Antiglobulinski princip. Antieritrocitna antitijela nepotpunog tipa i molekule komplementa (C) koje se nalaze na površini eritrocita otkrivaju se – direktnim testom – njihovom aglutinacijom u kontaktu sa životinjskim serumom koji sadrži antitijela na humani antiglobulin (antiglobulinski serum). Nepotpuna antitijela slobodna u serumu otkrivaju se - indirektnim testom - pričvršćivanjem na mješavinu normalnih crvenih krvnih zrnaca grupe 0, čiji svi antigeni pripadaju poznatom Rh sistemu, a zatim se aglutiniraju pod utjecajem antiglobulinskog seruma.
Materijali, reagensi za Coombsov antiglobulinski test: epruvete 10/100 ml; graduirane pipete 1,2 ml; Pasteurove pipete; tronošci; nebrušena staklena stakalca; 8,5‰ rastvor NaCl; crvena krvna zrnca. Pacijentova crvena krvna zrnca, kao i ona koja pripadaju grupi 0, dobiće se iz svježe izvađene krvi pomoću sredstva protiv zgrušavanja (EDTA otopina).
Crvena krvna zrnca grupe 0 trebaju biti odabrana na način da potiču od normalnih pojedinaca i da sadrže sve Rh antigeni. Mogu se čuvati do 7 dana u autolognoj plazmi na +4°C. U nedostatku crvenih krvnih zrnaca grupe 0, može se koristiti poznati antigeni mozaik, mješavina crvenih krvnih zrnaca grupe 0, Rh-pozitivnih i Rh-negativnih crvenih krvnih stanica.
Serum pacijent mora biti svježe odabran.
Antiglobulinski serum u produkciji Instituta. I. Cantacuzino, dostupan je u liofilizovanom obliku u ampulama od 1 ml. Nakon rastvaranja, čuvati serum na -20°C.
Tehnika Coombsovog antiglobulinskog testa:
A) Direktan Coombsov test: Isperite pacijentova crvena krvna zrnca 3 puta sa 8,5‰ rastvorom NaCl.
Nanijeti veliku kap razrjeđenja antiglobulinskog seruma na nekoliko staklenih pločica, a pored nje malu kap sedimenta eritrocita pacijenta; pomiješajte kapi sa uglom čaše. Ostavite pripremljeni materijal na stolu 5 minuta, a zatim ispitajte da li ima aglutinata. Ako je rezultat pozitivan, odredite maksimalni titar aglutinacije.
b) Indirektni Coombsov test: eritrociti grupe 0, Rh-pozitivni i Rh-negativni, isprati 3 puta sa 8,5‰ rastvorom NaCl i izložiti pacijentovom serumu brzinom od 2 kapi eritrocita na 8-10 kapi seruma, zatim inkubirati 60 minuta na temperatura od 37°S. Nakon toga ponovo tri puta operite crvena krvna zrnca i tretirajte ih antiglobulinskim serumom, prema uputama za direktni Coombs test.
Kad dođe o hladno aktivnim antitijelima senzibilizirati crvena krvna zrnca grupe 0 na 60 minuta. na temperaturi od +4°C.
Bilješka 1) Nemojte izvoditi direktan Coombsov test na crvenim krvnim zrncima pohranjenim jedan ili nekoliko dana na +4°C ili sobnoj temperaturi, jer rezultati mogu biti lažno pozitivni zbog fiksacije nepotpunih hladno aktivnih antitijela prisutnih u normalnom serumu. 2) U slučajevima teške hiperproteinemije, operite crvena krvna zrnca 4-5 puta i provjerite odsustvo serumskih proteina u posljednjoj tekućini za pranje koristeći sulfosalicilnu kiselinu.
Mogući ostatak od 2 μg IgG/ml u sedimentu eritrocita može neutraliziraju antiglobulinski serum. Coombsov test se može izvesti i korištenjem monospecifičnih anti-IgG, -IgM, -IgA -C3 i -C4 seruma kako bi se razjasnila vrsta stanica koje se nalaze na površini crvenih krvnih zrnaca, na primjer, kod pacijenata koji boluju od autoimune hemolitičke anemija.
Ili rastvoren u plazmi.
Sinonimi: antiglobulinski test, Coombsov test, AGT, indirektni/direktni antiglobulinski test, IAT, NAT, DAT, indirektni/direktni Coombsov test
Coombsov test je
analiza koja otkriva imunizaciju i antitijela na crvena krvna zrnca.
