അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം (ലാറ്റിൽ നിന്ന്. ആഗ്ലൂറ്റിനേഷ്യോ- ഗ്ലൂയിംഗ്) - ഇലക്ട്രോലൈറ്റുകളുടെ സാന്നിധ്യത്തിൽ ആൻ്റിബോഡികൾ ഉപയോഗിച്ച് കോർപ്പസിലുകൾ (ബാക്ടീരിയ, ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ മുതലായവ) ഒട്ടിക്കൽ.

അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണംആൻറിബോഡികൾ (ചിത്രം 7.37) "ഒട്ടിച്ചിരിക്കുന്ന" കോശങ്ങൾ (ഉദാഹരണത്തിന്, ബാക്ടീരിയ) അടങ്ങുന്ന അടരുകളായി അല്ലെങ്കിൽ അവശിഷ്ടത്തിൻ്റെ രൂപത്തിൽ സ്വയം പ്രത്യക്ഷപ്പെടുന്നു. അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം ഉപയോഗിക്കുന്നു: രോഗിയിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുത്ത രോഗകാരിയെ നിർണ്ണയിക്കുക; രോഗിയുടെ രക്തത്തിലെ സെറമിലെ ആൻ്റിബോഡികളുടെ നിർണ്ണയം; രക്തഗ്രൂപ്പുകളുടെ നിർണ്ണയം.

അരി. 7.37 എ, ബി. കൂടെ കൂടിച്ചേരൽ പ്രതികരണംIgM-ആൻ്റിബോഡികൾ (എ) കൂടാതെIgGആൻ്റിബോഡികൾ (ബി)

1. രോഗിയിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുത്ത രോഗകാരിയുടെ നിർണ്ണയം ഗ്ലാസിലെ ഏകദേശ അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം (ചിത്രം 7.38). രോഗിയിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുത്ത ബാക്ടീരിയയുടെ ഒരു സസ്പെൻഷൻ അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റിംഗ് സെറത്തിൻ്റെ ഒരു തുള്ളിയിലേക്ക് ചേർക്കുന്നു (1:20 നേർപ്പിക്കൽ). ഒരു ഫ്ലോക്കുലൻ്റ് അവശിഷ്ടം രൂപം കൊള്ളുന്നു.

അരി. 7.38

ഒരു രോഗിയിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുത്ത ഒരു രോഗകാരിയുമായി വിപുലമായ സങ്കലന പ്രതികരണം (ചിത്രം 7.39). രോഗിയിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുത്ത ബാക്ടീരിയയുടെ ഒരു സസ്പെൻഷൻ അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റിംഗ് സെറത്തിൻ്റെ നേർപ്പിക്കലിലേക്ക് ചേർക്കുന്നു.

അരി. 52

2. രോഗിയുടെ രക്തത്തിലെ സെറമിലെ ആൻ്റിബോഡികളുടെ നിർണ്ണയം
രോഗിയുടെ രക്തത്തിലെ സെറം (ചിത്രം 7.39) ഉപയോഗിച്ച് വിശദമായ സങ്കലന പ്രതികരണം. രോഗിയുടെ സെറം നേർപ്പിക്കുന്നതിലേക്ക് ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്കം ചേർക്കുന്നു.
- ഒ-ഡയഗ്‌നോസ്‌റ്റിക്കത്തോടുകൂടിയ അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ (ചൂട് മൂലമുണ്ടാകുന്ന ബാക്ടീരിയകൾ, ഒ-ആൻ്റിജൻ നിലനിർത്തുന്നത്) സൂക്ഷ്മമായ സംയോജനത്തിൻ്റെ രൂപത്തിലാണ് സംഭവിക്കുന്നത്.
- എച്ച്-ഡയഗ്‌നോസ്‌റ്റിക്കം (ഫോർമാൽഡിഹൈഡാൽ നശിക്കുന്ന ബാക്ടീരിയ, ഫ്ലാഗെല്ലർ എച്ച്-ആൻ്റിജൻ നിലനിർത്തുന്നത്) ഉള്ള അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ വലുതും വേഗത്തിലും സംഭവിക്കുന്നു.
3. രക്തഗ്രൂപ്പുകൾ നിർണ്ണയിക്കുന്നതിനുള്ള അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം A (I), B (III) എന്ന രക്തഗ്രൂപ്പ് ആൻ്റിജനുകൾക്കെതിരെ രോഗപ്രതിരോധ സെറം ആൻറിബോഡികൾ ഉപയോഗിച്ച് എറിത്രോസൈറ്റുകളുടെ സംയോജനം ഉപയോഗിച്ച് എബിഒ സിസ്റ്റം (ടേബിൾ ബി) സ്ഥാപിക്കാൻ രക്തഗ്രൂപ്പുകളെ നിർണ്ണയിക്കുന്നതിനുള്ള അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം ഉപയോഗിക്കുന്നു. നിയന്ത്രണം ഇതാണ്: ആൻ്റിബോഡികൾ അടങ്ങിയിട്ടില്ലാത്ത സെറം, അതായത്. സെറം എബി (IV) രക്തഗ്രൂപ്പ്; A (II), B (III) ഗ്രൂപ്പുകളുടെ ചുവന്ന രക്താണുക്കളിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന ആൻ്റിജനുകൾ. നെഗറ്റീവ് നിയന്ത്രണത്തിൽ ആൻ്റിജനുകൾ അടങ്ങിയിട്ടില്ല, അതായത്, ഗ്രൂപ്പ് O (I) എറിത്രോസൈറ്റുകൾ ഉപയോഗിക്കുന്നു.

പട്ടിക 7.6. ABO രക്തഗ്രൂപ്പുകളുടെ നിർണ്ണയം

പ്രതികരണ ഫലങ്ങൾ		ഗ്രൂപ്പ്
		ഉൾപ്പെടുന്ന
		ഗവേഷണം നടത്തി രക്തം
കൂടെ ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ	സെറം (പ്ലാസ്മ)
സ്റ്റാൻഡേർഡ്	സ്റ്റാൻഡേർഡ് കൂടെ
സെറംസ്

ഒരു ഇലക്ട്രോലൈറ്റിൻ്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ ആൻ്റിബോഡികളുടെ സ്വാധീനത്തിൽ സൂക്ഷ്മാണുക്കളുടെയോ മറ്റ് കോശങ്ങളുടെയോ അഡീഷനും മഴയും ആണ് അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം (RA). തത്ഫലമായുണ്ടാകുന്ന അവശിഷ്ടത്തെ അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റ് എന്ന് വിളിക്കുന്നു.

RA ഉപയോഗിക്കുന്നത്:

1. രോഗിയുടെ രക്തത്തിലെ സെറമിൽ (സെറോഡിയാഗ്നോസിസ്) ആൻ്റിബോഡികൾ കണ്ടെത്തുന്നതിന്.

2. ഒരു രോഗിയിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുത്ത രോഗകാരിയായ സൂക്ഷ്മാണുക്കളുടെ ശുദ്ധമായ സംസ്കാരത്തിൻ്റെ തരവും സെറോവറും നിർണ്ണയിക്കാൻ (സെറോടൈപ്പിംഗ്).

രോഗികളുടെ രക്തത്തിലെ സെറമിലെ ആൻ്റിബോഡികൾ നിർണ്ണയിക്കാൻ അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം ഉപയോഗിക്കുന്നു, ഉദാഹരണത്തിന്, ടൈഫോയ്ഡ് പനി, പാരാറ്റിഫോയ്ഡ് പനി (വിഡൽ പ്രതികരണം), ബ്രൂസെല്ലോസിസ് (റൈറ്റ്, ഹെഡിൽസൺ പ്രതികരണം), തുലാരീമിയ, ലെപ്റ്റോസ്പിറോസിസ് തുടങ്ങിയവ. പകർച്ചവ്യാധികൾ, അതുപോലെ ഒരു രോഗിയിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ച രോഗകാരി നിർണ്ണയിക്കാൻ ( കുടൽ അണുബാധകൾ, വില്ലൻ ചുമ മുതലായവ). രക്തഗ്രൂപ്പുകൾ, Rh ഘടകം മുതലായവ നിർണ്ണയിക്കാൻ RA ഉപയോഗിക്കുന്നു.

പ്രതികരണത്തിന് ഇനിപ്പറയുന്ന ഘടകങ്ങൾ ആവശ്യമാണ്:

1. ആൻ്റിജൻ (അഗ്ലൂട്ടിനോജെൻ) കോർപ്പസ്കുലർ ആയിരിക്കണം, അതായത്, ജീവിച്ചിരിക്കുന്നതോ കൊല്ലപ്പെട്ടതോ ആയ സൂക്ഷ്മാണുക്കൾ (ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്സ് എം), എറിത്രോസൈറ്റുകൾ അല്ലെങ്കിൽ മറ്റ് കോശങ്ങൾ എന്നിവയുടെ സസ്പെൻഷനാണ്. സാധാരണഗതിയിൽ, അഗർ ചരിവുകളിൽ വളരുന്ന സൂക്ഷ്മാണുക്കളുടെ ദൈനംദിന സംസ്കാരം ഉപയോഗിക്കുന്നു. സംസ്കാരം 3 - 4 മില്ലി ഐസോടോണിക് ലായനി ഉപയോഗിച്ച് കഴുകി, അണുവിമുക്തമായ ട്യൂബിലേക്ക് മാറ്റുകയും സാന്ദ്രത നിർണ്ണയിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. സസ്പെൻഷൻ ഏകതാനമായിരിക്കണം കൂടാതെ 1 മില്ലിയിൽ 3 ബില്യൺ മൈക്രോബയൽ സെല്ലുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കണം. കൊല്ലപ്പെട്ട സൂക്ഷ്മാണുക്കളുടെ ഒരു സസ്പെൻഷൻ്റെ ഉപയോഗം - ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്സ് - ജോലി സുഗമമാക്കുന്നു (ഉൽപാദനത്തിൽ തയ്യാറാക്കിയത്).

2. ആൻറിബോഡികൾ (അഗ്ലൂട്ടിനിൻസ്) രോഗിയുടെ സെറം (സെറോഡിയാഗ്നോസിസ് സമയത്ത്) അല്ലെങ്കിൽ അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റിംഗ് സെറം (സെറോടൈപ്പിംഗ് സമയത്ത്) കാണപ്പെടുന്നു. മുയലുകളെ കൊന്ന ബാക്ടീരിയകൾ ഉപയോഗിച്ച് പ്രതിരോധ കുത്തിവയ്പ്പ് നടത്തിയാണ് അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റിംഗ് സെറ ലഭിക്കുന്നത്.

അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റിംഗ് ടൈറ്റർസെറമിനെ അതിൻ്റെ ഏറ്റവും ഉയർന്ന നേർപ്പിക്കൽ എന്ന് വിളിക്കുന്നു, അതിൽ ചില പരീക്ഷണാത്മക സാഹചര്യങ്ങളിൽ അനുബന്ധ ആൻ്റിജനുമായി ഇത് പ്രതിപ്രവർത്തിക്കുന്നു.

അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റിംഗ് സെറ നേറ്റീവ് (നോൺ-അഡ്സോർബ്ഡ്) ആഡ്സോർബഡ് ആകാം. ചെറിയ നേർപ്പിക്കലുകളിലെ നേറ്റീവ് സെറ മൃഗത്തിന് സെറം ലഭിക്കുന്നതിന് പ്രതിരോധ കുത്തിവയ്പ്പ് നൽകിയ സൂക്ഷ്മാണുക്കളുമായി മാത്രമല്ല, അനുബന്ധ തരം സൂക്ഷ്മാണുക്കളുമായും ഇടപഴകുന്നു, കാരണം അവയിൽ ഗ്രൂപ്പ് ആൻ്റിബോഡികൾ (സാധാരണ ആൻ്റിജനുകളുള്ള സൂക്ഷ്മാണുക്കൾക്കുള്ള ആൻ്റിബോഡികൾ) അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. നേറ്റീവ് സെറ ഒരു വിശദമായ അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണത്തിന് (സെറോഡിയാഗ്നോസിസിനായി) ഉപയോഗിക്കുന്നു, ഇത് പ്രതികരണത്തിൻ്റെ സാന്നിധ്യം മാത്രമല്ല, ആൻ്റിബോഡി ടൈറ്ററിൻ്റെ വർദ്ധനവിൻ്റെ ചലനാത്മകതയും കണക്കിലെടുക്കുന്നു.

ഗ്രൂപ്പ് ആൻ്റിജനുകളുള്ള അനുബന്ധ ബാക്ടീരിയകളുമായുള്ള പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിലൂടെ നേറ്റീവ് സെറമിൽ നിന്ന് ഗ്രൂപ്പ് ആൻ്റിബോഡികൾ വേർതിരിച്ചെടുത്താൽ (അഡ്സോർബഡ്) ആഡ്സോർബ്ഡ് സെറ ലഭിക്കും. ഒരു ആൻ്റിജൻ റിസപ്റ്ററിലേക്കുള്ള ആൻ്റിബോഡികൾ അടങ്ങുന്ന അഡ്‌സോർബ്ഡ് സെറ മോണോറെസെപ്റ്റർ (അല്ലെങ്കിൽ തരം-നിർദ്ദിഷ്‌ട) ആകാം.പോളിവാലൻ്റ് സെറയിൽ അഡ്‌സോർബഡ് അല്ലെങ്കിൽ നോൺ-അഡ്‌സോർബ്ഡ് സെറകളുടെ മിശ്രിതം അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു. ഗ്ലാസ് അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണത്തിന് അഡ്‌സോർബ്ഡ് സെറ ഉപയോഗിക്കുന്നു.

മൃഗങ്ങൾക്ക് എച്ച്-ആൻ്റിജൻ ഉപയോഗിച്ച് മോട്ടൈൽ ബാക്ടീരിയ ഉപയോഗിച്ച് പ്രതിരോധ കുത്തിവയ്പ്പ് നൽകുമ്പോൾ, എച്ച്-ആൻ്റിബോഡികൾ അടങ്ങിയ എച്ച്-അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റിംഗ് സെറ ലഭിക്കും (ഉദാഹരണത്തിന്, സാൽമൊണെല്ല മോണോറെസെപ്റ്റർ എച്ച്-അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റിംഗ് സെറം). ഒ-ആൻ്റിജൻ ഉപയോഗിച്ചുള്ള പ്രതിരോധ കുത്തിവയ്പ്പിലൂടെ, ഒ-ആൻ്റിബോഡികൾ അടങ്ങിയ ഒ-അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റിംഗ് സെറ ലഭിക്കുന്നു (ഉദാഹരണത്തിന്, സാൽമൊണല്ല ഗ്രൂപ്പ് അഡ്സോർബ്ഡ് ഒ-അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റിംഗ് സെറം, ആൻ്റികോളറ ഒ-അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റിംഗ് സെറം). H-, O-ആൻ്റിജനുകൾ ഉപയോഗിച്ചുള്ള പ്രതിരോധ കുത്തിവയ്പ്പ് വഴി, H-, O-ആൻ്റിബോഡികളുള്ള സെറ ലഭിക്കും.

മാത്രമല്ല, ഒ-അഗ്ലൂട്ടിനിനുകൾ സൂക്ഷ്മമായ അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റ് ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്നു, കൂടാതെ എച്ച്-അഗ്ലൂട്ടിനിൻ ഒരു പരുക്കൻ-ധാന്യമുള്ള അവശിഷ്ടവും ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്നു.

3. ഇലക്ട്രോലൈറ്റ് - ഐസോടോണിക് NaCl പരിഹാരം (0.9% സോഡിയം ക്ലോറൈഡ് ലായനി വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളത്തിൽ തയ്യാറാക്കിയത്).

ഒരു അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം നടത്തുന്നതിന് രണ്ട് പ്രധാന രീതികളുണ്ട്: ഗ്ലാസിൽ ഒരു പ്രതികരണം (ചിലപ്പോൾ ഒരു സൂചകമോ പ്ലേറ്റ് പ്രതികരണമോ എന്ന് വിളിക്കുന്നു), വിശദമായ പ്രതികരണം (ടെസ്റ്റ് ട്യൂബുകളിൽ)

ഗ്ലാസിൽ ഒരു അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം സജ്ജീകരിക്കുന്നു. കൊഴുപ്പ് രഹിത ഗ്ലാസ് സ്ലൈഡിൽ രണ്ട് തുള്ളി സെറം, ഒരു തുള്ളി ഐസോടോണിക് സോഡിയം ക്ലോറൈഡ് ലായനി എന്നിവ പ്രയോഗിക്കുന്നു. ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റിംഗ് സെറം ഒരു നേർപ്പിക്കലിലാണ് എടുക്കുന്നത്, അത് അതിൻ്റെ ടൈറ്ററിനെ ആശ്രയിച്ച് 1:10, 1:25, 1:50 അല്ലെങ്കിൽ 1:100 ആണ്. പഠനത്തിൻ കീഴിലുള്ള സൂക്ഷ്മാണുക്കളുടെ സംസ്ക്കാരം ഒരു തുള്ളി സെറത്തിലും ഒരു തുള്ളി ഐസോടോണിക് ലായനിയിലും ഒരു ലൂപ്പ് ഉപയോഗിച്ച് ചേർത്ത് നന്നായി കലർത്തിയിരിക്കുന്നു. സൂക്ഷ്മജീവികളുള്ള സോഡിയം ക്ലോറൈഡിൻ്റെ ഒരു തുള്ളി ആൻ്റിജൻ നിയന്ത്രണമാണ്, സൂക്ഷ്മാണുക്കൾ ഇല്ലാത്ത ഒരു തുള്ളി സെറം സെറം നിയന്ത്രണമാണ്. സെറം ഉള്ള ഒരു ഡ്രോപ്പിൽ നിന്ന് NaCl ഉള്ള ഒരു ഡ്രോപ്പിലേക്ക് നിങ്ങൾക്ക് സംസ്കാരം കൈമാറാൻ കഴിയില്ല. പ്രതികരണം 1-3 മിനിറ്റ് ഊഷ്മാവിൽ നടക്കുന്നു. സെറം നിയന്ത്രണം വ്യക്തമാണെങ്കിൽ, ആൻ്റിജൻ നിയന്ത്രണത്തിൽ ഏകീകൃത പ്രക്ഷുബ്ധത നിരീക്ഷിക്കപ്പെടുന്നു, കൂടാതെ സംസ്കാരം സെറവുമായി കലർന്ന തുള്ളിയിൽ അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റ് അടരുകൾ പ്രത്യക്ഷപ്പെടുന്നു, അപ്പോൾ ഫലം പോസിറ്റീവ് ആയി കണക്കാക്കപ്പെടുന്നു. സെറം, ആൻ്റിജൻ എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് ഡ്രോപ്പിൽ യൂണിഫോം ടർബിഡിറ്റി ഉണ്ടെങ്കിൽ, ഇത് ഒരു നെഗറ്റീവ് ഫലമാണ്. ഇരുണ്ട പശ്ചാത്തലത്തിൽ പ്രതികരണം കൂടുതൽ വ്യക്തമായി കാണാം.

സെറം

1. ആൻ്റിജൻ നിയന്ത്രണം

2. സെറം നിയന്ത്രണം

രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണങ്ങൾ. ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്സിൽ രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണങ്ങളുടെ പ്രയോഗം പകർച്ചവ്യാധികൾ.

പ്ലാൻ:

രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണങ്ങളുടെ തരങ്ങൾ.

സീറോളജിക്കൽ പ്രതികരണങ്ങൾ നടത്തുന്നതിനുള്ള വ്യവസ്ഥകൾ.

സെറം ആവശ്യകതകൾ.

പോസിറ്റീവ്, നെഗറ്റീവ് ഫലങ്ങളുടെ ആശയം.

പ്രധാന ഉള്ളടക്കം:

രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണങ്ങളുടെ തരങ്ങൾ.

രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണം – ഇത് ഒരു ആൻ്റിബോഡിയുമായി ഒരു ആൻ്റിജൻ്റെ പ്രതിപ്രവർത്തനമാണ്, ഇത് ആൻ്റിജനുകളുടെ എപ്പിടോപ്പുകളുള്ള ആൻ്റിബോഡിയുടെ (പാരാടോപ്പ്) സജീവ കേന്ദ്രങ്ങളുടെ പ്രത്യേക ഇടപെടലാണ് നിർണ്ണയിക്കുന്നത്.

രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണങ്ങളുടെ പൊതുവായ വർഗ്ഗീകരണം:

സീറോളജിക്കൽ പ്രതികരണങ്ങൾ ആൻ്റിജനുകളും (Ag) ആൻ്റിബോഡികളും (Ig) തമ്മിലുള്ള പ്രതിപ്രവർത്തനങ്ങൾ

ഇൻ വിട്രോ ;

സെല്ലുലാർ പ്രതികരണങ്ങൾ രോഗപ്രതിരോധ ശേഷിയില്ലാത്ത കോശങ്ങളുടെ പങ്കാളിത്തത്തോടെ;

അലർജി പരിശോധനകൾ - ഹൈപ്പർസെൻസിറ്റിവിറ്റി കണ്ടെത്തൽ.

സീറോളജിക്കൽ പ്രതികരണങ്ങൾ: 1) നിർവചനം, 2) ഘട്ടങ്ങൾ, 3) ലക്ഷ്യങ്ങൾ, 4) പൊതുവായ വർഗ്ഗീകരണം.

1) നിർവ്വചനം

സീറോളജിക്കൽ രീതികൾആൻ്റിജൻ-ആൻ്റിബോഡി പ്രതികരണം ഉപയോഗിച്ച് ഗവേഷണം (ലാറ്റിൻ സെറത്തിൽ നിന്ന് - സെറം, ലോഗോകൾ - പഠിപ്പിക്കൽ).

2) ഘട്ടങ്ങൾ

ഇടപെടലിൻ്റെ 2 ഘട്ടങ്ങൾ:

ഐ. പ്രത്യേകം (ദൃശ്യം) - വേഗത്തിൽ സംഭവിക്കുന്നു, ആൻ്റിബോഡികൾ അവയുടെ അനുബന്ധ ആൻ്റിജനുകളുമായി സംയോജിക്കുന്നു. ഈ ഘട്ടത്തിൽ, ആൻ്റിജനുകളുടെ (എജി) ഡിറ്റർമിനൻ്റ് ഗ്രൂപ്പുകളും ആൻ്റിബോഡികളുടെ സജീവ കേന്ദ്രങ്ങളും (എടി) സംവദിക്കുന്നു.

