Produk seksual dikumpulkan dari ikan dengan tiga cara: metode penyaringan, metode pembedahan, dan metode gabungan.
Mengejan.
Sebelum disaring, bagian perut dan sirip dubur dilap dengan kain kering (Gbr. 1), kemudian kepala ikan dan sirip dubur dibalut dengan kain kering lainnya. Jika ikannya kecil, maka penyaringannya bisa dilakukan oleh satu orang. Kepala ikan ditekan dengan siku tangan kiri ke badan, dan dengan tangan tersebut tangkai ekor dipegang sedemikian rupa sehingga lubang alat kelamin berada di atas tepi piring bersih (enamel atau plastik). baskom), dan perutnya agak melengkung ke luar. Dari tekanan dinding rongga perut sebagian kaviar terlepas dari lubang alat kelamin, jatuh di tepi piring dan mengalir ke bawah. Jangan biarkan telur langsung jatuh ke dasar wadah, karena mudah rusak. Setelah aliran bebas telur terhenti, perut betina diremas sedikit dan dipijat dengan jari tangan kanan ke sirip dubur. Ketika gumpalan kaviar dan tetesan darah muncul, pengejanan dihentikan. Jika betinanya besar, maka telurnya disaring oleh dua orang: yang satu memegang kepala ikan, yang lain memegang tangkai ekor di tepi piring dan sekaligus menyaring telur dengan tangannya yang bebas. Metode penyaringan berhasil digunakan pada ikan salmon, ikan mas, bandeng, Hering dan lainnya ikan sturgeon ah (sterlet).
Dari ikan pemijahan porsi, kaviar diambil dengan cara disaring.
Gambar.1. Saring kaviar
Sperma juga disaring dengan cara yang sama. Laki-laki dewasa dipegang di atas piring dan perutnya dipijat sampai sperma mulai mengalir keluar dari lubang alat kelamin. Pada pria besar, sperma disaring menggunakan alat karet yang dimasukkan ke dalam lubang genital. Sperma matang dalam porsi, sehingga bila perlu dapat diambil dari pejantan beberapa kali. Dengan menggunakan metode penyaringan, sperma diambil dari semua jenis ikan jantan yang dibiakkan secara artifisial.
Pembukaan(Gbr. 2). Metode pembedahan digunakan untuk mengumpulkan kaviar dari ikan mati. Metode pengumpulan kaviar dari ikan sturgeon ini adalah yang paling umum.
Ikan sturgeon betina dewasa diimobilisasi dengan pukulan palu kayu, setelah itu dikeluarkan darahnya dengan memotong arteri ekor atau insang, dicuci dengan air dan dikeringkan. Untuk mencegah darah masuk ke dalam baskom berisi kaviar, tempat sayatan dibalut. Betina, siap untuk diseksi, digantung di kepala menggunakan lift khusus dan diamankan. Perut dipotong 15-20 cm di bawah lubang kelamin, sayatan dibuat dangkal dan agak ke samping garis tengah. Untuk menghindari kemungkinan hilangnya telur, ekor betina dipegang di atas panggul, dan sebagian telur yang matang mengalir bebas ke dalam panggul di sepanjang tepinya. Setelah itu, bagian perut dipotong hingga sirip tengah dan sisa telur yang terpisah bebas dipindahkan ke baskom. Anda juga bisa menggunakan telur jinak yang tersedia di saluran telur untuk pembuahan.
Gambar.2. Pemilihan kaviar dengan metode pembukaan
Metode gabungan. Dengan metode ini, semua operasi digabungkan, sebagian kaviar diambil dari ikan dengan cara disaring, dan sebagian lagi dengan cara dibuka, bagian yang tidak dapat diperoleh semata-mata karena alasan teknis.
DI DALAM Akhir-akhir ini Metode baru untuk mengumpulkan kaviar dari ikan sturgeon tersebar luas, disebut metode pengumpulan produk reproduksi intravital. I.A. Pada tahun 1969, Burtsev mengembangkan metode pengumpulan kaviar dari ikan sturgeon intravital; metode ini disebut “metode operasi caesar" Mereka ditawari pembukaan sebagian rongga perut ikan sturgeon hibrida betina, diikuti dengan penjahitan sayatan secara bedah. Metode ini kemudian diterapkan secara luas dalam budidaya ikan komersial. Sayatan kecil (10-15 cm) dibuat di atas anus betina dan telur dapat dikumpulkan melaluinya. Namun, metode ini memerlukan banyak tenaga kerja dan tidak semua produsen dapat bertahan dalam operasi ini.
Saat ini, metode “sayatan saluran telur” banyak digunakan (Podushka, 1986). Setelah ikan sturgeon betina matang, dibuat sayatan di salah satu saluran telur. Ovarium ikan sturgeon tidak memiliki rongga sendiri dan kaviar, setelah matang, langsung masuk ke rongga tubuh. Saluran telur adalah dua tabung panjang yang terletak di bagian dorsolateral rongga perut. Setelah dibuat sayatan di bagian ekor salah satu saluran telur, sel telur yang berovulasi dapat mengalir ke lubang genital langsung dari rongga tubuh, melewati saluran telur. Kedalaman penyisipan pisau bedah ke dalam saluran telur tergantung pada ukuran ikan, dari satu hingga beberapa sentimeter. Telur mengalir bebas dari lubang alat kelamin. Pemotongan saluran telur cukup dilakukan operasi sederhana dan tingkat kelangsungan hidup ikan di lapangan mendekati 100%. Metode ini banyak digunakan di banyak peternakan ikan sturgeon (Gbr. 3).
Memperoleh indukan dewasa yang sel telur dan spermanya cocok untuk pembuahan - elemen penting bekerja pada pembiakan buatan ikan sturgeon.
Sebelumnya, memperoleh ikan seperti itu hanya dapat dilakukan di dekat tempat pemijahan alami atau langsung di tempat pemijahan, di mana penangkapan ikan khusus harus dilakukan. Dari ikan yang ditangkap, hanya sebagian kecil (tidak lebih dari 1-4%) yang memiliki sel telur dan sperma matang.
Dengan metode perolehan yang tidak bisa diandalkan produk matang mengorganisir pembiakan buatan dalam skala besar menjadi sangat sulit.
Metode ekologi dan fisiologis untuk merangsang pematangan produk reproduksi
Untuk memindahkan pembiakan ikan sturgeon ke rencana yang direncanakan, perlu menguasai proses pemindahan produsen ke kondisi pemijahan untuk mendapatkan telur matang dan sperma yang sama.
Ada dua cara untuk mengatasi masalah ini. Salah satunya - lingkungan - dikembangkan oleh Akademisi Akademi Ilmu Pengetahuan AzSSR A. N. Derzhavin. Ia berpendapat bahwa dalam beternak indukan, harus diciptakan kondisi lingkungan yang sesuai dengan alam tempat berkembangnya produk reproduksi. Karena di alam, telur dan sperma matang selama pemijahan ikan melawan aliran air, A. N. Derzhavin menilai faktor inilah yang menjadi faktor utama yang mempengaruhi percepatan pematangan hasil reproduksi. Dia merekomendasikan penggunaan kandang oval dengan panjang 25 m, lebar 6 m dan kedalaman hingga 1,2 m untuk memelihara dan mendapatkan pemijahan dewasa, di mana arus dibuat dan kondisi sungai disimulasikan (arus deras, dll.). Kerikil ditempatkan di dasar kandang tersebut. Persediaan air di dalam kandang bersifat mekanis, aliran air 20 l/s. Peningkatan sirkulasi air dilakukan dengan memasang dinding beton sepanjang 19 m di tengah keramba sepanjang, 50 ekor ikan ditempatkan di setiap keramba; perempuan dan laki-laki secara terpisah. Seiring dengan arus, kondisi suhu dan oksigen yang menguntungkan tercipta di dalam kandang. Namun, pengalaman dengan kandang seperti itu menunjukkan bahwa hanya sepertiga dari pemijahan yang matang di dalamnya, dan juga sulit untuk menentukan kapan harus mengambil kaviar.
Metode fisiologis untuk merangsang pematangan produk reproduksi, yang dikembangkan oleh Profesor N.L. Gerbilsky, tidak memiliki kekurangan ini. Hal ini didasarkan pada pengenalan persiapan kelenjar pituitari aseton ke dalam otot tubuh wanita dan pria yang ingin mereka peroleh sel telur atau sperma matang.
Penelitian telah menunjukkan bahwa dalam tubuh ikan, pengatur penting pematangan sel germinal adalah pelengkap otak - kelenjar pituitari, yang menghubungkan sistem saraf tubuh dengan gonad. Kelenjar pituitari, kelenjar endokrin, menghasilkan zat khusus - hormon, di bawah pengaruh transisi produsen ke keadaan pemijahan.
Kelenjar pituitari terdiri dari dua bagian: otak - neurohipofisis dan kelenjar - adenohipofisis. Hormon gonadotropik diproduksi oleh sel kelenjar adenohipofisis.
Hasil terbaik diperoleh dengan menggabungkan metode ekologi dan fisiologis dalam merangsang fungsi seksual produsen ikan sturgeon. Kombinasi tersebut dilakukan dengan urutan sebagai berikut: pertama, indukan dipelihara di reservoir khusus, kemudian dilakukan penyuntikan hipofisis.
