অ্যাগ্লুটিনেশন প্রতিক্রিয়া অ্যান্টি-রিসাস অ্যান্টিবডি নির্ধারণের জন্য ( পরোক্ষ প্রতিক্রিয়াকম্বস)আবেদনইন্ট্রাভাসকুলার হেমোলাইসিস রোগীদের মধ্যে। এই রোগীদের মধ্যে কিছু, অ্যান্টি-রিসাস অ্যান্টিবডি সনাক্ত করা হয়, যা অসম্পূর্ণ এবং একচেটিয়া। তারা বিশেষভাবে আরএইচ-পজিটিভ এরিথ্রোসাইটের সাথে যোগাযোগ করে, কিন্তু তাদের সংযোজন ঘটায় না। এই ধরনের অসম্পূর্ণ অ্যান্টিবডির উপস্থিতি পরোক্ষ Coombs পরীক্ষা দ্বারা নির্ধারিত হয়। এটি করার জন্য, অ্যান্টিগ্লোবুলিন সিরাম (মানুষের ইমিউনোগ্লোবুলিনের বিরুদ্ধে অ্যান্টিবডি) অ্যান্টি-আরএইচ অ্যান্টিবডি + আরএইচ-পজিটিভ এরিথ্রোসাইটের সিস্টেমে যুক্ত করা হয়, যা এরিথ্রোসাইটের সংমিশ্রণ ঘটায়। Coombs প্রতিক্রিয়া ব্যবহার করে, ইমিউন উত্সের এরিথ্রোসাইটের ইন্ট্রাভাসকুলার লাইসিসের সাথে সম্পর্কিত প্যাথলজিকাল অবস্থা নির্ণয় করা হয়, উদাহরণস্বরূপ, নবজাতকের হেমোলাইটিক রোগ: একটি আরএইচ-পজিটিভ ভ্রূণের এরিথ্রোসাইটগুলি রক্তে সঞ্চালিত আরএইচ ফ্যাক্টরের অসম্পূর্ণ অ্যান্টিবডিগুলির সাথে একত্রিত হয়। আরএইচ-নেগেটিভ মায়ের কাছ থেকে প্লাসেন্টার মধ্য দিয়ে চলে গেছে।
পদ্ধতি. অসম্পূর্ণ (একচেটিয়া) অ্যান্টিবডিগুলি সনাক্ত করতে অসুবিধা এই কারণে যে এই অ্যান্টিবডিগুলি, যখন একটি নির্দিষ্ট অ্যান্টিজেনের এপিটোপে আবদ্ধ হয়, তখন একটি জালিকা গঠন তৈরি করে না এবং অ্যান্টিজেন এবং অ্যান্টিবডিগুলির মধ্যে প্রতিক্রিয়াটি সংযোজন, বৃষ্টিপাত দ্বারা সনাক্ত করা যায় না। বা অন্যান্য পরীক্ষা। গঠিত অ্যান্টিজেন-অ্যান্টিবডি কমপ্লেক্স সনাক্ত করতে, অতিরিক্ত পরীক্ষা সিস্টেম ব্যবহার করা প্রয়োজন। অসম্পূর্ণ অ্যান্টিবডি সনাক্ত করতে, উদাহরণস্বরূপ, একজন গর্ভবতী মহিলার রক্তের সিরামে এরিথ্রোসাইটের আরএইচ অ্যান্টিজেনের জন্য, প্রতিক্রিয়াটি দুটি পর্যায়ে সঞ্চালিত হয়: 1) আরএইচ অ্যান্টিজেনযুক্ত এরিথ্রোসাইটগুলিকে পরীক্ষার সিরামের দ্বিগুণ তরলীকরণে যুক্ত করা হয় এবং রাখা হয়। এক ঘন্টার জন্য 37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে; 2) খরগোশের মানব-বিরোধী অ্যান্টি-গ্লোবিউলিন সিরাম (প্রি-টাইট্রেটেড ওয়ার্কিং ডিলিউশনে) প্রথম পর্যায়ের পরে পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে ধুয়ে এরিথ্রোসাইটগুলিতে যোগ করা হয়। 37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে 30 মিনিটের জন্য ইনকিউবেশনের পরে, ফলাফলগুলি হেম্যাগ্লুটিনেশন (ইতিবাচক প্রতিক্রিয়া) এর উপস্থিতি দ্বারা মূল্যায়ন করা হয়। প্রতিক্রিয়ার উপাদানগুলি নিয়ন্ত্রণ করা প্রয়োজন: 1) অ্যান্টিগ্লোবুলিন সিরাম + লোহিত রক্তকণিকা নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডিগুলির সাথে সংবেদনশীল বলে পরিচিত; 2) সাধারণ সিরাম + অ্যান্টিগ্লোবুলিন সিরাম দিয়ে চিকিত্সা করা এরিথ্রোসাইট; 3) পরীক্ষার সিরাম + অ্যান্টিগ্লোবুলিন সিরাম দিয়ে চিকিত্সা করা আরএইচ-নেগেটিভ এরিথ্রোসাইট।
50. প্যাসিভ হেমাগ্লুটিনেশন প্রতিক্রিয়া। পদ্ধতি. উপাদান. আবেদন।
