Reaksyon ng aglutinasyon upang matukoy ang mga anti-Rhesus antibodies ( hindi direktang reaksyon Coombs)mag-apply sa mga pasyente na may intravascular hemolysis. Sa ilan sa mga pasyenteng ito, ang mga anti-Rhesus antibodies ay nakita, na hindi kumpleto at monovalent. Partikular na nakikipag-ugnayan ang mga ito sa Rh-positive erythrocytes, ngunit hindi nagiging sanhi ng kanilang aglutinasyon. Ang pagkakaroon ng naturang hindi kumpletong antibodies ay tinutukoy ng hindi direktang pagsubok ng Coombs. Upang gawin ito, ang antiglobulin serum (antibodies laban sa mga immunoglobulin ng tao) ay idinagdag sa sistema ng mga anti-Rh antibodies + Rh-positive erythrocytes, na nagiging sanhi ng agglutination ng mga erythrocytes. Gamit ang reaksyon ng Coombs, ang mga pathological na kondisyon na nauugnay sa intravascular lysis ng mga erythrocytes ng immune na pinagmulan ay nasuri, halimbawa, hemolytic disease ng bagong panganak: ang mga erythrocytes ng isang Rh-positive na fetus ay pinagsama sa hindi kumpletong antibodies sa Rh factor na nagpapalipat-lipat sa dugo, na mayroong dumaan sa inunan mula sa isang Rh-negative na ina.
Mekanismo. Ang kahirapan sa pagtukoy ng hindi kumpleto (monovalent) na mga antibodies ay dahil sa ang katunayan na ang mga antibodies na ito, kapag nagbubuklod sa mga epitope ng isang tiyak na antigen, ay hindi bumubuo ng isang istraktura ng sala-sala at ang reaksyon sa pagitan ng mga antigen at antibodies ay hindi napansin ng alinman sa pamamagitan ng aglutinasyon, pag-ulan, o iba pang mga pagsubok. Upang matukoy ang nabuo na mga antigen-antibody complex, kinakailangan na gumamit ng mga karagdagang sistema ng pagsubok. Upang makita ang mga hindi kumpletong antibodies, halimbawa sa Rh antigen ng mga erythrocytes sa serum ng dugo ng isang buntis, ang reaksyon ay isinasagawa sa dalawang yugto: 1) ang mga erythrocyte na naglalaman ng Rh antigen ay idinagdag sa dalawang beses na dilution ng test serum at pinapanatili. sa 37 ° C para sa isang oras; 2) rabbit anti-human anti-globulin serum (sa isang pre-titrated working dilution) ay idinagdag sa erythrocytes na lubusan na hugasan pagkatapos ng unang yugto. Pagkatapos ng pagpapapisa ng itlog sa loob ng 30 minuto sa 37 °C, ang mga resulta ay tinasa sa pamamagitan ng pagkakaroon ng hemagglutination (positibong reaksyon). Kinakailangang kontrolin ang mga sangkap ng reaksyon: 1) antiglobulin serum + pulang selula ng dugo na kilala na sensitized sa mga tiyak na antibodies; 2) mga erythrocytes na ginagamot ng normal na serum + antiglobulin serum; 3) Rh-negative erythrocytes na ginagamot gamit ang test serum + antiglobulin serum.
50. Passive hemagglutination reaction. Mekanismo. Mga bahagi. Aplikasyon.
Hindi direktang (passive) hemagglutination reaksyon(RNGA, RPGA) ay batay sa paggamit ng mga erythrocytes (o latex) na may mga antigen o antibodies na na-adsorbed sa kanilang ibabaw, ang pakikipag-ugnayan nito sa mga kaukulang antibodies o antigens ng serum ng dugo ng mga pasyente ay nagiging sanhi ng mga erythrocytes na magkadikit at mahulog sa ilalim ng test tube o cell sa anyo ng isang scalloped sediment.
