– isang antiglobulin test na naglalayong tukuyin sa Rh-negative na dugo ang hindi kumpletong anti-erythrocyte antibodies sa Rh factor - isang partikular na protina na matatagpuan sa ibabaw ng erythrocytes ng Rh-positive na dugo. Mayroong dalawang uri ng pagsusulit na ito: direktang - pagtuklas ng mga antibodies sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo, hindi direktang - pagtuklas ng mga antibodies sa serum ng dugo. Ang direktang pagsusuri ay isinasagawa sa pagsusuri at pagsubaybay sa paggamot ng mga sakit sa dugo: hemolytic anemia, sakit na hemolytic mga bagong silang at iba pa. Ang isang hindi direktang pagsusuri ay isinasagawa upang masuri ang pagiging tugma ng dugo ng donor at tatanggap sa panahon ng pagsasalin, pati na rin upang matukoy ang pagkakaroon at panganib ng Rh conflict kapag nagpaplano at namamahala sa pagbubuntis. Ang materyal para sa pagsusuri ng Coombs ay venous blood; Karaniwan, ang parehong mga pagsubok ay nagbibigay ng negatibong resulta. Ang pagsusuri ay nakumpleto sa loob ng isang araw.
Pagsubok sa Coombs - klinikal na pagsubok Rh-negative na dugo, na naglalayong makita ang mga antibodies sa Rh factor. Ang pagsusulit ay ginagamit upang matukoy ang panganib na magkaroon ng Rh conflict at hemolytic reactions. Sa bawat tao, ang ibabaw ng mga pulang selula ng dugo ay naglalaman ng isang tiyak na hanay ng mga antigens o agglutinogens - mga compound ng iba't ibang kalikasan, ang presensya o kawalan nito ay ginagamit upang matukoy ang uri ng dugo at Rh factor. Mayroong maraming mga uri ng antigens, kabilang ang medikal na kasanayan Ang mga Agglutinogens A at B, na tumutukoy sa pangkat ng dugo, at ang agglutinogen D, ang Rh factor, ay pinakamahalagang praktikal. Sa isang positibong Rh factor, ang mga D antigens ay nakikita sa panlabas na lamad ng mga erythrocytes, ngunit sa isang negatibong kadahilanan, sila ay hindi.
Ang Coombs test, na tinatawag ding antiglobulin test, ay naglalayong makita ang hindi kumpletong anti-erythrocyte antibodies sa Rh factor system sa dugo. Ang mga antibodies sa Rh factor ay mga partikular na immunoglobulin na nagagawa sa Rh-negative na dugo kapag ang mga pulang selula ng dugo na may mga aglutinogen D ay pumasok dito. Ito ay maaaring mangyari kapag ang dugo ng isang fetus at isang buntis na babae ay pinaghalo, sa panahon ng pagsasalin ng dugo nang walang paunang dugo pagta-type. Ang pagsubok ng Coombs ay umiiral sa dalawang bersyon - direkta at hindi direkta. Kapag nagsasagawa ng direktang pagsusuri sa Coombs, ang mga antibodies na nakakabit sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo ay nakita. Ang pag-aaral ay ginagamit upang matukoy ang sanhi ng hemolytic reaction. Ang indirect Coombs test ay naglalayong makita ang mga anti-erythrocyte antibodies sa plasma ng dugo. Ito ay kinakailangan upang matukoy ang pagiging tugma ng dugo sa pagitan ng donor at tatanggap o ina at fetus, at tumutulong na maiwasan ang pagbuo ng Rh conflict at kasunod na hemolysis ng mga pulang selula ng dugo.
Ang dugo para sa parehong bersyon ng Coombs test ay kinuha mula sa isang ugat. Ang pagsusuri ay isinasagawa sa pamamagitan ng agglutination gamit ang antiglobulin serum. Ang mga resulta ng pag-aaral ay ginagamit sa hematology upang matukoy ang mga sanhi ng hemolytic reaksyon, sa operasyon at resuscitation kapag nagsasagawa ng pagsasalin ng dugo, sa obstetrics at ginekolohiya kapag sinusubaybayan ang pagbubuntis sa mga babaeng may Rh-negative na dugo.
Mga indikasyon
Ang direktang pagsusuri ng Coombs, na nakakakita ng mga antibodies na nakakabit sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo, ay inireseta para sa mga reaksiyong hemolytic (pagkasira ng mga pulang selula ng dugo) ng iba't ibang pinagmulan. Ang pag-aaral ay ipinahiwatig para sa pangunahing autoimmune hemolytic anemia, post-transfusion hemolytic anemia, hemolytic disease ng bagong panganak, hemolysis ng erythrocytes na dulot ng autoimmune, tumor o Nakakahawang sakit, pati na rin ang pagtanggap mga gamot, halimbawa, quinidine, methyldopa, procainamide. Ang hindi direktang pagsusuri ng Coombs, na tumutukoy sa mga antibodies sa plasma ng dugo, ay ginagamit upang maiwasan ang pagbuo ng Rh conflict. Ito ay ipinahiwatig para sa mga pasyente bilang paghahanda para sa pagsasalin ng dugo, pati na rin para sa mga buntis na kababaihan na may negatibong Rh factor, sa kondisyon na ang hinaharap na ama ng bata ay may positibong Rh factor.
