைப்பைப் பயன்படுத்தி 37 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 2 மணிநேர அடைகாக்கும் பிறகு முடிவுகள் பதிவு செய்யப்படுகின்றன. ஒரு நேர்மறையான எதிர்வினையுடன், திரட்டப்பட்ட சிவப்பு இரத்த அணுக்கள் துளையின் அடிப்பகுதியில் குடியேறி, தலைகீழ் குடையின் வடிவத்தில் சமமாக மூடுகின்றன. மணிக்கு எதிர்மறை எதிர்வினைசிவப்பு இரத்த அணுக்களும் குடியேறுகின்றன, திரவம் வெளிப்படையானதாகிறது, வண்டல் துளையின் மையத்தில் ஒரு சிறிய "வட்டு" போல் தெரிகிறது. RPHA இல் உள்ள சீரம் டைட்டர் அதன் கடைசி நீர்த்தலாகக் கருதப்படுகிறது, இது இன்னும் "வட்டு" இருப்பதற்கான குறிப்பிடத்தக்க அறிகுறிகள் இல்லாமல் உச்சரிக்கப்படும் ஹீமாக்ளூட்டினேஷன் அளிக்கிறது.

RPGA ஆனது நுண்ணுயிரியியல் நோயறிதலின் விரைவுபடுத்தப்பட்ட முறையாகவும் பயன்படுத்தப்படலாம் வினையெதிர்ப்பு ஆன்டிபாடிகளின் அறியப்பட்ட கூறுகளாக குறிப்பிட்ட தன்மை பயன்படுத்தப்படுகிறது - ஆன்டிபாடி எரித்ரோசைட் கண்டறிதல். சோதனைப் பொருளில் போதுமான அளவு அறியப்பட்ட ஆன்டிஜென் இருந்தால், RPGA நேர்மறையாக இருக்கும்.

RPHA ஐப் பயன்படுத்துவதற்கான விருப்பங்கள்: ஆன்டிஜென் நியூட்ரலைசேஷன் எதிர்வினை (RNAg), ஆன்டிபாடி நியூட்ராலைசேஷன் எதிர்வினை (RNAb), செயலற்ற ஹீமாக்ளூட்டினேஷன் தடுப்பு எதிர்வினை (PHA). இந்த எதிர்விளைவுகளுக்கு, ஆன்டிஜென் மற்றும் ஆன்டிபாடி எரித்ரோசைட் கண்டறியும் முறைகள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. இரண்டு பரஸ்பரம் கட்டுப்படுத்தும் ஒரு திசை எதிர்வினைகள் ஒரே நேரத்தில் பயன்படுத்தப்படலாம், எடுத்துக்காட்டாக, ஆன்டிஜென் கண்டறிதலுடன் கூடிய RPHA மற்றும் ஆன்டிபாடி எரித்ரோசைட் கண்டறியும் RNAg.

ஆன்டிபாடி நியூட்ரலைசேஷன் ரியாக்ஷன் (ஆர்என்ஏபி) என்பது விரும்பிய ஆன்டிஜெனைக் கொண்ட ஒரு சஸ்பென்ஷனை ஒரு குறிப்பிட்ட நோயெதிர்ப்பு சீரம் கொண்ட குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடிகளை பொருத்தமான அளவுகளில் கலந்து 37 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் இரண்டு மணி நேரம் அடைகாப்பதைக் கொண்டுள்ளது. இதற்குப் பிறகு, ஆன்டிஜெனிக் எரித்ரோசைட் நோயறிதல் சேர்க்கப்படுகிறது. கலவை அசைக்கப்பட்டு அறை வெப்பநிலையில் விடப்படுகிறது. முடிவுகள் 3-4 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ளப்படுகின்றன, இறுதியாக 18-24 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு, சோதனைப் பொருளில் ஆன்டிஜென் இருந்தால், அது ஆன்டிபாடிகளை பிணைக்கும் (அவற்றை நடுநிலையாக்கும்), எனவே ஹீமாக்ளூட்டினேஷன் ஏற்படாது.

ஆன்டிஜென் நியூட்ரலைசேஷன் எதிர்வினை (RNAg) அதே கொள்கையைப் பயன்படுத்தி செய்யப்படுகிறது. இந்த விஷயத்தில் மட்டுமே சோதனைப் பொருளில் ஆன்டிபாடிகள் கண்டறியப்படுகின்றன. அத்தகைய சோதனைப் பொருளில் சேர்க்கப்பட்ட ஒரு குறிப்பிட்ட ஆன்டிஜென், அதில் உள்ள ஆன்டிபாடிகளுடன் பிணைக்கப்படும், அதாவது ஆன்டிபாடிகளால் ஆன்டிஜெனின் நடுநிலைப்படுத்தல் ஏற்படும், எனவே ஆன்டிபாடி எரித்ரோசைட் கண்டறியும் போது ஹெமாக்ளூட்டினேஷன் ஏற்படாது.

