Prinsipyo ng antiglobulin. Ang mga anti-erythrocyte antibodies ng hindi kumpletong uri at mga complement molecule (C) na matatagpuan sa ibabaw ng mga erythrocytes ay nakita - isang direktang pagsubok - sa pamamagitan ng kanilang agglutination sa pakikipag-ugnay sa serum ng hayop na naglalaman ng mga antibodies sa antiglobulin ng tao (antiglobulin serum). Ang mga hindi kumpletong antibodies na libre sa serum ay nakita - isang hindi direktang pagsubok - sa pamamagitan ng paglakip sa kanila sa isang halo ng normal na pangkat 0 na mga pulang selula ng dugo, ang lahat ng mga antigen ay nabibilang sa kilalang Rh system, at pagkatapos ay pinagsama-sama sa ilalim ng impluwensya ng antiglobulin serum.
Mga materyales, reagents para sa Coombs antiglobulin test: test tubes 10/100 ml; nagtapos na mga pipette 1, 2 ml; Pasteur pipettes; tripod; unground glass slide; 8.5‰ NaCl solution; pulang selula ng dugo. Ang mga pulang selula ng dugo ng pasyente, gayundin ang mga kabilang sa pangkat 0, ay makukuha mula sa bagong iginuhit na dugo gamit ang isang anti-clotting agent (EDTA solution).
Ang pangkat 0 na mga pulang selula ng dugo ay dapat piliin sa paraang nagmula sila sa mga normal na indibidwal at naglalaman ng lahat Rh antigens. Maaari silang maiimbak ng hanggang 7 araw sa autologous plasma sa + 4°C. Sa kawalan ng pangkat 0 na pulang selula ng dugo, isang kilalang antigenic mosaic, isang halo ng pangkat 0 na pulang selula ng dugo, Rh-positibo at Rh-negatibong pulang selula ng dugo ay maaaring gamitin.
Serum ang pasyente ay dapat na bagong napili.
Serum ng antiglobulin ginawa ng Institute. Dr. I. Cantacuzino, ay magagamit sa lyophilized form sa 1 ml ampoules. Pagkatapos matunaw, itabi ang serum sa -20°C.
Coombs antiglobulin test technique:
A) Direktang pagsubok ng Coombs: Banlawan ang mga pulang selula ng dugo ng pasyente ng 3 beses gamit ang 8.5‰ NaCl solution.
Maglagay ng isang malaking patak ng dilutions ng antiglobulin serum sa ilang mga glass slide, at sa tabi nito, isang maliit na patak ng erythrocyte sediment ng pasyente; ihalo ang mga patak sa sulok ng baso. Iwanan ang handa na materyal sa mesa sa loob ng 5 minuto, pagkatapos ay suriin para sa pagkakaroon ng mga agglutinates. Kung positibo ang resulta, tukuyin ang maximum agglutinating titer.
b) Hindi direktang pagsubok ng Coombs: erythrocytes ng grupo 0, Rh-positive at Rh-negative, banlawan ng 3 beses na may 8.5‰ NaCl solution at ilantad sa serum ng pasyente sa rate na 2 patak ng erythrocytes bawat 8-10 patak ng serum, pagkatapos ay i-incubate sa loob ng 60 minuto sa temperaturang 37° MAY. Pagkatapos nito, hugasan muli ang mga pulang selula ng dugo ng tatlong beses at gamutin ang mga ito ng antiglobulin serum, ayon sa mga tagubilin para sa direktang pagsusuri ng Coombs.
Pagdating tungkol sa malamig na aktibong antibodies gawing sensitize ang pangkat 0 na mga pulang selula ng dugo sa loob ng 60 minuto. sa temperatura na + 4°C.
Tandaan 1) Huwag magsagawa ng direktang pagsusuri ng Coombs sa mga pulang selula ng dugo na nakaimbak sa loob ng isa o ilang araw sa + 4°C o temperatura ng silid, dahil maaaring false positive ang mga resulta dahil sa pag-aayos ng mga hindi kumpletong cold-active antibodies na nasa normal na serum. 2) Sa mga kaso ng matinding hyperproteinemia, hugasan ang mga pulang selula ng dugo 4-5 beses at suriin ang kawalan ng mga protina ng serum sa huling washing liquid gamit ang sulfosalicylic acid.
Ang isang posibleng nalalabi ng 2 μg IgG/ml sa erythrocyte sediment ay maaaring neutralisahin ang serum ng antiglobulin. Ang pagsusuri sa Coombs ay maaari ding isagawa gamit ang monospecific anti-IgG, -IgM, -IgA -C3 at -C4 sera upang linawin ang uri ng mga selula na matatagpuan sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo, halimbawa, sa mga pasyenteng dumaranas ng autoimmune hemolytic anemya.
O natunaw sa plasma.
kasingkahulugan: antiglobulin test, Coombs test, AGT, indirect/direct antiglobulin test, IAT, NAT, DAT, indirect/direct Coombs test
Ang pagsusulit ng Coombs ay
isang pagsusuri na nakakakita ng pagbabakuna at mga antibodies sa mga pulang selula ng dugo.
Mga uri ng pagsubok sa Coombs
- direktang pagsubok ng Coombs– nakakakita ng mga antibodies na naayos sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo. Isinasagawa ito kung pinaghihinalaang autoimmune hemolytic anemia, hemolysis sa mga autoimmune disease, pagkatapos kumuha ng mga gamot (methyldopa, penicillin, quinine), pagkatapos ng pagsasalin ng dugo at hemolytic disease ng bagong panganak.
