Додому Пульпіт Анісімова І.М., Лавровський В.В. Іхтіологія

Пульпіт

Анісімова І.М., Лавровський В.В. Іхтіологія

Шкали зрілості (для особин, що одноразово нерестяться):

1) ювенальна(juv) особини (нестатевозрілі), підлога неозброєним оком невиразна. Гонади мають вигляд тонких ниток;

2) підготовча: гонади починають дозрівати, підлогу помітний, стадія у більшості риб триває все літо;

У самок яєчники мають вигляд прозорих тяжів, уздовж яких йде кровоносна судина. Ікринки неозброєним оком не видно.

У самців сім'яники мають вигляд сплощених тяжів, колір рожево-білуватий;

3) дозрівання: яєчники збільшуються в обсязі, у цій стадії весняно-рестуючі риби можуть перебувати з другої половини літа до весни наступного року.

У самок ікринки добре помітні неозброєним оком, багатогранної форми і при зіскрібці погано поділяються. Прозорість їх зменшується, до кінця стадії стають непрозорими.

У самців сім'яники мають розширену передню частину, звужуючись ззаду. При поперечному розрізіїх краї не опливають;

4) зрілість: статеві органи досягають майже максимального розвитку (нетривала стадія)

У самок яєчники зазвичай заповнюють 2/3 черевної порожнини. Ікринки великі, прозорі, легко відокремлюються одна від одної, при натисканні витікають.

У самців сім'яники білого кольору та наповнені рідкими молоками, при поперечному розрізі сім'яника краю його округляються. При натисканні на черевце виділяються краплі сперми, часто з кров'ю;

5) ікрометання(текуча)

У самок при легкому натисканні на черевце виділяється ікра.

У самців при легкому натисканні на черевце виділяється сперма;

6)вибій: статеві продукти виметані повністю (нетривала стадія)

У самок яєчники в'ялі, запалені, темно-червоного кольору. Нерідко залишається невелика кількість ікринок.

У самців сім'яники в'ялі, запалені, темно-червоного кольору;

6-2) Відновна стадія- гонади відновлюються після ікрометання, набувають пружної форми, проте ділянки ястиків і сім'яників у сечостатевого отвору залишаються запаленими.

Переваги:

Застосовується в польових умовах у ПБА

Дозволяє чітко визначити внутрішньовидову динаміку

Недоліки:

Суб'єктивність

Кількісні показники:

Коефіцієнт зрілості - це відношення маси гонад до маси тіла риби, %

Індекс зрілості - це відсоткове відношення КЗ гонад, обчислю. в окремі періоди зрілості гонад до max КЗ.

54. Плодючість риб: основні поняття та методи їх виявлення.

Плодючість змінюється і від віку та від екологічних умов.

Абсолютна плодючість (індивід.) - Кількість ікри, яка може вимітати самка в 1 нерестовий сезон.

Зі збільшенням маси тіла та розмірів зростає плодючість

Відносна індивідуальна плодючість-кількість ікри, що припадає на одиницю маси самки.

Робоча плодючість-кількість ікри, взяте з метою відтворення від 1 самки.

Видова плодючість-кількість ікри, що викидалося самкою за все її життя.

Популяційна плодючість-кількість ікри, яка викидається популяцій в 1 нерестовий сезон.

Методика визначення плодючості

Береться на 4 стадії зрілості.

Береться ваговим чи об'ємним методом.

Визначити плодючість за порціями

Провести аналіз ікринок, виділити порції.

55.Особливості визначення стадій зрілості та плодючості у порційно-нерестуючих видів риб.Плодючість - кількість ікри, яку може вимітати самка за 1 нерестовий сезон. У порційно-нерестуючих риб плодючість визначається кількістю порцій, якщо риба вимітає 2-3 порції, можна визначити візуальним методом, якщо >3 необхідно робити гістологічні дослідження. Ступені зрілості гонад методи: 1) гістологічний (роблять зрізи та визначають ступінь зрілості ооциту та сперматозоїда); 2) шкала зрілості (ювенальна, підготовча, дозрівання, зрілість, нерест, вибій); 3) кількіс. Для яєчника риб з порц нерестом хар-но: ооцити, що не розвилися, або ооцити різних фаз зрілості. Кожна порція може випереджати іншу на 2-3 тижні. Про порційність судять на підставі вимірювання діаметра ікринок у яєчнику в переднерестовий та нерестовий період.

Отримання зрілих виробників, у яких ікра та сперма придатні для запліднення, - найважливіший елемент роботи зі штучного розведення осетрових.

Раніше отримання таких риб було можливе лише поблизу місць природного нересту або безпосередньо на нерестовищах, де доводилося організовувати спеціальний лов. З пійманих риб лише невелика частина (не більше 1-4%) мала зрілу ікру та сперму.

За такого ненадійного способу отримання зрілих продуктіворганізація штучного розведення у великих масштабах дуже важко.

Екологічний та фізіологічний методи стимулювання дозрівання статевих продуктів

Для переведення осетровництва на планову основу потрібно було опанувати процес переведення виробників у нерестовий стан з метою отримання зрілих яйцеклітин і такої ж сперми.

Існує два способи вирішення цього завдання. Один із них – екологічний – розробив академік АН АзРСР А. Н. Державін. Він вважав, що з витримуванні виробників слід створювати умови довкілля, відповідні природним, у яких відбувається розвиток статевих продуктів. Оскільки в природі ікра і сперма дозрівають під час ходу риби на нерест проти течії води, цей чинник А. М. Державін вважав основним, що впливає прискорення дозрівання статевих продуктів. Він рекомендував для витримування та отримання зрілих виробників використовувати овальні садки завдовжки 25 м, шириною 6 м і глибиною до 1,2 м, у яких створювався перебіг та імітувалися річкові умови (швидкоструми тощо). На дно таких садків насипається галька. Водопостачання у садку механічне, витрата води 20 л/с. Поліпшення циркуляції води досягається пристроєм у середній частині садка за його довжиною бетонної стіни довжиною 19 м. У кожен садок поміщають по 50 риб; самок та самців окремо. Поряд із течією в садках створюють сприятливий температурний та кисневий режим. Однак досвід роботи з такими садками показав, що в них дозріває лише одна третина виробників, до того ж важко визначити момент, коли треба брати ікру.

Цих недоліків позбавлений фізіологічного методу стимулювання дозрівання статевих продуктів, розроблений професором Н. Л. Гербільським. Він заснований на введенні ацетонованого препарату гіпофіза у м'язи тіла самки та самця, від яких хочуть отримати зрілу ікру чи сперму.

Дослідження показали, що в організмі риби важливим регулятором дозрівання статевих клітин є придаток мозку – гіпофіз, що зв'язує нервову системуорганізму із статевими залозами. Гіпофіз – заліза внутрішньої секреції – виробляє особливі речовини – гормони, під впливом яких відбувається перехід виробників у нерестовий стан.

Гіпофіз складається з двох частин: мозковий – нейрогіпофіза та залозистої – аденогіпофіза. Гонадотропні гормони виробляються залізистими клітинами аденогіпофіза.

Найкращі результати виходять при поєднанні екологічного та фізіологічного методів стимулювання статевої функції виробників осетрових. Поєднання здійснюється в наступній послідовності: спочатку виробників витримують у спеціальних водоймищах, а потім виробляють гіпофізарну ін'єкцію.

Відсаджувальні господарства для витримування виробників

Виробників витримують у спеціальних водоймищах, призначених для відсадження риби. Існує два основних типи відсаджувальних господарств. Один із них сконструйований проф. Б. Н. Казанським, другий – куринськими рибниками (садкове господарство куринського типу).

Берегове відсадкове господарствоконструкції Б. Н. Казанського. У садковому господарстві конструкції Б. Н. Казанського є земляні ставки для тривалого резервування та розташовані поблизу них бетонні садки-басейни, призначені для короткочасного утримання виробників.