உறைதல் எதிர்வினை. இது ஒரு செயலற்ற விருப்பங்களில் ஒன்றாகும், அதாவது, ஆன்டிபாடி-சுமந்து செல்கள் மூலம் மத்தியஸ்தம் செய்யப்பட்ட கண்ணாடி மீது துரிதப்படுத்தப்பட்ட திரட்டல் எதிர்வினை. இந்த எதிர்வினை ஒரு தனித்துவமான சொத்தை அடிப்படையாகக் கொண்டது ஸ்டேஃபிளோகோகஸ் ஆரியஸ், அதன் செல் சுவரில் புரதம் A ஐக் கொண்டுள்ளது, IgG மற்றும் IgM இன் Fc துண்டுகளுடன் பிணைக்கிறது. இந்த வழக்கில், ஆன்டிபாடிகளின் செயலில் உள்ள மையங்கள் சுதந்திரமாக இருக்கும் மற்றும் ஆன்டிஜென்களின் குறிப்பிட்ட தீர்மானிப்பாளர்களுடன் தொடர்பு கொள்ளலாம். பொருத்தமான ஆன்டிபாடிகளுடன் உணர்திறன் செய்யப்பட்ட ஸ்டேஃபிளோகோகியின் 2% இடைநீக்கத்தின் ஒரு துளி கண்ணாடி ஸ்லைடில் பயன்படுத்தப்படுகிறது, மேலும் ஆய்வு செய்யப்படும் பாக்டீரியாவின் இடைநீக்கத்தின் ஒரு துளி சேர்க்கப்படுகிறது. ஆன்டிஜென் ஆன்டிபாடிகளுடன் பொருந்தினால், ஆன்டிபாடிகள் ஏற்றப்பட்ட ஸ்டேஃபிளோகோகியின் தெளிவான திரட்டல் 30-60 வினாடிகளுக்குள் நிகழ்கிறது.

லேடெக்ஸ் திரட்டல் எதிர்வினை (LAR). இந்த கண்டறியும் அமைப்பில் ஆன்டிபாடிகளின் கேரியர் சிறிய நிலையான லேடெக்ஸ் துகள்கள் ஆகும். கண்ணாடி மீது கிணறுகளில் மைக்ரோமெத்தடைப் பயன்படுத்தி எதிர்வினை செய்யப்படுகிறது. PAH இன் வெற்றிகரமான நிலைப்பாட்டிற்கான முக்கிய நிபந்தனை கணினி கூறுகளின் அளவு விகிதங்களை கண்டிப்பாக கடைபிடிப்பதாகும்: ஆன்டிபாடிகளுடன் உணர்திறன் செய்யப்பட்ட ஒரு லேடெக்ஸ் தயாரிப்பின் 10 μl சோதனைப் பொருளின் 50 μl இல் சேர்க்கப்படுகிறது. வணிக சோதனை அமைப்புகளில் உள்ள மூன்று கட்டுப்பாட்டு சோதனைகளைப் பயன்படுத்தி PAH இன் தனித்தன்மை கட்டுப்படுத்தப்படுகிறது: அறியப்படுகிறது நேர்மறை எதிர்வினை, வெளிப்படையாக எதிர்மறையான எதிர்வினை மற்றும் PAH-உணர்திறன் இல்லாத (ஆன்டிபாடிகளை எடுத்துச் செல்லாத) லேடெக்ஸ்களுக்கான லேடெக்ஸ் இடைநீக்கத்தின் தரக் கட்டுப்பாடு சோதனைப் பொருளுடன். நம் நாட்டில், வெவ்வேறு துகள் விட்டம் (0.3; 0.66; 0.75; 0.8 மைக்ரான்) கொண்ட பாலிஸ்டிரீன் மோனோடிஸ்பெர்ஸ் லேடெக்ஸ்கள் குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடிகளின் கேரியர்களாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. சோதனைப் பொருளில் நுண்ணுயிர்கள் அல்லது அவற்றின் ஆன்டிஜென்களை விரைவாகக் கண்டறிய LAG பயன்படுத்தப்படுகிறது.

ஆன்டிஜென்களின் நோயெதிர்ப்பு காந்த கண்டறிதல். கண்ணாடி மீது துரிதப்படுத்தப்பட்ட திரட்டல் எதிர்வினைக்கான விருப்பங்களில் ஒன்று, குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடிகளுடன் பூசப்பட்ட சூப்பர் காந்த பாலிமர் துகள்களின் பயன்பாட்டுடன் தொடர்புடையது. அத்தகைய ஒரு துகள் நுண்ணுயிரிகளின் 107-108 செல்கள் வரை பிணைக்கிறது, இதன் காரணமாக உணர்திறன் இந்த முறை 5 CFU/ml ஐ அடைகிறது. நுண்ணுயிரிகளின் நோயெதிர்ப்பு காந்த கண்டறிதல் CPR உடன் இணைந்து பயன்படுத்தப்படலாம்.

மொத்த ஹீமாக்ளூட்டினேஷன் எதிர்வினை (AHA). நோயாளிகளின் இரத்தத்தில் சுதந்திரமாக சுழலும் ஆன்டிஜென்கள் (ஆன்டிஜெனீமியா) மற்றும் ஆன்டிபாடிகளுடன் தொடர்புடைய ஆன்டிஜென்கள் - சுற்றும் நோயெதிர்ப்பு வளாகங்கள் (சிஐசி) ஆகியவற்றை விரைவாகக் கண்டறிய உங்களை அனுமதிக்கிறது. RAHA க்கு, பொருத்தமான ஆன்டிபாடிகளுடன் உணர்திறன் செய்யப்பட்ட சிவப்பு இரத்த அணுக்கள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. ஆன்டிபாடிகள் நிலையாக இருக்கும் உணர்திறன் கொண்ட எரித்ரோசைட்டுகளுக்கு ஆன்டிஜென்களைக் கொண்ட நோயாளியின் இரத்த சீரம் சேர்ப்பது, எரித்ரோசைட்டுகள் மற்றும் நோயெதிர்ப்பு வளாகங்களின் ஒட்டுதலுக்கு (திரட்டுதல்) வழிவகுக்கிறது.