Mga bahagi. Upang maisagawa ang RNGA, maaaring gamitin ang mga erythrocyte mula sa tupa, kabayo, kuneho, manok, daga, tao, at iba pa, na iniimbak para magamit sa hinaharap sa pamamagitan ng pagtrato sa kanila ng formaldehyde o glutaraldehyde. Ang kapasidad ng adsorption ng mga erythrocytes ay tumataas kapag ginagamot sila ng mga solusyon ng tannin o chromium chloride.
Ang mga antigen sa RNGA ay maaaring magsilbi bilang polysaccharide antigens ng microorganisms, extracts ng bacterial vaccine, antigens ng mga virus at rickettsiae, pati na rin ang iba pang substance.
Ang mga pulang selula ng dugo na na-sensitize ng hypertension ay tinatawag na erythrocyte diagnosticums. Para sa paghahanda ng erythrocyte diagnosticum, ang mga erythrocytes ng tupa, na may mataas na aktibidad ng adsorbing, ay kadalasang ginagamit.
Aplikasyon. Ginagamit ang RNGA upang masuri ang mga nakakahawang sakit, matukoy ang gonadotropic hormone sa ihi kapag nagtatag ng pagbubuntis, upang matukoy ang hypersensitivity sa mga gamot, hormone, at sa ilang iba pang mga kaso.
Mekanismo. Ang indirect hemagglutination test (IRHA) ay may mas mataas na sensitivity at specificity kaysa sa agglutination test. Ito ay ginagamit upang makilala ang pathogen sa pamamagitan ng antigenic na istraktura nito o upang ipahiwatig at kilalanin ang mga produktong bacterial - mga lason sa pathological na materyal na pinag-aaralan. Alinsunod dito, ginagamit ang pamantayan (komersyal) na mga diagnostic ng erythrocyte antibody, na nakuha sa pamamagitan ng adsorption ng mga tiyak na antibodies sa ibabaw ng tannized (tannin-treated) erythrocytes. Ang mga serial dilution ng materyal sa pagsubok ay inihanda sa mga balon ng mga plastic plate. Pagkatapos ay isang pantay na dami ng 3% na suspensyon ng antibody-loaded na mga pulang selula ng dugo ay idinagdag sa bawat balon. Kung kinakailangan, ang reaksyon ay isinasagawa nang magkatulad sa ilang mga hilera ng mga balon na may mga erythrocytes na puno ng mga antibodies ng iba't ibang mga pagtutukoy ng grupo.
Pagkatapos ng 2 oras ng pagpapapisa ng itlog sa 37 °C, ang mga resulta ay isinasaalang-alang, sinusuri hitsura sediment ng erythrocytes (nang walang nanginginig): na may negatibong reaksyon, lumilitaw ang isang sediment sa anyo ng isang compact disk o singsing sa ilalim ng balon, na may positibong reaksyon - isang katangian ng lacy sediment ng mga erythrocytes, isang manipis na pelikula na may hindi pantay na mga gilid .
Ang Coombs test ay klinikal na pagsusuri pagsusuri ng dugo, na ginagawa upang makita kung ang dugo ay naglalaman ng ilang partikular na antibodies na maaaring hindi ligtas. Ang mga antibodies na ito ay dumidikit sa mga pulang selula ng dugo at maaaring sumalakay immune system, pati na rin nagdudulot ng pinsala sa iba pang mga paraan. Sa terminolohiyang medikal, ang pag-aaral na ito ay tinatawag ding antiglobulin test (AGT).
Mga uri ng mga sample ng Coombs
Mayroong dalawang uri ng mga pagsubok sa Coombs - direkta at hindi direkta.
Direktang pagsubok ng Coombs, na kilala rin bilang direct (DAT), ay nakakakita ng mga auto-antibodies na nakakabit sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo. Ang mga antibodies na ito ay minsan nagagawa sa katawan dahil sa ilang mga sakit o kapag umiinom ng ilang mga gamot, tulad ng procainamide, methyldopa, o quinidine.
