Coombs বিক্রিয়া প্রত্যক্ষ এবং পরোক্ষ। নবজাতকের হেমোলাইটিক রোগ নির্ণয়ের জন্য কম্বস পরীক্ষা

Coombs পরীক্ষা একটি পদ্ধতি পরীক্ষাগার গবেষণা, হেমাগ্লুটিনেশনকে প্রভাবিত করে তৈরি। এটি ইমিউনোগ্লোবুলিন এবং এনজাইম উপাদানগুলির প্রতি অ্যান্টিবডিগুলির সংবেদনশীলতার পাশাপাশি C3 বা এলজি দিয়ে প্রলিপ্ত এরিথ্রোসাইটগুলিকে একত্রিত করার ক্ষমতার উপর ভিত্তি করে।

সরাসরি Coombs রোগ নির্ণয়

কোষের বাইরে ইনস্টল করা অ্যান্টিবডি বা পরিপূরক উপাদান সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়। সরাসরি Coombs পরীক্ষা নিম্নরূপ সঞ্চালিত হয়.

যেমন একটি নমুনা ব্যবহার

সরাসরি Coombs নির্ণয় কিছু ক্ষেত্রে ব্যবহৃত হয়, যেমন:

• স্থানান্তর প্রভাব;
• অটোইমিউন হেমোলাইসিস;
• ঔষধি হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়া.

পরোক্ষ Coombs পরীক্ষা

এই নির্ণয়ের ফলে সিরামের কোষগুলিতে অ্যান্টিবডি সনাক্ত করা সম্ভব হয়, যা একটি নিয়ম হিসাবে, টাইপ 0 এর দাতার লাল রক্ত ​​​​কোষের সাথে ইনকিউব করা হয় এবং তারপরে একটি সরাসরি পরীক্ষা করা হয়। আবেদন করুন পরোক্ষ রোগ নির্ণয়নিম্নলিখিত ক্ষেত্রে coombs:

বিশ্লেষণের জন্য কীভাবে প্রস্তুতি নেবেন

পরীক্ষার প্রস্তুতির কিছু নিয়ম আছে।

1. রোগী যদি নবজাতক হয়, তাহলে বাবা-মাকে সচেতন হতে হবে যে পরীক্ষাটি নবজাতকের হেমোলাইটিক রোগ নির্ণয় করতে সাহায্য করবে।
2. যদি রোগীর হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়ার সন্দেহ থাকে তবে তাকে ব্যাখ্যা করা উচিত যে বিশ্লেষণ তাকে এটি প্রতিরক্ষামূলক ব্যাধি, ওষুধ বা অন্যান্য কারণের কারণে সৃষ্ট কিনা তা খুঁজে বের করার অনুমতি দেবে।
3. Coombs পরীক্ষা, প্রত্যক্ষ এবং পরোক্ষ, পুষ্টি বা খাদ্যের উপর কোন সীমাবদ্ধতা তৈরি করে না।
4. রোগীকে জানাতে হবে যে পরীক্ষার জন্য শিরা থেকে রক্ত ​​নেওয়ার প্রয়োজন হবে এবং তাকে ঠিক কখন ভেনিপাংচার করা হবে তাও বলুন।
5. আপনি সম্ভাবনা সম্পর্কে সতর্ক করা উচিত অস্বস্তিবাহুতে ব্যান্ডেজ লাগানোর সময় এবং পদ্ধতি নিজেই।
6. নমুনা ফলাফলকে প্রভাবিত করতে পারে এমন ওষুধগুলি বন্ধ করা উচিত।

এই ওষুধগুলির মধ্যে রয়েছে:

• "স্ট্রেপ্টোমাইসিন";
• "মিথাইলডোপা";
• "প্রোকেনামাইড";
• সালফোনামাইডস;
• "মেলফালান";
• "কুইনিডিন";
• "রিফাম্পিন";
• "আইসোনিয়াজিড";
• সেফালোস্পোরিন;
• "হাইড্রালাজিন";
• "ক্লোরপ্রোমাজিন";
• "লেভোডোপা";
• "টেট্রাসাইক্লিন";
• "ডিফেনাইলহাইড্যান্টোইন";
• "Ethosuximide";
• "পেনিসিলিন";
• মেফেনামিক এসিড.

সকালে খালি পেটে রক্তের নমুনা নেওয়া হয়।

কিভাবে অনুষ্ঠানটি অনুষ্ঠিত হয়

Coombs পরীক্ষা নিম্নলিখিত ক্রমে সঞ্চালিত হয়:

1. একজন প্রাপ্তবয়স্ক রোগীর ডায়াগনস্টিক করার সময়, ভেনিপাংচারের পরে, রক্ত ​​EDTA (ethylenediaminetetraacetate) সহ টিউবে নেওয়া হয়।
2. নবজাতকের রক্ত ​​নাভি থেকে EDTA ধারণকারী একটি বীকারে টানা হয়।
3. রক্তপাত বন্ধ না হওয়া পর্যন্ত পাংচার এলাকাটি একটি তুলো দিয়ে চাপা হয়।
4. ভেনিপাংচার সাইটে যদি ক্ষত দেখা দেয় তবে উষ্ণ কম্প্রেসগুলি নির্ধারিত হয়।
5. রক্ত সংগ্রহের পরে, রোগীকে ওষুধ সেবনে ফিরে যেতে দেওয়া হয়।
6. নবজাতকের পিতামাতাকে জানাতে হবে যে রক্তাল্পতার গতিশীলতা নিরীক্ষণের জন্য সেকেন্ডারি বিশ্লেষণের প্রয়োজন হতে পারে।

Coombs পরীক্ষার সুবিধা

এই ধরনের গবেষণার কিছু সুবিধা রয়েছে, যথা:

বিশ্লেষণের অসুবিধা

ইতিবাচক Coombs পরীক্ষা একটি বরং শ্রম-নিবিড় পরীক্ষা পদ্ধতি, যা সম্পাদনের একটি চরিত্রগত নির্ভুলতা প্রয়োজন। এটি ব্যবহার করার সময়, আপনি কিছু অসুবিধার সম্মুখীন হতে পারেন, বিশেষত দুর্বল ইতিবাচক প্রভাবগুলির ব্যাখ্যার সাথে সম্পর্কিত।

এটি প্রতিষ্ঠিত হয়েছে যে Coombs পরীক্ষার উত্পাদনের সময় ভুল নেতিবাচক বা দুর্বল ইতিবাচক প্রতিক্রিয়াগুলি অসন্তুষ্টভাবে সক্রিয় কোষ ধোয়ার পরিণতি হতে পারে, সিরামের অবশিষ্টাংশগুলির দ্বারা অ্যান্টিগ্লোবুলিন বিকারককে দুর্বল করে, সেইসাথে অ-চর্বিযুক্ত পৃষ্ঠের সাথে সংযোগ, যার উপর অ্যান্টিগ্লোবুলিন হতে পারে। স্থির করা, যার ফলে এর কার্যকারিতা হারাবে।

Coombs পরীক্ষার আরেকটি ত্রুটি রয়েছে - অ্যান্টিগ্লোবুলিন রিএজেন্টের কম স্থিতিশীলতা, যার অধিগ্রহণ এবং সঞ্চয় স্বতন্ত্র বৈশিষ্ট্য, যা একইভাবে হিমাগ্লুটিনেশনের উপর অ্যান্টিগ্লোবুলিন সিরামের প্রভাবকে সংখ্যাগতভাবে মূল্যায়ন করা কঠিন করে তোলে।

গবেষণার সময় যে রোগগুলি সনাক্ত করা যায়

Coombs ডায়াগনস্টিকগুলি নির্দিষ্ট ধরণের রোগ সনাক্ত করা সম্ভব করে, যেমন:

• নবজাতকের হেমোলিটিক অসুস্থতা;
• বিভিন্ন স্থানান্তর প্রতিক্রিয়া;
• অটোইমিউন হেমোলাইসিস;
• ড্রাগ-প্ররোচিত হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়া।