ஆன்டிகுளோபுலின் கூம்ப்ஸ் சோதனை (ஆர். கூம்ப்ஸ் எதிர்வினை). முழு (டைவலன்ட்) ஆன்டிபாடிகள் நேரடி மற்றும் செயலற்ற திரட்டல் எதிர்வினைகளைப் பயன்படுத்தி தீர்மானிக்கப்படுகின்றன. முழுமையற்ற (மோனோவலன்ட், பிளாக்கிங்) ஆன்டிபாடிகள் இந்த முறைகளால் கண்டறியப்படவில்லை, ஏனெனில் அவை ஆன்டிஜெனுடன் இணைந்தால், அவை அதைத் தடுக்கின்றன, ஆனால் ஆன்டிஜெனின் ஒருங்கிணைப்பை பெரிய நிறுவனங்களாக ஏற்படுத்த முடியாது. முழுமையற்ற (தடுக்கும்) ஆன்டிபாடிகள் ஒரு செயலில் உள்ள மையம் மட்டுமே செயல்படும்; இரண்டாவது செயலில் உள்ள மையம் அறியப்படாத காரணத்திற்காக வேலை செய்யாது. முழுமையற்ற ஆன்டிபாடிகளைக் கண்டறிய, ஒரு சிறப்பு கூம்ப்ஸ் எதிர்வினை பயன்படுத்தப்படுகிறது (படம் 72). எதிர்வினை உள்ளடக்கியது: நோயாளியின் சீரம், இதில் முழுமையற்ற ஆன்டிபாடிகள் தீர்மானிக்கப்படுகின்றன, கார்பஸ்குலர் ஆன்டிஜென்-கண்டறிதல், மனித குளோபுலினுக்கு ஆன்டிபாடிகள் கொண்ட ஆன்டிகுளோபுலின் சீரம். எதிர்வினை இரண்டு நிலைகளில் நிகழ்கிறது:

முழுமையற்ற ஆன்டிபாடிகளுடன் ஆன்டிஜெனின் தொடர்பு. காணக்கூடிய வெளிப்பாடுகள் எதுவும் இல்லை. நோயாளியின் மீதமுள்ள சீரம் உள்ள ஆன்டிஜெனைக் கழுவுவதன் மூலம் முதல் நிலை முடிக்கப்படுகிறது.

ஆன்டிஜெனின் மீது உறிஞ்சப்பட்ட முழுமையற்ற ஆன்டிபாடிகளுடன் மனித குளோபுலின் கொண்ட விலங்குக்கு நோய்த்தடுப்பு மூலம் பெறப்பட்ட ஆன்டிகுளோபுலின் சீரம் தொடர்பு. ஆன்டிகுளோபுலின் ஆன்டிபாடிகள் இருவலன்ட் என்ற உண்மையின் காரணமாக, அவை தனித்தனி ஏஜி + வளாகங்களின் இரண்டு மோனோவலன்ட் ஆன்டிபாடிகளை பிணைக்கின்றன. முழுமையற்ற ஆன்டிபாடி, இது அவர்களின் ஒட்டுதல் மற்றும் புலப்படும் வண்டல் தோற்றத்திற்கு வழிவகுக்கிறது.

திரட்டுதல் என்பது எலக்ட்ரோலைட் (ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு கரைசல்) முன்னிலையில் ஆன்டிபாடிகளின் செல்வாக்கின் கீழ் நுண்ணுயிர்கள் அல்லது பிற செல்களை ஒட்டுதல் மற்றும் மழைப்பொழிவு ஆகும்.ஒட்டப்பட்ட பாக்டீரியாக்களின் குழுக்கள் (செல்கள்) அக்லூட்டினேட் என்று அழைக்கப்படுகின்றன. திரட்டல் எதிர்வினைக்கு பின்வரும் கூறுகள் தேவை:

1. நோய்வாய்ப்பட்ட அல்லது நோயெதிர்ப்பு விலங்கின் சீரத்தில் காணப்படும் ஆன்டிபாடிகள் (அக்லூட்டினின்கள்).

2. ஆன்டிஜென் - உயிருள்ள அல்லது கொல்லப்பட்ட நுண்ணுயிரிகள், இரத்த சிவப்பணுக்கள் அல்லது பிற உயிரணுக்களின் இடைநிறுத்தம்.

3. ஐசோடோனிக் (0.9%) சோடியம் குளோரைடு கரைசல்.

செரோடியாக்னோசிஸிற்கான திரட்டல் சோதனை பயன்படுத்தப்படுகிறது டைபாயிட் ஜுரம்மற்றும் paratyphoid காய்ச்சல் (விடல் எதிர்வினை), புருசெல்லோசிஸ் (ரைட் மற்றும் ஹெடில்சன் எதிர்வினை), துலரேமியா போன்றவை. ஆன்டிபாடி என்பது நோயாளியின் சீரம் மற்றும் ஆன்டிஜென் என்பது அறியப்பட்ட நுண்ணுயிரி ஆகும். நுண்ணுயிரிகள் அல்லது பிற செல்களை அடையாளம் காணும்போது, ​​அவற்றின் இடைநீக்கம் ஆன்டிஜெனாகவும், அறியப்பட்ட நோயெதிர்ப்பு சீரம் ஆன்டிபாடியாகவும் பயன்படுத்தப்படுகிறது. இந்த எதிர்வினை நோயறிதலுக்கு பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது குடல் தொற்றுகள், கக்குவான் இருமல் போன்றவை.