Jigging farm untuk menjaga produsen
Produsen dipelihara di reservoir khusus yang diperuntukkan bagi ikan jigging. Ada dua jenis utama peternakan jigging. Salah satunya dirancang oleh Prof. B. N. Kazansky, yang kedua - oleh petani ikan Kura (peternakan keramba tipe Kurin).
Fasilitas jigging pesisir dirancang oleh B. N. Kazansky. Peternakan keramba yang dirancang oleh B. N. Kazansky memiliki kolam tanah untuk cadangan jangka panjang dan kolam keramba beton yang terletak di dekatnya, dimaksudkan untuk pemeliharaan jangka pendek bagi para peternak.
Betina dan jantan dipelihara secara terpisah.
Kolam tanah terdiri dari dua bagian: bagian utama yang diperluas dengan kedalaman hingga 2,5 m, dan bagian yang menyempit dan lebih dangkal dengan kedalaman 0,5-1 m.Di bagian kolam ini diciptakan kondisi yang mensimulasikan pendekatan jangkauan pemijahan. Di bagian yang diperluas dengan kedalaman yang lebih besar, kondisinya mendekati kondisi lubang musim dingin.
Kolam betina mempunyai ukuran sebagai berikut: panjang 130 m (bagian melebar 100 m dan menyempit 30 m), lebar 20-25 m pada bagian melebar dan 4-6 m pada bagian menyempit. Bagian bawah bagian yang diperluas terbuat dari tanah, dan pada bagian yang menyempit dilapisi dengan batu-batuan halus kecil di atas beton yang sudah habis; Kerikil berserakan di persimpangan bagian yang melebar dan menyempit.
Pasokan air ke kolam bersifat mekanis, saluran masuk air berupa baki atau pipa beton bertulang. Air dialirkan melalui struktur drainase, yang menjamin drainase kolam secara menyeluruh dan kemampuan untuk mengalirkan berbagai ketinggian air. Ketinggian air diatur oleh sander. Aliran air konstan sebesar 30 l/s dapat ditingkatkan hingga 300 l/s.
Peternakan kandang tipe Kura. Merupakan kolam tanah berukuran 75x12 m, dibagi menjadi tiga bagian dengan menggunakan struktur partisi beton, di tengahnya terdapat lubang untuk memasang penutup.
Pada bagian pertama, panjang 105 m dan kedalaman 3 m, produsen disimpan dalam waktu lama - dari 1 hingga 1,5 bulan. Pengisian air berlangsung 10-12 jam, dan pembuangan 5-6 jam.
Ketika suhu pemijahan mendekati, pemijahan dipindahkan ke area kedua, yaitu kolam beton oval dengan dinding vertikal. Dalam kolam dengan panjang 7 m, lebar 5 m, dan kedalaman 1 m, dilakukan penahanan awal jangka pendek terhadap betina dan jantan sebelum penyuntikan (1-3 hari). Peralihan dari bagian pertama ke bagian kedua dilakukan dalam bentuk pendakian yang mulus: alat tangkap - tarikan, yang digunakan untuk menangkap pemijahan, ditarik sepanjang pemandu khusus dengan derek listrik dengan kendali jarak jauh. Bagian kedua diisi air dalam waktu 30 menit.
Di tempat ketiga, produsen disuntik dan dipelihara setelah penyuntikan hipofisis. Kawasan ini memiliki 2 buah kolam beton dengan dinding vertikal. Kolam berukuran panjang 5 m, lebar 3,5, kedalaman 1 m, pengisian dan pembuangan air membutuhkan waktu 15 menit. Ada kanopi di atas kolam. Pemindahan peternak dari bagian kedua ke bagian ketiga, serta pengirimannya ke departemen operasi, tempat kaviar diperoleh, dilakukan dengan kerekan listrik self-propelled dalam buaian.
Di awal musim semi, air hangat disuplai dari tangki pengendapan, yang memungkinkan ikan untuk disuntikkan ke dalam air yang lebih banyak tanggal awal. Produsen tinggal di kolam selama 1-3 hari. Pasokan dan pembuangan air dari kolam bersifat mandiri. Air dialirkan melalui pipa (flute) yang terletak di seberang kolam. Semburan air dari seruling diarahkan ke arah yang berlawanan. Sebagai hasil dari pasokan air ini, sistem oksigen meningkat.
50 ekor peternak ikan beluga, 80 ekor ikan sturgeon atau ikan sturgeon, dan 100 ekor ikan sturgeon bintang ditanam di kolam tersebut. Konsumsi air di kolam adalah 30 l/s. Petak ketiga ditutup dengan pagar kayu yang di sekelilingnya ditanami pohon.
Produsen pemanenan
Untuk penggunaan produsen yang lebih efisien dalam budidaya ikan sangat penting memiliki pengetahuan tentang kelompok biologis intraspesifik.
Studi tentang stok spesies ikan individu memungkinkan Acad. L. S. Berg menetapkan keberadaan kelompok biologis intraspesifik di beberapa di antaranya. Perkembangan lebih lanjut dari masalah ini adalah milik Prof. N.L.Gerbilsky.
Doktrin kelompok biologis intraspesifik didasarkan pada pengakuan fakta keanekaragaman hayati intraspesifik yang melekat pada semua spesies hewan dan tumbuhan. Pada ikan, hal ini terutama terkait dengan proses reproduksi dan dapat ditentukan dengan mengetahui waktu dan lokasi pemijahan, perbedaan siklus seksual, suhu pemijahan, kondisi pemijahan selama masuk ke sungai, dan lamanya pemijahan tinggal di sungai sebelum pemijahan.
Analisis biologis stok ikan sturgeon memungkinkan untuk memilih lokasi pembenihan ikan yang tepat, membantu menentukan waktu jigging dan pemeliharaan pemijahan, dan juga untuk menyelesaikan masalah kemungkinan memperoleh produk reproduksi matang dari mereka di daerah hilir. sungai dan pemanfaatan ganda kolam untuk memelihara ikan muda selama satu musim tanam. Mengetahui kelompok biologis intraspesifik, adalah mungkin untuk menetapkan jadwal musiman yang memungkinkan penggunaan reservoir dan peralatan perusahaan budidaya ikan secara paling rasional.
Sebagai contoh, mari kita berikan kelompok biologis ikan sturgeon Kura.
Profesor N.L. Gerbilsky dan B.N. Kazansky menemukan bahwa ketika indukan ikan sturgeon dari kelompok biologis yang berbeda disilangkan, vitalitasnya selama periode embrionik meningkat.
Penulis menemukan bahwa ikan muda yang diperoleh dari persilangan indukan ikan sturgeon dari kelompok biologis yang berbeda lebih unggul daripada ikan muda dari induk yang termasuk dalam kelompok biologis yang sama dalam banyak indikator budidaya ikan yang penting: mereka memberi makan lebih intensif dan tumbuh lebih cepat, mereka memiliki indeks kegemukan yang lebih tinggi, lebih tinggi kandungan protein dan unsur abu.
Pengadaan bibit ikan sturgeon yang termasuk dalam kelompok biologi berbeda untuk keperluan budidaya ikan dilakukan pada waktu yang berbeda-beda.
Jadi, ikan sturgeon awal musim semi dipanen di delta Volga pada paruh kedua April - awal Mei dan digunakan untuk mendapatkan produk seksual dewasa setelah cadangan jangka pendek pada bulan Mei. Ikan sturgeon musim dingin musim gugur dipanen pada bulan Oktober, dan kaviar serta sperma diperoleh darinya setelah periode penuaan yang lama pada paruh kedua bulan April tahun berikutnya.
- betina yang mendekati masa ovulasi memiliki tubuh yang kurus, lebih kecil ikan dewasa dia sangat kental dan berminyak;
- pada ikan dewasa, tangkai ekor (dari tepi belakang sirip punggung hingga awal bilah ekor) memiliki penampang oval, yaitu tingginya jauh lebih besar daripada lebarnya, yang menunjukkan bahwa ikan mengalami penurunan berat badan. Pada ikan yang kurang dewasa, tangkai ekor lebih tebal dan kurang tinggi;
- pada individu dewasa, moncongnya runcing akibat penurunan berat badan, pada ikan yang kurang dewasa, moncong dan seluruh kepalanya lebih tebal;
- Serangga pada ikan dewasa kurang tajam, kulitnya lebih banyak ditutupi lendir yang kental.
Untuk fokus pada tanda-tanda ini, Anda harus memiliki pengalaman luas bekerja dengan produsen.
AE Andronov (1979) mengembangkan metode pemilihan ikan sturgeon betina berdasarkan pengukuran telur. Di antara ikan sturgeon bintang betina yang bermigrasi ke sungai, banyak terdapat ikan yang kurang matang, yang di dalam gonadnya banyak terdapat kaviar kecil berkualitas rendah, sehingga perlu dilakukan seleksi betina yang memiliki kaviar terbesar. Telur diukur menggunakan probe yang mempunyai skala dengan nilai pembagian 2 mm dan tanda nol pada jarak 31 mm dari awal celah berdiameter 3 mm. Pada betina yang dipilih untuk tujuan budidaya ikan, 15 butir telur harus membentuk barisan yang berakhir setidaknya pada divisi kedua pada skala probe.
Pilihan kedua untuk memilih betina sturgeon bintang adalah dengan menentukan derajat polarisasi (posisi ekstrim) inti. Kaviar yang diambil dengan probe ditempatkan dalam cairan Serra (6 bagian formaldehida, 3 bagian alkohol, 1 bagian es asam asetat), dicuci dengan air dan dipotong dengan pisau cukur sepanjang sumbu hewan-vegetatif.