আজ, Coombs পরীক্ষা প্রাপ্তবয়স্ক এবং নবজাতক উভয়ের জন্য একটি মোটামুটি জনপ্রিয় রক্ত ​​​​পরীক্ষা ব্যবস্থা হিসাবে বিবেচিত হয়। এটি বিভিন্ন রোগ সনাক্ত করা সম্ভব করে তোলে।

অ্যান্টিবডি, এরিথ্রোসাইটের পৃষ্ঠে অবস্থিত, একটি স্থির বা মুক্ত অবস্থায় হতে পারে রক্তের প্লাস্মা. অ্যান্টিবডিগুলির অবস্থার উপর নির্ভর করে, একটি প্রত্যক্ষ বা পরোক্ষ Coombs প্রতিক্রিয়া সঞ্চালিত হয়। যদি বিশ্বাস করার কারণ থাকে যে লোহিত রক্তকণিকার পৃষ্ঠে অ্যান্টিবডিগুলি স্থির করা হয়েছে, একটি সরাসরি Coombs পরীক্ষা করা হয়। এই ক্ষেত্রে, পরীক্ষা এক পর্যায়ে সঞ্চালিত হয় - যোগ অ্যান্টিগ্লোবুলিন সিরাম. যদি অসম্পূর্ণ অ্যান্টিবডি লোহিত রক্তকণিকার পৃষ্ঠে উপস্থিত থাকে, সংযোজনলোহিত রক্ত ​​কণিকা

পরোক্ষ প্রতিক্রিয়া

পরোক্ষ Coombs প্রতিক্রিয়া 2 পর্যায়ে ঘটে। প্রথমে আপনাকে কৃত্রিমভাবে বাস্তবায়ন করতে হবে সংবেদনশীলতালোহিত রক্ত ​​কণিকা এটি করার জন্য, লোহিত রক্তকণিকা এবং রক্তের সিরাম পরীক্ষা করা হয়, যার ফলে অ্যান্টিবডিগুলি লাল রক্ত ​​​​কোষের পৃষ্ঠে স্থির হয়ে যায়। যার পরে Coombs পরীক্ষার দ্বিতীয় পর্যায়ে বাহিত হয় - অ্যান্টিগ্লোবুলিন সিরাম সংযোজন।

বৃষ্টিপাতের প্রতিক্রিয়া - RP (ল্যাটিন praecipilo থেকে precipitate পর্যন্ত) হল দ্রবণীয় আণবিক অ্যান্টিজেনের একটি কমপ্লেক্স গঠন এবং বর্ষণ যা অ্যান্টিবডিগুলির সাথে একটি মেঘলা আকারে বলা হয়। বর্ষণ. এটি সমান পরিমাণে অ্যান্টিজেন এবং অ্যান্টিবডি মিশ্রিত করে গঠিত হয়; তাদের মধ্যে একটির অতিরিক্ত ইমিউন কমপ্লেক্স গঠনের মাত্রা হ্রাস করে। বৃষ্টিপাতের প্রতিক্রিয়া পরীক্ষা টিউবে (রিং রেসিপিটেশন প্রতিক্রিয়া), জেল, পুষ্টির মাধ্যম ইত্যাদিতে সঞ্চালিত হয়। আধা-তরল আগর বা অ্যাগারোজ জেলে বৃষ্টিপাতের প্রতিক্রিয়ার বিভিন্ন প্রকার, ডবল ইমিউনোডিফিউশন Ouchterlony, radiap immunodiffusion, immunoepectrophoresisএবং ইত্যাদি.

রিং বৃষ্টিপাতের প্রতিক্রিয়া. প্রতিক্রিয়াটি সংকীর্ণ বৃষ্টিপাতের টিউবগুলিতে সঞ্চালিত হয়: একটি দ্রবণীয় অ্যান্টিজেন ইমিউন সিরামের উপর স্তরযুক্ত হয়। অ্যান্টিজেন এবং অ্যান্টিবডিগুলির সর্বোত্তম অনুপাতের সাথে, এই দুটি সমাধানের সীমানায় একটি অস্বচ্ছ স্তর তৈরি হয়। অবক্ষেপ রিং. যদি বিক্রিয়ায় সিদ্ধ এবং ফিল্টার করা টিস্যু নির্যাসকে অ্যান্টিজেন হিসেবে ব্যবহার করা হয়, তাহলে এই বিক্রিয়াকে বলা হয় প্রথম থার্মোপ্রেসিপিটেশন বিক্রিয়া (যে বিক্রিয়ায় অ্যানথ্রাক্স হ্যাপ্টেন সনাক্ত করা হয়)।
Ouchterlony ডবল ইমিউনোডিফিউশন প্রতিক্রিয়া. প্রতিক্রিয়া সেট আপ করার জন্য, গলিত আগর জেলের একটি পাতলা স্তর একটি কাচের প্লেটে ঢেলে দেওয়া হয় এবং শক্ত হওয়ার পরে, কূপগুলি কেটে ফেলা হয়। অ্যান্টিজেন এবং ইমিউন সেরাকে আলাদাভাবে জেলের কূপে স্থাপন করা হয়, যা একে অপরের দিকে ছড়িয়ে পড়ে। মিটিং পয়েন্টে, সমতুল্য অনুপাতে, তারা একটি সাদা ডোরা আকারে একটি অবক্ষেপ তৈরি করে। মাল্টিকম্পোনেন্ট সিস্টেমে, অ্যান্টিজেন এবং অ্যান্টিবডি সহ কূপের মধ্যে বেশ কয়েকটি রেখার অবক্ষেপ দেখা যায়; অভিন্ন AGs-এ, বর্ষণ রেখা একত্রিত হয়; অ-অভিন্ন AG-তে তারা ছেদ করে।
রেডিয়াল ইমিউনোডিফিউশন প্রতিক্রিয়া।গলিত আগর জেল সহ ইমিউন সিরাম গ্লাসের উপর সমানভাবে ঢেলে দেওয়া হয়। জেলে দৃঢ়করণের পরে, কূপগুলি তৈরি করা হয় যেখানে অ্যান্টিজেনকে বিভিন্ন পাতলা করে রাখা হয়। অ্যান্টিজেন, জেলের মধ্যে ছড়িয়ে পড়ে, অ্যান্টিবডিগুলির সাথে কূপের চারপাশে রিং বৃষ্টিপাত অঞ্চল তৈরি করে। বৃষ্টিপাতের বলয়ের ব্যাস অ্যান্টিজেনের ঘনত্বের সমানুপাতিক। প্রতিক্রিয়া রক্তের সিরামে ইমিউনোগ্লোবুলিন নির্ধারণ করতে ব্যবহৃত হয় বিভিন্ন ক্লাস, পরিপূরক সিস্টেমের উপাদান, ইত্যাদি
ইমিউনোইলেক্ট্রোফোরেসিস- ইলেক্ট্রোফোরেসিস এবং ইমিউনোপ্রেসিপিটেশন পদ্ধতির সংমিশ্রণ: অ্যান্টিজেনের মিশ্রণটি জেলের কূপে প্রবেশ করানো হয় এবং ইলেক্ট্রোফোরেসিস ব্যবহার করে জেলে আলাদা করা হয়, তারপর ইমিউনোসেরামটি ইলেক্ট্রোফোরেসিস জোনের সমান্তরাল খাঁজে যুক্ত করা হয়, যার অ্যান্টিবডিগুলি ছড়িয়ে পড়ে অ্যান্টিজেনের সাথে "মিটিং" এর জায়গায় জেল এবং বৃষ্টিপাতের রেখা তৈরি করে।
ফ্লোকুলেশন প্রতিক্রিয়া(র্যামনের মতে) (ল্যাটিন f1oecus থেকে - উল ফ্লেক্স) - টক্সিন - অ্যান্টিটক্সিন বা টক্সয়েড - অ্যান্টিটক্সিন প্রতিক্রিয়ার সময় একটি টেস্ট টিউবে অস্পষ্টতা বা ফ্লোকুলেন্ট ভর (ইমিউনোপ্রিসিপিটেশন) এর উপস্থিতি। এটি অ্যান্টিটক্সিক সিরাম বা টক্সয়েডের কার্যকলাপ নির্ধারণ করতে ব্যবহৃত হয়।