Ang mga antibodies na ito ay mapanganib dahil minsan ay nagdudulot sila ng anemia sa pamamagitan ng pagsira sa mga pulang selula ng dugo.
Minsan inuutusan ang pagsusulit na ito upang masuri ang sanhi ng jaundice o anemia.
Karaniwan, negatibo ang reaksyon ng Coombs.
Positibo para sa:
- sakit na hemolytic mga bagong silang;
- autoimmune hemolysis;
- mga reaksyon ng hemolytic transfusion;
- immune hemolytic anemia na dulot ng droga.
Hindi direktang sample Coombs, na kilala rin bilang , ay ginagamit upang makita ang mga antibodies sa mga pulang selula ng dugo na matatagpuan sa serum ng dugo (ang serum ay ang malinaw na dilaw na likido ng dugo na nananatili pagkatapos na maalis ang mga pulang selula ng dugo at coagulant).
Ang hindi direktang pagsusuri ng Coombs ay ginagamit sa panahon ng pagsasalin ng dugo upang matukoy kung ang dugo ng donor ay tumutugma sa dugo ng tatanggap. Ito ay tinatawag na compatibility test at nakakatulong na maiwasan ang anumang masamang reaksyon sa dugo ng donor. Ang pagsusuring ito inirerekomenda din para sa mga buntis na kababaihan. Ang ilang mga kababaihan ay may IgG antibodies, na maaaring tumawid sa inunan sa dugo ng pangsanggol at makapinsala sa bagong panganak, na nagdudulot ng hemolytic disease na kilala bilang hemolytic anemia.
Pamamaraan
Ang dugo ay kinukuha gamit ang isang syringe mula sa isang ugat, kadalasang may likurang bahagi palad o sa baluktot ng siko. Bago ito, ang lugar ng pagbutas ay lubusang nadidisimpekta, at pagkatapos kumuha ng pagsusuri sa dugo, inilapat ang malinis na gasa o cotton wool.
Ang resultang dugo ay dinadalisay sa laboratoryo at ang mga pulang selula ng dugo ay pinaghihiwalay. Pagkatapos ay susuriin ang sample nang sunud-sunod gamit ang iba't ibang serum at Coombs reagents, na pinaghahambing. Kung walang agglutination (pagkumpol ng mga pulang selula ng dugo), nangangahulugan ito ng positibong resulta.
Gayunpaman, kung negatibo ang pagsusuri, nangangahulugan ito na mayroong mga antibodies sa dugo na kumikilos laban sa mga pulang selula ng dugo. Ito ay maaaring magpahiwatig iba't ibang sakit, tulad ng anemia (parehong natural at sanhi ng pag-inom ng mga gamot), syphilis, o impeksyon sa mycoplasma. Matapos matanggap ang mga resulta, ang dumadating na manggagamot ay magrereseta ng naaangkop na paggamot.
Video
Prinsipyo ng antiglobulin. Ang mga anti-erythrocyte antibodies ng hindi kumpletong uri at mga complement molecule (C) na matatagpuan sa ibabaw ng mga erythrocytes ay nakita - isang direktang pagsubok - sa pamamagitan ng kanilang agglutination sa pakikipag-ugnay sa serum ng hayop na naglalaman ng mga antibodies sa antiglobulin ng tao (antiglobulin serum). Libre sa serum hindi kumpletong antibodies ay nakita - isang hindi direktang pagsubok - sa pamamagitan ng paglakip sa kanila sa isang halo ng mga normal na erythrocytes ng pangkat 0, ang lahat ng mga antigen ay nabibilang sa kilalang Rh system, at pagkatapos ay pinagsama-sama sa ilalim ng impluwensya ng antiglobulin serum.
Mga materyales, reagents para sa Coombs antiglobulin test: test tubes 10/100 ml; nagtapos na mga pipette 1, 2 ml; Pasteur pipettes; mga tripod; unground glass slide; 8.5‰ NaCl solution; pulang selula ng dugo. Ang mga pulang selula ng dugo ng pasyente, pati na rin ang mga kabilang sa pangkat 0, ay makukuha mula sa bagong iginuhit na dugo gamit ang isang anti-clotting agent (EDTA solution).