Самок та самців містять окремо.

Земляний ставок складається з двох частин: основної, розширеної, що має глибину до 2,5 м, і звуженої, дрібнішої частини з глибиною 0,5-1 м. У цій частині ставка створюються умови, що імітують підхід до нерестового плесу. У розширеній частині із більшою глибиною умови наближаються до режиму зимувальних ям.

Ставок для самок має такі розміри: довжина 130 м (розширена частина 100 м та звужена 30 м), ширина 20-25 м у розширеній частині та 4-6 м у звуженій. Дно розширеної ділянки земляне, а в звуженому вимощене дрібним гладким каменем на збідненому бетоні; на місці стику розширеної та звуженої частин розсипана галька.

Водопостачання ставків механічне, водопуск має вигляд залізобетонного лотка або труби. Скидання води здійснюється через водоспускну споруду, що забезпечує як повне осушення ставка, так і можливість спускання різних горизонтів води. Рівень води регулюється шандорами. Постійна витрата води 30 л/с може бути збільшена до 300 л/с.

Садкове господарство куринського типу. Є земляний ставок розміром 75×12 м, розділений на три ділянки за допомогою бетонної споруди, що перегороджує, в середині якої влаштовано отвір для установки затвора.

На першій ділянці довжиною 105 м та глибиною 3 м проводиться тривала витримка виробників - від 1 до 1,5 міс. Заповнення водою триває 10-12 год, а скидання 5-6 год.

При настанні нерестових температур виробників переводять на другу ділянку, що є овальним бетонним басейном з вертикальними стінками. У басейні довжиною 7 м, шириною 5 і глибиною 1 м проводиться попереднє короткочасне витримування самок і самців до ін'єкції (1-3 доби). Перехід з першого до другого ділянку здійснюється у формі плавного підйому: знаряддя лову - волокуші, якими відловлюють виробників, підтягують по спеціальних напрямних електролебідками з дистанційним керуванням. Друга ділянка заповнюється водою за 30 хв.

На третій ділянці виробників ін'єктують та витримують після гіпофізарної ін'єкції. Ця ділянка має 2 бетонні басейни з вертикальними стінками. Довжина басейну 5 м, ширина 3,5, глибина 1 м. На заповнення та скидання води відводиться по 15 хв. Над басейном влаштовується навіс. Пересадка виробників з другого на третю ділянку, а також доставка їх до операційного відділення, де отримують ікру, проводиться самохідним електротельфером у колисках.

Провесною з відстійника подають теплішу воду, що дозволяє ін'єкувати рибу в більш ранні терміни. У басейнах виробники знаходяться 1-3 доби. Подача та скидання води з басейнів незалежні. Вода подається за допомогою труби (флейти), розташованої впоперек басейну. Струмені води з флейти направлені в протилежні сторони. Внаслідок такої подачі води покращується кисневий режим.

У басейн садять по 50 виробників білуги, по 80 – осетрів або шипа та по 100 – севрюги. Витрата води у басейнах 30 л/с. Третя ділянка обгороджується штакетним парканом, навколо якого садять дерева.

Заготівля виробників

Для ефективнішого використання виробників при риборозведенні велике значення має знання внутрішньовидових біологічних груп.

Вивчення стад окремих видів риб дало можливість акад. Л. С. Бергу встановити у деяких із них наявність внутрішньовидових біологічних груп. Подальша розробка цього питання належить проф. Н. Л. Гербільського.

Вчення про внутрішньовидові біологічні групи засноване на визнанні факту внутрішньовидової біологічної різноякісності, властивої всім видам тварин та рослин. У риб вона пов'язана насамперед з процесом розмноження і встановити її можна, знаючи терміни та місця нересту, відмінності у статевому циклі, нерестові температури, стан виробників у період їхнього заходу до річок, терміни перебування виробників у річці перед нерестом.

Біологічний аналіз стада осетрових дозволяє вибрати правильне місце розташування рибоводних заводів, допомагає з'ясувати терміни відсадки та витримування виробників, а також вирішити питання про можливість отримання від них зрілих статевих продуктів у пониззі річки та дворазового використання ставків для вирощування молоді протягом одного вегетаційного періоду. Знаючи внутрішньовидові біологічні групи, можна встановити сезонний графік, який дозволяє найбільш раціонально використовувати водоймища та обладнання рибоводних підприємств.

Як приклад наведемо біологічні групи куринського осетра.

Професори Н. Л. Гербильський та Б. Н. Казанський встановили, що при схрещуванні виробників осетра різних біологічних груп його життєстійкість протягом ембріонального періоду підвищується.

Автором виявлено, що молодь, отримана від схрещування виробників осетра різних біологічних груп, за багатьма важливими рибоводними показниками перевершує молодь від батьків, що належать до однієї біологічної групи: вона інтенсивніше харчується і швидше зростає, у неї вище показник вгодованості, більш високий вміст протеїну і зольних елементів.

Заготівля для рибоводних цілей виробників осетра, що належать до різних біологічних груп, здійснюється у різні терміни.

Так, раннього ярого осетра заготовляють у дельті Волги у другій половині квітня - на початку травня і використовують для отримання зрілих статевих продуктів після короткострокового резервування в травні. Заготівлю озимого осетра осіннього ходу здійснюють у жовтні, а отримують від нього ікру та сперму після тривалого витримування у другій половині квітня наступного року.

самки, близькі до овуляції, мають тонку тішу, у менш зрілих риб вона дуже товста та жирна;
у зрілих риб хвостове стебло (від заднього краю спинного плавця до початку хвостової лопаті) має в поперечному розрізі овальну форму, тобто його висота значно більша за ширину, що вказує на схуднення риби. У менш зрілих риб хвостове стебло товщі і менш високе;
у зрілих особин рило загострене внаслідок схуднення, у менш зрілих риб рило і вся голова товстіша;
жучки у зрілих риб менш гострі, шкіра більше вкрита густим слизом.

Щоб орієнтуватися на ці ознаки, треба мати великий досвід роботи з виробниками.

А. Є. Андронов (1979) розробив спосіб відбору самок севрюги, заснований на вимірі ікринок. Серед самок севрюги, які мігрують у річку, міститься багато недостатньо зрілих риб, у гонадах яких багато недоброякісної дрібної ікри, тому потрібно відбирати самок із найбільшою ікрою. Ікринки вимірюють за допомогою щупа, що має шкалу з ціною розподілу 2 мм і відміткою нуля на відстані 31 мм від початку прорізу діаметром 3 мм. У самок, що відбираються для рибоводних цілей, 15 ікринок повинні становити ряд, що закінчується не менше ніж на другому поділку за шкалою щупа.

Другий варіант відбору самок севрюги полягає у з'ясуванні ступеня поляризації (крайнього становища) ядра. Витягнуту щупом ікру поміщають у рідину Серра (6 частин формаліну, 3 частини спирту, 1 частина крижаної оцтової кислоти), промивають водою і розрізають безпечною бритвою анімально-вегетативної осі.

Положення ядра в ікринках оцінюється під лупою 7×10 на відстані від ядра до оболонки анімального полюса. Хорошими вважаються самки севрюги, у яких ядро відійшло від свого первісного положення на відстань, що не перевищує радіуса ікринки.

Науковий співробітник Азовського науково-дослідного інституту рибного господарства Л. В. Баденко розробила метод відбору виробників за фізіологічними показниками, що дозволяє об'єктивніше судити про цінність виробників для рибоводних цілей. В основі методу лежить той факт, що осетрові в період нерестових міграцій входять до річок у різному фізіологічному стані. Це як неоднаковою зрілістю статевих продуктів, і різним рівнемнакопичення вони в організмі запасних речовин. Так, за даними Л. Ф. Голованенка, виснажені виробники, не придатні для отримання ікри та сперми, а також особини, що мають статеві продукти в IV незавершеній стадії зрілості, потребують резервування, а риби у IV завершеній стадії можуть бути ін'єктовані відразу після заготівлі на місцях видобутку.

