Պասիվ ագլյուտինացիայի ռեակցիաներ. Անուղղակի ագլյուտինացիոն ռեակցիաներ. Անուղղակի կամ պասիվ հեմագլյուտինացման ռեակցիա (IRHA, RPHA): Հակադարձ RNGA. Հեմագլյուտինացման պասիվ արգելակման ռեակցիա (PHA):
Սրանք ռեակցիաներկոչվում են անուղղակի (պասիվ), քանի որ նրանք օգտագործում են Ag (կամ AT) արհեստականորեն ներծծված տարբեր կորպուսուլյար մասնիկների մակերեսի վրա:
Հեմագլյուտինացման անուղղակի կամ պասիվ ռեակցիա (RNGA, RPGA) ամենազգայուն շճաբանական ռեակցիաներից է։ Այն հիմնված է AT-ի՝ արյան տարբեր կարմիր բջիջների վրա ամրագրված Ag-ի հետ փոխազդելու ունակության վրա, որոնք այնուհետև ագլյուտինացվում են: Ախտորոշման ավելի մեծ կայունության համար արյան կարմիր բջիջները ֆորմալիզացվում են:
Հակադարձ RNGAօգտագործվում է արյան շիճուկում Ag հայտնաբերելու համար; Այդ նպատակով էրիթրոցիտների վրա ամրացվում են ոչ թե Ag, այլ AT։ Այս տեսակի ռեակցիաները լայնորեն կիրառվում են վարակիչ հիվանդությունների ախտորոշման, հղիության հաստատման, հայտնաբերման համար գերզգայունությունդեղերի նկատմամբ և այլն:
Արգելակման արձագանքը պասիվ հեմագլյուտինացիա (RTPGA) - հետագա զարգացում RNGA; ինչ-որ իմաստով վերահսկում է դրա առանձնահատկությունը: Ի տարբերություն RNGA, ներառում է երեք բաղադրիչ. Ag, AT և Ag (AT) ներծծված էրիթրոցիտների վրա: Սկզբում Ag-ը փոխազդում է AT-ի (ստանդարտ հակաշիճուկի) հետ, այնուհետև խառնուրդին ավելացվում են նույն Ag-ով (կամ AT) զգայուն էրիթրոցիտներ։ Եթե Ag-ի հետ AT-ի փոխազդեցության ժամանակ համակարգում ազատ AT (կամ Ag) չի մնում, ապա էրիթրոցիտների դիագնոստիկումի ագլյուտինացիա չի նկատվում։
Այն օգտագործում է կարմիր արյան բջիջներ կամ չեզոք սինթետիկ նյութեր(օրինակ՝ լատեքսի մասնիկներ), որոնց մակերեսի վրա ներծծվում են անտիգեններ (բակտերիալ, վիրուսային, հյուսվածքային) կամ հակամարմիններ։ Նրանց ագլյուտինացիան տեղի է ունենում, երբ ավելացվում են համապատասխան շիճուկներ կամ անտիգեններ: Հակագեններով զգայուն արյան կարմիր բջիջները կոչվում են հակագենային էրիթրոցիտ դիագնոստիկում և օգտագործվում են հակամարմինները հայտնաբերելու և տիտրելու համար: Էրիտրոցիտները զգայուն են հակամարմիններով: կոչվում են իմունոգլոբուլինի էրիթրոցիտների ախտորոշում և օգտագործվում են անտիգենների նույնականացման համար:
Հեմագլյուտինացիայի պասիվ ռեակցիան օգտագործվում է բակտերիայից առաջացած հիվանդությունների ախտորոշման համար ( որովայնային տիֆև պարատիֆային տենդ, դիզենտերիա, բրուցելյոզ, ժանտախտ, խոլերա և այլն), նախակենդանիներ (մալարիա) և վիրուսներ (գրիպ, ադենովիրուսային վարակներ, վիրուսային հեպատիտԲ, կարմրուկ, տիզից փոխանցվող էնցեֆալիտՂրիմի հեմոռագիկ տենդ և այլն), ինչպես նաև որոշ հորմոններ որոշելու, հիվանդի նկատմամբ զգայունության բարձրացման համար դեղերև այնպիսի հորմոններ, ինչպիսիք են պենիցիլինը և ինսուլինը:
Պասիվ հեմագլյուտինացման ռեակցիա (RPHA): Հեմագլյուտինացիայի պասիվ թեստը զգայուն մեթոդ է սերոլոգիական ախտորոշումև օգտագործվում է ինչպես վաղ, այնպես էլ հետահայաց ախտորոշման, ինչպես նաև պատվաստված մարդկանց իմունոպոգիկ վիճակը որոշելու համար: Տուլարեմիայով հիվանդների մոտ հակամարմինները սովորաբար հայտնաբերվում են հիվանդության 1-1-2-րդ շաբաթվա վերջում, RPHA տիտրերը հասնում են առավելագույն կատարում(1:100000-1:20000, հազվադեպ ավելի բարձր), որից հետո նվազում են և երկար ժամանակ մնում 1:100-1:200 մակարդակում։
Պատվաստված մարդկանց մոտ հակամարմիններ նույնպես մշտապես հայտնաբերվում են, սակայն ավելի ցածր տիտրերով՝ պատվաստումից 1-1,5 ամիս հետո չգերազանցելով 1:2000-1:5000-ը և մի քանի տարի մնում են ցածր մակարդակում՝ 1:20-1:80:
RPHA-ի բեմադրման հակագենը տուլարեմիայի էրիթրոցիտային դիագնոստիկումն է (հակագին): Դեղը ֆորմալիզացված ոչխարի արյան կարմիր բջիջներ է, զգայուն տուլարեմիայի հակագենով, հասանելի հեղուկ և չոր տեսքով: Հեղուկ պատրաստում - կարմիր արյան բջիջների 10% կասեցում 10% կոնցենտրացիայի ֆորմալդեհիդի լուծույթում: Չոր լիոֆիլացված պատրաստուկը արյան կարմիր բջիջների վակուումային չորացրած 10% կախոց է՝ առանց կոնսերվանտի: Օգտագործելուց առաջ այն նոսրացվում է պիտակի վրա նշված ցուցումների համաձայն: Պոլիստիրոլային թիթեղներում ռեակցիան կարգավորելու համար երկու դեղամիջոցներն էլ օգտագործվում են 2,5% կոնցենտրացիայով, իսկ ռեակցիան միկրոծավալներով կարգավորելիս՝ 0,5% կոնցենտրացիայով:
RPGA-ի ստեղծման տեխնիկա. Փորձարկման շիճուկները նոսրացվում են ֆիզիոլոգիական լուծույթով 1:5 (1:10) հարաբերակցությամբ և տաքացնում են 56 աստիճան C ջերմաստիճանում 30 րոպե: Դրանից հետո ոչխարի էրիթրոցիտների նկատմամբ տարասեռ հակամարմինները հեռացնելու համար շիճուկները մշակվում են ֆորմալիզացված ոչխարի էրիթրոցիտների 50% կասեցմամբ: Դրա համար արյան կարմիր բջիջները ավելացրեք 2 կաթիլ (0,05 մլ) 1 մլ շիճուկին և թափահարելով մանրակրկիտ խառնեք։ Շիճուկը թողնում են մինչև էրիթրոցիտներն ամբողջությամբ նստեն, կամ մեկ ժամ հետո ցենտրիֆուգվում են սենյակային ջերմաստիճանում, որից հետո պատրաստ է հետազոտության։
Նոսրացման հեղուկը 0,5 մլ ծավալով լցվում է պոլիստիրոլի ափսեի վրա հորերի շարքով։ Շիճուկների նախնական ուսումնասիրության ժամանակ խորհուրդ է տրվում փորձարկել դրանք՝ ռեակցիան կարգավորելով ափսեի կարճ շարքում (6 հորատանցք): Եթե հակամարմինները հայտնաբերվում են կարճ շարքում, ապա շիճուկները նորից փորձարկվում են նոսրացումների երկար շարքով (12 հորատանցք): Նոսրացման հեղուկը թափելուց հետո յուրաքանչյուր շարքի առաջին հորին (կարճ կամ երկար) ավելացրեք 0,5 մլ փորձնական շիճուկ 1։5 հարաբերակցությամբ նոսրացումով։ Այնուհետեւ շիճուկի նույն ծավալները տիտրում են կրկնակի նոսրացումներով։ Այսպիսով, շիճուկի նոսրացումները ստացվում են կարճ շարքում՝ 1:10-ից մինչև 1:320, իսկ երկար շարքում՝ 1:10-ից մինչև 1:20480: Շիճուկների տիտրումից հետո յուրաքանչյուր հորին ավելացվում է մեկական կաթիլ (0,05 մլ) զգայուն էրիթրոցիտների աշխատանքային 2,5% կասեցման: Թիթեղների պարունակությունը մանրակրկիտ թափահարում է, մինչև ստացվի համասեռ կախոց։ Թիթեղները թողնում են սենյակային ջերմաստիճանում անշարժ սեղանի մակերեսի վրա։ Ռեակցիայի նախնական գրանցումը կատարվում է 2-3 ժամ հետո, տիտրի վերջնական որոշումը կատարվում է հորերում կարմիր արյան բջիջների ամբողջական նստվածքից հետո։ Ռեակցիայի համար նախատեսված են հետևյալ հսկիչ միջոցները. 2) նոսրացման հեղուկ 0,5 մլ ծավալով + 1 կաթիլ չզգայուն էրիթրոցիտների 2,5% կասեցման մեջ. 3) նոսրացման հեղուկ 0,5 մլ ծավալով + 1 կաթիլ զգայուն էրիթրոցիտների 2,5% կասեցման մեջ: Բոլոր հսկիչները պետք է հստակ բացասական արձագանք տան:
RPGA-ի հաշվառում և գնահատում: Արձագանքը գնահատվում է հետևյալ դիագրամը:
1) կտրուկ դրական արձագանք(++++) - արյան կարմիր բջիջները ընկնում են անցքի ներքևի մասում հավասար շերտով «հովանոցի» տեսքով, որը հաճախ ունենում է ծայրերի փխրուն հալեցում.
2) դրական ռեակցիա (+++) - արյան կարմիր բջիջները ծածկում են ջրհորի հատակի առնվազն 2/3-ը.
3) թույլ դրական ռեակցիա (++) - ագլյուտինատը փոքր է և գտնվում է ջրհորի հենց կենտրոնում.
4) կասկածելի ռեակցիա (+) - ջրհորի հենց կենտրոնում էրիթրոցիտների նստվածքի շուրջ կան ագլյուտինատի առանձին հատիկներ.
5) բացասական (-) - անցքի ներքևի մասում արյան կարմիր բջիջները նստում են «կոճակի» կամ հարթ, կտրուկ ընդգծված եզրերով փոքր օղակի տեսքով:
Շիճուկի տիտրը հաշվի է առնվում շիճուկի վերջին նոսրացման հիման վրա, որը տվել է շատ հստակ ռեակցիա (առնվազն երեք պլյուս): 1:100 կամ ավելի նոսրացումը համարվում է ախտորոշիչ տիտր, սակայն, ինչպես ՀՀ-ի դեպքում, անհրաժեշտ է վերահսկել դրա աճը.