RA ஐ நிலைநிறுத்துவதற்கான முறைகள்

கண்ணாடி மீது தோராயமான RA

பயன்படுத்தப்பட்ட RA

(தொகுதி முறை)

உறைதல் எதிர்வினை

கண்ணாடி மீது விரிக்கப்பட்ட RA (செரோஐடென்டிஃபிகேஷன்)

கண்ணாடி மீது திரட்டுதல் எதிர்வினை.குறிப்பிட்ட (உறிஞ்சப்பட்ட) சீரம் இரண்டு துளிகள் மற்றும் ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு தீர்வு ஒரு துளி கொழுப்பு-இலவச கண்ணாடி ஸ்லைடு பயன்படுத்தப்படும். உறிஞ்சப்படாத சீரம்கள் 1:5 - 1:100 என்ற விகிதத்தில் முன்கூட்டியே நீர்த்தப்படுகின்றன. கண்ணாடியில் சொட்டுகள் பயன்படுத்தப்பட வேண்டும், இதனால் அவற்றுக்கிடையே தூரம் இருக்கும். கலாச்சாரம் ஒரு கண்ணி அல்லது பைப்பட் மூலம் கண்ணாடி மீது முழுமையாக அரைக்கப்பட்டு, பின்னர் ஒரு துளி ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு கரைசல் மற்றும் சீரம் சொட்டுகளில் ஒன்றில் சேர்க்கப்படுகிறது, ஒவ்வொன்றிலும் ஒரே மாதிரியான இடைநீக்கம் உருவாகும் வரை கிளறவும். கலாச்சாரம் இல்லாமல் ஒரு துளி சீரம் ஒரு சீரம் கட்டுப்பாடு ஆகும்.

கவனம்!நீங்கள் சீரம் இருந்து கலாச்சாரம் ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு தீர்வு ஒரு துளி மாற்ற முடியாது, இது ஒரு ஆன்டிஜென் கட்டுப்பாடு. எதிர்வினை 1-3 நிமிடங்கள் அறை வெப்பநிலையில் நடைபெறுகிறது. சீரம் கட்டுப்பாடு வெளிப்படையானதாக இருந்தால், ஆன்டிஜென் கட்டுப்பாட்டில் ஒரு சீரான கொந்தளிப்பு காணப்படுகிறது, மேலும் ஒரு தெளிவான திரவத்தின் பின்னணியில் சீரம் கலந்த கலாச்சாரம் துளியில் அக்லுட்டினேட் செதில்கள் தோன்றும், எதிர்வினை முடிவு நேர்மறையானதாகக் கருதப்படுகிறது.

நோயறிதல் உடலியல்

சீரம் + கலாச்சார தீர்வு + கலாச்சாரம்

விரிவான திரட்டல் எதிர்வினை (தொகுதி முறை).சீரியல், பெரும்பாலும் இருமடங்கு, சீரம் நீர்த்தங்கள் தயாரிக்கப்படுகின்றன. முறை வால்யூமெட்ரிக் என்று அழைக்கப்படுகிறது. இரத்த சீரம் உள்ள ஆன்டிபாடி டைட்டரை தீர்மானிக்க, 6 குழாய்களை எடுத்துக் கொள்ளுங்கள். முதல் சோதனைக் குழாயில் 1 மிலி அசல் சீரம் நீர்த்த 1:50 ஐ ஊற்றவும் மற்றும் பட்டம் பெற்ற பைப்பட்டைப் பயன்படுத்தி அனைத்து 6 சோதனைக் குழாய்களிலும் 1 மில்லி உப்பு கரைசலை சேர்க்கவும். முதல் சோதனைக் குழாய் 2 மில்லி அளவுடன் 1:100 சீரம் நீர்த்தலைக் கொடுக்கும். முதல் சோதனைக் குழாயிலிருந்து 1 மில்லியை இரண்டாவது சோதனைக் குழாயிற்கு மாற்றவும், அங்கு நீர்த்தம் 1:200 ஆக மாறும். எனவே முதல் 5 சோதனைக் குழாய்களில் (1:100, 1:200, 1:400, 1:800, 1:1600) சீரம் தொடர் நீர்த்துப்போகச் செய்யவும். ஐந்தாவது சோதனைக் குழாயிலிருந்து, கிருமிநாசினி கரைசலில் 1 மி.லி. அனைத்து 6 சோதனைக் குழாய்களிலும் 2 சொட்டு கண்டறிதல்களைச் சேர்க்கவும். ஆறாவது குழாய் ஒரு கலாச்சாரக் கட்டுப்பாட்டாகும், ஏனெனில் இது உப்பு கரைசல் மற்றும் நோயறிதல் ஆகியவற்றை மட்டுமே கொண்டுள்ளது.

கலாச்சாரத்தின் தன்னிச்சையான திரட்டலைத் தவிர்ப்பதற்கு இத்தகைய கட்டுப்பாடு அவசியம். குழாய்கள் அசைக்கப்பட்டு, 37 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் ஒரு தெர்மோஸ்டாட்டில் 2 மணி நேரம் வைக்கப்படுகின்றன, பின்னர் அறை வெப்பநிலையில் ஒரு நாளுக்கு விடப்படுகின்றன, அதன் பிறகு திரட்டல் எதிர்வினையின் முடிவுகள் பதிவு செய்யப்படுகின்றன. வாழ்க்கையின் முதல் மாதங்களில் குழந்தைகளின் செராவுடன் ஒரு திரட்டல் எதிர்வினை செய்யும் போது, ​​ஆன்டிபாடி உருவாக்கத்தின் செயல்பாட்டுத் தாழ்வு காரணமாக, குறைந்த ஆன்டிபாடி டைட்டர்களை அடையாளம் காண வேண்டியது அவசியம், இது சீரம் நீர்த்தும்போது கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ளப்படுகிறது. ஆரம்ப சீரம் நீர்த்தல் 1:25 ஆகும். முதல் சோதனைக் குழாயில், 1:50 நீர்த்தம் பெறப்படுகிறது, பின்னர் 1:100, முதலியன.