Цілком зрозуміло, наскільки важливо здійснити оцінку виробників, що відбираються для риборозведення. Це найлегше зробити шляхом дослідження крові. Виявилося, що найчіткіша відповідь на питання про якість виробників можуть дати такі показники, як вміст гемоглобіну та склад білка сироватки крові. За ними Л. В. Баденко і рекомендує відбирати виробників.

На початку нерестового ходу самки мають значний рівень вмісту жиру та білка, у них високі показники обміну речовини та дихання, тому таких риб треба заготовляти насамперед. Зазвичай вони мають показники вмісту жиру, білка, обміну речовини та дихання, характерні для риб, що повністю віддають зрілу ікру.

Заготівлю виробляють з неводних уловів, відбираючи виробників оптимальної для роботи маси (не більше 15-20 кг для осетра та севрюги та 100 кг для білуги), які не мають травм, синців тощо.

При визначенні маси риби зважувати відібраних виробників на десяткових терезах на приймальному пункті забороняється, оскільки зважування без води негативно впливає на стан риби. Масу слід визначати за спеціальною таблицею, в якій наведено дані щодо співвідношення довжини тіла та маси.

Велике значення має віковий підбір виробників. За даними А. А. Попової, найкраще потомство дають осетри, які прийшли на нерест вдруге і втретє.

Виробників заготовляють з таким розрахунком, щоб мати резерв на випадок відходів у період транспортування та витримування: у білуги та севрюги від 20 до 30% та у осетра від 10 до 30% від загальної кількостізаготовлених виробників.

Виробники відбираються безпосередньо з невода. Їх по одному обережно поміщають у брезентові ноші та переносять у невелике живорибне судно (матенку), в яке можна збирати не більше 10 особин. Матенку доставляють до великого живорибного судна, в якому виробників доставляють на осетровий завод. У несамохідний живорибний проріз астраханського типу садять 5 білуг або 10 осетрів, стільки ж шипів або 16 севрюг. Довжина прорізу астраханського типу 13 м, ширина 5 м і глибина 0,8 м, норма завантаження: один осетр на 1,5-2 м 3 одна севрюга на 1 м 3 і одна білуга на 5-7 м 3 . Для запобігання травмуванню риб шпангоути прорізи обшивають струганими дошками.

Доставлених на рибоводний завод виробників піднімають на причал за допомогою спеціального крана вантажопідйомністю 500 кг. Рибу транспортують у наповненій водою люльці брезентової, підвішеної до металевого трубчастого каркасу. Її зверху закривають брезентовим фартухом.

Підняту на причал люльку відразу встановлюють на трубчасту підставку в кузові автомашини або самохідного шасі і транспортують до ставка. Люльку також можна пересувати монорейковим електротранспортом. Потім по похилій площиніколиску разом з рибою спускають у водойму. Рибу можна транспортувати та вивантажувати також за допомогою монорейкового шляху та вантажної талі. При такому способі транспортування люльку з виробниками знімають з шасі талію, переміщують над ставком і потім опускають. Монорейкові шляхи з електротельфер використовують також для внутрішньозаводських перевезень виробників.

З ставків виробників відловлюють волокушою (відціджує знаряддя лову), оснащеної плавом та грузилами. Плав є поплавцями з пінопласту, посаджені по верхній підборі. До нижньої підбирання прикріплюють грузила з обпаленої глини. До кінців крил прив'язують дерев'яні бруски – шкапи. Довжина волокуші на 40-50% більше ширини ставка, а висота на 30-40% перевищує максимальну глибину водойми.

Рибу зазвичай відловлюють за одну поздовжню тоню. Тягнуть невід за урізи по обидва береги водойми. Притоніння виробляють на мілководній ділянці в головній частині ставка. Місце притоніння зміцнюється за допомогою кам'яно-галькової відсипки. До цієї ділянки підводять тельферний підвісний шлях для механізації підйому виробників.

Виловлених виробників укладають у люльку або на носилки і підносять до тельфера, який доставляє рибу до садків, де ін'єкують виробників.

Після використання волокуші розвішують для просушування на вішалах.

Заготівля гіпофізів

Гіпофізи найкраще заготовляти навесні, під час ходу виробників. У цей час статеві продукти риб перебувають у IV завершеній стадії та в гіпофізах накопичується максимальна кількість гормонів.

Заготовляти гіпофізи від риб, що віднерестилися, не можна, оскільки раніше містяться в них гормони в період розмноження повністю витрачаються. Не можна використовувати для заготівлі та гіпофізи від нестатевозрілих риб. Разом з тим Т. І. Фалєєва зазначає, що гіпофізи можна заготовляти восени та взимку.

Для вилучення гіпофіза розкривають череп живої або свіжої риби трепаном, зробленим зі сталі і є металевим стрижнем, з рукояткою. На нижній кінець стрижня насаджено циліндр, який можна пересувати по вертикалі вздовж стрижня і закріплювати за допомогою гвинта. В основі циліндра є нагострені і розведені зубці, що врізаються в тканину при обертанні трепана. Його діаметр дорівнює 30 мм. Для отримання гіпофіза від білуги застосовують трепани великих розмірівдіаметром 35-40 мм.

Трепан встановлюють посередині голови риби, за очима. Для точної установки трепана циліндр піднімають вгору вщент, внаслідок чого нижній загострений кінець стрижня висувається за край циліндра. Після цього обертають рукоятку і, зробивши кілька обертів, піднімають стрижень, щоб уникнути руйнування гіпофіза. Потім трепан вгвинчують вщент і вирізану пробку, що складається з кістки і хряща, видаляють. У черепній кришці утворюється отвір, який при правильної установкитрепана знаходиться над гіпофізарною ямкою. Для отримання гіпофізів використовують також електротрепан, що є електричним дрилем, що набагато полегшує і прискорює заготівлю гіпофізів.

З порожнини черепа видаляють мозок та рідину. Підготовчі операції на цьому закінчуються і можна приступати до вилучення гіпофіза.

Гіпофіз витягують ложкою Фолькмана, що застосовується в хірургії, має гострі краї і довгу ручку. У жодному разі не можна брати пінцетом тканину залози, тому що можна зруйнувати гіпофіз і зробити його непридатним для ін'єкції. За допомогою ложки Фолькмана гіпофіз легко можна вийняти та перенести до судини. Вилучений гіпофіз знежирюють і зневоднюють, для чого в посудину з кришкою (бюкс), що добре закривається, наливають ацетон. Після отримання кожного гіпофіза заготівель поміщає його в ацетон. Після того, як усі гіпофізи вилучені, їх поміщають у нову порцію ацетону на 12 годин, потім його ще раз зливають і наливають нову порцію, в якій через 6-8 годин відбувається знежирення. Вилучені з бюкса гіпофізи просушують на фільтрувальному папері.

Для обробки гіпофізів можна застосовувати лише безводний, хімічно чистий ацетон. Обсяг ацетону повинен у 10-15 разів перевищувати масу закладених у нього гіпофізів. Повторне використання насиченого водою ацетону є неприпустимим.

Для тривалого зберігання висушені гіпофізи поміщають у поліетиленові мішечки та етикетують.

Бажано в окремі мішечки підбирати гіпофізи однієї маси для того, щоб у польових умовах на рибоводному пункті можна було точно розрахувати дозування, що застосовуються.

Заготівлю гіпофізів слід проводити централізовано відразу для декількох заводів з визначенням гонадотропної активності препарату, що випускається за допомогою тест-об'єктів.