পরোক্ষ (প্যাসিভ) হেমাগ্লুটিনেশন প্রতিক্রিয়া(আরএনজিএ, আরপিজিএ)অ্যান্টিজেন বা অ্যান্টিবডিগুলির সাথে তাদের পৃষ্ঠে শোষিত অ্যান্টিজেনগুলির সাথে এরিথ্রোসাইট (বা ল্যাটেক্স) ব্যবহারের উপর ভিত্তি করে, যার মিথস্ক্রিয়া রোগীদের রক্তের সিরামের অনুরূপ অ্যান্টিবডি বা অ্যান্টিজেনের সাথে এরিথ্রোসাইটগুলিকে একত্রিত করে এবং নীচের অংশে পড়ে যায়। একটি স্ক্যালপড পলল আকারে টেস্ট টিউব বা কোষ।
উপাদান. RNGA সঞ্চালনের জন্য, ভেড়া, ঘোড়া, খরগোশ, মুরগি, ইঁদুর, মানুষ এবং অন্যান্যদের থেকে এরিথ্রোসাইট ব্যবহার করা যেতে পারে, যা ফর্মালডিহাইড বা গ্লুটারালডিহাইড দিয়ে চিকিত্সা করে ভবিষ্যতে ব্যবহারের জন্য সংরক্ষণ করা হয়। এরিথ্রোসাইটের শোষণ ক্ষমতা বৃদ্ধি পায় যখন তাদের ট্যানিন বা ক্রোমিয়াম ক্লোরাইডের দ্রবণ দিয়ে চিকিত্সা করা হয়।
আরএনজিএ-তে অ্যান্টিজেনগুলি অণুজীবের পলিস্যাকারাইড অ্যান্টিজেন, ব্যাকটেরিয়া ভ্যাকসিনের নির্যাস, ভাইরাস এবং রিকেটসিয়ার অ্যান্টিজেন এবং সেইসাথে অন্যান্য পদার্থ হতে পারে।
উচ্চ রক্তচাপের দ্বারা সংবেদনশীল লোহিত রক্তকণিকাকে এরিথ্রোসাইট ডায়াগনস্টিকাম বলা হয়। এরিথ্রোসাইট ডায়াগনস্টিকামের প্রস্তুতির জন্য, ভেড়া এরিথ্রোসাইট, যার উচ্চ শোষণকারী কার্যকলাপ রয়েছে, প্রায়শই ব্যবহৃত হয়।
আবেদন. RNGA সংক্রামক রোগ নির্ণয় করতে, গর্ভাবস্থা প্রতিষ্ঠার সময় প্রস্রাবে গোনাডোট্রপিক হরমোন নির্ধারণ করতে, ওষুধ, হরমোন এবং অন্যান্য কিছু ক্ষেত্রে অতি সংবেদনশীলতা সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়।
পদ্ধতি. পরোক্ষ হেমাগ্লুটিনেশন পরীক্ষা (IRHA) এর সংবেদনশীলতা পরীক্ষার তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে উচ্চতর সংবেদনশীলতা এবং নির্দিষ্টতা রয়েছে। এটি অ্যান্টিজেনিক গঠন দ্বারা প্যাথোজেন সনাক্ত করতে বা ব্যাকটেরিয়াল পণ্যগুলি নির্দেশ করতে এবং সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয় - অধ্যয়ন করা প্যাথলজিক্যাল উপাদানের টক্সিন। তদনুসারে, স্ট্যান্ডার্ড (বাণিজ্যিক) এরিথ্রোসাইট অ্যান্টিবডি ডায়গনিস্টিক ব্যবহার করা হয়, ট্যানিনাইজড (ট্যানিন-চিকিত্সা) এরিথ্রোসাইটের পৃষ্ঠে নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডিগুলির শোষণের মাধ্যমে প্রাপ্ত। পরীক্ষার উপাদানের সিরিয়াল dilutions প্লাস্টিকের প্লেট কূপ প্রস্তুত করা হয়. তারপর প্রতিটি কূপে অ্যান্টিবডি-লোড লাল রক্তকণিকার 3% সাসপেনশনের সমান আয়তন যুক্ত করা হয়। যদি প্রয়োজন হয়, প্রতিক্রিয়াটি বিভিন্ন গোষ্ঠীর নির্দিষ্টতার অ্যান্টিবডিগুলির সাথে লোড এরিথ্রোসাইটগুলির সাথে কূপের কয়েকটি সারিতে সমান্তরালভাবে সঞ্চালিত হয়।
37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে 2 ঘন্টা ইনকিউবেশনের পরে, ফলাফলগুলি বিবেচনায় নেওয়া হয়, মূল্যায়ন করা হয় চেহারাএরিথ্রোসাইটের পলল (ঝাঁকুনি ছাড়া): একটি নেতিবাচক প্রতিক্রিয়ার সাথে, একটি পলল একটি কম্প্যাক্ট ডিস্ক বা রিংয়ের আকারে কূপের নীচে উপস্থিত হয়, একটি ইতিবাচক প্রতিক্রিয়া সহ - এরিথ্রোসাইটগুলির একটি বৈশিষ্ট্যযুক্ত লেসি পলল, অসম প্রান্ত সহ একটি পাতলা ফিল্ম .