மணிக்கு நேர்மறையான முடிவுசோதனைக் குழாய்களில் எதிர்வினைகள், தானியங்கள் அல்லது செதில்களின் வடிவத்தில் ஒட்டும் செல்கள் தெளிவான திரவத்தின் பின்னணியில் தெரியும்.அக்லூட்டினேட் படிப்படியாக "குடை" வடிவத்தில் கீழே குடியேறுகிறது, மேலும் வண்டலுக்கு மேலே உள்ள திரவம் தெளிவாகிறது. ஆன்டிஜென் கட்டுப்பாடு சீராக கொந்தளிப்பானது.

வண்டலின் தன்மையின் அடிப்படையில், நேர்த்தியான மற்றும் கரடுமுரடான (செதில்களாக) திரட்டுதல் வேறுபடுகிறது. ஓ-செராவுடன் பணிபுரியும் போது நேர்த்தியான திரட்டல் பெறப்படுகிறது. கரடுமுரடான தானியங்கள் - இயக்க நுண்ணுயிரிகள் ஃபிளாஜெல்லர் எச்-செராவுடன் தொடர்பு கொள்ளும்போது. இது நுண்ணிய தானியத்தை விட வேகமாக நிகழ்கிறது, இதன் விளைவாக வண்டல் மிகவும் தளர்வானது மற்றும் எளிதில் உடைக்கப்படுகிறது.

எதிர்வினையின் தீவிரம் பின்வருமாறு வெளிப்படுத்தப்படுகிறது:

அனைத்து செல்கள் குடியேறியுள்ளன, சோதனைக் குழாயில் உள்ள திரவம் முற்றிலும் வெளிப்படையானது. எதிர்வினையின் விளைவு கூர்மையாக நேர்மறையானது;

குறைந்த வண்டல் உள்ளது, திரவம் முழுமையாக துடைக்காது. எதிர்வினையின் விளைவு நேர்மறையானது;

இன்னும் குறைவான வண்டல் உள்ளது, திரவம் மேகமூட்டமாக உள்ளது. எதிர்வினையின் விளைவு சந்தேகத்திற்குரியது;

சோதனைக் குழாயின் அடிப்பகுதியில் ஒரு சிறிய வண்டல் உள்ளது, திரவம் மேகமூட்டமாக உள்ளது. கேள்விக்குரிய எதிர்வினை முடிவு;

வண்டல் இல்லை, ஆன்டிஜென் கட்டுப்பாட்டில் உள்ளதைப் போல திரவம் ஒரே மாதிரியான மேகமூட்டமாக உள்ளது. எதிர்மறை எதிர்வினை முடிவு

