معايير النشاط المضاد للميكروبات للدواء هي الحد الأدنى للتركيز(هيئة التصنيع العسكري) و الحد الأدنى من تركيز مبيد للجراثيم(MBK). MIC هو أقل تركيز للمضادات الحيوية والذي يثبط تمامًا في المختبر مرئي نمو البكتيريا. يتم التعبير عنها بالملجم / لتر أو ميكروجرام / مل. MBC هو أقل تركيز للمضاد الحيوي الذي يسبب تأثير مبيد للجراثيم. لتحديد ذلك، من الضروري تلقيح أنابيب الاختبار التي لا يوجد فيها نمو بصري على أجار مغذي كثيف لا يحتوي على مضاد حيوي. هذا المؤشر لديه كبير أهمية سريرية. واستنادًا إلى طريقة التخفيف التسلسلي، تم إنشاء طرق دقيقة تتضمن استخدام كمية أصغر من الوسط المغذي. حاليًا، لإجراء هذا النوع من الأبحاث، يتم إنتاج العديد من المجموعات التجارية، التي تتكون من التخفيفات المجففة المستقرة للمضادات الحيوية في وسط غذائي، والتي يتم تخفيفها بتعليق ميكروب الاختبار. يمكن تخزين هذه المجموعات في الظروف العاديةمما يلغي الحاجة إلى تحضير التخفيفات للوسط والمضادات الحيوية في المختبر. تتمتع اختبارات التخفيف الدقيق أيضًا بميزة دمجها في نظام آلي.
بناءً على البيانات التي تم الحصول عليها (قطر منطقة تثبيط النمو أو قيمة MIC)، يتم تقسيم الكائنات الحية الدقيقة إلى حساسة ومقاومة متوسطة ومقاومة. وللتمييز بين هذه الفئات، يتم استخدام ما يسمى بالتركيزات الحدية للمضادات الحيوية، وهي ليست قيمًا ثابتة. ويتم تنقيحها مع تغير حساسية التجمعات الميكروبية. يتم تطوير ومراجعة معايير التفسير من قبل كبار المتخصصين (المعالجين الكيميائيين، علماء الأحياء الدقيقة) الذين هم أعضاء في اللجان الخاصة. إحداها هي اللجنة الوطنية لمعايير المختبرات السريرية ( نوطني ج ommitteefor جخطي لمجهري سالمعايير – NCCLS)، نظمت في الولايات المتحدة الأمريكية. حاليا، يتم استخدام معايير NCCLS كمعايير دولية لتقييم نتائج تحديد حساسية البكتيريا خلال التجارب الميكروبيولوجية متعددة المراكز. الدراسات السريرية.
تحديد حساسية البكتيريا للمضادات الحيوية.إن معيار حساسية الكائنات الحية الدقيقة للمضادات الحيوية هو الحد الأدنى من التركيز المثبط (MIC) للمضاد الحيوي، والذي يؤخر نمو العامل الممرض في ظل الظروف التجريبية القياسية.
لتحديد مقاومة الأدوية، يتم استخدام مزرعة نقية يومية للعامل الممرض المعزول من جسم المريض ووسط غذائي قياسي (AGV أو أجار مولر-هينتون) لتلقيحه.
يتم تحديد حساسية الكائنات الحية الدقيقة للمضادات الحيوية باستخدام طريقة نشر القرص أو طريقة التخفيفات التسلسلية للمضاد الحيوي في الوسائط السائلة أو الصلبة.
طريقة انتشار القرص.يعتمد تحديد الحساسية للمضادات الحيوية باستخدام طريقة القرص الورقي على انتشار المضاد الحيوي في الوسط المغذي. يتم اختيار تركيز المضادات الحيوية في الأقراص بحيث تتوافق أقطار مناطق تثبيط نمو الكائنات الحية الدقيقة التي تم اختبارها بشكل قياسي المعايير الدولية. يتوافق هذا التركيز مع متوسط الجرعة العلاجية للسلالات القياسية من الكائنات الحية الدقيقة.