Vrste Coombs testa
- direktan Coombsov test– otkriva antitijela fiksirana na površini crvenih krvnih zrnaca. Provodi se kod sumnje na autoimunu hemolitičku anemiju, hemolizu kod autoimunih bolesti, nakon uzimanja lijekova (metildopa, penicilin, kinin), nakon transfuzije krvi i hemolitičke bolesti novorođenčeta.
Crvena krvna zrnca su in vivo senzibilizirana - antitijela su već čvrsto vezana za njih, a dodatak antiglobulinskog seruma (anti-IgG) uzrokuje da se senzibilizirane stanice slijepe, što je vidljivo golim okom.
- indirektni Coombsov test– otkriva antieritrocitna antitijela u krvnoj plazmi, urađena prije transfuzije krvi i tokom trudnoće.
Anti-eritrocitna antitijela su vrsta autoantitijela, tj. antitela protiv sopstvenih tkiva. Autoantitelo nastaje kada imuni sistem nenormalno reaguje na određene lekove, kao što su visoke doze penicilina.
Crvena krvna zrnca na svojoj površini sadrže različite hemijske strukture (glikolipide, saharide, glikoproteine i proteine), u medicini tzv. antigeni. Osoba nasljeđuje od svojih roditelja određenu mapu antigena na svakom crvenom krvnom zrncu.
Antigeni se kombinuju u grupe i pored toga se krv deli u nekoliko grupa - prema AB0 sistem, Rhesus, Kell, Lewis, Kidd, Duffy. Najpoznatiji i najznačajniji u radu ljekara su AB0 i Rh faktor (Rh).
AB0 sistem
Rezus pripadnost osoba je određena prisustvom ovih antigena. Posebno važan antigen eritrocita je antigen D. Ako je prisutan, onda se govori o Rh-pozitivnoj krvi RhD, a ako nije prisutna, govori se o Rh-negativnom Rhd.
Ako se odgovarajuće antitelo veže za antigene eritrocita, eritrocit je uništen - hemolizira.
Indikacije za upotrebu direktan antiglobulinski test
- primarni autoimuni hemolitička anemija
- hemolitička anemija kod autoimunih, tumorskih, infektivnih bolesti
- autoimuna hemolitička anemija izazvana lijekovima
- hemolitička anemija nakon transfuzije (dani - mjeseci)
- hemolitička bolest novorođenčeta (nekompatibilnost jedne od krvnih grupa)
Indikacije za upotrebu indirektni antiglobulinski test
- prije transfuzije krvi
- tokom trudnoće Rh negativne žene
Autoimuna hemolitička anemija
Autoimuna hemolitička anemija (primarna)– klasična autoimuna bolest nepoznatih uzroka. Pretpostavlja se da dolazi do poremećaja u procesu interakcije na nivou imunog sistema, što dovodi do percepcije sopstvenih crvenih krvnih zrnaca kao stranih. Ćelije proizvode antitela klase IgG (reaguju na t 37°C) i/ili IgM (na t 40°C), pričvršćuju se na površinu eritrocita, pokrećući niz enzima (sistem komplementa) i „perforiraju“ zid eritrocita, što dovodi do njegovog uništenja - hemoliza.
Simptomi hemolitičke anemije
- umor, opšta slabost, razdražljivost
- dispneja
- bol u stomaku, mučnina
- tamne boje urina
- bol u leđima
- ikterična promena boje kože i sluzokože
- povećana jetra, slezina
- smanjenje broja crvenih krvnih zrnaca i hemoglobina u općem testu krvi
Pozitivan rezultat ravno Coombs testovi 100% potvrđuje dijagnozu autoimune hemolitičke anemije, što dokazuje njeno autoimuno porijeklo. Istovremeno, negativan rezultat ne omogućava uklanjanje dijagnoze.
Sekundarna autoimuna hemolitička anemija i pozitivan Coombsov test mogu se javiti kod sljedećih bolesti:
- sistemski eritematozni lupus
- Evansov sindrom
- Waldenstromova makroglobulinemija
- paroksizmalna hladna hemoglobinurija
- hronična limfocitna leukemija
- limfomi
- Infektivna mononukleoza
- Infekcija Mycoplasma pneumoniae
- sifilis
Pozitivan antiglobulinski test na ove bolesti ne služi kao dijagnostički kriterijum, već je jedan od simptoma bolesti.