এইচএলএ টাইপিং- মানব প্রধান হিস্টোকম্প্যাটিবিলিটি কমপ্লেক্সের অধ্যয়ন - এইচএলএ কমপ্লেক্স। এই গঠনের মধ্যে রয়েছে ক্রোমোজোম 6-এ জিনের একটি অঞ্চল যা বিভিন্ন ইমিউন প্রতিক্রিয়ার সাথে জড়িত এইচএলএ অ্যান্টিজেনকে এনকোড করে।

জন্য কাজ এইচএলএ টাইপিংখুব ভিন্ন হতে পারে - জৈবিক শনাক্তকরণ (HLA টাইপ পিতামাতার জিনের সাথে উত্তরাধিকারসূত্রে পাওয়া যায়), প্রবণতা নির্ধারণ বিভিন্ন রোগ, অঙ্গ প্রতিস্থাপনের জন্য দাতাদের নির্বাচন - এর মধ্যে দাতা এবং প্রাপক টিস্যুর এইচএলএ টাইপিংয়ের ফলাফল তুলনা করা জড়িত। এইচএলএ টাইপিং ব্যবহার করে, বন্ধ্যাত্বের ক্ষেত্রে নির্ণয়ের জন্য হিস্টোকম্প্যাটিবিলিটি অ্যান্টিজেনের পরিপ্রেক্ষিতে স্বামী বা স্ত্রী কতটা একই রকম বা ভিন্ন তা নির্ধারণ করা হয়।

এইচএলএ টাইপিং পরামর্শ দেয় এইচএলএ পলিমারফিজম বিশ্লেষণএবং দুটি পদ্ধতি দ্বারা বাহিত হয় - সেরোলজিক্যাল এবং আণবিক জেনেটিক। এইচএলএ টাইপিংয়ের ক্লাসিক সেরোলজিক্যাল পদ্ধতি একটি মাইক্রোলিম্ফোসাইটোটক্সিক পরীক্ষার উপর ভিত্তি করে, এবং আণবিক পদ্ধতি পিসিআর (পলিমারেজ চেইন প্রতিক্রিয়া) ব্যবহার করে।

সেরোলজিক্যাল এইচএলএ টাইপিংবিচ্ছিন্ন কোষ জনসংখ্যার উপর বাহিত. প্রধান হিস্টোকম্প্যাটিবিলিটি জটিল অ্যান্টিজেনগুলি প্রধানত লিম্ফোসাইট দ্বারা বাহিত হয়। তাই, টি লিম্ফোসাইটের একটি সাসপেনশন ক্লাস I অ্যান্টিজেনের প্রধান বাহক হিসাবে এবং B লিম্ফোসাইটের সাসপেনশন HLA ক্লাস II অ্যান্টিজেন নির্ধারণ করতে ব্যবহৃত হয়। পুরো রক্ত ​​থেকে প্রয়োজনীয় কোষের জনসংখ্যাকে বিচ্ছিন্ন করতে, হয় সেন্ট্রিফিউগেশন বা ইমিউনোম্যাগনেটিক বিচ্ছেদ ব্যবহার করা হয়। এটি বিশ্বাস করা হয় যে প্রথম পদ্ধতিটি মিথ্যা-ইতিবাচক ডেটার দিকে নিয়ে যেতে পারে, কারণ এর ফলে কিছু কোষের মৃত্যু ঘটে। দ্বিতীয় পদ্ধতিটি আরও নির্দিষ্ট হিসাবে স্বীকৃত - 95% এরও বেশি কোষ কার্যকর থাকে।

কিন্তু একটি লিম্ফোসাইটোটক্সিক পরীক্ষা করার জন্য ভিত্তি এইচএলএ টাইপিংএইচএলএ ক্লাস I এবং II অ্যান্টিজেনের বিভিন্ন অ্যালিলিক রূপের অ্যান্টিবডি ধারণকারী একটি নির্দিষ্ট সিরাম। কোন সেরা লিম্ফোসাইটের সাথে প্রতিক্রিয়া করে এবং কোনটি নয় তা পরীক্ষা করে একটি সেরোলজিক্যাল পরীক্ষা HLA প্রকার নির্ধারণ করতে পারে।

যদি কোষ এবং সিরামের মধ্যে একটি প্রতিক্রিয়া ঘটে, ফলাফলটি কোষের পৃষ্ঠে একটি অ্যান্টিজেন-অ্যান্টিবডি কমপ্লেক্স গঠন করে। পরিপূরক ধারণকারী একটি সমাধান যোগ করার পরে, কোষ lysis এবং মৃত্যু ঘটে। সেরোলজিক্যাল এইচএলএ টাইপিং পরীক্ষাটি পজিটিভ (লাল ফ্লুরোসেন্স) এবং নেতিবাচক (সবুজ ফ্লুরোসেন্স) প্রতিক্রিয়া মূল্যায়নের জন্য ফ্লুরোসেন্স মাইক্রোস্কোপি ব্যবহার করে বা মৃত কোষের নিউক্লিয়াসকে দাগ দেওয়ার জন্য ফেজ-কনট্রাস্ট মাইক্রোস্কোপি ব্যবহার করে মূল্যায়ন করা হয়। এইচএলএ টাইপিংয়ের ফলাফলটি অ্যান্টিজেনের প্রতিক্রিয়াযুক্ত সেরা এবং ক্রস-রিঅ্যাক্টিং গ্রুপের নির্দিষ্টতা এবং সাইটোটক্সিসিটি প্রতিক্রিয়ার তীব্রতা বিবেচনায় নিয়ে উদ্ভূত হয়।

সেরোলজিক্যাল এর অসুবিধা এইচএলএ টাইপিংক্রস-প্রতিক্রিয়ার উপস্থিতি, দুর্বল অ্যান্টিবডি অ্যাফিনিটি বা এইচএলএ অ্যান্টিজেনের কম প্রকাশ, এইচএলএ জিনের একটি সংখ্যায় প্রোটিন পণ্যের অনুপস্থিতি।

আরও আধুনিক, আণবিক পদ্ধতি এইচএলএ টাইপিংতারা ইতিমধ্যেই প্রমিত কৃত্রিম নমুনা ব্যবহার করে যা লিউকোসাইটের পৃষ্ঠে অ্যান্টিজেনের সাথে প্রতিক্রিয়া করে না, কিন্তু ডিএনএর সাথে এবং সরাসরি নির্দেশ করে যে নমুনায় কোন অ্যান্টিজেন উপস্থিত রয়েছে। আণবিক পদ্ধতিতে জীবন্ত লিউকোসাইটের প্রয়োজন হয় না; যেকোনো মানব কোষঅধ্যয়ন করা যেতে পারে, এবং রক্তের কয়েক মাইক্রোলিটার কাজ করার জন্য যথেষ্ট, অথবা আপনি মৌখিক শ্লেষ্মা থেকে স্ক্র্যাপ করার জন্য নিজেকে সীমাবদ্ধ করতে পারেন।

আণবিক জেনেটিক এইচএলএ টাইপিংপিসিআর পদ্ধতি ব্যবহার করে, যার প্রথম ধাপ হল বিশুদ্ধ জিনোমিক ডিএনএ (পুরো রক্ত, লিউকোসাইট সাসপেনশন, টিস্যু থেকে) প্রাপ্ত করা।

তারপরে ডিএনএ নমুনাটি অনুলিপি করা হয় - একটি নির্দিষ্ট এইচএলএ লোকাসের জন্য নির্দিষ্ট প্রাইমার (শর্ট সিঙ্গেল-স্ট্র্যান্ডেড ডিএনএ) ব্যবহার করে ভিট্রোতে প্রশস্ত করা হয়। প্রতিটি প্রাইমার জোড়ার প্রান্ত অবশ্যই একটি নির্দিষ্ট অ্যালিলের সাথে সম্পর্কিত অনন্য অনুক্রমের কঠোরভাবে পরিপূরক হতে হবে, অন্যথায় পরিবর্ধন ঘটবে না।