Upang matukoy ang Rh compatibility, ang Coombs test ay hindi inireseta sa mga pasyenteng may Rh-positive na dugo. Sa mga kasong ito, mayroon nang mga antigen sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo ang paggawa ng mga antibodies ay hindi maaaring pukawin ng pagsasalin ng dugo o pagpasok ng dugo ng pangsanggol sa daluyan ng dugo ng buntis. Gayundin, ang pag-aaral ay hindi ipinahiwatig para sa mga buntis na kababaihan kung ang parehong mga magulang ay may negatibong Rh factor - isang minanang recessive na katangian. Ang bata sa gayong mga mag-asawa ay laging may Rh-negative na dugo ay imposible ang isang immunological conflict sa ina. Sa hemolytic pathologies, ang antiglobulin test ay hindi ginagamit upang subaybayan ang tagumpay ng therapy, dahil ang mga resulta ay hindi sumasalamin sa aktibidad ng proseso ng pagkasira ng mga pulang selula ng dugo.
Ang isang limitasyon ng pagsubok ng Coombs ay ang pagiging matrabaho ng pamamaraan ng pananaliksik - upang makakuha ng maaasahang mga resulta, kinakailangan na sumunod sa mga kondisyon ng temperatura at oras, mga patakaran para sa paghahanda ng mga reagents at biomaterial. Kasama sa mga pakinabang ng pagsusulit ng Coombs ang nito mataas na sensitivity. Sa hemolytic anemia, ang mga resulta ng pagsusulit na ito ay nananatiling positibo, kahit na ang mga antas ng hemoglobin, bilirubin at reticulocyte ay na-normalize.
Paghahanda para sa pagsusuri at pagkolekta ng materyal
Ang materyal na ginamit sa pagsasagawa ng Coombs test ay venous blood. Walang mga espesyal na kinakailangan para sa oras ng pamamaraan ng sampling ng dugo at para sa paghahanda ng pasyente. Tulad ng anumang pag-aaral, inirerekumenda na magpahinga pagkatapos kumain ng hindi bababa sa 4 na oras, at huminto sa paninigarilyo sa huling 30 minuto. pisikal na Aktibidad, iwasan ang emosyonal na stress. Dapat ding talakayin nang maaga sa iyong doktor ang pangangailangang huminto sa pag-inom ng mga gamot - maaaring sirain ng ilang gamot ang mga resulta ng pagsusuri sa Coombs. Kinukuha ang dugo gamit ang isang syringe mula sa cubital vein, o mas madalas mula sa isang ugat sa likod ng kamay. Sa loob ng ilang oras, ang materyal ay naihatid sa laboratoryo.
Kapag nagsasagawa ng direktang pagsusuri sa Coombs, ang antiglobulin serum ay idinaragdag sa serum ng dugo ng pasyente. Pagkaraan ng ilang oras, ang halo ay sinusuri para sa pagkakaroon ng mga agglutinates - sila ay nabuo kung mayroong mga antibodies sa mga pulang selula ng dugo. Kung positibo ang resulta, tinutukoy ang agglutinating titer. Ang indirect Coombs test ay binubuo ng higit pang mga hakbang. Una, ang mga antibodies na naroroon sa suwero ay naayos sa mga iniksyon na pulang selula ng dugo sa panahon ng pagpapapisa ng itlog. Pagkatapos ang antiglobulin serum ay idinagdag sa sample, pagkatapos ng ilang oras ang presensya at titer ng mga agglutinates ay natutukoy. Ang panahon ng pagsusuri ay 1 araw.
Mga normal na resulta
Karaniwan, ang resulta ng direktang pagsusuri sa Coombs ay negatibo (-). Nangangahulugan ito na walang mga antibodies na nauugnay sa mga pulang selula ng dugo sa dugo, at hindi sila maaaring maging sanhi ng hemolysis. Normal na resulta hindi direktang pagsubok Ang Coombs ay negatibo din (-), ibig sabihin, walang mga antibodies sa Rh factor sa plasma ng dugo. Kapag naghahanda para sa pagsasalin ng dugo para sa tatanggap, nangangahulugan ito ng pagiging tugma sa dugo ng donor kapag sinusubaybayan ang pagbubuntis, nangangahulugan ito ng kawalan ng Rh sensitization ng ina, isang mababang panganib na magkaroon ng isang immunological conflict. Physiological na mga kadahilanan, tulad ng mga gawi sa pagkain o pisikal na Aktibidad, ay hindi makakaapekto sa resulta ng pagsusulit. Samakatuwid, kung positibo ang resulta, kinakailangan ang konsultasyon ng doktor.
Diagnostic na halaga ng pagsusuri
Ang isang positibong resulta ng pagsusulit sa Coombs ay ipinahayag nang husay, mula sa (+) hanggang (++++), o sa dami, ng mga titer mula 1:16 hanggang 1:256. Ang pagpapasiya ng konsentrasyon ng mga antibodies sa mga pulang selula ng dugo at sa serum ng dugo ay isinasagawa sa parehong uri ng mga sample. Kung positibo ang direktang pagsusuri ng Coombs, ang mga antibodies ay makikita sa panlabas na lamad ng mga pulang selula ng dugo, na humahantong sa pagkasira ng mga selula ng dugo na ito. Ang sanhi ay maaaring pagsasalin ng dugo nang walang paunang pag-type - post-transfusion hemolytic reaksyon, pati na rin ang erythroblastosis ng bagong panganak, hemolytic reaksyon dahil sa paggamit ng mga gamot, pangunahin o pangalawang autoimmune hemolytic anemia. Ang pangalawang pagkasira ng mga pulang selula ng dugo ay maaaring sanhi ng systemic lupus erythematosus, Evans syndrome, Waldenström macroglobulinemia, paroxysmal cold hemoglobinuria, talamak na lymphocytic leukemia, lymphoma, infectious mononucleosis, syphilis, mycoplasma pneumonia.