Hemolitička bolest novorođenčeta
Uzrok hemolitička bolest novorođenčadi - nekompatibilnost krvnih grupa majke i fetusa, u većini slučajeva prema Rh sistemu, u pojedinačnim slučajevima - po sistemu AB0, kazuistički - prema drugim antigenima.
Rh konflikt se razvija ako fetus Rh negativne žene naslijedi Rh pozitivnu krv od oca.
Bolest se razvija kod novorođenčeta samo ako je majka već razvila antitijela na odgovarajuće antigene, što se događa nakon prethodnih trudnoća, porođaja, pobačaja i nekompatibilnih transfuzija krvi. Većina uobičajen razlog pokretanje sinteze antitijela na antigene membrane eritrocita - porođaj (feto-maternalno krvarenje). Prvi porođaj uglavnom se odvija bez komplikacija, ali kasniji su prepuni hemolitičke bolesti novorođenčeta u prvim danima nakon rođenja.
Simptomi hemolitičke bolesti novorođenčeta
- žutilo kože
- anemija
- bljedilo kože i sluzokože
- povećana jetra i slezena
- problemi sa disanjem
- oticanje celog tela
- ekscitacija i postepena depresija centralnog nervnog sistema
Anemija nakon transfuzije krvi
Indirektni Coombsov test provedeno prije transfuzije krvi radi procjene kompatibilnosti, i direktan Coombsov test- nakon njega, ako se sumnja na posttransfuzijsku hemolizu, tj. ako imate simptome kao što su groznica, zimica, suzenje (pročitajte u nastavku). Svrha analize je identifikacija antitijela na transfuzirana crvena krvna zrnca koja su se vezala za crvena krvna zrnca primaoca i uzrok su posttransfuzijske hemolize, kao i preranog uklanjanja crvenih krvnih zrnaca donora iz krvotoka primalac (onaj koji je primio krv).
Simptomi hemolitičke reakcije nakon transfuzije krvi
- povećanje telesne temperature
- osip
- bol u leđima
- crvene boje urina
- mučnina
- vrtoglavica
Dekodiranje Coombsovog testa
Vrijedi podsjetiti da su osnovna pravila za dešifriranje direktnih i indirektnih antiglobulinskih testova ista. Jedina razlika je lokacija antitijela - u krvi ili već na crvenim krvnim zrncima - na crvenim krvnim zrncima.
- Ako direktni Coombsov test je negativan– to znači da antitijelo ne “sjeda” na crvena krvna zrnca i potrebno je dalje tražiti uzrok simptoma i izvršiti indirektni Coombsov test
- Ako pozitivan rezultat Coombsov test otkriven nakon transfuzije krvi, infekcija, lijekova - pozitivnost može trajati do 3 mjeseca (život crvenih krvnih zrnaca 120 dana - 3 mjeseca)
- pozitivan rezultat testa na antiglobulin sa autoimuna bolest može trajati mjesecima ili čak godinama
Coombs test standardi
- direktan Coombsov test- negativan
- indirektni Coombsov test- negativan
Kvalitativno pozitivan rezultat mjeri se brojem pluseva od jedan do četiri (+, ++, +++, ++++), a kvantitativno u digitalnom obliku - 1:16, 1:256, itd.
4 činjenice o Coombsovom testu
- prvi put predložen u Kembridžu 1945
- prag osjetljivosti - najmanje 300 fiksiranih molekula antitijela na jednom crvenom krvnom zrncu
- broj antitijela koja pokreću hemolizu - pojedinačno za svaku osobu (od 16-30 do 300)
- dinamika drugih laboratorijskih pokazatelja hemolitičke anemije (hemoglobin, bilirubin, retikulociti) može se normalizirati, a Coombsov test će ostati na istom nivou
Nedostaci antiglobulinskog testa
- jačina vezivanja antigena za antitelo se ne može odrediti
- nepoznat broj vezanih antitela
- ne određuje tip antitela
- pozitivan Coombs test neće pomoći u određivanju uzroka
- 0,5% zdravih ljudi ima pozitivan test Coombs bez ikakvih znakova hemolitičke anemije
- nije pogodan za praćenje uspješnosti liječenja, jer neće ukazivati na aktivnost hemolize eritrocita
Coombsov test je klinička analiza test krvi, koji se radi kako bi se otkrilo da li krv sadrži određena antitijela koja mogu biti nesigurna. Ova antitijela se lijepe za crvena krvna zrnca i mogu napasti imunološki sistem, kao i uzrokovati štetu na druge načine. U medicinskoj terminologiji, ova studija se naziva i antiglobulinski test (AGT).