পিসিআর-এর পরে, বারবার অনুলিপি করার সময়, প্রচুর পরিমাণে ডিএনএ খণ্ড প্রাপ্ত হয়, যা দৃশ্যত মূল্যায়ন করা যেতে পারে। এটি করার জন্য, প্রতিক্রিয়া মিশ্রণগুলি ইলেক্ট্রোলাইসিস বা হাইব্রিডাইজেশনের শিকার হয় এবং নির্দিষ্ট পরিবর্ধন ঘটেছে কিনা তা একটি প্রোগ্রাম বা টেবিল ব্যবহার করে নির্ধারিত হয়। এইচএলএ টাইপিংয়ের ফলাফল জিন এবং অ্যালিলিক স্তরে একটি ব্যাপক প্রতিবেদন আকারে উপস্থাপন করা হয়। ব্যবহৃত নমুনাগুলির প্রমিতকরণের কারণে, আণবিক এইচএলএ টাইপিংআরো সঠিকভাবে সেরোলজিক্যাল। উপরন্তু, এটি আরও তথ্য প্রদান করে (আরো নতুন ডিএনএ অ্যালিল) এবং আরও অনেক কিছু উচ্চস্তরএর বিশদ বিবরণ, যেহেতু এটি শুধুমাত্র অ্যান্টিজেন নয়, অ্যালিলগুলিও সনাক্ত করা সম্ভব করে তোলে, যা কোষে কোন অ্যান্টিজেন উপস্থিত রয়েছে তা নির্ধারণ করে।

ইমিউন লাইসিস প্রতিক্রিয়া।প্রতিক্রিয়াটি নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডিগুলির কোষগুলির সাথে ইমিউন কমপ্লেক্স গঠনের ক্ষমতার উপর ভিত্তি করে তৈরি হয়, এরিথ্রোসাইট এবং ব্যাকটেরিয়া সহ, যা ক্লাসিক্যাল পাথওয়ে এবং কোষের লাইসিস বরাবর পরিপূরক সিস্টেমের সক্রিয়তার দিকে পরিচালিত করে। ইমিউন লাইসিস প্রতিক্রিয়াগুলির মধ্যে, হিমোলাইসিস প্রতিক্রিয়াটি প্রায়শই ব্যবহৃত হয় এবং ব্যাকটেরিয়ালাইসিস প্রতিক্রিয়া খুব কমই ব্যবহৃত হয় (প্রধানত কলেরা এবং কলেরার মতো ভাইব্রিওসের পার্থক্যে)।

হেমোলাইসিস প্রতিক্রিয়া।পরিপূরকের উপস্থিতিতে অ্যান্টিবডিগুলির সাথে প্রতিক্রিয়ার প্রভাবে, লাল রক্ত ​​​​কোষের একটি মেঘলা সাসপেনশন একটি উজ্জ্বল লাল স্বচ্ছ তরলে পরিণত হয় - হিমোগ্লোবিনের মুক্তির কারণে "বার্ণিশ রক্ত"। একটি ডায়াগনস্টিক কমপ্লিমেন্ট ফিক্সেশন রিঅ্যাকশন (এফএফআর) সেট আপ করার সময়, হিমোলাইসিস প্রতিক্রিয়া একটি সূচক হিসাবে ব্যবহৃত হয়: বিনামূল্যে পরিপূরকের উপস্থিতি বা অনুপস্থিতি (স্থিরকরণ) পরীক্ষা করার জন্য।

জেলে স্থানীয় হেমোলাইসিস প্রতিক্রিয়া(Erne প্রতিক্রিয়া) হিমোলাইসিস প্রতিক্রিয়ার একটি রূপ। এটি আপনাকে অ্যান্টিবডি গঠনকারী কোষের সংখ্যা নির্ধারণ করতে দেয়। অ্যান্টিবডি নিঃসরণকারী কোষের সংখ্যা - হেমোলাইসিন - হিমোলাইসিস ফলকের সংখ্যা দ্বারা নির্ধারিত হয় যা একটি আগর জেলে এরিথ্রোসাইট রয়েছে যা অধ্যয়ন করা হচ্ছে এবং লিম্ফয়েড টিস্যুর কোষগুলির একটি সাসপেনশন।

ইমিউনোফ্লোরেসেন্স পদ্ধতি

(RIF, immunofluorescence প্রতিক্রিয়া) হল নির্দিষ্ট Ags (Abs) সনাক্ত করার একটি পদ্ধতি যা একটি ফ্লুরোক্রোমের সাথে সংযুক্ত Abs (Ags) ব্যবহার করে। এটি উচ্চ সংবেদনশীলতা এবং নির্দিষ্টতা আছে. সংক্রমণের স্পষ্ট নির্ণয়ের জন্য ব্যবহৃত হয়। রোগ (গবেষণা উপাদানে প্যাথোজেন সনাক্তকরণ), পাশাপাশি Ab এবং পৃষ্ঠের রিসেপ্টর এবং লিউকোসাইট (ইমিউনোফেনোটাইপিং) এবং অন্যান্য কোষের মার্কার নির্ধারণের জন্য। সরাসরি আই.এম.টিস্যুর একটি অংশ বা প্যাথলজিকাল উপাদান বা মাইক্রোবিয়াল ক্রাস্ট থেকে ফ্লুরোক্রোম সংযোজিত নির্দিষ্ট Abs ধারণ করে একটি স্মিয়ার প্রক্রিয়াকরণ করা হয়; প্রস্তুতিটি এটিকে আনবাউন্ড অ্যাবস থেকে মুক্ত করার জন্য ধুয়ে ফেলা হয় এবং একটি ফ্লুরোসেন্ট মাইক্রোস্কোপের অধীনে পরীক্ষা করা হয়। ইতিবাচক ক্ষেত্রে, বস্তুর পরিধির চারপাশে একটি উজ্জ্বল প্রতিরোধ ক্ষমতা কমপ্লেক্স প্রদর্শিত হয়। অনির্দিষ্ট লুমিনেসেন্স বাদ দেওয়ার জন্য নিয়ন্ত্রণ প্রয়োজন। এ পরোক্ষ তাদের।প্রথম পর্যায়ে, একটি টিস্যু বিভাগ বা স্মিয়ার একটি নন-ফ্লুরোসেন্ট নির্দিষ্ট এজেন্ট দিয়ে চিকিত্সা করা হয়, দ্বিতীয়টিতে - প্রথম পর্যায়ে ব্যবহৃত প্রাণীর -গ্লোবুলিনগুলির বিরুদ্ধে একটি লুমিনেসেন্ট এজেন্ট দিয়ে। ইতিবাচক ক্ষেত্রে, একটি আলোকিত কমপ্লেক্স গঠিত হয়, যার মধ্যে Ar, At to এবং At এর বিরুদ্ধে At (স্যান্ডউইচ পদ্ধতি) থাকে। একটি ফ্লুরোসেন্ট মাইক্রোস্কোপ ছাড়াও, ফেনোটাইপিং কোষগুলির সময় RIF বিবেচনা করা হয়। লেজার সেল বাছাইকারী .