Ang isang positibong resulta ng hindi direktang pagsusuri ng Coombs ay nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng mga antibodies sa Rh factor sa plasma. Sa pagsasagawa, nangangahulugan ito na naganap ang Rh sensitization, at may posibilidad na magkaroon ng Rh conflict pagkatapos ng pagbubuhos ng dugo ng donor sa panahon ng pagbubuntis. Upang maiwasan ang mga komplikasyon sa pagbubuntis, ang mga babaeng may positibong resulta ng pagsusuri sa Coombs ay inilalagay sa isang espesyal na rehistro.
Paggamot ng mga abnormalidad
Ang Coombs test ay tumutukoy sa isoserological studies. Ginagawang posible ng mga resulta nito na makilala ang isang hemolytic na reaksyon, pati na rin matukoy ang pagiging tugma ng dugo ng donor at tatanggap, ina at fetus, upang maiwasan ang pagbuo ng Rh conflict. Kung positibo ang resulta ng pagsusuri, kailangan mong humingi ng payo mula sa iyong dumadating na manggagamot - obstetrician-gynecologist, hematologist, surgeon.
Ang Coombs test ay isang paraan pananaliksik sa laboratoryo, na ginawa sa pamamagitan ng pag-impluwensya sa hemagglutination. Ito ay batay sa pagkamaramdamin ng mga antibodies sa mga immunoglobulin at mga elemento ng enzyme, pati na rin ang kanilang kakayahang pagsama-samahin ang mga erythrocytes na pinahiran ng C3 o Lg.
Direktang diagnosis ng Coombs
Ginagamit upang makita ang mga antibodies o mga bahaging pandagdag na naka-install sa labas ng mga cell. Ang direktang pagsusuri ng Coombs ay isinasagawa bilang mga sumusunod.
Ang paggamit ng naturang sample
Ginagamit ang Direct Coombs diagnosis sa ilang partikular na kaso, gaya ng:
- mga epekto ng pagsasalin ng dugo;
- autoimmune hemolysis;
- hemolytic anemia na dulot ng droga.
Hindi direktang pagsubok ng Coombs
Ginagawang posible ng diagnosis na ito na makita ang mga antibodies sa mga selula sa suwero, na kung saan ay incubated, bilang isang panuntunan, na may donor red blood cell ng uri 0, at pagkatapos ay isinasagawa ang isang direktang pagsusuri. Mag-apply hindi direktang diagnosis Coombs sa mga sumusunod na kaso:
Paano maghanda para sa pagsusuri
Mayroong ilang mga patakaran para sa paghahanda para sa pagsusulit.
- Kung ang pasyente ay bagong panganak, kailangang malaman ng mga magulang na ang pagsusuri ay makakatulong sa pag-diagnose ng hemolytic disease ng bagong panganak.
- Kung ang pasyente ay may mga hinala ng hemolytic anemia, dapat siyang ipaliwanag na ang pagsusuri ay magpapahintulot sa kanya na malaman kung ito ay sanhi ng mga proteksiyon na karamdaman, mga gamot, o iba pang mga kadahilanan.
- Ang pagsusulit ng Coombs, direkta at hindi direkta, ay hindi gumagawa ng anumang mga paghihigpit sa nutrisyon o diyeta.
- Kinakailangang ipaalam sa pasyente na ang pagsusuri ay mangangailangan ng pagkuha ng dugo mula sa isang ugat, at sabihin din sa kanya nang eksakto kung kailan isasagawa ang venipuncture.
- Dapat ka ring bigyan ng babala tungkol sa posibilidad kawalan ng ginhawa sa panahon ng paglalagay ng bendahe sa braso at sa mismong pamamaraan.
- Ang mga gamot na maaaring makaapekto sa sample na resulta ay dapat na ihinto.
Kasama sa mga gamot na ito ang:
- "Streptomycin";
- "Methyldopa";
- "Procainamide";
- sulfonamides;
- "Melphalan";
- "Quinidine";
- "Rifampin";
- "Isoniazid";
- cephalosporins;
- "Hydralazine";
- "Chlorpromazine";
- "Levodopa";
- "Tetracycline";
- "Diphenylhydantoin";
- "Ethosuximide";
- "Penicillin";
- mefenamic acid.
Ang sampling ng dugo ay ginagawa sa umaga nang walang laman ang tiyan.
Paano ginaganap ang kaganapan
Ang Coombs test ay isinasagawa sa sumusunod na pagkakasunud-sunod:
- Kapag nagsasagawa ng mga diagnostic sa isang may sapat na gulang na pasyente, pagkatapos ng venipuncture, ang dugo ay dinadala sa mga tubo na may EDTA (ethylenediaminetetraacetate).
- Ang dugo ng bagong panganak ay kinukuha mula sa pusod patungo sa isang beaker na naglalaman ng EDTA.