AG + AT സമുച്ചയത്തിൻ്റെ രൂപീകരണത്തിൽ ഉൾപ്പെട്ടിരിക്കുന്ന ശക്തികൾ ഇവയാണ്:

പെൻഡൻ്റ്;

വാൻ ഡെർ വാൽസ്

ഹൈഡ്രജൻ ബോണ്ടുകൾ.

ഒന്നുമില്ല ദൃശ്യമായ മാറ്റങ്ങൾഈ ഘട്ടത്തിലല്ല. ഇലക്ട്രോൺ മൈക്രോസ്കോപ്പി AG+AT കോംപ്ലക്സ് ഒരു ലാറ്റിസിൻ്റെ രൂപത്തിൽ കാണിക്കുന്നു.

II. നിർദ്ദിഷ്ടമല്ലാത്തത് - സാവധാനത്തിൽ സംഭവിക്കുന്നു, തത്ഫലമായുണ്ടാകുന്ന ആൻ്റിജൻ-ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്സ് പ്രതികരണം സംഭവിക്കുന്ന ഒരു നിർദ്ദിഷ്ട പാരിസ്ഥിതിക ഘടകവുമായി പ്രതിപ്രവർത്തിക്കുന്നു, ഇത് കണ്ണിന് ദൃശ്യമാണ് - ഗ്ലൂയിംഗ്, പിരിച്ചുവിടൽ, മഴയുടെ അടരുകൾ മുതലായവ. ഒരു ഇലക്ട്രോലൈറ്റിൻ്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ, ചാർജ് കുറയുന്നു. , ലായകത കുറയുന്നു, ദൃശ്യമായ കോൺഗ്ലോമറേറ്റുകൾ രൂപം കൊള്ളുന്നു, അവശിഷ്ടം (അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റ്).

3) ലക്ഷ്യങ്ങൾ സജ്ജമാക്കുക :

a) ആൻ്റിജനെ തിരിച്ചറിയാൻ (ആൻ്റിബോഡി അറിയപ്പെടുന്ന ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് സെറം):

• പാത്തോളജിക്കൽ മെറ്റീരിയലിൽ (ദ്രുതഗതിയിലുള്ള ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്സ്);

  ശുദ്ധമായ സംസ്കാരത്തിൽ:

  1. സീറോളജിക്കൽ ഐഡൻ്റിഫിക്കേഷൻ (സ്പീഷീസ് ഐഡൻ്റിഫിക്കേഷൻ);

     സെറോടൈപ്പിംഗ് (സെറോവറിൻ്റെ നിർണ്ണയം) - സമ്മർദ്ദത്തിൻ്റെ നിർണ്ണയം;

b) ആൻ്റിബോഡികൾ (Ig) കണ്ടുപിടിക്കാൻ (ആൻ്റിജൻ അറിയപ്പെടുന്നു-ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്):

• സാന്നിധ്യം (ഗുണപരമായ പ്രതികരണങ്ങൾ);

  അളവ് (ടൈറ്ററിലെ വർദ്ധനവ് - "ജോടിയാക്കിയ സെറം" രീതി).

4) പൊതുവായ വർഗ്ഗീകരണം സീറോളജിക്കൽ പ്രതികരണങ്ങൾ :

a) ലളിതം (2-ഘടകം: Ag+Ig):

ആർഎ അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണങ്ങൾ (കോർപ്പസ്കുലർ ആൻ്റിജനോടൊപ്പം);

പിആർ മഴ പ്രതികരണങ്ങൾ (ലയിക്കുന്ന ആൻ്റിജനോടൊപ്പം);

b) സങ്കീർണ്ണമായ (3-ഘടകം: Ag+Ig+C);

c) ഒരു ടാഗ് ഉപയോഗിക്കുന്നു.

സംയോജനത്തിൻ്റെയും മഴ പ്രതികരണങ്ങളുടെയും വകഭേദങ്ങൾ

അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം :

ഫിസിയോളജിക്കൽ ലായനിയിൽ ആൻ്റിജനുകളുമായുള്ള ആൻ്റിജനുകളുടെ (എറിത്രോസൈറ്റുകൾ, ബാക്ടീരിയകൾ) സസ്പെൻഷൻ്റെ പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിൻ്റെ രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണമാണ് അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം (ആർഎ).

സങ്കലന സമയത്ത്, എടി കണങ്ങൾ ഒരുമിച്ച് ചേർന്ന് ഒരു ഫ്ലോക്കുലൻ്റ് അവശിഷ്ടമായി മാറുന്നു.

പ്രതികരണം നിഷ്ക്രിയ ഹേമഗ്ലൂട്ടിനേഷൻ(ആർപിജിഎ) ഒരു ആൻ്റിബോഡി അല്ലെങ്കിൽ ആൻ്റിജൻ എറിത്രോസൈറ്റ് ഡയഗ്‌നോസ്റ്റിക് ഉപയോഗിക്കുന്ന ഒരു തരം അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണമാണ് (അതിൻ്റെ ഉപരിതലത്തിൽ എടി അല്ലെങ്കിൽ എജി ആഡ്‌സോർബുചെയ്‌ത എറിത്രോസൈറ്റുകൾ).

ഈ പ്രതികരണത്തിൽ ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ നിഷ്ക്രിയ വാഹകരായി പ്രവർത്തിക്കുന്നു.

RPGA യുടെ ഫലങ്ങളുടെ വിലയിരുത്തൽ ഇനിപ്പറയുന്ന രീതിയിൽ നടത്തുന്നു:

- ചെയ്തത് നല്ല പ്രതികരണം നിഷ്ക്രിയമായി ഒട്ടിപ്പിടിക്കുന്ന ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ U- അല്ലെങ്കിൽ V- ആകൃതിയിലുള്ള ദ്വാരത്തിൻ്റെ അടിഭാഗം സ്കലോപ്പ്ഡ് അരികുകളുള്ള ("കുട") ഒരു ഇരട്ട പാളിയിൽ മൂടുന്നു;

- ചെയ്തത് നെഗറ്റീവ് പ്രതികരണം (അഗ്ലൂട്ടിനേഷൻ്റെ അഭാവത്തിൽ), ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ ദ്വാരത്തിൻ്റെ മധ്യഭാഗത്ത് അടിഞ്ഞുകൂടുന്നു, ഇത് കുത്തനെ നിർവചിച്ച അരികുകളുള്ള ഒരു കോംപാക്റ്റ് “ബട്ടൺ” ഉണ്ടാക്കുന്നു.

വൈറൽ അണുബാധയുടെ രോഗനിർണയത്തിൽ ഹെമഗ്ലൂട്ടിനേഷൻ ഇൻഹിബിഷൻ ടെസ്റ്റ് (HAI) ഉപയോഗിക്കുന്നു. ചില വൈറസുകളുടെ ഉപരിതലത്തിൽ ഹീമാഗ്ലൂട്ടിനിൻ എന്ന പ്രോട്ടീൻ അടങ്ങിയിട്ടുണ്ട്, ഇത് ചുവന്ന രക്താണുക്കളെ ഒരുമിച്ച് ചേർക്കുന്നു. നിർദ്ദിഷ്ട ആൻറിവൈറൽ ആൻ്റിബോഡികൾ ചേർക്കുന്നത് വൈറൽ ഹെമഗ്ലൂട്ടിനിൻ തടയുന്നു - ഹെമഗ്ലൂട്ടിനേഷൻ ഇല്ല.

അപൂർണ്ണമായ ആൻ്റിബോഡികൾ നിർണ്ണയിക്കാൻ പരോക്ഷമായ ഹെമഗ്ലൂട്ടിനേഷൻ പ്രതികരണം (IRHA), അല്ലെങ്കിൽ കൂംബ്സ് പ്രതികരണം ഉപയോഗിക്കുന്നു. ആൻറിഗ്ലോബുലിൻ സെറം (എ.ടി. ഹ്യൂമൻ ഐജിക്കെതിരെ) ചേർക്കുന്നത് പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ഫലങ്ങൾ വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു. Rh ഘടകം നിർണ്ണയിക്കാൻ RNGA ഉപയോഗിക്കുന്നു.

ഒരു അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ റിയാക്ഷൻ (RA) നടത്താൻ മൂന്ന് ഘടകങ്ങൾ ആവശ്യമാണ്:

1) ആൻ്റിജൻ (അഗ്ലൂട്ടിനോജൻ) എജി;

2) ആൻ്റിബോഡി(അഗ്ലൂറ്റിനിൻ) എടി;

3) ഇലക്ട്രോലൈറ്റ് (ഐസോടോണിക് സോഡിയം ക്ലോറൈഡ് ലായനി).
Ag + AT + ഇലക്‌ട്രോലൈറ്റ് = agglutinate

Agglutination (ലാറ്റിൻ agglutinatio ൽ നിന്ന് - gluing) - ഇലക്ട്രോലൈറ്റുകളുടെ സാന്നിധ്യത്തിൽ ആൻ്റിബോഡികൾ വഴി കോർപ്പസ് (ബാക്ടീരിയ, ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ മുതലായവ) ഒട്ടിക്കൽ - സോഡിയം ക്ലോറൈഡ്.

ആൻ്റിബോഡികളാൽ "ഒട്ടിച്ചിരിക്കുന്ന" മൃതദേഹങ്ങൾ (ഉദാഹരണത്തിന്, ബാക്ടീരിയ, ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ) അടങ്ങുന്ന അടരുകളായി അല്ലെങ്കിൽ അവശിഷ്ടത്തിൻ്റെ രൂപത്തിൽ RA സ്വയം പ്രത്യക്ഷപ്പെടുന്നു.

RA ഇതിനായി ഉപയോഗിക്കുന്നു:

നേരിട്ടുള്ള മൈക്രോബയൽ അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം (RA).

ഈ പ്രതികരണത്തിൽ, ആൻ്റിബോഡികൾ (അഗ്ലൂട്ടിനിൻസ്) നേരിട്ട് കോർപ്പസ്കുലർ ആൻ്റിജനുകളെ (അഗ്ലൂട്ടിനോജൻസ്) അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റ് ചെയ്യുന്നു.

നിർജ്ജീവമായ സൂക്ഷ്മാണുക്കളുടെ (മൈക്രോബയൽ അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം) സസ്പെൻഷനാണ് അവ സാധാരണയായി പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നത്.

സൂക്ഷ്മാണുക്കളുടെ തരം നിർണ്ണയിക്കാൻ, ഉപയോഗിക്കുകസ്റ്റാൻഡേർഡ് ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ സെറം (പ്രശസ്ത എ.ടി ).

ഏറ്റവും സാധാരണമായത് ലാമെല്ലർ (ഏകദേശം), വികസിപ്പിച്ച ആർഎ എന്നിവയാണ്.

RA എന്ന പ്ലേറ്റ് ഗ്ലാസിൽ സ്ഥാപിച്ചിരിക്കുന്നു. ആയി ഉപയോഗിക്കുക ത്വരിതപ്പെടുത്തിയ രീതിആൻ്റിബോഡികളുടെ കണ്ടെത്തൽ അല്ലെങ്കിൽ സൂക്ഷ്മാണുക്കളുടെ തിരിച്ചറിയൽ.

ഘടകങ്ങൾ:

1. സ്റ്റാൻഡേർഡ് ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റിംഗ് സെറ (AT);

2. രോഗിയിൽ നിന്ന് പഠിക്കുന്ന ശുദ്ധമായ സംസ്കാരം;

3. ഉപ്പുവെള്ള പരിഹാരം.

പഠനത്തിന് കീഴിലുള്ള ശുദ്ധമായ സംസ്കാരത്തിൽ, ആൻ്റിജനുകൾ (എജി) കണങ്ങളുടെ രൂപത്തിലാണ് (മൈക്രോബയൽ സെല്ലുകൾ, എറിത്രോസൈറ്റുകൾ, മറ്റ് കോർപ്പസ്കുലർ ആൻ്റിജനുകൾ), അവ ആൻ്റിബോഡികളാൽ ഒട്ടിക്കുകയും അവശിഷ്ടങ്ങൾ ഉണ്ടാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.

ഉദാഹരണം:

സ്റ്റേജിംഗ് സൂചകമായ സമാഹരണ പ്രതികരണങ്ങൾ (ആർ.എ ) ഗ്ലാസിൽ കോളിഫോം ബാക്ടീരിയയെ തിരിച്ചറിയാൻ വേണ്ടി.

ഒരു ഗ്ലാസ് സ്ലൈഡിൽ തുള്ളികൾ പ്രയോഗിക്കുക:

1 അതിസാരം ;
2 -th drop: - രോഗകാരികൾക്കെതിരെ അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റിംഗ് സെറംടൈഫോയ്ഡ് പനി ;

(1-2 ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് സെറ)
3 -th drop: - ഉപ്പുവെള്ള പരിഹാരം (നിയന്ത്രണം).
ഓരോ തുള്ളിയിലും പരിശോധിച്ച ശുദ്ധമായ ബാക്ടീരിയൽ കൾച്ചർ ചേർക്കുക. ഇളക്കുക.

ഫലമായി : പോസിറ്റീവ് - അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റ് അടരുകളുടെ സാന്നിധ്യം,
നെഗറ്റീവ് - അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റ് അടരുകളുടെ അഭാവം
ഉപസംഹാരം:പഠിച്ച ബാക്ടീരിയകൾ ടൈഫോയ്ഡ് പനിയുടെ കാരണക്കാരാണ് (ആൻ്റിജനുകൾ നിർണ്ണയിക്കപ്പെട്ടു).

രോഗിയുടെ സെറം (സീറോളജിക്കൽ ഡയഗ്നോസിസ്) ൽ എടി നിർണ്ണയിക്കാൻ, ഒരു സാധാരണ മൈക്രോബയൽരോഗനിർണയം , സസ്പെൻഷൻ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നുപ്രശസ്തമായ സൂക്ഷ്മാണുക്കൾ അല്ലെങ്കിൽ അവയുടെ ആൻ്റിജനുകൾഎ.ജി .

ABO രക്തഗ്രൂപ്പുകളുടെ നിർണ്ണയം (ഹെമാഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ റിയാക്ഷൻ (എച്ച്ആർഎ)) - ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ സംയോജനം.

പ്രതികരണ ഘടകങ്ങൾ:

1. എജി (ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ) രക്തം പരിശോധിക്കുന്നു

2. എടി (എറിത്രോസ്റ്റുകൾ - സോളിക്ലോൺസ്)

സോളിക്ലോണുകളുടെ കൂട്ടം:

കോളിക്ലോൺ ആൻ്റി-എ റീജൻ്റ് (പിങ്ക്)

കോളിക്ലോൺ ആൻ്റി-ബി റിയാജൻ്റ് (നീല)

റീജൻ്റ് സോളിക്ലോൺ ആൻ്റി-എവി (നിറമില്ലാത്തത്)

3. ഇലക്ട്രോലൈറ്റ് (സലൈൻ ലായനി)

നിർണ്ണയിക്കുന്നതിനുള്ള സാങ്കേതികത:

1 .

ഒരു തുള്ളി (0.1 മില്ലി) ആൻ്റി-എ, ആൻ്റി-ബി, ആൻ്റി-എബി സോളിക്കോൺ എന്നിവ ടാബ്ലറ്റിൻ്റെ കിണറുകളിൽ (നിയന്ത്രണത്തിനായി) പ്രയോഗിക്കുന്നു.

2.

റിയാക്ടറിൻ്റെ ഓരോ തുള്ളിയ്ക്കും അടുത്തായി, പരിശോധിക്കപ്പെടുന്ന രക്തത്തിൻ്റെ ഒരു ചെറിയ (0.05-0.01 മില്ലി) തുള്ളി പ്രയോഗിക്കുന്നു.

തുടർന്ന് ഒരു തുള്ളി സോളിക്ലോൺ ഒരു തുള്ളി രക്തത്തിൽ ഒരു വ്യക്തിഗത വൃത്തിയുള്ള ഗ്ലാസ് വടി ഉപയോഗിച്ച് കലർത്തുന്നു.

3.

ആദ്യ 3-5 സെക്കൻഡിനുള്ളിൽ പ്ലേറ്റ് മൃദുവായി കുലുക്കുമ്പോൾ അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം വികസിക്കുന്നു.

തുള്ളികൾ കലർത്തി 2.5-3 മിനിറ്റിനുശേഷം പ്രതികരണ ഫലങ്ങൾ കണക്കിലെടുക്കുന്നു. കിണറുകളിൽ ഇടത്തുനിന്ന് വലത്തോട്ട് ആൻ്റി-എ, ആൻ്റി-ബി, ആൻ്റി-എബി.

ഒരു നല്ല ഫലം ഒരു ഗ്രാനുലാർ അവശിഷ്ടത്തിൻ്റെ (അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റ്) രൂപമാണ്.

പോസിറ്റീവ് RA (+)

നെഗറ്റീവ് - അവശിഷ്ടമില്ല.

നെഗറ്റീവ് RA(-)

4.

ഫലങ്ങളുടെ വിശകലനം.

ഒ(ഐ) α β - സമാഹരണം ഇല്ല

എ(II) β - ആൻറി-എ ഉള്ള സങ്കലനം

ബി(III) α - ആൻറി-ബി ഉള്ള സങ്കലനം

എബി(IV)O - ആൻ്റി-എ, ആൻ്റി-ബി എന്നിവയ്‌ക്കൊപ്പം സമാഹരണം

സങ്കലനത്തിൻ്റെ സ്കീമാറ്റിക് പ്രാതിനിധ്യം.

എറിത്രോസൈറ്റുകളിലെ എജി ആൻ്റിജനുകൾ (കണ്ടെത്താൻ കഴിയുന്നത്) + ആൻ്റിബോഡിഎ.ടി(സോളിക്ലോൺ) ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് സെറം

ടാബ്‌ലെറ്റുകളിലെ അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ്റെ അക്കൗണ്ടിംഗ്

മഴ പ്രതികരണം:

ഒരു ഫിസിയോളജിക്കൽ ലായനിയിൽ ആൻ്റിജനുമായി ലയിക്കുന്ന അവസ്ഥയിൽ ആൻ്റിജൻ്റെ പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിൻ്റെ രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണമാണ് മഴ പ്രതികരണം.

മഴയുടെ സമയത്ത്, ഒരു മാക്രോമോളിക്യുലർ ഇമ്യൂൺ കോംപ്ലക്സ് രൂപം കൊള്ളുന്നു, ഇത് സുതാര്യമായ കൊളോയ്ഡൽ ലായനി അതാര്യമായ സസ്പെൻഷനിലേക്കോ അവശിഷ്ടത്തിലേക്കോ മാറ്റുന്നതിലൂടെ പ്രകടമാണ്.

രണ്ട് റിയാക്ടറുകളുടെയും അളവ് കർശനമായി നിർവചിക്കപ്പെട്ട അനുപാതത്തിലായിരിക്കണം, കാരണം അവയിലൊന്നിൻ്റെ അധികവും ഫലം കുറയ്ക്കുന്നു.

നിലവിലുണ്ട് വിവിധ വഴികൾമഴ പ്രതികരണം നടത്തുന്നു.

1. റിംഗ് മഴയുടെ പ്രതികരണം ചെറിയ വ്യാസമുള്ള മഴ ട്യൂബുകളിലാണ് നടത്തുന്നത്. ഇമ്യൂൺ സെറം ടെസ്റ്റ് ട്യൂബിൽ ചേർക്കുന്നു, ലയിക്കുന്ന ആൻ്റിജൻ ശ്രദ്ധാപൂർവ്വം പാളികളാക്കി മാറ്റുന്നു. തന്മാത്രകളുടെ താപ ചലനം കാരണം എജിയും എടിയും മിശ്രണം ചെയ്യുന്നു, അവ സംവദിക്കുന്നു. ചെയ്തത് നല്ല ഫലംരണ്ട് ലായനികളുടെ അതിർത്തിയിൽ അതാര്യമായ അവശിഷ്ടങ്ങളുടെ ഒരു വളയം രൂപം കൊള്ളുന്നു.

2. Ouchterlony ഇരട്ട ഇമ്മ്യൂണോഡിഫ്യൂഷൻ പ്രതികരണം ഒരു അഗർ ജെല്ലിലാണ് നടത്തുന്നത്, അതിൽ ഒരു എജി ലായനി അല്ലെങ്കിൽ എടി ലായനി സ്കീം അനുസരിച്ച് ചേർക്കുന്നു. എജിയും എടിയും ജെല്ലിലേക്ക് പരസ്പരം വ്യാപിക്കുകയും പ്രതികരണം പോസിറ്റീവ് ആണെങ്കിൽ, പ്രതിരോധ കോംപ്ലക്സുകൾ മഴ രേഖകളായി ദൃശ്യമാകുകയും ചെയ്യുന്നു.

മഴ പ്രതികരണം -ഇതാണ് രൂപീകരണംലയിക്കുന്ന തന്മാത്രാ ആൻറിജൻ-ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്‌സിൻ്റെ അവശിഷ്ടം എന്നറിയപ്പെടുന്ന മേഘമായി. ആൻ്റിജനുകളും ആൻ്റിബോഡികളും തുല്യ അളവിൽ കലർത്തിയാണ് ഇത് രൂപപ്പെടുന്നത്.

RA ഘടകങ്ങൾ:

പ്രിസിപിറ്റിംഗ് സെറം (എടി-പ്രെസിപിറ്റിൻ അറിയപ്പെടുന്നു);

ടെസ്റ്റ് സെറം (അജ്ഞാത പ്രിസിപിറ്റിനോജൻ ആൻ്റിജൻ);

ശാരീരികമായ പരിഹാരം.

പ്രത്യേക ഇടുങ്ങിയ ടെസ്റ്റ് ട്യൂബുകളിലോ (റിംഗ് റെസിപിറ്റേഷൻ റിയാക്ഷൻ) അല്ലെങ്കിൽ ജെൽ, ന്യൂട്രിയൻ്റ് മീഡിയ മുതലായവയിലെ പെട്രി വിഭവങ്ങളിലോ മഴ പ്രതികരണം നടത്തുന്നു.

റിംഗ്-പ്രിസിപിറ്റേഷൻ പ്രതികരണം

പ്രതികരണ ഫലങ്ങളുടെ പ്രസ്താവനയും റെക്കോർഡിംഗുംറിംഗ് മഴരോഗകാരി കണ്ടെത്തുന്നതിന് ആന്ത്രാക്സ്(അസ്കോളി പ്രതികരണം).

സ്റ്റേജിംഗ് .