Ang pangkat 0 na mga pulang selula ng dugo ay dapat piliin sa paraang nagmula sila sa mga normal na indibidwal at naglalaman ng lahat Mga antigen ng Rh system. Maaari silang maiimbak ng hanggang 7 araw sa autologous plasma sa + 4°C. Sa kawalan ng pangkat 0 na pulang selula ng dugo, isang kilalang antigenic mosaic, isang halo ng pangkat 0 na pulang selula ng dugo, Rh-positibo at Rh-negatibong pulang selula ng dugo ay maaaring gamitin.
Serum ang pasyente ay dapat na bagong napili.
Antiglobulin serum ginawa ng Institute. Dr. I. Cantacuzino, ay magagamit sa lyophilized form sa 1 ml ampoules. Pagkatapos matunaw, itabi ang serum sa -20°C.
Coombs antiglobulin test technique:
A) Direktang pagsubok ng Coombs: Banlawan ang mga pulang selula ng dugo ng pasyente ng 3 beses gamit ang 8.5‰ NaCl solution.
Maglagay ng isang malaking patak ng dilutions ng antiglobulin serum sa ilang mga glass slide, at sa tabi nito, isang maliit na patak ng erythrocyte sediment ng pasyente; ihalo ang mga patak sa sulok ng baso. Iwanan ang handa na materyal sa mesa sa loob ng 5 minuto, pagkatapos ay suriin para sa pagkakaroon ng mga agglutinates. Kailan positibong resulta matukoy ang maximum na agglutinating titer.
b) Hindi direktang pagsubok ng Coombs: erythrocytes ng grupo 0, Rh-positive at Rh-negative, banlawan ng 3 beses na may 8.5‰ NaCl solution at ilantad sa serum ng pasyente sa rate na 2 patak ng erythrocytes bawat 8-10 patak ng serum, pagkatapos ay i-incubate sa loob ng 60 minuto sa temperaturang 37° MAY. Pagkatapos nito, hugasan muli ang mga pulang selula ng dugo ng tatlong beses at gamutin ang mga ito ng antiglobulin serum, ayon sa mga tagubilin para sa direktang pagsusuri ng Coombs.
Pagdating tungkol sa malamig na aktibong antibodies gawing sensitize ang pangkat 0 na mga pulang selula ng dugo sa loob ng 60 minuto. sa temperatura na + 4°C.
Tandaan 1) Huwag magsagawa ng direktang pagsusuri ng Coombs sa mga pulang selula ng dugo na nakaimbak sa loob ng isa o ilang araw sa + 4°C o temperatura ng silid, dahil maaaring false positive ang mga resulta dahil sa pag-aayos ng mga hindi kumpletong cold-active antibodies na nasa normal na serum. 2) Sa mga kaso ng matinding hyperproteinemia, hugasan ang mga pulang selula ng dugo 4-5 beses at suriin ang kawalan ng mga protina ng serum sa huling washing liquid gamit ang sulfosalicylic acid.
Ang isang posibleng nalalabi ng 2 μg IgG/ml sa erythrocyte sediment ay maaaring neutralisahin ang serum ng antiglobulin. Ang pagsusuri sa Coombs ay maaari ding isagawa gamit ang monospecific anti-IgG, -IgM, -IgA -C3 at -C4 sera upang linawin ang uri ng mga selula na matatagpuan sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo, halimbawa, sa mga pasyenteng dumaranas ng autoimmune hemolytic anemya.
Maglagay ng 1 malaking patak ng serum O(I), A(II), B(III) sa isang plato o glass slide gamit ang mga pipette (iba!). Pagkatapos tandaan ang oras, gumamit ng isang malinis na basong baras o isang malinis na sulok ng isang glass slide upang pagsamahin ang mga patak ng serum sa mga patak ng dugo. Ang pagpapasiya ay tumatagal ng 5 minuto, nanginginig ang plato, pagkatapos ay magdagdag ng 1 patak ng solusyon sa asin sa bawat halo ng mga patak at suriin ang mga resulta. Mas maganda kung ang serum ay dumating sa 2 magkaibang serye. Ang mga resulta ng pangkat ng dugo ay dapat tumugma sa parehong serum lot.