Տուլարեմիայի համար RPGA-ն բավականին կոնկրետ է և հայտնաբերում է որոշները խաչաձեւ ռեակցիաներմիայն բրուցելոզի շիճուկներով: Դիֆերենցիալ ախտորոշումհնարավոր է RPGA-ում տիտրերի բարձրությամբ, որոնք զգալիորեն ավելի բարձր են հոմոլոգ անտիգենով:
Միկրոծավալներով RPHA-ի տեղադրման տեխնիկա: RPGA-ն կարող է իրականացվել միկրոծավալներով՝ օգտագործելով Takachi-ի տիպի միկրոտիտրատոր (կամ միկրոպիպետներով կլոր հատակով միկրոափսեներ), որը թույլ է տալիս նյութի տիտրումը 25 մկլ և 50 մկլ ծավալներով: Ռեակցիայի տեխնիկան և բոլոր գործողությունների հաջորդականությունը նույնն են, ինչ պոլիստիրոլի թիթեղներում ուսումնասիրելիս: Այնուամենայնիվ, պետք է հաշվի առնել, որ միկրոմեթոդի զգայունությունը սովորաբար մեկ նոսրացումով (այսինքն՝ 2 անգամ) ավելի ցածր է, քան մակրոմեթոդինը:
Ռեակցիան միկրոտիտրատորում կարգավորելու համար յուրաքանչյուր հորին ավելացվում է 50 մկլ ծավալով նոսրացման հեղուկ՝ կաթիլային պիպետտի միջոցով: Այնուհետև, օգտագործելով 50 մկլ գլխիկ ունեցող տիտրատորներ, փորձարկման շիճուկը հավաքում են՝ գլուխն ընկղմելով դրա մեջ։ Համոզվեք, որ հեղուկը լցրել է տիտրատորի գլուխը: Շիճուկով տիտրատորը տեղափոխվում է առաջին ջրհորը և այն ներս պահելով ուղղահայաց դիրք, մի քանիսը արեք պտտվող շարժումներՇրջագայություն. Այնուհետև տիտրատորը տեղափոխվում է հաջորդ ջրհոր և մանիպուլյացիան կրկնվում է: Տիտրումը կարող է իրականացվել միաժամանակ մի քանի շարքերում: Ամբողջ շարքը տիտրելուց հետո տիտրատորը լվանում են թորած ջրով (փոխելով 2 բաժին), պտտվող շարժումներով ջուրը գլխից հանվում է շվաբրի միջոցով և այրվում այրիչի կրակի վրա։
Տիտրումից հետո հորերին ավելացրեք 25 մկլ էրիթրոցիտների ախտորոշիչ հեղուկ: RPHA-ի ախտորոշման կոնցենտրացիան միկրոծավալներում պետք է լինի 0,5% (այսինքն, կարմիր արյան բջիջների 2,5% կասեցումը լրացուցիչ նոսրացվում է 5 անգամ): Արյան կարմիր բջիջների ավելացումից հետո թիթեղները պետք է մի փոքր թափահարել, մինչև ստացվի համասեռ կախոց: Արդյունքները կարելի է գրանցել 1-1,5 ժամվա ընթացքում, ինչը RPGA-ի զգալի առավելությունն է միկրոտիտրում: Բացի այդ, այս տեխնիկան պահանջում է փոքր քանակությամբ ռեակցիայի բոլոր բաղադրիչները և փորձարկման շիճուկները:
Ռեակցիան հաշվի է առնվում հետևյալ սխեմայի համաձայն.
1) «+» - ամբողջական հեագլյուտինացիա, որի դեպքում արյան կարմիր բջիջները ընկնում են ջրհորի հատակին հավասար շերտով «հովանոցի» տեսքով՝ զբաղեցնելով հատակի առնվազն 2/3-ը.
2) «+-» - մասնակի հեմագլյուտինացիա, որի դեպքում արյան կարմիր բջիջները փոքր չափի չամրացված օղակի տեսքով ընկնում են հատակին.
3) «-» – հեմագլյուտինացիայի բացակայություն, երբ կարմիր արյան բջիջները ընկնում են հատակին փոքր կոճակի կամ հարթ եզրով օղակի տեսքով:
RPHA-ում ստացված դրական արդյունքի առանձնահատկությունը կարելի է ստուգել՝ օգտագործելով երեք բաղադրիչ ռեակցիա՝ պասիվ հեմագլյուտինացման արգելակման ռեակցիա (PHA):
RTPGA-ի ստեղծման տեխնիկա: Այս ռեակցիան օգտագործվում է RPGA-ի դրական արդյունքի առանձնահատկությունը հաստատելու համար, երբ այն կասկածի տակ է կամ առանձնահատուկ համաճարակաբանական հետաքրքրություն է ներկայացնում: Ռեակցիայի մեխանիզմը բաղկացած է հեմագլյուտինացիայի հատուկ արգելակումից, երբ փորձարկման շիճուկին ավելացվում է սպանված տուլարեմիայի բակտերիաների կասեցում: Երեք բաղադրիչ փոխազդում են ռեակցիայի մեջ՝ թեստային շիճուկ, հատուկ տուլարեմիայի հակագեն և հակագենային էրիթրոցիտ diagnosticum RTPHA սովորաբար տեղադրվում է 7-8 հորերի շարքում: Ցանկալի է RTPGA-ին զուգահեռ տեղադրել կրկնվող RPGA: 0,25 մլ նոսրացման հեղուկը լցնում են երկու շարք հորերի մեջ, այնուհետև 0,25 մլ ծավալով փորձնական շիճուկը ավելացնում են երկու շարքերի առաջին հորերին և ստացվում են շիճուկի երկու միանման շարքեր։ Երկրորդ շարքի բոլոր հորերին ավելացրեք 0,25 մլ նոսրացման հեղուկ, իսկ առաջին շարքի հորերին՝ 0,25 մլ տուլարեմիայի բակտերիաների կախույթ: Օգտագործվում է Tularemia diagnosticum (պարունակում է 25 միլիարդ տուլարեմիայի բակտերիաներ 1 մլ-ում), նախկինում 50 անգամ նոսրացված։ Այս կախոցը պարունակում է 500 միլիոն բակտերիա 1 մլ-ում կամ 125 միլիոն՝ 0,25 մլ ծավալով։ Հակագենն ավելացնելուց հետո թիթեղը թողնում են 1 ժամ սենյակային ջերմաստիճանում, որից հետո երկու շարքի բոլոր հորերին ավելացնում են մեկ կաթիլ (0,05 մլ) էրիթրոցիտ դիագնոստիկում, թիթեղը թափահարում և թողնում սեղանի հարթ մակերեսի վրա։ Հաշվառումն իրականացվում է 2-3 ժամ հետո։