Централізована заготівля досвідченими фахівцями дозволяє забезпечити високу якість гіпофізів та можливість застосування оптимальних доз.

Визначення якості гіпофізів

Для визначення кількості гормонів, що перебувають у гіпофізах, та якості одержуваних препаратів здійснюють біологічне тестування, яке зводиться до з'ясування різних реакцій органів тварин, які отримали ін'єкцію досліджуваних препаратів. Зазвичай для біологічного тестування використовують в'юна та жаб.

В'юн після введення гіпофіза завжди дає кількісно визначену чітку реакцію. Визначення одиниці активності гіпофіза риб виробляють за допомогою встановленого Б. Н. Казанським поняття в'юнової одиниці (ст. е.).

В'юнова одиниця- це така кількість гонадотропного гормону, яка необхідно, щоб викликати через 50-80 год після ін'єкції дозрівання ікри та овуляцію у зимових самок в'юна IV стадії зрілості масою 35-45 г при температурі води 16-18°С у лабораторних умовах.

З метою з'ясування активності досліджуваного препарату гіпофіза у в'юнових одиницях кільком групам самок одночасно виробляють гіпофізарні ін'єкції з різними дозами гіпофізу. Найменша доза, що викликала дозрівання, і відповідає в'юнової одиниці. Знаючи її, можна порівнювати вміст гонадотропного гормону у різних гіпофізах.

Використання в'юнів як тест-об'єктів утруднюється у зв'язку з обмеженістю їх поширення у природних водоймах.

Більш доступним об'єктом є жаби. Їх легко можна отримувати у необхідних кількостях у будь-яку пору року. Позитивною реакцією у жаб є поява рухливих сперматозоїдів у клоаці після введення суспензії гіпофіза в спинні лімфатичні мішки. Ця реакція настає дуже швидко – через 40-50 хв. У цьому полягає друга перевага роботи з жабами в порівнянні з в'юнами.

Жаби-самці заготовляють пізньої осені в місцях їх концентрації для зимівлі. Містять їх у воді при температурі 1,5°С, слабкій проточності та невеликій освітленості.

Тестування препарату слід здійснювати щорічно в ті самі терміни. Так, у дельті Волги це роблять у першій половині березня.

Жаб виводять із зимового стану, повільно підвищуючи температуру води і доводячи її через тиждень до 16-18°С. Тестування дає кращі результати за температури 18-23°С.

Перевірку проводять у такий спосіб. Спочатку відбирають партії по 8-10 гіпофізів, що відрізняються кольором та величиною. Потім їх зважують на аналітичних терезах з точністю до 0,1 мг. Зважений препарат розтирають у ступці, поступово зволожуючи до отримання однорідної сметаноподібної консистенції. Потім препарат додають фізіологічний розчин, і суспензія готова для ін'єктування.

Ін'єкцію виробляють одночасно 5 жаб. Усього випробовують 3 групи жаб. Кожну групу ін'єктують певною дозою: 0,2; 0,3 та 0,4 мг сухого препарату гіпофіза.

Показником біологічної активностівипробуваного препарату гіпофіза є мінімальна вагова доза, що викликає реакцію спермації у більш ніж половини проін'єктованих жаб. Біологічну активність препарату розраховують шляхом поділу одиниці на ваговий показник мінімальної ефективної дози.

Одна жаб'яча одиниця(Л. Е.) - Це активність мінімальної вагової дози препарату, що викликає спермації у самця жаби.

Ацетонований препарат гіпофіза повинен мати стандартну, заздалегідь відому активність, яка дорівнює 3,3 жабиних одиниць.

Використання препарату дозволить витрачати заготовлені гіпофізи економніше. Крім того, у випадках, коли після проведення гіпофізарної ін'єкції дозрівання виробників не спостерігається, полегшується аналіз причин цього явища.

Слід також мати на увазі, що дозу препарату, що вводиться, на одиницю маси виробників потрібно розраховувати з урахуванням біологічної активності кожної даної партії гіпофізів.

Крім вищевикладеної методики визначення активності ацетонованих гіпофізів, існує кілька інших методів такої перевірки. Зокрема, Б. Ф. Гончаров запропонував визначення якості гіпофізів використовувати систему дозрівання ікринок поза організму. Перевірка здійснюється в такий спосіб. Щупом береться проба ікри і міститься у фізіологічний розчин з 0,1%-ним розчином кристалічного альбуміну. Туди ж додається суспензія гіпофізу. Якщо самка підготовлена до дозрівання, то зародковий пляшечку розчиняється.

Переваги запропонованого методу полягають у тому, що він є чутливим, дає можливість отримувати великий цифровий матеріал і його можна використовувати безпосередньо на рибоводних заводах під час проведення робіт із виробниками.

При цьому методі доза гіпофізу, що вводиться, розраховується в міліграмах ацетонованого гіпофіза на 1 кг маси виробника або в міліграмах на одного самця або одну самку.

Правильне дозування багато в чому визначає якість статевих продуктів. Якщо доза виявиться недостатньою, дозрівання виробників не відбудеться. При збільшеній дозі гормонального препаратузнижується якість ікри чи сперми.

При нижчих температурах (у межах діапазону нерестових температур) для дозрівання виробників необхідні вищі дози препарату, при температурах, близьких до верхньої межі нерестових температур, кількість гормонального препарату знижується. Для дозрівання самців порівняно із самками потрібно вводити менше гормонального препарату.

Осетрові рибоводні заводи отримують ацетоновані гіпофізи із заздалегідь визначеною гонадотропною активністю. Однак вона не завжди залишається постійною. При зберіганні гіпофізів понад рік їхня гонадотропна активність знижується. Процес погіршення якості гіпофізів уповільнюється при їх зберіганні в герметично закритому посуді в сухому приміщенні при низькій температурі.

Гіпофізарна ін'єкція

Висушений гіпофіз у чистій скляній або фарфоровій ступці розтирають маточкою в порошок, потім зважують необхідну дозуна аналітичних або торзійних вагах для кожної партії ін'єкційних виробників окремо для самок і самців.

Зважену дозу вносять у фізіологічний розчин (6,5 г хімічно чистої кухонної солі, розчиненої в 1 л дистильованої води) та ще трохи розтирають. Потім до цієї маси додають ще одну порцію фізіологічного розчину в такій кількості, щоб одного виробника припадало 2 см 3 суспензії. Потім її кілька разів ретельно збовтують за допомогою шприца і переносять у склянку з широким шийкою та притертою пробкою.

Перед початком ін'єктування вміст склянки ще кілька разів ретельно перемішують. Суспензію шприцом вводять у м'язи спини. Після ін'єкції голку обережно виймають. Місце проколу шкіри притискають пальцем, потім трохи масажують. Це потрібно робити, щоб уникнути витікання введеного препарату.

При температурі води нижче за нерестову на 2-3°С дозу гіпофіза збільшують на 30-50%.

Гіпофізарні ін'єкції дають позитивні результати лише при завершенні у виробників IV стадії зрілості статевих продуктів. Показником такого стану яйцеклітин служить зміщення наявних у них ядер до каналу (мікропил), через який сперматозоїд проникає в ікринку.

Четверта стадія у самців характеризується завершеністю процесу утворення сперміїв. У таких самців переважають зрілі, сформовані сперматозоїди.

Хороші результати дають одноразові ін'єкції ацетонованого препарату. Водночас іноді вони виявляються недостатньо результативними. Таке положення спостерігається, коли загальний стан виробників погіршено або розвиток ікри повністю не завершено. За такої ситуації іноді доцільно проводити повторні ін'єкції невеликих доз препарату. Однак завжди треба пам'ятати, що збільшені в порівнянні з науковообґрунтованими дози препарату гіпофіза призводять до зниження якості одержуваних зрілих статевих клітин. Пояснюється це тим, що в порошку ацетонованого гіпофіза містяться і такі гормони, які не потрібні безпосередньо для дозрівання статевих клітин. В результаті створюються побічні ефекти, організм входить у стан великої напруги (стресу).