Vrste Coombsovih uzoraka
Postoje dvije vrste Coombsovih testova - direktni i indirektni.
Direktan Coombsov test, također poznat kao direktni (DAT), otkriva auto-antitijela koja se vezuju za površinu crvenih krvnih zrnaca. Ova antitijela se ponekad stvaraju u tijelu zbog određenih bolesti ili prilikom uzimanja određenih lijekova, kao što su prokainamid, metildopa ili kinidin.
Ova antitijela su opasna jer ponekad uzrokuju anemiju uništavanjem crvenih krvnih stanica.
Ovaj test se ponekad naređuje kako bi se dijagnosticirao uzrok žutice ili anemije.
Normalno, Coombsova reakcija je negativna.
Pozitivno za:
- hemolitička bolest novorođenčadi;
- autoimuna hemoliza;
- hemolitičke transfuzijske reakcije;
- imunohemolitička anemija izazvana lijekovima.
Indirektni Coombsov test, također poznat kao , koristi se za otkrivanje antitijela na crvena krvna zrnca koja se nalaze u krvnom serumu (serum je bistra žuta tekućina krvi koja ostaje nakon što su crvena krvna zrnca i koagulant eliminirani).
Indirektni Coombsov test se koristi tokom transfuzije krvi kako bi se utvrdilo da li krv davaoca odgovara krvi primaoca. Ovo se zove test kompatibilnosti i pomaže u sprečavanju bilo kakve štetne reakcije na krv davaoca. Ova analiza preporučuje se i trudnicama. Neke žene imaju IgG antitijela, koja mogu proći kroz placentu u fetalnu krv i oštetiti novorođenče, uzrokujući hemolitičku bolest poznatu kao hemolitička anemija.
Procedura
Krv se uzima pomoću šprica iz vene, obično sa stražnja strana dlanu ili na pregibu lakta. Prije toga, mjesto uboda se temeljito dezinficira, a nakon uzimanja krvi stavlja se čista gaza ili vata.
Dobivena krv se pročišćava u laboratoriju i crvena krvna zrnca se odvajaju. Uzorak se zatim testira uzastopno upotrebom različitih seruma i Coombsovih reagensa, koji se kontrastiraju. Ako nema aglutinacije (skupljanja crvenih krvnih zrnaca), to znači pozitivan rezultat.
Međutim, ako je test negativan, to znači da u krvi postoje antitijela koja djeluju protiv crvenih krvnih stanica. Ovo može ukazivati razne bolesti, kao što je anemija (i prirodna i uzrokovana uzimanjem lijekova), sifilis ili infekcija mikoplazmama. Nakon dobijanja rezultata, ljekar će propisati odgovarajući tretman.
Video
Od mnogih postojećih antigena u medicinska praksa najveća vrijednost fokusira se na tri vrste aglutinogena u krvi. Jedan od njih je tip odgovoran za ispoljavanje Rh faktora: ako je prisutan na membrani eritrocita, krvna grupa se dijagnosticira kao Rh+, ako je odsutna - Rh-. Ako eritrociti s Rh+ aglutinogeni uđu u Rh negativnu krv, tijelo pokreće imunološki odgovor i počinje proizvoditi antitijela na ovaj antigen, što uzrokuje patološka stanja.
REFERENCA! Rh faktor je složen višekomponentni sistem od nekoliko desetina antigena. Najčešći od njih su aglutinogeni tipa D (85% slučajeva), kao i E i C.
Coombsov test se izvodi samo ako postoje direktni dokazi. Opća lista razloga za propisivanje Coombsovog testa:
- planiranje i vođenje trudnoće (roditelji imaju različit Rh);
- darivanje i priprema za transfuziju krvi (neusklađenost krvi prema Rh nije ništa manje destruktivna od nepodudaranja po sistemu AB0);
- planirano hirurška intervencija(u slučaju nadoknade gubitka krvi transfuzijom krvi);
- dijagnoza hemolitičkih bolesti.
Specifičnije indikacije zavise od vrste studije koja se izvodi.