Ang mga pulang selula ng dugo ay na-sensitized sa vivo - ang mga antibodies ay mahigpit na nakakabit sa kanila, at ang pagdaragdag ng antiglobulin serum (anti-IgG) ay nagiging sanhi ng mga sensitized na mga selula upang magkadikit, na nakikita ng mata.
- hindi direktang pagsubok ng Coombs– nakakakita ng mga anti-erythrocyte antibodies sa plasma ng dugo, na ginawa bago ang pagsasalin ng dugo at sa panahon ng pagbubuntis.
Ang mga anti-erythrocyte antibodies ay isang uri ng autoantibodies, i.e. antibodies laban sa iyong sariling mga tisyu. Ang isang autoantibody ay nangyayari kapag ang immune system ay abnormal na tumugon sa ilang mga gamot, tulad ng mataas na dosis ng penicillin.
Ang mga pulang selula ng dugo sa kanilang ibabaw ay naglalaman ng iba't ibang mga istrukturang kemikal (glycolipids, saccharides, glycoproteins at mga protina), sa gamot na tinatawag na antigens. Ang isang tao ay nagmamana mula sa kanyang mga magulang ng isang tiyak na mapa ng mga antigen sa bawat pulang selula ng dugo.
Ang mga antigen ay pinagsama sa mga grupo at sa tabi nito ang dugo ay nahahati sa ilang mga grupo - ayon sa AB0 system, Rhesus, Kell, Lewis, Kidd, Duffy. Ang pinakatanyag at makabuluhan sa gawain ng isang doktor ay ang AB0 at ang Rh factor (Rh).
Sistema ng AB0
Rhesus na kaakibat ang isang tao ay natutukoy sa pamamagitan ng pagkakaroon ng mga antigen na ito. Ang isang partikular na mahalagang antigen ng mga erythrocytes ay ang antigen D. Kung ito ay naroroon, pagkatapos ay nagsasalita sila ng Rh-positibong dugo RhD, at kung ito ay wala, pagkatapos ay nagsasalita sila ng Rh-negatibong Rhd.
Kung ang kaukulang antibody ay nakakabit sa mga erythrocyte antigens, ang erythrocyte ay nawasak - hemolyzes.
Mga pahiwatig para sa paggamit direktang pagsusuri ng antiglobulin
- pangunahing autoimmune hemolytic anemia
- hemolytic anemia sa autoimmune, tumor, mga nakakahawang sakit
- autoimmune hemolytic anemia na dulot ng droga
- post-transfusion hemolytic anemia (mga araw - buwan)
- hemolytic disease ng bagong panganak (incompatibility ng isa sa mga pangkat ng dugo)
Mga pahiwatig para sa paggamit hindi direktang pagsusuri ng antiglobulin
- bago ang pagsasalin ng dugo
- sa panahon ng pagbubuntis ng isang Rh-negative na babae
Autoimmune hemolytic anemia
Autoimmune hemolytic anemia (pangunahing)– isang klasikong sakit na autoimmune na may hindi kilalang dahilan. Ipinapalagay na mayroong pagkagambala sa proseso ng pakikipag-ugnayan sa antas ng immune system, na humahantong sa pang-unawa ng sariling mga pulang selula ng dugo bilang dayuhan. Ang mga cell ay gumagawa ng mga antibodies ng klase ng IgG (reaksyon sa t 37°C) at/o IgM (sa t 40°C), na nakakabit sa ibabaw ng erythrocyte, na nagpapalitaw ng bilang ng mga enzyme (ang sistema ng pandagdag) at "pagbubutas" ang pader ng erythrocyte, na humahantong sa pagkasira nito - hemolysis.
Mga sintomas ng hemolytic anemia
- pagkapagod, pangkalahatang kahinaan, pagkamayamutin
- dyspnea
- pananakit ng tiyan, pagduduwal
- madilim na kulay ng ihi
- sakit sa likod
- icteric discoloration ng balat at mauhog lamad
- pinalaki ang atay, pali
- pagbaba sa bilang ng mga pulang selula ng dugo at hemoglobin sa isang pangkalahatang pagsusuri sa dugo
Positibong resulta tuwid Mga pagsusulit sa Coombs Kinukumpirma ng 100% ang diagnosis ng autoimmune hemolytic anemia, na nagpapatunay sa pinagmulan ng autoimmune nito. Kasabay nito, ang isang negatibong resulta ay hindi ginagawang posible na alisin ang diagnosis.
Ang pangalawang autoimmune hemolytic anemia at isang positibong pagsusuri sa Coombs ay maaaring mangyari sa mga sumusunod na sakit:
- systemic lupus erythematosus
- Evans syndrome
- Ang macroglobulinemia ng Waldenström
- paroxysmal cold hemoglobinuria
- talamak na lymphocytic leukemia
- lymphoma
- Nakakahawang mononucleosis
- Impeksyon sa Mycoplasma pneumoniae
- syphilis
Ang positibong antiglobulin test para sa mga sakit na ito ay hindi nagsisilbing diagnostic criterion, ngunit isa sa mga sintomas ng sakit.
Hemolytic disease ng bagong panganak
Dahilan hemolytic disease ng mga bagong silang - incompatibility ng mga grupo ng dugo sa ina at fetus, sa karamihan ng mga kaso ayon sa Rh system, sa mga solong kaso - ayon sa AB0 system, casuistically - ayon sa iba pang mga antigens.
Ang Rh conflict ay nabubuo kung ang fetus ng isang Rh-negative na babae ay nagmamana ng Rh-positive na dugo mula sa ama.