திரட்டுதல் எதிர்வினை திரட்டுதல் எதிர்வினை

(RA) - அடையாளம் காணும் முறை மற்றும் அளவீடு Ag மற்றும் At, நிர்வாணக் கண்ணுக்குத் தெரியும் திரட்டுகளை உருவாக்கும் திறனை அடிப்படையாகக் கொண்டது. தொற்று நோய்கள் துறையில். நோய்கள் அல்லது பிற நோக்கங்களுக்காக அறியப்படாத நுண்ணுயிரிகள் மற்றும் செல்களை அடையாளம் காணவும், இரத்தம் மற்றும் பிற திரவங்களில் ஏபியின் இருப்பு மற்றும் அளவைக் கண்டறியவும் பயன்படுத்தப்படுகிறது. நிர்ணயக் கொள்கையானது Ag மற்றும் Ab இடையேயான தொடர்புகளின் குறிப்பிட்ட தன்மையை அடிப்படையாகக் கொண்டது மற்றும் அறியப்படாதவற்றிலிருந்து அறியப்பட்டதைக் கண்டுபிடிப்பதைக் கொண்டுள்ளது. RA க்கு பல விருப்பங்கள் உள்ளன: அளவு மற்றும் தரம், சோதனை குழாய் மற்றும் கண்ணாடி, அளவு மற்றும் நீர்த்துளி, வழக்கமான, துரிதப்படுத்தப்பட்ட மற்றும் எக்ஸ்பிரஸ் முறைகள். RA ஐ நிலைப்படுத்த உங்களுக்குத் தேவை: 1) s-ka இரத்தம்.பாக்டீரியாவின் வகையை (var) தீர்மானிப்பதற்கான மாறுபாட்டில், முயல்களுக்கு தடுப்பூசி போடுவதன் மூலம் உற்பத்தி செய்யப்படும் தொழில்துறை திரட்டுதல் சோதனைகள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. ஏபி வகையை நிர்ணயிக்கும் மாறுபாட்டில், சோதனையிலிருந்து இரத்த மாதிரி எடுக்கப்படுகிறது. மக்கள் அல்லது விலங்குகள். தீர்வு மலட்டுத்தன்மை மற்றும் இடைநிறுத்தப்பட்ட துகள்கள் இல்லாமல் இருக்க வேண்டும். உப்பு கரைசலில் அடிப்படை நீர்த்தலை தயார் செய்யவும். இந்த நோய்க்கான கண்டறியும் டைட்டரை விட இது 2-4 மடங்கு குறைவாக இருக்க வேண்டும்; 2) ஆக.ஏபி வகையின் உறுதியுடன் எதிர்வினையின் பதிப்பில், தொழில்துறை கண்டறியும் கருவிகள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன; 18-20 மணி நேர அகார் (குறைவாக அடிக்கடி குழம்பு) சோதனையின் உப்புக் கரைசலில் 1-3 பில்லியன் இடைநீக்க வடிவில், நோய் கண்டறிதல்கள் தயாரிக்கப்படுகின்றன. 70 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 1 மணிநேரம் அல்லது ஃபார்மால்டிஹைடுடன் 37 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 24 மணிநேர அடைகாப்பதன் மூலம் (இறுதி செறிவு 0.2%) நீர் குளியல் மூலம் நுண்ணுயிர் செயலிழக்கச் செய்யப்படுகிறது; 3) உப்பு கரைசல் வடிவில் எலக்ட்ரோலைட்.ஸ்டேஜிங் நுட்பம் அளவீட்டு தொடர் குழாய் s-ki இல் Ab titer ஐ தீர்மானிக்க RA: s-ki இன் முக்கிய நீர்த்தலில் இருந்து பல வரிசை வேலை நீர்த்தங்கள் தயாரிக்கப்படுகின்றன. வரிசைகளின் எண்ணிக்கை பரிசோதனையில் எடுக்கப்பட்ட நோயறிதல்களின் எண்ணிக்கையைப் பொறுத்தது; இந்தத் தொடரில் குறைந்தபட்சம் கண்டறிதல் ஏபி டைட்டருடன் தொடர்புடைய நீர்த்தம் இருக்க வேண்டும், கீழே இரண்டு நீர்த்தங்கள் மற்றும் அதற்கு மேல் இரண்டு நீர்த்தங்கள். எடுத்துக்காட்டாக, கண்டறியும் டைட்டர் 1:100 எனில், RA ஐ நிலைநிறுத்துவதற்கான அளவீட்டு முறையுடன் பின்வரும் நீர்த்தல்கள் தயாரிக்கப்பட வேண்டும்: 1:25, 1:50, 1:100, 1:200, 1"400; சொட்டு மருந்துடன் முறை, முதல் நீர்த்தல் (1:25) தேவையில்லை, ஆனால் மற்றொரு அதிக நீர்த்தல் தேவைப்படுகிறது - 1:800 பி. அறிவியல் ஆராய்ச்சி s-ku எதிர்மறையான எதிர்வினைக்கு பெயரிடப்பட்டது. இது பின்வருமாறு நீர்த்தப்படுகிறது: 0.25 மில்லி உப்புக் கரைசல் அனைத்து சோதனைக் குழாய்களிலும் ஊற்றப்படுகிறது, 1 வது ஒன்றைத் தவிர, 0.5 மில்லி அளவுகளில் எதிர்வினை மேற்கொள்ளப்படும்போது, ​​0.5 மில்லி அளவு 1 அளவில் மேற்கொள்ளப்படும் போது. மி.லி. 0.25 (0.5) மிலி பிரதான நீர்த்தத்தை 1 மற்றும் 2 வது சோதனைக் குழாய்களில், 2 வது சோதனைக் குழாயிலிருந்து, வெட்டு அளவு மற்றும் இனப்பெருக்கம் s-kமற்றும் 2 மடங்கு அதிகரித்தது, 0.25 (0.5) மில்லி 3 வது, 3 வது முதல் 4 வது, முதலியன மாற்றப்படுகிறது. கடைசி வரை, வெட்டப்பட்ட பகுதியிலிருந்து 0.25 (0.5) மில்லி அளவுகளை சமப்படுத்த எல்லாவற்றிலும் ஊற்றப்படுகிறது. ஒவ்வொரு நீர்த்தலும் ஒரு தனி பைப்பெட்டைப் பயன்படுத்தி மேற்கொள்ளப்படுகிறது. பல நோயறிதல்கள் பரிசோதனைக்கு எடுத்துக் கொள்ளப்பட்டால், அவை ஒவ்வொன்றிற்கும் அதன் சொந்த நீர்த்தங்கள் அதே வழியில் தயாரிக்கப்படுகின்றன. சோதனைக் குழாயின் ஒவ்வொரு நீர்த்தலுக்கும் சோதனைக் குழாயின் தொகுதிக்கு சமமான