- Ang lugar ng pagbutas ay pinindot ng cotton swab hanggang sa tumigil ang pagdurugo.
- Kung ang isang pasa ay lumitaw sa lugar ng venipuncture, ang mga mainit na compress ay inireseta.
- Pagkatapos ng koleksyon ng dugo, pinapayagan ang pasyente na bumalik sa pag-inom ng mga gamot.
- Kinakailangang ipaalam sa mga magulang ng bagong panganak na maaaring kailanganin ang pangalawang pagsusuri upang masubaybayan ang dinamika ng anemia.
Mga kalamangan ng pagsubok ng Coombs
Ang ganitong pananaliksik ay may ilang mga pakinabang, katulad:
Mga disadvantages ng pagsusuri
Ang positibong pagsusuri ng Coombs ay isang medyo matrabahong paraan ng pagsusuri, na nangangailangan ng isang katangiang katumpakan ng pagpapatupad. Kapag ginagamit ito, maaari kang makatagpo ng ilang mga paghihirap, lalo na nauugnay sa interpretasyon ng mahinang positibong epekto.
Ito ay itinatag na maling negatibo o mahina mga positibong reaksyon Sa panahon ng paggawa ng mga sample ng Coombs ay maaaring ang mga kahihinatnan ng hindi kasiya-siyang aktibong paghuhugas ng cell, pagpapahina ng antiglobulin reagent sa pamamagitan ng mga serum na nalalabi, pati na rin ang mga koneksyon sa panlabas na walang taba, kung saan maaaring ilakip ang antiglobulin, at sa gayon ay nawawala ang pagiging epektibo nito.
Ang pagsubok ng Coombs ay may isa pang disbentaha - ang mababang katatagan ng antiglobulin reagent, ang pagkuha at pag-iimbak kung saan indibidwal na katangian, na nagpapahirap din sa numerical na pagtatasa ng epekto ng antiglobulin serum sa hemagglutination.
Mga sakit na maaaring makita sa panahon ng pananaliksik
Ginagawang posible ng Coombs diagnostics na matukoy ang ilang uri ng sakit, gaya ng:
- hemolytic malaise ng bagong panganak;
- iba't ibang mga reaksyon ng pagsasalin ng dugo;
- autoimmune hemolysis;
- hemolytic anemia na dulot ng droga.
Ngayon, ang Coombs test ay itinuturing na isang medyo popular na sistema ng pagsusuri ng dugo para sa parehong mga nasa hustong gulang at bagong panganak. Ginagawa nitong posible na makilala ang maraming iba't ibang mga sakit.
Maglagay ng 1 malaking patak ng serum O(I), A(II), B(III) sa isang plato o glass slide gamit ang mga pipette (iba!). Pagkatapos tandaan ang oras, gumamit ng isang malinis na basong baras o isang malinis na sulok ng isang glass slide upang pagsamahin ang mga patak ng serum sa mga patak ng dugo. Ang pagpapasiya ay tumatagal ng 5 minuto, nanginginig ang plato, pagkatapos ay magdagdag ng 1 patak ng solusyon sa asin sa bawat halo ng mga patak at suriin ang mga resulta. Mas maganda kung ang serum ay dumating sa 2 magkaibang serye. Ang mga resulta ng pangkat ng dugo ay dapat tumugma sa parehong serum lot.
Pagsusuri ng mga resulta ng isohemagglutination:
kung lahat ng 3 sera ay nagbigay ng negatibong reaksyon, ibig sabihin, ang timpla ay pantay na kulay pink - ito ay O(I) na uri ng dugo;
Kung negatibong reaksyon tanging serum ng pangkat A(II) ang nagbigay, at ang sera O(I) at B(III) ay nagbigay ng positibong reaksyon, iyon ay, lumitaw ang mga butil - ito ay A(II) na pangkat ng dugo;
Ang serum ng pangkat B(II) ay nagbigay ng negatibong reaksyon, at ang sera ng pangkat O(I) at A(II) ay nagbigay ng positibong reaksyon - ito ay B(III) na pangkat ng dugo.
isohemagglutination. Kung positibo ang reaksyon, lumilitaw ang maliliit na pulang butil ng malagkit na pulang selula ng dugo sa pinaghalong. Ang mga butil ay nagsasama sa mas malalaking butil, at ang huli sa mga natuklap. Ang suwero ay halos kupas;
kung ang reaksyon ay negatibo, ang timpla ay nananatiling pantay na kulay sa loob ng 5 minuto kulay rosas at walang mga butil na natagpuan;
Kapag nagtatrabaho sa 3 sera ng mga pangkat O(I), A(II), B(III), 4 na kumbinasyon ng mga reaksyon ang posible:
lahat ng 3 sera ay nagbigay ng mga positibong reaksyon - ang nasuri na dugo ay pangkat AB(IV). Sa kasong ito, ang isang pag-aaral ay isinasagawa gamit ang AB(IV) group serum.
Tandaan! Ang mga patak ng dugo na sinusuri ay dapat na 5-10 beses na mas maliit kaysa sa mga patak ng serum.
Mga error sa isohemagglutination.
Pagkabigong magsagawa ng agglutination kung saan ito dapat at pagkakaroon ng agglutination kung saan hindi dapat. Maaaring dahil ito sa mahinang titer ng serum at mahinang pagsasama-sama ng red blood cell.