Ang sakit ay bubuo sa isang bagong panganak lamang kung ang ina ay nakabuo na ng mga antibodies sa kaukulang antigens, na nangyayari pagkatapos ng mga nakaraang pagbubuntis, panganganak, pagpapalaglag, at hindi tugmang pagsasalin ng dugo. Karamihan karaniwang dahilan nagpapalitaw ng synthesis ng mga antibodies sa antigens ng erythrocyte membrane - panganganak (feto-maternal bleeding). Ang unang kapanganakan ay karaniwang nagaganap nang walang mga komplikasyon, ngunit ang mga kasunod ay puno ng hemolytic disease ng bagong panganak sa mga unang araw pagkatapos ng kapanganakan.
Mga sintomas ng hemolytic disease ng bagong panganak
- paninilaw ng balat
- anemya
- pamumutla ng balat at mga mucous membrane
- pinalaki ang atay at pali
- problema sa paghinga
- pamamaga ng buong katawan
- paggulo at unti-unting pagkalumbay ng central nervous system
Anemia pagkatapos ng pagsasalin ng dugo
Hindi direktang pagsubok ng Coombs isinasagawa bago ang pagsasalin ng dugo upang masuri ang pagiging tugma, at direktang pagsubok ng Coombs- pagkatapos nito, kung pinaghihinalaang post-transfusion hemolysis, i.e. kung mayroon kang mga sintomas tulad ng lagnat, panginginig, pagdidilig (basahin sa ibaba). Ang layunin ng pagsusuri ay upang matukoy ang mga antibodies sa mga naisalin na pulang selula ng dugo na nakagapos sa mga pulang selula ng dugo ng tatanggap at ang sanhi ng post-transfusion hemolysis, pati na rin ang maagang pag-alis ng mga donor red blood cell mula sa sirkulasyon ng dugo ng ang tatanggap (ang tumanggap ng dugo).
Mga sintomas ng hemolytic reaction pagkatapos ng pagsasalin ng dugo
- pagtaas ng temperatura ng katawan
- pantal sa balat
- sakit sa likod
- pulang kulay ng ihi
- pagduduwal
- pagkahilo
Pag-decode ng Coombs test
Ito ay nagkakahalaga ng pag-alala na ang mga pangunahing patakaran para sa pag-decipher ng direkta at hindi direktang mga pagsusuri sa antiglobulin ay pareho. Ang pagkakaiba lamang ay ang lokasyon ng mga antibodies - sa dugo o nasa pulang selula ng dugo - sa pulang selula ng dugo.
- Kung Ang direktang pagsusuri sa Coombs ay negatibo– ito ay nangangahulugan na ang antibody ay hindi "umupo" sa mga pulang selula ng dugo at ang sanhi ng mga sintomas ay kailangang hanapin pa at ang isang hindi direktang pagsusuri sa Coombs ay dapat gawin
- Kung positibong resulta Natukoy ang pagsusuri sa Coombs pagkatapos ng pagsasalin ng dugo, mga impeksyon, mga gamot - ang pagiging positibo ay maaaring tumagal ng hanggang 3 buwan (buhay ng mga pulang selula ng dugo 120 araw - 3 buwan)
- positibong resulta ng pagsusuri sa antiglobulin na may sakit na autoimmune maaaring tumagal ng mga buwan o kahit na taon
Mga pamantayan sa pagsubok ng Coombs
- direktang pagsubok ng Coombs- negatibo
- hindi direktang pagsubok ng Coombs- negatibo
Ang isang qualitatively positive na resulta ay sinusukat sa bilang ng mga plus mula isa hanggang apat (+, ++, +++, ++++), at quantitatively sa digital form - 1:16, 1:256, atbp.
4 na katotohanan tungkol sa pagsusulit ng Coombs
- unang iminungkahi sa Cambridge noong 1945
- threshold ng sensitivity - hindi bababa sa 300 nakapirming molekula ng antibody sa isang pulang selula ng dugo
- ang bilang ng mga antibodies na nagpapalitaw ng hemolysis - isa-isa para sa bawat tao (mula 16-30 hanggang 300)
- ang dynamics ng iba pang mga laboratory indicator ng hemolytic anemia (hemoglobin, bilirubin, reticulocytes) ay maaaring mag-normalize, at ang Coombs test ay mananatili sa parehong antas
Mga disadvantages ng antiglobulin test
- hindi matukoy ang lakas ng pagbubuklod ng isang antigen sa isang antibody
- hindi kilalang bilang ng mga antibodies na nakatali
- hindi tinutukoy ang uri ng antibody
- ang isang positibong pagsusuri sa Coombs ay hindi makakatulong na matukoy ang sanhi nito
- 0.5% ng mga malusog na tao ay mayroon positibong pagsubok Coombs nang walang anumang palatandaan ng hemolytic anemia
- hindi angkop para sa pagsubaybay sa tagumpay ng paggamot, dahil hindi nito ipahiwatig ang aktibidad ng erythrocyte hemolysis
Ang pagsusulit ng Coombs ay klinikal na pagsusuri pagsusuri ng dugo, na ginagawa upang makita kung ang dugo ay naglalaman ng ilang partikular na antibodies na maaaring hindi ligtas. Ang mga antibodies na ito ay dumidikit sa mga pulang selula ng dugo at maaaring sumalakay immune system, pati na rin nagdudulot ng pinsala sa iba pang mga paraan. Sa terminolohiyang medikal, ang pag-aaral na ito ay tinatawag ding antiglobulin test (AGT).
Mga uri ng mga sample ng Coombs
Mayroong dalawang uri ng mga pagsubok sa Coombs - direkta at hindi direkta.
Direktang pagsubok ng Coombs, na kilala rin bilang direct (DAT), ay nakakakita ng mga auto-antibodies na nakakabit sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo. Ang mga antibodies na ito ay minsan ay nagagawa sa katawan dahil sa ilang mga sakit o kapag umiinom ng ilang mga gamot, tulad ng procainamide, methyldopa, o quinidine.
