கண்ணாடி நுண்ணுயிரியலில் திரட்டுதல் எதிர்வினை. விரிவான திரட்டல் எதிர்வினை (RA)

ஒரு திரட்டல் எதிர்வினை (RA) என்பது ஒரு எலக்ட்ரோலைட்டின் முன்னிலையில் ஆன்டிபாடிகளின் செல்வாக்கின் கீழ் நுண்ணுயிரிகள் அல்லது பிற செல்களின் ஒட்டுதல் மற்றும் மழைப்பொழிவு ஆகும். இதன் விளைவாக வரும் வீழ்படிவு ஒரு அக்லூட்டினேட் என்று அழைக்கப்படுகிறது.

RA பயன்படுத்தப்படுகிறது:

1. நோயாளியின் இரத்த சீரம் (செரோடியோக்னோசிஸ்) உள்ள ஆன்டிபாடிகளைக் கண்டறிய.

2. ஒரு நோயாளியிலிருந்து (செரோடைப்பிங்) தனிமைப்படுத்தப்பட்ட நோய்க்கிருமி நுண்ணுயிரிகளின் தூய கலாச்சாரத்தின் வகை மற்றும் செரோவரை தீர்மானிக்க.

நோயாளிகளின் இரத்த சீரம் உள்ள ஆன்டிபாடிகளை தீர்மானிக்க, திரட்டுதல் எதிர்வினை பயன்படுத்தப்படுகிறது, எடுத்துக்காட்டாக, டைபாய்டு காய்ச்சல் மற்றும் பாராடைபாய்டு காய்ச்சல் (வைடல் எதிர்வினை), புருசெல்லோசிஸ் (ரைட், ஹெடில்சன் எதிர்வினை), துலரேமியா, லெப்டோஸ்பிரோசிஸ் மற்றும் பிற. தொற்று நோய்கள், அத்துடன் ஒரு நோயாளி (குடல் தொற்று, கக்குவான் இருமல், முதலியன) இருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்ட நோய்க்கிருமியை தீர்மானிக்க. இரத்த குழுக்கள், Rh காரணி போன்றவற்றை தீர்மானிக்க RA பயன்படுத்தப்படுகிறது.

எதிர்வினைக்கு பின்வரும் கூறுகள் தேவை:

1. ஆன்டிஜென் (agglutinogen) கார்பஸ்குலர் இருக்க வேண்டும், அதாவது, அது வாழும் அல்லது கொல்லப்பட்ட நுண்ணுயிரிகள் (கண்டறிதல் மீ), எரித்ரோசைட்டுகள் அல்லது பிற செல்கள் ஒரு இடைநீக்கம். பொதுவாக, அகர் சாய்வுகளில் வளர்க்கப்படும் நுண்ணுயிரிகளின் தினசரி கலாச்சாரம் பயன்படுத்தப்படுகிறது. கலாச்சாரம் 3 - 4 மில்லி ஐசோடோனிக் கரைசலுடன் கழுவப்பட்டு, ஒரு மலட்டு குழாய்க்கு மாற்றப்பட்டு, அடர்த்தி தீர்மானிக்கப்படுகிறது. இடைநீக்கம் ஒரே மாதிரியாக இருக்க வேண்டும் மற்றும் 1 மில்லிக்கு 3 பில்லியன் நுண்ணுயிர் செல்களைக் கொண்டிருக்க வேண்டும். கொல்லப்பட்ட நுண்ணுயிரிகளின் இடைநீக்கத்தைப் பயன்படுத்துதல் - கண்டறிதல் - வேலை (உற்பத்தியில் தயாரிக்கப்பட்டது) எளிதாக்குகிறது.

2. ஆன்டிபாடிகள் (அக்லூட்டினின்கள்) நோயாளியின் சீரம் (செரோடியோக்னோசிஸின் போது) அல்லது திரட்டும் சீரம் (செரோடைப்பிங்கின் போது) காணப்படுகின்றன. கொல்லப்படும் பாக்டீரியாக்களுடன் முயல்களுக்கு தடுப்பூசி போடுவதன் மூலம் திரட்டும் செரா பெறப்படுகிறது.

திரட்டும் டைட்டர்சீரம் அதன் மிக உயர்ந்த நீர்த்தல் என்று அழைக்கப்படுகிறது, இதில் சில சோதனை நிலைமைகளின் கீழ் தொடர்புடைய ஆன்டிஜெனுடன் வினைபுரிகிறது.

திரட்டும் செரா பூர்வீகமாக (உறிஞ்சப்படாதது) மற்றும் உறிஞ்சப்பட்டதாக இருக்கலாம். சிறிய நீர்த்தங்களில் உள்ள நேட்டிவ் செரா, விலங்குகள் சீரம் பெறுவதற்கு நோய்த்தடுப்பு செய்யப்பட்ட நுண்ணுயிரிகளுடன் மட்டுமல்லாமல், தொடர்புடைய வகை நுண்ணுயிரிகளுடனும் தொடர்பு கொள்கின்றன, ஏனெனில் அவை குழு ஆன்டிபாடிகளைக் கொண்டிருக்கின்றன (பொதுவான ஆன்டிஜென்களைக் கொண்ட நுண்ணுயிரிகளுக்கு ஆன்டிபாடிகள்). நேட்டிவ் செரா ஒரு விரிவான திரட்டல் எதிர்வினைக்கு (செரோடியாக்னோசிஸ்) பயன்படுத்தப்படுகிறது, இது எதிர்வினையின் இருப்பை மட்டுமல்ல, ஆன்டிபாடி டைட்டரின் அதிகரிப்பின் இயக்கவியலையும் கணக்கில் எடுத்துக்கொள்கிறது.

குழு ஆன்டிபாடிகள் குழு ஆன்டிஜென்களைக் கொண்ட தொடர்புடைய பாக்டீரியாக்களுடன் தொடர்புகொள்வதன் மூலம் பூர்வீக சீரம் இருந்து பிரித்தெடுக்கப்பட்டால் (அட்சார்பட்) உறிஞ்சப்பட்ட செரா பெறப்படுகிறது. அட்ஸார்பட் செரா என்பது மோனோரெசெப்டராக இருக்கலாம் (அல்லது வகை-குறிப்பிட்டது), ஒரே ஒரு ஆன்டிஜென் ரிசெப்டருக்கு ஆன்டிபாடிகள் உள்ளன, இது பல உறிஞ்சப்பட்ட அல்லது உறிஞ்சப்படாத செராவின் கலவையைக் கொண்டுள்ளது. உறிஞ்சப்பட்ட செரா கண்ணாடி திரட்டல் எதிர்வினைக்கு பயன்படுத்தப்படுகிறது.

விலங்குகளுக்கு H-ஆன்டிஜெனுடன் மோடைல் பாக்டீரியாவுடன் நோய்த்தடுப்பு அளிக்கப்படும்போது, ​​H-ஆன்டிபாடிகளைக் கொண்ட H-அக்ளுடினேட்டிங் செரா பெறப்படுகிறது (உதாரணமாக, சால்மோனெல்லா மோனோரெசெப்டர் H-அக்ளுடினேட்டிங் சீரம்). O-ஆன்டிஜென் மூலம் நோய்த்தடுப்பு மூலம், O-ஆன்டிபாடிகள் கொண்ட O-அக்ளுடினேட்டிங் செரா பெறப்படுகிறது (உதாரணமாக, சால்மோனெல்லா குழு உறிஞ்சப்பட்ட ஓ-அக்ளுடினேட்டிங் சீரம், ஆன்டிகோலெரா ஓ-அக்ளுடினேட்டிங் சீரம்). H- மற்றும் O- ஆன்டிஜென்களுடன் நோய்த்தடுப்பு மூலம், H- மற்றும் O- ஆன்டிபாடிகள் கொண்ட செரா பெறப்படுகிறது.

மேலும், ஓ-அக்ளுட்டினின்கள் ஒரு நுண்ணிய-தானிய அக்லூட்டினேட்டை உருவாக்குகின்றன, மேலும் எச்-அக்ளுட்டினின்கள் கரடுமுரடான-தானிய வண்டலை உருவாக்குகின்றன.

3. எலக்ட்ரோலைட் - ஐசோடோனிக் NaCl கரைசல் (0.9% சோடியம் குளோரைடு கரைசல் காய்ச்சி வடிகட்டிய நீரில் தயாரிக்கப்படுகிறது).

ஒரு திரட்டல் வினையைச் செய்வதற்கு இரண்டு முக்கிய முறைகள் உள்ளன: கண்ணாடி மீது ஒரு எதிர்வினை (சில சமயங்களில் ஒரு அறிகுறி அல்லது தட்டு எதிர்வினை என்று அழைக்கப்படுகிறது) மற்றும் ஒரு விரிவான எதிர்வினை (சோதனை குழாய்களில்)

கண்ணாடி மீது ஒரு திரட்டல் எதிர்வினை அமைத்தல். இரண்டு சொட்டு சீரம் மற்றும் ஒரு துளி ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு கரைசல் கொழுப்பு இல்லாத கண்ணாடி ஸ்லைடில் பயன்படுத்தப்படுகிறது. நோயறிதல் திரட்டும் சீரம் ஒரு நீர்த்தலில் எடுக்கப்படுகிறது, இது அதன் டைட்டரைப் பொறுத்து, 1:10, 1:25, 1:50 அல்லது 1:100 ஆகும். ஆய்வின் கீழ் உள்ள நுண்ணுயிரிகளின் கலாச்சாரம் ஒரு துளி சீரம் மற்றும் ஒரு துளி ஐசோடோனிக் கரைசலில் ஒரு சுழற்சியைப் பயன்படுத்தி முழுமையாக கலக்கப்படுகிறது. நுண்ணுயிரிகளுடன் சோடியம் குளோரைடு ஒரு துளி ஆன்டிஜென் கட்டுப்பாடு, நுண்ணுயிரிகள் இல்லாமல் சீரம் ஒரு துளி சீரம் கட்டுப்பாடு ஆகும். சீரம் உள்ள ஒரு துளியிலிருந்து NaCl உடன் ஒரு துளிக்கு கலாச்சாரத்தை மாற்ற முடியாது. எதிர்வினை 1-3 நிமிடங்கள் அறை வெப்பநிலையில் நடைபெறுகிறது. சீரம் கட்டுப்பாடு தெளிவாக இருந்தால், ஆன்டிஜென் கட்டுப்பாட்டில் சீரான கொந்தளிப்பு காணப்பட்டது, மேலும் சீரம் கலந்த கலாச்சாரம் துளியில் அக்லூட்டினேட் செதில்கள் தோன்றும், இதன் விளைவாக நேர்மறையானதாக கருதப்படுகிறது. சீரம் மற்றும் ஆன்டிஜெனுடன் துளியில் சீரான கொந்தளிப்பு இருந்தால், இது எதிர்மறையான விளைவாகும். இருண்ட பின்னணியில் எதிர்வினை மிகவும் தெளிவாகத் தெரியும்.

சீரம்

1. ஆன்டிஜென் கட்டுப்பாடு

2. சீரம் கட்டுப்பாடு

13.1. ஆன்டிஜென்-ஆன்டிபாடி எதிர்வினைகள் மற்றும் அவற்றின் பயன்பாடுகள்

ஆன்டிஜென் அறிமுகப்படுத்தப்பட்டால், உடலில் ஆன்டிபாடிகள் உருவாகின்றன. ஆன்டிபாடிகள் அவற்றின் தொகுப்புக்கு காரணமான ஆன்டிஜெனுடன் இணைகின்றன மற்றும் அதனுடன் பிணைக்க முடியும். ஆன்டிபாடிகளுடன் ஆன்டிஜென்களின் பிணைப்பு இரண்டு கட்டங்களைக் கொண்டுள்ளது. முதல் கட்டம் குறிப்பிட்டது, இதில் ஆன்டிபாடிகளின் ஃபேப் துண்டின் செயலில் உள்ள மையத்திற்கு ஆன்டிஜெனிக் தீர்மானிப்பான் விரைவான பிணைப்பு ஏற்படுகிறது. வான் டெர் வால்ஸ் படைகள், ஹைட்ரஜன் மற்றும் ஹைட்ரோபோபிக் இடைவினைகள் காரணமாக பிணைப்பு ஏற்படுகிறது என்பதை கவனத்தில் கொள்ள வேண்டும். பிணைப்பின் வலிமையானது ஆன்டிபாடியின் செயலில் உள்ள தளத்திற்கும் ஆன்டிஜெனின் எபிடோப்புக்கும் இடையிலான இடஞ்சார்ந்த கடிதத்தின் அளவால் தீர்மானிக்கப்படுகிறது. குறிப்பிட்ட கட்டத்திற்குப் பிறகு, ஒரு மெதுவான கட்டம் தொடங்குகிறது - குறிப்பிடப்படாதது, இது ஒரு புலப்படும் உடல் நிகழ்வால் வெளிப்படுகிறது (உதாரணமாக, திரட்டலின் போது செதில்களின் உருவாக்கம் போன்றவை).