Coombs পরীক্ষা হয় ক্লিনিকাল বিশ্লেষণরক্ত পরীক্ষা, যা রক্তে কিছু নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডি আছে কিনা তা সনাক্ত করার জন্য করা হয় যা অনিরাপদ হতে পারে। এই অ্যান্টিবডিগুলি লাল রক্ত কোষে লেগে থাকে এবং আক্রমণ করতে পারে রোগ প্রতিরোধক ব্যবস্থাপনা, সেইসাথে অন্যান্য উপায়ে ক্ষতির কারণ. চিকিৎসা পরিভাষায়, এই গবেষণাকে অ্যান্টিগ্লোবুলিন টেস্ট (AGT)ও বলা হয়।
Coombs নমুনা প্রকার
দুই ধরনের Coombs পরীক্ষা আছে - প্রত্যক্ষ এবং পরোক্ষ।
সরাসরি Coombs পরীক্ষা, ডাইরেক্ট (DAT) নামেও পরিচিত, স্বয়ংক্রিয় অ্যান্টিবডি সনাক্ত করে যা লাল রক্তকণিকার পৃষ্ঠের সাথে সংযুক্ত থাকে। এই অ্যান্টিবডিগুলি কখনও কখনও নির্দিষ্ট রোগের কারণে বা প্রোকেনামাইড, মেথাইলডোপা বা কুইনিডিনের মতো নির্দিষ্ট ওষুধ গ্রহণের কারণে শরীরে তৈরি হয়।
এই অ্যান্টিবডিগুলি বিপজ্জনক কারণ তারা কখনও কখনও লাল রক্তকণিকা ধ্বংস করে রক্তাল্পতা সৃষ্টি করে।
এই পরীক্ষা কখনও কখনও জন্ডিস বা রক্তাল্পতার কারণ নির্ণয়ের নির্দেশ দেওয়া হয়।
সাধারণত, Coombs প্রতিক্রিয়া নেতিবাচক হয়।
এর জন্য ইতিবাচক:
- হেমোলাইটিক রোগনবজাতক;
- অটোইমিউন হেমোলাইসিস;
- হেমোলিটিক ট্রান্সফিউশন প্রতিক্রিয়া;
- ড্রাগ-প্ররোচিত ইমিউন হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়া।
পরোক্ষ নমুনা coombs, নামেও পরিচিত, রক্তের সিরামে পাওয়া লোহিত রক্তকণিকার অ্যান্টিবডি সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয় (সিরাম হল রক্তের পরিষ্কার হলুদ তরল যা লোহিত রক্তকণিকা এবং জমাট বাদ দেওয়ার পর থেকে যায়)।
দাতার রক্ত প্রাপকের রক্তের সাথে মেলে কিনা তা নির্ধারণ করতে পরোক্ষ Coombs পরীক্ষা রক্ত সঞ্চালনের সময় ব্যবহৃত হয়। এটিকে একটি সামঞ্জস্য পরীক্ষা বলা হয় এবং এটি দাতার রক্তের প্রতিকূল প্রতিক্রিয়া প্রতিরোধ করতে সাহায্য করে। এই বিশ্লেষণগর্ভবতী মহিলাদের জন্যও সুপারিশ করা হয়। কিছু মহিলার IgG অ্যান্টিবডি থাকে, যা ভ্রূণের রক্তে প্লাসেন্টা অতিক্রম করতে পারে এবং নবজাতকের ক্ষতি করতে পারে, যার ফলে হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়া নামে পরিচিত একটি হেমোলাইটিক রোগ হয়।
পদ্ধতি
রক্ত একটি শিরা থেকে একটি সিরিঞ্জ ব্যবহার করে নেওয়া হয়, সাধারণত সঙ্গে পিছন দিকহাতের তালু বা কনুইয়ের দিকে। এর আগে, পাংচার সাইটটি পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে জীবাণুমুক্ত করা হয় এবং রক্ত পরীক্ষা করার পরে, পরিষ্কার গজ বা তুলো উল প্রয়োগ করা হয়।
ফলস্বরূপ রক্ত পরীক্ষাগারে বিশুদ্ধ করা হয় এবং লোহিত রক্তকণিকা আলাদা করা হয়। তারপর নমুনাটি পর্যায়ক্রমে বিভিন্ন সিরাম এবং কম্বস রিএজেন্ট ব্যবহার করে পরীক্ষা করা হয়, যা বিপরীত। যদি কোন জমাটবদ্ধতা না থাকে (লাল রক্ত কোষের জমাট বাঁধা), এর অর্থ একটি ইতিবাচক ফলাফল।
যাইহোক, যদি পরীক্ষা নেতিবাচক হয়, এর মানে হল রক্তে অ্যান্টিবডি রয়েছে যা লোহিত রক্তকণিকার বিরুদ্ধে কাজ করে। এটি নির্দেশ করতে পারে বিভিন্ন রোগ, যেমন রক্তাল্পতা (স্বাভাবিক এবং ওষুধ খাওয়ার কারণে উভয়ই), সিফিলিস বা মাইকোপ্লাজমা সংক্রমণ। ফলাফল প্রাপ্তির পরে, উপস্থিত চিকিত্সক উপযুক্ত চিকিত্সা নির্ধারণ করবেন।
ভিডিও