Posisi inti telur dinilai di bawah kaca pembesar 7x10 berdasarkan jarak inti ke cangkang kutub hewan. Ikan sturgeon bintang betina dianggap baik jika intinya telah menjauh dari posisi semula hingga jarak tidak melebihi jari-jari telur.
Peneliti di Lembaga Penelitian Perikanan Azov L.V. Badenko telah mengembangkan metode untuk memilih produsen berdasarkan indikator fisiologis, yang memungkinkan untuk menilai secara lebih obyektif nilai produsen untuk tujuan budidaya ikan. Metode ini didasarkan pada fakta bahwa ikan sturgeon, selama migrasi pemijahan, memasuki sungai dalam keadaan fisiologis yang berbeda. Hal ini disebabkan oleh kematangan produk reproduksi yang tidak merata dan tingkat yang berbeda akumulasi zat cadangan dalam tubuh mereka. Jadi, menurut L.F. Golovanenko, peternak yang kelelahan yang tidak cocok untuk memperoleh kaviar dan sperma, serta individu yang memiliki produk seksual dalam tahap kematangan IV yang tidak lengkap, perlu dicadangkan, dan ikan dalam tahap IV yang selesai dapat disuntik. segera setelah panen di lokasi penambangan.
Jelas betapa pentingnya menilai indukan yang dipilih untuk budidaya ikan. Hal ini paling mudah dilakukan melalui tes darah. Ternyata jawaban paling jelas atas pertanyaan kualitas produsen dapat diberikan oleh indikator seperti kandungan hemoglobin dan komposisi protein serum. Berdasarkan mereka, L.V. Badenko merekomendasikan pemilihan produsen.
Pada awal masa pemijahan, ikan betina memiliki kadar lemak dan protein yang signifikan, tingkat metabolisme dan respirasi yang tinggi, sehingga ikan tersebut harus dipanen terlebih dahulu. Mereka biasanya memiliki kadar lemak, protein, metabolisme dan respirasi yang khas seperti ikan yang menghasilkan telur matang sepenuhnya.
Persiapannya dibuat dari hasil tangkapan pukat, memilih produsen dengan berat optimal untuk bekerja (tidak lebih dari 15-20 kg untuk ikan sturgeon dan sturgeon bintang dan 100 kg untuk beluga), tanpa cedera, memar, dll.
Saat menentukan massa ikan, dilarang menimbang produsen terpilih pada skala desimal di titik penerimaan, karena penimbangan tanpa air berdampak buruk pada kondisi ikan. Berat badan sebaiknya ditentukan dengan menggunakan tabel khusus yang menyediakan data perbandingan panjang dan berat badan.
Pemilihan umur produsen juga sangat penting. Menurut AA Popova, keturunan terbaik dihasilkan oleh ikan sturgeon yang bertelur untuk kedua dan ketiga kalinya.
Produsen dipersiapkan sedemikian rupa sehingga memiliki cadangan jika terjadi limbah selama transportasi dan penuaan: untuk ikan sturgeon beluga dan bintang dari 20 hingga 30% dan untuk ikan sturgeon dari 10 hingga 30% jumlah total produsen yang siap.
Produsen dipilih langsung dari jaring pendarat. Satu per satu, mereka ditempatkan dengan hati-hati di atas tandu kanvas dan dipindahkan ke kapal penangkap ikan hidup kecil (mattenka), yang dapat menampung tidak lebih dari 10 individu. Induknya dikirim ke kapal ikan hidup yang besar, di mana produsennya diangkut ke tempat penetasan ikan sturgeon. Di slot ikan hidup non-self-propelled tipe Astrakhan, ditanam 5 ekor beluga atau 10 ikan sturgeon, jumlah duri yang sama atau 16 ikan sturgeon bintang. Panjang slot tipe Astrakhan 13 m, lebar 5 m dan kedalaman 0,8 m, kecepatan pemuatan: satu sturgeon per 1,5-2 m 3, satu sturgeon per 1 m 3 dan satu beluga per 5-7 m 3. Untuk mencegah cedera pada ikan, rangka slot ditutup dengan papan datar.
Produsen yang diantar ke tempat pembenihan ikan diangkat ke dermaga menggunakan crane khusus dengan kapasitas angkat 500 kg. Ikan diangkut dalam buaian kanvas berisi air, digantung pada rangka tabung logam. Itu ditutupi dari atas dengan celemek kanvas.
Setelah diangkat ke dermaga, cradle segera dipasang pada dudukan berbentuk tabung di bagian belakang mobil atau sasis self-propelled dan diangkut ke kolam. Cradle juga dapat dipindahkan dengan angkutan monorel listrik. Kemudian buaian beserta ikannya diturunkan sepanjang bidang miring ke dalam reservoir. Ikan juga dapat diangkut dan dibongkar menggunakan monorel dan kerekan kargo. Dengan cara pengangkutan ini, buaian bersama produsen dikeluarkan dari sasis dengan menggunakan kerekan, dipindahkan ke atas kolam dan kemudian diturunkan. Jalur monorel dengan kerekan listrik juga digunakan untuk transportasi pabrikan di dalam pabrik.
Dari kolam pemijahan ditangkap dengan alat tangkap tarik (alat tangkap tegang) yang dilengkapi pelampung dan pemberat. Pelampung terdiri dari pelampung busa yang diletakkan di atasnya. Pemberat yang terbuat dari tanah liat yang dibakar dipasang pada rangka bawah. Balok kayu yang disebut cerewet diikatkan pada ujung sayap. Panjang hambatannya 40-50% lebih besar dari lebar kolam, dan tingginya 30-40% lebih besar dari kedalaman terbesar waduk.
Ikan biasanya ditangkap dalam satu cetakan memanjang. Mereka menarik pukat pada bagian tepi kedua sisi waduk. Penenggelaman dilakukan pada area dangkal di bagian hulu kolam. Tempat tenggelamnya diperkuat dengan timbunan batu dan kerikil. Jalur kerekan di atas kepala dihubungkan ke bagian ini untuk mekanisasi pengangkatan produsen.
Pemijahan yang tertangkap ditempatkan dalam buaian atau tandu dan dibawa ke kerekan, yang kemudian mengantarkan ikan ke keramba tempat pemijahan disuntik.
Setelah digunakan, drag digantung di gantungan hingga kering.
Persiapan kelenjar pituitari
Kelenjar pituitari paling baik dipanen pada musim semi, selama musim kawin. Pada saat ini, produk reproduksi ikan berada pada tahap IV selesai dan jumlah maksimum hormon terakumulasi di kelenjar pituitari.
Tidak mungkin memanen kelenjar pituitari dari ikan yang dipijahkan, karena hormon yang sebelumnya terkandung di dalamnya dikonsumsi seluruhnya selama musim kawin. Kelenjar pituitari pada ikan yang belum dewasa tidak dapat digunakan untuk dipanen. Pada saat yang sama, TI Faleeva mencatat bahwa kelenjar pituitari dapat dipanen pada musim gugur dan musim dingin.
Untuk menghilangkan kelenjar pituitari, tengkorak ikan hidup atau segar dibuka dengan trephine yang terbuat dari baja, yaitu batang logam yang dilengkapi pegangan. Sebuah silinder dipasang di ujung bawah batang, yang dapat dipindahkan secara vertikal di sepanjang batang dan diamankan dengan sekrup. Pada dasar silinder terdapat gigi yang diasah dan dipasang yang memotong jaringan ketika trephine berputar. Diameternya 30mm. Untuk mendapatkan kelenjar pituitari dari beluga, digunakan trephina besar dengan diameter 35-40 mm.
Trephine diletakkan di tengah kepala ikan, di belakang mata. Untuk memasang trephine secara akurat, silinder diangkat hingga kapasitas penuh, sehingga ujung runcing bawah batang melampaui tepi silinder. Setelah itu, putar pegangannya dan, setelah melakukan beberapa putaran, angkat batang untuk menghindari kerusakan kelenjar pituitari. Kemudian trephine disekrup sepenuhnya dan potongan sumbat, yang terdiri dari tulang dan tulang rawan, dilepas. Sebuah lubang terbentuk di tutup tengkorak, yang ketika instalasi yang benar Trephine terletak di atas fossa hipofisis. Untuk mendapatkan kelenjar pituitari juga digunakan electrotrephine, yaitu bor listrik, yang sangat memudahkan dan mempercepat persiapan kelenjar pituitari.
Otak dan cairan dikeluarkan dari rongga tengkorak. Operasi persiapan berakhir di sini dan Anda dapat mulai mengangkat kelenjar pituitari.
Kelenjar pituitari diangkat menggunakan sendok Volkmann, yang memiliki tepi tajam dan pegangan panjang, yang digunakan dalam pembedahan. Dalam situasi apa pun Anda tidak boleh mengambil jaringan kelenjar dengan pinset, karena ini dapat merusak kelenjar pituitari dan membuatnya tidak cocok untuk injeksi. Dengan menggunakan sendok Volkmann, kelenjar pituitari dapat dengan mudah dikeluarkan dan dipindahkan ke dalam wadah. Kelenjar pituitari yang diangkat mengalami degrease dan dehidrasi, dimana aseton dituangkan ke dalam bejana dengan tutup (kendi) yang tertutup rapat. Setelah mengeluarkan setiap kelenjar pituitari, pemanen menempatkannya dalam aseton. Setelah semua kelenjar hipofisis diangkat, dimasukkan ke dalam aseton bagian baru selama 12 jam, kemudian ditiriskan kembali dan dituang bagian baru, yang degreasingnya terjadi setelah 6-8 jam. Kelenjar pituitari yang dikeluarkan dari botol dikeringkan di atas kertas saring.