நோயெதிர்ப்பு எதிர்வினைகள் என்பது ஆன்டிபாடிகள் மற்றும் ஆன்டிஜென்களுக்கு இடையிலான தொடர்பு ஆகும், மேலும் இந்த எதிர்வினைகள் குறிப்பிட்டவை மற்றும் கொண்டவை அதிக உணர்திறன். அவை பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன மருத்துவ நடைமுறை. நோயெதிர்ப்பு எதிர்வினைகளின் உதவியுடன், பின்வரும் சிக்கல்களை தீர்க்க முடியும்:

அறியப்பட்ட ஆன்டிஜென்களால் அறியப்படாத ஆன்டிபாடிகளை தீர்மானித்தல் (ஆன்டிஜெனிக் கண்டறிதல்). நோயாளியின் இரத்த சீரம் (செரோடிக்னோசிஸ்) ஒரு நோய்க்கிருமிக்கு ஆன்டிபாடிகளை தீர்மானிக்க வேண்டிய அவசியம் ஏற்படும் போது இந்த பணி ஏற்படுகிறது. ஆன்டிபாடிகளைக் கண்டறிவது நோயறிதலை உறுதிப்படுத்த உங்களை அனுமதிக்கிறது;

அறியப்பட்ட ஆன்டிபாடிகளைப் பயன்படுத்தி அறியப்படாத ஆன்டிஜென்களைத் தீர்மானித்தல் (கண்டறியும் சீரம்). நோயாளியின் பொருளிலிருந்து (செரோடைப்பிங்) தனிமைப்படுத்தப்பட்ட நோய்க்கிருமி கலாச்சாரத்தை அடையாளம் காணும்போது, ​​அத்துடன் கண்டறியும் போது இந்த ஆய்வு மேற்கொள்ளப்படுகிறது.

நுண்ணுயிரிகளின் ஆன்டிஜென்கள் மற்றும் இரத்தத்தில் உள்ள அவற்றின் நச்சுகள் மற்றும் பிற உயிரியல் திரவங்கள். பல வகையான நோயெதிர்ப்பு எதிர்வினைகள் உள்ளன, அவை நிலைப்படுத்தும் நுட்பம் மற்றும் பதிவுசெய்யப்பட்ட விளைவு ஆகியவற்றில் வேறுபடுகின்றன. இவை திரட்டுதல் எதிர்வினைகள் (RA), மழைப்பொழிவு எதிர்வினைகள் (RP), நிரப்புதல் (RSC), பெயரிடப்பட்ட கூறுகளைப் பயன்படுத்தும் எதிர்வினைகள் (RIF, ELISA, RIA).

13.2 திரட்டுதல் எதிர்வினை

திரட்டுதல் எதிர்வினை (RA) ஆகும் நோய் எதிர்ப்பு எதிர்வினைஎலக்ட்ரோலைட்டுகளின் முன்னிலையில் ஆன்டிபாடிகளுடன் ஆன்டிஜெனின் தொடர்பு, மற்றும் ஆன்டிஜென் ஒரு கார்பஸ்குலர் நிலையில் உள்ளது (எரித்ரோசைட்டுகள், பாக்டீரியா, உறிஞ்சப்பட்ட ஆன்டிஜென்களுடன் லேடெக்ஸ் துகள்கள்). திரட்டலின் போது, ​​கார்பஸ்குலர் ஆன்டிஜென்கள் ஆன்டிபாடிகளால் ஒன்றாக ஒட்டப்படுகின்றன, இது ஒரு ஃப்ளோகுலண்ட் படிவு உருவாவதன் மூலம் வெளிப்படுத்தப்படுகிறது. ஆன்டிபாடிகள் இரண்டு செயலில் உள்ள மையங்களைக் கொண்டிருப்பதால் செதில்களின் உருவாக்கம் ஏற்படுகிறது, மேலும் ஆன்டிஜென்கள் பாலிவலன்ட், அதாவது. பல ஆன்டிஜெனிக் தீர்மானிப்பான்கள் உள்ளன. நோயாளியின் பொருளில் இருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்ட நோய்க்கிருமியை அடையாளம் காணவும், நோயாளியின் இரத்த சீரம் உள்ள நோய்க்கிருமிக்கான ஆன்டிபாடிகளைக் கண்டறியவும் RA பயன்படுத்தப்படுகிறது (உதாரணமாக, புருசெல்லோசிஸ்க்கான ரைட் மற்றும் ஹெடில்சன் எதிர்வினைகள், டைபாய்டு காய்ச்சல் மற்றும் பாரடைபாய்டு காய்ச்சலுக்கான பரந்த எதிர்வினை).

RA நோயைக் கண்டறிவதற்கான எளிய வழி கண்ணாடி மீதான எதிர்வினை ஆகும், இது நோயாளியிடமிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்ட நோய்க்கிருமியைத் தீர்மானிக்கப் பயன்படுகிறது. ஒரு எதிர்வினை நிறுவப்பட்டால், கண்டறியும் திரட்டல் சீரம் ஒரு கண்ணாடி ஸ்லைடில் பயன்படுத்தப்படுகிறது (1:10 அல்லது 1:20 நீர்த்துப்போகும்போது), பின்னர் நோயாளியிடமிருந்து ஒரு கலாச்சாரம் சேர்க்கப்படுகிறது. துளியில் ஒரு மிதவை வண்டல் தோன்றினால் எதிர்வினை நேர்மறையாக இருக்கும். ஒரு கட்டுப்பாடு அருகில் வைக்கப்பட்டுள்ளது: சீரம் பதிலாக, சோடியம் குளோரைடு தீர்வு ஒரு துளி பயன்படுத்தப்படுகிறது. கண்டறியும் திரட்டல் சீரம் 1 உறிஞ்சப்படாவிட்டால், அது நீர்த்தப்படுகிறது (டைட்டருக்கு - திரட்டல் ஏற்பட வேண்டிய நீர்த்தல்), அதாவது. சோதனைக் குழாய்களில் விரிவாக்கப்பட்ட RA ஐ அதிகரிக்கும் போது வைக்கவும்

1 உறிஞ்சப்படாத திரட்டும் சீரம் பொதுவான (குறுக்கு-எதிர்வினை) ஆன்டிஜென்களைக் கொண்ட தொடர்புடைய பாக்டீரியாக்களை திரட்ட முடியும். அதனால் பயன்படுத்துகிறார்கள்உறிஞ்சப்பட்ட திரட்டப்பட்ட செரா, அதிலிருந்து குறுக்கு-வினைபுரியும் ஆன்டிபாடிகள் தொடர்புடைய பாக்டீரியாக்களுக்கு உறிஞ்சுதல் மூலம் அகற்றப்பட்டது. கொடுக்கப்பட்ட பாக்டீரியத்திற்கு மட்டுமே குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடிகளை இத்தகைய செரா தக்கவைக்கிறது.

நோயாளியிடமிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்ட நோய்க்கிருமியின் இடைநீக்கத்தின் 2-3 துளிகள் சேர்க்கப்படும் சீரம் சீரம் நீர்த்தப்படுகிறது. வண்டலின் அளவு மற்றும் சோதனைக் குழாய்களில் உள்ள திரவத்தை சுத்தம் செய்யும் அளவு ஆகியவற்றால் திரட்டுதல் கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ளப்படுகிறது. கண்டறியும் சீரம் டைட்டருக்கு அருகில் உள்ள நீர்த்தலில் திரட்டுதல் காணப்பட்டால் எதிர்வினை நேர்மறையாகக் கருதப்படுகிறது. எதிர்வினை கட்டுப்பாடுகளுடன் சேர்ந்துள்ளது: ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு கரைசலில் நீர்த்த சீரம் வெளிப்படையானதாக இருக்க வேண்டும், அதே கரைசலில் நுண்ணுயிரிகளின் இடைநீக்கம் வண்டல் இல்லாமல் ஒரே மாதிரியாக மேகமூட்டமாக இருக்க வேண்டும்.

நோயாளியின் இரத்த சீரம் உள்ள நோய்க்கிருமிக்கு ஆன்டிபாடிகளை தீர்மானிக்க, முழு அளவிலான RA பயன்படுத்தப்படுகிறது. அதை அமைக்கும் போது, ​​நோயாளியின் இரத்த சீரம் சோதனைக் குழாய்களில் நீர்த்தப்பட்டு, சோதனைக் குழாய்களில் சம அளவு கண்டறியும் இடைநீக்கம் (கொல்லப்பட்ட நுண்ணுயிரிகளின் இடைநீக்கம்) சேர்க்கப்படுகிறது. அடைகாத்த பிறகு, திரட்டல் ஏற்பட்ட மிக உயர்ந்த சீரம் நீர்த்தல் தீர்மானிக்கப்படுகிறது, அதாவது. ஒரு வீழ்படிவு (சீரம் டைட்டர்) உருவாகியுள்ளது. இந்த வழக்கில், O-diagnosticum உடன் திரட்டுதல் எதிர்வினை (வெப்பத்தால் கொல்லப்படும் பாக்டீரியா, தெர்மோஸ்டபிள் O-ஆன்டிஜெனைத் தக்கவைத்தல்) நேர்த்தியான திரட்டல் வடிவத்தில் ஏற்படுகிறது. H-diagnosticum உடன் திரட்டுதல் எதிர்வினை (ஃபார்மால்டிஹைடால் கொல்லப்படும் பாக்டீரியா, தெர்மோலபைல் ஃபிளாஜெல்லர் H-ஆன்டிஜெனைத் தக்கவைத்துக்கொள்வது) கரடுமுரடானது மற்றும் வேகமாகச் செல்கிறது.

மறைமுக (செயலற்ற) ஹீமாக்ளூட்டினேஷன் எதிர்வினை(RNGA அல்லது RPGA) என்பது ஒரு வகை RA ஆகும். இந்த முறை அதிக உணர்திறன் கொண்டது. RNGA இன் உதவியுடன், இரண்டு சிக்கல்களைத் தீர்க்க முடியும்: நோயாளியின் இரத்த சீரம் உள்ள ஆன்டிபாடிகளை தீர்மானிக்க, இதில் ஆன்டிஜெனிக் எரித்ரோசைட் கண்டறிதல் சேர்க்கப்படுகிறது, இது அறியப்பட்ட ஆன்டிஜென்கள் உறிஞ்சப்படும் எரித்ரோசைட்டுகள் ஆகும்; சோதனைப் பொருளில் ஆன்டிஜென்கள் இருப்பதை தீர்மானிக்கவும். இந்த வழக்கில், எதிர்வினை சில நேரங்களில் தலைகீழ் மறைமுக ஹீமாக்ளூட்டினேஷன் எதிர்வினை (RONHA) என்று அழைக்கப்படுகிறது. செயல்முறையின் போது, ​​ஒரு ஆன்டிபாடி எரித்ரோசைட் கண்டறிதல் (அவற்றின் மேற்பரப்பில் உறிஞ்சப்பட்ட ஆன்டிபாடிகள் கொண்ட எரித்ரோசைட்டுகள்) சோதனைப் பொருளில் சேர்க்கப்படுகிறது. இந்த எதிர்வினையில், சிவப்பு இரத்த அணுக்கள் கேரியர்களாக செயல்படுகின்றன மற்றும் நோயெதிர்ப்பு திரட்டுகளை உருவாக்குவதில் செயலற்ற முறையில் ஈடுபட்டுள்ளன. ஒரு நேர்மறையான எதிர்வினையுடன், செயலற்ற முறையில் ஒட்டப்பட்ட சிவப்பு இரத்த அணுக்கள் துளையின் அடிப்பகுதியை ஸ்காலப் செய்யப்பட்ட விளிம்புகளுடன் ("குடை") சம அடுக்கில் மூடுகின்றன; திரட்டுதல் இல்லாத நிலையில், சிவப்பு இரத்த அணுக்கள் துளையின் மைய இடைவெளியில் குவிந்து, கூர்மையாக வரையறுக்கப்பட்ட விளிம்புகளுடன் ஒரு சிறிய "பொத்தானை" உருவாக்குகின்றன.