অ্যান্টিগ্লোবুলিন নীতি. এরিথ্রোসাইটের পৃষ্ঠে অবস্থিত অসম্পূর্ণ ধরনের এবং পরিপূরক অণুগুলির (C) অ্যান্টি-এরিথ্রোসাইট অ্যান্টিবডিগুলি সনাক্ত করা হয় - একটি সরাসরি পরীক্ষা - মানব অ্যান্টিগ্লোবুলিন (অ্যান্টিগ্লোবুলিন সিরাম) এর অ্যান্টিবডি ধারণকারী প্রাণীর সিরামের সংস্পর্শে তাদের সংযোজন দ্বারা। সিরামে বিনামূল্যে অসম্পূর্ণ অ্যান্টিবডিসনাক্ত করা হয় - একটি পরোক্ষ পরীক্ষা - এগুলিকে গ্রুপ 0-এর সাধারণ এরিথ্রোসাইটের মিশ্রণে সংযুক্ত করে, যার সমস্ত অ্যান্টিজেন পরিচিত আরএইচ সিস্টেমের অন্তর্গত, এবং তারপরে অ্যান্টিগ্লোবুলিন সিরামের প্রভাবে একত্রিত হয়।
উপাদান, Coombs antiglobulin পরীক্ষার জন্য reagents: টেস্ট টিউব 10/100 মিলি; স্নাতক পাইপেটস 1, 2 মিলি; পাস্তুর পাইপেটস; tripods; আন্ডারগ্রাউন্ড গ্লাস স্লাইড; 8.5‰ NaCl সমাধান; লোহিত রক্ত কণিকা. রোগীর লোহিত রক্ত কণিকা, সেইসাথে গ্রুপ 0 এর অন্তর্গত, একটি অ্যান্টি-ক্লটিং এজেন্ট (EDTA সলিউশন) ব্যবহার করে তাজা টানা রক্ত থেকে প্রাপ্ত করা হবে।
গ্রুপ 0 লোহিত রক্তকণিকা এমনভাবে নির্বাচন করা উচিত যাতে তারা সাধারণ ব্যক্তিদের থেকে আসে এবং সমস্ত ধারণ করে আরএইচ অ্যান্টিজেন. এগুলি অটোলোগাস প্লাজমাতে + 4°C তাপমাত্রায় 7 দিন পর্যন্ত সংরক্ষণ করা যেতে পারে। গ্রুপ 0 লোহিত রক্তকণিকার অনুপস্থিতিতে, একটি পরিচিত অ্যান্টিজেনিক মোজাইক, গ্রুপ 0 লোহিত রক্তকণিকার মিশ্রণ, আরএইচ-পজিটিভ এবং আরএইচ-নেগেটিভ লোহিত রক্তকণিকা ব্যবহার করা যেতে পারে।
সিরামরোগীকে নতুনভাবে নির্বাচন করতে হবে।
অ্যান্টিগ্লোবুলিন সিরামইনস্টিটিউট দ্বারা উত্পাদিত। ডাঃ আই. ক্যান্টাকুজিনো, 1 মিলি অ্যাম্পুলে লাইওফিলাইজড আকারে পাওয়া যায়। দ্রবীভূত করার পরে, সিরাম -20 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সংরক্ষণ করুন।
Coombs antiglobulin পরীক্ষা কৌশল:
ক) সরাসরি Coombs পরীক্ষা: 8.5‰ NaCl দ্রবণ দিয়ে রোগীর লোহিত রক্তকণিকা 3 বার ধুয়ে ফেলুন।
বেশ কয়েকটি কাচের স্লাইডে অ্যান্টিগ্লোবুলিন সিরামের একটি বড় ড্রপ এবং এর পাশে, রোগীর এরিথ্রোসাইট পলির একটি ছোট ফোঁটা প্রয়োগ করুন; কাচের কোণে ফোঁটা মিশ্রিত করুন। প্রস্তুত উপাদানটি 5 মিনিটের জন্য টেবিলে রেখে দিন, তারপরে অ্যাগ্লুটিনেটসের উপস্থিতি পরীক্ষা করুন। কখন ইতিবাচক ফলাফলসর্বোচ্চ অ্যাগ্লুটিনেটিং টাইটার নির্ধারণ করুন।
খ) পরোক্ষ Coombs পরীক্ষা: গ্রুপ 0 এর এরিথ্রোসাইট, আরএইচ-পজিটিভ এবং আরএইচ-নেগেটিভ, 8.5‰ NaCl দ্রবণ দিয়ে 3 বার ধুয়ে ফেলুন এবং সিরামের প্রতি 8-10 ফোঁটা এরিথ্রোসাইটের 2 ফোঁটা হারে রোগীর সিরামে প্রকাশ করুন, তারপরে 60 মিনিটের জন্য ইনকিউবেট করুন। সঙ্গে 37° তাপমাত্রা। এর পরে, লোহিত রক্তকণিকাগুলিকে আবার তিনবার ধুয়ে ফেলুন এবং সরাসরি Coombs পরীক্ষার নির্দেশাবলী অনুসারে অ্যান্টিগ্লোবুলিন সিরাম দিয়ে চিকিত্সা করুন।
যখন এটি আসে ঠান্ডা সক্রিয় অ্যান্টিবডি সম্পর্কে 60 মিনিটের জন্য গ্রুপ 0 লোহিত রক্তকণিকা সংবেদনশীল করুন। + 4 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায়।
বিঃদ্রঃ 1) + 4 ডিগ্রি সেলসিয়াস বা ঘরের তাপমাত্রায় এক বা কয়েক দিনের জন্য সঞ্চিত লোহিত রক্তকণিকার উপর সরাসরি Coombs পরীক্ষা করবেন না, কারণ সাধারণ সিরামে উপস্থিত অসম্পূর্ণ ঠান্ডা-সক্রিয় অ্যান্টিবডিগুলির স্থিরকরণের কারণে ফলাফলগুলি মিথ্যা ইতিবাচক হতে পারে। 2) গুরুতর হাইপারপ্রোটিনেমিয়ার ক্ষেত্রে, লোহিত রক্তকণিকা 4-5 বার ধুয়ে ফেলুন এবং সালফোসালিসিলিক অ্যাসিড ব্যবহার করে শেষ ওয়াশিং তরলে সিরাম প্রোটিনের অনুপস্থিতি পরীক্ষা করুন।