Untuk mengobati kelenjar pituitari, hanya aseton anhidrat dan murni kimia yang dapat digunakan. Volume aseton harus 10-15 kali lebih besar dari massa kelenjar pituitari yang terkandung di dalamnya. Penggunaan kembali aseton jenuh air tidak dapat diterima.
Untuk penyimpanan jangka panjang, kelenjar pituitari yang sudah kering ditempatkan dalam kantong plastik dan diberi label.
Dianjurkan untuk memilih kelenjar pituitari dengan massa yang sama ke dalam kantong terpisah sehingga dalam kondisi lapangan di tempat pembenihan ikan, dosis yang digunakan dapat dihitung secara akurat.
Pengadaan kelenjar pituitari sebaiknya dilakukan secara terpusat untuk beberapa tanaman sekaligus dengan penentuan aktivitas gonadotropik obat yang dihasilkan dengan menggunakan benda uji.
Pengadaan terpusat oleh spesialis berpengalaman memungkinkan kami memastikan kelenjar pituitari berkualitas tinggi dan kemungkinan penggunaan dosis optimal.
Penentuan kualitas kelenjar pituitari
Untuk mengetahui jumlah hormon yang terletak di kelenjar hipofisis dan kualitas obat yang dihasilkan, dilakukan pengujian biologis yang bertujuan untuk menjelaskan berbagai reaksi organ hewan yang mendapat suntikan obat yang diteliti. Biasanya, loaches dan katak digunakan untuk pengujian biologis.
Setelah penyuntikan kelenjar pituitari, loach selalu memberikan reaksi yang jelas dan terukur. Penentuan satuan aktivitas kelenjar pituitari ikan dilakukan dengan menggunakan konsep loach unit (v.u.) yang ditetapkan oleh B.N. Kazansky.
satuan loach- ini adalah jumlah hormon gonadotropik yang diperlukan untuk menyebabkan, 50-80 jam setelah injeksi, pematangan telur dan ovulasi di musim dingin loaches betina tahap IV kematangan dengan berat 35-45 g pada suhu air 16-18 ° C dalam kondisi laboratorium.
Untuk mengetahui aktivitas uji sediaan hipofisis pada unit loach, beberapa kelompok betina secara bersamaan diberikan suntikan hipofisis dengan dosis kelenjar hipofisis yang berbeda. Dosis terendah, yang menyebabkan pematangan, dan berhubungan dengan unit loach. Mengetahui hal ini, Anda dapat membandingkan kandungan hormon gonadotropik di berbagai kelenjar pituitari.
Pemanfaatan loaches sebagai benda uji sulit dilakukan karena terbatasnya sebarannya di perairan alami.
Objek yang lebih mudah dijangkau adalah katak. Mereka dapat dengan mudah diperoleh dalam jumlah yang dibutuhkan kapan saja sepanjang tahun. Reaksi positif pada katak adalah munculnya sperma motil di kloaka setelah injeksi suspensi kelenjar pituitari ke dalam kantung limfatik dorsal. Reaksi ini terjadi sangat cepat - setelah 40-50 menit. Inilah keuntungan kedua bekerja dengan katak dibandingkan dengan loaches.
Katak jantan dipanen pada akhir musim gugur di tempat terkonsentrasinya mereka untuk musim dingin. Mereka disimpan dalam air pada suhu 1,5°C, aliran rendah dan cahaya rendah.
Pengujian obat harus dilakukan setiap tahun pada waktu yang sama. Jadi, di delta Volga mereka melakukan ini pada paruh pertama bulan Maret.
Katak dikeluarkan dari keadaan musim dingin dengan menaikkan suhu air secara perlahan dan menaikkannya setelah seminggu menjadi 16-18°C. Pengujian memberikan hasil terbaik pada suhu 18-23°C.
Pengecekan dilakukan sebagai berikut. Pertama, kumpulan 8-10 kelenjar pituitari, berbeda dalam warna dan ukuran, dipilih. Kemudian ditimbang pada neraca analitik dengan ketelitian 0,1 mg. Sediaan yang ditimbang digiling dalam mortar, dibasahi secara bertahap sampai diperoleh konsistensi krim yang homogen. Kemudian larutan garam ditambahkan ke dalam sediaan, dan suspensi siap untuk injeksi.
Penyuntikan dilakukan secara bersamaan pada 5 ekor katak. Sebanyak 3 kelompok katak diuji. Setiap kelompok disuntik dengan dosis tertentu: 0,2; 0,3 dan 0,4 mg sediaan kering kelenjar pituitari.
Indikator aktivitas biologis Persiapan uji kelenjar pituitari adalah dosis berat minimum yang menyebabkan reaksi sperma pada lebih dari separuh katak yang disuntikkan. Aktivitas biologis obat dihitung dengan membagi satuan dengan indikator berat dosis efektif minimum.
Satu unit katak(l.e.) adalah aktivitas dosis berat minimum obat yang menyebabkan sperma pada katak jantan.
Sediaan kelenjar hipofisis asetonat harus memiliki aktivitas standar yang diketahui sebelumnya, yaitu sebesar 3,3 unit katak.
Penggunaan obat ini akan memungkinkan Anda menggunakan kelenjar pituitari yang dipanen dengan lebih hemat. Selain itu, dalam kasus di mana, setelah injeksi kelenjar pituitari, pematangan produsen tidak diamati, analisis penyebab fenomena ini difasilitasi.
Perlu juga diingat bahwa dosis obat yang diberikan per satuan massa produsen harus dihitung dengan mempertimbangkan aktivitas biologis setiap kumpulan kelenjar pituitari.
Selain metode di atas untuk menentukan aktivitas kelenjar pituitari aseton, ada beberapa metode lain untuk pengujian tersebut. Secara khusus, B.F. Goncharov mengusulkan penggunaan sistem pematangan sel telur di luar tubuh untuk menentukan kualitas kelenjar pituitari. Pengecekan dilakukan sebagai berikut. Sampel kaviar diambil dengan probe dan ditempatkan dalam larutan fisiologis dengan larutan kristal albumin 0,1%. Suspensi kelenjar pituitari juga ditambahkan di sana. Jika betina siap untuk dewasa, maka vesikel embrionik akan larut.
Keuntungan dari metode yang diusulkan adalah sensitif, memungkinkan perolehan materi digital dalam jumlah besar, dan dapat digunakan langsung di tempat pembenihan ikan selama musim kerja sama dengan produsen.
Dengan metode ini, dosis kelenjar hipofisis yang disuntikkan dihitung dalam miligram kelenjar hipofisis asetonasi per 1 kg berat badan produsen atau dalam miligram per pria atau wanita.
Dosis yang tepat sangat menentukan kualitas produk seksual yang dihasilkan. Jika dosisnya tidak mencukupi, pematangan indukan tidak akan terjadi. Dengan peningkatan dosis obat hormonal, kualitas kaviar atau sperma menurun.
Pada suhu yang lebih rendah (dalam kisaran suhu pemijahan), dosis obat yang lebih tinggi diperlukan untuk pematangan pemijahan; pada suhu mendekati batas atas suhu pemijahan, jumlah obat hormonal berkurang. Untuk pria dewasa, dibandingkan wanita, obat hormonal yang harus diberikan lebih sedikit.
Tempat penetasan ikan sturgeon menerima kelenjar hipofisis asetonasi dengan aktivitas gonadotropik yang telah ditentukan. Namun, hal ini tidak selalu konstan. Ketika kelenjar pituitari disimpan selama lebih dari satu tahun, aktivitas gonadotropiknya menurun. Proses penurunan kualitas kelenjar pituitari diperlambat bila disimpan dalam wadah tertutup rapat di ruang kering pada suhu rendah.
Injeksi hipofisis
Kelenjar pituitari yang sudah kering digiling menjadi bubuk dengan alu dalam gelas bersih atau lesung porselen, kemudian ditimbang. dosis yang diperlukan pada neraca analitik atau torsi untuk setiap batch indukan yang disuntik secara terpisah untuk betina dan jantan.
Dosis yang ditimbang ditambahkan ke larutan fisiologis (6,5 g garam meja murni kimia dilarutkan dalam 1 liter air suling) dan digiling lagi. Kemudian sebagian larutan fisiologis lainnya ditambahkan ke massa ini sedemikian rupa sehingga terdapat 2 cm3 suspensi per produsen. Kemudian dikocok secara menyeluruh beberapa kali menggunakan jarum suntik dan dipindahkan ke botol dengan leher lebar dan penutup tanah.
Sebelum memulai penyuntikan, isi botol tercampur rata beberapa kali. Suspensi disuntikkan ke otot punggung dengan jarum suntik. Setelah penyuntikan, jarum dicabut dengan hati-hati. Tempat tusukan kulit ditekan dengan jari lalu dipijat sedikit. Hal ini harus dilakukan untuk menghindari kebocoran obat yang disuntikkan.
Ketika suhu air 2-3°C lebih rendah dari suhu pemijahan, dosis kelenjar pituitari ditingkatkan 30-50%.
Suntikan hipofisis memberikan hasil positif hanya bila produsen telah menyelesaikan tahap IV kematangan reproduksi. Indikator keadaan sel telur ini adalah perpindahan inti yang ada menuju saluran (mikropil) tempat sperma memasuki sel telur.