Direktan Coombsov test
Direktan test otkriva antitijela na površini crvenih krvnih stanica. Ovo je neophodno za dijagnosticiranje postojećeg hemolitičke patologije:
- autoimune (crvena krvna zrnca i hemoglobin su uništeni kao rezultat napada vlastitih antitijela);
- ljekovito ( patološki proces počinje da prihvata neke lijekovi kao što su kinidin ili prokainamid);
- nakon transfuzije (ako se krvna grupa ne poklapa tokom transfuzije), kao i u obliku Rh konflikta tokom trudnoće (eritroblastoza novorođenčadi).
REFERENCA! Hemolitička anemija je bolest povezana s preranim uništavanjem crvenih krvnih stanica kao rezultatom hemolize, što dovodi do nedovoljne zasićenosti krvi kisikom i hipoksije mozga i/ili unutarnjih organa.
Hemoliza krvnih elemenata uočava se kod onkoloških, infektivnih i reumatskih bolesti, pa se direktni Coombsov test može koristiti kao dodatno sredstvo za dijagnosticiranje patološkog stanja. Vrijedi zapamtiti: negativna vrijednost testa ne isključuje mogućnost hemolize, ali je razlog za dodatni pregled.
Indirektni Coombsov test
Indirektno testiranje se češće koristi za prevenciju patoloških situacija. Pomaže u otkrivanju antitijela u krvnoj plazmi, što je neophodno za procjenu transfuzijske kompatibilnosti i dijagnosticiranje rizika od Rh konflikta tokom trudnoće.
Više od 80% ljudi ima pozitivan Rh faktor (Rh+), respektivno, nešto manje od 20% je Rh negativno. Ako Rh- majka razvije Rh+ dijete, njeno tijelo počinje proizvoditi antitijela koja napadaju crvena krvna zrnca fetusa, uzrokujući hemolizu.
Uzimajući u obzir činjenicu da postotak "različitih rezus" brakova dostiže 12-15%, rizik od hemolitičke bolesti novorođenčadi trebao bi biti visok, ali u stvarnosti samo u 1 od 25 takvih slučajeva žene doživljavaju fenomen senzibilizacije. (za 200 uspješnih porođaja postoji 1 primjer hemolitičke patologije). To je dijelom zbog činjenice da prvo Rh-pozitivno dijete obično ne izaziva otvorenu agresiju iz majčinog tijela; Velika većina slučajeva javlja se kod druge i sljedeće djece. Primjenjuje se isti princip kao i kod konvencionalne senzibilizacije na određeni alergen.
Nema reakcije pri prvom kontaktu. Tijelo se tek upoznaje sa novim antigenom, koji proizvodi antitijela klase IgM, koja su odgovorna za brzi imunološki odgovor, ali rijetko prodiru kroz placentnu barijeru u krv djeteta. Sve patološke reakcije se manifestiraju na drugom „sastanku“, kada tijelo počinje proizvoditi antitijela klase IgG koja lako prodiru u fetalni krvotok, započinjući proces hemolize.
Indirektni Coombs test tokom trudnoće omogućava vam da otkrijete prisustvo antitijela u majčinom tijelu i identificirate ih na vrijeme početna faza senzibilizacija. Za pozitivan odgovor potrebna je registracija uz mjesečni test titra antitijela i obavezna hospitalizacija 3-4 sedmice prije rođenja.
REFERENCA! Inkompatibilnost Rh faktora ni na koji način ne utiče na stanje majke, hemolitička bolest se razvija samo kod djeteta. U teškim slučajevima i u nedostatku pravovremene reakcije, fetus može umrijeti u maternici ili odmah nakon rođenja.
Priprema za postupak i njegovo sprovođenje
Za dijagnozu se koristi venska krv. Za Coombsov test nije potrebna posebna dugoročna priprema. Pokušajte slijediti standardni skup pravila prije uzimanja krvi iz vene za analizu:
- odustati od alkohola 3 dana, lijekovi(ako je moguće);
- Planirajte svoj posljednji obrok kasnije od 8 sati prije uzimanja krvi na analizu;
- odustati od pušenja, fizičkog, mentalnog i emocionalnog stresa u roku od 1 sata;
- Prije zahvata popijte čašu čiste negazirane vode.
Metoda istraživanja zasniva se na reakciji hemaglutinacije.
Prilikom izvođenja direktnog testa uzorak krvi se izlaže prethodno pripremljenom antiglobulinskom serumu sa poznatim indikatorima, smjesa se drži neko vrijeme i provjerava da li ima aglutinata, koji nastaju kada su antitijela prisutna na crvenim krvnim zrncima. Nivo aglutinata se dijagnosticira pomoću aglutinirajućeg titra.