Pagsusuri ng mga resulta ng isohemagglutination:
kung lahat ng 3 sera ay nagbigay ng negatibong reaksyon, ibig sabihin, ang timpla ay pantay na kulay pink - ito ay O(I) na uri ng dugo;
Kung negatibong reaksyon tanging serum ng pangkat A(II) ang nagbigay, at ang sera O(I) at B(III) ay nagbigay ng positibong reaksyon, iyon ay, lumitaw ang mga butil - ito ay A(II) na pangkat ng dugo;
Ang serum ng pangkat B(II) ay nagbigay ng negatibong reaksyon, at ang sera ng pangkat O(I) at A(II) ay nagbigay ng positibong reaksyon - ito ay B(III) na pangkat ng dugo.
isohemagglutination. Kung positibo ang reaksyon, lumilitaw ang maliliit na pulang butil ng malagkit na pulang selula ng dugo sa pinaghalong. Ang mga butil ay nagsasama sa mas malalaking butil, at ang huli sa mga natuklap. Ang suwero ay halos kupas;
kung ang reaksyon ay negatibo, ang timpla ay nananatiling pantay na kulay sa loob ng 5 minuto kulay rosas at walang mga butil na natagpuan;
Kapag nagtatrabaho sa 3 sera ng mga pangkat O(I), A(II), B(III), 4 na kumbinasyon ng mga reaksyon ang posible:
lahat ng 3 serum ay ibinigay mga positibong reaksyon- nasubok na dugo ng grupong AB(IV). Sa kasong ito, ang isang pag-aaral ay isinasagawa gamit ang AB(IV) group serum.
Tandaan! Ang mga patak ng dugo na sinusuri ay dapat na 5-10 beses na mas maliit kaysa sa mga patak ng serum.
Mga error sa isohemagglutination.
Pagkabigong magsagawa ng agglutination kung saan ito dapat at pagkakaroon ng agglutination kung saan ito ay hindi dapat. Maaaring dahil ito sa mahinang titer ng serum at mahinang pagsasama-sama ng red blood cell.
Ang pagkakaroon ng agglutination kung saan hindi dapat magkaroon- Ito ay pseudoagglutination, kapag ang mga tambak ng pulang selula ng dugo ay bumubuo ng "mga haligi ng barya". Ang pag-alog ng plato o pagdaragdag ng asin ay sumisira sa kanila.
Panagglutination, kapag pinagdikit-dikit ng serum ang lahat ng pulang selula ng dugo, kabilang ang mga may sariling uri ng dugo. Sa ika-5 minuto, nawawala ang mga palatandaan ng aglutinasyon.
Mayroon ding tinatawag na cold panagglutination, kapag nagdikit ang mga pulang selula ng dugo dahil sa mababang temperatura ng hangin (sa ibaba 15 ° C) sa silid.
Sa lahat ng mga kasong ito, maaaring ang isang paulit-ulit na reaksyon ay isinasagawa, o gumagamit ng karaniwang mga pulang selula ng dugo.