Tahap keempat pada pria ditandai dengan selesainya proses pembentukan sperma. Laki-laki seperti itu didominasi oleh sperma yang matang dan terbentuk sempurna.
Hasil yang baik diperoleh dengan suntikan tunggal obat asetonasi. Namun, terkadang cara-cara tersebut tidak cukup efektif. Situasi ini terjadi ketika keadaan umum produsen memburuk atau perkembangan telur belum selesai sepenuhnya. Dalam situasi seperti ini, terkadang disarankan untuk melakukan suntikan berulang dengan dosis kecil obat. Namun, kita harus selalu ingat bahwa peningkatan dosis obat kelenjar pituitari dibandingkan dengan yang berbasis ilmiah menyebabkan penurunan kualitas sel germinal dewasa yang dihasilkan. Hal ini dijelaskan oleh fakta bahwa bubuk kelenjar hipofisis aseton juga mengandung hormon yang tidak secara langsung dibutuhkan untuk pematangan sel germinal. Sebagai akibat, efek samping, tubuh mengalami ketegangan yang hebat (stres).
Keberhasilan suntikan hipofisis sangat bergantung pada cara peternak memeliharanya. Pada semua tahap operasi ini - sebelum, selama dan setelah memasukkan sediaan kelenjar pituitari ke dalam tubuh ikan - betina dan jantan harus ditangani dengan sangat hati-hati untuk mencegah cedera. Di reservoir yang diperuntukkan bagi peternak, harus ada sistem oksigen yang baik, betina dan jantan harus dipelihara secara terpisah. Sebelum diinjeksi, mereka dipindahkan ke kolam atau kandang beton kecil, tempat mereka dibuat kondisi optimal untuk menjamin pematangan produk reproduksi setelah masuknya obat hormonal ke dalam tubuh.
Penentuan waktu pematangan produsen
Setelah kelenjar pituitari masuk, ikan memulai masa pematangan (sampai diperoleh telur matang), yang lamanya tergantung pada suhu air dan keadaan awal betina.
A. S. Ginzburg dan T. A. Detlaf menemukan bahwa pada suhu rata-rata yang sama, masa pemasakan selalu jauh lebih pendek dibandingkan masa perkembangan embrio (4-6 kali). Oleh karena itu, dengan peningkatan atau penurunan suhu, durasi periode pematangan dan perkembangan embrio juga berubah. Identifikasi pola seperti itu memungkinkan A. S. Ginzburg dan T. A. Detlaff untuk membuat grafik kemungkinan waktu pematangan ikan sturgeon betina pada suhu yang berbeda tergantung pada durasi perkembangan embrio mereka.
Grafik menunjukkan kurva yang menunjukkan waktu kapan betina diharapkan menjadi dewasa setelah suntikan hipofisis. Dengan menggunakan grafik, Anda juga dapat menentukan waktu pengamatan betina dan pengambilan sampel dengan terlebih dahulu menghitung suhu rata-rata selama masa pematangan.
Perhitungannya dilakukan sebagai berikut. Pukul 19.00 malam menjelang hari penerimaan telur dan pukul 07.00 pagi hari pengambilan telur, dihitung suhu rata-rata, dimulai dari saat penyuntikan pemijahan. Lalu seterusnya sumbu horisontal temukan titik yang sesuai dengan suhu rata-rata selama periode pemasakan dan kembalikan garis tegak lurus dari titik tersebut hingga berpotongan dengan kurva. Titik perpotongan dengan kurva menunjukkan berapa jam kemudian betina pertama menjadi dewasa. Jumlah jam yang dihasilkan ditambahkan ke waktu penyuntikan dan waktu mulai melihat betina ditentukan. Titik perpotongan dengan kurva memungkinkan untuk menentukan waktu pematangan banyak betina dengan cara yang sama.
Dengan menggunakan jadwal ini, dimungkinkan untuk menentukan waktu penyuntikan suspensi kelenjar pituitari ke ikan sturgeon betina untuk mendapatkan kaviar pada waktu yang tepat untuk bekerja. Hasilnya, kerja sama dengan produsen disederhanakan, jumlah penayangan betina yang diperlukan berkurang, kualitas kaviar meningkat, dan kerugian akibat terlalu matang atau terlalu matang berkurang.
Saat menghitung indikator yang diperlukan, tentukan terlebih dahulu suhu rata-rata sehari sebelum penyuntikan. Kemudian, pada sumbu horizontal grafik pematangan betina, ditemukan titik yang sesuai dengan suhu ini, dan garis tegak lurus dipulihkan dari titik tersebut hingga berpotongan dengan kurva. Dari titik perpotongan, garis tegak lurus diturunkan ke sumbu vertikal dan dari situ ditentukan jumlah jam yang akan berlalu pada suhu rata-rata tertentu dari injeksi hingga pematangan betina pertama. Jumlah jam yang dihitung dengan cara ini dikurangi dari waktu mulai hari kerja dan diperoleh waktu dimana perempuan perlu disuntik.
Metode untuk menentukan tingkat kematangan gonad betina tanpa membuka ikan juga dikemukakan oleh V.Z.Trusov. Metode ini bermuara pada mengeluarkan beberapa sel telur dari ovarium wanita menggunakan probe. Mereka dipindahkan dengan pinset ke dalam tabung reaksi dengan formaldehida. Tabung dibawa ke ruangan tempat mikrotom pembekuan dipasang. Telur diletakkan di atas meja sehingga bagian pisau cukur mikrotom melewati kutub hewan dan vegetatifnya. Kemudian telur-telur tersebut dituangkan dengan air dari pipet mata, setelah itu meja ditutup dengan tutup logam dan bagian-bagiannya dibekukan dengan menambahkan karbon dioksida dari balon.
Bagian dibuat sampai inti terlihat jelas dengan mata telanjang atau di bawah kaca pembesar. Jika letaknya dekat dengan selaput, maka keadaan gonad betina berada pada tahap kematangan lengkap IV.
Metode penentuan tingkat kematangan gonad betina yang dikemukakan oleh V.Z.Trusov relatif sederhana, dapat diandalkan dan membutuhkan sedikit waktu: analisis satu sampel dapat dilakukan dalam 5-8 menit.
Kematangan betina juga dipantau melalui pengamatan langsung. Pengendalian ditingkatkan selama enam jam terakhir - periode pematangan yang paling mungkin terjadi pada suhu tertentu.
Metode ekspres yang lebih sederhana untuk menentukan kematangan gonad pada peternak ikan sturgeon dikembangkan oleh Prof. B. N. Kazansky, Yu. A. Feklov, S. B. Podushka dan A. N. Molodtsov. Inti dari metode ini adalah dengan menggunakan probe, sampel kaviar diambil dari bagian belakang ovarium, probe dimasukkan ke dalam rongga tubuh dengan sudut 30°, sehingga tidak menyentuh organ vital. Tongkat celup memiliki ujung yang berisi telur dan batang yang memungkinkan untuk dikosongkan.
Panjang total probe adalah 125 mm, ujungnya 65 mm, termasuk bagian runcingnya 20 mm. Diameter luar batang adalah 4,5 mm. Probe diakhiri dengan pegangan yang terletak tegak lurus terhadap batang. Untuk mengetahui tingkat penyelesaian tahap kematangan keempat, telur yang diekstraksi dengan probe direbus selama 2 menit. Telur yang sudah mengeras dipotong dengan silet pengaman sepanjang sumbu dari kutub hewan ke kutub vegetatif. Bagian tersebut diperiksa di bawah kaca pembesar atau teropong. Derajat polarisasi sel telur ditentukan oleh posisi inti relatif terhadap kutub hewan. Indeks polarisasi ditentukan dengan rumus yang dikemukakan oleh Yu A. Feklov: l = A/B, dimana l adalah indeks polarisasi; A adalah jarak dari inti ke cangkang; B adalah jarak terjauh sepanjang sumbu dari hewan ke kutub vegetatif.
Bagaimana nilainya lebih sedikit l, semakin terpolarisasi sel telur dan semakin besar penyelesaian tahap IV kematangan gonad. Polarisasi oosit terbesar diamati pada l = l/30: l/40.
Jika perut betina pada saat dipalpasi ternyata lebih lembut dibandingkan sebelum disuntik, maka hal ini menandakan kemungkinan pematangan sel telur pada individu tersebut. Untuk memastikannya, sebaiknya bawalah tandu ikan berisi air di bawah induk betina, angkat dan letakkan di atas kambing. Pada saat ini ikan melakukan gerakan tiba-tiba, dan jika telur sudah matang maka telur yang dikeluarkan di atas usungan dapat terlihat. Setelah betina tenang, dia dimiringkan dan perutnya diraba. Pada individu dewasa, ketika sepertiga bagian belakang perut dipijat, kaviar mengalir keluar dengan bebas dalam aliran.
Jadi, sebagaimana dikemukakan oleh A. S. Ginzburg dan T. A. Detlaf, indikator terbukanya betina adalah perut yang lunak, telur yang terlepas dalam aliran deras, dan retraksi dinding perut saat betina naik.
Penting untuk segera mendapatkan telur dari betina yang sudah dewasa.