ফ্লো সাইটোমেট্রি- একটি কোষের পরামিতি, এর অর্গানেল এবং এতে ঘটে যাওয়া প্রক্রিয়াগুলির অপটিক্যাল পরিমাপের একটি পদ্ধতি।

কৌশলটিতে লেজার রশ্মি থেকে আলোর বিচ্ছুরণ সনাক্ত করা জড়িত কারণ একটি কোষ এটির মধ্য দিয়ে তরল স্রোতে চলে যায় এবং আলোর বিচ্ছুরণের মাত্রা একজনকে কোষের আকার এবং গঠন সম্পর্কে ধারণা পেতে দেয়। উপরন্তু, বিশ্লেষণটি রাসায়নিক যৌগগুলির ফ্লুরোসেন্সের স্তরকে বিবেচনা করে যা কোষের অংশ (অটোফ্লোরেসেন্স) বা প্রবাহ সাইটোমেট্রির আগে নমুনায় যোগ করা হয়।

কোষ সাসপেনশন, ফ্লোরোসেন্ট মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডি বা ফ্লুরোসেন্ট রঞ্জক দিয়ে প্রি-লেবেলযুক্ত, প্রবাহ কোষের মধ্য দিয়ে যাওয়া তরল প্রবাহে প্রবেশ করে। শর্তগুলি এমনভাবে নির্বাচন করা হয় যে কোষগুলি তথাকথিত কারণে একের পর এক লাইন করে। জেটে জেটের হাইড্রোডাইনামিক ফোকাসিং। এই মুহুর্তে একটি কোষ লেজার রশ্মি অতিক্রম করে, ডিটেক্টর রেকর্ড করে:

ছোট কোণে আলো বিচ্ছুরণ (1° থেকে 10° পর্যন্ত) ( এই বৈশিষ্ট্যকোষের আকার নির্ধারণ করতে ব্যবহৃত হয়)।

90° কোণে আলো বিচ্ছুরণ (আমাদের নিউক্লিয়াস/সাইটোপ্লাজম অনুপাত, সেইসাথে কোষের ভিন্নতা এবং কণিকা বিচার করতে দেয়)।

বেশ কয়েকটি ফ্লুরোসেন্স চ্যানেলের মাধ্যমে ফ্লুরোসেন্সের তীব্রতা (2 থেকে 18-20 পর্যন্ত) - আপনাকে সেল সাসপেনশনের উপ-জনসংখ্যার গঠন নির্ধারণ করতে দেয়, ইত্যাদি।

coombs পরীক্ষা

ডাইরেক্ট কম্বস টেস্ট হল একটি অ্যান্টিগ্লোবুলিন টেস্ট (একটি জেলে অ্যাগ্লুটিনেশন যা সম্পূর্ণ ডিভালেন্ট অ্যান্টিবডি সনাক্ত করতে দেয়), যা আইজিজি ক্লাস অ্যান্টিবডি এবং লোহিত রক্তকণিকার পৃষ্ঠের পরিপূরক C3 উপাদান সনাক্ত করে। সাধারণত, সরাসরি Coombs পরীক্ষা দ্বারা সনাক্ত করা অ্যান্টিবডিগুলির একটি বিস্তৃত নির্দিষ্টতা রয়েছে যা একটি সু-প্রতিষ্ঠিত অ্যান্টিজেনের সাথে সম্পর্কিত নয়। একটি ইতিবাচক সরাসরি Coombs পরীক্ষা স্পষ্টভাবে নির্দেশ করে যে রোগীর হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়া আছে, যদিও ইতিবাচক সরাসরি অ্যান্টিগ্লোবুলিন পরীক্ষার সমস্ত রোগী এই রোগে ভোগেন না। প্রায় 10% রোগীর ক্ষেত্রে, লোহিত রক্তকণিকার ঝিল্লিতে অ্যান্টিবডি বা পরিপূরক উপাদানগুলি সরাসরি Coombs পরীক্ষা দ্বারা নির্ধারণ করা যায় না (পরীক্ষাটি নেতিবাচক), তবে, তা সত্ত্বেও, তারা অটোইমিউন হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়ায় ভোগে। এই জাতীয় ক্ষেত্রে অ্যান্টিবডিগুলির নির্দিষ্টতা স্পষ্ট করার জন্য, তাদের ইলুশন সহ পরীক্ষাগুলি ব্যবহার করা হয়। একটি সরাসরি Coombs পরীক্ষা, শুধুমাত্র পরিপূরক জন্য ইতিবাচক, সাধারণত IgM ধরনের ঠান্ডা অ্যান্টিবডি বোঝায়। এক্ষেত্রে আইজিএম অ্যান্টিবডিলোহিত রক্ত ​​কণিকায় উপস্থিত হয় না যখন বেসাল তাপমাত্রামৃতদেহ যাইহোক, IgM অ্যান্টিবডি সক্রিয়ভাবে পরিপূরক ঠিক করে এবং লাল রক্ত ​​কণিকায় পরিপূরক থেকে যায়, এই ধরনের অটোইমিউন হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়া (ঠান্ডা অ্যাগুটিনিন রোগ) সহ, Coombs পরীক্ষা শুধুমাত্র পরিপূরকের জন্য ইতিবাচক হবে।

উষ্ণ অ্যান্টিবডি দ্বারা সৃষ্ট অটোইমিউন হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়া, অটোইমিউন ড্রাগ-প্ররোচিত অ্যানিমিয়াতে সরাসরি Coombs পরীক্ষা ইতিবাচক (মেথাইলডোপা গ্রহণ করার সময়, 20% পর্যন্ত রোগীদের ইতিবাচক প্রতিক্রিয়া), হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়ার ওষুধ-শোষণের ধরন, ইমিউনো কমপ্লেক্স ধরনের হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়া (পরীক্ষাটি শুধুমাত্র C3 এর জন্য ইতিবাচক), ঠান্ডা অ্যান্টিবডি দ্বারা সৃষ্ট অটোইমিউন হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়া সহ - ঠান্ডা অ্যাগ্লুটিনিন রোগ (পরীক্ষা শুধুমাত্র C3-এর জন্য ইতিবাচক)। প্যারোক্সিসমাল ঠান্ডা হিমোগ্লোবিনুরিয়ায়, সরাসরি Coombs পরীক্ষা নেতিবাচক।
ভিতরে তীব্র সময়কাললোহিত রক্তকণিকা ধ্বংসের কারণে রোগ, যার উপর হিমোলাইটিক সঙ্কটের সময় প্রচুর পরিমাণে অ্যান্টিবডি রেকর্ড করা হয়েছিল, সেইসাথে অপর্যাপ্ত সংখ্যক অ্যান্টিবডি সহ দীর্ঘস্থায়ী কোর্সরোগ, একটি নেতিবাচক সরাসরি Coombs পরীক্ষা পরিলক্ষিত হতে পারে.

:

• পরীক্ষাগার রক্ত ​​​​পরীক্ষার গুণমান নিশ্চিত করার জন্য একটি গুরুত্বপূর্ণ শর্ত হল সকালে (12:00 আগে) খালি পেটে উপাদান গ্রহণ করা।
• পরীক্ষার 12 ঘন্টা আগে, আপনার অ্যালকোহল পান করা, ধূমপান করা, খাওয়া এবং শারীরিক কার্যকলাপ সীমিত করা উচিত।
• রক্ত পরীক্ষার সকালে, আপনি জল পান করতে পারেন।
• ওষুধ গ্রহণ এড়িয়ে চলুন; যদি ওষুধ গ্রহণ বন্ধ করা সম্ভব না হয় তবে আপনাকে অবশ্যই পরীক্ষাগারে জানাতে হবে।
• কোনো চিকিৎসা ডায়গনিস্টিক পদ্ধতি সম্পাদন করার আগে উপাদান গ্রহণ করার পরামর্শ দেওয়া হয়।
• মহিলাদের মধ্যে হরমোনের মাত্রা মূল্যায়ন করার সময়, দিনটি বিবেচনা করা গুরুত্বপূর্ণ মাসিক চক্রনির্দিষ্ট হরমোন নির্ধারণের সর্বোত্তম সময় কখন? আপনি আপনার ডাক্তারের কাছ থেকে এই তথ্য পেতে পারেন।