Pagpapasiya ng Rh dugo
Upang matukoy ang katayuan ng Rh, ibig sabihin, upang makita ang pagkakaroon o kawalan ng mga antigen ng Rh system sa dugo ng mga tao, ginagamit ang karaniwang anti-Rh sera (reagents), na nag-iiba sa pagtitiyak, ibig sabihin, naglalaman ng mga antibodies sa iba't ibang antigen ng sistemang ito. Upang matukoy ang Rh 0 (D) antigen, ang anti-Rhesus serum ay kadalasang ginagamit sa pagdaragdag ng isang 10% gelatin solution, o isang karaniwang anti-Rhesus reagent na inihanda nang maaga na may 33% polyglucin solution ay ginagamit. Upang makakuha ng mas tumpak na mga resulta ng pananaliksik, pati na rin upang matukoy ang mga antigen ng iba pang mga serological system, ang Coombs test ay ginagamit (ito rin ay napakasensitibo sa pagtukoy ng compatibility ng transfused blood). Para sa pananaliksik, ang katutubong dugo o dugo na inihanda na may ilang pang-imbak ay ginagamit. Sa kasong ito, ang dugo ay dapat hugasan mula sa pang-imbak na may sampung beses na dami ng isotonic sodium chloride solution. Kapag tinutukoy ang katayuan ng Rh- Rh 0 (D) dalawang sample ng serum o anti-Rhesus reagent ng dalawang magkaibang serye ang dapat gamitin at sa parehong oras ay karaniwang pulang selula ng dugo na nakuha mula sa dugo mula sa Rh-positive (Rh +) at Rh-negative (Rh -) ang mga indibidwal ay dapat gamitin para sa kontrol. Kapag tinutukoy ang iba pang isoantigens, kontrolin ang mga pulang selula ng dugo na naglalaman o kulang sa antigen kung saan ang mga antibodies sa karaniwang serum ay dapat gamitin nang naaayon.
Ang mga partial heat agglutinin ay ang pinakakaraniwang uri ng antibodies na maaaring maging sanhi ng pagbuo ng autoimmune hemolytic anemia. Ang mga antibodies na ito ay nabibilang sa IgG, bihira sa IgM, IgA.
COOMBS TEST
Pagsubok sa Coombs: panimula. Ang Coombs test ay isang laboratory diagnostic method batay sa hemagglutination reaction.
Ang pangunahing paraan para sa pag-diagnose ng autoimmune hemolytic anemia ay ang Coombs test. Ito ay batay sa kakayahan ng mga antibodies na tiyak sa mga immunoglobulin (lalo na sa IgG) o mga bahagi ng pandagdag (lalo na sa S3) upang pagsama-samahin ang mga erythrocyte na pinahiran ng IgG o S3.
Ang pagbubuklod ng IgG at C3b sa mga erythrocytes ay sinusunod sa autoimmune hemolytic anemia at drug-induced immune hemolytic anemia. Direktang pagsubok ng Coombs. Ang direktang pagsusuri ng Coombs ay ginagamit upang makita ang mga antibodies o mga bahaging pandagdag na naayos sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo. Ito ay isinasagawa bilang mga sumusunod:
Upang makakuha ng mga antibodies sa mga immunoglobulin ng tao (antiglobulin serum) o pandagdag (anticomplementary serum), ang hayop ay nabakunahan ng human serum, immunoglobulin o pandagdag ng tao. Ang serum na nakuha mula sa hayop ay dinadalisay mula sa mga antibodies sa iba pang mga protina.
Ang mga pulang selula ng dugo ng pasyente ay hinuhugasan ng asin upang ganap na maalis ang serum, na neutralisahin ang mga antibodies sa mga immunoglobulin at umakma at maaaring magdulot ng maling negatibong resulta.
Kung ang mga antibodies o mga bahagi ng pandagdag ay naayos sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo, ang pagdaragdag ng antiglobulin o anti-complement na serum ay nagdudulot ng pagsasama-sama ng mga pulang selula ng dugo.
Ang direktang pagsusuri ng Coombs ay ginagamit sa mga sumusunod na kaso:
Autoimmune hemolysis.
Hemolytic disease ng mga bagong silang.
Ang immune hemolytic anemia na dulot ng droga.
Mga reaksyon ng hemolytic transfusion. Hindi direktang pagsubok ng Coombs. Ang hindi direktang pagsusuri ng Coombs ay nakakakita ng mga antibodies sa mga pulang selula ng dugo sa serum. Upang gawin ito, ang suwero ng pasyente ay inilublob sa pangkat 0 na donor na mga pulang selula ng dugo, at pagkatapos ay isinasagawa ang isang direktang pagsusuri sa Coombs.