Успішне проведення гіпофізарних ін'єкцій великою мірою залежить від цього, як утримуються виробники. На всіх етапах цієї операції - перед, під час і після введення в тіло риби препарату гіпофіза - з самками та самцями слід поводитися дуже дбайливо, не допускати їхнього травмування. У водоймах, призначених для виробників, має бути хороший кисневий режим, самок і самців слід містити окремо. Перед ін'єкцією їх переводять у невеликі бетоновані басейни чи садки, у яких створюють оптимальні умовищоб гарантувати дозрівання статевих продуктів після введення в тіло гормонального препарату.

Визначення часу дозрівання виробників

Після введення гіпофіза у риб починається період дозрівання (до одержання зрілої ікри), тривалість якого залежить від температури води та вихідного стану самок.

А. С. Гінзбург і Т. А. Детлаф встановили, що при однаковій середній температурі період дозрівання завжди набагато коротший за період зародкового розвитку (у 4-6 разів). Звідси випливає, що з підвищенні чи зниженні температури відповідно змінюється тривалість періодів дозрівання і зародкового розвитку. Виявлення такої закономірності дозволило А. С. Гінзбург і Т. А. Детлаф побудувати графіки можливих термінів дозрівання самок осетрових за різної температури залежно від тривалості їхнього зародкового розвитку.

На графіках нанесені криві, що вказують час, коли після гіпофізарних ін'єкцій очікується дозрівання самок. За графіками також можна визначити терміни перегляду самок та взяття проб, вирахувавши спочатку середню температуру за період дозрівання.

Розрахунок провадиться так. О 19 годині напередодні дня отримання ікри та о 7 годині ранку в день взяття ікри вираховується середня температура, починаючи з часу ін'єкції виробників. Потім на горизонтальній осі знаходять точку, що відповідає середній температурі за період дозрівання, і відновлюють її перпендикуляр до перетину з кривими. Крапка перетину з кривою показує, через скільки годин дозрівають перші самки. Отримане число годинників додають до часу ін'єкції і виявляють час початку перегляду самок. Точка перетину з кривою дає можливість так само визначити терміни дозрівання багатьох самок.

Користуючись цим графіком, можна визначити терміни ін'єкції суспензії гіпофізів самкам осетрових, щоб отримувати ікру у зручний для роботи час. В результаті полегшується робота з виробниками, скорочується кількість необхідних переглядів самок, підвищується якість ікри, а також скорочуються втрати внаслідок її перезрівання чи недозрівання.

При розрахунку необхідного показника спочатку визначають середню температуру добу до ін'єкції. Потім на горизонтальній осі графіка дозрівання самок знаходять точку, що відповідає цій температурі, і відновлюють її перпендикуляр до перетину з кривою. З точки перетину опускають перпендикуляр на вертикальну вісь і визначають по ній число годин, яке пройде за даної середньої температури від ін'єкції до дозрівання перших самок. Вираховане таким чином число годин забирають від часу початку робочого дня і отримують час, коли треба ін'єкувати самок.

Метод визначення ступеня зрілості статевих залоз самок без розтину риби запропонував також У. З. Трусов. Цей метод зводиться до того, що у самок за допомогою щупа з яєчника витягують кілька ікринок. Пінцетом їх переносять у пробірку із формаліном. Пробірки вносять у приміщення, де встановлений мікротом, що заморожує. Ікринки розміщують на столику так, щоб зрізи мікротомної бритви проходили через їхній анімальний і вегетативний полюси. Потім ікринки заливають з піпетки очей водою, після чого покривають столик металевим ковпаком і заморожують зрізи, додаючи з балона вуглекислий газ.

Зрізи роблять доти, доки з'явиться добре видиме неозброєним оком чи під лупою ядро. Якщо воно лежить впритул до оболонок, стан статевої залози самки знаходиться в IV завершеній стадії зрілості.

Метод визначення ступеня зрілості статевих залоз самок, запропонований В. З. Трусовим, порівняно простий, надійний і мало часу: аналіз однієї проби можна здійснити за 5-8 хв.

Дозрівання самок контролюється також шляхом безпосереднього спостереження. Контроль посилюється протягом останніх шести годин - найімовірнішого при даній температурі терміну дозрівання.

Ще простіший експрес-метод визначення зрілості гонад у виробників осетрових розробили проф. Б. Н. Казанський, Ю. А. Феклов, С. Б. Подушка та А. Н. Молодцов. Сутність методу полягає в тому, що за допомогою щупа із задньої частини яєчника беруть пробу ікри, щуп вводиться в порожнину тіла під кутом 30°, що дозволяє не зачіпати життєво важливих органів. Щуп має наконечник, що заповнюється ікрою, і стрижень, що забезпечує його випорожнення.

Загальна довжина щупа – 125 мм, наконечника – 65 мм, у тому числі загостреної частини – 20 мм. Зовнішній діаметр стрижня – 4,5 мм. Щуп закінчується ручкою, розташованою перпендикулярно до стрижня. Витягнуті щупом ікринки для з'ясування ступеня завершеності IV стадії зрілості протягом 2 хвилин кип'ятять. Затверділі ікринки розрізають лезом безпечної бритви по осі від анімального полюса до вегетативного. Зрізи розглядають під лупою чи бінокуляром. Ступінь поляризації яйцеклітини визначають положенням ядра щодо анімального полюса. Показник поляризації визначають за формулою, запропонованою Ю. А. Фекловим: l = А/В де l - показник поляризації; А – відстань від ядра до оболонки; В – найбільша відстань по осі від анімального до вегетативного полюса.

Чим менше значення l, тим більше поляризована яйцеклітина і тим більша завершеність IV стадії зрілості гонад. Найбільша поляризація ооциту спостерігається за l = l/30: l/40.

Якщо черевце самки при промацуванні виявляється м'якшим, ніж було до ін'єкції, це свідчить про можливе дозрівання ікри в даної особини. Щоб у цьому переконатись, під самку слід підвести рибоводні ноші з водою, підняти їх та встановити на козли. У цей час риба робить різкі рухи, і якщо ікра дозріла, то на ношах можна помітити ікринки, що виділилися. Після того, як самка заспокоїться, її повертають на бік і обмацують черево. У дозрілої особи при масуванні задньої третини черева струменем вільно витікає ікра.

Таким чином, як відзначають А. С. Гінзбург і Т. А. Детлаф, показниками до розтину самок служать м'яке черевце, ікра, що вибивається сильним струменем, западання черевної стінкипід час підйому самки.

Від самої, що повністю дозріла, необхідно відразу ж отримати ікру.

Отримання зрілої ікри

Роботу з отримання зрілих статевих продуктів, включаючи взяття, запліднення та відмивання, ікри, проводять у операційному відділенні, що зазвичай знаходиться в інкубаційному цеху. У ньому є таке обладнання для отримання статевих продуктів, як лебідка, фіксатор, холодильна камера (КХ-6Б), в якій зберігають виробників вже без ікри та сперми (ікра та сперма отримані перед їх здаванням на заготівельний пункт). В операційному відділенні розміщують виробничі столи розміром 126×84×90 см типу СПСМ-4.

Дозрілу самку оглушують сильним ударом дерев'яного калатала по носі, після чого її знекровлюють, перерізаючи хвостову або зяброві артерії, обмивають водою і витирають. Щоб кров не потрапила у таз із ікрою, місце розрізу забинтовують. Готову до розтину рибу піднімають за голову через поперечину або блок і закріплюють. Черевце надрізають знизу вгору від статевого отвору на 15-20 см. Розріз робиться неглибоким і збоку від середньої лінії. Щоб уникнути можливих втрат ікри хвост самки притримують над тазом. Частина дозрілої ікри вільно витікає в таз на його краю. Після цього черевце розрізають до грудних плавців і ікру, що залишилася, вільно відокремлюється переносять в таз. Можна також використовувати для запліднення доброякісну ікру, яка є в яйцеводах.