Ang mga antibodies na ito ay mapanganib dahil minsan ay nagdudulot sila ng anemia sa pamamagitan ng pagsira sa mga pulang selula ng dugo.
Minsan inuutusan ang pagsusulit na ito upang masuri ang sanhi ng jaundice o anemia.
Karaniwan, negatibo ang reaksyon ng Coombs.
Positibo para sa:
- hemolytic disease ng mga bagong silang;
- autoimmune hemolysis;
- mga reaksyon ng hemolytic transfusion;
- immune hemolytic anemia na dulot ng droga.
Hindi direktang pagsubok ng Coombs, na kilala rin bilang , ay ginagamit upang makita ang mga antibodies sa mga pulang selula ng dugo na matatagpuan sa serum ng dugo (ang serum ay ang malinaw na dilaw na likido ng dugo na nananatili pagkatapos maalis ang mga pulang selula ng dugo at coagulant).
Ang hindi direktang pagsusuri ng Coombs ay ginagamit sa panahon ng pagsasalin ng dugo upang matukoy kung ang dugo ng donor ay tumutugma sa dugo ng tatanggap. Ito ay tinatawag na compatibility test at nakakatulong na maiwasan ang anumang masamang reaksyon sa dugo ng donor. Ang pagsusuring ito inirerekomenda din para sa mga buntis. Ang ilang kababaihan ay may IgG antibodies, na maaaring tumawid sa inunan sa dugo ng pangsanggol at makapinsala sa bagong panganak, na nagiging sanhi ng hemolytic disease na kilala bilang hemolytic anemia.
Pamamaraan
Ang dugo ay kinukuha gamit ang isang hiringgilya mula sa isang ugat, kadalasang may likurang bahagi palad o sa baluktot ng siko. Bago ito, ang lugar ng pagbutas ay lubusang nadidisimpekta, at pagkatapos kumuha ng pagsusuri sa dugo, inilapat ang malinis na gasa o cotton wool.
Ang resultang dugo ay dinadalisay sa laboratoryo at ang mga pulang selula ng dugo ay pinaghihiwalay. Pagkatapos ay susuriin ang sample nang sunud-sunod gamit ang iba't ibang serum at Coombs reagents, na pinaghahambing. Kung walang agglutination (pagkumpol ng mga pulang selula ng dugo), nangangahulugan ito ng positibong resulta.
Gayunpaman, kung negatibo ang pagsusuri, nangangahulugan ito na mayroong mga antibodies sa dugo na kumikilos laban sa mga pulang selula ng dugo. Ito ay maaaring magpahiwatig iba't ibang sakit, tulad ng anemia (parehong natural at sanhi ng pag-inom ng mga gamot), syphilis, o impeksyon sa mycoplasma. Matapos matanggap ang mga resulta, ang dumadating na manggagamot ay magrereseta ng naaangkop na paggamot.
Video
Sa maraming umiiral na antigens sa medikal na kasanayan pinakamataas na halaga nakatutok sa tatlong uri ng mga aglutinogen ng dugo. Ang isa sa kanila ay ang uri na responsable para sa pagpapakita ng Rh factor: kung ito ay naroroon sa erythrocyte membrane, ang pangkat ng dugo ay nasuri bilang Rh +, kung wala - Rh-. Kung ang mga erythrocytes na may Rh+ agglutinogens ay pumasok sa Rh-negative na dugo, ang katawan ay nag-trigger ng immune response at nagsisimulang gumawa ng mga antibodies sa antigen na ito, na nagiging sanhi ng mga pathological na kondisyon.
SANGGUNIAN! Ang Rh factor ay isang kumplikadong multicomponent system ng ilang dosenang antigens. Ang pinakakaraniwan sa mga ito ay agglutinogens type D (85% ng mga kaso), pati na rin ang E at C.
Ang pagsusulit sa Coombs ay isinasagawa lamang kung mayroong direktang ebidensya. Pangkalahatang listahan ng mga dahilan para sa pagrereseta ng Coombs test:
- pagpaplano at pamamahala ng pagbubuntis (ang mga magulang ay may iba't ibang Rh);
- donasyon at paghahanda para sa pagsasalin ng dugo (blood mismatch ayon sa Rh ay hindi gaanong nakakasira kaysa mismatch ayon sa AB0 system);
- binalak interbensyon sa kirurhiko(sa kaso ng muling pagdadagdag ng pagkawala ng dugo na may pagsasalin ng dugo);
- diagnosis ng mga hemolytic na sakit.
Ang mas tiyak na mga indikasyon ay nakasalalay sa uri ng pag-aaral na isinasagawa.
Direktang pagsubok ng Coombs
Nakikita ng direktang pagsusuri ang mga antibodies sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo. Ito ay kinakailangan upang masuri ang umiiral na hemolytic pathologies:
- autoimmune (mga pulang selula ng dugo at hemoglobin ay nawasak bilang resulta ng pag-atake ng sariling mga antibodies ng katawan);
- nakapagpapagaling ( proseso ng pathological nagsisimulang tumanggap ng ilan mga gamot tulad ng quinidine o procainamide);
- post-transfusion (kung ang uri ng dugo ay hindi tumutugma sa panahon ng pagsasalin ng dugo), pati na rin sa anyo ng Rh conflict sa panahon ng pagbubuntis (erythroblastosis ng mga bagong silang).
SANGGUNIAN! Ang hemolytic anemia ay isang sakit na nauugnay sa maagang pagkasira ng mga pulang selula ng dugo bilang resulta ng hemolysis, na humahantong sa hindi sapat na saturation ng oxygen ng dugo at hypoxia ng utak at/o mga panloob na organo.