يتم تلقيح المعلق المحضر من الكائنات الحية الدقيقة على سطح وسط خاص (AGV أو أجار مولر-هينتون) في أطباق بيتري. بعد ذلك، باستخدام ملاقط معقمة، يتم وضع الأقراص الورقية القياسية المنقوعة في محاليل المضادات الحيوية المختلفة على السطح الملقّح على مسافة متساوية من بعضها البعض، من الحواف ومنتصف الكوب (يمكن أيضًا استخدام أجهزة وموزعات خاصة). يتم حفظ الأطباق الملقحة في منظم الحرارة عند درجة حرارة مثالية لنمو البكتيريا قيد الدراسة. إذا كانت البكتيريا حساسة لهذا المضاد الحيوي، فسوف تتشكل منطقة تثبيط النمو حول القرص. يتوافق قطر منطقة تثبيط النمو مع درجة حساسية الكائنات الحية الدقيقة قيد الدراسة لمضاد حيوي معين. يتم تقييم النتيجة النهائية باستخدام جداول خاصة تشير إلى أقطار مناطق تثبيط النمو للمحاصيل القياسية والحساسة والمقاومة والمقاومة المعتدلة.
لا توفر طريقة القرص بيانات موثوقة عند تحديد حساسية الكائنات الحية الدقيقة للمضادات الحيوية متعددة الببتيد التي تنتشر بشكل سيئ في الأجار (على سبيل المثال، بوليميكسين، ريستوميسين). كما أن هذه الطريقة لا تسمح بتحديد الحد الأدنى للتركيز المثبط للمضاد الحيوي.
طريقة التخفيف التسلسلي.تحدد هذه الطريقة الحد الأدنى من التركيزمضاد حيوي يثبط نمو الثقافة البكتيرية قيد الدراسة (MIC، MIC). للقيام بذلك، قم أولاً بإعداد محلول مخزون يحتوي على تركيز معين من المضادات الحيوية (ميكروجرام/مل أو وحدات/مل) في محلول مذيب خاص أو محلول عازل. بعد ذلك، يتم تحضير جميع التخفيفات اللاحقة في المرق (بحجم 1 مل) من المحلول الرئيسي، وبعد ذلك يتم إضافة 0.1 مل من المعلق البكتيري الاختباري الذي يحتوي على 106-107 خلايا بكتيرية في 1 مل إلى كل تخفيف. أضف 1 مل من المرق (بدون مضاد حيوي) و 0.1 مل من المعلق الجرثومي (التحكم في الثقافة) إلى أنبوب الاختبار الأخير. تم تحضين المحاصيل عند درجة حرارة 37 درجة مئوية حتى اليوم التالي، وبعد ذلك تم ملاحظة نتائج التجربة من خلال تعكر الوسط المغذي مقارنة بالشاهد. يشير أنبوب الاختبار الأخير ذو الوسط المغذي الشفاف إلى تأخر نمو الثقافة البكتيرية قيد الدراسة، تحت تأثير التركيز المثبط الأدنى (المثبط) (MIC، MIC) للمضاد الحيوي الموجود فيه. لتقييم الحد الأدنى لتركيز مبيد الجراثيم (MBC)، يتم إجراء البذر على وسط مغذٍ صلب بدون مضاد حيوي من أنابيب اختبار بدون نمو. يعتبر MBC هو الحد الأدنى لتركيز المضاد الحيوي الذي يسبب موت الكائنات الحية الدقيقة، والذي يتميز بغياب النمو في أطباق بيتري مع وسط غذائي.