1. പഠനത്തിൻ കീഴിലുള്ള വസ്തുക്കൾ (തുകൽ, കമ്പിളി, തോന്നൽ, കുറ്റിരോമങ്ങൾ, തുണി, മാംസം, മണ്ണ്, മൃഗങ്ങളുടെ മലം മുതലായവ) 5-45 മിനുട്ട് ഉപ്പുവെള്ളത്തിൽ തിളപ്പിക്കുകയാണ്. ഒരു ഐസോടോണിക് എക്സ്ട്രാക്റ്റ് (സത്തിൽ) ലഭിക്കാൻ. ഫിൽട്ടർ ചെയ്തു.

2. ആൻ്റി ആന്ത്രാക്സ് സെറം ഒരു ടെസ്റ്റ് ട്യൂബിലേക്ക് ഒഴിക്കുന്നു.

3. ടെസ്റ്റ് മെറ്റീരിയൽ (എക്‌സ്‌ട്രാക്‌റ്റ്) അതിൽ ശ്രദ്ധാപൂർവ്വം പാളി ചെയ്യുക.

അക്കൌണ്ടിംഗ് .

അടുത്ത 10 മിനിറ്റിനുള്ളിൽ. പോസിറ്റീവ് കേസുകളിൽ, സെറത്തിനും എക്സ്ട്രാക്റ്റിനും ഇടയിലുള്ള ഇൻ്റർഫേസിൽ പ്രക്ഷുബ്ധതയുടെ ഒരു മോതിരം പ്രത്യക്ഷപ്പെടുന്നു (റിംഗ് മഴ). അസ്കോളി പ്രതികരണം വളരെ സെൻസിറ്റീവും നിർദ്ദിഷ്ടവുമാണ്

അതിൻ്റെ സഹായത്തോടെ, ആന്ത്രാക്സ് ബാധിച്ച വസ്തുക്കൾ പെട്ടെന്ന് തിരിച്ചറിയാൻ സാധിക്കും.

അഗറിലെ മഴ പ്രതികരണം

ഫലങ്ങളുടെ പ്രസ്താവനയും റെക്കോർഡിംഗുംഅഗറിലെ മഴ പ്രതികരണങ്ങൾകോറിനെബാക്ടീരിയയുടെ വിഷാംശം നിർണ്ണയിക്കാൻ (ഡിഫ്തീരിയയ്ക്ക് കാരണമാകുന്ന ഘടകങ്ങൾ)

സ്റ്റേജിംഗ്

ഒരു പെട്രി വിഭവത്തിൽ ഫോസ്ഫേറ്റ് പെപ്റ്റോൺ അഗറിൽ സ്ഥാപിച്ചിരിക്കുന്നു.

1. കപ്പിൻ്റെ മധ്യഭാഗത്ത് നനഞ്ഞ അണുവിമുക്തമായ ഫിൽട്ടർ പേപ്പറിൻ്റെ ഒരു സ്ട്രിപ്പ് വയ്ക്കുക.ആൻ്റിടോക്സിക് സെറം.

2. ഉണങ്ങിയ ശേഷം, സ്ട്രിപ്പിൻ്റെ അരികിൽ നിന്ന് 1 സെൻ്റിമീറ്റർ അകലെ, 10 മില്ലീമീറ്റർ വ്യാസമുള്ള ഫലകങ്ങൾ വിത്ത് വിതയ്ക്കുന്നു.തിരഞ്ഞെടുത്ത വിളകൾ.

ഒരു കപ്പിൽ നിങ്ങൾക്ക് 3 മുതൽ 10 വരെ വിളകൾ വിതയ്ക്കാം, അതിലൊന്ന്നിയന്ത്രണം, അറിഞ്ഞിരിക്കണംവിഷബാധയുള്ള.

വിളകൾ ഒരു തെർമോസ്റ്റാറ്റിൽ സ്ഥാപിച്ചിരിക്കുന്നു.

അക്കൌണ്ടിംഗ്

24-48-72 മണിക്കൂറിന് ശേഷമാണ് വിശകലനം നടത്തുന്നത്.

പോസിറ്റീവ് ഫലം - (സംസ്കാരംവിഷബാധയുള്ള) - പേപ്പർ സ്ട്രിപ്പിൽ നിന്ന് കുറച്ച് അകലെ ദൃശ്യമാകുംഅവശിഷ്ട വരികൾ, « ടെൻഡ്രിൽ അമ്പുകൾ", അത് പ്രക്ഷേപണം ചെയ്ത പ്രകാശത്തിൽ വ്യക്തമായി കാണാം.

ഡിഫ്തീരിയ ബാസിലിയുടെ വിഷാംശം നിർണ്ണയിക്കാൻ അഗറിലെ മഴ പ്രതികരണം ചിത്രം കാണിക്കുന്നു. ഇടത്തരം സംസ്കാരങ്ങൾ "അമ്പടയാളങ്ങൾ" രൂപപ്പെടുത്തിയില്ല; ഇവ ടോക്സിയോജനിക് രോഗകാരികളല്ല.

ഡിഫ്തീരിയയുടെ കാരണക്കാരൻ്റെ സ്‌ട്രെയിനുകൾ ടോക്സിജെനിക് (എക്‌സോടോക്‌സിൻ ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്നത്), നോൺ-ടോക്‌സിജെനിക് ആകാം. ഒരു എക്സോടോക്സിൻ രൂപീകരണം ഒരു എക്സോടോക്സിൻ രൂപീകരണം എൻകോഡ് ചെയ്യുന്ന ഒരു ടോക്സ് ജീൻ വഹിക്കുന്ന ഒരു പ്രോഫേജിൻ്റെ ബാക്ടീരിയയിലെ സാന്നിധ്യത്തെ ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നു.

അസുഖമുണ്ടെങ്കിൽ, എല്ലാ ഡിഫ്തീരിയ രോഗകാരികളും ടോക്സിജെനിസിറ്റിക്കായി പരിശോധിക്കുന്നു - അഗറിലെ മഴ പ്രതികരണം ഉപയോഗിച്ച് ഡിഫ്തീരിയ എക്സോടോക്സിൻ ഉത്പാദനം

സങ്കീർണ്ണമായ സീറോളജിക്കൽ പ്രതികരണങ്ങൾ ( 3-ഘടകം: Ag+Ig+C):

കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഫിക്സേഷൻ റിയാക്ഷൻ (CFR).

പ്രതികരണം രണ്ട് ഘട്ടങ്ങളിലായാണ് നടത്തുന്നത്.

ആദ്യ ഘട്ടത്തിൽ, AT ആൻ്റിജനും പൂരകവുമായി ഇടപഴകുന്നു; രണ്ടാം ഘട്ടത്തിൽ, ഒരു സൂചകം ചേർക്കുന്നു - ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റം (എറിത്രോസൈറ്റുകളുടെയും ആൻ്റി-എറിത്രോസൈറ്റ് സെറത്തിൻ്റെയും മിശ്രിതം).

ഫലം പോസിറ്റീവ് ആണെങ്കിൽ, ആദ്യ ഘട്ടത്തിൽ, ആൻ്റിബോഡികൾ ആൻ്റിജനുകൾക്കൊപ്പം ഒരു രോഗപ്രതിരോധ കോംപ്ലക്സ് ഉണ്ടാക്കുന്നു, ഇത് പ്രതികരണ മിശ്രിതത്തിൻ്റെ പൂരകത്തെ ബന്ധിപ്പിക്കുന്നു.

ഈ സാഹചര്യത്തിൽ, രണ്ടാം ഘട്ടത്തിൽ ചേർത്ത ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റത്തിൻ്റെ ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ നശിപ്പിക്കപ്പെടുന്നില്ല.

അല്ലെങ്കിൽ, അൺബൗണ്ട് കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഇൻഡിക്കേറ്റർ ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ ലിസിസിന് കാരണമാകുന്നു.

ഇത് നടപ്പിലാക്കാൻ, അഞ്ച് ചേരുവകൾ ആവശ്യമാണ്: എജി, എടി, കോംപ്ലിമെൻ്റ് (ആദ്യത്തെ സിസ്റ്റം), ആടുകളുടെ എറിത്രോസൈറ്റുകൾ, ഹീമോലിറ്റിക് സെറം (രണ്ടാമത്തെ സിസ്റ്റം) (ചിത്രം 1).

പ്രതികരണം രണ്ട് ഘട്ടങ്ങളിലാണ് സംഭവിക്കുന്നത് (ചിത്രം 3).

ആദ്യ ഘട്ടം - ആൻറിജൻ, ആൻ്റിബോഡികൾ എന്നിവയുടെ പ്രതിപ്രവർത്തനം നിർബന്ധിത പങ്കാളിത്തംപൂരകമാണ്.

രണ്ടാമത് - ഇൻഡിക്കേറ്റർ ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റം (ആടുകളുടെ ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ, ഹീമോലിറ്റിക് സെറം) ഉപയോഗിച്ച് പ്രതികരണ ഫലങ്ങൾ തിരിച്ചറിയൽ. ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റത്തിൽ പൂരകങ്ങൾ ചേർത്താൽ മാത്രമേ ഹീമോലിറ്റിക് സെറം വഴി ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ നാശം സംഭവിക്കുകയുള്ളൂ. ആൻ്റിജൻ-ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്സിൽ കോംപ്ലിമെൻ്റ് മുമ്പ് ആഗിരണം ചെയ്യപ്പെട്ടിരുന്നെങ്കിൽ, എറിത്രോസൈറ്റുകളുടെ ഹീമോലിസിസ് സംഭവിക്കുന്നില്ല (ചിത്രം).

അനുഭവ ഫലം വിലയിരുത്തി (ചിത്രം 2), എല്ലാ ട്യൂബുകളിലും ഹീമോലിസിസിൻ്റെ സാന്നിധ്യം അല്ലെങ്കിൽ അഭാവം ശ്രദ്ധിക്കുക. ഹീമോലിസിസ് പൂർണ്ണമായും വൈകുമ്പോൾ, ടെസ്റ്റ് ട്യൂബിലെ ദ്രാവകം നിറമില്ലാത്തതും ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ അടിയിൽ സ്ഥിരതാമസമാകുമ്പോൾ, നെഗറ്റീവ് - ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ പൂർണ്ണമായും അലിഞ്ഞുപോകുമ്പോൾ, ദ്രാവകത്തിന് തീവ്രമായ നിറമാകുമ്പോൾ (“വാർണിഷ്” രക്തം) പ്രതികരണം പോസിറ്റീവ് ആയി കണക്കാക്കപ്പെടുന്നു. ).

ദ്രാവകത്തിൻ്റെ നിറത്തിൻ്റെ തീവ്രതയും താഴെയുള്ള ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ അവശിഷ്ടത്തിൻ്റെ വലുപ്പവും (++++, +++, ++, +) അനുസരിച്ചാണ് ഹീമോലിസിസ് കാലതാമസത്തിൻ്റെ അളവ് വിലയിരുത്തുന്നത്.

അരി. 4. RSC യുടെ പ്രസ്താവനയും ഫലവും.

ഉപസംഹാരം:ടെസ്റ്റ് സെറത്തിൽ ആൻ്റിബോഡികൾ കണ്ടെത്തി.

വൈറസിൻ്റെ അതേ സെറോടൈപ്പിൻ്റെ ഏതെങ്കിലും തരത്തിലുള്ള ആൻറിബോഡികൾ കണ്ടെത്താൻ RSK നിങ്ങളെ അനുവദിക്കുന്നു.

ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് മൂല്യംഇതിന് ഉണ്ട്:

ജോടിയാക്കിയ സെറയിലെ ആൻ്റിബോഡി ടൈറ്ററിൽ നാലിരട്ടി വർദ്ധനവ് (ഒരു ഇൻഫ്ലുവൻസ പകർച്ചവ്യാധി സമയത്ത്);

ഒരു സ്വഭാവ ക്ലിനിക്കൽ ചിത്രമുള്ള രോഗികളുടെ രക്തത്തിലെ സെറം ഇരട്ടി വർദ്ധനവ്.

ഒരു ടാഗ് ഉപയോഗിച്ചുള്ള പ്രതികരണങ്ങൾ :

ഈ രീതികൾ വളരെ സെൻസിറ്റീവ് ആണ്. ഡൈകൾ, റേഡിയോ ആക്ടീവ് ഐസോടോപ്പുകൾ, എൻസൈമുകൾ മുതലായവ ആൻ്റിജനുകൾക്കോ ​​ആൻ്റിബോഡികൾക്കോ ​​ലേബലുകളായി ഉപയോഗിക്കുന്നു.

RIF - ഇമ്മ്യൂണോഫ്ലൂറസെൻസ് പ്രതികരണം

ആൻ്റിജൻ-ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്‌സിൻ്റെ നേരിയ സൂചനയെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ളതാണ് ഇമ്മ്യൂണോഫ്ലൂറസെൻസ് പ്രതികരണം

ലിങ്ക്ഡ് ഇമ്മ്യൂണോസോർബൻ്റ് അസ്സെ.

എറ്റിയോളജി മാത്രമല്ല, രോഗത്തിൻ്റെ ഘട്ടവും തിരിച്ചറിയുന്നതിനായി രക്തത്തിലെ നിർദ്ദിഷ്ട ആൻ്റിബോഡികൾ അല്ലെങ്കിൽ നിർദ്ദിഷ്ട രോഗങ്ങൾക്കുള്ള ആൻ്റിജനുകൾക്കായി തിരയുന്ന ഒരു ആധുനിക ലബോറട്ടറി പരിശോധന.

ELISA ഫലങ്ങൾ ഗുണപരമായും അളവിലും നൽകാം.

നിലവിൽ, ELISA ഇനിപ്പറയുന്ന സാഹചര്യങ്ങളിൽ ഉപയോഗിക്കുന്നു:

1) ഏതെങ്കിലും പകർച്ചവ്യാധികൾക്കുള്ള പ്രത്യേക ആൻ്റിബോഡികൾക്കായി തിരയുക;

2) ഏതെങ്കിലും രോഗങ്ങളുടെ ആൻ്റിജനുകൾക്കായി തിരയുക (പകർച്ചവ്യാധി, വെനീറോളജിക്കൽ);

3) ഗവേഷണം ഹോർമോൺ നിലരോഗി;

4) ട്യൂമർ മാർക്കറുകൾക്കുള്ള പരിശോധന;

5) സ്വയം രോഗപ്രതിരോധ രോഗങ്ങളുടെ സാന്നിധ്യത്തിനുള്ള പരിശോധന.

ചിത്രത്തിൽ, സോളിഡ്-ഫേസ് ELISA - അറിയപ്പെടുന്ന ആൻ്റിജനുകൾ (ഇടതുവശത്ത്) ഒരു പ്ലേറ്റിൻ്റെ കിണറ്റിൽ ആഗിരണം ചെയ്യപ്പെടുന്നു, (വലതുവശത്ത്) അറിയപ്പെടുന്ന ആൻ്റിജനുകളുടെ കിണറുകളിൽ

ELISA രീതിയുടെ പ്രയോജനങ്ങൾ:

1) ELISA രീതിയുടെ ഉയർന്ന പ്രത്യേകതയും സംവേദനക്ഷമതയും (90% ൽ കൂടുതൽ).

2) രോഗം നിർണ്ണയിക്കാനും പ്രക്രിയയുടെ ചലനാത്മകത ട്രാക്കുചെയ്യാനുമുള്ള കഴിവ്, അതായത്, വ്യത്യസ്ത കാലഘട്ടങ്ങളിലെ ആൻ്റിബോഡികളുടെ എണ്ണം താരതമ്യം ചെയ്യുക.

3) ഏതെങ്കിലും മെഡിക്കൽ സ്ഥാപനത്തിൽ ELISA ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്സിൻ്റെ ലഭ്യത.

ആപേക്ഷിക പോരായ്മ: രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണം (ആൻ്റിബോഡികൾ) കണ്ടെത്തൽ, പക്ഷേ രോഗകാരിയല്ല, ഒരു ടാഗ് എൻസൈമുമായി സംയോജിപ്പിച്ചിരിക്കുന്നു.

ELISA ടെസ്റ്റ് (പൊതു സംവിധാനം):

ഒരു രോഗപ്രതിരോധ സമുച്ചയത്തിൻ്റെ രൂപീകരണത്തോടുകൂടിയ ആൻ്റിജൻ്റെയും ആൻ്റിബോഡിയുടെയും രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണമാണ് എൻസൈം ഇമ്മ്യൂണോഅസേയുടെ അടിസ്ഥാനം: ആൻ്റിജൻ-ആൻ്റിബോഡി, ഇത് ആൻ്റിബോഡികളുടെ ഉപരിതലത്തിലെ പ്രത്യേക അടയാളങ്ങളുടെ എൻസൈമാറ്റിക് പ്രവർത്തനത്തിൽ മാറ്റം വരുത്തുന്നു.

പ്രതികരണ ഘടകങ്ങൾ:

1. AG(AT) അറിയപ്പെടുന്നത് - ടാബ്ലറ്റിൻ്റെ കിണറ്റിൽ.

2. AT (AG) പഠിക്കുന്നു.

3. AT (AG)-AG (AT) സമുച്ചയത്തിന് പ്രത്യേകമായ എൻസൈം ഉള്ള AT

4. എൻസൈമുമായി ഇടപഴകുന്ന ക്രോമോജെനിക് സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റ്

5. പരിഹാരം നിർത്തുക

ELISA യുടെ പ്രധാന ഘട്ടങ്ങൾ

1. പ്ലേറ്റിൻ്റെ കിണറുകളുടെ ഉപരിതലത്തിൽ ഒരു പ്രത്യേക രോഗകാരിയുടെ ശുദ്ധീകരിച്ച ആൻ്റിജൻ ഉണ്ട്. അവർ കൂട്ടിച്ചേർക്കുന്നു ജൈവ മെറ്റീരിയൽരോഗി, ഈ ആൻ്റിജനും ആവശ്യമുള്ള ആൻ്റിബോഡിയും (ഇമ്യൂണോഗ്ലോബുലിൻ) തമ്മിൽ ഒരു പ്രത്യേക പ്രതികരണം സംഭവിക്കുന്നു. ഒരു സമുച്ചയം രൂപപ്പെടുന്നു.

2. ഒരു സംയോജനം ചേർക്കുന്നു - എൻസൈമിനൊപ്പം AT. ആദ്യ ഘട്ടത്തിലെ AT-AG കോംപ്ലക്‌സിന് സംയോജനം പ്രത്യേകമാണ്. എൻസൈം സജീവമാകുന്നു.

3. അടിവസ്ത്രം കൂട്ടിച്ചേർക്കുകയും സജീവമായ എൻസൈം അതിനോട് പ്രതികരിക്കുകയും പരിഹാരത്തിൻ്റെ നിറമില്ലാത്ത നിറം മാറ്റുകയും ചെയ്യുന്നു.

4. എൻസൈം-സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റ് പ്രതിപ്രവർത്തനം നിർത്താൻ ഒരു സ്റ്റോപ്പ് സൊല്യൂഷൻ ചേർക്കുന്നു.

അക്കൌണ്ടിംഗ്.

പോസിറ്റീവ് ഫലം - മാറ്റംനിറങ്ങൾ, ചിത്രത്തിൽ - മഞ്ഞ.

ഇമ്മ്യൂണോക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് വിശകലനം

ഇമ്യൂണോക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക് അനാലിസിസ് രീതി (ഐസിഎ, ദ്രുത പരിശോധനകൾ) ഉയർന്ന നിലവാരമുള്ള പ്രാഥമിക സ്ക്രീനിംഗ് രീതിയാണ്, ഇത് ഉൾപ്പെടെയുള്ള ഏത് സാഹചര്യത്തിലും ഏതാനും മിനിറ്റുകൾക്കുള്ളിൽ വിശകലനം നടത്താൻ നിങ്ങളെ അനുവദിക്കുന്നു. "ഫീൽഡ്".

ഐസിഎയുടെ ഗുണങ്ങളിൽ ഇവ ഉൾപ്പെടുന്നു:

വേഗതയും ഉപയോഗ എളുപ്പവും;

ചെറിയ സാമ്പിൾ വോള്യങ്ങൾ, സാമ്പിൾ തയ്യാറാക്കലിൻ്റെ അഭാവം;

നിർമ്മാതാവിനും ഉപഭോക്താവിനും വിലകുറഞ്ഞത്;

വലിയ അളവുകളിൽ ടെസ്റ്റുകൾ നിർമ്മിക്കാനുള്ള സാധ്യത;

ഫലത്തിൻ്റെ വായനയുടെയും വ്യാഖ്യാനത്തിൻ്റെയും എളുപ്പം;

ഉയർന്ന സംവേദനക്ഷമതയും പുനരുൽപാദനക്ഷമതയും;

അളവ് നിർണ്ണയിക്കാനുള്ള സാധ്യത;

ഒരു കമ്പ്യൂട്ടറുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്ന പോർട്ടബിൾ റീഡറുകൾ ഉപയോഗിക്കുന്നതിനുള്ള സാധ്യത;

മൾട്ടി അനാലിസിസിൻ്റെ സാധ്യത.

ഘടകങ്ങൾ (ടെസ്റ്റ് സ്ട്രിപ്പിൽ പ്രയോഗിക്കുന്നു):

1. ഒരു കൊളോയ്ഡൽ ഗോൾഡ് ലേബൽ ഉള്ള സംയോജനം കണ്ടെത്തിയ ആൻ്റിജനുമായി ബന്ധപ്പെട്ടതാണ്.

2. AT ടെസ്റ്റ് ലൈൻ - AT-AG സമുച്ചയത്തിന് പ്രത്യേകം

3. കൺട്രോൾ ലൈനിൻ്റെ എബിഎസ് സംയോജനത്തിന് പ്രത്യേകമാണ്.

ICA ക്രമീകരണം:

1. സ്ട്രിപ്പിൻ്റെ നിയുക്ത ആരംഭ ഏരിയയിലേക്ക് സാമ്പിൾ പ്രയോഗിക്കുക.

2. ടെസ്റ്റ്, കൺട്രോൾ ലൈനുകളുടെ സ്ഥാനത്ത് നിറമുള്ള വരകൾ പ്രത്യക്ഷപ്പെടുന്നതിൻ്റെ രൂപത്തിൽ ഫലം നേടുന്നു.

അക്കൌണ്ടിംഗ്

പോസിറ്റീവ് - ടെസ്റ്റ് ലൈൻ സ്റ്റെയിൻ ചെയ്യുമ്പോൾ.

നെഗറ്റീവ് - ടെസ്റ്റ് ലൈനിൻ്റെ കളങ്കം ഇല്ലെങ്കിൽ.

അസാധുവാണ് - കൺട്രോൾ ലൈൻ സ്റ്റെയിൻ ചെയ്തിട്ടില്ലെങ്കിൽ.