Indirektni uzorak Coombs ima sličnu tehniku, ali složeniji slijed radnji. U izdvojeni krvni serum unose se antigeni eritrociti (sa Rh faktorom), a tek nakon ovih manipulacija se dodaje antiglobulinski serum za dijagnostiku i aglutinacijski titar.
Rezultati istraživanja
Normalno i ravno i indirektni Coombsov test treba dati negativan rezultat:
- negativan direktni test ukazuje na to da su u krvi odsutna specifična antitijela na Rh faktor povezan s crvenim krvnim zrncima i ne mogu uzrokovati hemolizu
- negativan indirektni test pokazuje da u krvnoj plazmi nema slobodnih antitijela na Rh faktor; ova činjenica ukazuje na kompatibilnost krvi davaoca sa krvlju primaoca (ili krvlju majke i djeteta) prema Rh faktoru.
Pozitivan Coombsov test ukazuje na činjenicu Rh senzibilizacije tijela, tj glavni razlog Rh konflikt u slučaju transfuzije krvi ili kada nosite dijete s drugačijim Rh statusom. U tom slučaju rezultati ostaju nepromijenjeni 3 mjeseca (životni vijek crvenih krvnih zrnaca). Ako je uzrok autoimuna hemolitička anemija, onda pozitivan test može pratiti pacijenta nekoliko godina (u nekim slučajevima i cijeli život).
REFERENCA! Antiglobulinski test je drugačiji visoka osjetljivost, ali ima malo informativnog sadržaja. Ne bilježi aktivnost hemolitičkog procesa, ne određuje vrstu antitijela i nije u stanju identificirati uzrok patologije. Da biste dobili potpuniju sliku, ljekar koji prisustvuje mora propisati dodatna istraživanja(mikroskopija krvi, opšta i biohemijske analize, reumatske testove, ESR, nivoe gvožđa i feritina).
Stepen senzibilizacije može se izraziti kvalitativno (od “+” do “++++”) ili kvantitativno u obliku titra:
- 1:2 - niska vrijednost, ne predstavlja opasnost;
- 1:4 - 1:8 - početak razvoja imunološke reakcije; ne predstavlja opasnost, ali zahtijeva stalno praćenje;
- 1:16 -1:1024 - jak oblik senzibilizacije, treba odmah preduzeti akciju.
Razlog za pozitivan test može biti:
- transfuzija netipizirane krvi (ili sa greškom u tipkanju), kada se Rh faktor donora i primaoca ne poklapa;
- Rh konflikt tokom trudnoće (ako se sastav krvnih antigena kod oca i majke ne poklapa);
- autoimuna hemolitička anemija – i kongenitalna (primarna) i sekundarna, koja je posljedica određenih bolesti (Evansov sindrom, infektivna pneumonija, sifilis, hladna hemoglobinurija, limfom);
- hemolitička reakcija na lijek.
Nijedan od gore navedenih problema pacijent ne može riješiti bez medicinsku njegu. U svim slučajevima bit će potrebna hitna konsultacija, registracija ili hitna hospitalizacija.
PAŽNJA! U rijetkim slučajevima moguć je lažno pozitivan Coombsov test. Razlog tome mogu biti česte transfuzije krvi, kao i niz bolesti: reumatoidni artritis, eritematozni lupus, sarkoidoza. Ovaj fenomen se može uočiti i nakon uklanjanja slezine, kao i kada je reakcija poremećena (često mućkanje sadržaja, prisustvo kontaminanata).
IN poslednjih godina među pacijentima raznih uzrasta Broj krvnih bolesti je povećan i koristi se za njihovu dijagnostiku. razne metode i sredstva. Coombsov test je kliničkim ispitivanjima test krvi, a svrha mu je da se identifikuju određene supstance u organizmu koje predstavljaju prijetnju ljudskom zdravlju.
Antitijela se mogu zalijepiti za kožu, a rezultat može biti poremećaj imunološkog sistema. Direktni Coombsov test je antiglobulinski test koji se izvodi kako bi se otkrila antitijela pričvršćena na površinu crvenih krvnih stanica.