সূচক	চারিত্রিক
বিশ্লেষক এবং পরীক্ষা সিস্টেম	জেল কার্ড; DiaMed AG (সুইজারল্যান্ড)
উল্লেখিত মূল্য	নেতিবাচক ফলাফল / ইতিবাচক ফলাফল
হস্তক্ষেপকারী কারণ। ওষুধগুলো
নিম্নলিখিত ওষুধগুলি গ্রহণ করার সময় একটি ইতিবাচক পরীক্ষা সম্ভব: অ্যাসিটামিনোফেন, স্যালিসিলিক অ্যাসিড, অ্যামিনোপাইরাইন, এন্টিহিস্টামাইনস, carbromal, cephalosporins, chlorpromazine, chlorpropamide, cisplatin, clonidine, dipyrone, ethosuximide, fenfluramine, fuadin, hydralazine, hydrochlorothiazide, ibuprofen, insulin, isoniazid, mevodomic, methylphet, methylpha, methylphamide অ্যাসিড আইডি, নোমিফেনসাইন, পেনিসিলামিন, পেনিসিলিন, ফেনাসেটিন, ফেনাইলবুটাজোন, প্রোবেনসিড, প্রোকেনামাইড, কুইনিডিন, কুইনাইন, রিফাম্পিন, স্ট্রেপ্টোমাইসিন, সালফোনামাইডস, সালফোনিলুরিয়া ডেরিভেটিভস, টেট্রাসাইক্লিন, ট্রায়ামটেরিন, ট্রিমেলিটিক অ্যানহাইড্রাইড
ব্যবহারের জন্য ইঙ্গিত
ইমিউন হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়া রোগ নির্ণয়, হেমোলাইটিক রোগনবজাতক, ড্রাগ-প্ররোচিত ইমিউন হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়া, হেমোলাইটিক ট্রান্সফিউশন প্রতিক্রিয়া
ফলাফলের ব্যাখ্যা
সাধারণত, সরাসরি Coombs পরীক্ষা নেতিবাচক হয়। ইতিবাচক পরীক্ষা coombs এখানে: অটোইমিউন হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়া; নবজাতকের হেমোলাইটিক রোগ; ড্রাগ-প্ররোচিত ইমিউন হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়া; হেমোলিটিক ট্রান্সফিউশন প্রতিক্রিয়া

কম্বস প্রতিক্রিয়া - কার্যকর পদ্ধতিমানুষের রক্তে এরিথ্রোসাইট অ্যান্টিজেন এবং অ্যান্টি-ইরিথ্রোসাইট অ্যান্টিবডি সনাক্তকরণ পরোক্ষ প্রতিক্রিয়াসংযোজন পরীক্ষার ভিত্তি হল এরিথ্রোসাইট অ্যান্টিজেন টাইপ করার জন্য ক্লাস G ইমিউনোগ্লোবুলিন (IgG) এর উপর ভিত্তি করে নির্দিষ্ট মনোক্লোনাল রিএজেন্টের ব্যবহার, এরপর দ্বিতীয় পর্যায়ে Coombs অ্যান্টিগ্লোবুলিন সিরাম (AGS) ব্যবহার করা হয়।

মানুষের ইমিউনোগ্লোবুলিন জি এবং মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডিগুলির সাথে টিকা দেওয়া পরীক্ষাগার প্রাণীদের রক্ত ​​থেকে সিরাম মিশ্রিত করে AGS তৈরি করা হয় - মানুষের সিরামের C3D পরিপূরক। AGS নির্দিষ্ট অ্যান্টিবডিগুলির সাথে সংবেদনশীল লাল রক্ত ​​​​কোষের সংযোজন ঘটায়। AGS-এর প্রভাবে লোহিত রক্তকণিকায় অ্যান্টিবডির অনুপস্থিতিতে, একটি ইতিবাচক প্রতিক্রিয়া ঘটে না।

পরোক্ষ Coombs প্রতিক্রিয়া আপনাকে এর উপস্থিতি নির্ধারণ করতে দেয়:

• এরিথ্রোসাইট অ্যান্টিজেনগুলি আইজিজি বিকারক দ্বারা সনাক্ত করা হয়েছে ("অসম্পূর্ণ" অ্যান্টিবডি, উদাহরণস্বরূপ, মনোক্লোনাল রিএজেন্ট অ্যান্টি-ডি, অ্যান্টি-এফ ওয়াই এ, অ্যান্টি-এফ ওয়াই বি);
• আইজিজি ক্লাসের অ্যান্টি-ইরিথ্রোসাইট অ্যান্টিবডি।

পরোক্ষ অ্যান্টিগ্লোবুলিন পরীক্ষা: লাল রক্তকণিকা অ্যান্টিজেন সনাক্তকরণ

আমরা অ্যান্টি-ডি আইজিজি কোলিক্লোনের উদাহরণ ব্যবহার করে পরোক্ষ কম্বস প্রতিক্রিয়ার পদ্ধতি উপস্থাপন করি।

1. একটি পরিষ্কার টেস্ট টিউব লেবেল করুন: যে ব্যক্তির পরীক্ষা করা হচ্ছে তার নাম নির্দেশ করুন।
2. টেস্টটিউবে অ্যান্টি-ডি আইজিজি জোলিক্লোনের 2 ফোঁটা (প্রায় 0.1 মিলি) যোগ করুন।
3. বিশ্লেষিত এরিথ্রোসাইটের 5% সাসপেনশনের 2 ড্রপ যোগ করুন, পূর্বে শারীরবৃত্তীয় সমাধান দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়েছিল। zoliclon সঙ্গে পরীক্ষার নমুনা মিশ্রিত.
4. মিশ্রণটি একটি জলের স্নানে বা একটি থার্মোস্ট্যাটে 37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে 30 মিনিটের জন্য সেদ্ধ করুন।
5. পাস্তুর পাইপেট ব্যবহার করে টেস্ট টিউবে 5 - 10 মিলি স্যালাইন দ্রবণ যোগ করুন।
6. এক মিনিটের জন্য 18 - 25 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় 1200 গ্রাম সেন্ট্রিফিউগাল ত্বরণ সহ টিউবটিকে সেন্ট্রিফিউজ করুন।
7. স্যালাইন দ্রবণটি সরান।
8. সেন্ট্রিফিউগেশন ব্যবহার করে লাল রক্তকণিকা ধোয়ার পদ্ধতিটি আরও 2 - 3 বার পুনরাবৃত্তি করুন।
9. অ্যান্টিগ্লোবুলিন সিরামের 2 ফোঁটা রক্তের কোষের পলিতে যোগ করুন এবং মিশ্রিত করুন।
10. 18 - 25 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় এক মিনিটের জন্য 1200 গ্রাম সেন্ট্রিফিউগাল ত্বরণ সহ টিউবটিকে সেন্ট্রিফিউজ করুন।
11. একটি ডিসপেনসার বা পাস্তুর পাইপেট ব্যবহার করে, 3 থেকে 5 ফোঁটা স্যালাইন দ্রবণ যোগ করুন।
12. পললটি পুনরায় চালু করুন এবং সংশ্লেষের জন্য দৃশ্যত মূল্যায়ন করুন। পটভূমির বিরুদ্ধে টেস্টটিউবের নীচে উচ্চারিত অ্যাগ্লুটিনেট পরিষ্কার সমাধানএরিথ্রোসাইট অ্যান্টিজেন সনাক্তকরণ নির্দেশ করে। রক্তের কোষের একটি অস্বচ্ছ সাসপেনশন অ্যান্টিজেনের অনুপস্থিতি নির্দেশ করে।

Coombs পরীক্ষা: আইসোইমিউন অ্যান্টি-এরিথ্রোসাইট অ্যান্টিবডিগুলির জন্য স্ক্রীনিং

গবেষণাটি দাতা এবং প্রাপকের সমস্ত লোহিত রক্তকণিকা অ্যান্টিজেনের জন্য একটি পৃথক সামঞ্জস্য পরীক্ষার অংশ হিসাবে বাহিত হয়। সম্পর্কে উপসংহার সম্পূর্ণ সামঞ্জস্যতাদাতা এরিথ্রোসাইট সহ প্রাপক সেরা বিশ্লেষণের সমস্ত পর্যায়ে হিমোলাইসিস এবং/অথবা সংযোজন অনুপস্থিতির ভিত্তিতে উত্পাদিত হয়। পরীক্ষার যেকোন পর্যায়ে হেমোলাইসিস এবং/অথবা অ্যাগ্লুটিনেশনের লক্ষণ রক্তের নমুনার অসঙ্গতি নির্দেশ করে।