அளவில் டயக்னோஸ்டிகம் சேர்க்கப்படுகிறது, இதன் விளைவாக ஒவ்வொரு சோதனைக் குழாயிலும் நீர்த்துவது இரட்டிப்பாகிறது. சோதனையானது s-ki கட்டுப்பாடு (0.25 - 0.5 மில்லி s-ki இன் முக்கிய நீர்த்தம் மற்றும் அதே அளவு உப்பு கரைசல்) மற்றும் Ag கட்டுப்பாடு (0.25 - 0.5 மில்லி கண்டறிதல் மற்றும் அதே அளவு உப்பு கரைசல்) ஆகியவற்றை ஒத்துள்ளது. பரிசோதனையில் பல கண்டறிதல்கள் பயன்படுத்தப்பட்டால், ஒவ்வொன்றும் அதன் சொந்த ஆன்டிஜென் கட்டுப்பாட்டைக் கொண்டிருக்கும். சோதனைக் குழாய்களைக் கொண்ட ரேக் நன்றாக அசைக்கப்பட்டு, 37 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 4 மணிநேரத்திற்கு ஒரு தெர்மோஸ்டாட்டில் வைக்கப்பட்டு, அடுத்த நாள் வரை அறை வெப்பநிலையில் விடப்படுகிறது, அதன் பிறகு வண்டலின் அளவு மற்றும் அகற்றப்பட்ட அளவு ஆகியவற்றின் அடிப்படையில் PA பதிவு செய்யப்படுகிறது. திரவம். இந்த குறிகாட்டிகளின் நிர்ணயம், அக்லூட்டினேட்டுகளின் தன்மையைப் பொறுத்து, நிர்வாணக் கண்ணால் இருண்ட பின்னணியில், அக்லூட்டினோஸ்கோப்பில் அல்லது நுண்ணோக்கி கண்ணாடியின் குழிவான மேற்பரப்பில் மேற்கொள்ளப்படுகிறது. கணக்கியல் கட்டுப்பாடுகளுடன் தொடங்குகிறது: கட்டுப்பாடு C வெளிப்படையாக இருக்க வேண்டும், Ag ஒரே மாதிரியான மேகமூட்டமாக இருக்க வேண்டும் (குழாயை அசைத்த பிறகு). கட்டுப்பாடுகள் நன்றாக இருந்தால், அனைத்து சோதனைக் குழாய்களிலும் திரட்டலின் இருப்பு மற்றும் அளவை நிறுவவும், அவை pluses மூலம் நியமிக்கப்படுகின்றன: பெரிய வண்டல் மற்றும் திரவத்தின் முழுமையான தீர்வு - 4 pluses; பெரிய வண்டல் மற்றும் திரவத்தின் முழுமையற்ற தீர்வு - 3 பிளஸ்கள்; கவனிக்கத்தக்க வண்டல் மற்றும் திரவத்தின் குறிப்பிடத்தக்க சுத்திகரிப்பு ஆகியவை 2 பிளஸ் ஆகும். இதற்குப் பிறகு, டைட்டர் தீர்மானிக்கப்படுகிறது: குறைந்தபட்சம் 2 பிளஸ்களின் திரட்டல் தீவிரத்துடன் கூடிய மிக உயர்ந்த நீர்த்தல். டைட்டர் ஆராய்ச்சி s-ki இந்த நோய்க்கான கண்டறியும் டைட்டருடன் ஒப்பிடப்படுகிறது. டைட்டர் படித்தால். s-ki கண்டறியும் மதிப்பை விட 2 மடங்கு குறைவாக உள்ளது, எதிர்வினை சந்தேகத்திற்குரியதாக மதிப்பிடப்படுகிறது; டைட்டர் சமமாக இருந்தால் நோய் கண்டறிதல் - எப்படிபலவீனமான நேர்மறை; இது 2-4 மடங்கு அதிகமாக இருந்தால், அது 8 அல்லது அதற்கு மேற்பட்ட மடங்கு அதிகமாக இருந்தால், அது நேர்மறையாகக் கருதப்படுகிறது. ஏபியின் பரவலான விநியோகத்துடன் ஆரோக்கியமான மக்கள் RA ஐ மதிப்பிடுவதற்கு, Ab titer இன் அதிகரிப்பு பயன்படுத்தப்படுகிறது. தொடர் RA இல் Ar வகையைத் தீர்மானிக்க, வரிசைகளின் எண்ணிக்கை அடையாளத்திற்காக எடுக்கப்பட்ட எண்ணுடன் ஒத்திருக்க வேண்டும். கண்டறியும் சோதனைகள். நோயறிதல் சோதனையின் முக்கிய நீர்த்தலில் இருந்து, AB டைட்டரைத் தீர்மானிக்க RA இல் உள்ளதைப் போலவே தொடர்ச்சியான இரண்டு மடங்கு நீர்த்தங்களின் தொடர் தயாரிக்கப்படுகிறது. நீர்த்துப்போகும் சோதனையின் டைட்டரைச் சார்ந்தது, சோதனையின் தலைப்புக்கு சமமான நீர்த்தம் இருப்பது அவசியம், எடுத்துக்காட்டாக, அதை விட 2, 4, 6, 8 மடங்கு குறைவு கண்டறியும் சோதனையின் தலைப்பு 1 3200 ஆகும், பின்னர் நீங்கள் நீர்த்த 1 3200, 1 1600, 1 800, 1 400, 1 200 ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்த வேண்டும், அதே அளவு சோதனை செய்யப்பட்ட Ag இன் அளவு சோதனையின் நீர்த்தங்களில் சேர்க்கப்படுகிறது, இதன் விளைவாக, நீர்த்தல் சோதனை 2 மடங்கு அதிகரிக்கிறது மற்றும் சோதனையில் பல s-k ஈடுபட்டிருந்தால், அவை ஒவ்வொன்றும் அதன் சொந்தக் கட்டுப்பாடு தேவைப்படுகிறது 37 ° C இல் உள்ள தெர்மோஸ்டாட்டில், ஆய்வுக்கு இணங்குவதைப் பற்றி ஒரு முடிவை எடுப்பதற்காக, வினையின் மதிப்பீடுகள் மேலே விவரிக்கப்பட்டுள்ளபடி கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ளப்படுகின்றன. சோதனையில் எடுத்துக் கொள்ளப்பட்டால், வினையின் தலைப்பு 1 4 மற்றும் அதற்குக் கீழே உள்ள டைட்டர்கள் ஒரு குழு எதிர்வினையாகக் கருதப்படும் டிரிப் எம்.டி RA இன் ஸ்டேஜிங் வால்யூமெட்ரிக்கில் இருந்து வேறுபடுகிறது, இதில் s-ku 1 மில்லி அளவில் நீர்த்தப்படுகிறது, Ag அதிக செறிவில் (10 பில்லியன்/மிலி) பயன்படுத்தப்படுகிறது மற்றும் இது 1 சேர்க்கப்படுகிறது. - 2 ஒரு சோதனைக் குழாயில் குறைகிறது