Ang pagkakaroon ng agglutination kung saan hindi dapat magkaroon- Ito ay pseudoagglutination, kapag ang mga tambak ng pulang selula ng dugo ay bumubuo ng "mga haligi ng barya". Ang pag-alog ng plato o pagdaragdag ng asin ay sumisira sa kanila.
Panagglutination, kapag pinagdikit-dikit ng serum ang lahat ng pulang selula ng dugo, kabilang ang mga may sariling uri ng dugo. Sa ika-5 minuto, nawawala ang mga palatandaan ng aglutinasyon.
Mayroon ding tinatawag na cold panagglutination, kapag nagdikit ang mga pulang selula ng dugo dahil sa mababang temperatura ng hangin (sa ibaba 15 ° C) sa silid.
Sa lahat ng mga kasong ito, maaaring ang isang paulit-ulit na reaksyon ay isinasagawa, o gumagamit ng karaniwang mga pulang selula ng dugo.
Pagpapasiya ng Rh dugo
Upang matukoy ang katayuan ng Rh, ibig sabihin, upang makita ang pagkakaroon o kawalan ng mga antigen ng Rh system sa dugo ng mga tao, ginagamit ang karaniwang anti-Rh sera (reagents), na nag-iiba sa pagtitiyak, ibig sabihin, naglalaman ng mga antibodies sa iba't ibang antigen ng sistemang ito. Upang matukoy ang Rh 0 (D) antigen, ang anti-Rhesus serum ay kadalasang ginagamit sa pagdaragdag ng isang 10% gelatin solution, o isang karaniwang anti-Rhesus reagent na inihanda nang maaga na may 33% polyglucin solution ay ginagamit. Upang makakuha ng mas tumpak na mga resulta ng pananaliksik, pati na rin upang matukoy ang mga antigen ng iba pang mga serological system, ang Coombs test ay ginagamit (ito rin ay napakasensitibo sa pagtukoy ng compatibility ng transfused blood). Para sa pananaliksik, ang katutubong dugo o dugo na inihanda na may ilang pang-imbak ay ginagamit. Sa kasong ito, ang dugo ay dapat hugasan mula sa pang-imbak na may sampung beses na dami ng isotonic sodium chloride solution. Kapag tinutukoy ang katayuan ng Rh- Rh 0 (D) dalawang sample ng serum o anti-Rhesus reagent ng dalawang magkaibang serye ang dapat gamitin at sa parehong oras ay karaniwang pulang selula ng dugo na nakuha mula sa dugo mula sa Rh-positive (Rh +) at Rh-negative (Rh -) ang mga indibidwal ay dapat gamitin para sa kontrol. Kapag tinutukoy ang iba pang isoantigens, kontrolin ang mga pulang selula ng dugo na naglalaman o kulang sa antigen kung saan ang mga antibodies sa karaniwang serum ay dapat gamitin nang naaayon.
Ang mga partial heat agglutinin ay ang pinakakaraniwang uri ng antibodies na maaaring maging sanhi ng pagbuo ng autoimmune hemolytic anemia. Ang mga antibodies na ito ay nabibilang sa IgG, bihira sa IgM, IgA.
COOMBS TEST
Pagsubok sa Coombs: panimula. Ang Coombs test ay isang laboratory diagnostic method batay sa hemagglutination reaction.
Ang pangunahing paraan para sa pag-diagnose ng autoimmune hemolytic anemia ay ang Coombs test. Nakabatay ito sa kakayahan ng mga antibodies na tiyak sa mga immunoglobulin (lalo na sa IgG) o mga bahagi ng pandagdag (lalo na sa S3) upang pagsama-samahin ang mga erythrocyte na pinahiran ng IgG o S3.
Ang pagbubuklod ng IgG at C3b sa mga erythrocytes ay sinusunod sa autoimmune hemolytic anemia at drug-induced immune hemolytic anemia. Direktang pagsubok ng Coombs. Ang direktang pagsusuri ng Coombs ay ginagamit upang makita ang mga antibodies o mga bahaging pandagdag na naayos sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo. Ito ay isinasagawa bilang mga sumusunod:
Upang makakuha ng mga antibodies sa mga immunoglobulin ng tao (antiglobulin serum) o pandagdag (anticomplementary serum), ang hayop ay nabakunahan ng human serum, immunoglobulins o pandagdag ng tao. Ang serum na nakuha mula sa hayop ay dinadalisay mula sa mga antibodies sa iba pang mga protina.
Ang mga pulang selula ng dugo ng pasyente ay hinuhugasan ng asin upang ganap na maalis ang serum, na neutralisahin ang mga antibodies sa mga immunoglobulin at umakma at maaaring magdulot ng maling negatibong resulta.
Kung ang mga antibodies o mga bahagi ng pandagdag ay naayos sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo, ang pagdaragdag ng antiglobulin o anti-complement na serum ay nagdudulot ng pagsasama-sama ng mga pulang selula ng dugo.
Ang direktang pagsusuri ng Coombs ay ginagamit sa mga sumusunod na kaso:
Autoimmune hemolysis.
Hemolytic disease ng mga bagong silang.
Ang immune hemolytic anemia na dulot ng droga.
Mga reaksyon ng hemolytic transfusion. Hindi direktang pagsubok ng Coombs. Ang hindi direktang pagsusuri ng Coombs ay nakakakita ng mga antibodies sa mga pulang selula ng dugo sa serum. Upang gawin ito, ang suwero ng pasyente ay inilublob sa pangkat 0 na donor na mga pulang selula ng dugo, at pagkatapos ay isinasagawa ang isang direktang pagsusuri sa Coombs.