AB0 সিস্টেম ব্যবহার করে সামঞ্জস্যতা মূল্যায়ন, "ঠান্ডা" অ্যান্টিবডি সনাক্তকরণ

1. দাতার রক্তের নমুনা প্রস্তুত করুন:
   • একটি স্বয়ংক্রিয় ডিসপেনসার ব্যবহার করে টেস্ট টিউবে 0.2 মিলি রক্ত ​​যোগ করুন;
   • লোহিত রক্তকণিকা 5.0 মিলি স্যালাইনে 3 বার ধুয়ে ফেলুন;
   • 3 থেকে 4 মিলি কম আয়নিক শক্তি LISS দ্রবণে পেলেটটি পুনরায় চালু করুন।
2. দ্বিতীয় পরিষ্কার টিউব লেবেল করুন: প্রাপকের নাম এবং দাতার নাম নির্দেশ করুন।
3. একটি স্বয়ংক্রিয় ডিসপেনসার ব্যবহার করে, একটি লেবেলযুক্ত টিউবে প্রাপকের সিরামের 0.1 মিলি যোগ করুন।
4. LISS দ্রবণে 5% লাল রক্তকণিকা সাসপেনশনের 2 ফোঁটা যোগ করুন।
5. অবিলম্বে 15 - 20 সেকেন্ডের জন্য 18 - 25 ° C তাপমাত্রায় 1200 গ্রাম সেন্ট্রিফিউগাল ত্বরণ সহ মিশ্রণটিকে কেন্দ্রীভূত করুন।
6. টেস্টটিউবটি আলতোভাবে ঝাঁকিয়ে, নীচে থেকে পলি আলাদা করুন। Agglutinates উপস্থিতি জন্য মূল্যায়ন. হিমোলাইসিস এবং/অথবা অ্যাগ্লুটিনেটসের উপস্থিতি মানে:
   • AB0 সিস্টেম অনুযায়ী অসঙ্গতি;
   • রোগীর সিরামে আইজিএম বা আইজিএ ক্লাসের "ঠান্ডা" অ্যান্টিবডির উপস্থিতি, AB0 অ্যান্টিজেনের জন্য নির্দিষ্ট নয়।

"উষ্ণ" অ্যান্টিবডি সনাক্তকরণ

1. যদি কোন হিমোলাইসিস এবং/অথবা অ্যাগ্লুটিনেট না থাকে, 37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে 10 - 15 মিনিটের জন্য টিউবটি ইনকিউবেট করুন।
2. ঘরের তাপমাত্রায় 15 - 20 সেকেন্ডের জন্য 1200 গ্রাম টিউবকে সেন্ট্রিফিউজ করুন।
3. টিউবটি ঝাঁকান এবং সুপারনাট্যান্টে হিমোলাইসিস এবং/অথবা অ্যাগ্লুটিনেটস পরীক্ষা করুন। একটি ইতিবাচক ফলাফল রোগীর সিরামে দাতা এরিথ্রোসাইট অ্যান্টিজেনের বিরুদ্ধে "উষ্ণ" আইজিএম অ্যান্টিবডি সনাক্তকরণ নির্দেশ করে।

Coombs পরীক্ষায় IgG অ্যান্টিবডি সনাক্তকরণ

1. অধ্যয়নের পূর্ববর্তী পর্যায়ে ফলাফল নেতিবাচক হলে, একটি পাস্তুর পাইপেট ব্যবহার করে টেস্ট টিউবে 0.9% NaCl দ্রবণের 5 মিলি যোগ করুন।
2. টিউবটিকে 1200 গ্রাম তাপমাত্রায় 15 - 20 সেকেন্ডের জন্য 18 - 25 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় সেন্ট্রিফিউজ করুন। একটি পাস্তুর পাইপেট ব্যবহার করুন সাবধানে সুপারনাট্যান্ট পরিত্যাগ করুন।
3. লোহিত রক্তকণিকা ধোয়ার প্রক্রিয়াটি আরও 2 - 3 বার পুনরাবৃত্তি করুন।
4. টেস্টটিউবে অ্যান্টিগ্লোবুলিন সিরামের 1 - 2 ফোঁটা যোগ করুন। পুঙ্খানুপুঙ্খ মিশ্রণ সঞ্চালন.
5. 15 - 20 সেকেন্ডের জন্য 1200 গ্রাম এ টিউবটি সেন্ট্রিফিউজ করুন।
6. লাল রক্ত ​​​​কোষের পললটি সাবধানে ভেঙে ফেলুন এবং প্রতিক্রিয়া ফলাফলটি দৃশ্যত মূল্যায়ন করুন। অ্যাগ্লুটিনেশন সনাক্তকরণ মানে রোগীর সিরামে দাতার এরিথ্রোসাইট অ্যান্টিজেনের বিরুদ্ধে IgG অ্যান্টিবডির উপস্থিতি।

হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়া, অটোইমিউন বডি দ্বারা সৃষ্ট যা তাদের নিজস্ব লোহিত রক্তকণিকার বিরুদ্ধে পরিচালিত হয়, তা সঠিকভাবে বোঝা যায় না। যাইহোক, এটি অনুমান করা হয় যে কিছু কারণ (উদাহরণস্বরূপ, একটি ভাইরাস, একটি অস্বাভাবিক প্রোটিন) লোহিত রক্তকণিকাকে এমনভাবে পরিবর্তন করে যে শরীর তাদের "বিদেশী কিছু" বলে মনে করে এবং অ্যান্টিবডিগুলির সাহায্যে তাদের সাথে লড়াই করে। অন্য একটি তত্ত্ব অনুসারে, কিছু রোগে অস্বাভাবিক প্লাজমা প্রোটিন দেহ গঠনের সময় লোহিত রক্তকণিকার বিরুদ্ধে নির্দেশিত অ্যান্টিবডিগুলি প্রায় দুর্ঘটনাক্রমে উত্থিত হয়। এই জাতীয় প্রোটিন সংস্থাগুলি, যেমন "এলোমেলোভাবে" প্রতিক্রিয়া দিতে পারে যা একটি রোগ নির্ণয়ের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে (উদাহরণস্বরূপ, ভাইরাল নিউমোনিয়া, যেমনটি পরিচিত, একটি ইতিবাচক ওয়াসারম্যান প্রতিক্রিয়া দেয়, একটি ইতিবাচক পল-বানেল প্রতিক্রিয়া এবং একটি ঠান্ডা সংযোজন প্রতিক্রিয়া) .

দুই আছে প্রধান ধরনের অটোঅ্যান্টিবডিহেমোলাইটিক অ্যানিমিয়ার জন্য, যথা: উষ্ণ অ্যান্টিবডি (37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে বিক্রিয়া করে) এবং ঠান্ডা অ্যান্টিবডি (যার প্রতিক্রিয়াশীলতা তাপমাত্রা শূন্যের কাছাকাছি আসার সাথে সাথে বৃদ্ধি পায়)। উষ্ণ অ্যান্টিবডিগুলি ঠান্ডা অ্যান্টিবডিগুলির চেয়ে বেশি সাধারণ। ডেসি আবিষ্কার করেছেন যে উষ্ণ হেমোলাইসিনগুলি ঠান্ডার চেয়ে 2 গুণ বেশি ঘন ঘন হয়। হেমোলিসিন এবং অ্যাগ্লুটিনিন মৌলিকভাবে আলাদা অ্যান্টিবডি নয়: তারা শুধুমাত্র তাদের কর্মের প্রকৃতিতে পৃথক। অ্যাগ্লুটিনিনগুলি লোহিত রক্তকণিকাকে একত্রিত করে এবং হেমোলাইসিনগুলি তাদের হেমোলাইসিসের জটিল প্রক্রিয়ার জন্য আরও সংবেদনশীল করে তোলে (পরিপূরক!)। অটোঅ্যান্টিবডি, এরিথ্রোসাইটের উপর ফিক্সিং, একটি এরিথ্রোসাইট-গ্লোবিন কমপ্লেক্স গঠন করে। এই জটিলটি Coombs অ্যান্টিগ্লোবিন পরীক্ষা ব্যবহার করে সনাক্ত করা হয়।