உறைதல் எதிர்வினைஉறிஞ்சப்பட்ட ஆன்டிபாடிகளைப் பயன்படுத்தி நோய்க்கிருமி செல்களை (ஆன்டிஜென்கள்) தீர்மானிக்கப் பயன்படுகிறது ஸ்டேஃபிளோகோகஸ் ஆரியஸ்,புரதம் A கொண்டிருக்கும். புரதம் A இம்யூனோகுளோபுலின்களின் Fc துண்டுடன் ஒரு தொடர்பைக் கொண்டுள்ளது. இதற்கு நன்றி, ஆன்டிபாடிகள் Fc துண்டு மூலம் மறைமுகமாக ஸ்டேஃபிளோகோகஸுடன் பிணைக்கப்படுகின்றன, மேலும் Fab துண்டுகள் வெளிப்புறமாக நோக்குநிலை கொண்டவை மற்றும் நோயாளிகளிடமிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்ட தொடர்புடைய நுண்ணுயிரிகளுடன் தொடர்பு கொள்ள முடிகிறது. இந்த வழக்கில், செதில்கள் உருவாகின்றன.

ஹீமாக்ளூட்டினேஷன் தடுப்பு எதிர்வினை (HAI)நோயறிதலில் பயன்படுத்தப்படுகிறது வைரஸ் தொற்றுகள், மற்றும் ஹெமாக்ளூட்டினேட்டிங் வைரஸ்களால் ஏற்படும் தொற்றுகள் மட்டுமே. இந்த வைரஸ்கள் அவற்றின் மேற்பரப்பில் ஒரு புரதத்தைக் கொண்டிருக்கின்றன - ஹெமாக்ளூட்டினின், இது சிவப்பு இரத்த அணுக்கள் வைரஸ்களுடன் சேர்க்கப்படும்போது ஹெமாக்ளூட்டினேஷன் எதிர்வினைக்கு (HRA) பொறுப்பாகும். RTGA ஆனது ஆன்டிபாடிகளுடன் வைரஸ் ஆன்டிஜென்களைத் தடுப்பதை உள்ளடக்குகிறது, இதன் விளைவாக வைரஸ்கள் இரத்த சிவப்பணுக்களை ஒருங்கிணைக்கும் திறனை இழக்கின்றன.

கூம்ப்ஸ் எதிர்வினை -முழுமையற்ற ஆன்டிபாடிகளை தீர்மானிப்பதற்கான ஆர்.ஏ. புருசெல்லோசிஸ் போன்ற சில தொற்று நோய்களில், நோய்க்கிருமிக்கான முழுமையற்ற ஆன்டிபாடிகள் நோயாளியின் இரத்த சீரத்தில் பரவுகின்றன. முழுமையற்ற ஆன்டிபாடிகள்முழு அளவிலான ஆன்டிபாடிகள் போல இரண்டல்ல, ஆன்டிஜென்-பைண்டிங் தளம் ஒன்று இருப்பதால் அவை தடுப்பு ஆன்டிபாடிகள் என்று அழைக்கப்படுகின்றன. எனவே, ஆன்டிஜெனிக் கண்டறியும் போது, ​​முழுமையற்ற ஆன்டிபாடிகள் ஆன்டிஜென்களுடன் பிணைக்கப்படுகின்றன, ஆனால் அவற்றை ஒன்றாக ஒட்ட வேண்டாம். எதிர்வினையை வெளிப்படுத்த, ஆன்டிகுளோபுலின் சீரம் (மனித இம்யூனோகுளோபுலின்களுக்கு ஆன்டிபாடிகள்) சேர்க்கப்படுகிறது, இது எதிர்வினையின் முதல் கட்டத்தில் உருவாகும் நோயெதிர்ப்பு வளாகங்களை (ஆன்டிஜெனிக் கண்டறிதல் + முழுமையற்ற ஆன்டிபாடிகள்) திரட்டுவதற்கு வழிவகுக்கும்.

இன்ட்ராவாஸ்குலர் ஹீமோலிசிஸ் நோயாளிகளுக்கு மறைமுக கூம்ப்ஸ் எதிர்வினை பயன்படுத்தப்படுகிறது. இந்த நோயாளிகளில் சிலவற்றில், முழுமையற்ற மோனோவலன்ட் ஆன்டி-ரீசஸ் ஆன்டிபாடிகள் கண்டறியப்படுகின்றன. அவை குறிப்பாக Rh- நேர்மறை எரித்ரோசைட்டுகளுடன் தொடர்பு கொள்கின்றன, ஆனால் அவற்றின் திரட்டலை ஏற்படுத்தாது. எனவே, ஆன்டிகுளோபுலின் சீரம் எதிர்ப்பு Rh ஆன்டிபாடிகள் + Rh- நேர்மறை எரித்ரோசைட்டுகளின் அமைப்பில் சேர்க்கப்படுகிறது, இது எரித்ரோசைட்டுகளின் திரட்டலை ஏற்படுத்துகிறது. கூம்ப்ஸ் சோதனை கண்டறிய பயன்படுத்தப்படுகிறது நோயியல் நிலைமைகள், நோயெதிர்ப்பு தோற்றத்தின் எரித்ரோசைட்டுகளின் ஊடுருவல் சிதைவுடன் தொடர்புடையது, எடுத்துக்காட்டாக, Rh மோதலால் புதிதாகப் பிறந்த குழந்தைகளின் ஹீமோலிடிக் நோய்.

இரத்தக் குழுக்களை நிர்ணயிப்பதற்கான ஆர்.ஏஇரத்த வகை ஆன்டிஜென்கள் A(II), B(III) க்கு நோயெதிர்ப்பு சீரம் ஆன்டிபாடிகள் மூலம் எரித்ரோசைட்டுகளின் திரட்டலை அடிப்படையாகக் கொண்டது. கட்டுப்பாடு ஆன்டிபாடிகள் இல்லாத சீரம் ஆகும், அதாவது. சீரம் AB(IV) இரத்தக் குழு, மற்றும் A(P) மற்றும் B(III) குழுக்களின் எரித்ரோசைட் ஆன்டிஜென்கள். குழு 0(I) இரத்த சிவப்பணுக்கள் எதிர்மறைக் கட்டுப்பாட்டாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, ஏனெனில் அவற்றில் ஆன்டிஜென்கள் இல்லை.

Rh காரணியைத் தீர்மானிக்க, எதிர்ப்பு Rh செரா பயன்படுத்தப்படுகிறது (குறைந்தது இரண்டு வெவ்வேறு தொடர்கள்). ஆய்வின் கீழ் எரித்ரோசைட்டுகளின் மென்படலத்தில் Rh ஆன்டிஜென் இருந்தால், இந்த உயிரணுக்களின் திரட்டல் ஏற்படுகிறது.

13.3. மழைப்பொழிவு எதிர்வினை

RP என்பது எலக்ட்ரோலைட்டுகளின் முன்னிலையில் ஆன்டிஜென்களுடன் ஆன்டிபாடிகளின் தொடர்புகளின் நோயெதிர்ப்பு எதிர்வினையாகும், மேலும் ஆன்டிஜென் கரையக்கூடிய நிலையில் உள்ளது. மழைப்பொழிவின் போது, ​​கரையக்கூடிய ஆன்டிஜென்கள் ஆன்டிபாடிகளால் துரிதப்படுத்தப்படுகின்றன, இது மழைப்பொழிவு பட்டைகள் வடிவில் மேகமூட்டத்தால் வெளிப்படுகிறது. இரண்டு வினைகளும் சமமான விகிதங்களில் கலக்கப்படும்போது காணக்கூடிய வீழ்படிவு உருவாக்கம் காணப்படுகிறது. அவற்றில் ஒன்று அதிகமாக இருந்தால், விரைவான நோயெதிர்ப்பு வளாகங்களின் எண்ணிக்கையைக் குறைக்கிறது. மழைப்பொழிவு எதிர்வினை செய்ய பல்வேறு வழிகள் உள்ளன.

ரிங் மழைப்பொழிவு எதிர்வினைஒரு சிறிய விட்டம் கொண்ட மழைப்பொழிவு குழாய்களில் வைக்கப்படுகிறது. நோயெதிர்ப்பு சீரம் சோதனைக் குழாயில் சேர்க்கப்பட்டு கரையக்கூடிய ஆன்டிஜென் கவனமாக அடுக்கப்படுகிறது. முடிவு நேர்மறையாக இருந்தால், இரண்டு தீர்வுகளின் இடைமுகத்தில் ஒரு பால் வளையம் உருவாகிறது. உறுப்புகள் மற்றும் திசுக்களில் ஆன்டிஜென்கள் இருப்பதைத் தீர்மானிக்கப் பயன்படும் வளைய மழைவீழ்ச்சி எதிர்வினை, அதன் சாறுகள் வேகவைக்கப்பட்டு வடிகட்டப்படுகின்றன, இது தெர்மோபிரெசிபிட்டேஷன் எதிர்வினை (தெர்மோஸ்டபிள் ஆந்த்ராக்ஸ் ஆன்டிஜெனைத் தீர்மானிப்பதற்கான அஸ்கோலி எதிர்வினை) என்று அழைக்கப்படுகிறது.

Ouchterlony இரட்டை இம்யூனோடிஃப்யூஷன் எதிர்வினை.இந்த எதிர்வினை ஒரு அகர் ஜெல்லில் மேற்கொள்ளப்படுகிறது. சீரான தடிமன் கொண்ட ஜெல் அடுக்கில், கிணறுகள் ஒருவருக்கொருவர் ஒரு குறிப்பிட்ட தூரத்தில் வெட்டப்பட்டு முறையே ஆன்டிஜென் மற்றும் நோயெதிர்ப்பு சீரம் நிரப்பப்படுகின்றன. இதற்குப் பிறகு, ஆன்டிஜென்கள் மற்றும் ஆன்டிபாடிகள் ஜெல்லுக்குள் பரவி, ஒன்றையொன்று சந்தித்து நோயெதிர்ப்பு வளாகங்களை உருவாக்குகின்றன, அவை ஜெல்லில் படிந்து துல்லியமான கோடுகளாகத் தெரியும்.

ஊட்டச்சத்து. அறியப்படாத ஆன்டிஜென்கள் அல்லது ஆன்டிபாடிகளை அடையாளம் காணவும், வெவ்வேறு ஆன்டிஜென்களுக்கு இடையிலான ஒற்றுமையை சோதிக்கவும் இந்த எதிர்வினை பயன்படுத்தப்படலாம்: ஆன்டிஜென்கள் ஒரே மாதிரியாக இருந்தால், மழைப்பொழிவு கோடுகள் ஒன்றிணைகின்றன, ஆன்டிஜென்கள் ஒரே மாதிரியாக இல்லாவிட்டால், மழைப்பொழிவு கோடுகள் வெட்டுகின்றன, ஆன்டிஜென்கள் பகுதியளவு இருந்தால் ஒரே மாதிரியாக, ஒரு ஸ்பர் உருவாகிறது.

ரேடியல் இம்யூனோடிஃப்யூஷன் எதிர்வினை.உருகிய அகார் ஜெல்லில் ஆன்டிபாடிகள் சேர்க்கப்பட்டு, ஜெல் கண்ணாடிக்கு சம அடுக்கில் பயன்படுத்தப்படுகிறது. ஜெல்லில் கிணறுகள் வெட்டப்பட்டு, வெவ்வேறு செறிவுகளின் நிலையான அளவு ஆன்டிஜென் தீர்வுகள் அவற்றில் சேர்க்கப்படுகின்றன. அடைகாக்கும் போது, ​​ஆன்டிஜென்கள் கிணற்றில் இருந்து கதிரியக்கமாக பரவி, ஆன்டிபாடிகளைச் சந்தித்து மழை வளையத்தை உருவாக்குகின்றன. அதிகப்படியான ஆன்டிஜென் கிணற்றில் இருக்கும் வரை, மழை வளையத்தின் விட்டத்தில் படிப்படியாக அதிகரிப்பு ஏற்படுகிறது. சோதனைக் கரைசலில் ஆன்டிஜென்கள் அல்லது ஆன்டிபாடிகளை தீர்மானிக்க இந்த முறை பயன்படுத்தப்படுகிறது (உதாரணமாக, இரத்த சீரம் உள்ள பல்வேறு வகுப்புகளின் இம்யூனோகுளோபின்களின் செறிவை தீர்மானிக்க).