এরিথ্রোসাইট পলিতে 2 μg IgG/ml এর সম্ভাব্য অবশিষ্টাংশ হতে পারে অ্যান্টিগ্লোবুলিন সিরাম নিরপেক্ষ করুন. লোহিত রক্তকণিকার পৃষ্ঠে অবস্থিত কোষের ধরন স্পষ্ট করার জন্য মনোস্পেসিফিক অ্যান্টি-আইজিজি, -আইজিএম, -আইজিএ -সি 3 এবং -সি 4 সেরা ব্যবহার করেও Coombs পরীক্ষা করা যেতে পারে, উদাহরণস্বরূপ, অটোইমিউন হেমোলাইটিক রোগীদের ক্ষেত্রে রক্তাল্পতা
পাইপেট ব্যবহার করে একটি প্লেট বা গ্লাস স্লাইডে সিরাম O(I), A(II), B(III) এর 1 বড় ফোঁটা প্রয়োগ করুন (ভিন্ন!)। সময়টি লক্ষ্য করার পরে, রক্তের ফোঁটাগুলির সাথে সিরামের ফোঁটা একত্রিত করতে একটি পরিষ্কার কাচের রড বা একটি গ্লাস স্লাইডের একটি পরিষ্কার কোণ ব্যবহার করুন। সংকল্পটি 5 মিনিট স্থায়ী হয়, প্লেটটি ঝাঁকান, তারপর ড্রপের প্রতিটি মিশ্রণে 1 ড্রপ স্যালাইন দ্রবণ যোগ করুন এবং ফলাফলগুলি মূল্যায়ন করুন। ভালো হয় যদি সিরামটি 2টি ভিন্ন সিরিজে আসে। রক্তের গ্রুপের ফলাফল অবশ্যই উভয় সিরাম লটে মিলতে হবে।
আইসোহেম্যাগ্লুটিনেশন ফলাফলের মূল্যায়ন:
যদি 3টি সেরা একটি নেতিবাচক প্রতিক্রিয়া দেয়, অর্থাৎ, মিশ্রণটি সমানভাবে গোলাপী রঙের হয় - এটি O(I) রক্তের গ্রুপ;
যদি নেতিবাচক প্রতিক্রিয়াশুধুমাত্র A(II) গ্রুপের সিরাম দিয়েছে, এবং সেরা O(I) এবং B(III) একটি ইতিবাচক প্রতিক্রিয়া দিয়েছে, অর্থাৎ, দানা দেখা দিয়েছে - এটি A(II) রক্তের গ্রুপ;
গ্রুপ B(II) এর সিরাম একটি নেতিবাচক প্রতিক্রিয়া দিয়েছে, এবং গ্রুপ O(I) এবং A(II) এর সেরা একটি ইতিবাচক প্রতিক্রিয়া দিয়েছে - এটি B(III) রক্তের গ্রুপ।
আইসোহেম্যাগ্লুটিনেশন প্রতিক্রিয়া ইতিবাচক হলে, আঠালো লাল রক্ত কোষের ক্ষুদ্র লাল দানা মিশ্রণে উপস্থিত হয়। দানাগুলো মিশে যায় বড় দানায়, আর পরেরটা ফ্লেক্সে পরিণত হয়। সিরাম প্রায় বিবর্ণ হয়;
প্রতিক্রিয়া নেতিবাচক হলে, মিশ্রণটি 5 মিনিটের জন্য সমানভাবে রঙিন থাকে গোলাপী রংএবং কোন শস্য পাওয়া যায় না;
O(I), A(II), B(III) গ্রুপের 3টি সেরার সাথে কাজ করার সময়, 4 টি প্রতিক্রিয়ার সংমিশ্রণ সম্ভব:
সব 3 serums দিয়েছেন ইতিবাচক প্রতিক্রিয়া- AB(IV) গ্রুপের রক্ত পরীক্ষা করুন। এই ক্ষেত্রে, AB(IV) গ্রুপ সিরাম দিয়ে একটি গবেষণা করা হয়।
বিঃদ্রঃ!পরীক্ষা করা রক্তের ফোঁটা সিরামের ফোঁটার চেয়ে 5-10 গুণ ছোট হওয়া উচিত।
আইসোহেম্যাগ্লুটিনেশন ত্রুটি।
যেখানে থাকা উচিত সেখানে অ্যাগ্লুটিনেশন সঞ্চালনে ব্যর্থতা এবং যেখানে থাকা উচিত নয় সেখানে অ্যাগ্লুটিনেশনের উপস্থিতি। এটি একটি দুর্বল সিরাম টাইটার এবং দুর্বল লোহিত রক্তকণিকা সংযোজনের কারণে হতে পারে।
একত্রিতকরণের উপস্থিতি যেখানে কোনও থাকা উচিত নয়- এটি সিউডোঅ্যাগ্লুটিনেশন, যখন লোহিত রক্তকণিকার স্তূপ "মুদ্রা কলাম" গঠন করে। প্লেট ঝাঁকান বা স্যালাইন যোগ করা তাদের ধ্বংস করে।
প্যানাগ্লুটিনেশন, যখন সিরাম সমস্ত লোহিত রক্তকণিকাকে একত্রিত করে, যার মধ্যে নিজস্ব রক্তের গ্রুপও রয়েছে। 5 তম মিনিটের মধ্যে, সমষ্টির লক্ষণগুলি অদৃশ্য হয়ে যায়।
কথিত কোল্ড প্যানাগ্লুটিনেশনও আছে, যখন লোহিত রক্তকণিকাগুলো রুমে বাতাসের কম তাপমাত্রার (১৫ ডিগ্রি সেলসিয়াসের নিচে) কারণে একসাথে লেগে থাকে।
এই সমস্ত ক্ষেত্রে, হয় একটি পুনরাবৃত্তি প্রতিক্রিয়া বাহিত হয়, অথবা আদর্শ লোহিত রক্তকণিকা ব্যবহার করে।
আরএইচ রক্তের নির্ণয়