طريقة التخفيف التسلسلي للمضادات الحيوية في وسط أجار.في هذه الحالة، من الممكن اختبار حساسية العديد من مزارع الكائنات الحية الدقيقة لتركيزات مختلفة من مضاد حيوي معين في تجربة واحدة. يتم تحضير التخفيفات المختلفة للمضاد الحيوي في وسط أجار معقم. للقيام بذلك، أضف الكمية المطلوبة من محلول المضاد الحيوي الأولي، واخلطه جيدًا واسكبه في أطباق بيتري معقمة. بعد أن يتصلب الأجار، يتم تقسيم قاع الكوب من الخارج إلى قطاعات باستخدام قلم التحديد. يتم رسم كل ثقافة قيد الدراسة باستخدام حلقة بكتريولوجية على قطاع معين في أطباق ذات تركيزات مختلفة من المضاد الحيوي. يمكن زرع الثقافات المدروسة على أطباق ذات تركيزات مختلفة من المضاد الحيوي باستخدام قضيب يسمح لك بتطعيم 12-15 ثقافة في نفس الوقت لكل طبق. ثم يتم وضع الأطباق في منظم الحرارة عند درجة حرارة مثالية لنمو وتطور البكتيريا قيد الدراسة. تم أخذ النتائج في الاعتبار بوجود أو عدم وجود نمو بكتيري مقارنة بالنمو على الوسط الموجود في لوحة التحكم. تعتبر البكتيريا حساسة للمضادات الحيوية عند التركيز الذي يتم فيه تثبيط نموها بالكامل.
طريقة الاختبار الإلكتروني.تجمع هذه الطريقة بين مزايا طريقة التخفيف التسلسلي وطريقة القرص. بدلاً من الأقراص، يتم استخدام شرائح ("مساطر") من ورق الترشيح المشرب بالمضادات الحيوية، وفي قاعدة الشريط سيكون تركيز المضاد الحيوي في حده الأدنى، وفي "الأعلى" - الحد الأقصى. يتم وضع الشرائط على سطح أجار المغذيات المصنف مع الثقافة قيد الدراسة. إذا كانت البكتيريا حساسة لعمل هذا الدواء، تظهر منطقة إهليلجية لتثبيط النمو حول مناطق الشريط التي تحتوي على تركيزاته المثبطة. قيمة عدديةويشير تركيز المضاد الحيوي في قاعدة هذه المنطقة إلى الحد الأدنى من الحد الأدنى لهذا المضاد الحيوي لمحصول معين.
ل حساسوتشمل هذه سلالات الكائنات الحية الدقيقة التي يتم تثبيط نموها عند تركيزات الدواء الموجودة في مصل دم المريض عند استخدام جرعات عادية من المضادات الحيوية.
ل مستقرة إلى حد ماوتشمل هذه السلالات التي يتطلب تثبيط نموها تراكيز يتم إنشاؤها في مصل الدم عند تناول الجرعات القصوى من الدواء.
مستمرهي كائنات دقيقة لا يتم تثبيط نموها بواسطة الدواء بتركيزات يتم تكوينها في الجسم عند استخدام الحد الأقصى للجرعات المسموح بها.
أسئلة التحكم.
تعريف مصطلح "المضادات الحيوية". المجموعات الرئيسية للمضادات الحيوية حسب طريقة التحضير: طبيعية وشبه صناعية وصناعية. اذكر اسم العالم الذي طور نظرية العلاج الكيميائي . ما هي الخصائص الحاسمة عند اختيار دواء العلاج الكيميائي؟ ما هو مؤشر العلاج الكيميائي واكتب صيغته وماذا يجب أن يكون؟ حدد الأدوية المضادة للفيروسات الأولى. أولاً دواء مضاد للجراثيمواسم العالم الذي حصل عليه. ما هي أسماء العلماء الروس الذين اكتشفوا لأول مرة خصائص العفن الأخضر المضادة للبكتيريا؟ اذكر اسم العالم الذي درس الخواص المضادة للبكتيريا لعفن البنسليوم وقام بمحاولة عزل البنسلين. العلماء الذين تلقوا لأول مرة مستحضرات البنسلين. منتجو المضادات الحيوية - أعط أمثلة. تصنيف المضادات الحيوية حسب المنشأ التركيب الكيميائي، وفقا لطيف العمل. آلية عمل المضادات الحيوية: الأهداف (نقاط تطبيق المضادات الحيوية مجموعات مختلفة). أنواع العمل - مبيد للجراثيم والجراثيم. كيفية تحديدها في تجربة في المختبر؟ المضادات الحيوية المضادة للفيروسات، آليات عملهم. في أي وحدات يتم قياس نشاط المضادات الحيوية؟ شروط تخزين المضادات الحيوية.