இம்யூனோ எலக்ட்ரோபோரேசிஸ்.ஆன்டிஜென்களின் கலவை முதலில் எலக்ட்ரோஃபோரெட்டிகல் முறையில் பிரிக்கப்படுகிறது, பின்னர் புரோட்டீன் இயக்கத்தின் திசையில் ஓடும் பள்ளத்தில் வீழ்படியும் ஆன்டிசெரம் சேர்க்கப்படுகிறது. ஆன்டிஜென்கள் மற்றும் ஆன்டிபாடிகள் ஒன்றுக்கொன்று நோக்கி ஜெல்லில் பரவுகின்றன; ஊடாடுதல், அவை வளைவு மழைக் கோடுகளை உருவாக்குகின்றன.

ஃப்ளோகுலேஷன் எதிர்வினை(ரமோனின் கூற்றுப்படி) - ஆன்டிடாக்ஸிக் சீரம் அல்லது டாக்ஸாய்டின் செயல்பாட்டைத் தீர்மானிக்கப் பயன்படும் ஒரு வகை மழைப்பொழிவு எதிர்வினை. எதிர்வினை சோதனை குழாய்களில் மேற்கொள்ளப்படுகிறது. டாக்ஸாய்டு மற்றும் ஆன்டிடாக்சின் சமமான விகிதத்தில் இருக்கும் சோதனைக் குழாயில், கொந்தளிப்பு காணப்படுகிறது.

13.4 நிரப்பு நிர்ணய எதிர்வினை

ஆன்டிபாடிகள், தொடர்புடைய ஆன்டிஜெனுடன் தொடர்புகொண்டு, கூடுதல் நிரப்புதலை பிணைக்கின்றன (1வது அமைப்பு). நிரப்பு நிலைப்படுத்தலின் ஒரு குறிகாட்டியானது ஹீமோலிடிக் சீரம் மூலம் உணர்திறன் கொண்ட எரித்ரோசைட்டுகள் ஆகும், அதாவது. இரத்த சிவப்பணுக்களுக்கு ஆன்டிபாடிகள் (2வது அமைப்பு). 1 வது அமைப்பில் நிரப்பு நிலைப்படுத்தப்படவில்லை என்றால், அதாவது. ஆன்டிஜென்-ஆன்டிபாடி எதிர்வினை ஏற்படவில்லை என்றால், உணர்திறன் கொண்ட இரத்த சிவப்பணுக்கள் முற்றிலும் லைஸ் செய்யப்படுகின்றன (எதிர்மறை எதிர்வினை). உணர்திறன் கொண்ட எரித்ரோசைட்டுகளைச் சேர்த்த பிறகு, 1 வது அமைப்பின் நோயெதிர்ப்பு வளாகங்களால் நிரப்புதல் சரி செய்யப்படும் போது, ​​ஹீமோலிசிஸ்

இல்லாதது (நேர்மறை எதிர்வினை). தொற்று நோய்களை (கொனோரியா, சிபிலிஸ், இன்ஃப்ளூயன்ஸா, முதலியன) கண்டறிய நிரப்பு நிலைப்படுத்தல் எதிர்வினை பயன்படுத்தப்படுகிறது.

13.5 நடுநிலைப்படுத்தல் எதிர்வினை

நுண்ணுயிரிகள் மற்றும் அவற்றின் நச்சுகள் மனித உடலின் உறுப்புகள் மற்றும் திசுக்களில் தீங்கு விளைவிக்கும். ஆன்டிபாடிகள் இந்த சேதப்படுத்தும் முகவர்களுடன் பிணைக்கப்பட்டு அவற்றைத் தடுக்கின்றன, அதாவது. நடுநிலைப்படுத்த. நோயறிதல் நடுநிலைப்படுத்தல் எதிர்வினை ஆன்டிபாடிகளின் இந்த அம்சத்தை அடிப்படையாகக் கொண்டது. ஆன்டிஜென்-ஆன்டிபாடி கலவையை விலங்குகள் அல்லது உணர்திறன் சோதனை பொருட்களில் (செல் கலாச்சாரம், கருக்கள்) அறிமுகப்படுத்துவதன் மூலம் இது மேற்கொள்ளப்படுகிறது. உதாரணமாக, ஒரு நோயாளியின் பொருளில் உள்ள நச்சுத்தன்மையைக் கண்டறிய, 1 வது குழுவின் விலங்குகள் நோயாளியின் பொருளைக் கொண்டு உட்செலுத்தப்படுகின்றன. 2 வது குழுவின் விலங்குகள் ஒரே மாதிரியான பொருட்களால் உட்செலுத்தப்படுகின்றன, பொருத்தமான ஆன்டிசெரம் மூலம் முன் சிகிச்சை அளிக்கப்படுகின்றன. பொருளில் ஒரு நச்சு இருந்தால், குழு 1 இன் விலங்குகள் இறக்கின்றன. இரண்டாவது குழு விலங்குகள் உயிர்வாழ்கின்றன;

13.6. பெயரிடப்பட்ட ஆன்டிபாடிகள் அல்லது ஆன்டிஜென்களைப் பயன்படுத்தி எதிர்வினைகள்

13.6.1. இம்யூனோஃப்ளோரசன்ஸ் எதிர்வினை (RIF, கூன்ஸ் முறை)

இந்த முறை எக்ஸ்பிரஸ் நோயறிதலுக்குப் பயன்படுத்தப்படுகிறது. நுண்ணுயிர் ஆன்டிஜென்கள் மற்றும் ஆன்டிபாடிகள் இரண்டையும் கண்டறிய இது பயன்படுத்தப்படலாம்.

நேரடி RIF முறை- ஆன்டிஜென்களுடன் ஆன்டிபாடிகளின் தொடர்புகளின் நோயெதிர்ப்பு எதிர்வினை, மற்றும் ஆன்டிபாடிகள் ஃப்ளோரோக்ரோம் என்று பெயரிடப்பட்டுள்ளன - ஒரு குறிப்பிட்ட அலைநீளத்தின் ஒளிக்கு வெளிப்படும் போது ஒரு குறிப்பிட்ட அலைநீளத்தின் ஒளி அளவை வெளியிடும் திறன் கொண்ட ஒரு பொருள். இந்த முறையின் தனித்தன்மை என்னவென்றால், குறிப்பிடப்படாத ஒளிர்வு கண்டறிதலைத் தவிர்ப்பதற்காக, செயல்படாத கூறுகளை அகற்ற வேண்டும். இதைச் செய்ய, செயல்படாத ஆன்டிபாடிகளைக் கழுவவும். முடிவுகள் ஒளிரும் நுண்ணோக்கியைப் பயன்படுத்தி மதிப்பிடப்படுகின்றன. அத்தகைய ஒளிரும் சீரம் மூலம் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட ஸ்மியரில் உள்ள பாக்டீரியாக்கள் செல்லின் சுற்றளவில் இருண்ட பின்னணியில் ஒளிரும்.

மறைமுக RIF முறைமுந்தையதை விட அடிக்கடி பயன்படுத்தப்படுகிறது. இந்த எதிர்வினை இரண்டு நிலைகளில் மேற்கொள்ளப்படுகிறது. முதல் கட்டத்தில், ஆன்டிஜென்கள் தொடர்பு கொள்கின்றன

தொடர்புடைய ஆன்டிபாடிகளுடன் தொடர்புகொண்டு, நோயெதிர்ப்பு வளாகங்களை உருவாக்குகிறது. எதிர்வினையாற்றாத அனைத்து கூறுகளும் (அதாவது, நோயெதிர்ப்பு வளாகங்களின் பகுதியாக இல்லை) கழுவுவதன் மூலம் அகற்றப்பட வேண்டும். இரண்டாவது கட்டத்தில், ஃப்ளோரோக்ரோமைஸ் செய்யப்பட்ட ஆன்டிகுளோபுலின் சீரம் பயன்படுத்தி ஆன்டிஜென்-ஆன்டிபாடி வளாகம் கண்டறியப்படுகிறது. இதன் விளைவாக, நுண்ணுயிர் + ஆண்டிமைக்ரோபியல் முயல் ஆன்டிபாடிகள் + முயல் இம்யூனோகுளோபுலின்களுக்கான ஆன்டிபாடிகள், ஃப்ளோரோக்ரோம் என்று பெயரிடப்பட்ட சிக்கலானது உருவாகிறது. முடிவுகள் ஒளிரும் நுண்ணோக்கியைப் பயன்படுத்தி மதிப்பிடப்படுகின்றன.

13.6.2. என்சைம் இம்யூனோசார்பன்ட் முறை அல்லது மதிப்பீடு

ELISA - மிகவும் பொதுவானது நவீன முறைவைரஸ், பாக்டீரியா, புரோட்டோசோல் நோய்த்தொற்றுகளைக் கண்டறிவதற்கு, குறிப்பாக எச்.ஐ.வி நோய்த்தொற்றைக் கண்டறிவதற்குப் பயன்படுத்தப்படுகிறது, வைரஸ் ஹெபடைடிஸ்மற்றும் பல.

நிறைய ELISA மாற்றங்கள் உள்ளன. சாலிட்-ஃபேஸ் அல்லாத போட்டி ELISA பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது. இது 96-கிணறு பாலிஸ்டிரீன் தட்டுகளில் (திட கட்டம்) மேற்கொள்ளப்படுகிறது. எதிர்வினையை மேற்கொள்ளும்போது, ​​​​ஒவ்வொரு கட்டத்திலும் செயல்படாத கூறுகளை கழுவ வேண்டியது அவசியம். ஆன்டிபாடிகளை நிர்ணயிக்கும் போது, ​​ஆன்டிஜென்கள் உறிஞ்சப்படும் கிணறுகளில் சோதனை இரத்த சீரம் சேர்க்கப்படுகிறது, பின்னர் ஆன்டிகுளோபுலின் சீரம் ஒரு நொதியுடன் லேபிளிடப்படுகிறது. நொதிக்கு அடி மூலக்கூறைச் சேர்ப்பதன் மூலம் எதிர்வினை மேற்கொள்ளப்படுகிறது. ஒரு நொதியின் முன்னிலையில், அடி மூலக்கூறு மாறுகிறது, மேலும் நொதி-அடி மூலக்கூறு வளாகம் தேர்ந்தெடுக்கப்படுகிறது, இதனால் எதிர்வினையில் உருவாகும் தயாரிப்பு நிறமாக இருக்கும். இதனால், ஒரு நேர்மறையான எதிர்வினையுடன், கரைசலின் நிறத்தில் மாற்றம் காணப்படுகிறது. ஆன்டிஜென்களைத் தீர்மானிக்க, திட-கட்ட கேரியர் ஆன்டிபாடிகளுடன் உணர்திறன் செய்யப்படுகிறது, பின்னர் சோதனைப் பொருள் (ஆன்டிஜென்கள்) மற்றும் ஆன்டிஜென்களுக்கு என்சைம்-லேபிளிடப்பட்ட சீரம் ஆகியவை தொடர்ச்சியாக சேர்க்கப்படுகின்றன. எதிர்வினை ஏற்பட, நொதிக்கான அடி மூலக்கூறு சேர்க்கப்படுகிறது. தீர்வு நிறத்தில் மாற்றம் நேர்மறை எதிர்வினையுடன் நிகழ்கிறது.