Specijalisti obično pribjegavaju izvođenju testa na antitijela u sljedećim situacijama:
- Potreba za transfuzijom krvi. Sa kursa školske anatomije Poznato je da osoba može imati jednu od četiri krvne grupe. Antiglobulinski test vam omogućava da odredite mogućnost transfuzije krvi u drugo tijelo. Možemo reći da pacijent može postati donor za transfuziju samo ako mu krv odgovara tipu pacijenta, odnosno sadrži iste antigene. Ako postoji razlika u antigenima između pacijenta i donora, to može dovesti do uništenja transfuziranih ćelija od strane imunološkog sistema. To bi moglo rezultirati razvojem ozbiljne bolesti i komplikacije, pa čak smrt. Upravo iz ovog razloga važnu ulogu vezan uz potragu za pravom vrstom krvi kada se ukaže potreba za transfuzijom.
- Određivanje rizika od Rh senzibilizacije. Moderna medicina definira Rh kao antigen, a njegova puna definicija je koncept “Rh faktora”. Zahvaljujući Coombsovom testu moguće je dijagnosticirati prisustvo antitijela na Rh faktor u krvi žena tokom trudnoće. Ako buduća majka ima negativan Rh faktor, a otac pozitivan, onda buduće dijete može naslijediti bilo koji od njih. Kada se kod nerođenog djeteta otkrije pozitivan Rh faktor, povećava se rizik od razvoja Rh senzibilizacije – to je proces miješanja krvi i majke tijekom trudnoće ili porođaja.
U slučaju da postoji nekompatibilnost između grupe majke i djeteta, onda imunološki sistem žensko tijelo počinje doživljavati fetus kao strani predmet i pokreće sve vrste napada na njega. Rezultat toga može biti razvoj teške patologije kod djeteta, koja se naziva eritroblastoza. U nekim slučajevima, u odsustvu efikasan tretman smrt fetusa se uočava u maternici ili neposredno nakon njegovog rođenja.
U nekim slučajevima radi se Coombsov test za identifikaciju autoimune hemolitičke bolesti.
Ova bolest je prilično rijetka i manifestira se stvaranjem crvenih krvnih stanica u vlastitim antigenima tijela.
Stručnjaci razlikuju dvije vrste Coombsovih testova, od kojih se svaki koristi u određene svrhe.
Direktan uzorak. Direktan test u medicinskoj praksi naziva se i direktnim antiglobulinskim testom i uz njegovu pomoć moguće je dijagnosticirati antitijela pričvršćena za površinu. U nekim slučajevima, proizvodnja takvih antitijela u ljudskom tijelu nastaje kao rezultat napredovanja različitih ili uzimanja lijekova kao što su:
- Kinidin
- Metildop
- Prokainamid
Opasnost od takvih antitijela leži u činjenici da mogu izazvati razvoj i destruktivno djelovati na. Ponekad se Coombsov test koristi kada je potrebno identificirati uzroke razvoja patologija kao što su anemija i.
Smatra se normom negativnu reakciju Coombs testovi.
Indirektni uzorak. Često stručnjaci pribjegavaju izvođenju indirektni uzorak Coombs, koji ima drugi naziv "indirektni antiglobulinski test". Glavna svrha ovoga je identificirati antitijela na crvena krvna zrnca koja su prisutna u krvnom serumu. Zahvaljujući ovom testu moguće je utvrditi da li krv davaoca odgovara krvi pacijenta ako je potrebna transfuzija. Takva analiza je svojevrsni test kompatibilnosti i zahvaljujući njenoj provedbi moguće je izbjeći razvoj nuspojave na krv donora.
Obično se takva studija preporučuje ženama tokom trudnoće. Neke majke mogu imati antitijela određene klase u svom tijelu koja mogu prodrijeti kroz placentu u krv nerođenog djeteta. Rezultat ovog procesa može biti hemolitička bolest fetusa, kao i razvoj raznih bolesti tokom trudnoće.
Priprema za postupak i njegovo sprovođenje
Obično postupak ne zahtijeva ništa posebna obuka, a može se uraditi apsolutno u bilo koje vrijeme.