اسم ووصف ممكن آثار جانبيةمع العلاج بالمضادات الحيوية. تعريف مفهوم "مقاومة الميكروبات للأدوية". أنواع مقاومة الأدوية. الطبيعية والمكتسبة (الابتدائية والثانوية). الآليات الوراثية لمقاومة الأدوية: الكروموسومات والبلازميد. الآليات المظهرية لمقاومة الأدوية - الاسم والتوصيف. الاستخدام الرشيد للمضادات الحيوية - تسمية الطرق. تسمية الأدوية التي تعمل على تثبيط الإنزيمات التي تدمر المضادات الحيوية. وصف طرق تحديد حساسية الميكروبات للمضادات الحيوية.
تحليل قدرة البكتيريا على التكاثر والنمو في الأوساط التي تحتوي على تركيزات متناقصة مادة طبية، يسمح لك بتحديد الحد الأدنى للتركيز المثبط للمضاد الحيوي (MIC)، والدور المثبط للبكتيريا في المختبر (الجدول 3 (الطبيب البيطري 7)). ويحدد حجم هذه الجرعة اختيار الدواء الذي يمكنه تحقيق تركيزات مماثلة في الجسم الحي، وهو الأساس لمقارنة حساسية الجسم النسبية للأدوية الأخرى. ويعتقد أنه لضمان الفعالية، يجب أن يكون تركيز المادة الدوائية في موقع الإصابة على الأقل يساوي القيمةالحد الأدنى من التركيز المثبط للمضادات الحيوية. من ناحية أخرى، يجب أن تكون تركيزات الدواء في البلازما بشكل عام أعلى لضمان تركيزات كافية في الأنسجة. ومع ذلك، فإن الزيادة غير المبررة في جرعات الأدوية المضادة للميكروبات من أجل تحقيق الحد الأدنى من جرعة المضاد الحيوي الذي يمنع نمو نوع معين من البكتيريا في المختبر يمكن أن تؤدي إلى تراكم الدواء في جسم المتلقي بجرعات سامة.
إن "MIC الحرج" لمادة دوائية معينة هو أعلى تركيز آمن إلى حد معقول للدواء والذي يمكن تحقيقه باستخدام جرعة مقبولة سريريًا وطريقة إعطاء الدواء (الجدول 3 (الطبيب البيطري 7)). يعتمد MIC على نوع معين من الثقافة البكتيرية ونوع المادة الدوائية المحددة. وفي الوقت نفسه، يكون MIC الحرج خاصًا بمستلم معين ولمادة دوائية معينة. وبالتالي، فإن MIC الحرج سيكون هو نفسه بالنسبة لأي كائن حي (الجدول 3 (الطبيب البيطري 7)). قد تختلف قيمة التركيز الحرج لكائن معين تبعًا لأنواع الحيوانات (بسبب الاختلافات في الحساسية أو أنماط التوزيع). الدواء) ومختبر محدد. يجب الاتصال بالمختبر الذي يقدم بيانات حول طرق الاستزراع وحساسية المضادات الحيوية للحصول على القيم الحرجة المستخدمة في دراساتهم.
استنادا إلى بيانات التخفيف في المختبر، يتم تصنيف البكتيريا على أنها حساسة (S) لدواء معين إذا كان MIC أقل بكثير من القيمة الحرجة لهذا المؤشر. يتم تثبيط نمو الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض ذات قيم الحساسية المتوسطة (MS) أو المتوسطة (IS) عندما يقترب تركيز الدواء من قيمة MIC الحرجة. مثل هذه البكتيريا يمكن أن تسبب ردود فعل سلبية في جسم المريض أو ليس لها أي تأثير عليه. يتجاوز MIC للبكتيريا المقاومة (R). قيمة حرجةالحد الأدنى من الجرعة. من غير المرجح أن يتحقق التركيز الفعال لمثل هذا الدواء في جسم المريض الذي يؤثر على كائن حي دقيق معين. في مثل هذه الحالات، قد يفوق أيضا خطر تراكم الدواء بجرعات سامة الفوائد المحتملةمن استخدام العلاج. يكون تحديد الجرعة الدنيا الحرجة للجيل الجديد من المضادات الحيوية المضادة للبكتيريا أكثر صعوبة في بعض الحالات بسبب الانتقال إلى وضع العلامات المهنية المرنة لنطاقات الجرعات.