Ang hemolysis ng mga elemento ng dugo ay sinusunod sa oncological, infectious, at rheumatic na sakit, kaya ang direktang pagsusuri ng Coombs ay maaaring gamitin bilang isang karagdagang paraan ng pag-diagnose ng isang pathological na kondisyon. Ito ay nagkakahalaga ng pag-alala: ang isang negatibong halaga ng pagsubok ay hindi ibinubukod ang posibilidad ng hemolysis, ngunit ito ay isang dahilan para sa karagdagang pagsusuri.
Hindi direktang pagsubok ng Coombs
Ang hindi direktang pagsusuri ay mas madalas na ginagamit upang maiwasan ang mga pathological na sitwasyon. Nakakatulong ito upang makita ang mga antibodies sa plasma ng dugo, na kinakailangan para sa pagtatasa ng pagiging tugma ng pagsasalin at pag-diagnose ng mga panganib ng Rh conflict sa panahon ng pagbubuntis.
Mahigit sa 80% ng mga tao ang may positibong Rh factor (Rh+), ayon sa pagkakabanggit, wala pang 20% ay Rh negatibo. Kung ang isang Rh-ina ay bumuo ng isang Rh+ na bata, ang kanyang katawan ay magsisimulang gumawa ng mga antibodies na umaatake sa mga pulang selula ng dugo ng fetus, na nagiging sanhi ng hemolysis.
Isinasaalang-alang ang katotohanan na ang porsyento ng mga "iba't ibang rhesus" na pag-aasawa ay umabot sa 12-15%, ang panganib ng hemolytic disease ng mga bagong silang ay dapat na mataas, ngunit sa katotohanan, sa 1 lamang sa 25 na mga ganitong kaso, ang mga kababaihan ay nakakaranas ng hindi pangkaraniwang bagay ng sensitization. (para sa 200 matagumpay na panganganak mayroong 1 halimbawa ng hemolytic pathology). Ito ay bahagyang dahil sa ang katunayan na ang unang Rh-positive na bata ay karaniwang hindi nagiging sanhi ng bukas na pagsalakay mula sa katawan ng ina; Ang napakalaking karamihan ng mga kaso ay nangyayari sa pangalawa at kasunod na mga bata. Ang parehong prinsipyo ay nalalapat tulad ng sa conventional sensitization sa isang partikular na allergen.
Walang reaksyon sa unang pakikipag-ugnay. Ang katawan ay nakikilala lamang sa isang bagong antigen, na gumagawa ng mga antibodies ng klase ng IgM, na responsable para sa isang mabilis na pagtugon sa immune, ngunit bihirang tumagos sa placental barrier sa dugo ng bata. Ang lahat ng mga pathological reaksyon ay nagpapakita ng kanilang sarili sa isang pangalawang "pagpupulong", kapag ang katawan ay nagsimulang gumawa ng mga antibodies ng klase ng IgG na madaling tumagos sa daloy ng dugo ng pangsanggol, na nagsisimula sa proseso ng hemolysis.
Indirect Coombs test sa panahon ng pagbubuntis nagbibigay-daan sa iyo na makita ang pagkakaroon ng mga antibodies sa katawan ng ina at makilala sa oras paunang yugto sensitization. Ang isang positibong sagot ay nangangailangan ng pagpaparehistro na may buwanang pagsusuri ng antibody titer at mandatoryong pagpapaospital 3-4 na linggo bago ipanganak.
SANGGUNIAN! Ang hindi pagkakatugma ng Rh factor ay hindi nakakaapekto sa kondisyon ng ina sa anumang paraan; ang hemolytic disease ay bubuo lamang sa bata. Sa mga malubhang kaso at sa kawalan ng napapanahong tugon, ang fetus ay maaaring mamatay sa sinapupunan o kaagad pagkatapos ng kapanganakan.
Paghahanda para sa pamamaraan at pagpapatupad nito
Ang venous blood ay ginagamit para sa diagnosis. Walang espesyal na pangmatagalang paghahanda ang kinakailangan para sa pagsusulit ng Coombs. Subukang sundin ang isang karaniwang hanay ng mga patakaran bago kumuha ng dugo mula sa isang ugat para sa pagsusuri:
- iwanan ang alkohol sa loob ng 3 araw, mga gamot(kung maaari);
- Planuhin ang iyong huling pagkain pagkalipas ng 8 oras bago kumuha ng dugo para sa pagsusuri;
- itigil ang paninigarilyo, pisikal, mental at emosyonal na stress sa loob ng 1 oras;
- Bago ang pamamaraan, uminom ng isang baso ng malinis na tubig.
Ang pamamaraan ng pananaliksik ay batay sa reaksyon ng hemagglutination.
Kapag nagsasagawa ng direktang pagsubok ang isang sample ng dugo ay nakalantad sa pre-prepared antiglobulin serum na may mga kilalang indicator, ang timpla ay pinananatili ng ilang panahon at sinusuri kung may mga agglutinate, na nabuo kapag ang mga antibodies ay naroroon sa mga pulang selula ng dugo. Ang antas ng agglutinates ay nasuri gamit ang agglutinating titer.
Hindi direktang sample Ang Coombs ay may katulad na pamamaraan, ngunit isang mas kumplikadong pagkakasunud-sunod ng mga aksyon. Ang mga antigenic erythrocytes (na may Rh factor) ay ipinakilala sa pinaghiwalay na serum ng dugo, at pagkatapos lamang ng mga manipulasyong ito ay idinagdag ang antiglobulin serum para sa diagnosis at agglutinate titer.