RTPGA-ի հաշվառում և գնահատում: Եթե փորձարկման շիճուկը պարունակում է հատուկ տուլարեմիայի հակամարմիններ, դրանք չեզոքացվում են ավելացված անտիգենով, և հեմագլյուտինացիա չի առաջանա հորերի առաջին շարքում, կամ, շիճուկի բարձր տիտրով, հեագգլուտինացիա կնկատվի ավելի փոքր (2-4) քանակով: հորեր, քան RPHA-ի հետ շարքում: Այս դեպքում հաստատվել է արդյունքների յուրահատկությունը։ Եթե հեմագլյուտինացիա է նշվում երկու շարքերում, այսինքն. Եթե RTPGA-ի և RPGA-ի արդյունքները համընկնում են, դա ցույց է տալիս փորձարկման շիճուկում տուլարեմիայի հակամարմինների բացակայությունը: Այս դեպքում RPGA-ի առաջնային արդյունքը համարվում է ոչ հատուկ:
RTHG-ի միկրոծավալներով բեմադրման տեխնիկա. RTPGA-ն, ինչպես RPGA-ն, կարող է իրականացվել միկրոծավալներով՝ օգտագործելով Takachi տիպի միկրոտիտր: Դրա համար ավելացրեք 0,25 մկլ նոսրացնող հեղուկ միկրոսալերի հորերի մեջ՝ յուրաքանչյուրը 7-8 հորանի երկու շարքով: Այնուհետև, օգտագործելով տիտրատոր, ավելացվում է 0,25 մկլ փորձնական շիճուկ և տիտրվում երկու շարքերում: Դրանից հետո առաջին շարքի յուրաքանչյուր հորատանցքում ավելացվում է 25 մկլ տուլարեմիայի հակագեն (որի կոնցենտրացիան 1 մլ-ում 500 մլն տուլարեմիայի բակտերիա է), իսկ երկրորդ շարքում ավելացվում է 25 մկլ նոսրացման հեղուկ։ Թիթեղները թողնում են 1 ժամ սենյակային ջերմաստիճանում, որից հետո 25 մկլ հակագենային զրիտրոցիտային դիագնոստիկում (0,5% կոնցենտրացիա) ավելացվում է երկու շարքի բոլոր հորերին։ Արդյունքների հաշվառումն ու գնահատումը կատարվում են մակրոծավալներում ռեակցիաների նման:
Պասիվ հեմագլյուտինացիոն ռեակցիա) անտիգենների կամ հակամարմինների հայտնաբերման և նույնականացման մեթոդ, որը հիմնված է կարմիր արյան բջիջների ագլյուտինացիայի երևույթի վրա, որը տեղի է ունենում դրանց ներկայությամբ, որի մակերեսին նախկինում ներծծվել են համապատասխան սպեցիֆիկ կամ անտիգեններ:
1. Փոքր բժշկական հանրագիտարան. - Մ.: Բժշկական հանրագիտարան. 1991-96 թթ 2. Նախ Առողջապահություն. - Մ.: Ռուսական մեծ հանրագիտարան: 1994 3. Հանրագիտարանային բառարան բժշկական տերմիններ. - Մ.: Խորհրդային հանրագիտարան. - 1982-1984 թթ.
Տեսեք, թե ինչ է «անուղղակի հեմագլյուտինացման ռեակցիան» այլ բառարաններում.
անուղղակի հեմագլյուտինացման ռեակցիա- RNGA Լաբորատոր փորձարկումօգտագործելով էրիթրոցիտների ախտորոշում: Պատվաստաբանության և իմունիզացիայի հիմնական տերմինների անգլերեն-ռուսերեն բառարան. Առողջապահության համաշխարհային կազմակերպություն, 2009] Թեմաներ պատվաստում, իմունիզացիա Հոմանիշներ RNGA EN... ... Տեխնիկական թարգմանչի ուղեցույց
- (RNHA; պասիվ հեմագլյուտինացման ռեակցիայի հոմանիշ) մեթոդ անտիգենների կամ հակամարմինների հայտնաբերման և նույնականացման համար, որը հիմնված է էրիթրոցիտների ագլյուտինացիայի երևույթի վրա, որը տեղի է ունենում դրանց ներկայությամբ, որի մակերեսին դրանք նախկինում ներծծվել են... .. . Բժշկական մեծ բառարան
- (RPHA) տե՛ս Անուղղակի հեմագլյուտինացման ռեակցիա... Բժշկական մեծ բառարան
Այս էջը բառարան է։ # Ա... Վիքիպեդիա
Անասնաբուժական հանրագիտարանային բառարանում ընդունված հիմնական հապավումները- a., aa, artena, arteriae aa ana (հավասարապես) ԽՍՀՄ Բժշկական Գիտությունների Ակադեմիա ԽՍՀՄ Բժշկական Գիտությունների Ակադեմիա ԽՍՀՄ ԳԱ ԽՍՀՄ ԳԱ Բակ. Bacillus Bact. Բակտերիա BSSR Բելառուսական ՍՍՀ դար, դ. դար, դարեր վ., հ. vena, venae ՎԱՍԽՆԻԼ Լենինի համամիութենական շքանշան և... ...
Այս տերմինն այլ իմաստներ ունի, տես Ժանտախտ։ Մսակերների ախտը (Կարեի հիվանդություն) սուր կամ ենթասուր վարակիչ վիրուսային հիվանդություն, դրսեւորվում է տենդով, լորձաթաղանթների կատարալային բորբոքումներով, մաշկային վնասվածքներով, կենտրոնական ... ... Վիքիպեդիա
- (renes) զույգ արտազատող և էնդոկրին օրգան, որը կարգավորում է մարմնի քիմիական հոմեոստազը մեզի ձևավորման գործառույթի միջոցով: ԱՆԱՏՈՄԻԱԿԱՆ ՖԻԶԻՈԼՈԳԻԱԿԱՆ ԷՍԿԻԶ Երիկամները գտնվում են հետանցքային տարածությունում (Retroperitoneal space) ին... ... Բժշկական հանրագիտարան
I (տրիխինելլոզ; հոմանիշ՝ տրիխինոզ, «փքուն») հելմինթոզ նեմատոդների խմբից, որը բնութագրվում է ջերմությամբ, միալգիայով, դեմքի այտուցով, մաշկի ցան, արյան էոզինոֆիլիա, իսկ ծանր դեպքերում՝ վնասվածքներ ներքին օրգաններև կենտրոնական...... Բժշկական հանրագիտարան
- (նեմատոզներ) հելմինտիազներ, որոնք առաջանում են կլոր որդերի նեմատոդներից դասի նեմատոդա. Ի թիվս այլ հելմինտիազների, ունեն Ն ամենաբարձր արժեքըմարդու պաթոլոգիայում դրանց մեծ մասը գեոհելմինթոզ են (տես Հելմինթոզ); նրանց ձվերի կամ թրթուրների զարգացումը... ... Բժշկական հանրագիտարան
վարակիչ էպիդիդիմիտ- Բրինձ: 1. Ինֆեկցիոն էպիդիդիմիտով ոչխարի ձախ ամորձիների մեծացում։ Բրինձ. 1. Ինֆեկցիոն էպիդիդիմիտով ոչխարի ձախ ամորձիների մեծացում։ ոչխարների վարակիչ էպիդիդիմիտ (Epididymitis infectiosa arietum), քրոնիկ ինֆեկցիոն... ... Անասնաբուժական հանրագիտարանային բառարան
Տես անուղղակի հեմագլյուտինացման ռեակցիա... Բժշկական մեծ բառարան
Արձագանքը տրվում է.