13.6.3. இம்யூனோபிளாட்டிங்

இந்த முறை எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் மற்றும் ELISA ஆகியவற்றின் கலவையை அடிப்படையாகக் கொண்டது. இம்யூனோபிளாட்டிங் செய்யும் போது (ஆங்கிலத்தில் இருந்து ப்ளாட்டிங். கறை- ஸ்பாட்) ஆன்டிஜென்களின் சிக்கலான கலவை முதலில் பாலிஅக்ரிலாமைடு ஜெல்லில் எலக்ட்ரோபோரேசிஸுக்கு உட்படுத்தப்படுகிறது. இதன் விளைவாக பிரிக்கப்பட்ட எதிர்ப்பு

மரபணு பெப்டைடுகள் நைட்ரோசெல்லுலோஸ் சவ்வுக்கு மாற்றப்படுகின்றன. கறைகள் பின்னர் ஒரு குறிப்பிட்ட ஆன்டிஜெனுக்கு என்சைம்-லேபிளிடப்பட்ட ஆன்டிபாடிகள் மூலம் சிகிச்சையளிக்கப்படுகின்றன, அதாவது. ELISA ப்ளாட்டை செயல்படுத்தவும். எச்.ஐ.வி போன்ற தொற்றுநோய்களைக் கண்டறிவதில் இம்யூனோபிளாட்டிங் பயன்படுத்தப்படுகிறது.

13.6.4. நோயெதிர்ப்பு எலக்ட்ரான் நுண்ணோக்கி

இந்த முறை நுண்ணோக்கியை கொண்டுள்ளது எலக்ட்ரான் நுண்ணோக்கிவைரஸ்கள் (குறைவாக மற்ற நுண்ணுயிரிகள்), எலக்ட்ரான்-ஆப்டிகல் அடர்த்தியான தயாரிப்புகளுடன் லேபிளிடப்பட்ட தகுந்த நோயெதிர்ப்பு சீரம் மூலம் முன்கூட்டியே சிகிச்சையளிக்கப்படுகிறது, எடுத்துக்காட்டாக ஃபெரிடின், இரும்புச்சத்து கொண்ட புரதம்.

13.7. ஓட்டம் சைட்டோமெட்ரி

லேசர் சைட்டோபுளோரோமெட்ரியின் அடிப்படையில் இரத்த அணுக்கள் வேறுபடுகின்றன. இதைச் செய்ய, சிடி ஆன்டிஜென்களுக்கு ஃப்ளோரசன்ட் மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடிகள் மூலம் விரும்பிய செல்கள் படிந்திருக்கும். இரத்த மாதிரி, லேபிளிடப்பட்ட ஆன்டிபாடிகளுடன் சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட பிறகு, ஒரு மெல்லிய குழாய் வழியாக அனுப்பப்படுகிறது மற்றும் ஒரு லேசர் கற்றை அதன் வழியாக அனுப்பப்படுகிறது, இது ஃப்ளோரோக்ரோமை ஒளிரச் செய்கிறது. ஃப்ளோரசன்ஸின் தீவிரம் செல் மேற்பரப்பில் உள்ள ஆன்டிஜென்களின் அடர்த்தியுடன் தொடர்புடையது மற்றும் ஒரு ஒளி பெருக்கிக் குழாயைப் பயன்படுத்தி அளவுகோலாக அளவிட முடியும். பெறப்பட்ட முடிவுகள் ஒரு ஹிஸ்டோகிராமாக மாற்றப்படுகின்றன.

ஃப்ளோ சைட்டோமெட்ரி தீர்மானிக்கப் பயன்படுகிறது நோய் எதிர்ப்பு நிலை(லிம்போசைட்டுகளின் முக்கிய மக்கள்தொகையின் உள்ளடக்கம், உள்செல்லுலார் மற்றும் எக்ஸ்ட்ராசெல்லுலர் சைட்டோகைன்களின் உள்ளடக்கம், என்.கே செல்களின் செயல்பாட்டு செயல்பாடு, பாகோசைடோசிஸ் செயல்பாடு போன்றவை).

இம்யூனோமிக்ரோபயாலஜிக்கல் ஆய்வுகள்

பல சிக்கல்களைத் தீர்க்க நோயெதிர்ப்பு முறைகள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன:

1. நிபந்தனை மதிப்பீடு நோய் எதிர்ப்பு அமைப்புஅளவு மற்றும் தீர்மானிப்பதன் மூலம் நபர் (நோய் எதிர்ப்பு நிலை). செயல்பாட்டு பண்புகள்நோயெதிர்ப்பு மண்டலத்தின் செல்கள் மற்றும் அவற்றின் தயாரிப்புகள்.

2. மனித திசுக்களின் கலவை மற்றும் பண்புகளை தீர்மானித்தல்: இரத்த குழுக்கள், Rh காரணி, மாற்று ஆன்டிஜென்கள்.

3. தொற்று நோய்களைக் கண்டறிதல் மற்றும் ஆன்டிபாடி டைட்டர்களை (செரோடியாக்னோசிஸ்) கண்டறிந்து நிறுவுதல், உடலில் உள்ள நோய்க்கிருமி ஆன்டிஜென்களைக் கண்டறிதல் மற்றும் இந்த ஆன்டிஜென்களுக்கு செல்லுலார் எதிர்வினைகளைத் தீர்மானித்தல்.

4. மனிதர்கள் மற்றும் விலங்குகளின் உடலில் இருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்ட பாக்டீரியா மற்றும் வைரஸ்களின் கலாச்சாரங்களின் செராய்டு அடையாளம்.

5. மனித உடலிலும் உள்ளேயும் கண்டறிதல் வெளிப்புற சுற்றுசூழல்ஆன்டிஜெனிக் அல்லது ஹேப்டன் பண்புகள் (ஹார்மோன்கள், என்சைம்கள், விஷங்கள், மருந்துகள், மருந்துகள் போன்றவை) கொண்ட ஏதேனும் பொருட்கள்

6. நோயெதிர்ப்பு நோயியல் நிலைமைகள், ஒவ்வாமை, மாற்று அறுவை சிகிச்சை மற்றும் ஆன்டிடூமர் எதிர்வினைகளை அடையாளம் காணுதல்.

ஆன்டிஜென் மற்றும் ஆன்டிபாடி இடையேயான தொடர்பு செயல்முறை செரோலாஜிக்கல் எதிர்வினைகள்இரண்டு கட்டங்களில் நிகழ்கிறது:

1) குறிப்பிட்ட- ஆன்டிபாடிகள் (பாராடோப்கள்) மற்றும் ஆன்டிஜென் எபிடோப்களின் செயலில் உள்ள மையங்களின் நிரப்பு சேர்க்கை ஏற்படும் தொடர்பு கட்டம். பொதுவாக இந்த கட்டம் சில வினாடிகள் அல்லது நிமிடங்கள் நீடிக்கும்;

2) குறிப்பிடப்படாத- வெளிப்பாடு கட்டம், வகைப்படுத்தப்படும் வெளிப்புற அறிகுறிகள்நோயெதிர்ப்பு வளாகங்களின் உருவாக்கம். இந்த கட்டம் பல நிமிடங்கள் முதல் பல மணி நேரம் வரை உருவாகலாம்.

ஆன்டிஜெனுடன் ஆன்டிபாடிகளின் உகந்த குறிப்பிட்ட தொடர்பு நடுநிலைக்கு நெருக்கமான pH உடன் ஐசோடோனிக் கரைசலில் நிகழ்கிறது. இன் விட்ரோ அமைப்பில் ஆன்டிஜென்-ஆன்டிபாடி எதிர்வினை பல நிகழ்வுகளின் நிகழ்வுகளுடன் சேர்ந்து கொள்ளலாம்.

· திரட்டுதல்,

· மழைப்பொழிவு,

· சிதைவு.

வெளிப்புற வெளிப்பாடுகள்எதிர்வினைகள் ஆன்டிஜெனின் இயற்பியல் வேதியியல் பண்புகளைப் பொறுத்தது (துகள் அளவு, உடல் நிலை), வகுப்பு மற்றும் ஆன்டிபாடிகளின் வகை (முழுமையான மற்றும் முழுமையற்றது), அத்துடன் சோதனை நிலைகள் (நடுத்தர நிலைத்தன்மை, உப்பு செறிவு, pH, வெப்பநிலை).

ஆன்டிஜென்கள் மற்றும் ஆன்டிபாடிகளின் பாலிவலன்சி நிர்வாணக் கண்ணுக்குத் தெரியும் மொத்தங்களின் உருவாக்கத்தை உறுதி செய்கிறது. நெட்வொர்க் உருவாக்கம் கோட்பாட்டின் படி இது நிகழ்கிறது, இதன்படி பிற ஆன்டிபாடி மற்றும் ஆன்டிஜென் மூலக்கூறுகள் விளைவான ஆன்டிஜென்-ஆன்டிபாடி வளாகத்துடன் தொடர்ச்சியாக இணைக்கப்படுகின்றன. இதன் விளைவாக, நெட்வொர்க் கட்டமைப்புகள் உருவாகின்றன, அவை வீழ்படியும் மொத்தமாக மாறும். எதிர்வினையின் தன்மை மற்றும் தீவிரம் ஆன்டிஜென்கள் மற்றும் ஆன்டிபாடிகளின் அளவு விகிதத்தைப் பொறுத்தது. எதிர்வினைகள் சமமான விகிதத்தில் இருக்கும்போது மிகவும் தீவிரமான எதிர்வினைகள் ஏற்படுகின்றன.

முன்நிபந்தனைலட்டு உருவாக்கம் (நெட்வொர்க்குகள்) - ஒவ்வொரு ஆன்டிஜென் மூலக்கூறுக்கும் மூன்றுக்கும் மேற்பட்ட ஆன்டிஜெனிக் தீர்மானிப்பான்கள் மற்றும் ஒவ்வொரு ஆன்டிபாடி மூலக்கூறுக்கும் இரண்டு செயலில் உள்ள மையங்கள் இருப்பது. ஆன்டிஜென் மூலக்கூறுகள் லட்டு முனைகள், மற்றும் ஆன்டிபாடி மூலக்கூறுகள் இணைப்புகளை இணைக்கின்றன. ஆன்டிஜென் மற்றும் ஆன்டிபாடி செறிவுகளின் உகந்த விகிதங்களின் (சமநிலை மண்டலம்) பகுதி, வண்டல் உருவாவதற்குப் பிறகு சூப்பர்நேட்டண்டில் இலவச ஆன்டிஜென்கள் அல்லது இலவச ஆன்டிபாடிகள் கண்டறியப்படவில்லை.

ஆன்டிஜென்கள் முழு ஆன்டிபாடிகளுடன் இணைந்தால் வீழ்படிவக்கூடிய திரட்டிகள் உருவாகின்றன. முழுமையற்ற ஆன்டிபாடிகள் (மோனோவலன்ட்) பிணைய கட்டமைப்புகள் மற்றும் பெரிய திரட்டுகளின் உருவாக்கத்தை ஏற்படுத்தாது. அத்தகைய ஆன்டிபாடிகளைக் கண்டறிய, பயன்படுத்தவும் சிறப்பு முறைகள்ஆன்டிகுளோபுலின் (கூம்ப்ஸ் எதிர்வினை) பயன்பாட்டின் அடிப்படையில்.

செரோலாஜிக்கல் சோதனைகள், அவற்றின் உயர் குறிப்பிட்ட தன்மை மற்றும் உணர்திறன் காரணமாக, கண்டறிய மற்றும் பயன்படுத்தப்படுகின்றன அளவீடுஆன்டிஜென்கள் மற்றும் ஆன்டிபாடிகள். எதிர்வினைகளில் உள்ள நோயெதிர்ப்பு சக்திகளின் அளவு டைட்டரால் வெளிப்படுத்தப்படுகிறது - சீரம் அல்லது ஆன்டிஜெனின் அதிகபட்ச நீர்த்தம், இதில் ஒரு எதிர்வினை இன்னும் காணப்படுகிறது.

நுண்ணுயிரியல் மற்றும் நோயெதிர்ப்பு ஆய்வகங்களில் செரோலாஜிக்கல் எதிர்வினைகள் இரண்டு நோக்கங்களுக்காகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன:

1) நுண்ணுயிரிகள், நச்சுகள், ஆன்டிஜென்கள் ஆகியவற்றை பொதுவாக அறியப்பட்ட ஆன்டிபாடியை (நோய் எதிர்ப்பு நோய் கண்டறிதல் சீரம்) பயன்படுத்தி சீரோவைக் கண்டறிதல்

2) செரோடயாக்னோசிஸுக்கு - அறியப்பட்ட ஆன்டிஜெனைப் பயன்படுத்தி (நோயறிதல்) பாக்டீரியா, வைரஸ் மற்றும் குறைவான அடிக்கடி பிற தொற்று நோய்களுக்கான நோயாளியின் இரத்த சீரம் உள்ள ஆன்டிபாடியின் தன்மையை தீர்மானித்தல்.