ഐസിഎയുടെ പൊതു സംവിധാനം:

1. സാമ്പിൾ സ്റ്റാർട്ടിംഗ് ഫീൽഡിൽ (സാമ്പിൾ പാഡ്) അവതരിപ്പിക്കുകയും കൺജഗേറ്റ് പാഡിൽ സ്ഥിതി ചെയ്യുന്ന കൺജഗേറ്റുമായി (നിറമുള്ള ലേബലുള്ള ഒരു നിർദ്ദിഷ്ട ബോഡി) ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു. തൽഫലമായി, ഒരു നിറമുള്ള സമുച്ചയം രൂപം കൊള്ളുന്നു.

2. തത്ഫലമായുണ്ടാകുന്ന നിറമുള്ള രോഗപ്രതിരോധ സമുച്ചയം നൈട്രോസെല്ലുലോസ് മെംബ്രണിനൊപ്പം കാപ്പിലറി ശക്തികളുടെ പ്രവർത്തനത്തിൽ നീങ്ങുന്നു.ഒപ്പം ഇടപെടുന്നുAT ടെസ്റ്റ് ലൈനിനൊപ്പം.ഫലം ഒരൊറ്റ നിറമുള്ള പിങ്ക്-ചുവപ്പ് വരയാണ്.

3. AT (സംയോജനം) പരീക്ഷിച്ച ബാൻഡിൽ ബന്ധിപ്പിച്ചിട്ടില്ലകൂടുതൽ നീങ്ങുകയും നിയന്ത്രണരേഖയിലെത്തുകയും നിയന്ത്രണരേഖയുടെ എടിയുമായി ആശയവിനിമയം നടത്തുകയും ചെയ്യുന്നു.തൽഫലമായി, രണ്ടാമത്തെ നിറമുള്ള സ്ട്രിപ്പ് പ്രത്യക്ഷപ്പെടുന്നു.വിശകലനം ശരിയായി നടപ്പിലാക്കുകയാണെങ്കിൽ, ബയോളജിക്കൽ ഫ്ലൂയിഡ് സാമ്പിളിലെ ടെസ്റ്റ് ആൻ്റിജൻ്റെ (ആൻ്റിബോഡി) സാന്നിധ്യം പരിഗണിക്കാതെ തന്നെ കൺട്രോൾ ലൈൻ എല്ലായ്പ്പോഴും ദൃശ്യമാകണം.

2. സീറോളജിക്കൽ പ്രതികരണങ്ങൾ നടത്തുന്നതിനുള്ള വ്യവസ്ഥകൾ.

1. ഹോമോലോജസിൻ്റെ സാന്നിധ്യം - പരസ്പരം ആൻ്റിജനും ആൻ്റിബോഡിയും യോജിക്കുന്നു.

2. വൃത്തിയുള്ളതും ഉണങ്ങിയതുമായ വിഭവങ്ങൾ.

3. മരുന്നുകളുടെ ഒരു നിശ്ചിത അനുപാതം (മിക്കപ്പോഴും തുല്യമാണ്).

4. ഒരു ഇലക്ട്രോലൈറ്റിൻ്റെ നിർബന്ധിത സാന്നിധ്യം (ഐസോടോണിക് NaCl പരിഹാരം).

5. pH ന്യൂട്രൽ അല്ലെങ്കിൽ ചെറുതായി ക്ഷാരത്തിന് അടുത്ത്.

6. താപനില +37 ° C അല്ലെങ്കിൽ മുറിയിലെ താപനില (ആവശ്യമായും പോസിറ്റീവ്).

7. ആൻ്റിജൻ നിയന്ത്രണവും സെറം (ആൻ്റിബോഡി) നിയന്ത്രണവും നടത്തുന്നു.

3 സെറം ആവശ്യകതകൾ

സെറം കോശങ്ങളുടെ മിശ്രിതമില്ലാതെ പൂർണ്ണമായും സുതാര്യമായിരിക്കണം.

ആൻറിബോഡികൾ ഇതിനകം ലഭ്യമാകുമ്പോൾ, രോഗത്തിൻ്റെ രണ്ടാം ആഴ്ചയിൽ അവർ സാധാരണയായി ഇത് സ്വീകരിക്കുന്നു.

ഒഴിഞ്ഞ വയറിലോ ഭക്ഷണത്തിന് 6 മണിക്കൂറിന് ശേഷമോ 3-5 മില്ലി അളവിൽ രക്തം എടുക്കുന്നു.

സെറം ലഭിക്കുന്നതിന്, രക്തം ഊഷ്മാവിൽ 1 മണിക്കൂർ അവശേഷിക്കുന്നു അല്ലെങ്കിൽ സെൻട്രിഫ്യൂജ് ചെയ്യുന്നു. രൂപപ്പെട്ട മൂലകങ്ങൾ പിടിച്ചെടുക്കാതിരിക്കാൻ സെറം വളരെ ശ്രദ്ധാപൂർവ്വം വലിച്ചെടുക്കുന്നു.

രോഗപ്രതിരോധ സെറം ലഭിക്കുന്നത് ആളുകളുടെയോ മൃഗങ്ങളുടെയോ (സാധാരണയായി മുയലുകളുടെയും കുതിരകളുടെയും) രക്തത്തിൽ നിന്നാണ്, അനുബന്ധ ആൻ്റിജൻ (വാക്സിൻ) ഉപയോഗിച്ച് ഒരു നിശ്ചിത സ്കീം അനുസരിച്ച് പ്രതിരോധ കുത്തിവയ്പ്പ് നടത്തുന്നു. സെറം സാധാരണയായി ഉൽപാദനത്തിൽ തയ്യാറാക്കപ്പെടുന്നു.

4. പോസിറ്റീവ്, നെഗറ്റീവ് ഫലങ്ങളുടെ ആശയം.

ആർ.എ.

ഒരു പോസിറ്റീവ് പ്രതികരണത്തോടെ, നിഷ്ക്രിയമായി ഒട്ടിച്ച ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ ദ്വാരത്തിൻ്റെ അടിഭാഗം സ്കലോപ്പ്ഡ് അരികുകളുള്ള ("കുട") ഒരു ഇരട്ട പാളിയിൽ മൂടുന്നു; സങ്കലനത്തിൻ്റെ അഭാവത്തിൽ, ദ്വാരത്തിൻ്റെ മധ്യഭാഗത്ത് ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ അടിഞ്ഞുകൂടുന്നു, ഇത് കുത്തനെ നിർവചിച്ച അരികുകളുള്ള ഒരു കോംപാക്റ്റ് “ബട്ടൺ” രൂപപ്പെടുത്തുന്നു (മുകളിലുള്ള ചിത്രങ്ങൾ കാണുക).

ആർ.പി.

ഫലം പോസിറ്റീവ് ആണെങ്കിൽ, രണ്ട് പരിഹാരങ്ങളുടെ ഇൻ്റർഫേസിൽ ഒരു ക്ഷീര മോതിരം രൂപം കൊള്ളുന്നു (മുകളിലുള്ള ചിത്രങ്ങൾ കാണുക).

എലിസ.

പോസിറ്റീവ് പ്രതികരണത്തോടെ ലായനിയുടെ നിറത്തിൽ മാറ്റം സംഭവിക്കുന്നു.

ആർ.എസ്.കെ.

വൈകി ഹീമോലിസിസ് - പ്രതികരണം പോസിറ്റീവ് ആണ്; പൂരകങ്ങൾ സ്വതന്ത്രമാണെങ്കിൽ, ഹീമോലിസിസ് നിരീക്ഷിക്കപ്പെടുന്നു - പ്രതികരണം നെഗറ്റീവ് ആണ്(മുകളിലുള്ള ചിത്രങ്ങൾ കാണുക).

വാസർമാൻ പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ഫലങ്ങൾ:

a - ഹീമോലിസിസിൻ്റെ പൂർണ്ണമായ കാലതാമസം (+ + ++);

b - ഹീമോലിസിസിൽ കാലതാമസം (+ ++);

c - ഹീമോലിസിസിൻ്റെ ഭാഗിക കാലതാമസം (++);

d - ഹീമോലിസിസിൽ നേരിയ കാലതാമസം (+);

d - പൂർണ്ണമായ ഹീമോലിസിസ് (-).

ഹീമോലിസിസിൻ്റെ ഭാഗികവും ഉച്ചരിക്കുന്നതും പൂർണ്ണവുമായ കാലതാമസത്തോടെയുള്ള പ്രതികരണം പോസിറ്റീവ് ആണ്, ഇളം പിങ്ക് മുതൽ കടും ചുവപ്പ് വരെ ട്യൂബുകളിലെ ഉള്ളടക്കങ്ങളുടെ കറയുടെ അളവ് നിർണ്ണയിക്കുന്നു; നോൺ-ഹീമോലൈസ്ഡ് എറിത്രോസൈറ്റുകൾ പിന്നീട് ഒരു ചുവന്ന അവശിഷ്ടമായി മാറുന്നു.

ഹോം വർക്ക്:

1. മെറ്റീരിയൽ പഠിക്കുക

വീഡിയോയിൽ 3 കുറിപ്പുകൾ ഉണ്ടാക്കുക

മൈക്രോബയോളജിയിൽ

"അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണവും അതിൻ്റെ തരങ്ങളും (RA)"

പ്ലാൻ:

1. ആമുഖം ………………………………………………………………………………………… 3

2. ഗ്ലാസിലെ RA …………………………………………………………………………………….4

3. ടെസ്റ്റ് ട്യൂബ് RA……………………………………………………………………………………. 5

4. ഉപയോഗിച്ച സാഹിത്യം ……………………………………………………………….7

1. ആമുഖം.

മൈക്രോബയൽ ആൻ്റിജൻ്റെയും ആൻ്റിബോഡികളുടെയും പ്രതിപ്രവർത്തനം പ്രകൃതിയിൽ കർശനമായി നിർദ്ദിഷ്ടമാണ്, ഇത് രോഗകാരിയെയും അതിൻ്റെ വിഷവസ്തുക്കളെയും നിർവീര്യമാക്കുന്നതിന് മൃഗങ്ങളുടെ ശരീരത്തിൽ ലക്ഷ്യമിടുന്നു. വിട്രോയിലെ ആൻ്റിജൻ്റെയും ആൻ്റിബോഡികളുടെയും പ്രതിപ്രവർത്തനം, ചില വ്യവസ്ഥകളിൽ, ദൃശ്യമായ പ്രതിഭാസങ്ങളോടൊപ്പം (അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ, മഴ, ഇമ്യൂൺ ലിസിസ്), ഇത് പ്രായോഗിക ആവശ്യങ്ങൾക്കായി സീറോളജിക്കൽ (ലാറ്റിൻ സെറത്തിൽ നിന്ന്) എന്ന് വിളിക്കുന്ന എജി-എടി പ്രതികരണങ്ങൾ ഉപയോഗിക്കാൻ അനുവദിക്കുന്നു. ബയോഫാക്‌ടറികൾ അറിയപ്പെടുന്ന പ്രത്യേക സ്വഭാവമുള്ള (ഡയഗ്‌നോസ്റ്റിക്) ആൻ്റിജനുകളും ഇമ്യൂൺ സെറയും (ആൻ്റിബോഡികൾ) ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്നു. അത്തരം സെറയുടെ സഹായത്തോടെ, സീറോളജിക്കൽ പ്രതികരണങ്ങളിൽ ഒരു അജ്ഞാത സൂക്ഷ്മാണുക്കളെ തിരിച്ചറിയാൻ കഴിയും അല്ലെങ്കിൽ അറിയപ്പെടുന്ന ഒരു ആൻ്റിജൻ ഉപയോഗിച്ച്, രോഗകാരിയുടെ ആമുഖത്തിന് പ്രതികരണമായി ശരീരത്തിൽ സമന്വയിപ്പിച്ച ആൻ്റിബോഡികൾ കണ്ടെത്താനാകും, അങ്ങനെ ഒരു രോഗനിർണയം നടത്താം (സീറോളജിക്കൽ ഡയഗ്നോസിസ് ). കൂടാതെ, വാക്സിനേഷൻ അല്ലെങ്കിൽ ഒരു പകർച്ചവ്യാധിക്ക് ശേഷമുള്ള രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണത്തിൻ്റെ തീവ്രത വിലയിരുത്താൻ സീറോളജിക്കൽ പ്രതികരണങ്ങൾ ഉപയോഗിക്കാം.

ആൻറിബോഡികളുമായുള്ള കോർപ്പസ്കുലർ ആൻ്റിജനുകളുടെ ഇൻ വിട്രോ ഇൻ്ററാക്ഷനെയും തത്ഫലമായുണ്ടാകുന്ന കോംപ്ലക്സുകളുടെ അവശിഷ്ടത്തിൻ്റെ കഴിവിനെയും അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ളതാണ് പരോക്ഷ സങ്കലനം, കൂംബ്സ് പോലുള്ള അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണങ്ങൾ. സൂക്ഷ്മാണുക്കളിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചെടുക്കുന്ന ബാക്ടീരിയ കോശങ്ങൾ അല്ലെങ്കിൽ ലയിക്കുന്ന ആൻ്റിജനുകൾ കാരിയർ കോർപ്പസിലുകളിൽ സോർബുചെയ്യുന്നു: ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ, ലാറ്റക്സ് കണങ്ങൾ മുതലായവ കോർപ്പസ്കുലർ ആൻ്റിജനുകളായി ഉപയോഗിക്കുന്നു.

കോർപ്പസ്കുലർ ആൻ്റിജനുകളുടെ ആൻ്റിജനിക് ഡിറ്റർമിനൻ്റുകൾ പ്രത്യേകമായി ഹോമോലോജസ് ആൻ്റിബോഡികളുമായി (പ്രതികരണത്തിൻ്റെ പ്രത്യേക, അദൃശ്യ ഘട്ടം) ഇടപഴകുന്നു, തുടർന്ന് ആൻ്റിജൻ-ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്സുകൾ നഗ്നനേത്രങ്ങൾക്ക് ദൃശ്യമാകുന്ന വലിയ സംഘങ്ങളെ രൂപപ്പെടുത്തുന്നു, ഇത് ഒരു അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റ് (പ്രതികരണത്തിൻ്റെ നിർദ്ദിഷ്ടമല്ലാത്ത, ദൃശ്യമാകുന്ന ഘട്ടം. ). ഫ്ലാഗെലേറ്റ് ഇല്ലാത്ത സൂക്ഷ്മാണുക്കൾ (ബ്രൂസെല്ലെ) ഗ്രാനുലാർ അഗ്ലൂറ്റിനൻ്റുകൾ ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്നു, അതേസമയം ഫ്ലാഗെലേറ്റഡ് രൂപങ്ങൾ (എസ്ഷെറിച്ചിയ, സാൽമൊണെല്ല) വലിയ കോട്ടൺ അഗ്ലൂറ്റിനൻ്റുകൾ ഉത്പാദിപ്പിക്കുന്നു, ഇത് ടെസ്റ്റ് ട്യൂബിൻ്റെ അടിയിൽ വിപരീത കുടയുടെ രൂപത്തിൽ സ്ഥിരതാമസമാക്കുകയും ഇളകുമ്പോൾ എളുപ്പത്തിൽ തകരുകയും ചെയ്യുന്നു. ആൻ്റിജനുകളും ആൻ്റിബോഡികളും ഒരു ഇലക്ട്രോലൈറ്റിൻ്റെ (0.8% സോഡിയം ക്ലോറൈഡ് ലായനി) സാന്നിധ്യത്തിൽ മാത്രം ഇടപെടുന്നു. ഇലക്ട്രോലൈറ്റിലെ ഉപ്പ് സാന്ദ്രത, സസ്പെൻഷനിലെ സൂക്ഷ്മജീവ കോശങ്ങളുടെ എണ്ണം, സെറം സാന്ദ്രത, പിഎച്ച്, താപനില, മറ്റ് ഘടകങ്ങൾ എന്നിവ പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ഗതിയെ സ്വാധീനിക്കുന്നു.

അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം (റ).

ആൻ്റിജൻ്റെ പ്രതിപ്രവർത്തനത്തെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ള നിർദ്ദിഷ്ട അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ ഉണ്ട് കൂടെഹോമോലോജസ് ആൻ്റിബോഡി , ഈ ആൻ്റിജൻ അവതരിപ്പിച്ച മൃഗത്തിൻ്റെ ശരീരത്തിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു (ഇമ്യൂണോഅഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ); നോൺസ്പെസിഫിക് (കെമിക്കൽ), പരിസ്ഥിതിയുടെ പിഎച്ച്, ഇലക്ട്രോലൈറ്റുകളുടെ സാന്ദ്രതയിലെ മാറ്റങ്ങളിൽ നിന്ന് ഉണ്ടാകുന്ന; സ്വാഭാവിക ലായനിയിൽ ബാക്ടീരിയകൾ (ആർ-ഫോമിൽ) സസ്പെൻഡ് ചെയ്യപ്പെടുമ്പോഴും ചൂടാക്കുമ്പോഴും ഇത് നിരീക്ഷിക്കപ്പെടുന്നു, ഇത് ബാക്ടീരിയ കോശത്തിൻ്റെ കൊളോയ്ഡൽ അവസ്ഥയിലെ മാറ്റവുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു. ആൻ്റിജൻ , ആർഎയിൽ ഉൾപ്പെടുന്നതിനെ അഗ്ലൂട്ടിനോജൻ എന്നും ആൻ്റിബോഡിയെ അഗ്ലൂട്ടിനിൻ എന്നും തത്ഫലമായുണ്ടാകുന്ന അവശിഷ്ടത്തെ അഗ്ലൂട്ടിനേറ്റ് എന്നും വിളിക്കുന്നു. ഒരു അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റ് രൂപപ്പെടുമ്പോൾ, ആൻ്റിജൻ്റെയും ആൻ്റിബോഡികളുടെയും അളവ് അനുപാതം പ്രധാനമാണ് (ഒപ്റ്റിമൽ പ്രതിഭാസം). ആൻ്റിബോഡികളുടെ അധികമോ കുറവോ ഉള്ളതിനാൽ, ഒരു കാലതാമസം സംഭവിക്കുന്നു.

മൈക്രോബയോളജിക്കൽ പ്രാക്ടീസിൽ ഉപയോഗിക്കുന്ന ആദ്യത്തെ രോഗപ്രതിരോധ പ്രതിപ്രവർത്തനങ്ങളിലൊന്നാണ് അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം (RA). ആദ്യമായി (1895), ടൈഫോയ്ഡ് പനി നിർണ്ണയിക്കാൻ എഫ്.വിഡാൽ ആർഎ ഉപയോഗിച്ചു. പിന്നീട് (1897), എ. റൈറ്റ് മനുഷ്യരിൽ ബ്രൂസെല്ലോസിസ് നിർണ്ണയിക്കാൻ ഇതേ പ്രതികരണം ഉപയോഗിച്ചു. കോഴികളിലെ പുള്ളോറോസിസ്, എലിപ്പനി, മാരിലെ സാംക്രമിക ഗർഭഛിദ്രം, അതുപോലെ അറിയപ്പെടുന്ന അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റിംഗ് സെറം ഉപയോഗിച്ച് അജ്ഞാത മൈക്രോബയൽ കൾച്ചറുകൾ ടൈപ്പ് ചെയ്യുന്നതിനും RA പ്രയോഗം കണ്ടെത്തി. RA വളരെ സെൻസിറ്റീവ് ആണ്; 1 മില്ലിയിൽ 0.01 μg ആൻ്റിബോഡി പ്രോട്ടീൻ നൈട്രജൻ കണ്ടെത്തുന്നതിന് ഇത് ഉപയോഗിക്കാം.

പഠനത്തിൻ്റെ രീതിശാസ്ത്രപരമായ നിർവ്വഹണത്തിലും ഉദ്ദേശ്യത്തിലും വ്യത്യാസമുള്ള, അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണത്തിൻ്റെ നിരവധി വകഭേദങ്ങൾ വികസിപ്പിച്ചെടുത്തിട്ടുണ്ട്.

2. ഗ്ലാസിൽ റാ.

ആർഎയുടെ ഈ വകഭേദത്തിൽ, ടെസ്റ്റ് വിഷയങ്ങൾ ഒന്നുകിൽ സെറമോ ആൻ്റിജനോ ആകാം, എന്നാൽ മിക്കപ്പോഴും ഈ ഓപ്ഷൻ സൂക്ഷ്മാണുക്കളെ തിരിച്ചറിയാൻ ഉപയോഗിക്കുന്നു.

1. സൂക്ഷ്മാണുക്കളെ (m/o) തിരിച്ചറിയാൻ, അറിയപ്പെടുന്ന അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റിംഗ് സെറത്തിൻ്റെ ഒരു തുള്ളി, ഉദാഹരണത്തിന് സാൽമൊണല്ല സെറം, ഒരു തുള്ളി ഫിസിയോളജിക്കൽ സൊല്യൂഷൻ (നിയന്ത്രണം) എന്നിവ കൊഴുപ്പ് രഹിത ഗ്ലാസ് സ്ലൈഡിൽ പ്രത്യേകം പ്രയോഗിക്കുന്നു. തുടർന്ന്, ഒരു ബാക്ടീരിയോളജിക്കൽ ലൂപ്പ് ഉപയോഗിച്ച്, പഠിച്ച സംസ്കാരത്തിൻ്റെ ബാക്ടീരിയ പിണ്ഡം ഒരു പെട്രി ഡിഷിലെ കോളനിയിൽ നിന്നോ ഒരു ടെസ്റ്റ് ട്യൂബിലെ ചരിഞ്ഞ MPA യുടെ ഉപരിതലത്തിൽ നിന്നോ എടുത്ത് ഒരു ഏകീകൃത സസ്പെൻഷൻ ലഭിക്കുന്നതുവരെ രോഗപ്രതിരോധ സെറത്തിലും ഫിസിയോളജിക്കൽ ലായനിയിലും പ്രത്യേകം സസ്പെൻഡ് ചെയ്യുന്നു. . ഫലം 2 ... 4 മിനിറ്റിനു ശേഷം കണക്കിലെടുക്കുന്നു.

ഫലങ്ങൾക്കുള്ള അക്കൗണ്ടിംഗ്: നിയന്ത്രണ സാമ്പിളിൽ മാറ്റങ്ങളൊന്നും ഉണ്ടാകരുത്. ബാക്ടീരിയ സംസ്കാരം രോഗപ്രതിരോധ സെറവുമായി പ്രത്യേകമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നുവെങ്കിൽ, അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റ് അടരുകൾ പ്രത്യക്ഷപ്പെടുന്നു (പോസിറ്റീവ് ഫലം); അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതിഭാസമൊന്നുമില്ലെങ്കിൽ, പഠനത്തിന് കീഴിലുള്ള ബാക്ടീരിയ സംസ്കാരം രോഗപ്രതിരോധ സെറവുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നില്ലെന്ന് നിഗമനം.