Priprema za dijagnozu uključuje sljedeće točke:
- u slučaju da se analiza provodi na novorođenčetu, roditeljima treba objasniti da će uz nju biti moguće dijagnosticirati hemolitičku bolest
- ako postoji sumnja da je pacijent razvio hemolitičku bolest, potrebno mu je objasniti da će takva analiza pomoći da se utvrde razlozi njenog razvoja
- Priprema za analizu ne zahtijeva nikakva ograničenja u hrani ili prehrani
- Prilikom provođenja analize novorođenčeta, roditelje treba obavijestiti da će biti potrebno uzimanje krvi iz vene, kao i navesti vrijeme zahvata
- potrebno je obavijestiti pacijenta da može doći do neugodnosti prilikom postavljanja podveza i uzimanja uzorka krvi
- uzimanje lijekova može poremetiti rezultate Coombsovog testa, pa ih treba prekinuti neko vrijeme prije testa
Prilikom izvođenja direktnog Coombsovog testa, krv se uzima iz vene pomoću šprica. Prije početka postupka, mjesto uboda se temeljito dezinficira, a nakon prikupljanja materijala za pregled stavlja se vata ili sterilna gaza. Ako se analiza radi na novorođenčadi, uzima se krv iz pupčane vrpce.
Ako se nakon uzimanja krvi pojavi hematom, propisuju se topli oblozi koji se stavljaju na mjesto uboda. Nakon zahvata pacijent može nastaviti s uzimanjem lijekova.
U laboratoriji se dobijena krv pročišćava, a istovremeno se odvajaju crvena krvna zrnca.
Specijalista će ispitati uzorak koristeći različite serume i Coombsove reagense u kontrastu s ljudskim globulinom. Ako se crvena krvna zrnca ne lijepe i ne razvije aglutinacija, onda možemo govoriti o pozitivnom rezultatu.
Tokom zahvata mogu se pojaviti sljedeće komplikacije:
- razvoj od mjesta uzimanja uzorka krvi tokom studije
- glavobolja, vrtoglavica ili nesvjestica
- razvoj krvarenja ispod kože
- sa lošim antimikrobnim tretmanom kože na mjestu ubrizgavanja povećava se rizik od ulaska infekcije u tijelo
Rezultati istraživanja
Objašnjenje - moguće bolesti
U zdrava osoba Antitela na organizam ne postoje, odnosno normalno ne bi trebalo da postoje. Ako test pokaže pozitivan test, to može ukazivati na prisustvo antitijela na crvenim krvnim zrncima u tijelu.
Rezultat ovog patološkog stanja može biti uništavanje crvenih krvnih stanica, a obično se razvija:
- sa sistemskim
- za infekciju mikoplazmama
- za infektivnu mononukleozu
- za hemolitičku bolest novorođenčadi
- za hemolitičku anemiju izazvanu lijekovima
- za hroničnu limfocitnu leukemiju
- za autoimunu hemolitičku anemiju
- u slučaju nekompatibilnosti krvi fetusa i majke
Direktni Coombsov test se često propisuje ženama tokom trudnoće kako bi se utvrdila kompatibilnost krvi majke i fetusa. Ako postoji nekompatibilnost između tijela majke i nerođenog djeteta u pogledu agenasa eritrocita, povećava se rizik od razvoja hemolitičke bolesti kod novorođenčeta.
Rh-pozitivno dijete kod Rh negativne žene uzrokuje razvoj Rh konflikta.
Uz ovu patologiju, crvena krvna zrnca nerođenog djeteta uništavaju antirezus tijela majčinog tijela. Kada uđu u žensko tijelo, crvena krvna zrnca fetusa djeluju stimulativno na imuni sistem majke, a to rezultira proizvodnjom antitijela na dijete.
Korisni video - hemolitička anemija.
Formiranje takvih u majčinom tijelu dovodi do aglutinacijske tromboze kapilara i ishemijske nekroze fetalnog tkiva. Kao rezultat hemolize crvenih krvnih stanica i razgradnje hemoglobina, uočava se stvaranje toksičnih indirektnih tvari u tijelu fetusa. Oštar pad sadržaj crvenih krvnih zrnaca u fetusu zbog njihove hemolize dovodi do razvoja bolesti kao što je anemija kod djeteta.
Niske razine i visoke koncentracije bilirubina značajno otežavaju tok bolesti. Tokom trudnoće dijagnosticiraju se mnoge komplikacije kao što su:
- rizik od pobačaja
- razvoj krvarenja
- gestoza
- anemija
- prijevremeni porođaj
Antirezus tijela štite majku, ali istovremeno predstavljaju ozbiljnu prijetnju fetusu u razvoju. Zahvaljujući Coombs testu, moguće je ovo dijagnosticirati na vrijeme. patološko stanježensko tijelo i dodijeliti blagovremeno liječenje. Osim toga, takva analiza pomaže identificirati različite bolesti krvi, čije napredovanje može dovesti do smrti pacijenta.