يجب اختيار الأدوية بطريقة تجعل من الممكن، عند تناولها وفق جدول زمني يمنع تراكم الدواء بجرعات سامة، تحقيق أقصى تركيز للدواء في البلازما يتجاوز MIC بشكل ملحوظ. ستكون العديد من البكتيريا حساسة لتأثيرات دواء معين بتركيزات أقل بكثير من الجرعة الدنيا الحرجة. الفرق بين القيمة الحرجة و القيمة الذاتيةيمكن استخدام MICs لمقارنة الفعالية النسبية لمضادات الميكروبات المختلفة. على سبيل المثال، بالنسبة للأميكاسين، القيمة الحرجة هي 32 ميكروغرام/مل، لذا فإن الإشريكية القولونية ذات الحد الأدنى من التركيز 2 ميكروغرام/مل هي أكثر حساسية نسبيًا للأميكاسين من الإشريكية القولونية ذات الحد الأدنى من التركيز 16 ميكروغرام/مل. ينبغي اعتبار كلا النوعين حساسين (على الرغم من أن النوع الثاني يمكن اعتباره ذو حساسية متوسطة)، ولكن يبدو أن نمو بكتيريا النوع الأول قد تم تثبيطه إلى حد أكبر. إذا كانت نفس الأنواع من الإشريكية القولونية ذات قيمة MIC تبلغ 2 ميكروجرام/مل بالنسبة للأموكسيسيلين لها قيمة MIC تبلغ 16 ميكروجرام/مل (مع قيمة حرجة تبلغ 32 ميكروجرام/مل)، فمن المفترض أن يكون نمو هذه الكائنات الحية الدقيقة منخفضًا. يمكن الوقاية منه بسهولة أكبر عن طريق استخدام الأميكاسين بدلاً من الأموكسيسيلين لأن قيمة MIC للأميكاسين بعيدة عن قيمة MIC الحرجة الخاصة بها من قيمة MIC للأموكسيسيلين.
على الرغم من أن الاختلافات بين قيم MIC لنوع بكتيري معين ودواء معين (16 أو 32) قد تبدو كبيرة جدًا (خاصة في سياق حد تركيز بلازما الدواء)، فإن هذا الاختلاف يتوافق مع محلول واحد فقط في أنبوب اختبار. وهذا مثال على خطورة المبالغة في تقدير بيانات الحساسية. إذا كانت قيمة MIC لكائن حي معين قريبة بدرجة كافية من القيمة الحرجة، فعندئذ، بسبب الاختلافات المحتملة في التفسير، قد يتم تعيين درجة حساسية لهذا الكائن الدقيق من "S" أو "MS" في أحد المختبرات، و "R" في مختبر واحد. آخر، بسبب الاختلافات المحتملة في التفسير. مثل هذه التناقضات المحتملة في التقييم هي أحد الأسباب لتجنب استخدام الأدوية التي يكون لدى كائن معين حساسية تجاهها لمرض التصلب العصبي المتعدد (أو إذا كانت قيمة MIC قريبة من الحرجة)، إلا إذا كان تركيز الدواء في موقع الإصابة قد يكون كبيرًا أعلى من قيمة MIC المحددة في الاختبار المختبري. ومن الأمثلة التوضيحية استخدام الأدوية التي تفرز عن طريق الكلى لعلاج العدوى. المسالك البوليةأو استخدام الأدوية المفرزة الصفراوية لعلاج العدوى القنوات الصفراوية. تراكم بعض الأدوية بواسطة الكريات البيض (الفلوروكينولونات، الماكروليدات) قد يؤدي أيضًا إلى تركيزات الدواء في الأنسجة تتجاوز بشكل ملحوظ MIC (أو قيمة MIC الحرجة)، على الرغم من انخفاض تركيزات البلازما.