(ஆதாரம்: நுண்ணுயிரியல் விதிமுறைகளின் அகராதி)

திரட்டுதல் எதிர்வினை (lat இலிருந்து. திரட்டுதல்- gluing) - எலக்ட்ரோலைட்டுகள் முன்னிலையில் ஆன்டிபாடிகள் மூலம் கார்பஸ்கல்ஸ் (பாக்டீரியா, சிவப்பு இரத்த அணுக்கள், முதலியன) ஒட்டுதல்.

திரட்டுதல் எதிர்வினைஉடற்கூறுகள் (உதாரணமாக, பாக்டீரியா) "ஒட்டப்பட்ட" ஆன்டிபாடிகள் (படம் 7.37) கொண்ட செதில்கள் அல்லது வண்டல் வடிவத்தில் தன்னை வெளிப்படுத்துகிறது. திரட்டல் எதிர்வினை பயன்படுத்தப்படுகிறது: நோயாளியிலிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்ட நோய்க்கிருமியைத் தீர்மானிக்கவும்; நோயாளியின் இரத்த சீரம் உள்ள ஆன்டிபாடிகளை தீர்மானித்தல்; இரத்த குழுக்களை தீர்மானித்தல்.

அரிசி. 7.37 a, b. உடன் திரட்டுதல் எதிர்வினைIgMஆன்டிபாடிகள் (அ) மற்றும்IgGஆன்டிபாடிகள் (பி)

1. நோயாளியிலிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்ட நோய்க்கிருமியைத் தீர்மானித்தல் தோராயமான எதிர்வினைகண்ணாடி மீது திரட்டுதல் (படம் 7.38). நோயாளியிடமிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்ட பாக்டீரியாவின் இடைநீக்கம் ஒரு துளி திரட்டும் சீரம் (1:20 நீர்த்தல்) சேர்க்கப்படுகிறது. ஒரு மிதவை வீழ்படிவு உருவாகிறது.

அரிசி. 7.38.

ஒரு நோயாளியிலிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்ட ஒரு நோய்க்கிருமியுடன் ஒரு விரிவான திரட்டல் எதிர்வினை (படம் 7.39). நோயாளியிடமிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்ட பாக்டீரியாவின் இடைநீக்கம், aglutinating சீரம் நீர்த்தங்களில் சேர்க்கப்படுகிறது.

அரிசி. 52

2. நோயாளியின் இரத்த சீரம் உள்ள ஆன்டிபாடிகளை தீர்மானித்தல்
நோயாளியின் இரத்த சீரம் (படம் 7.39) உடன் விரிவான திரட்டல் எதிர்வினை. நோயறிதல் நோயாளியின் சீரம் நீர்த்துப்போகச் சேர்க்கப்படுகிறது.
- O-diagnosticum உடன் திரட்டுதல் (வெப்பத்தால் கொல்லப்படும் பாக்டீரியா, O-ஆன்டிஜெனைத் தக்கவைத்தல்) நேர்த்தியான திரட்டல் வடிவத்தில் ஏற்படுகிறது.
- H-diagnosticum உடன் திரட்டுதல் (ஃபார்மால்டிஹைடால் கொல்லப்படும் பாக்டீரியா, ஃபிளாஜெல்லர் H-ஆன்டிஜெனைத் தக்கவைத்தல்) பெரியது மற்றும் வேகமாக நிகழ்கிறது.
3. இரத்தக் குழுக்களைத் தீர்மானிப்பதற்கான திரட்டல் எதிர்வினை A (I), B (III) என்ற இரத்தக் குழுவின் ஆன்டிஜென்களுக்கு எதிராக நோய் எதிர்ப்பு சீரம் ஆன்டிபாடிகளுடன் எரித்ரோசைட்டுகளின் திரட்டலைப் பயன்படுத்தி ABO அமைப்பை (அட்டவணை ஆ) நிறுவுவதற்கு இரத்தக் குழுக்களைத் தீர்மானிப்பதற்கான திரட்டல் எதிர்வினை பயன்படுத்தப்படுகிறது. கட்டுப்பாடு: ஆன்டிபாடிகள் இல்லாத சீரம், அதாவது. சீரம் ஏபி (IV) இரத்தக் குழு; A (II), B (III) குழுக்களின் சிவப்பு இரத்த அணுக்களில் உள்ள ஆன்டிஜென்கள். எதிர்மறை கட்டுப்பாட்டில் ஆன்டிஜென்கள் இல்லை, அதாவது, குழு O (I) எரித்ரோசைட்டுகள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன.

அட்டவணை 7.6. ABO இரத்தக் குழுக்களைத் தீர்மானித்தல்

எதிர்வினை முடிவுகள்		குழு
		சொந்தமானது
		ஆய்வு செய்தார் இரத்தம்
உடன் சிவப்பு இரத்த அணுக்கள்	சீரம் (பிளாஸ்மா)
தரநிலை	தரத்துடன்
சீரம்கள்