আরএইচ স্ট্যাটাস নির্ধারণ করতে, অর্থাৎ, মানুষের রক্তে আরএইচ সিস্টেম অ্যান্টিজেনের উপস্থিতি বা অনুপস্থিতি সনাক্ত করতে, স্ট্যান্ডার্ড অ্যান্টি-আরএইচ সেরা (রিএজেন্ট) ব্যবহার করা হয়, নির্দিষ্টতার মধ্যে ভিন্ন, অর্থাৎ, এই সিস্টেমের বিভিন্ন অ্যান্টিজেনের অ্যান্টিবডি রয়েছে। Rh 0 (D) অ্যান্টিজেন নির্ধারণ করতে, অ্যান্টি-রিসাস সিরাম প্রায়শই 10% জেলটিন দ্রবণ যোগ করার সাথে ব্যবহৃত হয়, বা 33% পলিগ্লুসিন দ্রবণের সাথে আগে থেকে প্রস্তুত একটি স্ট্যান্ডার্ড অ্যান্টি-রিসাস বিকারক ব্যবহার করা হয়। আরও সঠিক গবেষণা ফলাফল পেতে, সেইসাথে অন্যান্য সেরোলজিক্যাল সিস্টেমের অ্যান্টিজেন সনাক্ত করতে, Coombs পরীক্ষা ব্যবহার করা হয় (এটি ট্রান্সফিউজড রক্তের সামঞ্জস্য নির্ধারণের ক্ষেত্রেও খুব সংবেদনশীল)। গবেষণার জন্য, কিছু প্রিজারভেটিভ দিয়ে তৈরি দেশীয় রক্ত বা রক্ত ব্যবহার করা হয়। এই ক্ষেত্রে, আইসোটোনিক সোডিয়াম ক্লোরাইড দ্রবণের দশগুণ পরিমাণে প্রিজারভেটিভ থেকে রক্ত ধুয়ে ফেলতে হবে। Rh অবস্থা নির্ধারণ করার সময়- Rh 0 (D) দুটি ভিন্ন সিরিজের সিরাম বা অ্যান্টি-রিসাস রিএজেন্টের দুটি নমুনা ব্যবহার করা উচিত এবং একই সময়ে Rh-পজিটিভ (Rh +) এবং Rh-নেগেটিভ (Rh -) থেকে রক্ত থেকে প্রাপ্ত স্ট্যান্ডার্ড লোহিত রক্তকণিকা ব্যবহার করা উচিত। নিয়ন্ত্রণের জন্য ব্যক্তিদের ব্যবহার করা উচিত। অন্যান্য আইসোঅ্যান্টিজেনগুলি নির্ধারণ করার সময়, লোহিত রক্তকণিকা নিয়ন্ত্রণ করুন যেগুলিতে অ্যান্টিজেন থাকে বা নেই যার বিরুদ্ধে স্ট্যান্ডার্ড সিরামের অ্যান্টিবডিগুলি নির্দেশিত হয় সেই অনুযায়ী ব্যবহার করা উচিত।
আংশিক তাপ অ্যাগ্লুটিনিন হল সবচেয়ে সাধারণ ধরনের অ্যান্টিবডি যা অটোইমিউন হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়ার বিকাশ ঘটাতে পারে। এই অ্যান্টিবডিগুলি IgG-এর অন্তর্গত, খুব কমই IgM, IgA-এর।
COOMBS পরীক্ষা
Coombs পরীক্ষা: ভূমিকা. Coombs পরীক্ষা হল একটি ল্যাবরেটরি ডায়গনিস্টিক পদ্ধতি যা হেমাগ্লুটিনেশন প্রতিক্রিয়ার উপর ভিত্তি করে।
অটোইমিউন হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়া নির্ণয়ের প্রধান পদ্ধতি হল Coombs পরীক্ষা। এটি ইমিউনোগ্লোবুলিন (বিশেষত আইজিজি) বা পরিপূরক উপাদানের (বিশেষত এস৩) জন্য নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডিগুলির আইজিজি বা এস৩-এর সাথে প্রলিপ্ত এরিথ্রোসাইটগুলিকে একত্রিত করার ক্ষমতার উপর ভিত্তি করে।
এরিথ্রোসাইটের সাথে IgG এবং C3b এর আবদ্ধতা অটোইমিউন হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়া এবং ড্রাগ-প্ররোচিত ইমিউন হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়াতে পরিলক্ষিত হয়। সরাসরি Coombs পরীক্ষা।সরাসরি Coombs পরীক্ষাটি লোহিত রক্তকণিকার পৃষ্ঠে স্থির অ্যান্টিবডি বা পরিপূরক উপাদান সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়। এটি নিম্নরূপ সঞ্চালিত হয়:
হিউম্যান ইমিউনোগ্লোবুলিন (অ্যান্টিগ্লোবুলিন সিরাম) বা পরিপূরক (অ্যান্টি কমপ্লিমেন্টারি সিরাম) থেকে অ্যান্টিবডি পাওয়ার জন্য, প্রাণীকে মানব সিরাম, ইমিউনোগ্লোবুলিন বা মানুষের পরিপূরক দিয়ে টিকা দেওয়া হয়। প্রাণী থেকে প্রাপ্ত সিরাম অ্যান্টিবডি থেকে অন্যান্য প্রোটিনে বিশুদ্ধ হয়।
সিরাম সম্পূর্ণরূপে অপসারণের জন্য রোগীর লাল রক্তকণিকা স্যালাইন দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়, যা ইমিউনোগ্লোবুলিন এবং পরিপূরক অ্যান্টিবডিগুলিকে নিরপেক্ষ করে এবং একটি মিথ্যা নেতিবাচক ফলাফলের কারণ হতে পারে।