Ang indirect Coombs test ay ginagamit sa mga sumusunod na kaso:
Pagpapasiya ng indibidwal na pagkakatugma ng dugo ng donor at tatanggap.
Pagtuklas ng mga alloantibodies, kabilang ang mga antibodies na nagdudulot ng mga reaksyon ng hemolytic transfusion.
Pagpapasiya ng surface erythrocyte antigens sa medikal na genetika at forensic na gamot.
Pagkumpirma ng identical twins sa panahon ng bone marrow transplantation.
Upang magsagawa ng biological test, ang dugo ay magsisimulang maisalin sa lalong madaling panahon (mas mabuti sa isang stream). Pagkatapos ng pagsasalin ng 25 ML ng dugo, ang tubo ng system ay naka-clamp ng isang clamp. Pagkatapos ay mayroong pause sa loob ng 3 minuto, kung saan sinusubaybayan ang kundisyon ng tatanggap. Upang magsagawa ng biological test, 25 ML ng dugo ay iniksyon ng tatlong beses. Sa pagtatapos ng pagsubok (pagkatapos ng pagsasalin ng unang 75 ml ng dugo sa mga fractional na dosis ng 25 ml sa pagitan ng 3 minuto), ang sistema ay nababagay sa kinakailangang rate ng pagsasalin ng dugo. Kapag nagsalin ng higit sa isang bote ng dugo sa isang pasyente, kinakailangang alisin ang karayom mula sa ugat. Sa kasong ito, ang karayom ay tinanggal mula sa test tube ng vial kung saan ang dugo ay naubos at ipinasok sa susunod na vial. Ang tubo ng system (goma o plastik) ay naka-clamp sa sandaling ito gamit ang isang clamp. Kung sa panahon ng pagsasalin ng dugo ay kinakailangan na magbigay ng anumang iba pang gamot sa intravenously sa tatanggap, ito ay ginagawa sa pamamagitan ng pagbutas sa rubber tube ng system. Ang mga punctures ng plastic tube ay hindi katanggap-tanggap, dahil hindi sila nahuhulog. Pagkatapos ng bawat pagsasalin ng dugo, ang pasyente ay dapat na subaybayan upang makilala at maalis kaagad posibleng komplikasyon, kasama ang mga reaksiyong alerdyi. 2 oras pagkatapos ng pagtatapos ng pagsasalin ng dugo, ang temperatura ng katawan ay dapat masukat. Kung ito ay tumaas, ang pagsukat ay dapat na ulitin bawat oras para sa susunod na 4 na oras. Ang parehong mahalaga ay ang pagsubaybay sa pag-ihi at komposisyon ng ihi, na ginagawang posible upang maitaguyod ang pagkakaroon ng isang nakakalason na reaksyon pagkatapos ng pagsasalin. Ang simula ng oliguria at anuria pagkatapos ng pagsasalin ng dugo, ang pagkakaroon ng mga selula ng dugo at protina sa ihi ay isang direktang indikasyon ng pag-unlad ng post-transfusion hemolysis.
COMBES REACTION(R. R. A. Coombs, English immunologist, ipinanganak noong 1921; kasingkahulugan: Coombs test, antiglobulin test) - isang immunological na reaksyon upang makita ang mga hindi kumpletong antibodies sa auto- at isoantigens ng mga erythrocytes.
Ang reaksyon ay binuo noong 1908 ni S. Moreschi, ngunit natanggap malawak na aplikasyon mula noong 1945 lamang matapos ipakita ng Coombs ang papel nito sa pagtukoy ng pagiging tugma sa panahon ng pagsasalin ng dugo, Rh conflict, diagnosis ng mga kondisyon ng autoallergic at autoimmune, atbp.
Ang reaksyon ng Coombs ay batay sa paggamit ng isang espesyal na inihanda na gamot - antiglobulin serum. Sa pagkakaroon ng antiglobulin serum, ang mga pulang selula ng dugo na puno ng hindi kumpletong antibodies ay nagsasama-sama. Ang mga pulang selula ng dugo na walang mga antibodies sa kanilang ibabaw ay nananatiling hindi pinagsama-sama.
K.r. ay malawakang ginagamit para sa: a) pagtatatag ng estado ng isosensitization, ibig sabihin, pag-detect ng mga isoantibodies na nangyayari sa panahon ng paulit-ulit na pagsasalin ng dugo (tingnan ang Pagsasalin ng dugo) o mga pagbubuntis (tingnan ang Pagbubuntis); b) pagsasagawa ng compatibility test sa panahon ng pagsasalin ng dugo; c) pagpapasiya ng uri ng Rh factor sa erythrocytes (tingnan); d) pagtuklas ng mga autoimmune antibodies sa mga pulang selula ng dugo ng mga pasyente na may nakuha na hemolytic anemia (tingnan) at iba pang mga autoallergic na sakit (tingnan), pati na rin sa ilang mga impeksyon na nangyayari sa isang sangkap na allergy; e) pagtuklas ng isoimmune antibodies na naayos sa mga pulang selula ng dugo ng mga bata na dumaranas ng hemolytic disease ng mga bagong silang (tingnan). K.r. ginagamit din sa forensic at anthropological na pananaliksik.