Ang indirect Coombs test ay ginagamit sa mga sumusunod na kaso:
Pagpapasiya ng indibidwal na pagkakatugma ng dugo ng donor at tatanggap.
Pagtuklas ng mga alloantibodies, kabilang ang mga antibodies na nagdudulot ng mga reaksyon ng hemolytic transfusion.
Pagpapasiya ng surface erythrocyte antigens sa medikal na genetika at forensic na gamot.
Pagkumpirma ng identical twins sa panahon ng bone marrow transplantation.
Upang magsagawa ng biological test, ang dugo ay magsisimulang maisalin sa lalong madaling panahon (mas mabuti sa isang stream). Pagkatapos ng pagsasalin ng 25 ML ng dugo, ang tubo ng system ay naka-clamp ng isang clamp. Pagkatapos ay mayroong pause sa loob ng 3 minuto, kung saan sinusubaybayan ang kundisyon ng tatanggap. Upang magsagawa ng biological test, 25 ML ng dugo ay iniksyon ng tatlong beses. Sa pagtatapos ng pagsubok (pagkatapos ng pagsasalin ng unang 75 ml ng dugo sa mga fractional na dosis ng 25 ml sa pagitan ng 3 minuto), ang sistema ay nababagay sa kinakailangang rate ng pagsasalin ng dugo. Kapag nagsalin ng higit sa isang bote ng dugo sa isang pasyente, kinakailangang alisin ang karayom mula sa ugat. Sa kasong ito, ang karayom ay tinanggal mula sa test tube ng vial kung saan ang dugo ay naubos at ipinasok sa susunod na vial. Ang tubo ng system (goma o plastik) ay naka-clamp sa sandaling ito gamit ang isang clamp. Kung sa panahon ng pagsasalin ng dugo ay kinakailangan na magbigay ng anumang iba pang gamot sa intravenously sa tatanggap, ito ay ginagawa sa pamamagitan ng pagtusok sa rubber tube ng system. Ang mga punctures ng plastic tube ay hindi katanggap-tanggap, dahil hindi sila nahuhulog. Pagkatapos ng bawat pagsasalin ng dugo, ang pasyente ay dapat na subaybayan upang makilala at maalis kaagad posibleng komplikasyon, kasama ang mga reaksiyong alerdyi. 2 oras pagkatapos ng pagtatapos ng pagsasalin ng dugo, ang temperatura ng katawan ay dapat masukat. Kung ito ay tumaas, ang pagsukat ay dapat na ulitin bawat oras para sa susunod na 4 na oras. Ang parehong mahalaga ay ang pagsubaybay sa pag-ihi at komposisyon ng ihi, na ginagawang posible upang maitaguyod ang pagkakaroon ng isang nakakalason na reaksyon pagkatapos ng pagsasalin. Ang simula ng oliguria at anuria pagkatapos ng pagsasalin ng dugo, ang pagkakaroon ng mga selula ng dugo at protina sa ihi ay isang direktang indikasyon ng pag-unlad ng post-transfusion hemolysis.
Direktang pagsubok ng Coombs. Ang pagsusulit na ito ay ginagamit upang patunayan ang pagkakaroon ng pagharang ng mga antibodies na naayos sa mga pulang selula ng dugo ng bata. Ang isang positibong direktang pagsusuri ay nagpapahiwatig ng sensitization at nagsisilbing isang nakakumbinsi na senyales ng hemolytic disease ng bagong panganak bago pa man lumitaw ang iba. mga klinikal na palatandaan. Bilang eksepsiyon at sa mga napakalubhang kaso lamang, maaaring negatibo ang direktang pagsusuri sa Coombs dahil sa nagaganap na, halos kumpletong hemolysis ng mga sensitized na pulang selula ng dugo.