যদি অ্যান্টিবডি বা পরিপূরক উপাদানগুলি লোহিত রক্তকণিকার পৃষ্ঠে স্থির থাকে, তবে অ্যান্টিগ্লোবুলিন বা অ্যান্টি-কপ্লিমেন্ট সিরাম যোগ করলে লোহিত রক্তকণিকার সংযোজন ঘটে।
সরাসরি Coombs পরীক্ষা নিম্নলিখিত ক্ষেত্রে ব্যবহৃত হয়:
অটোইমিউন হেমোলাইসিস।
নবজাতকের হেমোলাইটিক রোগ।
ড্রাগ-প্ররোচিত ইমিউন হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়া।
হেমোলিটিক ট্রান্সফিউশন প্রতিক্রিয়া। পরোক্ষ Coombs পরীক্ষা.পরোক্ষ Coombs পরীক্ষা সিরামের লাল রক্ত কোষের অ্যান্টিবডি সনাক্ত করে। এটি করার জন্য, রোগীর সিরাম গ্রুপ 0 দাতা লাল রক্ত কোষের সাথে incubated হয়, এবং তারপর একটি সরাসরি Coombs পরীক্ষা সঞ্চালিত হয়।
পরোক্ষ Coombs পরীক্ষা নিম্নলিখিত ক্ষেত্রে ব্যবহৃত হয়:
দাতা এবং গ্রহীতার রক্তের স্বতন্ত্র সামঞ্জস্য নির্ধারণ।
অ্যালোঅ্যান্টিবডি সনাক্তকরণ, অ্যান্টিবডিগুলি সহ যা হেমোলাইটিক ট্রান্সফিউশন প্রতিক্রিয়া সৃষ্টি করে।
চিকিৎসা জেনেটিক্স এবং ফরেনসিক ওষুধে পৃষ্ঠের এরিথ্রোসাইট অ্যান্টিজেন নির্ধারণ।
অস্থি মজ্জা প্রতিস্থাপনের সময় অভিন্ন যমজ সন্তানের নিশ্চিতকরণ।
একটি জৈবিক পরীক্ষা পরিচালনা করার জন্য, রক্ত যত তাড়াতাড়ি সম্ভব স্থানান্তরিত হতে শুরু করে (বিশেষত একটি স্রোতে)। 25 মিলি রক্ত সঞ্চালনের পরে, সিস্টেম টিউবটি একটি ক্ল্যাম্প দিয়ে আটকানো হয়। তারপরে 3 মিনিটের জন্য একটি বিরতি রয়েছে, যার সময় প্রাপকের অবস্থা পর্যবেক্ষণ করা হয়। একটি জৈবিক পরীক্ষা করার জন্য, 25 মিলি রক্ত তিনবার ইনজেকশন করা হয়।পরীক্ষার শেষে (3 মিনিটের ব্যবধানে 25 মিলি ভগ্নাংশে প্রথম 75 মিলি রক্তের ট্রান্সফিউশনের পরে), সিস্টেমটি প্রয়োজনীয় স্থানান্তর হারের সাথে সামঞ্জস্য করা হয়। একজন রোগীকে এক বোতলের বেশি রক্ত দেওয়ার সময়, শিরা থেকে সুচ অপসারণ করা প্রয়োজন। এই ক্ষেত্রে, যে শিশির রক্ত ফুরিয়ে গেছে তার টেস্টটিউব থেকে সুচটি সরিয়ে পরবর্তী শিশিতে ঢোকানো হয়। সিস্টেম টিউব (রাবার বা প্লাস্টিক) এই মুহূর্তে একটি বাতা সঙ্গে clamped হয়। যদি রক্ত সঞ্চালনের সময় প্রাপককে শিরায় অন্য কোনও ওষুধ দেওয়ার প্রয়োজন হয়, তবে এটি সিস্টেমের রাবার টিউব ছিদ্র করে করা হয়। প্লাস্টিকের টিউবের পাংচারগুলি অগ্রহণযোগ্য, কারণ সেগুলি পড়ে না। প্রতিটি রক্ত সঞ্চালনের পরে, রোগীকে সনাক্ত করতে এবং অবিলম্বে নির্মূল করার জন্য অবশ্যই পর্যবেক্ষণ করতে হবে সম্ভাব্য জটিলতা, সহ এলার্জি প্রতিক্রিয়া. রক্ত সঞ্চালন শেষ হওয়ার 2 ঘন্টা পরে, শরীরের তাপমাত্রা পরিমাপ করা উচিত। যদি এটি বৃদ্ধি পায়, পরিমাপটি অবশ্যই পরবর্তী 4 ঘন্টার জন্য প্রতি ঘন্টায় পুনরাবৃত্তি করতে হবে। সমানভাবে গুরুত্বপূর্ণ হল প্রস্রাব এবং প্রস্রাবের গঠন পর্যবেক্ষণ করা, যা একটি বিষাক্ত পোস্ট-ট্রান্সফিউশন প্রতিক্রিয়ার উপস্থিতি স্থাপন করা সম্ভব করে তোলে। রক্ত সঞ্চালনের পরে অলিগুরিয়া এবং অ্যানুরিয়ার সূত্রপাত, প্রস্রাবে রক্তকণিকা এবং প্রোটিনের উপস্থিতি পোস্ট-ট্রান্সফিউশন হেমোলাইসিসের বিকাশের সরাসরি ইঙ্গিত।
সরাসরি Coombs পরীক্ষা. এই পরীক্ষাটি শিশুর লাল রক্ত কণিকায় স্থির ব্লকিং অ্যান্টিবডির উপস্থিতি প্রমাণ করতে ব্যবহৃত হয়। একটি ইতিবাচক প্রত্যক্ষ পরীক্ষা সংবেদনশীলতা নির্দেশ করে এবং নবজাতকের হেমোলাইটিক রোগের একটি নিশ্চিত লক্ষণ হিসাবে কাজ করে ক্লিনিকাল লক্ষণ. একটি ব্যতিক্রম হিসাবে এবং শুধুমাত্র খুব গুরুতর ক্ষেত্রে, একটি সরাসরি Coombs পরীক্ষা নেতিবাচক হতে পারে কারণ ইতিমধ্যেই সংবেদনশীল লোহিত রক্তকণিকার প্রায় সম্পূর্ণ হিমোলাইসিস ঘটেছে।