يمكن أن يتغير الحد الأدنى من التركيز البكتيري خلال حالات العدوى اللاحقة التي تسببها بكتيريا من نفس النوع، ويمكن أن يتغير أيضًا أثناء سير المرض المعدي. قد تعكس الزيادة في MIC ببساطة نهجًا مختلفًا لتقييم الفحص (خاصة إذا تم اكتشاف الاختلافات فقط عن طريق التخفيف في المختبر)، ولكن قد تكون أيضًا بسبب تطور المقاومة لدواء معين. في مثل هذه الحالات، يمكن تغيير مسار العلاج المضاد للميكروبات باستخدام دواء إضافي أو التحول إلى دواء جديد أكثر فعالية. دواء فعال. في حالات العدوى المتعددة الميكروبات، من المرجح أن تكون قيمة MIC لدواء معين مختلفة بالنسبة لكل بكتيريا معدية. ويعتقد أنه من الأسهل منع نمو البكتيريا قيمة منخفضة MIC نسبة إلى مادة دوائية معينة مقارنة بنمو الكائنات الحية الدقيقة مع قيمة MIC أعلى بالنسبة لنفس المادة الدوائية.
(ميكروفون) - الحد الأدنى من التركيز المثبط (القمعي). - أدنى تركيز للمضاد الحيوي الذي يمنع النمو المرئي للكائنات الحية الدقيقة قيد الدراسة في المختبر(في المرق أو الأوساط المغذية) في ظل ظروف تجريبية قياسية ويتم التعبير عنها بالميكروجرام/مل (ملجم/لتر) أو الوحدات/مل.
الحد الأدنى لتركيز مبيد الجراثيم (MBC) -أدنى تركيز للمضادات الحيوية، والتي في الدراسة في المختبريسبب موت 99.9% من الكائنات الحية الدقيقة حدودخلال فترة زمنية معينة.
حساسالكائنات الحية الدقيقة - سلالة من الكائنات الحية الدقيقة التي ليس لديها آليات مقاومة لدواء معين. يتم إيقافه على وسط غذائي عند استخدام المضاد الحيوي بجرعة علاجية.
مقاومة معتدلةالكائنات الحية الدقيقة - سلالة من الكائنات الحية الدقيقة، التي يتوقف نموها على وسط غذائي فقط عند استخدام المضاد الحيوي بأعلى جرعة. يتم علاج الالتهابات التي تسببها الكائنات الحية الدقيقة ذات المقاومة المعتدلة في غياب الأدوية البديلة، مع أعلى جرعة (علاجية قصوى) من المضاد الحيوي.
الكائنات الحية الدقيقة المقاومة -سلالة من الكائنات الحية الدقيقة التي لديها آليات مقاومة لدواء معين. ويتوقف نموه على وسط غذائي فقط عند استخدام تركيزات عالية جدًا من الدواء، والتي لا يمكن تكوينها في الجسم بسبب سميتها العالية. عند علاج الالتهابات التي تسببها هذه الكائنات الحية الدقيقة، لا يوجد أي تأثير سريري من العلاج حتى عند استخدام أعلى جرعة من المضادات الحيوية. في هذه الحالة، قد يكون هناك ملاحظة آثار جانبيةمضاد حيوي.