Ang isang direktang pagsusuri sa Coombs ay isinasagawa tulad ng sumusunod: 5 patak ng dugo na kinuha mula sa takong ng bata ay inilagay sa isang test tube at 5 ml ng asin ay idinagdag. Haluing mabuti at i-centrifuge sa loob ng 10 minuto. Ang malinaw na likido sa itaas ng red blood cell sediment ay pinaghihiwalay. Pagkatapos ay magdagdag muli ng 5 ML ng asin, ihalo at centrifuge. Pagkatapos ng paghahalo sa asin ng tatlong beses, ang mga pulang selula ng dugo ay mahusay na hugasan. Matapos ang huling paghihiwalay ng supernatant, ang erythrocyte sediment sa halagang 0.1 ml ay halo-halong may 0.9 ml ng physiological solution. Maglagay ng 2-3 patak ng halo na ito sa isang glass slide at magdagdag ng isang patak ng Coombs serum. Ang pagkakaroon ng agglutination ay nagpapahiwatig na ang reaksyon ay positibo (positive direct Coombs test). Ang pag-aaral ay dapat isagawa sa temperatura ng silid na higit sa 16° upang maiwasan ang epekto ng malamig na agglutinin.
Hindi direktang pagsubok ng Coombs nagsisilbing katibayan ng pagkakaroon ng mga libreng antibodies sa maternal serum at ginagawa kasama ng maternal serum.
Ang hemolytic disease sa isang bagong panganak na may Rh incompatibility ay kadalasang nagpapakita ng sarili pagkatapos ng ikalawang pagbubuntis. Ang unang anak ay ipinanganak na malusog, ang pangalawa ay may mga palatandaan ng banayad na anemia, at pagkatapos lamang ng ikatlong pagbubuntis ay ipinanganak ang mga bata malinaw na mga palatandaan sakit na hemolytic. Tanging ang mga pre-sensitized na kababaihan lamang ang maaaring manganak ng isang bata na may mga sintomas ng hemolytic disease sa kanilang unang pagbubuntis. Sa ilang mga kaso, ang pagbabakuna ay nagdudulot ng aborsyon at panganganak patay na mga bata. Para sa simula at kalubhaan ng sakit, ang kondisyon ng inunan at ang tagal ng pagkakalantad ng maternal agglutinins sa fetus ay mahalaga. Kapag lumitaw ang mga agglutinin 10-14 na linggo bago ang kapanganakan, ang bata ay kadalasang nakakaranas ng mga subclinical form. Ang maagang paglitaw ng mga agglutinin, 15-26 na linggo bago ang kapanganakan, ay nagiging sanhi malubhang anyo mga sakit. Sa lahat ng anyo ng sakit, ang pangunahing proseso ay hemolysis. Ang kinahinatnan ng reaksyon ng antigen-antibody ay hemolysis, pinsala sa atay at mga capillary ng utak. Depende sa kung aling sugat ang nangingibabaw, mayroon din iba't ibang hugis mga sakit. Ang ilang anaphylactic phenomena ay mapanganib din. Humahantong sila sa pagbuo ng mga sangkap na tulad ng histamine, na nagdudulot ng matinding pinsala sa mga selula ng atay at lalo na sa mga selula ng ganglion ng basal ganglia, sungay ng ammon, medulla oblongata at maging ang cerebral cortex. Kapag nasira ang mga selula ng atay, ang hepatic jaundice ay idinaragdag sa extrahepatic jaundice. Namamatay ang mga bata dahil sa matinding sintomas ng kernicterus. Kung mabubuhay sila, mananatili ang mga sintomas ng mga sugat sistema ng nerbiyos(mga karamdaman ng extrapyramidal system na may mga choreoathetotic na paggalaw, isang kakaibang lakad ng pagsasayaw, sapilitang paggalaw ng ulo, kung minsan ay may kapansanan sa koordinasyon boluntaryong paggalaw na may madalas na pagbagsak, tumaas na tono kalamnan, mental retardation, ibig sabihin, may mga palatandaan ng tinatawag na. encephalopatia posticteria infantum).