Mga resulta ng pananaliksik
Karaniwan parehong tuwid at hindi direktang pagsubok ng Coombs dapat magbigay ng negatibong resulta:
- Ang isang negatibong direktang pagsusuri ay nagpapahiwatig na ang mga partikular na antibodies sa Rh factor na nauugnay sa mga pulang selula ng dugo ay wala sa dugo at hindi maaaring maging sanhi ng hemolysis
- ang isang negatibong hindi direktang pagsusuri ay nagpapakita na wala ring libreng antibodies sa Rh factor sa plasma ng dugo; ang katotohanang ito ay nagpapahiwatig ng pagiging tugma ng dugo ng donor sa dugo ng tatanggap (o dugo ng ina at anak) ayon sa Rh factor.
Ang isang positibong pagsusuri sa Coombs ay nagpapahiwatig ng katotohanan ng Rh sensitization ng katawan, na pangunahing dahilan Rh conflict sa kaso ng pagsasalin ng dugo o kapag nagdadala ng isang bata na may ibang Rh status. Sa kasong ito, ang mga resulta ay nananatiling hindi nagbabago sa loob ng 3 buwan (ang habang-buhay ng mga pulang selula ng dugo). Kung ang sanhi ay autoimmune hemolytic anemia, kung gayon ang isang positibong pagsusuri ay maaaring sundin ang pasyente sa loob ng ilang taon (sa ilang mga kaso, sa buong buhay niya).
SANGGUNIAN! Iba ang antiglobulin test mataas na sensitivity, ngunit may kaunting nilalaman ng impormasyon. Hindi nito naitala ang aktibidad ng proseso ng hemolytic, hindi tinutukoy ang uri ng antibody at hindi matukoy ang sanhi ng patolohiya. Upang makakuha ng mas kumpletong larawan, dapat magreseta ang dumadating na manggagamot karagdagang pananaliksik(mikroskopyo ng dugo, pangkalahatan at pagsusuri ng biochemical, mga pagsusuri sa rayuma, ESR, mga antas ng iron at ferritin).
Ang antas ng sensitization ay maaaring ipahayag nang husay (mula sa "+" hanggang "++++") o sa dami sa anyo ng isang titer:
- 1:2 - mababang halaga, ay hindi nagdudulot ng panganib;
- 1:4 - 1:8 - ang simula ng pagbuo ng isang immunological reaksyon; ay hindi nagdudulot ng panganib, ngunit nangangailangan ng patuloy na pagsubaybay;
- 1:16 -1:1024 - isang malakas na anyo ng sensitization, ang agarang aksyon ay dapat gawin.
Ang dahilan para sa isang positibong pagsusuri ay maaaring:
- pagsasalin ng dugong hindi na-type (o may error sa pag-type), kapag hindi magkatugma ang Rh factor ng donor at recipient;
- Rh conflict sa panahon ng pagbubuntis (kung ang komposisyon ng mga antigens ng dugo sa ama at ina ay hindi tumutugma);
- autoimmune hemolytic anemia - parehong congenital (pangunahin) at pangalawa, na bunga ng ilang mga sakit (Evans syndrome, infectious pneumonia, syphilis, cold hemoglobinuria, lymphoma);
- hemolytic reaksyon ng gamot.
Wala sa mga problema sa itaas ang malulutas ng pasyente nang wala Medikal na pangangalaga. Sa lahat ng kaso, kinakailangan ang agarang konsultasyon, pagpaparehistro o emergency na ospital.
PANSIN! Sa mga bihirang kaso, posible ang isang maling positibong pagsusuri sa Coombs. Ang dahilan nito ay maaaring madalas na pagsasalin ng dugo, pati na rin ang isang bilang ng mga sakit: rheumatoid arthritis, lupus erythematosus, sarcoidosis. Ang hindi pangkaraniwang bagay na ito ay maaari ding maobserbahan pagkatapos ng pag-alis ng pali, pati na rin kapag ang reaksyon ay nagambala (madalas na pag-alog ng mga nilalaman, ang pagkakaroon ng mga kontaminant).
SA mga nakaraang taon sa mga pasyente ng iba't ibang edad Ang bilang ng mga sakit sa dugo ay tumaas at ginagamit para sa kanilang pagsusuri. iba't ibang pamamaraan at mga pondo. Ang pagsusulit ng Coombs ay klinikal na pagsubok pagsusuri ng dugo, at ang layunin nito ay tukuyin ang ilang mga sangkap sa katawan na nagdudulot ng banta sa kalusugan ng tao.
Ang mga antibodies ay maaaring dumikit sa balat at ang resulta ay maaaring pagkagambala sa immune system. Ang direktang pagsusuri ng Coombs ay isang pagsusuri sa antiglobulin na ginagawa upang makita ang mga antibodies na nakakabit sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo.
Karaniwan, ang mga espesyalista ay gumagamit ng pagsasagawa ng pagsusuri sa antibody sa mga sumusunod na sitwasyon:
- Ang pangangailangan para sa pagsasalin ng dugo. Mula sa kurso anatomy ng paaralan Nabatid na ang isang tao ay maaaring magkaroon ng isa sa apat na pangkat ng dugo. Ang isang antiglobulin test ay nagpapahintulot sa iyo na matukoy ang posibilidad ng pagsasalin ng dugo sa ibang katawan. Masasabi nating ang isang pasyente ay maaaring maging isang donor para sa pagsasalin ng dugo kung ang kanyang dugo ay tumutugma sa uri ng pasyente, iyon ay, naglalaman ito ng parehong antigens. Kung may pagkakaiba sa antigens sa pagitan ng pasyente at ng donor, maaari itong humantong sa pagkasira ng mga naisalin na selula ng immune system. Ito ay maaaring magresulta sa pag-unlad malubhang sakit at komplikasyon, at maging kamatayan. Dahil mismo sa kadahilanang ito mahalagang papel kalakip sa paghahanap ng tamang uri ng dugo kapag kailangan ng pagsasalin ng dugo.