مؤشرات لتحديد حساسية الكائنات الحية الدقيقة للمضادات الحيوية:
1) تحديد الحساسية للمضادات الحيوية الجديدة الموصى باستخدامها؛
2) المراقبة الدورية لمقاومة المضادات الحيوية لدى الأفراد المراكز الطبيةوفي مناطق جغرافية مختلفة لرصد انتشار مقاومة المضادات الحيوية؛
3) مبرر العلاج بالمضادات الحيوية الكافية في المرضى الأفراد في حالات:
أ) عزل الكائنات الحية الدقيقة من السوائل والأعضاء والأنسجة البشرية المعقمة في المقام الأول؛
ب) عند عزل الكائنات الحية الدقيقة من البيئات الحيوية غير المعقمة في المقام الأول، ينبغي أن يسبق تقييم الحساسية تقييم للأهمية السريرية للكائنات الحية الدقيقة المعزولة؛
ج) الالتهابات المقاومة للأدوية العلاج التجريبي;
د) حالات العدوى الفريدة ونقص الخبرة في علاجها؛
هـ) الالتهابات التي تتطلب علاجًا طويل الأمد (يتم اكتشاف مقاومة للمضادات الحيوية كل أسبوع من العلاج، نظرًا لاحتمال حدوث تغيير في مسببات الأمراض).
تحديد حساسية الكائنات الحية الدقيقة للمضادات الحيوية غير مناسب:
1) للممثلين البكتيريا الطبيعيةالبشر، عندما يكونون معزولين عن بيئاتهم الطبيعية؛
2) لأنواع الكائنات الحية الدقيقة التي لم يتم وصف الأشكال المقاومة لبعض المضادات الحيوية فيها. على سبيل المثال، تعتبر المكورات العقدية المقيحة حساسة للبنسلين، لذا فإن اختبار الحساسية لهذه الأدوية ليس عمليًا في الممارسة الروتينية.
جدول محتويات موضوع "طرق تحديد الحساسية للعوامل المضادة للميكروبات. آثار جانبيةالعلاج بالمضادات الحيوية.":طرق تحديد الحساسية للعوامل المضادة للميكروبات. الحد الأدنى من التركيز المثبط (MIC). طريقة التخفيفات التسلسلية في الوسائط السائلة.
معايير نشاط دواء معين هي الحد الأدنى للتركيز (هيئة التصنيع العسكري) - أقل تركيز للدواء الذي يمنع نمو ثقافة الاختبار و الحد الأدنى من تركيز مبيد للجراثيم (إم بي كيه) - أقل تركيز للدواء الذي يسبب تأثير مبيد للجراثيم.
طريقة التخفيفات التسلسلية في الوسائط السائلة
طريقة التخفيفات التسلسلية في الوسائط السائلةيسمح لك بالتثبيت الحد الأدنى للتركيز (هيئة التصنيع العسكري) و الحد الأدنى من تركيز مبيد للجراثيم (إم بي كيه) دواء لمسببات الأمراض المعزولة. يمكن إجراء الأبحاث بكميات مختلفة من الوسط الغذائي (1-10 مل). استخدام الوسائط المغذية السائلة التي تلبي الاحتياجات الغذائية للممرض. في أنابيب الاختبار (عادة ثمانية)، يتم تحضير سلسلة من التخفيفات المزدوجة للدواء في وسط غذائي. يتم تقليل التركيز وفقًا لذلك من 128 إلى 0.06 ميكروجرام / مل (قد يختلف التركيز الأساسي اعتمادًا على نشاط الدواء). الحجم النهائي للوسط في كل أنبوب هو 1 مل. يُستخدم أنبوب اختبار يحتوي على وسط غذائي نظيف كعنصر تحكم. يضاف 0.05 مل من المحلول الفسيولوجي الذي يحتوي على 106/ مل من الخلايا الميكروبية إلى كل أنبوب اختبار. يتم تحضين الأنابيب لمدة 10-18 ساعة عند 37 درجة مئوية (أو حتى يظهر نمو البكتيريا في أنبوب التحكم). وبعد الفترة المحددة، تؤخذ النتائج بعين الاعتبار من خلال التغيرات في الكثافة البصرية للوسط بصريا أو قياسا للكلية. يمكن أيضًا استخدام طريقة معدلة باستخدام وسط مكمل بالجلوكوز ومؤشر. ويصاحب نمو الكائنات الحية الدقيقة تغير في الرقم الهيدروجيني للوسط وبالتالي لون المؤشر.