Ang pangunahing materyal para sa pagtatanghal ng K. r. ay serum o citrated plasma at pulang selula ng dugo ng pasyente. Mayroong dalawang variant ng K. r.: hindi direkta at direkta. Sa hindi direktang K. r. Ang serum ng pasyente ay pinag-aralan at ang mga malayang nagpapalipat-lipat na antibodies ay tinutukoy. Sa direktang K. r. suriin ang mga pulang selula ng dugo para sa pagkakaroon ng mga antibodies na naayos sa mga ito hugis elemento dugo.
Antiglobulin serum para sa K. r. nakuha ng immunization laboratory. mga hayop (rabbit, kambing, tupa, atbp.) na may mga globulin na nakahiwalay sa serum ng tao sa pamamagitan ng fractionation na may ethanol, ammonium sulfate o gel filtration sa Sephadex. Kapag kumukuha ng antiglobulin serum, kinakailangan na alisin ang mga heteroagglutinating antibodies na nagreresulta mula sa pagbabakuna ng mga hayop na may mga globulin ng tao. Ito ay nakakamit sa pamamagitan ng adsorption ng immune serum na may pinaghalong erythrocytes mula sa mga taong may magkaibang grupo dugo o diluting ito ng isotonic sodium chloride solution. Sa huling kaso, ang titer ng hetero-agglutinins ay dapat na mababa (1: 16 - 1: 32), upang ang antiglobulin serum, pagkatapos ng pagbabanto, ay nagpapanatili ng magandang aktibidad sa K. r.
Hindi direktang reaksyon ng Coombs
Ang hindi direktang reaksyon ng Coombs ay isinasagawa sa dalawang yugto. Ang unang yugto ay isinasagawa sa mga maliliit na tubo ng pagsubok na espesyal na idinisenyo para sa layuning ito, na may sukat na 4 X 0.5 cm Sa bawat test tube, magdagdag ng isang patak sa tatlong patak ng serum (buo, 1: 2, atbp.), kung saan ang presensya. ng mga antibodies ay pinaghihinalaang sediment ng mga erythrocytes ng kilalang antigenic na komposisyon. Ang mga nilalaman ng test tube ay pinaghalo at inilagay sa isang thermostat sa t° 37° sa loob ng 1 oras. Pagkatapos ang mga pulang selula ng dugo ay hugasan ng tatlong beses gamit ang isotonic sodium chloride solution. Ang pangalawang yugto ay binubuo ng paghahanda ng 5% na suspensyon ng mga hugasan na erythrocytes at pagsasama-sama ng isang patak ng erythrocytes na may isang patak ng antiglobulin serum sa isang puting (porselana) na plato na may basang ibabaw. Ang mga resulta ay isinasaalang-alang hanggang sa 10 minuto. Exception maling positibong resulta ginawa sa pamamagitan ng pagsasagawa ng control studies. Ang paggamit ng isotonic sodium chloride solution sa halip na antiglobulin serum ay hindi dapat sinamahan ng agglutination ng mga pulang selula ng dugo. Nagsasagawa ng hindi direktang K. r. laban sa mga erythrocytes ng isang kilalang isoantigen phenotype ay nagbibigay-daan sa isa na maitaguyod ang pagtitiyak ng mga antibodies. Halimbawa, isang pag-aaral ng serum ng pasyente na may mga pulang selula ng dugo 0(I), CDE, Kk, Fya; 0(1), CDe, Kk, Fya; 0(I), сDe, Kk, Fya; 0(I), cDE, Kk, Fya; 0(I), cde, kk, nagpakita si Fya positibong resulta na may sample ng dugo sa mga kaso 1 at 4; ibang mga sample ng dugo (mga kaso 2, 3, 5) ay nagpakita ng negatibong resulta. Ang serum ay naglalaman ng mga anti-E antibodies. Sa tulong ng hindi direktang K. r. ang mga hindi kumpletong antibodies laban sa mga antigen ay maaaring makita: C, D, E, c, e; K, k; Fya, Fyb; Lea, Leb; Jka, Jkb, atbp. (tingnan ang Blood groups).
Direktang reaksyon ng Coombs
Ang direktang reaksyon ng Coombs sa pamamaraan nito ay tumutugma sa ikalawang yugto ng hindi direktang K. R.: ang mga pulang selula ng dugo ng pasyente (5% na suspensyon), hugasan ng tatlong beses na may isotonic sodium chloride solution, ay pinagsama sa antiglobulin serum. Direk K.r. ginagawa kapag may dahilan upang maniwala na ang mga pulang selula ng dugo ng pasyenteng pinag-aaralan ay nasensitibo na sa mga antibodies sa vivo. Positibong tuwid na linya K. r. nagsisilbing diagnostic sign para sa hemolytic disease ng mga bagong silang, na sanhi ng sensitization ng katawan ng babae sa fetal antigens at ang pagtagos ng mga antibodies sa pamamagitan ng inunan sa katawan ng bata, pati na rin ang nakuha na hemolytic anemia.