- Pagtukoy sa panganib ng Rh sensitization. Makabagong gamot Tinutukoy ang Rh bilang isang antigen, at ang buong kahulugan nito ay ang konsepto ng "Rh factor". Salamat sa pagsubok ng Coombs, posible na masuri ang pagkakaroon ng mga antibodies sa Rh factor sa dugo ng mga kababaihan sa panahon ng pagbubuntis. Kung ang umaasam na ina ay may negatibong Rh factor at ang ama ay positibo, kung gayon ang magiging anak ay maaaring magmana ng alinman sa kanila. Kapag ang isang positibong Rh factor ay nakita sa isang hindi pa isinisilang na bata, ang panganib na magkaroon ng Rh sensitization ay tumataas - ito ang proseso ng paghahalo ng dugo at ina sa panahon ng pagbubuntis o panganganak.
Sa kaganapan na mayroong hindi pagkakatugma sa pagitan ng grupo ng ina at anak, pagkatapos ay ang immune system katawan ng babae nagsisimulang maramdaman ang fetus bilang isang dayuhang bagay at naglulunsad ng lahat ng uri ng pag-atake dito. Ang resulta nito ay maaaring ang pag-unlad ng malubhang patolohiya sa bata, na tinatawag na erythroblastosis. Sa ilang mga kaso, sa kawalan mabisang paggamot ang pagkamatay ng fetus ay sinusunod sa sinapupunan o kaagad pagkatapos ng kapanganakan nito.
Sa ilang mga kaso, ang Coombs test ay isinasagawa upang matukoy ang autoimmune hemolytic disease.
Ang sakit na ito ay medyo bihira at nagpapakita ng sarili sa pagbuo ng mga pulang selula ng dugo sa sariling mga antigen ng katawan.
Tinutukoy ng mga eksperto ang dalawang uri ng mga pagsubok sa Coombs, na ang bawat isa ay ginagamit para sa mga partikular na layunin.
Direktang sample. Ang direktang pagsusuri sa medikal na kasanayan ay tinatawag ding direktang pagsusuri sa antiglobulin at sa tulong nito posible na masuri ang mga antibodies na nakakabit sa ibabaw. Sa ilang mga kaso, ang paggawa ng mga naturang antibodies sa katawan ng tao ay nangyayari bilang resulta ng pag-unlad ng iba't ibang o pag-inom ng mga gamot tulad ng:
- Quinidine
- Methyldop
- Procainamide
Ang panganib ng naturang mga antibodies ay nakasalalay sa katotohanan na maaari silang maging sanhi ng pag-unlad at magkaroon ng mapanirang epekto sa. Minsan ginagamit ang pagsubok ng Coombs kapag kinakailangan upang matukoy ang mga sanhi ng pag-unlad ng mga pathology tulad ng anemia at.
Ito ay itinuturing na pamantayan negatibong reaksyon Mga pagsusulit sa Coombs.
Hindi direktang sample. Kadalasan ang mga espesyalista ay gumagamit ng pagsasagawa hindi direktang sample Coombs, na may pangalawang pangalan na "indirect antiglobulin test". Ang pangunahing layunin nito ay kilalanin ang mga antibodies sa mga pulang selula ng dugo na naroroon sa serum ng dugo. Salamat sa pagsusulit na ito, posibleng matukoy kung ang dugo ng donor ay tumutugma sa dugo ng pasyente kung kinakailangan ang pagsasalin ng dugo. Ang ganitong pagsusuri ay isang uri ng pagsubok sa pagiging tugma at, salamat sa pagpapatupad nito, posible na maiwasan ang pagbuo ng isang masamang reaksyon sa dugo ng donor.
Karaniwan, ang ganitong pag-aaral ay inirerekomenda para sa mga kababaihan sa panahon ng pagbubuntis. Ang ilang mga ina ay maaaring may mga antibodies ng isang tiyak na klase sa kanilang mga katawan na maaaring tumagos sa inunan sa dugo ng hindi pa isinisilang na bata. Ang resulta ng prosesong ito ay maaaring hemolytic disease ng fetus, pati na rin ang pag-unlad ng iba't ibang sakit sa panahon ng pagbubuntis.
Paghahanda para sa pamamaraan at pagpapatupad nito
Karaniwan ang pamamaraan ay hindi nangangailangan ng anuman espesyal na pagsasanay, at ganap na magagawa anumang oras.
Ang paghahanda para sa diagnosis ay kinabibilangan ng mga sumusunod na puntos:
- sa kaganapan na ang pagsusuri ay isinasagawa sa isang bagong panganak, kung gayon ang mga magulang ay dapat ipaliwanag na sa tulong nito posible na masuri ang isang hemolytic disease
- kung may hinala na ang isang pasyente ay nakabuo ng isang hemolytic disease, kinakailangang ipaliwanag sa kanya na ang naturang pagsusuri ay makakatulong na matukoy ang mga dahilan para sa pag-unlad nito
- Ang paghahanda para sa pagsusuri ay hindi nangangailangan ng anumang mga paghihigpit sa pagkain o diyeta
- Kapag nagsasagawa ng pagsusuri sa isang bagong panganak, dapat ipaalam sa mga magulang na ang pag-sample ng dugo mula sa isang ugat ay kinakailangan, at tukuyin din ang oras ng pamamaraan.