1) պոլիսախարիդների, սպիտակուցների, բակտերիաների էքստրակտների և այլ բարձր ցրված նյութերի, ռիկետսիայի և վիրուսների հայտնաբերման համար, որոնց ագլյուտինինների հետ բարդույթները սովորական ՌՀ-ներում չեն նկատվում.
2) հիվանդների շիճուկներում հակամարմիններ հայտնաբերել այս խիստ ցրված նյութերի և փոքր միկրոօրգանիզմների նկատմամբ:
Անուղղակի կամ պասիվ ագլյուտինացիան հասկացվում է որպես ռեակցիա, որի ժամանակ հակամարմինները փոխազդում են անտիգենների հետ, որոնք նախապես կլանված են իներտ մասնիկների վրա (լատեքս, բջջանյութ, պոլիստիրոլ, բարիումի օքսիդ և այլն կամ ոչխարի կարմիր արյան բջիջներ, I (0) - մարդու արյան խումբ)
Պասիվ հեմագլյուտինացման ռեակցիայի (RPHA) դեպքում. կարմիր արյան բջիջները. Հակագենով բեռնված կարմիր արյան բջիջները կպչում են այս անտիգենին հատուկ հակամարմինների առկայության դեպքում և նստում են: Հակագենով զգայուն էրիթրոցիտները օգտագործվում են RPGA-ում որպես էրիթրոցիտների ախտորոշիչ հակամարմինների հայտնաբերման համար (սերոդիագնոզ): Եթե արյան կարմիր բջիջները բեռնված են հակամարմիններով (էրիթրոցիտային հակամարմիններ diagnosticum), այն կարող է օգտագործվել անտիգենները հայտնաբերելու համար:
Բրինձ. 3. RPGA սխեման. կարմիր արյան բջիջները (1), բեռնված հակագենով (3), կապված են հատուկ հակամարմիններով (4):
Բեմականացում. Պոլիստիրոլային թիթեղների հորերում պատրաստվում են շիճուկի սերիական նոսրացումներ։ Նախավերջին հորին ավելացրեք 0,5 մլ ակնհայտ դրական շիճուկ, իսկ վերջին հորին` 0,5 մլ ֆիզիոլոգիական լուծույթ (հսկիչ): Այնուհետև բոլոր հորերին ավելացվում է 0,1 մլ նոսրացված էրիթրոցիտային դիագնոստիկ, թափահարում և 2 ժամով տեղադրվում թերմոստատի մեջ։
Հաշվապահություն. IN դրական դեպքէրիթրոցիտները տեղավորվում են անցքի ներքևում՝ ծալված կամ ատամնավոր եզրով բջիջների հավասար շերտի տեսքով (շրջված հովանոց), բացասականը՝ դրանք նստում են կոճակի կամ օղակի տեսքով։
Նկ.4. RNGA (RPGA) հաշվառում:
Բոտուլինի տոքսին հայտնաբերելու համար կատարված ռենտգենյան թեստի արդյունքների հաշվառում:
Բոտուլիզմի հարուցիչը՝ Clostridium botulinum-ն արտադրում է յոթ սերովարների տոքսիններ (A, B, C, D, E, F, G), բայց A, B, E սերովարները ամենից հաճախ տարբերվում են հակագենային հատկություններով և կարող են տարբերվել տիպային շիճուկներ օգտագործող ռեակցիաներում: Այդ նպատակով հիվանդի շիճուկով կարող է իրականացվել պասիվ (անուղղակի) հեմագլյուտինացիոն ռեակցիա, որում ենթադրվում է տոքսինի առկայություն, իսկ կարմիր արյան բջիջները բեռնված են A, B, E տիպերի հակատոքսիկ հակաբոտուլինային շիճուկների հակամարմիններով: շիճուկը ծառայում է որպես հսկիչ:
Բրինձ. 3. RNGA-ի հայտարարություն և արդյունք:
Հաշվապահություն. Դրական դեպքում, արյան կարմիր բջիջները նստում են անցքի ներքևի մասում, ծալված կամ ատամնավոր եզրով բջիջների հավասար շերտի տեսքով (բացասական դեպքում դրանք նստում են կոճակի կամ օղակի տեսքով): .
Եզրակացություն. հիվանդի շիճուկում հայտնաբերվել է E տեսակի բոտուլինային տոքսին:
Հեմագգլուտինացման արգելակման ռեակցիա (HART):
Բրինձ. 8. Հեմագլյուտինացիայի արգելակման ռեակցիա (HAI) (սխեմա).