2. ബ്രൂസെല്ലോസിസിൻ്റെ സെറോഡയാഗ്നോസിസിൽ ഉപയോഗിക്കുന്ന റോസ് ബംഗാൾ ടെസ്റ്റിൻ്റെ ഉദാഹരണം ഉപയോഗിച്ച് ടെസ്റ്റ് ബ്ലഡ് സെറമിലെ ആനിറ്റലുകൾ കണ്ടെത്തുന്നത് നമുക്ക് പരിഗണിക്കാം. 0.3 മില്ലി ടെസ്റ്റ് അനിമൽ ബ്ലഡ് സെറം, 0.03 മില്ലി ബ്രൂസെല്ലോസിസ് ആൻ്റിജൻ (റോസ്-ബംഗാൾ-സ്റ്റെയിൻഡ് ബ്രൂസെല്ല സെല്ലുകൾ) ഒരു ഗ്ലാസ് സ്ലൈഡിൽ പ്രയോഗിക്കുന്നു. ഗ്ലാസ് കുലുക്കിക്കൊണ്ട് ഘടകങ്ങൾ നന്നായി കലർത്തി 4 മിനിറ്റിനുശേഷം ഫലം കണക്കിലെടുക്കുന്നു.

ഫലങ്ങളുടെ റെക്കോർഡിംഗ്: പ്രതികരണം പോസിറ്റീവ് ആണെങ്കിൽ, അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റിൻ്റെ പിങ്ക് അടരുകൾ പ്രത്യക്ഷപ്പെടുന്നു. ഈ തരത്തിലുള്ള സീറോളജിക്കൽ പ്രതികരണത്തെ ഗുണപരമായി തരംതിരിച്ചിരിക്കുന്നു, കാരണം ഇത് മൃഗങ്ങളുടെ രക്തത്തിലെ സെറമിലെ രോഗകാരിയിലേക്കുള്ള ആൻ്റിബോഡികൾ കണ്ടെത്തുന്നതിന് ഉപയോഗിക്കാം, പക്ഷേ അവയുടെ അളവ് വിലയിരുത്തുന്നത് അസാധ്യമാണ്.

1.1 സമാഹരണ പ്രതികരണം (RA)

സമാഹരണ പ്രതികരണം (RA)

അതിൻ്റെ പ്രത്യേകത, പ്രകടനത്തിൻ്റെ ലാളിത്യം, പ്രകടനക്ഷമത എന്നിവ കാരണം, പല പകർച്ചവ്യാധികളുടെയും രോഗനിർണയത്തിനായി മൈക്രോബയോളജിക്കൽ പ്രാക്ടീസിൽ അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം വ്യാപകമാണ്.

മുഴുവൻ സൂക്ഷ്മജീവികളുമായോ മറ്റ് കോശങ്ങളുമായോ (അഗ്ലൂട്ടിനോജൻസ്) ആൻ്റിബോഡികളുടെ (അഗ്ലൂട്ടിനിൻസ്) പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിൻ്റെ പ്രത്യേകതയെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ളതാണ് അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം. ഈ പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിൻ്റെ ഫലമായി, കണികകളും അഗ്ലോമറേറ്റുകളും രൂപം കൊള്ളുന്നു, അവ അടരുകളായി (അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റ്) രൂപപ്പെടുന്നു.

സങ്കലന പ്രതികരണത്തിൽ ജീവനുള്ളതും കൊല്ലപ്പെട്ടതുമായ ബാക്ടീരിയകൾ, സ്പൈറോചെറ്റുകൾ, ഫംഗസ്, പ്രോട്ടോസോവ, റിക്കറ്റ്‌സിയ, അതുപോലെ ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ, മറ്റ് കോശങ്ങൾ എന്നിവ ഉൾപ്പെടുന്നു. പ്രതികരണം രണ്ട് ഘട്ടങ്ങളിലായാണ് സംഭവിക്കുന്നത്: ആദ്യത്തേത് (അദൃശ്യമായത്) നിർദ്ദിഷ്ടം, ആൻ്റിജൻ്റെയും ആൻ്റിബോഡികളുടെയും സംയോജനം, രണ്ടാമത്തേത് (ദൃശ്യമായത്) നിർദ്ദിഷ്ടമല്ലാത്തത്, ആൻ്റിജനുകളുടെ ഒട്ടിക്കൽ, അതായത്. agglutinate രൂപീകരണം.

ഒരു ഡൈവാലൻ്റ് ആൻ്റിബോഡിയുടെ ഒരു സജീവ കേന്ദ്രം ഒരു ആൻ്റിജൻ്റെ ഡിറ്റർമിനൻ്റ് ഗ്രൂപ്പുമായി സംയോജിപ്പിക്കുമ്പോൾ ഒരു അഗ്ലൂറ്റിനേറ്റ് രൂപം കൊള്ളുന്നു. ഏതെങ്കിലും സീറോളജിക്കൽ പ്രതികരണം പോലെ, അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം ഇലക്ട്രോലൈറ്റുകളുടെ സാന്നിധ്യത്തിലാണ് സംഭവിക്കുന്നത്.

ബാഹ്യമായി, പോസിറ്റീവ് അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണത്തിൻ്റെ പ്രകടനത്തിന് ഇരട്ട സ്വഭാവമുണ്ട്. സോമാറ്റിക് O2 ആൻറിജൻ മാത്രമുള്ള ഫ്ലാഗെലേറ്റഡ് സൂക്ഷ്മാണുക്കളിൽ, സൂക്ഷ്മജീവ കോശങ്ങൾ നേരിട്ട് ഒന്നിച്ചുനിൽക്കുന്നു. ഈ സങ്കലനത്തെ ഫൈൻ-ഗ്രെയിൻഡ് എന്ന് വിളിക്കുന്നു. ഇത് 18 22 മണിക്കൂറിനുള്ളിൽ സംഭവിക്കുന്നു. വി

ഫ്ലാഗെലേറ്റ് സൂക്ഷ്മാണുക്കൾക്ക് രണ്ട് ആൻ്റിജനുകളുണ്ട്: സോമാറ്റിക് O2 ആൻ്റിജനും ഫ്ലാഗെല്ലർ H2 ആൻ്റിജനും. കോശങ്ങളെ ഫ്ലാഗെല്ല ഉപയോഗിച്ച് ഒട്ടിച്ചാൽ, വലിയതും അയഞ്ഞതുമായ അടരുകൾ രൂപം കൊള്ളുന്നു, ഈ സംയോജന പ്രതികരണത്തെ നാടൻ-ധാന്യമെന്ന് വിളിക്കുന്നു. ഇത് 24 മണിക്കൂറിനുള്ളിൽ സംഭവിക്കുന്നു.

രോഗിയുടെ രക്തത്തിലെ സെറമിലെ നിർദ്ദിഷ്ട ആൻ്റിബോഡികളുടെ ഗുണപരവും അളവ്പരവുമായ നിർണ്ണയത്തിനും ഒറ്റപ്പെട്ട രോഗകാരിയുടെ ഇനം നിർണ്ണയിക്കുന്നതിനും അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം നടത്താം. വി

അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം ഒരു വിപുലീകരിച്ച പതിപ്പിലും നടത്താം, ഇത് ഒരു ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് ടൈറ്ററിലേക്ക് ലയിപ്പിച്ച സെറം ഉപയോഗിച്ച് പ്രവർത്തിക്കാൻ നിങ്ങളെ അനുവദിക്കുന്നു, കൂടാതെ ഒരു വേരിയൻ്റിലും സൂചന പ്രതികരണം, ഇത് തത്വത്തിൽ, നിർദ്ദിഷ്ട ആൻ്റിബോഡികൾ കണ്ടെത്തുന്നതിനോ രോഗകാരിയുടെ ഇനം നിർണ്ണയിക്കുന്നതിനോ അനുവദിക്കുന്നു.

വിശദമായ അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം നടത്തുമ്പോൾ, വിഷയത്തിൻ്റെ രക്തത്തിലെ സെറമിലെ നിർദ്ദിഷ്ട ആൻ്റിബോഡികൾ കണ്ടെത്തുന്നതിന്, ടെസ്റ്റ് സെറം 1:50 അല്ലെങ്കിൽ 1:100 നേർപ്പിക്കുമ്പോൾ എടുക്കുന്നു. പൂർണ്ണമായതോ ചെറുതായി നേർപ്പിച്ചതോ ആയ സെറത്തിൽ സാധാരണ ആൻ്റിബോഡികൾ വളരെ ഉയർന്ന സാന്ദ്രതയിൽ ഉണ്ടായിരിക്കാം, തുടർന്ന് പ്രതികരണ ഫലങ്ങൾ കൃത്യമല്ലാത്തതാകാം. പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ഈ പതിപ്പിൽ പരിശോധിക്കുന്ന മെറ്റീരിയൽ രോഗിയുടെ രക്തമാണ്.

രക്തം ഒഴിഞ്ഞ വയറിലോ ഭക്ഷണത്തിന് 6 മണിക്കൂറിനു മുമ്പോ എടുക്കുന്നു (അല്ലെങ്കിൽ രക്തത്തിലെ സെറമിൽ കൊഴുപ്പിൻ്റെ തുള്ളികൾ ഉണ്ടാകാം, ഇത് മേഘാവൃതവും ഗവേഷണത്തിന് അനുയോജ്യവുമല്ല). രോഗിയുടെ രക്ത സെറം സാധാരണയായി രോഗത്തിൻ്റെ രണ്ടാം ആഴ്ചയിൽ ലഭിക്കുന്നു, ക്യൂബിറ്റൽ സിരയിൽ നിന്ന് 3 × 4 മില്ലി രക്തം അണുവിമുക്തമായി ശേഖരിക്കുന്നു (ഈ സമയം പരമാവധി നിർദ്ദിഷ്ട ആൻ്റിബോഡികൾ കേന്ദ്രീകരിച്ചിരിക്കുന്നു). ഒരു നിർദ്ദിഷ്ട ആൻ്റിജനിക് ഘടനയുള്ള ഒരു പ്രത്യേക സ്പീഷിസിൻ്റെ കൊല്ലപ്പെട്ടതും എന്നാൽ നശിപ്പിക്കപ്പെടാത്തതുമായ സൂക്ഷ്മജീവി കോശങ്ങളിൽ നിന്ന് തയ്യാറാക്കിയ ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് ഒരു അറിയപ്പെടുന്ന ആൻ്റിജനായി ഉപയോഗിക്കുന്നു.

രോഗകാരിയുടെ ഇനവും തരവും നിർണ്ണയിക്കാൻ വിശദമായ അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം നടത്തുമ്പോൾ, പഠിക്കുന്ന മെറ്റീരിയലിൽ നിന്ന് വേർപെടുത്തിയ ഒരു തത്സമയ രോഗകാരിയാണ് ആൻ്റിജൻ. ഇമ്മ്യൂൺ ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് സെറത്തിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന ആൻ്റിബോഡികൾ അറിയപ്പെടുന്നു. വി

രോഗപ്രതിരോധം ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് സെറംവാക്സിനേഷൻ നൽകിയ മുയലിൻ്റെ രക്തത്തിൽ നിന്ന് ലഭിച്ചതാണ്. ടൈറ്റർ നിർണ്ണയിച്ച ശേഷം (ആൻ്റിബോഡികൾ കണ്ടെത്തുന്ന പരമാവധി നേർപ്പിക്കൽ), ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് സെറം ഒരു പ്രിസർവേറ്റീവ് ചേർത്ത് ആംപ്യൂളുകളിലേക്ക് ഒഴിക്കുന്നു. ഒറ്റപ്പെട്ട രോഗകാരിയുടെ ആൻ്റിജനിക് ഘടനയാൽ തിരിച്ചറിയാൻ ഈ സെറം ഉപയോഗിക്കുന്നു.

അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ഓപ്ഷനുകൾ

ഈ പ്രതിപ്രവർത്തനങ്ങളിൽ കണങ്ങളുടെ രൂപത്തിലുള്ള ആൻ്റിജനുകൾ ഉൾപ്പെടുന്നു (മൈക്രോബയൽ സെല്ലുകൾ, ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ, മറ്റ് കോർപ്പസ്കുലർ ആൻ്റിജനുകൾ), അവ ആൻ്റിബോഡികളാൽ ഒട്ടിക്കുകയും അവശിഷ്ടങ്ങൾ ഉണ്ടാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.

ഒരു അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ റിയാക്ഷൻ (RA) നടത്താൻ, മൂന്ന് ഘടകങ്ങൾ ആവശ്യമാണ്: 1) ആൻ്റിജൻ (അഗ്ലൂട്ടിനോജൻ); 2) ആൻ്റിബോഡി (അഗ്ലൂട്ടിനിൻ), 3) ഇലക്ട്രോലൈറ്റ് (ഐസോടോണിക് സോഡിയം ക്ലോറൈഡ് ലായനി).

ഓറിയൻ്റേറ്റീവ് (പ്ലേറ്റ്) അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം (RA)

ഊഷ്മാവിൽ ഒരു ഗ്ലാസ് സ്ലൈഡിൽ ഒരു സൂചന, അല്ലെങ്കിൽ പ്ലേറ്റ്, RA സ്ഥാപിച്ചിരിക്കുന്നു. ഇത് ചെയ്യുന്നതിന്, ഒരു പാസ്ചർ പൈപ്പറ്റ് ഉപയോഗിച്ച് ഒരു തുള്ളി സെറം 1:10 1:20 നേർപ്പിക്കുകയും ഐസോടോണിക് സോഡിയം ക്ലോറൈഡ് ലായനിയുടെ നിയന്ത്രണ ഡ്രോപ്പ് ഗ്ലാസിൽ വെവ്വേറെ പ്രയോഗിക്കുകയും ചെയ്യുക. കോളനികൾ അല്ലെങ്കിൽ ബാക്ടീരിയയുടെ ദൈനംദിന സംസ്കാരം (ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്സിൻ്റെ ഒരു തുള്ളി) രണ്ട് ബാക്ടീരിയോളജിക്കൽ ലൂപ്പുകളിലും അവതരിപ്പിക്കുകയും നന്നായി കലർത്തുകയും ചെയ്യുന്നു. പ്രതികരണങ്ങൾ കുറച്ച് മിനിറ്റുകൾക്ക് ശേഷം ദൃശ്യപരമായി കണക്കിലെടുക്കുന്നു, ചിലപ്പോൾ ഒരു ഭൂതക്കണ്ണാടി (x5) ഉപയോഗിക്കുന്നു. പോസിറ്റീവ് ആർഎയിൽ, ഒരു തുള്ളി സെറത്തിൽ വലുതും ചെറുതുമായ അടരുകളുടെ രൂപം ശ്രദ്ധിക്കപ്പെടുന്നു; നെഗറ്റീവ് ആണെങ്കിൽ, സെറം ഒരേപോലെ മേഘാവൃതമായി തുടരുന്നു.

പരോക്ഷ (നിഷ്ക്രിയ) ഹെമാഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ പ്രതികരണം (RNGA, RPGA)

പ്രതികരണം നടത്തുന്നു: 1) പോളിസാക്രറൈഡുകൾ, പ്രോട്ടീനുകൾ, ബാക്ടീരിയകളുടെ സത്തിൽ, മറ്റ് ചിതറിക്കിടക്കുന്ന പദാർത്ഥങ്ങൾ, റിക്കറ്റ്സിയ, വൈറസുകൾ, അഗ്ലൂട്ടിനിനുകളുള്ള കോംപ്ലക്സുകൾ പരമ്പരാഗത ആർഎകളിൽ കാണാൻ കഴിയില്ല, അല്ലെങ്കിൽ 2) രോഗികളുടെ സെറയിലെ ആൻ്റിബോഡികൾ കണ്ടെത്തുന്നതിന്. ഈ വളരെ ചിതറിക്കിടക്കുന്ന പദാർത്ഥങ്ങളും ഏറ്റവും ചെറിയ സൂക്ഷ്മാണുക്കളും.

നിഷ്ക്രിയ കണങ്ങളിൽ (ലാറ്റക്സ്, സെല്ലുലോസ്, പോളിസ്റ്റൈറൈൻ, ബേരിയം ഓക്സൈഡ് മുതലായവ അല്ലെങ്കിൽ ചെമ്മരിയാടുകളുടെ ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ, മനുഷ്യ രക്തഗ്രൂപ്പ് I(0)) ആൻ്റിബോഡികൾ മുൻകൂർ ആഗിരണം ചെയ്യപ്പെടുന്ന ആൻ്റിജനുകളുമായി പ്രതിപ്രവർത്തനം നടത്തുന്ന ഒരു പ്രതികരണമായാണ് പരോക്ഷമായ അല്ലെങ്കിൽ നിഷ്ക്രിയമായ അഗ്ലൂറ്റിനേഷൻ മനസ്സിലാക്കുന്നത്.

നിഷ്ക്രിയ ഹീമാഗ്ലൂട്ടിനേഷൻ പ്രതികരണത്തിൽ (ആർപിഎഎ), ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ ഒരു വാഹകനായി ഉപയോഗിക്കുന്നു. ആൻറിജൻ-ലോഡ് ചെയ്ത ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ ഈ ആൻ്റിജനിലേക്കുള്ള പ്രത്യേക ആൻ്റിബോഡികളുടെ സാന്നിധ്യത്തിൽ ഒന്നിച്ചു ചേർന്ന് അവശിഷ്ടമാക്കുന്നു. ആൻ്റിബോഡികൾ (സെറോഡയഗ്നോസിസ്) കണ്ടുപിടിക്കുന്നതിനുള്ള എറിത്രോസൈറ്റ് ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് ആയി ആൻ്റിജൻ സെൻസിറ്റൈസ്ഡ് എറിത്രോസൈറ്റുകൾ ആർപിജിഎയിൽ ഉപയോഗിക്കുന്നു. ചുവന്ന രക്താണുക്കളിൽ ആൻ്റിബോഡികൾ (എറിത്രോസൈറ്റ് ആൻറിബോഡി ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്കം) അടങ്ങിയിട്ടുണ്ടെങ്കിൽ, ആൻ്റിജനുകൾ കണ്ടെത്തുന്നതിന് ഇത് ഉപയോഗിക്കാം.

സ്റ്റേജിംഗ്. പോളിസ്റ്റൈറൈൻ പ്ലേറ്റുകളുടെ കിണറുകളിൽ സെറത്തിൻ്റെ സീരിയൽ ഡൈല്യൂഷനുകളുടെ ഒരു പരമ്പര തയ്യാറാക്കപ്പെടുന്നു. അവസാന കിണറ്റിൽ 0.5 മില്ലി പോസിറ്റീവ് സെറവും അവസാന കിണറ്റിൽ 0.5 മില്ലി ഫിസിയോളജിക്കൽ ലായനിയും (നിയന്ത്രണങ്ങൾ) ചേർക്കുക. തുടർന്ന് എല്ലാ കിണറുകളിലും 0.1 മില്ലി നേർപ്പിച്ച എറിത്രോസൈറ്റ് ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്സ് ചേർക്കുക, കുലുക്കി ഒരു തെർമോസ്റ്റാറ്റിൽ 2 മണിക്കൂർ വയ്ക്കുക.

അക്കൌണ്ടിംഗ്. IN പോസിറ്റീവ് കേസ്എറിത്രോസൈറ്റുകൾ ദ്വാരത്തിൻ്റെ അടിയിൽ കോശങ്ങളുടെ ഇരട്ട പാളിയുടെ രൂപത്തിൽ, മടക്കിയതോ മുല്ലതോ ആയ അരികുള്ള (വിപരീതമായ കുട) രൂപത്തിൽ സ്ഥിരതാമസമാക്കുന്നു; നെഗറ്റീവ് ആയി അവ ഒരു ബട്ടണിൻ്റെയോ മോതിരത്തിൻ്റെയോ രൂപത്തിൽ സ്ഥിരതാമസമാക്കുന്നു.

1.2 ന്യൂട്രലൈസേഷൻ പ്രതികരണം. ലൈസിസ്,
ഓപ്സോനോഫാഗോസൈറ്റിക് പ്രതികരണം, ഹൈപ്പർസെൻസിറ്റിവിറ്റി പ്രതികരണം

ആൻ്റിടോക്സിൻ (RN) ഉപയോഗിച്ച് എക്സോടോക്സിൻ ന്യൂട്രലൈസേഷൻ്റെ പ്രതികരണം

എക്സോടോക്സിൻ ഫലത്തെ നിർവീര്യമാക്കാനുള്ള ആൻ്റിടോക്സിക് സെറത്തിൻ്റെ കഴിവിനെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ളതാണ് പ്രതികരണം. ആൻ്റിടോക്സിക് സെറമുകളുടെ ടൈറ്ററേഷനും എക്സോടോക്സിൻ നിർണ്ണയിക്കാനും ഇത് ഉപയോഗിക്കുന്നു.

സെറം ടൈറ്റേറ്റ് ചെയ്യുമ്പോൾ, ആൻ്റിടോക്സിക് സെറമിൻ്റെ വ്യത്യസ്ത നേർപ്പിക്കലുകളിൽ അനുബന്ധ വിഷത്തിൻ്റെ ഒരു നിശ്ചിത ഡോസ് ചേർക്കുന്നു. ആൻറിജൻ പൂർണ്ണമായും നിർവീര്യമാക്കപ്പെടുകയും ചെലവഴിക്കാത്ത ആൻ്റിബോഡികൾ ഇല്ലാതിരിക്കുകയും ചെയ്യുമ്പോൾ, പ്രാരംഭ ഫ്ലോക്കുലേഷൻ സംഭവിക്കുന്നു. ഫ്ലോക്കുലേഷൻ പ്രതികരണം സെറത്തിൻ്റെ ടൈറ്ററേഷനായി (ഉദാഹരണത്തിന്, ഡിഫ്തീരിയ) മാത്രമല്ല, ടോക്സിൻ, ടോക്സോയിഡ് എന്നിവയുടെ ടൈറ്ററേഷനും ഉപയോഗിക്കാം. ആൻ്റിടോക്സിക് തെറാപ്പി സെറമുകളുടെ പ്രവർത്തനം നിർണ്ണയിക്കുന്നതിനുള്ള ഒരു രീതി എന്ന നിലയിൽ ആൻറിടോക്സിനുമായുള്ള ടോക്സിൻ ന്യൂട്രലൈസേഷൻ്റെ പ്രതികരണത്തിന് വലിയ പ്രായോഗിക പ്രാധാന്യമുണ്ട്. ഈ പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിലെ ആൻ്റിജൻ ഒരു യഥാർത്ഥ എക്സോടോക്സിൻ ആണ്.