Кількість одержаної ікри залежить від маси самки.

Ікру від різних самок не змішують. Усі операції з ікрою проводять із граничною обережністю. Ікру можна збирати лише в тази з неушкодженою емаллю. У таз місткістю 12-15 л поміщають трохи більше 2 кг ікри.

запліднюють тільки повноцінну зрілу ікру, яку треба вміти визначати.

Недозрілі ікринки відрізняються від зрілих однаковим забарвленням усіх ділянок. Дозрілі ікринки дуже повільно знебарвлюють водний розчин метиленової сині. Недозрілі ікринки цей розчин зовсім не знебарвлюють, а перезрілі знебарвлюють значно швидше, ніж дозрілі. Такий спосіб визначення рибоводної якості ікри осетрових розроблений доцентом Ленінградського державного університету М. Ф. Вернідуб. Він зводиться до наступного: 2 см 3 ікри (без порожнинної рідини) поміщають в бюкс або пробірку, що щільно закривається, заповнену 10 см 3 свіжоприготовленого розчину метиленової сині (одна крапля 0,05%-ного водного розчинуфарби на 10 см 3 води) кілька разів струшують і враховують час, протягом якого відбудеться знебарвлення розчину.

В окремих випадках знебарвлення у терміни, звичайні для ікри цієї якості, не відбувається.

Визначення готовності ікри до запліднення

Співробітник Азовського науково-дослідного інституту рибного господарства Л. Т. Горбачова запропонувала оцінювати готовність ікри до запліднення у заводських умовах за швидкістю настання клейкості оболонок ікри після її запліднення.

Щоб встановити, коли слід розпочати запліднення ікри, вже витягнутої з порожнини тіла самки, беруть 100-150 ікринок, запліднюють спермою і визначають час, протягом якого ікра в пробі приклеюється до чашки Петрі. Після цього за спеціальним графіком встановлюють час, коли слід запліднювати всю ікру. Для ікри осетра найкращим для запліднення вважається стан, у якому за 9-16 хв приклеюється щонайменше 90-95% всіх запліднених ікринок; для ікри севрюги цей стан відповідає часу 6-10 хв. Така ікра розвивається нормально.

Ікра осетра, що перезріла, починає приклеюватися через 4-6 хв, а севрюги - через 2-4 хв. Така ікра у період інкубації дає підвищений відхід.

Для запліднення використовують ікру тільки високої якості, показниками якого є:

наявність на зародковому полюсі плями іншого забарвлення, ніж інша половина ікринки;
правильна округла форма і однакові розміри ікринок, а також пофарбовані бластоміри, що утворюються після появи двох борозен поділу;
поява через 6-12 хв у осетра і через 5-10 хв у севрюги вузької щілини між зовнішньою оболонкою та икринкою у швидко відмитої від порожнинної рідини проби ікри (у перезрілих ікринок цей процес починається раніше, у недозрілих - пізніше);
певна маса ікринок; в 1 г дозрілої ікри білуги повинне міститися 35-40 ікринок, осетра - 45-50 ікринок, севрюги - 75-90 ікринок.

Якщо ви знайшли помилку, будь ласка, виділіть фрагмент тексту та натисніть Ctrl+Enter.

РОЗВИТОК ПІДЛОВИХ КЛІТИН РИБ

У круглоротих спеціальних статевих проток немає. З статевої залози, що розривається, статеві продукти випадають в порожнину тіла, з неї - через статеві пори - в сечостатевий синус, а потім через сечі статевий отвірвиводяться назовні.

У хрящових риб статева система пов'язана з видільною. У самок більшості видів яйця виводяться з яєчників по мюллерових каналах, що виконують роль яйцеводів і відкриваються в клоаку; вольфів канал є сечоводом. У самців вольфів канал служить сім'япроводом і через сечостатевий сосочок також відкривається в клоаку.

У костистих риб вольфові канали служать сечоводами, мюллерові канали у більшості видів редукуються, статеві продукти виводяться назовні через самостійні статеві протоки, що відкриваються в сечостатевий або статевий отвір.

У самок (більшості видів) зрілі яйця виводяться з яєчника назовні через коротку протоку, утворену оболонкою яєчника. У самців канальці сім'яника з'єднуються з сім'япроводом (не пов'язаним з ниркою), який відкривається назовні сечостатевим або статевим отвором.

Статеві залози, гонади – сім'яники у самців і яєчники або ястики у самок – стрічкоподібні або мішковидні утворення, що висять на складках очеревини – брижі – у порожнині тіла, над кишечником, під плавальною бульбашкою. Будова гонад, подібна в основі, у різних груприб має деякі особливості, У круглоротих статева залоза непарна, у справжніх риб гонади переважно парні. Варіації у формі гонад у різних видів головним чином виражаються в частковому або повному злитті парних залоз в одну непарну (самки тріски, окуня, бельдюги, самці піщанки) або в ясно вираженій асиметрії розвитку: часто гонади бувають різні за обсягом та масою (мийва, срібний) карась та ін), аж до повного зникнення однієї з них. З внутрішньої сторонистінок яєчника в щілинну порожнину його відходять поперечні яйця несучі пластинки, на яких розвиваються статеві клітини. Основу пластинок складають сполучнотканинні тяжи з численними відгалуженнями. Уздовж тяжів проходять сильно розгалужені кровоносні судини. Зрілі статеві клітини випадають з пластинок, що яйце несуть, в порожнину яєчника, яка може бути розташована в центрі його (наприклад, окуневі) або збоку (наприклад, коропові).

Яєчник безпосередньо зливається з яйцеводом, що виводить яйця назовні. У деяких форм (лососеві, корюшкові, вугрові) яєчники не замкнуті і зрілі яйця випадають у порожнину тіла, а вже через неї через спеціальні протоки виводяться з організму. Насінники більшості риб – парні мішковидні утворення. Зрілі статеві клітини по вивідних протоках – сім'япроводів – виводяться у зовнішнє середовищечерез спеціальний статевий отвір (у самців лососів, оселедців, щуки та деяких інших) або через сечостатевий отвір, розташований позаду ануса (у самців більшості кісткових риб).

У акул, скатів, химер є придаткові статеві залози (передня частина нирки, що стає лейдиговим органом); виділення залози домішуються до сперми.

У деяких риб кінець сім'япроводу розширений і утворює насіннєвий пляшечку (не гомологічний органам тієї ж назви у вищих хребетних).

Відомо про залізисту функцію насіннєвої бульбашки у деяких представників кісткових риб. Від внутрішніх стінок насінника відходять всередину насіннєві канальці, що сходяться до вивідної протоки. За розташуванням канальців сім'яники костистих риб поділяють на дві групи: циприноїдні, або ацинозні, - у коропових, оселедцевих, лососевих, сомових, щукових, осетрових, тріскових та ін; перкоїдні, або радіальні, - у окуневих, колюшкових та ін (рис. 24).

Мал. 24. Типи будови насінників кісткових риб . А – перкоїдний; Б - циприноїдний

У насінниках циприноїдного типу насіннєві канальці звиваються в різних площинах і без певної системи. Внаслідок цього на поперечних гістологічних зрізах видно їх окремі ділянки неправильної форми (звані ампули). Вивідна протока міститься у верхній частині насінника. Краї насінника округлі.

У насінниках перкоїдного типу насіннєві канальці тягнуться від стінок насінника радіально. Вони прямі, вивідна протокарозташований у центрі сім'яника. Насінник на поперечному зрізі має трикутну форму.