ஆன்டிஜெனின் பொதுவான, இனங்கள் மற்றும் வகையைத் தீர்மானிக்க, அறியப்பட்ட நோயெதிர்ப்பு கண்டறியும் செரா தேவை. கொல்லப்பட்ட அல்லது உயிருள்ள நுண்ணுயிரிகள், அவற்றின் சிதைவு பொருட்கள், நடுநிலைப்படுத்தப்பட்ட அல்லது சொந்த நச்சுகள் ஆகியவற்றின் அளவை அதிகரிப்பதன் மூலம் விலங்குகளுக்கு (பொதுவாக முயல்கள்) மீண்டும் மீண்டும் வழங்குவதன் மூலம் அவை பெறப்படுகின்றன. விலங்குகளின் நோய்த்தடுப்பு சுழற்சியின் ஒரு குறிப்பிட்ட சுழற்சிக்குப் பிறகு, பாரிய இரத்தப்போக்கு அல்லது விலங்குகளின் மொத்த இரத்தப்போக்கு செய்யப்படுகிறது. ஒரு மலட்டுக் கொள்கலனில் சேகரிக்கப்பட்ட இரத்தம் முதலில் 37 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 4 - 6 மணிநேரங்களுக்கு ஒரு தெர்மோஸ்டாட்டில் வைக்கப்பட்டு, உறைவதை துரிதப்படுத்துகிறது, பின்னர் ஒரு நாள் ஒரு ஐஸ்பாக்ஸில் வைக்கப்படுகிறது. இதன் விளைவாக வெளிப்படையான சீரம் ஒரு மலட்டு கொள்கலனில் உறிஞ்சப்படுகிறது, பாதுகாப்புகள் சேர்க்கப்படுகின்றன, ஆன்டிபாடி டைட்டர் தீர்மானிக்கப்படுகிறது, மலட்டுத்தன்மையை சரிபார்க்கிறது மற்றும் ஆம்பூல்களில் ஊற்றப்படுகிறது.

பயன்படுத்தப்படுகின்றன உறிஞ்சப்படாதமற்றும் உறிஞ்சப்பட்டநோய் கண்டறிதல் செரா. உறிஞ்சப்படாத சீரம் உள்ளது உயர் டைட்டர்கள்ஆன்டிபாடிகள், ஆனால் குழு (குறுக்கு) எதிர்வினைகளை கொடுக்கும் திறன் கொண்டவை.

Adsorbed sera நடவடிக்கையின் கடுமையான குறிப்பிட்ட தன்மையால் வகைப்படுத்தப்படுகிறது (அவை ஒரே மாதிரியான ஆன்டிஜெனுடன் மட்டுமே செயல்படுகின்றன). ஒரு குறிப்பிட்ட ஆன்டிஜெனுக்கு மட்டும் ஆன்டிபாடிகள் கொண்ட செரா என்று அழைக்கப்படுகிறது ஒற்றை ஏற்பி.

அவை ஃப்ளோரோக்ரோம்கள், என்சைம்கள் மற்றும் ரேடியோஐசோடோப்புகள் என்று பெயரிடப்பட்ட சீரம்களை உருவாக்குகின்றன, இது ஆன்டிஜெனின் தடயங்களைக் கூட அதிக அளவு துல்லியத்துடன் கண்டறிய உதவுகிறது.

உயிருள்ள அல்லது கொல்லப்பட்ட பாக்டீரியாக்களின் இடைநீக்கங்கள், அவற்றின் முறிவு பொருட்கள், நச்சுகள் மற்றும் வைரஸ்கள் செரோலாஜிக்கல் எதிர்வினைகளில் ஆன்டிஜென்களாக (நோயறிதல்கள்) பயன்படுத்தப்படுகின்றன. சில சந்தர்ப்பங்களில், நுண்ணுயிரிகள் மற்றும் விலங்கு திசுக்களில் இருந்து சாறுகள் அல்லது வேதியியல் ரீதியாக தனிமைப்படுத்தப்பட்ட ஆன்டிஜென்கள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன.

அனைத்து நோயெதிர்ப்பு நுண்ணுயிரியல் முறைகளையும் 3 குழுக்களாக பிரிக்கலாம்:

1) அடிப்படையில் ஆன்டிபாடியுடன் ஆன்டிஜெனின் நேரடி தொடர்பு(திரட்சியின் நிகழ்வுகள், மழைப்பொழிவு, ஹீமாக்ளூட்டினேஷன், அசையாமை, முதலியன);

2) அடிப்படையில் ஆன்டிபாடியுடன் ஆன்டிஜெனின் மத்தியஸ்த தொடர்பு(எதிர்வினைகள் மறைமுக ரத்தக்கசிவு, உறைதல், மரப்பால் திரட்டுதல், கார்பன் திரட்டுதல், பெண்டோனைட் திரட்டுதல், நிரப்புதல் சரிசெய்தல் போன்றவை);

3) பயன்படுத்தி பெயரிடப்பட்ட ஆன்டிபாடிகள் அல்லது ஆன்டிஜென்கள்(ஃப்ளோரசன்ட் ஆன்டிபாடி முறை, என்சைம்-இணைக்கப்பட்ட இம்யூனோசார்பன்ட் மற்றும் ரேடியோ இம்யூனோசேஸ்கள் மற்றும் பிற முறைகள்).

திரட்டுதல் எதிர்வினைகள்

இந்த எதிர்வினைகளில் ஆன்டிஜென்கள் துகள்கள் (நுண்ணுயிர் செல்கள், சிவப்பு இரத்த அணுக்கள் மற்றும் பிற கார்பஸ்குலர் ஆன்டிஜென்கள்) ஆகியவை அடங்கும், அவை ஆன்டிபாடிகள் மற்றும் வீழ்படிவுகளால் ஒன்றாக ஒட்டப்படுகின்றன.

ஒரு திரட்டல் எதிர்வினை செய்ய(RA) மூன்று கூறுகள் தேவை: 1) ஆன்டிஜென் (agglutinogen);

2) ஆன்டிபாடி (அக்லூட்டினின்)

3) எலக்ட்ரோலைட் (ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு தீர்வு).

தோராயமான திரட்டல் எதிர்வினை (RA)

ஒரு அறிகுறி அல்லது தட்டு, RA அறை வெப்பநிலையில் ஒரு கண்ணாடி ஸ்லைடில் வைக்கப்படுகிறது. இதைச் செய்ய, 1:10 முதல் 1:20 வரை நீர்த்துப்போகும்போது ஒரு துளி சீரம் மற்றும் ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு கரைசலின் கட்டுப்பாட்டுத் துளியை கண்ணாடி மீது தனித்தனியாகப் பயன்படுத்த, ஒரு பாஸ்டர் பைப்பெட்டைப் பயன்படுத்தவும். காலனிகள் அல்லது பாக்டீரியாவின் தினசரி கலாச்சாரம் (ஒரு துளி கண்டறிதல்) இரண்டு பாக்டீரியாவியல் சுழல்களிலும் அறிமுகப்படுத்தப்பட்டு முழுமையாக கலக்கப்படுகிறது. சில நிமிடங்களுக்குப் பிறகு, சில நேரங்களில் பூதக்கண்ணாடி (x5) பயன்படுத்தி எதிர்வினைகள் பார்வைக்கு கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ளப்படுகின்றன. நேர்மறை RA உடன், சீரம் வீழ்ச்சியில் பெரிய மற்றும் சிறிய செதில்களின் தோற்றம் எதிர்மறை RA உடன் குறிப்பிடப்பட்டுள்ளது, சீரம் ஒரே மாதிரியாக மேகமூட்டமாக உள்ளது.

விரிவான திரட்டல் எதிர்வினைஒரு நோயாளியின் குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடிகளின் டைட்டரை அடையாளம் காண்பதற்காக.

செரோடியோக்னோசிஸிற்கான முழு வீச்சு RA நோயாளிகளின் சீரம் மூலம் செய்யப்படுகிறது. இது ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு கரைசலில் 1:50 - 1:100 முதல் 1:800 அல்லது 1: 1600 வரை நீர்த்தப்படுகிறது. குறைந்த சீரம் டைட்டர்களில் சாதாரண அக்லுட்டினின்கள் இருக்கலாம். ஆரோக்கியமான மக்கள்அல்லது மற்றொரு நோயறிதலைக் கொண்ட நோயாளிகள் (நோயறிதல் டைட்டர்). இந்த எதிர்வினையில் ஒரு ஆன்டிஜெனாக, கண்டறியும் மருந்துகள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன - அறியப்பட்ட இடைநீக்கங்கள், பொதுவாக கொல்லப்பட்ட பாக்டீரியாக்கள்.

1 மில்லி ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு கரைசல் முதலில் திரட்டல் குழாய்களில் ஊற்றப்படுகிறது. 1 மில்லி சீரம் நீர்த்த 1:100 அவற்றில் முதலாவதாக சேர்க்கப்படுகிறது, அதை கலந்த பிறகு, 1 மில்லி இரண்டாவதாக மாற்றப்படுகிறது, இரண்டாவது முதல் மூன்றாவது வரை. 1 மில்லியில் 3 பில்லியன் நுண்ணுயிர் உடல்களைக் கொண்ட ஒரு பாக்டீரியா இடைநீக்கத்தின் 1-2 துளிகள் செராவின் இரண்டு மடங்கு நீர்த்தலுக்கு (1:100 முதல் 1:1600 அல்லது அதற்கு மேற்பட்டவை) சேர்க்கப்படுகின்றன. குழாய்கள் குலுக்கப்பட்டு 37 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 2 மணிநேரத்திற்கு ஒரு தெர்மோஸ்டாட்டில் வைக்கப்பட்டு, பின்னர் அறை வெப்பநிலையில் 24 மணி நேரம் வைக்கப்படும்.

ஒவ்வொரு சோதனைக் குழாயையும் வரிசையாக மதிப்பீடு செய்வதன் மூலம் விரிவான திரட்டல் எதிர்வினை கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ளப்படுகிறது, கட்டுப்பாட்டில் இருந்து தொடங்கி, மென்மையான குலுக்கல். கட்டுப்பாட்டு குழாய்களில் திரட்டுதல் இருக்கக்கூடாது. திரட்டல் எதிர்வினையின் தீவிரம் பின்வரும் அறிகுறிகளால் குறிக்கப்படுகிறது: ++++ - முழுமையான திரட்டல் (ஒரு முழுமையான வெளிப்படையான திரவத்தில் திரள் செதில்கள்); +++ - முழுமையற்ற திரட்டல் (சற்று ஒளிபுகா திரவத்தில் செதில்களாக); ++ - பகுதி திரட்டல் (செதில்களாகத் தெளிவாகத் தெரியும், திரவம் சற்று மேகமூட்டமாக இருக்கும்); + - பலவீனமான, கேள்விக்குரிய திரட்டல் - திரவம் மிகவும் மேகமூட்டமாக உள்ளது, அதில் உள்ள செதில்களை வேறுபடுத்துவது கடினம்; - - திரட்டுதல் இல்லாதது (திரவமானது ஒரே மாதிரியான மேகமூட்டமாக உள்ளது).

சீரம் டைட்டர் அதன் கடைசி நீர்த்தலாக எடுத்துக் கொள்ளப்படுகிறது, இதில் திரட்டலின் தீவிரம் இரண்டு பிளஸ்களுக்குக் குறையாமல் (++) மதிப்பிடப்படுகிறது.