Ռեակցիայի սկզբունքը հիմնված է AT-ի՝ տարբեր վիրուսներ կապելու և դրանք չեզոքացնելու ունակության վրա՝ անհնարին դարձնելով արյան կարմիր բջիջների ագլյուտինացումը։ Տեսողականորեն այս ազդեցությունը դրսևորվում է հեմագլյուտինացիայի «արգելակման» մեջ։ RTGA-ն օգտագործվում է վիրուսային ինֆեկցիաների ախտորոշման մեջ՝ սպեցիֆիկ հակահեմագգլուտինինների հայտնաբերման և տարբեր վիրուսների նույնականացման համար իրենց հեագգլուտինիններով, որոնք ցուցադրում են Ag-ի հատկությունները:
Վիրուսային տիպավորումն իրականացվում է RTGA ռեակցիայի մեջ՝ տիպային հատուկ շիճուկների հավաքածուով: Ռեակցիայի արդյունքները հաշվի են առնվում հեմագլյուտինացիայի բացակայությամբ։ A տիպի վիրուսի ենթատիպերը H0N1, H1N1, H2N2, H3N2 և այլ անտիգեններով կարող են տարբերակվել RTGA-ում մի շարք հոմոլոգ տիպային հատուկ շիճուկներով:
Բրինձ. 9. RTGA արդյունքներ գրիպի վիրուսի տիպավորման համար
Լեգենդ. - հեմագլյուտինացիայի արգելակում (կոճակ); - հեմագլյուտինացիա (հովանոց):
Եզրակացություններ. Ուսումնասիրվող նյութը պարունակում է գրիպի A տիպի վիրուս՝ H3N2 անտիգենով
Անուղղակի (պասիվ) հեմատագլյուտինացիոն ռեակցիան (IRHA) հիմնված է այն փաստի վրա, որ կարմիր արյան բջիջները, եթե լուծվող հակագենը ներծծվում է դրանց մակերեսին, ձեռք են բերում կծկվելու հատկություն, երբ փոխազդում են ներծծվող անտիգենի հակամարմինների հետ: RNGA դիագրամը ներկայացված է Նկ. 34. RNGA-ն լայնորեն կիրառվում է մի շարք վարակների ախտորոշման ժամանակ։
Բրինձ. 34. Պասիվ հեմագլյուտինացման ռեակցիայի (RPHA) սխեմա. A - ստացվում է էրիթրոցիտների ախտորոշում. B - RPGA. 1 - էրիթրոցիտ. 2 - հետազոտվող հակագեն; 3 - erythrocyte diagnosticum; 4 - հետազոտվող հակագենի հակամարմինը. 5 - ագլյուտինատ
Ռեակցիայի կարգավորում: Փորձարկման շիճուկը տաքացվում է 30 րոպե 56°C-ում, հաջորդաբար նոսրացվում է 1:10 - 1:1280 հարաբերակցությամբ և լցնում 0,25 մլ-ի մեջ փորձանոթների կամ հորերի մեջ, որտեղ 2 կաթիլ էրիթրոցիտային դիագնոստիկում (դրանց վրա ներծծված հակագենով էրիթրոցիտներ: ) այնուհետև ավելացվում են:
Վերահսկիչ միջոցներ. էրիթրոցիտների ախտորոշման կասեցում հայտնի իմունային շիճուկով; ախտորոշման կասեցում նորմալ շիճուկով; արյան նորմալ կարմիր բջիջների կասեցում թեստային շիճուկով: Առաջին հսկողության ժամանակ ագլյուտինացիա պետք է տեղի ունենա, երկրորդում և երրորդում՝ չառաջանա։
RIGA-ի միջոցով դուք կարող եք հայտնաբերել անհայտ հակագեն, եթե հայտնի հակամարմինները ներծծվում են կարմիր արյան բջիջների վրա:
Հեմագլյուտինացման ռեակցիան կարող է իրականացվել 0,025 մլ ծավալով (միկրոմեթոդ)՝ օգտագործելով Takachi միկրոտիտրատոր:
1. Ի՞նչ է դա ցույց տալիս: դրական արդյունք RHA կարմիր արյան բջիջների և վիրուսի առկայության համար փորձարկվող նյութի միջև:
2. Արդյո՞ք կարմիր արյան բջիջների ագլյուտինացիա տեղի կունենա, եթե դրանց ավելացնեն վիրուս և դրա համապատասխան շիճուկ: Ինչպե՞ս է կոչվում այն ռեակցիան, որը բացահայտում է այս երևույթը:
Զորավարժություններ
Հաշվի առեք և գրանցեք արդյունքը ՌԻԳԱ.
Տեղումների ռեակցիա
Տեղումների ռեակցիայի ժամանակ նստվածք է առաջանում սպեցիֆիկ իմունային համալիր, որը բաղկացած է լուծելի անտիգենից (լիզատ, էքստրակտ, հապտեն) և էլեկտրոլիտների առկայության դեպքում հատուկ հակամարմին։
Այս ռեակցիայի արդյունքում առաջացած պղտոր օղակը կամ նստվածքը կոչվում է նստվածք։ Այս ռեակցիան հիմնականում տարբերվում է ագլյուտինացիոն ռեակցիայից անտիգենի մասնիկների չափերով։
Տեղումների ռեակցիան սովորաբար օգտագործվում է մի շարք վարակների ախտորոշման ժամանակ անտիգենը որոշելու համար ( սիբիրախտ, մենինգիտ և այլն); դատաբժշկական բժշկության մեջ՝ որոշելու արյան տեսակները, սերմնաբջիջները և այլն; սանիտարահիգիենիկ ուսումնասիրություններում - ապրանքների կեղծման հաստատման ժամանակ. նրա օգնությամբ որոշվում է կենդանիների և բույսերի ֆիլոգենետիկ հարաբերությունները։ Ռեակցիայի համար անհրաժեշտ է.
1. Հակամարմիններ (precipitins) - իմունային շիճուկ հետ բարձր տիտրհակամարմիններ (1:100000-ից ոչ ցածր): Տեղում շիճուկի տիտրը որոշվում է հակագենի ամենաբարձր նոսրացումով, որի հետ այն արձագանքում է: Շիճուկը սովորաբար օգտագործվում է չնոսրացված կամ 1:5 - 1:10 նոսրացումով:
2. Հակագեն - սպիտակուցային կամ լիպոիդ պոլիսախարիդային բնույթի լուծված նյութեր (լիարժեք անտիգեններ և հապտեններ):
3. Իզոտոնիկ լուծույթ.