По стінках канальців (ампул) лежать великі клітини – вихідні насінні клітини, первинні сперматогонії, майбутні сперматозоїди.

Статеві клітини з'являються на ранніх етапах розвитку у ембріонів у генітальних складках, що тягнуться вздовж порожнини тіла. У молоді лососів (горбуша, кета, нерка, сима, кижуч та атлантичний лосось) первинні статеві клітини виявляються на стадії формування первинно-ниркових проток. У зародка атлантичного лосося первинні статеві клітини були виявлені у віці 26 cyт. У мальків риб вже можна знайти статеві залози у вигляді волосоподібних тяжів.

Овогонії - майбутні ікринки - утворюються в результаті розподілу зародкових клітин зародкового епітелію, це округлі, дуже дрібні, не видимі простим оком клітини. Після овогоніальних поділів овування перетворюється на овоцит. Надалі в ході овогенезу – розвитку яйцевих клітин – розрізняють три періоди: період синаптенного шляху, період зростання (малого – протоплазматичного та великого – трофоплазматичного) та період дозрівання.

Кожен із цих періодів поділяється на ряд фаз. Період синаптенного шляху характеризується переважно перетворенням ядра клітини (овоцита). Потім настає період малого -протоплазматичного - зростання, коли збільшення розмірів овоциту відбувається за рахунок накопичення цитоплазми. Тут у розвитку овоцитів виділяють ювенільну фазу та фазу одношарового фолікула.

У ювенільній фазі овоцити ще відносно невеликі, найчастіше округлої форми, з тонкою, безструктурною, так званою первинною (яка виробляється самою яйцеклітиною) оболонкою, до якої прилягають окремі фолікулярні клітини, а зовні – клітини сполучної тканини. Ядро овоциту має добре помітну тонку оболонку; округле велике, воно майже завжди лежить у центрі. По периферії ядра розташовуються численні ядерця, здебільшого прилеглі до оболонки. У фазі одношарового фолікула власна оболонка стає товщою, над нею формується фолікулярна оболонка з прилеглими окремими сполучнотканинними клітинами.

У цій же фазі в овоциті часто можна виявити вітелогенну зону. Ця зона має комірчасту, як би пінисту структуру і виникає в цитоплазмі навколо ядра, на деякій відстані від нього (циркумнуклеарна зона). До кінця фази (і періоду) овоцити збільшуються настільки, що їх можна розрізнити за допомогою лупи або навіть неозброєним оком.

Протягом формування яєчної клітини поряд з перетвореннями ядра в ній утворюються і накопичуються поживні речовини, що концентруються в жовтку (білки та ліпіди) та чисто ліпідних включеннях, які потім, у період розвитку ембріона, використовуються для його пластичних та енергетичних потреб. Цей процес починається у періоді великого зростання овоциту, коли на периферії його з'являються вакуолі, що містять вуглеводи. Отже, період великого (трофоплазматического) зростання овоциту характеризується збільшенням як кількості протоплазми, але накопиченням у ньому поживних, трофічних речовин – білка і жиру.

У період великого зростання відбуваються вакуолізація цитоплазми, поява жовтка та наповнення ним овоциту. Період великого зростання складається з кількох фаз. У фазі вакуолізації цитоплазми овоцити, збільшені порівняно з попередньою фазою, мають дещо незграбну форму внаслідок тиску сусідніх клітин. Оболонки овоциту – власна, фолікулярна, сполучнотканинна – стали чіткіше вираженими. На периферії овоцита утворюються поодинокі дрібні вакуолі, які, збільшуючись у числі, створюють більш менш густий шар. Це майбутні кортикальні альвеоли або гранули. Вміст вакуолей складають вуглеводи (полісахариди), які після запліднення яйця сприяють всмоктуванню під оболонку води та утворенню перивітеллінового простору. У деяких видів (лосось, короп) раніше вакуолей у цитоплазмі з'являються жирові включення. У ядрі ядерця відходять від оболонки вглиб. У наступній фазі – первинного накопичення жовтка – на периферії овоциту між вакуолями з'являються окремі дрібні кульки жовтка, кількість яких швидко зростає, тому до кінця фази вони займають майже всю плазму овоциту.

У своїй оболонці виникають тонкі канальці, що надають їй радіальну смугастість (Zona radiata); за ними в овоцит проникають поживні речовини. Над своєю оболонкою у деяких риб утворюється ще одна вторинна – оболонка (похідна фолікулярних клітин, що оточують овоцит). Ця оболонка, різноманітна за структурою (студениста, стільникова або ворсинчаста), після виходу овоциту з фолікула служить для прикріплення ікринки до субстрату. Фолікулярна оболонка стає двошаровою. Кордони ядра виразні, але стали звивистими, лапчастими“.

Наступна фаза – наповнення овоциту жовтком – характеризується дуже сильним збільшенням обсягу жовтка, частинки якого набувають замість кулястої багатогранної, глибокоподібної форми. Вакуолі віджимаються до поверхні овоциту.

Через переважання тим часом кількісних змін (без істотних морфологічних зрушень) деякі дослідники вважають недоцільним виділяти цю фазу як самостійну. До кінця фази овоцит досягає дефінітивних розмірів. Помітні зміни жовтка та ядра: ядро починає зміщуватися (до анімального полюса), його контури стають менш ясними; частинки жовтка починають зливатися. Закінчується формування вторинної оболонки.

Остання фаза розвитку – фаза зрілого овоциту. Частинки жовтка у більшості риб (за винятком в'юна, макропода, деяких коропових) зливаються в гомогенну масу, овоцит стає прозорим, цитоплазма зосереджується на периферії овоциту, ядро втрачає контури. Перетворення ядра входять у завершальну стадію.

Одне по одному йдуть два поділу дозрівання. В результаті утворюються ядро зрілого овоциту з гаплоїдним числом хромосом і три редукційні тільця, які не беруть участь у подальшому розвитку, відокремлюються від яйця та дегенерують. Після другого поділу дозрівання мітотичний розвиток ядра доходить до метафази і в цьому стані залишається до запліднення.

Подальший розвиток (формування жіночого пронуклеуса та відділення полярного тільця) відбувається вже після запліднення.

Крізь власну (Z. radiata) і драглисту оболонку проходить канал (мікропілі), через який сперматозоїд проникає в яйцеклітину при заплідненні. У костистих риб одне мікропиле, у осетрових – кілька: у севрюги – до 13, білуги – до 33, чорноморсько-азовського осетра – до 52. Тому поліспермія можлива лише у осетрових риб, але не у костистих. При овуляції фолікулярна і сполучнотканинна оболонки лопаються і залишаються на яйценесучих пластинках, а звільнений з них овоцит, оточений власною і драглистими оболонками, випадає в порожнину яєчника або порожнину тіла. Тут яйця, що овулюють, знаходяться в порожнинній (оваріальній) рідині, зберігаючи відносно довгий часздатність до запліднення (табл. 3). У воді або поза порожнинною рідиною вони цю здатність швидко втрачають.

У акул і схилів, яким властиве внутрішнє запліднення, запліднене яйце, просуваючись по статевим шляхам, оточується ще однією – третинною – оболонкою. Рогоподібна речовина цієї оболонки утворює тверду капсулу, що надійно захищає зародок у зовнішньому середовищі (див. рис. 34).

У процесі розвитку овоцитів поряд з іншими змінами відбувається колосальне збільшення його розмірів: так, порівняно з овогоннями, утвореними при останньому овініальному поділі, обсяг зрілого овоцита зростає у окуня в 1049440, у вобли - в 1271400 разів.