திரட்டுதல் எதிர்வினை திரட்டுதல் எதிர்வினை

(RA) என்பது Ag மற்றும் Ab ஐக் கண்டறிந்து அளவிடுவதற்கான ஒரு முறையாகும், இது நிர்வாணக் கண்ணுக்குத் தெரியும் திரட்டுகளை உருவாக்கும் திறனை அடிப்படையாகக் கொண்டது. தொற்று நோய்கள் துறையில். நோய்கள் அல்லது பிற நோக்கங்களுக்காக அறியப்படாத நுண்ணுயிரிகள் மற்றும் செல்களை அடையாளம் காணவும், இரத்தம் மற்றும் பிற திரவங்களில் ஏபியின் இருப்பு மற்றும் அளவைக் கண்டறியவும் பயன்படுத்தப்படுகிறது. நிர்ணயக் கொள்கையானது Ag மற்றும் Ab இடையேயான தொடர்புகளின் தனித்தன்மையை அடிப்படையாகக் கொண்டது மற்றும் தெரியாதவற்றிலிருந்து அறியப்பட்டதைக் கண்டுபிடிப்பதில் உள்ளது. RA க்கு பல விருப்பங்கள் உள்ளன: அளவு மற்றும் தரம், சோதனை குழாய் மற்றும் கண்ணாடி, அளவு மற்றும் நீர்த்துளி, வழக்கமான, துரிதப்படுத்தப்பட்ட மற்றும் எக்ஸ்பிரஸ் முறைகள். RA ஐ நிலைப்படுத்த உங்களுக்குத் தேவை: 1) s-ka இரத்தம்.பாக்டீரியாவின் வகையை (var) தீர்மானிப்பதற்கான மாறுபாட்டில், முயல்களுக்கு தடுப்பூசி போடுவதன் மூலம் உற்பத்தி செய்யப்படும் தொழில்துறை திரட்டுதல் சோதனைகள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. ஏபி வகையை நிர்ணயிக்கும் மாறுபாட்டில், சோதனையிலிருந்து இரத்த மாதிரி எடுக்கப்படுகிறது. மக்கள் அல்லது விலங்குகள். தீர்வு மலட்டுத்தன்மை மற்றும் இடைநீக்கம் செய்யப்பட்ட துகள்கள் இல்லாமல் இருக்க வேண்டும். உப்பு கரைசலில் அடிப்படை நீர்த்தலை தயார் செய்யவும். இந்த நோய்க்கான கண்டறியும் டைட்டரை விட இது 2-4 மடங்கு குறைவாக இருக்க வேண்டும்; 2) ஆக.ஏபி வகையின் உறுதியுடன் எதிர்வினையின் பதிப்பில், தொழில்துறை கண்டறியும் கருவிகள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன; 18-20 மணி நேர அகார் (குறைவாக அடிக்கடி குழம்பு) சோதனையின் உப்புக் கரைசலில் 1-3 பில்லியன் இடைநீக்க வடிவில், நோய் கண்டறிதல்கள் தயாரிக்கப்படுகின்றன. 70 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 1 மணிநேரம் அல்லது ஃபார்மால்டிஹைடுடன் 37 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 24 மணிநேர அடைகாப்பதன் மூலம் (இறுதி செறிவு 0.2%) நீர் குளியல் மூலம் நுண்ணுயிர் செயலிழக்கச் செய்யப்படுகிறது; 3) உப்பு கரைசல் வடிவில் எலக்ட்ரோலைட்.ஸ்டேஜிங் நுட்பம் அளவீட்டு தொடர் குழாய் s-ki இல் AB டைட்டரை தீர்மானிக்க RA: s-ki இன் முக்கிய நீர்த்தலில் இருந்து பல வரிசை வேலை நீர்த்தங்கள் தயாரிக்கப்படுகின்றன. வரிசைகளின் எண்ணிக்கை பரிசோதனையில் எடுக்கப்பட்ட நோயறிதல்களின் எண்ணிக்கையைப் பொறுத்தது; இந்தத் தொடரில் குறைந்தபட்சம் கண்டறிதல் ஏபி டைட்டருடன் தொடர்புடைய நீர்த்தம் இருக்க வேண்டும், கீழே இரண்டு நீர்த்தங்கள் மற்றும் அதற்கு மேல் இரண்டு நீர்த்தங்கள். எடுத்துக்காட்டாக, கண்டறியும் டைட்டர் 1:100 எனில், RA ஐ நிலைநிறுத்துவதற்கான அளவீட்டு முறையுடன் பின்வரும் நீர்த்தல்கள் தயாரிக்கப்பட வேண்டும்: 1:25, 1:50, 1:100, 1:200, 1"400; சொட்டு மருந்துடன் முறை, முதல் நீர்த்தல் (1:25) தேவையில்லை, ஆனால் மற்றொரு அதிக நீர்த்தல் தேவைப்படுகிறது - 1:800 பி. அறிவியல் ஆராய்ச்சி s-ku என டைட்ரேட் செய்யப்பட்டுள்ளது எதிர்மறை எதிர்வினை. இது பின்வருமாறு நீர்த்தப்படுகிறது: 0.25 மில்லி உப்புக் கரைசல் அனைத்து சோதனைக் குழாய்களிலும் ஊற்றப்படுகிறது, 1 வது ஒன்றைத் தவிர, எதிர்வினை 0.5 மில்லி அளவில் மேற்கொள்ளப்படும்போது, ​​0.5 மில்லி, எதிர்வினை 1 அளவில் மேற்கொள்ளப்படும்போது. மி.லி. 0.25 (0.5) மிலி பிரதான நீர்த்தத்தை 1 மற்றும் 2 வது சோதனைக் குழாய்களில், 2 வது சோதனைக் குழாயிலிருந்து, வெட்டு அளவு மற்றும் இனப்பெருக்கம் s-kமற்றும் 2 மடங்கு அதிகரித்தது, 0.25 (0.5) மில்லி 3 வது, 3 வது முதல் 4 வது, முதலியன மாற்றப்படுகிறது. கடைசி வரை, வெட்டப்பட்ட பகுதியிலிருந்து 0.25 (0.5) மில்லி அளவுகளை சமப்படுத்த எல்லாவற்றிலும் ஊற்றப்படுகிறது. ஒவ்வொரு நீர்த்தலும் ஒரு தனி பைப்பெட்டைப் பயன்படுத்தி மேற்கொள்ளப்படுகிறது. பல நோயறிதல்கள் பரிசோதனைக்கு எடுத்துக் கொள்ளப்பட்டால், அவை ஒவ்வொன்றிற்கும் அதன் சொந்த நீர்த்தங்கள் அதே வழியில் தயாரிக்கப்படுகின்றன. சோதனைக் குழாயின் ஒவ்வொரு நீர்த்தலுக்கும் சோதனைக் குழாயின் தொகுதிக்கு சமமான அளவில் கண்டறியும் கருவி சேர்க்கப்படுகிறது, இதன் விளைவாக ஒவ்வொரு சோதனைக் குழாயிலும் நீர்த்துவது இரட்டிப்பாகிறது. சோதனையானது s-ki கட்டுப்பாடு (0.25 - 0.5 மில்லி s-ki இன் முக்கிய நீர்த்தம் மற்றும் அதே அளவு உப்பு கரைசல்) மற்றும் Ag கட்டுப்பாடு (0.25 - 0.5 மில்லி கண்டறிதல் மற்றும் அதே அளவு உப்பு கரைசல்) ஆகியவற்றை ஒத்துள்ளது. பரிசோதனையில் பல கண்டறிதல்கள் பயன்படுத்தப்பட்டால், ஒவ்வொன்றும் அதன் சொந்த ஆன்டிஜென் கட்டுப்பாட்டைக் கொண்டிருக்கும். சோதனைக் குழாய்களைக் கொண்ட ரேக் நன்றாக அசைக்கப்பட்டு, 37 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 4 மணிநேரத்திற்கு ஒரு தெர்மோஸ்டாட்டில் வைக்கப்பட்டு, அடுத்த நாள் வரை அறை வெப்பநிலையில் விடப்படுகிறது, அதன் பிறகு வண்டலின் அளவு மற்றும் அகற்றப்பட்ட அளவு ஆகியவற்றின் அடிப்படையில் PA பதிவு செய்யப்படுகிறது. திரவம். இந்த குறிகாட்டிகளின் நிர்ணயம், அக்லூட்டினேட்டுகளின் தன்மையைப் பொறுத்து, நிர்வாணக் கண்ணால் இருண்ட பின்னணியில், அக்லூட்டினோஸ்கோப்பில் அல்லது நுண்ணோக்கி கண்ணாடியின் குழிவான மேற்பரப்பில் மேற்கொள்ளப்படுகிறது. கணக்கியல் கட்டுப்பாடுகளுடன் தொடங்குகிறது: கட்டுப்பாடு C வெளிப்படையாக இருக்க வேண்டும், Ag ஒரே மாதிரியான மேகமூட்டமாக இருக்க வேண்டும் (குழாயை அசைத்த பிறகு). கட்டுப்பாடுகள் நன்றாக இருந்தால், அனைத்து சோதனைக் குழாய்களிலும் திரட்டலின் இருப்பு மற்றும் அளவை நிறுவவும், அவை pluses மூலம் நியமிக்கப்படுகின்றன: பெரிய வண்டல் மற்றும் திரவத்தின் முழுமையான தீர்வு - 4 pluses; பெரிய வண்டல் மற்றும் திரவத்தின் முழுமையற்ற தீர்வு - 3 பிளஸ்கள்; கவனிக்கத்தக்க வண்டல் மற்றும் திரவத்தின் குறிப்பிடத்தக்க சுத்திகரிப்பு ஆகியவை 2 பிளஸ் ஆகும். இதற்குப் பிறகு, டைட்டர் தீர்மானிக்கப்படுகிறது: குறைந்தபட்சம் 2 பிளஸ்களின் திரட்டல் தீவிரத்துடன் கூடிய மிக உயர்ந்த நீர்த்தல். டைட்டர் ஆராய்ச்சி s-ki இந்த நோய்க்கான கண்டறியும் டைட்டருடன் ஒப்பிடப்படுகிறது. டைட்டர் படித்தால். s-ki கண்டறியும் மதிப்பை விட 2 மடங்கு குறைவாக உள்ளது, எதிர்வினை சந்தேகத்திற்குரியதாக மதிப்பிடப்படுகிறது; டைட்டர் சமமாக இருந்தால் நோய் கண்டறிதல் - எப்படிபலவீனமான நேர்மறை; இது 2-4 மடங்கு அதிகமாக இருந்தால், அது 8 அல்லது அதற்கு மேற்பட்ட மடங்கு அதிகமாக இருந்தால், அது நேர்மறையாகக் கருதப்படுகிறது. ஆரோக்கியமான மக்களில் Ab பரவலாக இருக்கும்போது, ​​RA ஐ மதிப்பிடுவதற்கு Ab titer இன் அதிகரிப்பு பயன்படுத்தப்படுகிறது. தொடர் RA இல் Ar வகையைத் தீர்மானிக்க, வரிசைகளின் எண்ணிக்கை அடையாளத்திற்காக எடுக்கப்பட்ட எண்ணுடன் ஒத்திருக்க வேண்டும். கண்டறியும் சோதனைகள். நோயறிதல் சோதனையின் முக்கிய நீர்த்தலில் இருந்து, AB டைட்டரைத் தீர்மானிக்க RA இல் உள்ளதைப் போலவே தொடர்ச்சியான இரண்டு மடங்கு நீர்த்தங்களின் தொடர் தயாரிக்கப்படுகிறது. நீர்த்துப்போகும் சோதனையின் டைட்டரைச் சார்ந்தது, சோதனையின் தலைப்புக்கு சமமான நீர்த்தம் இருப்பது அவசியம், எடுத்துக்காட்டாக, அதை விட 2, 4, 6, 8 மடங்கு குறைவு கண்டறியும் சோதனையின் தலைப்பு 1 3200 ஆகும், பின்னர் நீங்கள் நீர்த்த 1 3200, 1 1600, 1 800, 1 400, 1 200 ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்த வேண்டும், அதே அளவு சோதனை செய்யப்பட்ட Ag இன் அளவு சோதனையின் நீர்த்தங்களில் சேர்க்கப்படுகிறது, இதன் விளைவாக, நீர்த்தல் சோதனை 2 மடங்கு அதிகரிக்கிறது மற்றும் சோதனையில் பல s-k ஈடுபட்டிருந்தால், அவை ஒவ்வொன்றும் அதன் சொந்தக் கட்டுப்பாடு தேவைப்படுகிறது 37 ° C இல் உள்ள தெர்மோஸ்டாட்டில், ஆய்வுக்கு இணங்குவதைப் பற்றி ஒரு முடிவை எடுப்பதற்காக, வினையின் மதிப்பீடுகள் மேலே விவரிக்கப்பட்டுள்ளபடி கணக்கில் எடுத்துக்கொள்ளப்படுகின்றன. சோதனையில் எடுத்துக் கொள்ளப்பட்டால், 1 4 மற்றும் அதற்குக் கீழே உள்ள டைட்டர்கள் ஒரு குழு எதிர்வினையாகக் கருதப்படும் டிரிப் எம்.டி RA இன் ஸ்டேஜிங் வால்யூமெட்ரிக்கில் இருந்து வேறுபடுகிறது, இதில் s-ku 1 மில்லி அளவில் நீர்த்தப்படுகிறது, Ag அதிக செறிவில் (10 பில்லியன்/மிலி) பயன்படுத்தப்படுகிறது மற்றும் இது 1 சேர்க்கப்படுகிறது. - 2 ஒரு சோதனைக் குழாயில் குறைகிறது

(ஆதாரம்: நுண்ணுயிரியல் விதிமுறைகளின் அகராதி)

திரட்டுதல் எதிர்வினை.