ആൻ്റിടോക്സിക് സെറത്തിൻ്റെ ശക്തി നിർണ്ണയിക്കുന്നത് എഇയുടെ പരമ്പരാഗത യൂണിറ്റുകളാണ്.

1 AE ബോട്ടുലിനം സെറം അതിൻ്റെ അളവ് 1000 DLM ബോട്ടുലിനം ടോക്‌സിനെ നിർവീര്യമാക്കുന്നു. എക്സോടോക്സിൻ ഇനം അല്ലെങ്കിൽ തരം നിർണ്ണയിക്കുന്നതിനുള്ള ന്യൂട്രലൈസേഷൻ പ്രതികരണം (ടെറ്റനസ്, ബോട്ടുലിസം, ഡിഫ്തീരിയ മുതലായവയുടെ രോഗനിർണയത്തിനായി) വിട്രോയിലും (റാമോൺ അനുസരിച്ച്) നടത്താം, കൂടാതെ സൂക്ഷ്മജീവ കോശങ്ങളുടെ ടോക്സിജെനിസിറ്റി നിർണ്ണയിക്കുമ്പോൾ - ഒരു ജെല്ലിൽ ( Ouchterlony പ്രകാരം).

ലിസിസ് പ്രതികരണം (RL)

ശരീരത്തിലേക്ക് പ്രവേശിക്കുന്ന സൂക്ഷ്മാണുക്കളെയോ സെല്ലുലാർ ഘടകങ്ങളെയോ പിരിച്ചുവിടാനുള്ള കഴിവാണ് രോഗപ്രതിരോധ സെറത്തിൻ്റെ സംരക്ഷണ ഗുണങ്ങളിലൊന്ന്.

സെൽ പിരിച്ചുവിടലിന് (ലൈസിസ്) കാരണമാകുന്ന നിർദ്ദിഷ്ട ആൻ്റിബോഡികളെ ലൈസിനുകൾ എന്ന് വിളിക്കുന്നു. ആൻ്റിജൻ്റെ സ്വഭാവത്തെ ആശ്രയിച്ച്, അവ ബാക്ടീരിയലൈസിൻ, സൈറ്റോളിസിൻ, സ്പിറോകെറ്റോളിസിൻ, ഹീമോലിസിൻ മുതലായവ ആകാം.

ഒരു അധിക പൂരക ഘടകത്തിൻ്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ മാത്രമേ ലൈസിനുകൾ അവയുടെ പ്രഭാവം പ്രകടിപ്പിക്കുകയുള്ളൂ. ഒരു നോൺ-സ്പെസിഫിക് ഘടകമായി പൂർത്തീകരിക്കുക ഹ്യൂമറൽ പ്രതിരോധശേഷി, സെറിബ്രോസ്പൈനൽ ഫ്ലൂയിഡ്, ആൻ്റീരിയർ ചേംബർ ഫ്ലൂയിഡ് എന്നിവ ഒഴികെ മിക്കവാറും എല്ലാ ശരീര ദ്രാവകങ്ങളിലും കാണപ്പെടുന്നു. മനുഷ്യ രക്ത സെറമിൽ പൂരകത്തിൻ്റെ ഉയർന്നതും സ്ഥിരവുമായ ഉള്ളടക്കം രേഖപ്പെടുത്തിയിട്ടുണ്ട്, കൂടാതെ രക്തത്തിലെ സെറമിൽ അതിൽ ധാരാളം ഉണ്ട്. ഗിനി പന്നി. മറ്റ് സസ്തനികളിൽ, രക്തത്തിലെ സെറമിലെ പൂരകത്തിൻ്റെ ഉള്ളടക്കം വ്യത്യസ്തമാണ്.

പൂരകമാണ് ഒരു സങ്കീർണ്ണ സംവിധാനം whey പ്രോട്ടീനുകൾ. ഇത് അസ്ഥിരമാണ്, 30 മിനിറ്റ് നേരത്തേക്ക് 55 ഡിഗ്രിയിൽ തകരുന്നു. ഊഷ്മാവിൽ, രണ്ട് മണിക്കൂറിനുള്ളിൽ കോംപ്ലിമെൻ്റ് നശിപ്പിക്കപ്പെടും. നീണ്ട കുലുക്കം, ആസിഡുകൾ, അൾട്രാവയലറ്റ് രശ്മികൾ എന്നിവയോട് വളരെ സെൻസിറ്റീവ്. എന്നിരുന്നാലും, പൂരകങ്ങൾ വളരെക്കാലം (ആറുമാസം വരെ) കുറഞ്ഞ താപനിലയിൽ ഉണങ്ങിയ അവസ്ഥയിൽ സൂക്ഷിക്കുന്നു. കോംപ്ലിമെൻ്റ് മൈക്രോബയൽ സെല്ലുകളുടെയും ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെയും ലിസിസ് പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കുന്നു.

ബാക്‌ടീരിയോലിസിസിൻ്റെയും ഹീമോലിസിസിൻ്റെയും പ്രതിപ്രവർത്തനങ്ങൾ തമ്മിൽ വേർതിരിവുണ്ട്.

ബാക്ടീരിയലൈസിസ് പ്രതികരണത്തിൻ്റെ സാരം, ഒരു നിർദ്ദിഷ്ട രോഗപ്രതിരോധ സെറം അതിൻ്റെ അനുബന്ധ ഹോമോലോഗസ് ലിവിംഗ് മൈക്രോബയൽ സെല്ലുകളുമായി സംയോജിപ്പിക്കുമ്പോൾ, പൂരകത്തിൻ്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ, മൈക്രോബയൽ ലിസിസ് സംഭവിക്കുന്നു എന്നതാണ്.

ഹീമോലിസിസ് പ്രതികരണം, പൂരകത്തിൻ്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ എറിത്രോസൈറ്റുകൾക്ക് പ്രതിരോധശേഷിയുള്ള (ഹീമോലിറ്റിക്) ഒരു പ്രത്യേക സെറം വിധേയമാകുമ്പോൾ, എറിത്രോസൈറ്റുകളുടെ പിരിച്ചുവിടൽ നിരീക്ഷിക്കപ്പെടുന്നു, അതായത്. ഹീമോലിസിസ്.

ലബോറട്ടറി പ്രാക്ടീസിലെ ഹീമോലിസിസ് പ്രതികരണം പൂരക ശ്രേണി നിർണ്ണയിക്കുന്നതിനും ഫലങ്ങൾ രേഖപ്പെടുത്തുന്നതിനും ഉപയോഗിക്കുന്നു. ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് പ്രതികരണങ്ങൾപൂരക ഫിക്സേഷൻ. കോംപ്ലിമെൻ്റ് ടൈറ്റർ അതിൻ്റെ ഏറ്റവും ചെറിയ അളവാണ്, ഇത് 2.5 മില്ലി അളവിൽ ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റത്തിൽ 30 മിനിറ്റിനുള്ളിൽ ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ ലിസിസിന് കാരണമാകുന്നു. എല്ലാ സീറോളജിക്കൽ പ്രതിപ്രവർത്തനങ്ങളെയും പോലെ ലിസിസ് പ്രതികരണം ഒരു ഇലക്ട്രോലൈറ്റിൻ്റെ സാന്നിധ്യത്തിലാണ് സംഭവിക്കുന്നത്.

ഹൈപ്പർസെൻസിറ്റിവിറ്റി പ്രതികരണങ്ങൾ (അലർജിക്)

ശരീരവുമായുള്ള ആവർത്തിച്ചുള്ള സമ്പർക്കത്തിൽ ചില ആൻ്റിജൻ്റെ രൂപങ്ങൾ, അതിൻ്റെ അടിസ്ഥാനത്തിൽ പ്രത്യേകമായ ഒരു പ്രതികരണത്തിന് കാരണമാകും, എന്നാൽ നിശിത കോശജ്വലന പ്രതികരണത്തിൻ്റെ നിർദ്ദിഷ്ടമല്ലാത്ത സെല്ലുലാർ, മോളിക്യുലാർ ഘടകങ്ങൾ ഉൾപ്പെടുന്നു. ഹൈപ്പർസെൻസിറ്റിവിറ്റിയുടെ അറിയപ്പെടുന്ന രണ്ട് രൂപങ്ങളുണ്ട്: ഉടനടി-ടൈപ്പ് ഹൈപ്പർസെൻസിറ്റിവിറ്റി (IHT), വൈകിയുള്ള-തരം ഹൈപ്പർസെൻസിറ്റിവിറ്റി (DTH). ആദ്യ തരം പ്രതികരണം ആൻ്റിബോഡികളുടെ പങ്കാളിത്തത്തോടെയാണ് സംഭവിക്കുന്നത്, അലർജിയുമായുള്ള ആവർത്തിച്ചുള്ള സമ്പർക്കത്തിന് ശേഷം 2 മണിക്കൂറിനുള്ളിൽ പ്രതികരണം വികസിക്കുന്നില്ല. രണ്ടാമത്തെ തരം കോശജ്വലന ടി സെല്ലുകളുടെ (ടിജിസി) സഹായത്തോടെയാണ് പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിൻ്റെ പ്രധാന ഇഫക്റ്ററുകൾ, വീക്കം പ്രദേശത്ത് മാക്രോഫേജുകളുടെ ശേഖരണം ഉറപ്പാക്കുന്നു; പ്രതികരണം 6-8 മണിക്കൂറിനു ശേഷവും അതിനുശേഷവും പ്രകടമാകുന്നു.

ഒരു ഹൈപ്പർസെൻസിറ്റിവിറ്റി പ്രതികരണത്തിൻ്റെ വികസനം ഒരു ആൻ്റിജനുമായുള്ള ഏറ്റുമുട്ടലിലൂടെയും സെൻസിറ്റൈസേഷൻ്റെ സംഭവവികാസത്തിനും മുമ്പാണ്, അതായത്. ആൻ്റിബോഡികളുടെ രൂപം, സജീവമായി സെൻസിറ്റൈസ് ചെയ്ത ലിംഫോസൈറ്റുകൾ, മറ്റ് ല്യൂക്കോസൈറ്റുകളുടെ (മാക്രോഫേജുകൾ, ഗ്രാനുലോസൈറ്റുകൾ) നിഷ്ക്രിയമായി സെൻസിറ്റൈസ് ചെയ്ത സൈറ്റോഫിലിക് ആൻ്റിബോഡികൾ.

ഹൈപ്പർസെൻസിറ്റിവിറ്റി പ്രതികരണങ്ങൾക്ക് വികസനത്തിൻ്റെ മൂന്ന് ഘട്ടങ്ങളുണ്ട്: രോഗപ്രതിരോധം; പാത്തോകെമിക്കൽ; പാത്തോഫിസിയോളജിക്കൽ.

ആദ്യ ഘട്ടത്തിൽ, അലർജി ആൻ്റിബോഡികളുമായും (അല്ലെങ്കിൽ) സെൻസിറ്റൈസ്ഡ് കോശങ്ങളുമായും ഇടപഴകുന്നു. രണ്ടാം ഘട്ടത്തിൽ, ജൈവിക പ്രകാശനം സംഭവിക്കുന്നു സജീവ പദാർത്ഥങ്ങൾസജീവമാക്കിയ സെല്ലുകളിൽ നിന്ന്. പുറത്തുവിടുന്ന മധ്യസ്ഥർ (ഹിസ്റ്റാമിൻ, സെറോടോണിൻ, ല്യൂക്കോട്രിയെൻസ്, ബ്രാഡികിനിൻ മുതലായവ) അനുബന്ധ തരത്തിലുള്ള പ്രതികരണത്തിൻ്റെ മൂന്നാം ഘട്ടത്തിൻ്റെ സവിശേഷതയായ വിവിധ പെരിഫറൽ ഇഫക്റ്റുകൾക്ക് കാരണമാകുന്നു.

പ്രതികരണങ്ങൾ ഹൈപ്പർസെൻസിറ്റിവിറ്റിനാലാമത്തെ തരം

ഇത്തരത്തിലുള്ള പ്രതികരണങ്ങൾ ഉണ്ടാകുന്നത് സെൻസിറ്റൈസ്ഡ് ടി-ഹെൽപ്പർ സെല്ലുകൾ, സൈറ്റോടോക്സിക് ടി-ലിംഫോസൈറ്റുകൾ (ടി-കില്ലർ സെല്ലുകൾ), മോണോ ന്യൂക്ലിയർ ഫാഗോസൈറ്റ് സിസ്റ്റത്തിൻ്റെ സജീവമാക്കിയ സെല്ലുകൾ എന്നിവയുടെ രോഗകാരിയായ ഇൻ്റർസെല്ലുലാർ ഇടപെടലുകൾ മൂലമാണ്, ഇത് ബാക്ടീരിയ ആൻ്റിജനുകളാൽ രോഗപ്രതിരോധവ്യവസ്ഥയുടെ നീണ്ട ഉത്തേജനം മൂലമാണ്. ശരീരത്തിൻ്റെ പ്രതിരോധ സംവിധാനത്തിൻ്റെ ആപേക്ഷിക അപര്യാപ്തത ഇല്ലാതാക്കാൻ ആന്തരിക പരിസ്ഥിതിപകർച്ചവ്യാധികളുടെ ബാക്ടീരിയ രോഗകാരികൾ. ഈ ഹൈപ്പർസെൻസിറ്റിവിറ്റി പ്രതികരണങ്ങൾ ക്ഷയരോഗബാധിതരായ ശ്വാസകോശത്തിലെ അറകൾ, അവയുടെ കേസസ് നെക്രോസിസ്, ക്ഷയരോഗബാധിതരിൽ പൊതുവായ ലഹരി എന്നിവയ്ക്ക് കാരണമാകുന്നു. ക്ഷയരോഗത്തിലെ ക്യുട്ടേനിയസ് ഗ്രാനുലോമാറ്റോസിസ്, മോർഫോപഥോജെനറ്റിക് പദങ്ങളിൽ കുഷ്ഠരോഗം എന്നിവ പ്രധാനമായും നാലാമത്തെ തരത്തിലുള്ള ഹൈപ്പർസെൻസിറ്റിവിറ്റി പ്രതികരണങ്ങളാൽ നിർമ്മിതമാണ്.

മിക്കതും പ്രശസ്തമായ ഉദാഹരണംനാലാമത്തെ തരത്തിലുള്ള ഹൈപ്പർസെൻസിറ്റിവിറ്റി പ്രതികരണങ്ങൾ, ശരീരവും സിസ്റ്റവും മൈകോബാക്ടീരിയൽ ആൻ്റിജനുകളോട് സംവേദനക്ഷമതയുള്ള ഒരു രോഗിക്ക് ട്യൂബർക്കുലിൻ ഇൻട്രാഡെർമൽ കുത്തിവയ്പ്പ് നടത്തുന്ന സ്ഥലത്ത് വികസിക്കുന്ന ഒരു മാൻ്റൂക്സ് പ്രതികരണമാണ്. പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ഫലമായി, മധ്യഭാഗത്ത് necrosis ഉള്ള ഒരു സാന്ദ്രമായ ഹൈപ്പർമിക് പാപ്പൂൾ രൂപം കൊള്ളുന്നു, ഇത് ട്യൂബർകുലിൻ ഇൻട്രാഡെർമൽ കുത്തിവയ്പ്പിന് ശേഷം ഏതാനും മണിക്കൂറുകൾക്ക് ശേഷം (സാവധാനം) പ്രത്യക്ഷപ്പെടുന്നു. വാസ്കുലർ ബെഡിൽ നിന്ന് ഇൻ്റർസെല്ലുലാർ സ്പേസുകളിലേക്ക് രക്തചംക്രമണം നടത്തുന്ന മോണോ ന്യൂക്ലിയർ ഫാഗോസൈറ്റുകളുടെ പ്രകാശനത്തോടെയാണ് പാപ്പൂളിൻ്റെ രൂപീകരണം ആരംഭിക്കുന്നത്. അതേ സമയം, വാസ്കുലർ ബെഡിൽ നിന്ന് പോളിമോർഫോണ്യൂക്ലിയർ സെല്ലുകളുടെ എമിഗ്രേഷൻ ആരംഭിക്കുന്നു. അപ്പോൾ ന്യൂട്രോഫിലുകളുടെ നുഴഞ്ഞുകയറ്റം കുറയുന്നു, നുഴഞ്ഞുകയറ്റം പ്രധാനമായും ലിംഫോസൈറ്റുകളും മോണോ ന്യൂക്ലിയർ ഫാഗോസൈറ്റുകളും ഉൾക്കൊള്ളാൻ തുടങ്ങുന്നു. ഇത് പ്രധാനമായും പോളിമോർഫോണ്യൂക്ലിയർ ല്യൂക്കോസൈറ്റുകൾ നിഖേദ് ഉണ്ടായ സ്ഥലത്ത് അടിഞ്ഞുകൂടുന്ന ആർതസ് പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിൽ നിന്നുള്ള മാൻ്റൂക്സ് പ്രതികരണത്തിൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്തമാണ്.

ടൈപ്പ് 4 ഹൈപ്പർസെൻസിറ്റിവിറ്റി പ്രതികരണങ്ങളിൽ, ആൻ്റിജനുകളുള്ള സെൻസിറ്റൈസ്ഡ് ലിംഫോസൈറ്റുകളുടെ ദീർഘകാല ഉത്തേജനം നയിക്കുന്നു പാത്തോളജിക്കൽ മാറ്റങ്ങൾടി ഹെൽപ്പർ സെല്ലുകൾ വഴി സൈറ്റോകൈനുകളുടെ പാത്തോളജിക്കൽ തീവ്രവും ദീർഘവുമായ പ്രകാശനത്തിലേക്ക് ടിഷ്യൂകൾ. ടിഷ്യു കേടുപാടുകൾ സംഭവിക്കുന്ന സ്ഥലത്ത് സൈറ്റോകൈനുകളുടെ തീവ്രമായ പ്രകാശനം അവിടെ സ്ഥിതിചെയ്യുന്ന മോണോ ന്യൂക്ലിയർ ഫാഗോസൈറ്റ് സിസ്റ്റത്തിൻ്റെ കോശങ്ങളുടെ ഹൈപ്പർ ആക്റ്റിവേഷന് കാരണമാകുന്നു, അവയിൽ പലതും ഹൈപ്പർ ആക്റ്റിവേറ്റഡ് അവസ്ഥയിൽ എപ്പിത്തീലിയോയിഡ് കോശങ്ങളുടെ സരണികൾ ഉണ്ടാക്കുന്നു, ചിലത് പരസ്പരം ലയിച്ച് ഭീമൻ കോശങ്ങളായി മാറുന്നു. ബാക്ടീരിയ, വൈറൽ ആൻ്റിജനുകൾ തുറന്നുകാട്ടപ്പെടുന്ന ഉപരിതലത്തിലുള്ള മാക്രോഫേജുകൾ, ടികില്ലറുകളുടെ (പ്രകൃതിദത്ത കൊലയാളികൾ) പ്രവർത്തനത്തിലൂടെ നശിപ്പിക്കാൻ കഴിയും.

നാലാമത്തെ തരം ഹൈപ്പർസെൻസിറ്റിവിറ്റി പ്രതികരണം, ടി ഹെൽപ്പർ സെല്ലുകൾ ഒരു വിദേശ ബാക്റ്റീരിയൽ ആൻ്റിജനെ തിരിച്ചറിയുന്നതിലൂടെയാണ് ഉണ്ടാകുന്നത്. എൻഡോസൈറ്റോസിസിനും മോണോ ന്യൂക്ലിയർ ഫാഗോസൈറ്റുകൾ വഴി വിദേശ ഇമ്മ്യൂണോജനുകളുടെ സംസ്കരണത്തിനും ശേഷം ആൻ്റിജൻ അവതരിപ്പിക്കുന്ന കോശങ്ങളുടെ ഉപരിതലത്തിൽ തുറന്നുകാട്ടപ്പെടുന്ന ആൻ്റിജനുകളുമായുള്ള ഇൻഡ്യൂസറുകളുടെ ഇടപെടലാണ് തിരിച്ചറിയലിന് ആവശ്യമായ ഒരു വ്യവസ്ഥ. മറ്റൊന്ന് ആവശ്യമായ അവസ്ഥപ്രധാന ഹിസ്റ്റോകോംപാറ്റിബിലിറ്റി കോംപ്ലക്സിൽ നിന്നുള്ള ക്ലാസ് I തന്മാത്രകളുമായി ചേർന്ന് ആൻ്റിജനുകളുടെ എക്സ്പോഷർ. ആൻ്റിജൻ തിരിച്ചറിയലിനുശേഷം, സെൻസിറ്റൈസ്ഡ് ഹെൽപ്പർ സെല്ലുകൾ സൈറ്റോകൈനുകളും, പ്രത്യേകിച്ച്, പ്രകൃതിദത്ത കൊലയാളി കോശങ്ങളും മോണോ ന്യൂക്ലിയർ ഫാഗോസൈറ്റുകളും സജീവമാക്കുന്ന ഇൻ്റർലൂക്കിൻ 2 പുറത്തുവിടുന്നു. സജീവമാക്കിയ മോണോ ന്യൂക്ലിയർ ഫാഗോസൈറ്റുകൾ പ്രോട്ടിയോലൈറ്റിക് എൻസൈമുകളും സ്വതന്ത്ര ഓക്സിജൻ റാഡിക്കലുകളും പുറത്തുവിടുന്നു, ഇത് ടിഷ്യുവിനെ നശിപ്പിക്കുന്നു.

അലർജിയോടുള്ള ശരീരത്തിൻ്റെ സംവേദനക്ഷമത സ്ഥാപിക്കുന്നതിനും അണുബാധയുടെ അളവ് നിർണ്ണയിക്കുന്നതിനുമുള്ള ചർമ്മ അലർജി പരിശോധനകൾ, ഉദാഹരണത്തിന്, ക്ഷയം, ബ്രൂസെല്ലോസിസ്, കന്നുകാലി പ്രതിരോധശേഷി, ഉദാഹരണത്തിന്, തുലാരീമിയയിലേക്ക്. അലർജി അഡ്മിനിസ്ട്രേഷൻ്റെ സൈറ്റിനെ അടിസ്ഥാനമാക്കി, ഉണ്ട്: 1) ചർമ്മ പരിശോധനകൾ; 2) സ്കാർഫിക്കേഷൻ; 3) ഇൻട്രാഡെർമൽ; 4) subcutaneous. ചർമ്മ അലർജി പരിശോധനയ്ക്കിടെ അലർജിയോടുള്ള ക്ലിനിക്കൽ പ്രതികരണം ലോക്കൽ, ജനറൽ, ഫോക്കൽ എന്നിങ്ങനെ തിരിച്ചിരിക്കുന്നു, അതുപോലെ ഉടനടിയും കാലതാമസവുമാണ്.