Sa likod mga nakaraang taon K.r. makabuluhang napabuti. Sa tulong nito, posible hindi lamang upang matiyak ang pagkakaroon ng mga antibodies sa mga pulang selula ng dugo, kundi pati na rin upang maitaguyod ang klase ng mga immunoglobulin (tingnan). Upang gawin ito, gumamit ng serum laban sa ilang mga klase ng immunoglobulins: IgG, IgM, IgA. Ang mga isoimmune antibodies laban sa Rhesus, Kell antigens, Duffy antigens at iba pang antigens, pati na rin ang mainit na autoimmune antibodies, ay karaniwang inuri bilang IgG. Ang mga malamig na autoimmune antibodies, pati na rin ang mga isoimmune antibodies laban sa Le at ilang iba pang antigens, ay karaniwang nabibilang sa IgM. Ang mga bihirang autoimmune antibodies lamang ang may likas na IgA (tingnan ang Autoantibodies).
Bibliograpiya: Dygin V.P. Mga sakit sa autoimmune sa klinika ng mga panloob na sakit, L., 1970, bibliogr. ; Kassirsky I. A. at Alekseev G. A. Clinical hematology, M., 1970; Kosyakov P. N. Mga isoantigen at isoantibodies ng tao sa kalusugan at sakit, M., 1974, bibliogr.; Boivin P. e. a. Les anemia hemolytiques, p. 93, P., 1971, bibliogr.; Mga klinikal na aspeto ng immunology, ed. ni P. G. H. Geli a. o., Oxford, 1975; Coombs R. R. A., Mourant A. E. a. Race R. R. In-vivo isosensitisation ng mga pulang selula sa mga sanggol na may haemolytic disease, Lancet, v. 1, p. 264, 1946.
Ang pagsusulit ng Coombs ay klinikal na pagsusuri pagsusuri ng dugo, na ginagawa upang matukoy kung ang dugo ay naglalaman ng ilang partikular na antibodies na maaaring hindi ligtas. Ang mga antibodies na ito ay dumidikit sa mga pulang selula ng dugo at maaaring sumalakay immune system, pati na rin nagdudulot ng pinsala sa iba pang mga paraan. Sa medikal na terminolohiya, ang pag-aaral na ito ay tinatawag ding antiglobulin test (AGT).
Mga uri ng mga sample ng Coombs
Mayroong dalawang uri ng mga pagsubok sa Coombs - direkta at hindi direkta.
Direktang pagsubok ng Coombs, na kilala rin bilang direct (DAT), ay nakakakita ng mga auto-antibodies na nakakabit sa ibabaw ng mga pulang selula ng dugo. Ang mga antibodies na ito ay minsan ay nagagawa sa katawan dahil sa ilang mga sakit o kapag umiinom ng ilang mga gamot, tulad ng procainamide, methyldopa, o quinidine.
Ang mga antibodies na ito ay mapanganib dahil minsan ay nagdudulot sila ng anemia sa pamamagitan ng pagsira sa mga pulang selula ng dugo.
Minsan inuutusan ang pagsusulit na ito upang masuri ang sanhi ng jaundice o anemia.
Karaniwan, negatibo ang reaksyon ng Coombs.
Positibo para sa:
- hemolytic disease ng mga bagong silang;
- autoimmune hemolysis;
- mga reaksyon ng hemolytic transfusion;
- immune hemolytic anemia na dulot ng droga.
Hindi direktang pagsubok ng Coombs, na kilala rin bilang , ay ginagamit upang makita ang mga antibodies sa mga pulang selula ng dugo na matatagpuan sa serum ng dugo (ang serum ay ang malinaw na dilaw na likido ng dugo na nananatili pagkatapos na maalis ang mga pulang selula ng dugo at coagulant).
Ang hindi direktang pagsusuri ng Coombs ay ginagamit sa panahon ng pagsasalin ng dugo upang matukoy kung ang dugo ng donor ay tumutugma sa dugo ng tatanggap. Ito ay tinatawag na compatibility test at nakakatulong na maiwasan ang anumang masamang reaksyon sa dugo ng donor. Ang pagsusuring ito inirerekomenda din para sa mga buntis. Ang ilang mga kababaihan ay may IgG antibodies, na maaaring tumawid sa inunan sa dugo ng pangsanggol at makapinsala sa bagong panganak, na nagdudulot ng hemolytic disease na kilala bilang hemolytic anemia.
Pamamaraan
Ang dugo ay kinukuha gamit ang isang syringe mula sa isang ugat, kadalasang may likurang bahagi palad o sa baluktot ng siko. Bago ito, ang lugar ng pagbutas ay lubusang nadidisimpekta, at pagkatapos kumuha ng pagsusuri sa dugo, inilapat ang malinis na gasa o cotton wool.
Ang resultang dugo ay dinadalisay sa laboratoryo at ang mga pulang selula ng dugo ay pinaghihiwalay. Pagkatapos ay susuriin ang sample nang sunud-sunod gamit ang iba't ibang serum at Coombs reagents, na pinaghahambing. Kung walang agglutination (pagkumpol ng mga pulang selula ng dugo), nangangahulugan ito ng positibong resulta.
Gayunpaman, kung negatibo ang pagsusuri, nangangahulugan ito na mayroong mga antibodies sa dugo na kumikilos laban sa mga pulang selula ng dugo. Ito ay maaaring magpahiwatig iba't ibang sakit, tulad ng anemia (parehong natural at sanhi ng pag-inom ng mga gamot), syphilis, o impeksyon sa mycoplasma. Matapos matanggap ang mga resulta, ang dumadating na manggagamot ay magrereseta ng naaangkop na paggamot.
Video