- kinakailangang ipaalam sa pasyente na ang kakulangan sa ginhawa ay maaaring mangyari sa panahon ng paglalagay ng tourniquet at blood sampling
- Ang pag-inom ng mga gamot ay maaaring masira ang mga resulta ng Coombs test, kaya dapat na ihinto ang mga ito ilang oras bago ang pagsubok
Kapag nagsasagawa ng direktang pagsusuri sa Coombs, ang dugo ay kinukuha mula sa isang ugat gamit ang isang syringe. Bago simulan ang pamamaraan, ang lugar ng pagbutas ay lubusang nadidisimpekta, at pagkatapos mangolekta ng materyal para sa pagsusuri, inilapat ang cotton wool o sterile gauze. Kung ang pagsusuri ay isinasagawa sa mga bagong silang, ang dugo ay kinuha mula sa pusod.
Kung lumilitaw ang hematoma pagkatapos ng sampling ng dugo, ang mga mainit na compress ay inireseta upang ilapat sa lugar ng pagbutas. Pagkatapos ng pamamaraan, maaaring ipagpatuloy ng pasyente ang pag-inom ng mga gamot.
Sa laboratoryo, ang nakuha na dugo ay dinadalisay at, sa parehong oras, ang mga pulang selula ng dugo ay pinaghihiwalay.
Susuriin ng isang espesyalista ang sample gamit ang iba't ibang serum at Coombs reagents na kaibahan sa human globulin. Kung ang mga pulang selula ng dugo ay hindi magkakadikit at ang agglutination ay hindi bubuo, kung gayon maaari nating pag-usapan ang isang positibong resulta.
Sa panahon ng pamamaraan, maaaring mangyari ang mga sumusunod na komplikasyon:
- pag-unlad mula sa lugar ng pag-sample ng dugo sa panahon ng pag-aaral
- sakit ng ulo, pagkahilo o pagkahilo
- pag-unlad ng pagdurugo sa ilalim ng balat
- na may mahinang paggamot sa antimicrobial balat sa lugar ng pag-iiniksyon, ang panganib ng impeksyon na pumasok sa katawan ay tumataas
Mga resulta ng pananaliksik
Paliwanag - posibleng mga sakit
U malusog na tao Walang mga antibodies sa katawan, ibig sabihin, karaniwang hindi sila dapat umiral. Kung ang pagsusuri ay nagpapakita ng isang positibong pagsusuri, ito ay maaaring magpahiwatig ng pagkakaroon ng mga antibodies sa mga pulang selula ng dugo sa katawan.
Ang resulta ng kondisyong ito ng pathological ay maaaring ang pagkasira ng mga pulang selula ng dugo, at kadalasan ito ay bubuo:
- may systemic
- para sa impeksyon sa mycoplasma
- para sa nakakahawang mononucleosis
- para sa hemolytic disease ng mga bagong silang
- para sa hemolytic anemia na dulot ng droga
- para sa talamak na lymphocytic leukemia
- para sa autoimmune hemolytic anemia
- sa kaso ng hindi pagkakatugma ng pangsanggol at maternal na dugo
Ang direktang pagsusuri ng Coombs ay madalas na inireseta sa mga kababaihan sa panahon ng pagbubuntis upang matukoy ang pagiging tugma ng dugo ng ina at ng fetus. Kung mayroong hindi pagkakatugma sa pagitan ng katawan ng ina at ng hindi pa isinisilang na bata tungkol sa mga erythrocyte agent, ang panganib na magkaroon ng hemolytic disease sa bagong panganak ay tumataas.
Ang isang Rh-positive na bata sa isang Rh-negative na babae ay nagiging sanhi ng pag-unlad ng Rh conflict.
Sa patolohiya na ito, ang mga pulang selula ng dugo ng hindi pa isinisilang na bata ay nawasak ng mga anti-Rhesus na katawan ng katawan ng ina. Kapag nasa katawan ng babae, ang mga pulang selula ng dugo ng fetus ay may nakapagpapasigla na epekto sa immune system ng ina, at nagreresulta ito sa paggawa ng mga antibodies sa bata.
Kapaki-pakinabang na video - hemolytic anemia.
Ang pagbuo ng tulad sa maternal body ay humahantong sa agglutination thrombosis ng mga capillary at ischemic necrosis ng fetal tissue. Bilang resulta ng hemolysis ng mga pulang selula ng dugo at pagkasira ng hemoglobin, ang pagbuo ng mga nakakalason na hindi direktang sangkap sa katawan ng pangsanggol ay sinusunod. Isang matalim na pagbaba ang nilalaman ng mga pulang selula ng dugo sa fetus dahil sa kanilang hemolysis ay humahantong sa pag-unlad ng isang sakit tulad ng anemia sa bata.
Ang mababang antas at mataas na konsentrasyon ng bilirubin ay makabuluhang nagpapalubha sa kurso ng sakit. Sa panahon ng pagbubuntis, maraming mga komplikasyon ang nasuri tulad ng:
- panganib ng pagkalaglag
- pag-unlad ng pagdurugo
- gestosis
- anemya
- preterm labor
Pinoprotektahan ng mga katawan ng anti-Rhesus ang ina, ngunit sa parehong oras ay nagdudulot ng malubhang banta sa pagbuo ng fetus. Salamat sa pagsubok ng Coombs, posible itong masuri sa oras. pathological kondisyon babaeng katawan at italaga napapanahong paggamot. Bilang karagdagan, ang naturang pagsusuri ay nakakatulong upang makilala ang iba't ibang mga sakit sa dugo, ang pag-unlad nito ay maaaring humantong sa pagkamatay ng pasyente.