coombs পরীক্ষা Coombs সিরাম দিয়ে করা হয়, যার প্রস্তুতির জন্য খরগোশকে মানব সিরামের সাথে সংবেদনশীল করা হয়, যার বিরুদ্ধে খরগোশের সিরামে অ্যান্টিবডি তৈরি হয়। যখন এই ধরনের সংবেদনশীল সিরাম মানুষের এরিথ্রোসাইটের উপর কাজ করে, তখন তাদের সংযোজন ঘটে যদি এরিথ্রোসাইট রিসেপ্টরগুলি অ্যান্টিবডিগুলিকে অবরুদ্ধ করে দখল করে থাকে। যেহেতু এই ব্লকিং অ্যান্টিবডিগুলি মানুষের সিরাম থেকে প্রাপ্ত, তাই এগুলি মানব রক্তরসে সংবেদনশীল খরগোশের সিরামের সাথে একত্রিত হয় এবং এতে প্রিসিপিটিন থাকে। এই প্রতিক্রিয়া Coombs পরীক্ষা বলা হয়; অটোইমিউন বডির কারণে হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়া (Lo tit) প্রায় নির্দিষ্ট (বিস্তারিত জানার জন্য, Maier দেখুন)।

সাধারণভাবে হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়াসের জন্যএরিথ্রোসাইটের প্রাথমিক ব্যাধির সাথে, Coombs পরীক্ষাটি নেতিবাচক এবং অর্জিত পরীক্ষাগুলির সাথে এটি ইতিবাচক। যাইহোক, এই নিয়মের কিছু ব্যতিক্রম রয়েছে: সাংবিধানিক হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়ার সংকটের সময় একটি মিথ্যা-পজিটিভ Coombs পরীক্ষা পাওয়া গেছে এবং দুর্বল ডিগ্রী- এছাড়াও কখনও কখনও স্প্লেনেক্টমির পরে, রিউম্যাটিক আর্থ্রাইটিস, সারকোইডোসিস, ঘন ঘন রক্ত ​​​​সঞ্চালনের পরে এবং সিস্টেমিক লুপাস এরিথেমাটোসাসের সাথে। স্বাভাবিকভাবেই, অটোইমিউন বডি গঠন ছাড়াই অর্জিত হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়াতে, এটি নেতিবাচক।

হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়াঅটোইমিউন শরীরের দ্বারা সৃষ্ট বিভক্ত করা যেতে পারে:
ক) তীব্র, সাবএকিউট এবং ক্রনিক ফর্ম, সেইসাথে চালু
খ) অজানা ইটিওলজি সহ ইডিওপ্যাথিক এবং গ) লক্ষণীয় [ভাইরাল নিউমোনিয়া (শুধুমাত্র ঠান্ডা অ্যাগ্লুটিনিনস), দীর্ঘস্থায়ী লিম্ফ্যাটিক লিউকেমিয়া, রেটিকুলোসারকোমা, লিম্ফোসারকোমা, সিস্টেমিক লুপাস এরিথেমাটোসাস (প্রধানত উষ্ণ, কম প্রায়ই ঠান্ডা অ্যাগ্লুটিনিনস), একটি সিফিলুটিনস (সিফ্লুটিনস)। কর্মীদের সাথে))।
গ) লক্ষণীয় [ভাইরাল নিউমোনিয়া (শুধুমাত্র ঠান্ডা অ্যাগ্লুটিনিনস), ক্রনিক লিম্ফ্যাটিক লিউকেমিয়া, রেটিকুলোসারকোমা, লিম্ফোসারকোমা, সিস্টেমিক লুপাস এরিথেমাটোসাস (প্রধানত উষ্ণ, কম প্রায়ই ঠান্ডা অ্যাগ্লুটিনিনস), সিফিলিস (ঠান্ডা অ্যাগ্লুটিনিনস) এবং টিউচারারিয়ান (কোল্ড অ্যাগ্লুটিনিনস)।

হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়ার ক্লিনিক, অটোইমিউন সংস্থার প্রভাবের অধীনে বিকাশ করা খুব বৈচিত্র্যময়, এবং তাই তাদের সাধারণ আঁকতে খুব কমই সম্ভব ক্লিনিকাল ছবি. সব বয়সের মানুষ এবং উভয় লিঙ্গ সমানভাবে প্রভাবিত হয়। তবুও, ইডিওপ্যাথিক ফর্মগুলি প্রায়শই মহিলাদের মধ্যে পরিলক্ষিত হয় বলে মনে হয় (স্যাক্স এবং ওয়ার্কম্যান)।

ইডিওপ্যাথিক ফর্মের ক্লিনিকাল ছবিরোগের তীব্রতার উপর নির্ভর করে পরিবর্তিত হয়। ভিতরে দীর্ঘস্থায়ী ক্ষেত্রেসূচনা ধীরে ধীরে হয়, রোগটি ঘন ঘন তীব্রতা সহ বহু বছর ধরে টানতে থাকে। রক্তাল্পতার তীব্রতা হেমোলাইসিসের ডিগ্রির উপর নির্ভর করে পরিবর্তিত হয়। হিমোগ্লোবিনের 10% পর্যন্ত ড্রপ পরিলক্ষিত হয়; অন্যান্য ক্ষেত্রে, হিমোগ্লোবিন দীর্ঘ সময়ের জন্য 50-60% থাকে। রেটিকুলোসাইটোসিসের তীব্রতা এবং ত্বক এবং সিরামের আইক্টেরিক রঙ হিমোলাইসিসের ডিগ্রির সাথে মিলে যায়। বিলিরুবিন খুব কমই প্রস্রাবে পাওয়া যায়, যেহেতু এটি কিডনির মধ্য দিয়ে যায় না, তবে হিমোগ্লোবিনুরিয়া পরিলক্ষিত হয়। দীর্ঘস্থায়ী ক্ষেত্রে, প্লীহা প্রায়শই বড় হয় এবং এমনকি একটি খুব উল্লেখযোগ্য আকারে পৌঁছাতে পারে, তবে অন্যান্য ক্ষেত্রে এটি এখনও অনুভূত হতে পারে। লিভার খুব কমই বড় হয় না।

বেশিরভাগ ক্ষেত্রে রক্তে macrocytosis পরিলক্ষিত হয়, মধ্যে তীব্র পর্যায়এছাড়াও অনেক মাইক্রোসাইট আছে, নরমোব্লাস্টোসিস এবং পলিক্রোমাসিয়া খুব কমই অনুপস্থিত, লিউকোসাইটোসিস 30,000 পৌঁছতে পারে, প্লেটলেটগুলি স্বাভাবিক। কিছু ক্ষেত্রে, তবে, গুরুতর থ্রম্বোসাইটোপেনিয়া আছে। ইভান্স প্লেটলেটগুলির বিরুদ্ধে অ্যান্টিবডিগুলির একযোগে উপস্থিতি দ্বারা এই মামলাগুলিকে ব্যাখ্যা করেছেন, যাতে অটোইমিউন সংস্থাগুলির ক্রিয়াকলাপের কারণে হেমোলাইটিক অ্যানিমিয়া এবং থ্রম্বোসাইটোপেনিয়া উভয়ই হয় - ইভান্স সিন্ড্রোম। অসমোটিক প্রতিরোধ কিছুটা হ্রাস পেয়েছে, তবে একই পরিমাণে নয় এবং সাংবিধানিক গ্লোবুলার সেল অ্যানিমিয়ার মতো স্থায়ীভাবে নয়। তাপ প্রতিরোধের পরীক্ষা (হেগলিন-মাইয়ার) 6 ঘন্টা পরেও সামান্য হেমোলাইসিস (নিজস্ব পর্যবেক্ষণ) দিতে পারে, তবে মার্চিয়াফাভা রক্তাল্পতার তুলনায় কিছুটা কম। হেমোসিডারিনও প্রস্রাবে পাওয়া যায় (নিজস্ব পর্যবেক্ষণ)।