ஒரு திரட்டல் எதிர்வினை என்பது எலக்ட்ரோலைட்டின் முன்னிலையில் ஆன்டிபாடிகளின் செல்வாக்கின் கீழ் நுண்ணுயிர் அல்லது பிற செல்கள் (எரித்ரோசைட்டுகள்) ஒட்டுதல் மற்றும் மழைப்பொழிவு ஆகும். எதிர்வினையின் புலப்படும் விளைவு (அக்ளுடினேஷன் நிகழ்வு) அக்லூட்டினேட் எனப்படும் வீழ்படிவு உருவாக்கம் ஆகும்.

இந்த எதிர்வினை பயன்படுத்தப்படுகிறது செரோடியக்னோசிஸ்மற்றும் seroidentification. RA செரோடயாக்னோசிஸ் (நோயாளிகளின் இரத்த சீரம் உள்ள ஆன்டிபாடிகளைக் கண்டறிதல்) க்கு பயன்படுத்தப்படுகிறது. டைபாயிட் ஜுரம்மற்றும் paratyphoid(விடல் எதிர்வினை), புருசெல்லோசிஸ்(ரைட்டின் எதிர்வினை) துலரேமியா மற்றும் லெப்டோஸ்பிரோசிஸ். RA ஆனது seroidentification (ஒரு நோயாளியிடமிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்ட நோய்க்கிருமியின் வகையைத் தீர்மானித்தல்) எப்போது பயன்படுத்தப்படுகிறது குடல் தொற்றுகள், கக்குவான் இருமல், காலராமற்றும் பல.

கூறுகள்எதிர்வினைகள்:

1. ஏ என்டிஜென் (அக்லூட்டினோஜென்) -இவை முழு (அழிக்கப்படவில்லை) நுண்ணுயிர் அல்லது பிற செல்கள் ( கார்பஸ்குலர், கரையாத ஆன்டிஜென்). அக்லூட்டினோஜென்கள்- இது ஒரு இடைநீக்கம் உயிருடன்அல்லது கொல்லப்பட்டனர்நுண்ணுயிர் செல்கள் அல்லது வேறு எந்த செல்கள். ஆன்டிஜென்கள் அறியப்படாத அல்லது அறியப்பட்டதாக இருக்கலாம். அறியப்படாத அக்லூட்டினோஜென் என்பது நோயாளியின் உடலில் இருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்ட ஒரு நுண்ணுயிர் கலாச்சாரமாகும், இது தீர்மானிக்கப்பட வேண்டும். அறியப்பட்ட ஆன்டிஜென் - நோய் கண்டறிதல்- கண்டறியும் மருந்து - இறந்தவர்களின் இடைநீக்கம்நுண்ணுயிரிகள் அறியப்பட்ட இனங்கள்உப்பு கரைசலில். இந்த இடைநீக்கம் மேகமூட்டம் (ஒளிபுகா), ஏனெனில் நுண்ணுயிர் செல்கள் கரைவதில்லை, ஆனால் அப்படியே இருக்கும். நோயாளிகளின் இரத்த சீரத்தில் உள்ள அறியப்படாத ஆன்டிபாடிகளைக் கண்டறிய அறியப்பட்ட அக்லூட்டினோஜென் பயன்படுத்தப்படும்.

2. ஆன்டிபாடி (அக்லூட்டினின்)- இரத்த சீரம் காணப்படுகிறது. ஆன்டிபாடிகள் அறியப்படாத அல்லது அறியப்பட்டதாகவும் இருக்கலாம். அறியப்படாத ஆன்டிபாடிகள் இரத்த சீரத்தில் உள்ளன நோய்வாய்ப்பட்ட நபர். அறியப்பட்ட ஆன்டிபாடிகள் காணப்படுகின்றன நோய் எதிர்ப்பு சக்தி நோய் கண்டறிதல் செரா என்று அழைக்கப்படுகின்றன திரட்டும் சீரகம். அவை செரோ-அடையாளம் காண பயன்படுத்தப்படுகின்றன, அதாவது. அறியப்படாத ஆன்டிஜெனைத் தீர்மானிக்க - ஒரு வகை நுண்ணுயிர் கலாச்சாரம்.

3. எலக்ட்ரோலைட்- 0.9% சோடியம் குளோரைடு தீர்வு.

RA ஐ நிலைநிறுத்துவதற்கான முறைகள்.

1. தோராயமான (லேமல்லர்) RA- கண்ணாடி மீது மேற்கொள்ளப்படுகிறது. ஒரு கண்ணாடி ஸ்லைடில் 2 சொட்டு சீரம் மற்றும் 1 சொட்டு ஐசோடோனிக் கரைசலைப் பயன்படுத்துங்கள். ஒரு நுண்ணுயிர் கலாச்சாரம் சீரம் சொட்டுகளில் ஒன்றில் ஒரு சுழற்சியில் சேர்க்கப்பட்டு ஐசோடோனிக் கரைசலின் ஒரு துளி மற்றும் கலக்கப்படுகிறது. ஐசோடோனிக் தீர்வு ஒரு துளி கிருமிகளுடன் – ஆன்டிஜென் கட்டுப்பாடு, ஒரு துளி கிருமிகள் இல்லாத சீரம்கள் – ஆன்டிபாடி கட்டுப்பாடு, ஒரு துளி நுண்ணுயிரிகள் கொண்ட சீரம் – அனுபவம்.சீரம் அதனுடன் கலந்த நுண்ணுயிர் ஆன்டிஜென்களுடன் தொடர்புடைய ஆன்டிபாடிகளைக் கொண்டிருந்தால், ஆன்டிபாடிகள் மற்றும் ஆன்டிஜென்கள் குறிப்பாக ஒன்றோடொன்று பிணைக்கப்படும் மற்றும் 1-3 நிமிடங்களுக்குப் பிறகு சோதனைத் துளியில் திரட்டப்பட்ட செதில்கள் தோன்றும். ஆன்டிஜென் கட்டுப்பாடு மேகமூட்டமாக இருக்க வேண்டும் மற்றும் ஆன்டிபாடி கட்டுப்பாடு தெளிவாக இருக்க வேண்டும். எதிர்வினையின் முடிவுகள், அக்லூட்டினேட் செதில்களின் தோற்றத்தின் அடிப்படையில் பதிவு செய்யப்படுகின்றன . செதில்களாக விழுந்தால், எதிர்வினை நேர்மறையாக இருக்கும், அதாவது. ஆன்டிஜென் ஒரு ஆன்டிபாடிக்கு ஒத்திருக்கிறது மற்றும் ஆன்டிபாடியை தீர்மானிக்க ஆன்டிஜென் பயன்படுத்தப்படலாம் அல்லது நேர்மாறாகவும். மேகமூட்டம் இருந்தால், எதிர்வினை எதிர்மறையாக இருக்கும்.

2. விரிவான திரட்டல் எதிர்வினை -சோதனை குழாய்களில் மேற்கொள்ளப்படுகிறது. முதலில், நோய்வாய்ப்பட்ட நபரின் இரத்த சீரம் 1:50 முதல் 1:1600 வரை 2 மடங்கு நீர்த்தலைத் தயாரிக்கவும். 1 மில்லி ஐசோடோனிக் சோடியம் குளோரைடு கரைசல் 6 சோதனைக் குழாய்களில் ஊற்றப்படுகிறது. 1:50 நீர்த்த நோயாளியின் இரத்த சீரம் 1 மில்லி முதல் சோதனைக் குழாயில் சேர்க்கப்பட்டு, கலக்கப்பட்டு 1:100 நீர்த்தம் பெறப்படுகிறது, பின்னர் 1 மில்லி 1:100 நீர்த்த இரண்டாவது சோதனைக் குழாய்க்கு மாற்றப்படுகிறது. மற்றும் 1:200 நீர்த்தல் பெறப்படுகிறது, முதலியன. ஆன்டிஜென் மற்றும் சீரம் கட்டுப்பாட்டுக்காக இரண்டு குழாய்கள் வைக்கப்பட்டுள்ளன. சீரம் கட்டுப்பாட்டில் சீரம் மட்டும் 1:50 நீர்த்துப்போகவும், ஆன்டிஜென் கட்டுப்பாட்டில் - ஆன்டிஜென் மட்டும் சேர்க்கவும். மற்ற அனைத்து சோதனைக் குழாய்களிலும் 0.1 மில்லி ஆன்டிஜென் - கண்டறிதல் (O- அல்லது H-) ஐச் சேர்த்து, அனைத்து சோதனைக் குழாய்களையும் 37 ° C வெப்பநிலையில் 18-20 மணிநேரங்களுக்கு ஒரு தெர்மோஸ்டாட்டில் வைக்கவும். எதிர்வினையின் முடிவுகள் இயல்பு, படிவு அளவு (அக்லூட்டினேட்) மற்றும் கொந்தளிப்பின் அளவு ஆகியவற்றின் படி பதிவு செய்யப்படுகின்றன. கணக்கியல் கட்டுப்பாடுகளில் பின்வரும் முடிவுகளுடன் மட்டுமே மேற்கொள்ளப்படுகிறது: சீரம் கட்டுப்பாடு - வெளிப்படையான, ஆன்டிஜென் கட்டுப்பாடு - மேகமூட்டம். ஓ-ஆன்டிபாடிகள் நுண்ணிய படிவுகளை கொடுக்கின்றன. எச்-ஆன்டிபாடிகள் - கரடுமுரடான தானியங்கள். கடைசி சோதனைக் குழாயின் அடிப்படையில், திரட்டல் எதிர்வினை இன்னும் தெரியும், அது நிறுவப்பட்டது கண்டறியும் தலைப்பு.

நோய்களின் serodiagnosis போது, ​​ஒரு குறிப்பிட்ட நோய்க்கிருமிக்கு குறிப்பிட்ட ஆன்டிபாடிகளை கண்டறிவது மட்டும் முக்கியம், ஆனால் அவற்றின் அளவை அடையாளம் காணவும், அதாவது. இந்த நோய்க்கிருமியால் ஏற்படும் நோய் இருப்பதைப் பற்றி பேசக்கூடிய ஒரு ஆன்டிபாடி டைட்டரை நிறுவவும். இந்த டைட்டர் நோயறிதல் டைட்டர் என்று அழைக்கப்படுகிறது. உதாரணமாக, டைபாய்டு காய்ச்சலைக் கண்டறிய, நீங்கள் 1:400 என்ற ஆன்டிபாடி டைட்டரை அடையாளம் காண வேண்டும், ஆனால் குறைவாக இல்லை. இணைக்கப்பட்ட செராவில் ஆன்டிபாடிகள் அதிகரிப்பதைக் கண்டறிவதன் மூலம் இன்னும் துல்லியமான முடிவுகள் பெறப்படுகின்றன, நோயாளியின் சீரம் நோயின் தொடக்கத்திலும் 3-5 அல்லது அதற்கு மேற்பட்ட நாட்களுக்குப் பிறகும் சேகரிக்கப்படுகிறது. ஆன்டிபாடி டைட்டர் குறைந்தது 4 மடங்கு அதிகரித்தால், எனவே, தற்போதைய நோயைப் பற்றி பேசலாம்.