Mendapatkan kaviar matang
Pekerjaan untuk memperoleh produk reproduksi matang, termasuk pengumpulan, pembuahan dan pencucian telur, dilakukan di departemen operasi, yang biasanya terletak di tempat penetasan. Memiliki peralatan untuk memperoleh hasil reproduksi seperti winch, penjepit, dan lemari es (KX-6B), yang didalamnya disimpan produsen tanpa kaviar dan sperma (kaviar dan sperma diperoleh sebelum diantar ke tempat pengadaan. ). Pada bagian operasi terdapat meja produksi berukuran 126x84x90 cm tipe SPSM-4.
Betina dewasa dipingsankan dengan pukulan kuat di hidung dengan palu kayu, setelah itu darahnya dikeringkan dengan memotong arteri ekor atau insang, dicuci dengan air dan dikeringkan. Untuk mencegah darah masuk ke dalam baskom berisi kaviar, tempat sayatan dibalut. Ikan yang siap dibuka diangkat kepalanya melalui palang atau balok dan diamankan. Bagian perut diiris dari bawah ke atas dari lubang kelamin sejauh 15-20 cm, sayatan dibuat dangkal dan agak ke samping garis tengah. Untuk menghindari kemungkinan hilangnya telur, ekor betina diletakkan di atas panggul. Sebagian kaviar yang matang mengalir bebas ke dalam baskom di sepanjang tepinya. Setelah itu, perut dipotong hingga sirip dada dan sisa telur yang terpisah bebas dipindahkan ke panggul. Anda juga bisa menggunakan telur jinak yang tersedia di saluran telur untuk pembuahan.
Banyaknya telur yang diperoleh tergantung dari berat badan betina.
Telur dari betina yang berbeda tidak tercampur. Semua operasi dengan kaviar dilakukan dengan sangat hati-hati. Kaviar hanya dapat dikumpulkan di baskom dengan enamel utuh. Kaviar yang ditampung tidak lebih dari 2 kg dalam baskom berkapasitas 12-15 liter.
Hanya telur matang yang dibuahi, yang harus dapat diidentifikasi.
Telur mentah berbeda dengan telur matang karena memiliki warna yang sama di semua area. Telur matang berubah warna dengan sangat lambat larutan air metilen biru. Larutan ini tidak mengubah warna telur mentah sama sekali, tetapi telur yang terlalu matang lebih cepat berubah warna dibandingkan telur matang. Metode penentuan kualitas pembiakan ikan kaviar sturgeon ini dikembangkan oleh M.F. Vernidub, profesor di Universitas Negeri Leningrad. Intinya sebagai berikut: 2 cm 3 kaviar (tanpa cairan rongga) ditempatkan dalam botol atau tabung reaksi tertutup rapat yang diisi dengan 10 cm 3 larutan metilen biru yang baru disiapkan (satu tetes larutan encer 0,05% cat per 10 cm 3 air), beberapa kali Kocok sekali dan perhitungkan waktu perubahan warna larutan.
Dalam beberapa kasus, perubahan warna tidak terjadi dalam jangka waktu yang biasa untuk kaviar dengan kualitas ini.
Menentukan kesiapan sel telur untuk pembuahan
L. T. Gorbacheva, seorang karyawan Institut Penelitian Perikanan Azov, mengusulkan untuk menilai kesiapan telur untuk pembuahan di pabrik berdasarkan tingkat lengketnya cangkang telur setelah pembuahan.
Untuk menentukan kapan mulai inseminasi telur yang telah dikeluarkan dari rongga tubuh betina, diambil 100-150 butir telur, diinseminasi dengan sperma, dan ditentukan waktu penempelan telur dalam sampel pada cawan petri. Setelah itu, menurut jadwal khusus, ditentukan waktu kapan semua telur harus diinseminasi. Untuk kaviar sturgeon, kondisi pembuahan terbaik adalah di mana setidaknya 90-95% dari semua telur yang telah dibuahi menempel dalam 9-16 menit; untuk kaviar sevruga keadaan ini setara dengan waktu 6-10 menit. Kaviar seperti itu berkembang secara normal.
Kaviar sturgeon yang terlalu matang mulai menempel setelah 4-6 menit, dan kaviar sturgeon bintang - setelah 2-4 menit. Telur tersebut menghasilkan peningkatan kematian selama masa inkubasi.
Untuk pemupukan hanya digunakan kaviar yang berkualitas tinggi, yang indikatornya adalah:
- adanya bintik di kutub embrio dengan warna yang berbeda dari separuh telur lainnya;
- bentuk telur yang bulat teratur dan berukuran sama, serta blastomer berwarna yang terbentuk setelah munculnya dua alur pembelahan;
- munculnya setelah 6-12 menit pada ikan sturgeon dan 5-10 menit pada ikan sturgeon bintang dari celah sempit antara kulit terluar dan telur dalam sampel kaviar yang dengan cepat dicuci dari cairan rongga (pada telur yang terlalu matang proses ini dimulai lebih awal, pada telur mentah telur - nanti);
- sejumlah telur tertentu; 1 g kaviar beluga dewasa harus mengandung 35-40 butir telur, sturgeon - 45-50 butir, sturgeon bintang - 75-90 butir.
Jika Anda menemukan kesalahan, silakan sorot sepotong teks dan klik Ctrl+Masuk.
Meliputi ginjal, gonad (gonad), saluran ekskresi dan organ luar.
Sistem kemih ikan
Ginjal sebagian besar ikan berpasangan, terdiri dari tubuh berbentuk pita berwarna merah tua yang membentang hampir di sepanjang rongga tubuh dan menempel erat pada tulang belakang.
Ginjal ikan memiliki saluran kemih yang berbelit-belit, yang dindingnya ditembus oleh kapiler. Darah vena mengalir melalui vena portal menuju ginjal ikan. Ginjal menyaring produk limbah dari darah, kemudian memasuki tubulus dan darah yang telah dimurnikan meninggalkan ginjal melalui vena kardinal.
Pada saat yang sama, dinding tubulus melihat penyerapan air, vitamin dan gula dari filtrat. Produk peluruhan dari tubulus masuk ke dalam ureter kandung kemih dan lebih jauh lagi (ikan jantan dari banyak ikan bertulang mengeluarkan urin melalui lubang di belakang anus, sedangkan teleost betina dan salmon jantan, pike, herring dan beberapa lainnya mengeluarkan urin melalui anus; pada ikan seperti ikan pari dan hiu, ureter terbuka ke dalam kloaka).
Lungfish dan ikan bertulang rawan telah memodifikasi saluran Müllerian (menjadi saluran telur), sedangkan saluran Wolffian hanya berperan sebagai ureter; pada pria mereka berfungsi sebagai ureter dan vas deferens. Saluran serigala ikan lain hanya berperan sebagai ureter, sedangkan saluran reproduksi kedua jenis kelamin merupakan saluran khusus yang hanya dimiliki ikan.
Sistem reproduksi ikan
Gonad(testis dan ovarium) ikan sebagian besar merupakan formasi berpasangan seperti pita atau kantung yang digantung pada lipatan peritoneum di rongga tubuh ikan. Varian bentuk gonad berbagai jenis ikan diekspresikan dalam fusi sebagian atau seluruhnya dari kelenjar berpasangan menjadi satu kelenjar tidak berpasangan (bertengger) atau dalam asimetri perkembangan yang diungkapkan secara khusus. Gonadnya bisa berbeda volume dan beratnya (ikan mas crucian perak), bisa jadi salah satunya hilang sama sekali.
Ovarium ikan
DI DALAM ovarium ikan kaviar terbentuk dan matang, yang terakumulasi di rongga ovarium, dapat ditempatkan di tengah (pada ikan bertengger) dan di samping (pada ikan mas). Ovarium ikan menyatu dengan saluran telur, yang mengeluarkan telur. Beberapa ikan (berbau, salmon, belut) memiliki ovarium terbuka dan telur yang matang jatuh ke dalam rongga tubuh, kemudian melalui saluran khusus dikeluarkan dari tubuh. Ada juga ikan vivipar (akuarium), anak-anaknya berkembang di ovarium.
Testis ikan
Testis ikan membentuk sperma. Sel reproduksi ikan yang matang dikeluarkan melalui vas deferens khusus lingkungan luar melalui pembukaan alat kelamin(pada tombak jantan, salmon) atau melalui lubang urogenital, yang terletak di belakang anus (pada sebagian besar ikan bertulang jantan).
Beberapa spesies ikan memiliki ujung vas deferens yang membesar, tempat terbentuknya vesikula seminalis.
Dari dinding bagian dalam testis terdapat tubulus seminiferus yang menyatu dengan saluran ekskretoris. Menurut letak tubulus tersebut, testis dibagi menjadi dua kelompok: percoid (sticleback, hinggap) dan cyprinoid (pike, carp, catfish).
Tubulus seminiferus pada testis tipe cyproid berbelit-belit pada berbagai bidang. Saluran ekskresi terletak di bagian atas testis dan tepi testis berbentuk membulat.
Tubulus seminiferus pada testis tipe perkoid menyimpang secara radial dari dinding testis, dan saluran ekskretoris terletak di tengah testis. Testis ini berbentuk segitiga.
Perkembangan sel germinal secara bertahap mengubah ukuran dan tampilan gonad.
Ada skala kematangan gonad, pakai yang mana tanda-tanda eksternal(ukuran dan penampilan), tingkat kematangan produk reproduksi ikan dapat ditentukan, yang sangat penting dalam budidaya ikan dan penelitian ilmiah.