Տեղումների ռեակցիան իրականացնելու հիմնական մեթոդներն են՝ օղակաձև տեղումների ռեակցիան և տեղումների ռեակցիան ագարում (գել):
Ուշադրություն. Տեղումների ռեակցիայի մեջ ներգրավված բոլոր բաղադրիչները պետք է լիովին թափանցիկ լինեն:
Օղակաձեւ տեղումների ռեակցիա. Օգտագործելով Pasteur pipette, տեղումների խողովակի մեջ ավելացրեք 0,2-0,3 մլ (5-6 կաթիլ) շիճուկ (շիճուկը չպետք է ընկնի խողովակի պատերին): Նույն ծավալով հակագենը խնամքով շերտավորվում է շիճուկի վրա՝ բարակ Պաստերի պիպետտով լցնելով փորձանոթի պատի երկայնքով։ Փորձանոթը պահվում է թեքված վիճակում։ Երբ պատշաճ շերտավորվում է, պետք է լինի հստակ սահման շիճուկի և հակագենի միջև: Զգուշորեն, որպեսզի հեղուկը չխառնվի, փորձանոթը դրեք տակդիրի մեջ։ Եթե ռեակցիան դրական է, ապա անտիգենի և հակամարմինի միջերեսում ձևավորվում է պղտոր «օղակ»՝ նստվածք (տես նկ. 48):
Ռեակցիան ուղեկցվում է մի շարք հսկողությամբ (Աղյուսակ 18): Շատ կարևոր է փորձանոթի մեջ ռեակցիայի բաղադրիչների ավելացման հաջորդականությունը: Դուք չեք կարող շերտավորել շիճուկը անտիգենի վրա (հսկողության մեջ՝ իզոտոնիկ լուծույթի վրա), քանի որ շիճուկի հարաբերական խտությունն ավելի մեծ է, այն կիջնի փորձանոթի հատակին, և հեղուկների միջև սահմանը չի բացահայտվի։
Աղյուսակ 18. Օղակաձեւ տեղումների ռեակցիայի ստեղծման սխեմա
Նշում. + «մատանի» առկայությունը; - «մատանի» բացակայություն:
Արդյունքները գրանցվում են 5-30 րոպե հետո, որոշ դեպքերում՝ մեկ ժամ հետո, ինչպես միշտ՝ սկսած հսկիչներից։ 2-րդ փորձանոթի «օղակը» ցույց է տալիս իմունային շիճուկի մեջ մտնելու ունակությունը կոնկրետ ռեակցիահամապատասխան անտիգենով: 3-5 փորձանոթներում չպետք է լինեն «օղակներ». չկան միմյանց համապատասխան հակամարմիններ և անտիգեններ։ 1-ին խողովակի «օղակը»՝ դրական ռեակցիայի արդյունքը, ցույց է տալիս, որ թեստի անտիգենը համապատասխանում է վերցված իմունային շիճուկին, «մատանի» բացակայությունը («մատանի» միայն 2-րդ խողովակում) ցույց է տալիս դրանց անհամապատասխանությունը՝ բացասական։ ռեակցիայի արդյունքը.
Տեղումների ռեակցիա ագարում (գել). Ռեակցիայի առանձնահատկությունն այն է, որ հակագենի և հակամարմինների փոխազդեցությունը տեղի է ունենում խիտ միջավայրում, այսինքն՝ գելի մեջ: Ստացված նստվածքը պղտոր շերտ է տալիս միջավայրի հաստության մեջ: Գոտու բացակայությունը ցույց է տալիս ռեակցիայի բաղադրիչների անհամապատասխանությունը: Այս ռեակցիան լայնորեն կիրառվում է կենսաբժշկական հետազոտություններում, մասնավորապես դիֆթերիայի հարուցիչում տոքսինների առաջացման ուսումնասիրության մեջ։
Վերահսկիչ հարցեր
1. Ո՞րն է ագլյուտինացիայի և տեղումների ռեակցիաների հիմնական տարբերությունը:
2. Ինչու՞ չի կարելի պղտոր բաղադրիչները օգտագործել տեղումների ռեակցիայի մեջ:
Զորավարժություններ
1. Սահմանեք օղակաձև տեղումների արձագանքը և ուրվագծեք արդյունքը:
2. Ուսումնասիրեք հակագենի փոխազդեցության բնույթը հակամարմինների հետ ագարում տեղումների ռեակցիայի ժամանակ, ուրվագծեք արդյունքը (ձեր ուսուցչից մի բաժակ ստացեք):
Լիզիսի ռեակցիա (իմունային ցիտոլիզ)
Իմունային լիզիսը հակամարմինների ազդեցության տակ բջիջների տարրալուծումն է, երբ պարտադիր մասնակցությունլրացնում. Ռեակցիայի համար անհրաժեշտ է.
1. Հակագեն՝ մանրէներ, կարմիր արյան բջիջներ կամ այլ բջիջներ։
2. Հակամարմին (լիզին) - իմունային շիճուկ, ավելի քիչ հաճախ հիվանդի շիճուկ: Բակտերիոլիտիկ շիճուկը պարունակում է հակամարմիններ, որոնք մասնակցում են բակտերիաների լիզմանը. հեմոլիտիկ - հեմոլիզիններ, որոնք նպաստում են կարմիր արյան բջիջների լիզմանը; սպիրոխետների լիզի համար անհրաժեշտ են սպիրոխետոլիզիններ, բջիջներ՝ իտոլիզիններ և այլն։
3. Լրացում. Առավելագույնը լրացնում է շիճուկում ծովախոզուկներ. Այս շիճուկը (մի քանի կենդանիների խառնուրդ) սովորաբար օգտագործվում է որպես հավելում։ Թարմ (հայրենի) հավելումը անկայուն է և հեշտությամբ քայքայվում է տաքացման, թափահարման կամ պահեստավորման արդյունքում, ուստի այն կարող է օգտագործվել ստանալուց հետո ոչ ավելի, քան երկու օր հետո: Կոմպլեմենտը պահպանելու համար դրան ավելացվում է 2% բորի թթուև 3% նատրիումի սուլֆատ: Այս հավելումը կարող է պահվել 4°C ջերմաստիճանում մինչև երկու շաբաթ: Ամենից հաճախ օգտագործվում է չոր լրացում: Օգտագործելուց առաջ այն լուծվում է իզոտոնիկ լուծույթում մինչև սկզբնական ծավալը (նշված է պիտակի վրա):
4. Իզոտոնիկ լուծույթ.