একটি সরাসরি Coombs পরীক্ষা নিম্নরূপ সঞ্চালিত হয়: শিশুর গোড়ালি থেকে নেওয়া রক্তের 5 ফোঁটা একটি টেস্ট টিউবে স্থাপন করা হয় এবং 5 মিলি স্যালাইন যোগ করা হয়। ভালভাবে নাড়ুন এবং 10 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করুন। লোহিত রক্তকণিকার পলির উপরে থাকা স্বচ্ছ তরল আলাদা হয়ে যায়। তারপর আবার 5 মিলি স্যালাইন যোগ করুন, মিশ্রিত করুন এবং সেন্ট্রিফিউজ করুন। স্যালাইনের সাথে তিনবার মেশালে রক্তের লোহিত কণিকা ভালোভাবে ধুয়ে যায়। সুপারনাট্যান্টের শেষ বিচ্ছেদের পরে, 0.1 মিলি পরিমাণে এরিথ্রোসাইট পলিকে 0.9 মিলি শারীরবৃত্তীয় দ্রবণের সাথে মিশ্রিত করা হয়। এই মিশ্রণের 2-3 ফোঁটা কাচের স্লাইডে লাগান এবং এক ফোঁটা কম্বস সিরাম যোগ করুন। সমষ্টির উপস্থিতি নির্দেশ করে যে প্রতিক্রিয়াটি ইতিবাচক (ইতিবাচক সরাসরি Coombs পরীক্ষা)। ঠান্ডা অ্যাগ্লুটিনিনের প্রভাব এড়াতে অধ্যয়নটি 16° এর উপরে ঘরের তাপমাত্রায় করা উচিত।
পরোক্ষ Coombs পরীক্ষামাতৃ সিরামে বিনামূল্যে অ্যান্টিবডি উপস্থিতির প্রমাণ হিসাবে কাজ করে এবং মাতৃ সিরামের সাথে সঞ্চালিত হয়।
Rh অসঙ্গতি সহ নবজাতকের হেমোলিটিক রোগ সাধারণত দ্বিতীয় গর্ভাবস্থার পরে নিজেকে প্রকাশ করে। প্রথম সন্তান সুস্থভাবে জন্মগ্রহণ করে, দ্বিতীয়টি হালকা রক্তাল্পতার লক্ষণ নিয়ে এবং তৃতীয় গর্ভধারণের পরই শিশুরা জন্মগ্রহণ করে। স্পষ্ট লক্ষণহেমোলাইটিক রোগ। শুধুমাত্র পূর্ব সংবেদনশীল মহিলারা তাদের প্রথম গর্ভাবস্থায় হেমোলাইটিক রোগের উপসর্গ সহ একটি শিশুর জন্ম দিতে পারেন। কিছু ক্ষেত্রে, টিকাদান গর্ভপাত এবং জন্মের কারণ মৃত শিশু. রোগের সূচনা এবং তীব্রতার জন্য, প্ল্যাসেন্টার অবস্থা এবং ভ্রূণে মাতৃ অ্যাগ্লুটিনিনগুলির প্রকাশের সময়কাল গুরুত্বপূর্ণ। যখন অ্যাগ্লুটিনিন জন্মের 10-14 সপ্তাহ আগে উপস্থিত হয়, তখন শিশু সাধারণত সাবক্লিনিকাল ফর্মগুলি অনুভব করে। জন্মের 15-26 সপ্তাহ আগে অ্যাগ্লুটিনিনগুলির প্রাথমিক চেহারা দেখা দেয় গুরুতর ফর্মরোগ রোগের সব ধরনের ক্ষেত্রে, প্রধান প্রক্রিয়া হল হেমোলাইসিস। অ্যান্টিজেন-অ্যান্টিবডি প্রতিক্রিয়ার পরিণতি হল হেমোলাইসিস, লিভার এবং মস্তিষ্কের কৈশিকগুলির ক্ষতি। কোন ক্ষত প্রাধান্য উপর নির্ভর করে, এছাড়াও আছে বিভিন্ন আকাররোগ কিছু অ্যানাফিল্যাকটিক ঘটনাও বিপজ্জনক। এগুলি হিস্টামিন জাতীয় পদার্থের গঠনের দিকে পরিচালিত করে, যা লিভারের কোষগুলির এবং বিশেষত বেসাল গ্যাংলিয়া, কর্নু অ্যামনের গ্যাংলিওন কোষগুলির মারাত্মক ক্ষতি করে। medulla oblongataএমনকি সেরিব্রাল কর্টেক্স। যখন যকৃতের কোষ ক্ষতিগ্রস্ত হয়, তখন হেপাটিক জন্ডিস এক্সট্রাহেপ্যাটিক জন্ডিসে যোগ হয়। কার্নিক্টেরাসের গুরুতর উপসর্গের কারণে শিশুরা মারা যায়। যদি তারা বেঁচে থাকে তবে ক্ষতের লক্ষণগুলি থেকে যায় স্নায়ুতন্ত্র(কোরিওথেটোটিক নড়াচড়া সহ এক্সট্রাপিরামিডাল সিস্টেমের ব্যাধি, একটি অদ্ভুত নাচের গতি, জোরপূর্বক মাথা নড়াচড়া, কখনও কখনও সমন্বয় ব্যাধি স্বেচ্ছাসেবী আন্দোলনঘন ঘন পতনের সাথে, বর্ধিত স্বনপেশী, মানসিক প্রতিবন্ধকতা, অর্থাৎ তথাকথিত লক্ষণ সহ। এনসেফালোপ্যাথিয়া পোস্টিকটেরিয়া ইনফ্যান্টাম)।