മീഡിയേറ്റർ തരത്തിലുള്ള ജിഎൻടിയുടെ പ്രാദേശിക പ്രതികരണങ്ങൾ 520 മിനിറ്റിനുശേഷം സംഭവിക്കുന്നു, എറിത്തമയുടെയും ബ്ലിസ്റ്ററിൻ്റെയും രൂപത്തിൽ പ്രകടിപ്പിക്കുകയും ഏതാനും മണിക്കൂറുകൾക്ക് ശേഷം അപ്രത്യക്ഷമാവുകയും മില്ലീമീറ്ററിൽ അളക്കുന്ന എറിത്തമയുടെ വലുപ്പം അനുസരിച്ച് പ്ലസ് രീതി വിലയിരുത്തുകയും ചെയ്യുന്നു. പ്രാദേശിക എച്ച്ആർടി പ്രതികരണങ്ങൾ 24-48 മണിക്കൂറിനുള്ളിൽ സംഭവിക്കുന്നു, വളരെക്കാലം നീണ്ടുനിൽക്കും, ഒരു നുഴഞ്ഞുകയറ്റത്തിൻ്റെ രൂപത്തിൽ പ്രത്യക്ഷപ്പെടുന്നു, ചിലപ്പോൾ മധ്യഭാഗത്ത് നെക്രോസിസ് ഉണ്ടാകുന്നു, കൂടാതെ മില്ലീമീറ്ററിലെ നുഴഞ്ഞുകയറ്റത്തിൻ്റെ വലുപ്പം അനുസരിച്ച് പ്ലസ് സിസ്റ്റം ഉപയോഗിച്ച് വിലയിരുത്തപ്പെടുന്നു. സൈറ്റോടോക്സിക്, ഇമ്മ്യൂണോകോംപ്ലക്സ് തരം എച്ച്എൻടി എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച്, 3-4 മണിക്കൂറിന് ശേഷം ഹൈപ്പർമിയയും നുഴഞ്ഞുകയറ്റവും നിരീക്ഷിക്കപ്പെടുന്നു, പരമാവധി 6-8 മണിക്കൂറിൽ എത്തുകയും ഏകദേശം ഒരു ദിവസത്തിന് ശേഷം കുറയുകയും ചെയ്യുന്നു. ചിലപ്പോൾ സംയുക്ത പ്രതികരണങ്ങൾ നിരീക്ഷിക്കപ്പെടുന്നു.

1.3 കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഫിക്സേഷൻ പ്രതികരണം (FFR)

വിവിധ അണുബാധകൾക്കായി രക്തത്തിലെ സെറമിലെ ആൻ്റിബോഡികൾ കണ്ടെത്തുന്നതിനും അതുപോലെ തന്നെ അതിൻ്റെ ആൻ്റിജനിക് ഘടനയാൽ രോഗകാരിയെ തിരിച്ചറിയുന്നതിനും ലബോറട്ടറി പഠനങ്ങളിൽ ഈ പ്രതികരണം ഉപയോഗിക്കുന്നു.

കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഫിക്സേഷൻ പ്രതികരണം ഒരു സങ്കീർണ്ണമായ സീറോളജിക്കൽ പ്രതികരണമാണ്, അത് വളരെ സെൻസിറ്റീവും നിർദ്ദിഷ്ടവുമാണ്.

ഈ പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ഒരു സവിശേഷത, നിർദ്ദിഷ്ട ആൻ്റിബോഡികളുമായുള്ള പ്രതിപ്രവർത്തന സമയത്ത് ആൻ്റിജനിലെ മാറ്റം പൂരകത്തിൻ്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ മാത്രമേ സംഭവിക്കൂ എന്നതാണ്. "ആൻ്റിബോഡി ആൻ്റിജൻ" കോംപ്ലക്സിൽ മാത്രമേ കോംപ്ലിമെൻ്റ് ആഗിരണം ചെയ്യപ്പെടുകയുള്ളൂ. സെറമിലെ ആൻ്റിജനും ആൻ്റിബോഡിയും തമ്മിൽ ഒരു ബന്ധമുണ്ടെങ്കിൽ മാത്രമേ "ആൻ്റിബോഡി ആൻ്റിജൻ" കോംപ്ലക്സ് രൂപപ്പെടുന്നത്.

"ആൻ്റിജൻ ആൻ്റിബോഡി" സമുച്ചയത്തിലെ പൂരകത്തിൻ്റെ അഡോർപ്ഷൻ അതിൻ്റെ സ്വഭാവസവിശേഷതകളെ ആശ്രയിച്ച് ആൻ്റിജൻ്റെ വിധിയിൽ വ്യത്യസ്ത ഫലങ്ങൾ ഉണ്ടാക്കും.

ഈ അവസ്ഥകളിൽ ചില ആൻ്റിജനുകൾ മൂർച്ചയുള്ള രൂപാന്തര മാറ്റങ്ങൾക്ക് വിധേയമാകുന്നു, പിരിച്ചുവിടൽ (ഹീമോലിസിസ്, ഐസേവ്-ഫൈഫർ പ്രതിഭാസം, സൈറ്റോലൈറ്റിക് പ്രവർത്തനം) ഉൾപ്പെടെ. മറ്റുള്ളവർ ചലനത്തിൻ്റെ വേഗത മാറ്റുന്നു (ട്രെപോണിമ ഇമ്മൊബിലൈസേഷൻ). മറ്റുചിലർ പെട്ടെന്നുള്ള വിനാശകരമായ മാറ്റങ്ങളില്ലാതെ മരിക്കുന്നു (ബാക്ടീരിയ നശിപ്പിക്കുന്ന അല്ലെങ്കിൽ സൈറ്റോടോക്സിക് പ്രഭാവം). അവസാനമായി, എളുപ്പത്തിൽ നിരീക്ഷിക്കാൻ കഴിയുന്ന ആൻ്റിജൻ മാറ്റങ്ങളോടൊപ്പം പൂരക അഡോർപ്ഷനും ഉണ്ടാകണമെന്നില്ല.

RSC മെക്കാനിസം അനുസരിച്ച്, ഇത് രണ്ട് ഘട്ടങ്ങളിലായാണ് സംഭവിക്കുന്നത്:

1. ആദ്യ ഘട്ടം "ആൻ്റിജൻ ആൻ്റിബോഡി" കോംപ്ലക്സിൻറെ രൂപീകരണവും ഈ പൂരക സമുച്ചയത്തിൽ ആഗിരണം ചെയ്യപ്പെടുന്നതുമാണ്. ഘട്ടത്തിൻ്റെ ഫലം ദൃശ്യപരമായി ദൃശ്യമല്ല (പൂരകത്തിൻ്റെ നിർബന്ധിത പങ്കാളിത്തത്തോടെ ആൻ്റിജൻ്റെയും ആൻ്റിബോഡികളുടെയും ഇടപെടൽ).
2. പൂരകത്തിൻ്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ പ്രത്യേക ആൻ്റിബോഡികളുടെ സ്വാധീനത്തിൽ ആൻ്റിജനിലെ മാറ്റമാണ് രണ്ടാം ഘട്ടം. ഘട്ടത്തിൻ്റെ ഫലം ദൃശ്യപരമായി ദൃശ്യമാകാം അല്ലെങ്കിൽ ദൃശ്യമാകില്ല (ഒരു ഇൻഡിക്കേറ്റർ ഹെമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റം (ആടുകളുടെ ചുവന്ന രക്താണുക്കളും ഹീമോലിറ്റിക് സെറവും) ഉപയോഗിച്ച് പ്രതികരണ ഫലങ്ങൾ കണ്ടെത്തൽ.

ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റത്തിൽ പൂരകങ്ങൾ ചേർത്താൽ മാത്രമേ ഹീമോലിറ്റിക് സെറം വഴി ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ നാശം സംഭവിക്കുകയുള്ളൂ. ആൻ്റിജൻ-ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്സിൽ പൂരകം മുമ്പ് ആഗിരണം ചെയ്യപ്പെട്ടിരുന്നെങ്കിൽ, എറിത്രോസൈറ്റുകളുടെ ഹീമോലിസിസ് സംഭവിക്കുന്നില്ല.

എല്ലാ ടെസ്റ്റ് ട്യൂബുകളിലും ഹീമോലിസിസിൻ്റെ സാന്നിദ്ധ്യമോ അഭാവമോ രേഖപ്പെടുത്തിയാണ് പരീക്ഷണത്തിൻ്റെ ഫലം വിലയിരുത്തുന്നത്. ഹീമോലിസിസ് പൂർണ്ണമായും വൈകുമ്പോൾ, ടെസ്റ്റ് ട്യൂബിലെ ദ്രാവകം നിറമില്ലാത്തതും ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ അടിയിൽ സ്ഥിരതാമസമാകുമ്പോൾ, ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ പൂർണ്ണമായും അലിഞ്ഞുപോകുമ്പോൾ, ദ്രാവകത്തിന് തീവ്രമായ നിറമാകുമ്പോൾ (“വാർണിഷ്”) പ്രതികരണം പോസിറ്റീവ് ആയി കണക്കാക്കപ്പെടുന്നു. രക്തം). ദ്രാവകത്തിൻ്റെ നിറത്തിൻ്റെ തീവ്രതയും താഴെയുള്ള ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ അവശിഷ്ടത്തിൻ്റെ വലുപ്പവും (++++, +++, ++, +) അനുസരിച്ചാണ് ഹീമോലിസിസ് കാലതാമസത്തിൻ്റെ അളവ് വിലയിരുത്തുന്നത്.

ആൻ്റിജനിലെ മാറ്റങ്ങൾ ദൃശ്യ നിരീക്ഷണത്തിന് അപ്രാപ്യമാകുമ്പോൾ, രണ്ടാമത്തെ സംവിധാനം ഉപയോഗിക്കേണ്ടത് ആവശ്യമാണ്, ഇത് ഒരു സൂചകമായി പ്രവർത്തിക്കുന്നു, ഇത് പൂരകത്തിൻ്റെ അവസ്ഥ വിലയിരുത്താനും പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ഫലത്തെക്കുറിച്ച് ഒരു നിഗമനത്തിലെത്താനും അനുവദിക്കുന്നു.

ഈ സൂചക സംവിധാനത്തെ പ്രതിനിധീകരിക്കുന്നത് ഹീമോലിസിസ് പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ഘടകങ്ങളാണ്, അതിൽ ആടുകളുടെ എറിത്രോസൈറ്റുകൾ, ഹെമോലിറ്റിക് സെറം എന്നിവ ഉൾപ്പെടുന്നു, അതിൽ എറിത്രോസൈറ്റുകൾക്ക് (ഹെമോലിസിൻസ്) പ്രത്യേക ആൻ്റിബോഡികൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്നു, പക്ഷേ പൂരകങ്ങൾ അടങ്ങിയിട്ടില്ല. പ്രധാന RSC സ്ഥാപിച്ച് ഒരു മണിക്കൂറിന് ശേഷം ഈ ഇൻഡിക്കേറ്റർ സിസ്റ്റം ടെസ്റ്റ് ട്യൂബുകളിലേക്ക് ചേർക്കുന്നു. പൂരക ഫിക്സേഷൻ പ്രതികരണം പോസിറ്റീവ് ആണെങ്കിൽ, ഒരു ആൻ്റിബോഡി ആൻ്റിജൻ കോംപ്ലക്സ് രൂപം കൊള്ളുന്നു, അത് സ്വയം പൂരകമാക്കുന്നു. ഒരു പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിന് ആവശ്യമായ അളവിൽ കോംപ്ലിമെൻ്റ് ഉപയോഗിക്കുന്നതിനാൽ, ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ ലിസിസ് പൂരകത്തിൻ്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ മാത്രമേ സംഭവിക്കൂ, തുടർന്ന് അത് “ആൻ്റിജൻ ആൻ്റിബോഡി” സമുച്ചയത്തിൽ ആഗിരണം ചെയ്യുമ്പോൾ, ഹീമോലിറ്റിക് (ഇൻഡിക്കേറ്റർ) സിസ്റ്റത്തിലെ ചുവന്ന രക്താണുക്കളുടെ ലിസിസ് സംഭവിക്കും. സംഭവിക്കുന്നില്ല. പൂരക ഫിക്സേഷൻ പ്രതികരണം നെഗറ്റീവ് ആണെങ്കിൽ, "ആൻ്റിജൻ ആൻ്റിബോഡി" കോംപ്ലക്സ് രൂപപ്പെടുന്നില്ല, കോംപ്ലിമെൻ്റ് സ്വതന്ത്രമായി തുടരുന്നു, ഹീമോലിറ്റിക് സിസ്റ്റം ചേർക്കുമ്പോൾ, എറിത്രോസൈറ്റ് ലിസിസ് സംഭവിക്കുന്നു.

1.4 ഡിഎൻഎ പ്രോബ്സ്. പോളിമറേസ് ചെയിൻ റിയാക്ഷൻ (PCR),
ഇമ്മ്യൂണോ എൻസൈം രീതി (എലിസ), ഫ്ലൂറസിങ് ആൻ്റിബോഡി രീതി (എഫ്എഫ്എ)

ജീൻ പരിശോധനയുടെ രീതികൾ

മോളിക്യുലർ ബയോളജിയുടെ തീവ്രമായ വികസനവും ജനിതക ഗവേഷണത്തിനുള്ള ഒരു തികഞ്ഞ രീതിശാസ്ത്രപരമായ അടിത്തറയുടെ സൃഷ്ടിയും ജനിതക എഞ്ചിനീയറിംഗിൻ്റെ അടിത്തറയായി. ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്സ് മേഖലയിൽ, ജീൻ പ്രോബിംഗ് എന്ന് വിളിക്കപ്പെടുന്ന ഡിഎൻഎയുടെയും ആർഎൻഎയുടെയും പ്രത്യേക ന്യൂക്ലിയോടൈഡ് സീക്വൻസുകൾ നിർണ്ണയിക്കാൻ ഒരു ദിശ ഉയർന്നുവരുകയും അതിവേഗം വികസിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. കോംപ്ലിമെൻ്ററി ന്യൂക്ലിയോടൈഡുകളുടെ (എടി, ജിസി) പ്രതിപ്രവർത്തനം മൂലം ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകളുടെ ഹൈബ്രിഡൈസ് ചെയ്യാനും ഡബിൾ സ്ട്രാൻഡഡ് ഘടനകൾ രൂപപ്പെടുത്താനുമുള്ള കഴിവിനെ അടിസ്ഥാനമാക്കിയുള്ളതാണ് ഇത്തരം സാങ്കേതിക വിദ്യകൾ.

ആവശ്യമുള്ള ഡിഎൻഎ (അല്ലെങ്കിൽ ആർഎൻഎ) ക്രമം നിർണ്ണയിക്കാൻ, ഒരു നിർദ്ദിഷ്ട അടിസ്ഥാന ശ്രേണിയിലുള്ള പോളിന്യൂക്ലിയോടൈഡ് അന്വേഷണം പ്രത്യേകമായി സൃഷ്ടിക്കപ്പെടുന്നു. ഒരു പ്രത്യേക ലേബൽ അതിൻ്റെ ഘടനയിൽ അവതരിപ്പിക്കുന്നു, ഇത് സമുച്ചയത്തിൻ്റെ രൂപീകരണം തിരിച്ചറിയുന്നത് സാധ്യമാക്കുന്നു.

ജീൻ പ്രോബിംഗിനെ ഇമ്മ്യൂണോകെമിക്കൽ വിശകലനത്തിൻ്റെ ഒരു രീതിയായി തരംതിരിക്കാൻ കഴിയില്ലെങ്കിലും, അതിൻ്റെ അടിസ്ഥാന തത്വം (പൂരക ഘടനകളുടെ ഇടപെടൽ) ഇമ്മ്യൂണോ ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്സിൻ്റെ സൂചക രീതികൾ പോലെ തന്നെ രീതിപരമായി നടപ്പിലാക്കുന്നു. കൂടാതെ, ജീൻ പ്രോബിംഗ് രീതികൾ അതിൻ്റെ ഫിനോടൈപ്പിക് എക്സ്പ്രഷൻ്റെ അഭാവത്തിൽ ഒരു പകർച്ചവ്യാധിയെക്കുറിച്ചുള്ള വിവരങ്ങൾ നിറയ്ക്കുന്നത് സാധ്യമാക്കുന്നു (ജീനോമിൽ ഉൾച്ചേർത്ത വൈറസുകൾ, "നിശബ്ദ" ജീനുകൾ).

ഡിഎൻഎ വിശകലനം നടത്താൻ, ഡിഎൻഎ അല്ലെങ്കിൽ ആർഎൻഎ പ്രോബ് തന്മാത്രകൾ പ്രതിപ്രവർത്തിക്കുന്ന സിംഗിൾ-സ്ട്രാൻഡഡ് ഘടനകൾ ലഭിക്കുന്നതിന് സാമ്പിൾ ഡിനേച്ചർ ചെയ്യുന്നു. പ്രോബുകൾ തയ്യാറാക്കാൻ, ഒന്നുകിൽ ഡിഎൻഎയുടെ (അല്ലെങ്കിൽ ആർഎൻഎ) വിവിധ വിഭാഗങ്ങൾ പ്രകൃതിദത്ത ഉറവിടത്തിൽ നിന്ന് വേർതിരിച്ചിരിക്കുന്നു (ഉദാഹരണത്തിന്, ഒരു പ്രത്യേക സൂക്ഷ്മാണുക്കൾ), സാധാരണയായി വെക്റ്റർ പ്ലാസ്മിഡുകളിലെ ജനിതക ശ്രേണികളുടെ രൂപത്തിൽ അവതരിപ്പിക്കുന്നു, അല്ലെങ്കിൽ രാസപരമായി സമന്വയിപ്പിച്ച ഒലിഗോ ന്യൂക്ലിയോടൈഡുകൾ ഉപയോഗിക്കുന്നു. ചില സന്ദർഭങ്ങളിൽ, ശകലങ്ങളായി ഹൈഡ്രോലൈസ് ചെയ്ത ജനിതക ഡിഎൻഎ തയ്യാറെടുപ്പുകൾ, ചിലപ്പോൾ ആർഎൻഎ തയ്യാറെടുപ്പുകൾ, പ്രത്യേകിച്ച് പലപ്പോഴും റൈബോസോമൽ ആർഎൻഎ എന്നിവയായി ഉപയോഗിക്കുന്നു. വിവിധ തരം ഇമ്മ്യൂണോകെമിക്കൽ വിശകലനങ്ങളിലെന്നപോലെ ഒരേ സൂചകങ്ങൾ ഒരു ലേബലായി ഉപയോഗിക്കുന്നു: റേഡിയോ ആക്ടീവ് ഐസോടോപ്പുകൾ, ഫ്ലൂറസെൻസ്, ബയോടോപ്പ് (അവിഡിൻ-എൻസൈം കോംപ്ലക്സ് കൂടുതൽ വികസനത്തോടെ) മുതലായവ.

ലഭ്യമായ അന്വേഷണത്തിൻ്റെ സവിശേഷതകളാൽ വിശകലനത്തിൻ്റെ ക്രമം നിർണ്ണയിക്കപ്പെടുന്നു

നിലവിൽ, ആവശ്യമായ എല്ലാ ചേരുവകളും അടങ്ങിയ വാണിജ്യ കിറ്റുകളാണ് കൂടുതലായി ഉപയോഗിക്കുന്നത്.

മിക്ക കേസുകളിലും, വിശകലന പ്രക്രിയയെ ഇനിപ്പറയുന്ന ഘട്ടങ്ങളായി തിരിക്കാം: സാമ്പിൾ തയ്യാറാക്കൽ (ഡിഎൻഎ എക്‌സ്‌ട്രാക്‌ഷനും ഡീനാറ്ററേഷനും ഉൾപ്പെടെ), ഒരു കാരിയറിലെ സാമ്പിൾ ഫിക്സേഷൻ (മിക്കപ്പോഴും ഒരു പോളിമർ മെംബ്രൺ ഫിൽട്ടർ), പ്രീഹൈബ്രിഡൈസേഷൻ, ഹൈബ്രിഡൈസേഷൻ, അൺബൗണ്ട് ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ കഴുകൽ, കണ്ടെത്തൽ . ഒരു സ്റ്റാൻഡേർഡ് ഡിഎൻഎ അല്ലെങ്കിൽ ആർഎൻഎപ്രോബ് തയ്യാറെടുപ്പിൻ്റെ അഭാവത്തിൽ, അത് ആദ്യം ലഭിക്കുകയും ലേബൽ ചെയ്യുകയും ചെയ്യുന്നു.

ഒരു സാമ്പിൾ തയ്യാറാക്കാൻ, ബാക്ടീരിയയുടെ വ്യക്തിഗത കോളനികളെ തിരിച്ചറിയുന്നതിനോ ഒരു സെൽ കൾച്ചറിൽ വൈറസുകളുടെ സാന്ദ്രത വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിനോ ടെസ്റ്റ് മെറ്റീരിയൽ പ്രാഥമികമായി "വളരുന്നത്" ആവശ്യമായി വന്നേക്കാം. നടത്തുകയും ചെയ്യുന്നു നേരിട്ടുള്ള വിശകലനംരക്തത്തിലെ സെറം, മൂത്രത്തിൻ്റെ സാമ്പിളുകൾ, ആകൃതിയിലുള്ള ഘടകങ്ങൾഒരു പകർച്ചവ്യാധിയുടെ സാന്നിധ്യത്തിനായി രക്തം അല്ലെങ്കിൽ മുഴുവൻ രക്തം. സെല്ലുലാർ ഘടനകളിൽ നിന്ന് ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകൾ പുറത്തുവിടാൻ, സെൽ ലിസിസ് നടത്തപ്പെടുന്നു, ചില സന്ദർഭങ്ങളിൽ ഡിഎൻഎ തയ്യാറാക്കൽ ഫിനോൾ ഉപയോഗിച്ച് ശുദ്ധീകരിക്കപ്പെടുന്നു.