Հեմոլիզի ռեակցիա(Աղյուսակ 19): Ռեակցիայի համար անհրաժեշտ է.
1. Հակագեն - լվացված ոչխարի էրիթրոցիտների 3% կասեցում 0,3 մլ էրիթրոցիտային նստվածքի և 9,7 մլ իզոտոնիկ լուծույթի չափով:
2. Հակամարմին - հեմոլիտիկ շիճուկ (հեմոլիզին) ոչխարի էրիթրոցիտների դեմ; սովորաբար պատրաստվում է արտադրության մեջ, լիոֆիլացված և պիտակի վրա նշված տիտրը:
Հեմոլիզինի տիտրը շիճուկի ամենաբարձր նոսրացումն է, որի դեպքում կոմպլեմենտի առկայության դեպքում տեղի է ունենում կարմիր արյան բջիջների 3% կասեցման ամբողջական հեմոլիզ: Հեմոլիզի ռեակցիայի համար հեմոլիզինը վերցվում է եռակի տիտրով, այսինքն՝ նոսրացվում է 3 անգամ ավելի քիչ, քան տիտրից առաջ: Օրինակ, շիճուկի տիտրով 1:1200, շիճուկը նոսրացվում է 1:400 (0,1 մլ շիճուկ * և 39,9 մլ իզոտոնիկ լուծույթ): Հեմոլիզինի ավելցուկը անհրաժեշտ է, քանի որ դրա մի մասը կարող է կլանվել ռեակցիայի այլ բաղադրիչներով:
* (Դուք չպետք է ընդունեք 0,1 մլ-ից պակաս շիճուկ - չափման ճշգրտությունը կտուժի:)
3. Կոմպլեմենտը նոսրացվում է 1:10 (0,2 մլ կոմպլեմենտ և 1,8 մլ իզոտոնիկ լուծույթ):
4. Իզոտոնիկ լուծույթ.
Աղյուսակ 19. Հեմոլիզի ռեակցիայի սխեման
Արդյունքների հաշվառում: Եթե ռեակցիան ճիշտ իրականացվի, 1-ին փորձանոթում հեմոլիզ կառաջանա՝ դրա պարունակությունը կդառնա թափանցիկ։ Վերահսկիչ սարքերում հեղուկը մնում է պղտոր. 2-րդ խողովակում բավականաչափ կոմպլեմենտ չկա, որպեսզի հեմոլիզը տեղի ունենա, 3-րդ խողովակում չկա հեմոլիզին, 4-րդ խողովակում չկա ոչ հեմոլիզին, ոչ էլ կոմպլեմենտ, 5-րդ խողովակում հակագենն է: չի համապատասխանում հակամարմիններին,
Անհրաժեշտության դեպքում հեմոլիտիկ շիճուկը տիտրվում է հետևյալ սխեմայի համաձայն (Աղյուսակ 20):
Նախքան տիտրումը պատրաստել շիճուկի սկզբնական նոսրացում 1:100 (0,1 մլ շիճուկ և 9,9 մլ իզոտոնիկ լուծույթ), որից. անհրաժեշտ նոսրացումներ, Օրինակ:
Այս նոսրացումներից ավելացրեք 0,5 մլ շիճուկ տիտրման փորձանոթների մեջ, ինչպես ցույց է տրված Աղյուսակում: 20.
Աղյուսակ 20. Հեմոլիտիկ շիճուկի տիտրման սխեման (հեմոլիզին)
Աղյուսակում տրված օրինակում. 20, հեմոլիտիկ շիճուկի տիտրը 1:1200 է:
Թարմ հեմոլիտիկ շիճուկ օգտագործելիս այն պետք է ապաակտիվացվի՝ դրանում առկա կոմպլեմենտը ոչնչացնելու համար: Դա անելու համար այն ջեռուցվում է 30 րոպե 56 ° C ջերմաստիճանում ջրային բաղնիքում կամ թերմոստատով ինակտիվատորում: Վերջին մեթոդն ավելի լավն է. այն վերացնում է շիճուկի գերտաքացման հնարավորությունը, այսինքն՝ նրա դենատուրացիա։ Դենատուրացված շիճուկները պիտանի չեն փորձարկման համար:
Բակտերիոլիզի ռեակցիա. Այս ռեակցիայի ժամանակ կոմպլեմենտը լիզում է բակտերիաները համապատասխան (հոմոլոգ) շիճուկի առկայության դեպքում: Ռեակցիայի սխեման սկզբունքորեն նման է հեմոլիզի ռեակցիայի սխեմային: Տարբերությունն այն է, որ երկու ժամ տևած ինկուբացիայից հետո բոլոր փորձանոթները ցանում են Petri ափսեների վրա՝ միկրոօրգանիզմի համար բարենպաստ միջավայրով, որն ընդունվում է փորձի մեջ՝ պարզելու, թե արդյոք այն լուծված է: Եթե փորձը ճիշտ է իրականացվում, 2-5 փորձանոթներից (հսկիչներից) մշակույթները պետք է առատ աճ ցույց տան: 1-ին փորձանոթից (փորձարկում) պատվաստման մեջ աճի բացակայությունը կամ թույլ աճը ցույց է տալիս մանրէների մահը, այսինքն, որ նրանք հոմոլոգ են հակամարմիններին:
Ուշադրություն. Բակտերիոլիզի ռեակցիան պետք է իրականացվի ասեպտիկ պայմաններում:
Վերահսկիչ հարցեր
1. Ի՞նչ կլինի կարմիր արյան բջիջների հետ, եթե նատրիումի քլորիդի իզոտոնիկ լուծույթի փոխարեն օգտագործվի թորած ջուր: Ո՞րն է այս երեւույթի հիմքը։
2. Ի՞նչ ռեակցիա կառաջանա, երբ էրիթրոցիտները փոխազդում են հոմոլոգ իմունային շիճուկի հետ կոմպլեմենտի բացակայության դեպքում:
Զորավարժություններ
Կարգավորեք հեմոլիզի ռեակցիան: Ձայնագրեք և ուրվագծեք արդյունքը:
Առնչվող տեղեկություններ.