EMBRIOLOGI
Kuliah 7
Sel kelamin pada ikan terbentuk di gonad – kelenjar seks. Sesuai dengan konsep modern, pada ikan, dasar sel germinal primer - gonosit - dipisahkan pada akhir gastrulasi. Sumbernya adalah endomesoderm primer, dan periblas adalah tempat perlindungan sementara sebelum dimulainya migrasi ke gonad. Ada kemungkinan sel germinal primer terdapat pada gonad ikan dewasa.
Proses perkembangan sel germinal betina disebut oogenesis. Gonosit berpindah ke dasar gonad betina, dan semua perkembangan lebih lanjut sel germinal betina terjadi di dalamnya. Struktur oogenesis pada dasarnya sama pada semua hewan. Sesampainya di ovarium, gonosit menjadi oogonia.
Oogonia adalah sel germinal yang belum matang yang mampu melakukan mitosis. Oogonia melaksanakan periode pertama oogenesis - periode reproduksi. Selama periode ini, oogonia membelah secara mitosis. Jumlah divisi bergantung pada spesies tertentu. Pada ikan dan amfibi, periodisitas pembelahan mitosis oogonia dikaitkan dengan reproduksi musiman dan berulang sepanjang hidup.
Periode berikutnya Oogenesis adalah masa pertumbuhan. Sel kelamin pada periode ini disebut oosit orde pertama. Mereka kehilangan kemampuan untuk menjalani pembelahan mitosis dan memasuki profase I meiosis. Pada periode ini terjadi pertumbuhan sel germinal.
Ada tahap pertumbuhan kecil dan besar. Proses utama pada masa pertumbuhan besar adalah pembentukan kuning telur (vitellogenesis, vitellus - kuning telur).
Selama masa pertumbuhan kecil (previtellogenesis, pertumbuhan sitoplasma), volume nukleus dan sitoplasma meningkat secara proporsional dan tidak signifikan. Dalam hal ini, hubungan nuklir-sitoplasma tidak terganggu. Selama periode pertumbuhan besar (vitellogenesis), sintesis dan masuknya inklusi ke dalam sitoplasma sangat intensif, menyebabkan akumulasi kuning telur. Rasio nuklir-sitoplasma menurun. Seringkali telur selama periode ini bertambah besar dan ukurannya bertambah puluhan kali lipat (manusia), ratusan ribu kali lipat (katak, lalat buah) atau lebih (ikan hiu dan burung).
Jenis nutrisi sel telur berikut ini dibedakan:
Tipe fagositik - ditemukan pada sel germinal hewan yang tidak memiliki gonad (spons, coelenterata). Dengan metode vitellogenesis fagositosis, oosit, yang bergerak melalui ruang antar sel, mampu memfagosit sel somatik tubuh.
Tipe soliter - ditemukan pada polip hidroid kolonial, echinodermata, cacing, serangga tak bersayap, lancelet. Dengan metode nutrisi soliter, oosit menerima bahan dari cairan selom dan dari gonad. Protein kuning telur disintesis di retikulum endoplasma, dan pembentukan butiran kuning telur terjadi di alat Golgi.
Jenis pencernaan - dilakukan dengan bantuan sel tambahan; dibagi menjadi nutrisi dan folikel.
Metode nutrisi nutrisi terdapat pada cacing dan artropoda. Di dalamnya, oosit di ovarium dikelilingi oleh trofosit (sel perawat), yang dihubungkan oleh jembatan sitoplasma. Sel yang bersentuhan dengan oosit menjadi oosit. jumlah yang besar sel saudara (sel pengumpan). Cara nutrisi folikular ditemukan pada sebagian besar hewan. Sel pembantu dalam metode nutrisi ini adalah sel gomatik di ovarium. Folikel, yaitu oosit bersama dengan sel-sel folikel tambahan, memasuki oogenesis. Sebagian besar kuning telur terbentuk karena asupan zat dari luar, dan oosit dengan sintesis kuning telur eksogen tumbuh dengan kecepatan tinggi. Di zona permukaan oosit, banyak muncul vesikel pinositik yang mengandung vitellogenin, prekursor protein kuning telur yang berasal dari darah.
Vitellogenin pada hewan yang berbeda disintesis di jaringan somatik yang berbeda dan, dalam proses evolusi, secara bertahap terkonsentrasi di organ yang ditentukan secara ketat. Pada vertebrata, vitellogenin diproduksi oleh hati betina. Vitellogenin disintesis oleh sel hati dan berada di bawah kendali hormonal.
Untuk memulai proses perkembangan embrio sejak sel telur dibuahi, beberapa persiapan untuk peristiwa ini dilakukan di dalam sel telur itu sendiri. Inti sel telur harus dibawa ke keadaan yang sesuai agar dapat menyatu dengan inti sperma; dalam hal ini, sebagian bahan kromosom dikeluarkan dari sel telur, berubah menjadi badan polar kecil (proses ini biasanya tidak selesai pada saat pembuahan, tetapi terhenti sementara). Selanjutnya isi sitoplasma sel telur menjadi cukup level tinggi organisasi; pada saat ini sifat simetri masa depan tampaknya telah ditentukan secara luas, meskipun kejadian lebih lanjut dapat mengubahnya. Jumlah kuning telur yang terkandung dalam sebutir telur sangat bervariasi; ini berfungsi sebagai faktor utama yang menentukan ukuran telur dan jenis penghancurannya. Pada beberapa hewan, khususnya lancelet dan manusia, telurnya mengandung sedikit kuning telur. Telur seperti itu bisa disebut oligolecithal. Jenis telur lainnya berukuran agak lebih besar dan mengandung kuning telur dalam jumlah sedang; mereka disebut mesolecithal. Telur mesolecithal yang khas termasuk telur katak; ini juga termasuk telur amfibi berekor, ikan paru-paru, ikan sirip pari bawah, dan lamprey.
Telur mesolecithal sangat umum di antara makhluk air primitif sehingga mungkin merupakan ciri khas vertebrata nenek moyang. Hiu dan pari, di satu sisi, dan reptil serta burung, di sisi lain, memiliki telur yang besar; disebut polilesithal karena sebagian besar sel ditempati oleh kuning telur, dan sitoplasma yang relatif kecil terkonsentrasi pada satu kutub.
Telur juga diklasifikasikan berdasarkan distribusi kuning telur di dalamnya. Pada beberapa telur, terutama telur oligolecithal, kuning telur didistribusikan secara merata ke seluruh sel; telur seperti itu disebut isolecithal. Dalam telur meso dan polilesithal, kuning telur dalam banyak kasus terkonsentrasi pada setengah telur; untuk telur yang mengapung di air - di bagian bawah. Telur seperti ini disebut telolecithal. Pada ikan bertulang modern, telur juga sangat kaya akan kuning telur, namun ukurannya bervariasi.
Konsentrasi kuning telur di satu belahan dengan jelas menunjukkan adanya organisasi, atau polaritas tertentu, di dalam telur: di ujung atasnya terdapat kutub hewan, dan di ujung bawah terdapat kutub vegetatif; Setengah bagian atas telur diisi dengan sitoplasma yang relatif transparan, dan bagian bawah diisi dengan kuning telur.
Telur ikan, seperti telur vertebrata, ukurannya sangat bervariasi, biasanya berupa sel bulat yang mengandung, selain nukleus dan sejumlah sitoplasma transparan, kuning telur yang berfungsi sebagai makanan bagi embrio yang sedang berkembang. Telur ikan biasanya berbentuk bulat, meski ada bentuk lain. Struktur telurnya adalah fitur karakteristik tidak hanya untuk genus, famili, tetapi juga untuk kategori yang lebih besar.
Telur ikan berbeda tidak hanya dalam bentuk, tetapi juga dalam ukuran, warna, ada tidaknya tetesan lemak, dan struktur cangkang. Ukuran telurnya sama dengan yang lain ciri-ciri morfologi, adalah karakteristik spesies yang stabil. Ikan besar bertelur dengan diameter lebih besar daripada ikan kecil, tetapi amplitudo fluktuasi ukuran telur tetap konstan untuk spesies tersebut bahkan di perairan yang berbeda, meskipun nilai rata-ratanya dapat bergeser ke satu arah atau lainnya.
Ukuran telur tergantung pada kandungan nutrisi di dalamnya - kuning telur dan bervariasi secara signifikan (dalam mm): sprat - 0,8-1,05, ikan mas - 1,4-1,5, ikan mas rumput - 2,0-2,5, ikan sturgeon Rusia - 3,0-3,5 , salmon - 5.0-6.0, chum salmon - 6.5-9.1, hiu kutub - 80 (tanpa kapsul), hiu paus - 670 (panjang dengan kapsul) .
Di antara sekian banyak ikan bertulang, telur terkecil merupakan ciri khas flounder, yang terbesar - untuk salmon, terutama chum salmon. Sejumlah besar kuning telur dalam telur salmon, tidak seperti ikan lainnya, memastikan periode perkembangan yang lebih lama dan munculnya larva yang lebih besar yang mampu memakan organisme makanan yang lebih besar pada tahap pertama pemberian makanan aktif. Telur terbesar diamati pada ikan bertulang rawan. Perkembangan embrio pada beberapa diantaranya (katran) berlangsung hampir 2 tahun.