ഡിഎൻഎയുടെ ഡീനാറ്ററേഷൻ, അതായത്, ഒരു ഒറ്റ-ധാരാ രൂപത്തിലേക്കുള്ള മാറ്റം, ആൽക്കലി ഉപയോഗിച്ച് ചികിത്സിക്കുമ്പോൾ സംഭവിക്കുന്നു. ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് സാമ്പിൾ ഒരു സപ്പോർട്ട്, ഒരു നൈട്രോസെല്ലുലോസ് അല്ലെങ്കിൽ നൈലോൺ മെംബ്രൺ, സാധാരണയായി 10 മിനിറ്റ് മുതൽ 4 മണിക്കൂർ വരെ 80 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ ഒരു ശൂന്യതയിൽ ഇൻകുബേഷൻ വഴി ഉറപ്പിക്കുന്നു. കൂടാതെ, പ്രീഹൈബ്രിഡൈസേഷൻ പ്രക്രിയയിൽ, മെംബ്രണുമായുള്ള അന്വേഷണത്തിൻ്റെ നിർദ്ദിഷ്ടമല്ലാത്ത ഇടപെടൽ കുറയ്ക്കുന്നതിന് ഫ്രീ ബൈൻഡിംഗ് സൈറ്റുകളുടെ നിഷ്ക്രിയത്വം കൈവരിക്കുന്നു. സാമ്പിളിലെ ഡിഎൻഎയുടെ സാന്ദ്രത, ഉപയോഗിച്ച അന്വേഷണത്തിൻ്റെ സാന്ദ്രത, അതിൻ്റെ വലിപ്പം എന്നിവയെ ആശ്രയിച്ച് ഹൈബ്രിഡൈസേഷൻ പ്രക്രിയ 2 മുതൽ 20 മണിക്കൂർ വരെ എടുക്കും.

ഹൈബ്രിഡൈസേഷൻ പൂർത്തിയാക്കി അൺബൗണ്ട് ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ കഴുകിയ ശേഷം, രൂപംകൊണ്ട സമുച്ചയം കണ്ടുപിടിക്കുന്നു. അന്വേഷണത്തിൽ ഒരു റേഡിയോ ആക്ടീവ് ലേബൽ അടങ്ങിയിട്ടുണ്ടെങ്കിൽ, പ്രതികരണം പ്രകടിപ്പിക്കാൻ, മെംബ്രൺ ഫോട്ടോഗ്രാഫിക് ഫിലിമിലേക്ക് (ഓട്ടോറാഡിയോഗ്രാഫി) തുറന്നുകാട്ടുന്നു. മറ്റ് ലേബലുകൾക്ക്, അനുബന്ധ നടപടിക്രമങ്ങൾ ഉപയോഗിക്കുന്നു.

റേഡിയോ ആക്ടീവ് അല്ലാത്ത (കോൾഡ് എന്ന് വിളിക്കപ്പെടുന്ന) പേടകങ്ങൾ നേടുക എന്നതാണ് ഏറ്റവും പ്രതീക്ഷ നൽകുന്ന കാര്യം. അതേ അടിസ്ഥാനത്തിൽ, ഒരു ഹൈബ്രിഡൈസേഷൻ സാങ്കേതികത വികസിപ്പിച്ചെടുക്കുന്നു, ഇത് സെക്ഷൻ തയ്യാറെടുപ്പുകളിലും ടിഷ്യു പഞ്ചറുകളിലും ഒരു രോഗകാരിയുടെ സാന്നിധ്യം സ്ഥാപിക്കുന്നത് സാധ്യമാക്കുന്നു, ഇത് പാത്തോമോർഫോളജിക്കൽ വിശകലനത്തിൽ (സിറ്റു ഹൈബ്രിഡൈസേഷനിൽ) പ്രത്യേകിച്ചും പ്രധാനമാണ്.

പോളിമറേസ് ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ റിയാക്ഷൻ്റെ (പിസിആർ) ഉപയോഗമായിരുന്നു ജീൻ പ്രോബിംഗ് രീതികളുടെ വികസനത്തിലെ ഒരു സുപ്രധാന ഘട്ടം. വിട്രോയിൽ ഒന്നിലധികം പകർപ്പുകൾ സമന്വയിപ്പിച്ച് ഒരു സാമ്പിളിലെ ഒരു നിർദ്ദിഷ്ട (മുൻപ് അറിയപ്പെടുന്ന) ഡിഎൻഎ ശ്രേണിയുടെ സാന്ദ്രത വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നത് ഈ സമീപനം സാധ്യമാക്കുന്നു. പ്രതികരണം നടത്തുന്നതിന്, ഡിഎൻഎ പോളിമറേസ് എൻസൈം തയ്യാറാക്കൽ, സിന്തസിസിനായുള്ള അധിക ഡിയോക്സിന്യൂക്ലിയോടൈഡുകൾ, പ്രൈമറുകൾ എന്ന് വിളിക്കപ്പെടുന്നവ എന്നിവ ഡിഎൻഎ സാമ്പിളിലേക്ക് ചേർത്തു - 2025 ബേസുകളുടെ വലുപ്പമുള്ള രണ്ട് തരം ഒലിഗോ ന്യൂക്ലിയോടൈഡുകൾ ടെർമിനൽ വിഭാഗങ്ങളുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു. താൽപ്പര്യമുള്ള DNA ക്രമം. പ്രൈമറുകളിലൊന്ന് വായന ദിശ 53-ൽ കോഡിംഗ് ഡിഎൻഎ സ്ട്രാൻഡിൻ്റെ റീഡിംഗ് റീജിയൻ്റെ തുടക്കത്തിൻ്റെ പകർപ്പായിരിക്കണം, രണ്ടാമത്തേത് നോൺ-കോഡിംഗ് സ്ട്രാൻഡിൻ്റെ എതിർ അറ്റത്തിൻ്റെ പകർപ്പായിരിക്കണം. തുടർന്ന്, പോളിമറേസ് പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിൻ്റെ ഓരോ ചക്രത്തിലും, ഡിഎൻഎ പകർപ്പുകളുടെ എണ്ണം ഇരട്ടിയാകുന്നു.

പ്രൈമർ ബൈൻഡിംഗ് നേടുന്നതിന്, 94 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ ഡിഎൻഎ ഡിനാറ്ററേഷൻ (ഉരുകൽ) ആവശ്യമാണ്, തുടർന്ന് മിശ്രിതം 40-55 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിലേക്ക് കൊണ്ടുവരിക.

പ്രതികരണം നടപ്പിലാക്കുന്നതിനായി, പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിൻ്റെ ഓരോ ഘട്ടത്തിലും ഒപ്റ്റിമൽ താപനിലയിലെ മാറ്റങ്ങൾക്കിടയിൽ എളുപ്പത്തിൽ മാറാൻ പ്രോഗ്രാമബിൾ മൈക്രോസാമ്പിൾ ഇൻകുബേറ്ററുകൾ രൂപകൽപ്പന ചെയ്തിട്ടുണ്ട്.

ആംപ്ലിഫിക്കേഷൻ പ്രതികരണം, ജീൻ പ്രോബിംഗ് സമയത്ത് വിശകലനത്തിൻ്റെ സംവേദനക്ഷമത ഗണ്യമായി വർദ്ധിപ്പിക്കും, ഇത് പകർച്ചവ്യാധി ഏജൻ്റിൻ്റെ കുറഞ്ഞ സാന്ദ്രതയിൽ പ്രത്യേകിച്ചും പ്രധാനമാണ്.

ആംപ്ലിഫിക്കേഷനോടുകൂടിയ ജീൻ പ്രോബിംഗിൻ്റെ ഒരു പ്രധാന ഗുണം, പാത്തോളജിക്കൽ മെറ്റീരിയലിൻ്റെ സബ്‌മൈക്രോസ്കോപ്പിക് അളവുകൾ പഠിക്കാനുള്ള കഴിവാണ്.

ഈ രീതിയുടെ മറ്റൊരു സവിശേഷത, അണുബാധയുള്ള വസ്തുക്കളുടെ വിശകലനത്തിന് കൂടുതൽ പ്രധാനമാണ്, മറഞ്ഞിരിക്കുന്ന (നിശബ്ദമായ) ജീനുകളെ തിരിച്ചറിയാനുള്ള കഴിവാണ്. ജീൻ പ്രോബിംഗിൻ്റെ ഉപയോഗവുമായി ബന്ധപ്പെട്ട രീതികൾ തീർച്ചയായും സാംക്രമിക രോഗങ്ങൾ ലളിതവും വിലകുറഞ്ഞതുമായിത്തീരുന്നതിനാൽ രോഗനിർണ്ണയ സമ്പ്രദായത്തിൽ കൂടുതൽ വ്യാപകമായി അവതരിപ്പിക്കപ്പെടും.

ELISA, RIF രീതികൾ വലിയതോതിൽ ഗുണപരമോ അർദ്ധ അളവ് സ്വഭാവമുള്ളതോ ആണ്. ഘടകങ്ങളുടെ വളരെ കുറഞ്ഞ സാന്ദ്രതയിൽ, ആൻറിജൻ ആൻറിബോഡി കോംപ്ലക്‌സിൻ്റെ രൂപീകരണം ദൃശ്യമായോ ലളിതമായ ഉപകരണ മാർഗങ്ങളാലോ കണ്ടെത്താൻ കഴിയില്ല. അത്തരം സന്ദർഭങ്ങളിൽ ആൻ്റിജൻ ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്‌സിൻ്റെ സൂചന പ്രാരംഭ ഘടകങ്ങളിലൊന്നിലേക്ക് ഒരു ലേബൽ അവതരിപ്പിച്ചാൽ നടപ്പിലാക്കാൻ കഴിയും ആൻ്റിജൻ അല്ലെങ്കിൽ ആൻ്റിബോഡി , ഇത് വിശകലനത്തിൻ്റെ നിർണ്ണയിച്ചിരിക്കുന്ന സാന്ദ്രതയുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്താവുന്ന സാന്ദ്രതകളിൽ എളുപ്പത്തിൽ കണ്ടെത്താനാകും.

റേഡിയോ ആക്ടീവ് ഐസോടോപ്പുകൾ (ഉദാഹരണത്തിന്, 125I), ഫ്ലൂറസെൻ്റ് വസ്തുക്കൾ, എൻസൈമുകൾ എന്നിവ ലേബലുകളായി ഉപയോഗിക്കാം.

ഉപയോഗിച്ച ലേബലിനെ ആശ്രയിച്ച്, റേഡിയോ ഇമ്മ്യൂൺ (RIA), ഫ്ലൂറസൻ്റ് ഇമ്യൂൺ (FIA), എൻസൈം-ലിങ്ക്ഡ് ഇമ്യൂണോസോർബൻ്റ് അസ്സേ (ELISA) വിശകലന രീതികൾ മുതലായവ ഉണ്ട്. കഴിഞ്ഞ വർഷങ്ങൾ ELISA യ്ക്ക് വ്യാപകമായ പ്രായോഗിക ഉപയോഗം ലഭിച്ചു, ഇത് സാധ്യത മൂലമാണ് അളവ് നിർണയങ്ങൾ, ഉയർന്ന സംവേദനക്ഷമത, അക്കൗണ്ടിംഗിൻ്റെ പ്രത്യേകതയും ഓട്ടോമേഷനും.

എൻസൈം ഇമ്മ്യൂണോഅസ്സേ രീതികൾ ഒരു എൻസൈം പിളർന്ന് ഒരു നിറം ഉണ്ടാക്കുന്ന ഒരു അടിവസ്ത്രം ഉപയോഗിച്ച് ആൻ്റിജൻ-ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്സ് കണ്ടുപിടിക്കാൻ അനുവദിക്കുന്ന ഒരു കൂട്ടം രീതികളാണ്.

ആൻ്റിജൻ ആൻ്റിബോഡി പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ഘടകങ്ങളെ അളന്ന എൻസൈം ലേബലുമായി സംയോജിപ്പിക്കുക എന്നതാണ് രീതിയുടെ സാരം. പ്രതികരിക്കുന്ന ആൻ്റിജൻ അല്ലെങ്കിൽ ആൻ്റിബോഡി ഒരു എൻസൈം ഉപയോഗിച്ച് ലേബൽ ചെയ്തിരിക്കുന്നു. എൻസൈമിൻ്റെ പ്രവർത്തനത്തിന് കീഴിലുള്ള അടിവസ്ത്രത്തിൻ്റെ പരിവർത്തനത്തെ അടിസ്ഥാനമാക്കി, ആൻ്റിജൻ ആൻ്റിബോഡി പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിൻ്റെ പ്രതിപ്രവർത്തന ഘടകത്തിൻ്റെ അളവ് ഒരാൾക്ക് വിലയിരുത്താൻ കഴിയും. എൻസൈം ഇൻ ഈ സാഹചര്യത്തിൽഒരു മാർക്കറായി പ്രവർത്തിക്കുന്നു രോഗപ്രതിരോധ പ്രതികരണംദൃശ്യപരമായോ ഉപകരണപരമായോ അത് നിരീക്ഷിക്കാൻ നിങ്ങളെ അനുവദിക്കുന്നു.

എൻസൈമുകൾ വളരെ സൗകര്യപ്രദമായ ടാഗുകളാണ്, കാരണം അവയുടെ കാറ്റലറ്റിക് ഗുണങ്ങൾ അവയെ ആംപ്ലിഫയറുകളായി പ്രവർത്തിക്കാൻ അനുവദിക്കുന്നു, കാരണം ഒരു എൻസൈം തന്മാത്രയ്ക്ക് മിനിറ്റിൽ 1 × 105-ലധികം തന്മാത്രകളുടെ കാറ്റലറ്റിക് റിയാക്ഷൻ ഉൽപ്പന്നത്തിൻ്റെ രൂപീകരണം പ്രോത്സാഹിപ്പിക്കാനാകും. ദീർഘകാലത്തേക്ക് അതിൻ്റെ ഉത്തേജക പ്രവർത്തനം നിലനിർത്തുന്ന ഒരു എൻസൈം തിരഞ്ഞെടുക്കേണ്ടത് ആവശ്യമാണ്, ഒരു ആൻ്റിജനുമായോ ആൻ്റിബോഡിയുമായോ ബന്ധിപ്പിക്കുമ്പോൾ അത് നഷ്ടപ്പെടുന്നില്ല, കൂടാതെ അടിവസ്ത്രവുമായി ബന്ധപ്പെട്ട് ഉയർന്ന പ്രത്യേകതയുണ്ട്.

എൻസൈം-ലേബൽ ചെയ്ത ആൻറിബോഡികൾ അല്ലെങ്കിൽ ആൻ്റിജനുകളും കൺജഗേറ്റുകളും നിർമ്മിക്കുന്നതിനുള്ള പ്രധാന രീതികൾ ഇവയാണ്: കെമിക്കൽ, ഇമ്മ്യൂണോളജിക്കൽ, ജനിതക എഞ്ചിനീയറിംഗ്. നിറകണ്ണുകളോടെ പെറോക്സിഡേസ്, ആൽക്കലൈൻ ഫോസ്ഫേറ്റേസ്, ഗാലക്ടോസിഡേസ് തുടങ്ങിയവയാണ് എലിസയ്ക്ക് ഏറ്റവും കൂടുതൽ ഉപയോഗിക്കുന്ന എൻസൈമുകൾ.

പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ദൃശ്യപരവും ഉപകരണപരവുമായ റെക്കോർഡിംഗിനായി ആൻ്റിജൻ-ആൻ്റിബോഡി കോംപ്ലക്സിലെ എൻസൈം പ്രവർത്തനം കണ്ടെത്തുന്നതിന്, ക്രോമോജെനിക് സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റുകൾ ഉപയോഗിക്കുന്നു, തുടക്കത്തിൽ നിറമില്ലാത്ത, എൻസൈമാറ്റിക് പ്രതിപ്രവർത്തന സമയത്ത് നിറം നേടുന്ന പരിഹാരങ്ങൾ, അതിൻ്റെ തീവ്രത അളവിന് ആനുപാതികമാണ്. എൻസൈമിൻ്റെ. അതിനാൽ, സോളിഡ്-ഫേസ് എലിസയിലെ നിറകണ്ണുകളോടെ പെറോക്സിഡേസിൻ്റെ പ്രവർത്തനം കണ്ടെത്തുന്നതിന്, തീവ്രമായ തവിട്ട് നിറം ഉണ്ടാക്കുന്ന 5-അമിനോസാലിസിലിക് ആസിഡും ഓറഞ്ച്-മഞ്ഞ നിറം ഉൽപ്പാദിപ്പിക്കുന്ന ഓർത്തോ-ഫെനൈലെനെഡിയമൈനും ഒരു അടിവസ്ത്രമായി ഉപയോഗിക്കുന്നു. ആൽക്കലൈൻ ഫോസ്ഫേറ്റസിൻ്റെയും β-ഗാലറ്റോസിഡേസിൻ്റെയും പ്രവർത്തനം കണ്ടുപിടിക്കാൻ, യഥാക്രമം നൈട്രോഫെനൈൽഫോസ്ഫേറ്റുകളും നൈട്രോഫെനൈൽഗലാക്റ്റോസൈഡുകളും ഉപയോഗിക്കുന്നു.

ഒരു നിറമുള്ള ഉൽപ്പന്നത്തിൻ്റെ രൂപീകരണത്തിലെ പ്രതികരണത്തിൻ്റെ ഫലം ദൃശ്യപരമായി അല്ലെങ്കിൽ ഒരു നിശ്ചിത തരംഗദൈർഘ്യമുള്ള പ്രകാശത്തിൻ്റെ ആഗിരണം അളക്കുന്ന ഒരു സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമീറ്റർ ഉപയോഗിച്ചാണ് നിർണ്ണയിക്കുന്നത്.

ELISA നടത്തുന്നതിന് നിരവധി ഓപ്ഷനുകൾ ഉണ്ട്. ഏകതാനവും വൈവിധ്യപൂർണ്ണവുമായ ഓപ്ഷനുകൾ ഉണ്ട്.

ഉൽപാദന രീതി അനുസരിച്ച്, മത്സരപരവും മത്സരപരമല്ലാത്തതുമായ ELISA രീതികൾ വേർതിരിച്ചിരിക്കുന്നു. ആദ്യ ഘട്ടത്തിൽ വിശകലനം ചെയ്ത സംയുക്തവും അതിൻ്റെ അനുബന്ധ ബൈൻഡിംഗ് സെൻ്ററുകളും (ആൻ്റിജനും നിർദ്ദിഷ്ട ആൻ്റിബോഡികളും) മാത്രമേ സിസ്റ്റത്തിൽ ഉള്ളൂവെങ്കിൽ, രീതി മത്സരപരമല്ല. ആദ്യ ഘട്ടത്തിൽ വിശകലനം ചെയ്ത സംയുക്തവും (ആൻ്റിജൻ) അതിൻ്റെ അനലോഗും (എൻസൈം-ലേബൽ ചെയ്ത ആൻ്റിജനും) ഉണ്ടെങ്കിൽ, കുറവുള്ള നിർദ്ദിഷ്ട ബൈൻഡിംഗ് സെൻ്ററുകളുമായി (ആൻ്റിബോഡികൾ) ബന്ധിപ്പിക്കുന്നതിന് പരസ്പരം മത്സരിക്കുന്നു, അപ്പോൾ രീതി മത്സരപരമാണ്. ഈ സാഹചര്യത്തിൽ, ലായനിയിൽ അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന കൂടുതൽ ടെസ്റ്റ് ആൻ്റിജൻ, ബന്ധിത ലേബൽ ചെയ്ത ആൻ്റിജനുകളുടെ എണ്ണം കുറയുന്നു.

ഫ്ലൂറസിങ് ആൻ്റിബോഡികളുടെ രീതി (എംഎഫ്എ) അല്ലെങ്കിൽ ഇമ്മ്യൂണോഫ്ലൂറസെൻസ് റിയാക്ഷൻ (ആർഐഎഫ്)

ടെസ്റ്റ് മെറ്റീരിയലിൽ ഒരു അജ്ഞാത സൂക്ഷ്മാണുക്കളെ ദ്രുതഗതിയിൽ കണ്ടെത്തുന്നതിനും തിരിച്ചറിയുന്നതിനുമുള്ള തിരഞ്ഞെടുക്കൽ രീതിയാണ് ഇമ്മ്യൂണോഫ്ലൂറസെൻസ് രീതി.

Ag + AT + ഇലക്ട്രോലൈറ്റ് = UV രശ്മികളിൽ തിളങ്ങുന്ന സങ്കീർണ്ണമായ

ഫ്ലൂറോക്രോം ലേബൽ ചെയ്ത മൈക്രോബ് സെറം

ഫ്ലൂറസിൻ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ് എഫ്ഐടിസി ആണ് പലപ്പോഴും ഉപയോഗിക്കുന്ന ചായം

ഈ രീതി പഠിക്കുമ്പോൾ, ഒരു ഫ്ലൂറസെൻ്റ് മൈക്രോസ്കോപ്പ് ഉപയോഗിക്കുന്നു.

സ്റ്റേജിംഗ് RIF

30 μl FITC-ലേബൽ ചെയ്ത ആൻ്റിബോഡി ലായനി സ്മിയറിലേക്ക് പ്രയോഗിക്കുന്നു.

ഈർപ്പമുള്ള അറയിൽ ഗ്ലാസ് വയ്ക്കുക, 20-25 മിനിറ്റ് ഊഷ്മാവിൽ വയ്ക്കുക, അല്ലെങ്കിൽ 37 ° C താപനിലയിൽ 15 മിനിറ്റ് തെർമോസ്റ്റാറ്റിൽ വയ്ക്കുക.

പ്രവർത്തിക്കുന്ന മെഷീനിൽ ഗ്ലാസ് കഴുകുക പൈപ്പ് വെള്ളം 2 മിനിറ്റ്, വാറ്റിയെടുത്ത വെള്ളം ഉപയോഗിച്ച് കഴുകിക്കളയുക, വായുവിൽ ഉണക്കുക.

ഉണങ്ങിയ സ്മിയറിൽ ഒരു തുള്ളി മൗണ്ടിംഗ് ലിക്വിഡ് പ്രയോഗിക്കുന്നു, സ്മിയർ ഒരു കവർസ്ലിപ്പ് കൊണ്ട് പൊതിഞ്ഞ് ഒരു ഫ്ലൂറസെൻ്റ് മൈക്രോസ്കോപ്പ് അല്ലെങ്കിൽ ഒരു പരമ്പരാഗത ഒപ്റ്റിക്കൽ മൈക്രോസ്കോപ്പിലേക്കുള്ള ഫ്ലൂറസെൻ്റ് അറ്റാച്ച്മെൻ്റ് ഉപയോഗിച്ച് മൈക്രോസ്കോപ്പ് ചെയ്യുന്നു.