Warna telurnya spesifik untuk setiap spesies. Pada vendace warnanya kuning, pada salmon warnanya oranye, pada tombak warnanya abu-abu tua, pada ikan mas warnanya kehijauan, pada ikan hijau warnanya hijau zamrud, biru, merah jambu dan ungu. Warna kekuningan dan kemerahan disebabkan oleh adanya pigmen pernapasan - karotenoid. Telur yang berkembang dalam kondisi oksigen yang kurang menguntungkan biasanya memiliki warna yang lebih pekat. Di antara ikan salmon, salmon sockeye memiliki kaviar berwarna merah tua paling terang, berkembang di air yang relatif miskin oksigen. Telur pelagis, yang berkembang dengan oksigen yang cukup, berpigmen buruk.
Telur banyak ikan mengandung satu atau lebih tetes lemak, yang bersama dengan metode lain, seperti penyiraman, memberikan daya apung pada telur. Bagian luar telur ditutupi dengan cangkang, yang dapat bersifat primer, sekunder, dan tersier.
Yang utama - membran vitelline, atau radiasi, yang dibentuk oleh telur itu sendiri, ditembus oleh banyak pori-pori tempat makanan masuk ke dalam telur. nutrisi selama perkembangannya di ovarium. Cangkang ini cukup kuat, dan pada ikan sturgeon memiliki dua lapis.
Di atas cangkang primer, sebagian besar ikan mengembangkan cangkang sekunder, agar-agar, lengket, dengan berbagai tonjolan untuk menempelkan telur ke substrat.
Di kutub hewan kedua membran terdapat saluran khusus, mikropil, tempat sperma menembus sel telur. Teleost mempunyai satu saluran, sedangkan ikan sturgeon mempunyai beberapa saluran. Ada juga membran tersier - albumin dan tanduk. Kornea berkembang pada ikan bertulang rawan dan hagfish, sedangkan membran protein hanya berkembang pada ikan bertulang rawan. Kornea ikan bertulang rawan jauh lebih besar dari telur itu sendiri, bentuknya tidak sesuai, pipih dan sedikit menekan telur. Seringkali benang tanduk memanjang darinya, dengan bantuan telur menempel pada tanaman air. Pada spesies ovovivipar dan vivipar, kornea sangat tipis, menghilang segera setelah permulaan perkembangan.
Partenogenesis. Perkembangan sel telur dimungkinkan tanpa partisipasi sperma, dan dalam hal ini disebut partenogenesis (dari bahasa Yunani "parthenosis" - perawan, "genesis" - kemunculan).
Ada kasus di mana organisme berkembang secara normal dari telur yang tidak dibuahi.
Ketika mereka berbicara tentang partenogenesis, yang mereka maksud adalah perkembangan berdasarkan pronukleus wanita. Namun, dalam beberapa kasus, perkembangan berdasarkan pronukleus pria dimungkinkan, dan kemudian mereka berbicara tentang androgenesis, membandingkannya dengan ginogenesis. Ginogenesis adalah suatu bentuk perkembangan berkelamin tunggal di mana sperma mengaktifkan sel telur, mendorongnya untuk berkembang, tetapi nukleusnya (pronukleus jantan) tidak menyatu dengan sel betina dan tidak ikut minum. Ginogenesis alami diketahui pada satu spesies ikan mas crucian, yang telurnya diinseminasi dengan sperma spesies lain, yang mengaktifkan sel telur, tetapi inti sperma tidak ikut serta dalam pembentukan zigot. Androgenesis adalah fenomena yang jauh lebih jarang, dan bila terjadi (alami atau buatan), perkembangan terjadi tanpa pronukleus perempuan berdasarkan inti laki-laki dan pronukleus laki-laki.
Sel reproduksi pria adalah sperma berbeda dengan oosit, mereka kecil, banyak dan mobile. Setiap kelompok sperma merupakan turunan dari satu sel awal dan berkembang sebagai klon secara sinkron sel yang terhubung, dan dalam hal jumlah dan beberapa ciri struktural, ini memberikan sekelompok sel individu yang bergerak. Perkembangan spermatozoa sendiri serupa pada hewan yang berbeda. Spermatogenesis selalu berhubungan erat dengan sel-sel layanan tambahan yang berasal dari somatik. Posisi relatif sel-sel layanan reproduksi dan somatik secara spesifik mencirikan spermatogenesis dan merupakan hal yang paling menarik. Lebih tepat jika kita menganggap perkembangan sperma bukan sebagai “biografi” sel reproduksi pria, tetapi sebagai riwayat hidup sebuah klon.
Sel germinal jantan tidak pernah berkembang sendiri, tetapi tumbuh sebagai klon dari sel-sel yang terhubung secara sinkronisasi, dimana semua sel saling mempengaruhi satu sama lain.
Pada sebagian besar hewan, komponen tambahan berperan dalam proses spermatogenesis. sel somatik epitel folikuler (“mendukung”, “memberi makan”).
Sel germinal dan sel tambahan terkait pada tahap awal perkembangan dipisahkan dari sel soma oleh lapisan sel perbatasan yang berfungsi fungsi penghalang. Di dalam gonad itu sendiri, terjadi pemisahan struktural lebih lanjut dalam bentuk kista atau tubulus, di mana sel-sel folikel tambahan menciptakan lingkungan khusus untuk spermatogenesis.
Sel germinal primer, termasuk sel jantan, pada banyak hewan dapat diidentifikasi jauh sebelum pembentukan gonad dan seringkali bahkan pada tahap perkembangan yang sangat awal. Sel germinal muncul pada awal perkembangan embrio di lipatan genital yang membentang di sepanjang rongga tubuh. Pada salmon remaja (salmon merah muda, salmon chum, salmon sockeye, salmon masu, salmon coho dan salmon Atlantik), sel germinal primer ditemukan pada tahap pembentukan saluran ginjal primer. Pada embrio salmon Atlantik, sel germinal primordial teridentifikasi pada umur 26 hari. Pada benih ikan, gonad sudah dapat ditemukan dalam bentuk tali mirip rambut.
Ciri khas dari proses perkembangan sperma - spermatogenesis - adalah pengurangan beberapa sel. Setiap spermatogonia asli membelah beberapa kali sehingga terjadi penumpukan spermatogonia di bawah satu membran yang disebut kista (tahap reproduksi). Spermatogonia yang terbentuk pada pembelahan terakhir sedikit meningkat, terjadi transformasi meiosis pada nukleusnya dan spermatogonia berubah menjadi spermatosit orde pertama (tahap pertumbuhan). Kemudian terjadi dua pembelahan berturut-turut (tahap pematangan): spermatosit orde pertama terbagi menjadi dua spermatosit orde kedua, karena pembelahan tersebut terbentuklah dua spermatid. Pada tahap pembentukan berikutnya – akhir –, spermatid berubah menjadi spermatozoa. Jadi, dari setiap spermatosit terbentuk empat spermatid dengan satu set kromosom setengah (haploid). Cangkang kista pecah dan sperma memenuhi tubulus seminiferus. Sperma matang meninggalkan testis melalui vas deferens, kemudian keluar melalui saluran.
Sperma memasukkan bahan nuklir ke dalam sel telur, yang kemudian berperan peran penting dalam keturunan dan transformasi pada tahap perkembangan selanjutnya, tetapi tidak memiliki dampak yang signifikan tahap awal. Telur berisi semua yang diperlukan untuk perkembangan penuh orang dewasa. Telur yang matang siap berkembang; ia hanya menunggu rangsangan yang tepat untuk mulai terurai menjadi unit-unit seluler, yang merupakan langkah pertama yang diperlukan untuk perkembangan jaringan dan organ organisme dewasa yang kompleks. Dalam banyak kasus, proses ini dapat dipicu oleh rangsangan fisik atau kimia. Namun pada kondisi normal, permulaan proses perkembangan dirangsang oleh masuknya sperma ke dalam sel telur.
Pertanyaan untuk pengendalian diri
1. Jenis sel kelamin ikan apa yang kamu ketahui? Jelaskan mereka. Dalam proses apa sel kelamin terbentuk?
2. Jenis nutrisi apa saja yang tersedia untuk sel telur?
3. Jenis telur apa yang dimiliki ikan? Klasifikasi berdasarkan ukuran, bentuk, ukuran.
4. Mendeskripsikan struktur telur ikan. Struktur cangkang. Apa itu mikropil?
5. Apa itu partenogenesis?
6. Sel reproduksi pria disebut apa? Apa bentuk dan tipenya?
BIBLIOGRAFI
Utama
1.Kalajda, M.L. Histologi umum dan embriologi ikan / M.L. Kalaida, M.V. Nigmetzyanova, S.D. Borisova // - Prospek Ilmu Pengetahuan. Saint Petersburg. - 2011. - 142 hal.
2. Kozlov, N.A. Histologi umum / N.A. Kozlov // - St. Petersburg - Moskow - Krasnodar. "Kelinci betina." - 2004
3. Konstantinov, V.M. Perbandingan anatomi vertebrata / V.M. Konstantinov, S.P. Shatalova // Penerbit: "Akademi", Moskow. 2005.304 hal.
4. Pavlov, D.A. Keragaman morfologi pada awal entogenesis ikan teleost / D.A. Pavlov // M.: GEOS, 2007.262 hal.
Tambahan
1. Afanasyev, Yu.I. Histologi / Yu.I. Afanasyev [dll.] // - M.. “Kedokteran”. 2001
2.Bykov, V.L. Sitologi dan histologi umum / V.L. Bykov // - St.Petersburg: “Sotis”. 2000
3.Alexandrovskaya, O.V. Sitologi, histologi, embriologi / O.V. Alexandrovskaya [dan lainnya] // - M. 1987