Таблиця 3 Збереження яйцями здатності до запліднення (за Гінзбургом, 1968, зі скороченнями)

Білуга Huso huso

Щука Esox lucius

3,5 10 24

Судак Lucioperca lucioperca

У однієї самки овоцити (а після овуляції - ікринки) неоднакові за величиною: найбільші можуть перевершувати найдрібніші в 1,5-2 рази. Це залежить від їхнього розташування на яйценосній платівці: овоцити, що лежать поблизу кровоносних судин, краще постачаються поживними речовинами і досягають великих розмірів.

Відмінною особливістю процесу розвитку сперматозоїдів – сперматогенезу є багаторазове зменшення клітин. Кожен вихідний сперматогоній ділиться кілька разів, у результаті виникає скупчення сперматогоній під однією оболонкою, зване цистою (стадія розмноження). Сперматогоній, що утворився при останньому розподілі, дещо збільшується, в його ядрі відбуваються мейотичні перетворення і сперматогоній перетворюється на сперматоцит I порядку (стадія росту). Потім наступають два послідовні поділу (стадія дозрівання): сперматоцит I порядку ділиться на два сперматоцити II порядку, внаслідок поділу яких утворюються дві сперматиди. У наступній – завершальній – стадії формування сперматиди перетворюються на сперматозоїди. Таким чином, з кожного сперматоцита утворюються чотири сперматид з половинним (гаплоїдним) набором хромосом. Оболонка цисти лопається, і сперматозоїди наповнюють насіннєвий каналець. Через сім'япроводи дозрілі сперматозоїди виходять із сім'яника, а потім по протоці – назовні.

Характерними рисами розвитку сім'яників є сильна нерівномірність (асинхронність) розвитку органу загалом. Особливо сильно ця нерівномірність проявляється у вперше дозрівають риб, але цілком чітко виражена і у нерестуючих повторно статевозрілих особин. В результаті практично всі самці нерестують порційно і протягом тривалого періодувід них можна одержувати сперму.

Процес дозрівання статевих клітин у різних риб відбувається, загалом, за однією схемою. У міру розвитку статевих клітин усередині яєчників та сім'яників змінюються і зовнішній вигляд, і розміри гонад. Це спонукало скласти так звану шкалу зрілості гонад, користуючись якою можна було б за зовнішніми ознаками гонад визначити ступінь зрілості статевих продуктів, що дуже важливо у наукових та промислових дослідженнях. Найчастіше використовують універсальну 6-бальну шкалу, в основі якої лежать загальні ознакидля різних видів риб (табл. 4, 5; рис. 25, 26). Запропоновано також інші шкали, в яких враховують особливості дозрівання певних груп риб. Так, для яєчників коропових та окуневих В. М. Мейєном запропоновано 6-бальну шкалу, а для насінників С. І. Кулаєва – 8-бальну.

Мал. 25. Стадії (I – VI) зрілості гонад самок кісткових риб

Мал. 26. Стадії зрілості гонад самців кісткових риб (за Сакуном, Буцькою, 1968) : А – I стадія (1 – сперматогоній, 2 – сперматогоній, що ділиться, 3 – кровоносна судина з еритроцитами, 4 – оболонка сім'яника); Б - II стадія (1 - сперматогоній, 2 - сперматогоній, що ділиться, 3 – кровоносна судина, 4 – оболонка, сім'яника, 5 – циста з дрібними сперматогоніями);В - III стадія (1 - сперматогоній, 2 - циста зі сперматоцитами I порядку, 3 - циста з сперматоцитами, що діляться I порядку, 4 - циста з сперматоцитами, що діляться II порядку, 5 - циста зі сперматидами, 6 - ци оболонка сім'яника, 8 – фолікулярний епітелій); Г – IV стадія (1 – сперматогоній, 2 – сперматозоїди, 3 – оболонка сім'яника, 4 – фолікулярний епітелій); Д – VI стадія (1 – сперматогоній, 2 кровоносна судина, 3 – оболонка сім'яника, 4 – залишкові сперматозоїди, 5 – фолікулярний епітелій)

Зрілий сперматозоїд є клітиною з малою кількістю плазми. У ньому розрізняють голівку, середню частину та хвіст. Форма голівки різна: у вигляді кулі, яйця, жолудя (у більшості костистих риб), палички (у осетрових і деяких костистих), списи (у подвійних), циліндра (у акулових, кістеперих). У головці міститься ядро.

Попереду ядра у акулообразных, осетрових та інших риб розташовується акросома; у костистих акросоми немає. Ядерна частина головки сперматозоїда складається здезоксирибонуклеопротеида (нейтральна сіль ДНК з основним білком - протаміном) і невеликої кількості РНК. Концентрація ДНК в головці (ядрі) становить 38,1% (короп), 48,4% (семга) і відображає кількість ДНК у наборі гаплоїдному хромосом. Протаміни складаються з 6-8 амінокислот, серед яких переважає аргінін. У середній частині сперматозоїдів виявлені мітохондрії, які відіграють основну роль у постачанні клітини енергією. У хвостовій частині виявлено білки, лецитин, жири та холестерин.

Сперматозоїди більшості кісткових риб мають загальну довжину 40-60 мкм (головка 2-3мкм).

· Сперма, що виділяється самцем, складається зі сперматозоїдів, занурених у сперміальну рідину, подібну до складу з фізіологічним розчином. У момент виходу з організму сперматозоїди ще нерухомі, їх обмін знижений.

· В одного і того ж самця сперматозоїди якісно неоднакові. Насамперед, вони різняться за величиною: в еякуляті з допомогою центрифугування можна назвати групи сперматозоїдів - дрібних (легких), великих (важких), проміжних (середніх).

Вони різняться і за біологічними властивостями, зокрема характером гамет: серед великих сперматозоїдів у великій кількості зустрічаються X-гамети, серед дрібних - Y-гамети. Внаслідок цього з ікри, заплідненої великими сперматозоїдами, народжуються переважно самки, а дрібними – самці.

У переважної більшості риб запліднення зовнішнє. У хрящових риб, яким властиві внутрішнє запліднення та живонародження, є відповідні зміни у будові статевого апарату. Розвиток зародків вони відбувається у задньому відділі яйцеводів, отримали назву матки. З костистих риб живородіння властиве гамбузії, морському окуню, багатьом акваріумним рибкам. У них молодь розвивається у яєчнику.

Таблиця 4 Шкала зрілості гонад. Самки ..

Стадія не повторюється (буває один раз у житті)

У неполовозрелых риб ця стадія слідує за I; у яєчниках статевозрілих самок II стадія настає після того, як зникають ознаки минулого нересту, тобто після VI стадії

	Яєчники округлої форми, жовтувато-жовтогарячого кольору, займають близько 1/3-1/2 довжини порожнини тіла. Вони наповнені дрібними непрозорими жовтуватими або білуватими икринками, добре помітними неозброєним оком. При розрізі яєчника ікринки тримаються грудками; яйценесучі платівки ще видно. По стінках яєчника проходять великі розгалужені кровоносні судини.	Овоцити лежать густіше внаслідок збільшення їх розмірів. Вони знаходяться на початку періоду великого (трофоплазматичного) зростання: основна маса овоцитів проходить фази ва куолізації цитоплазми і початку жовткоутворення. Є молодші генерації. У самок, що вже нерестували, можуть зустрітися невиметані ікринки, що резорбуються.
	Яєчники сильно збільшені в об'ємі та займають більше половини – іноді до 2/3 порожнини тіла. Вони світло-жовтогарячого кольору, туго набиті непрозорими икринками. Стінки яєчника прозорі. При розрізі їх випадають окремі ікринки. Яйценесучі платівки невиразні. Макроскопічно легко помітити перехід овоцитів старшої генерації в наступну фазу: у яєчнику, близькому до зрілості, серед жовтих каламутних овоцитів з'являються одиночні більші та прозоріші ікринки. Кількість таких ікринок зростає.	Овоцити старшої генерації знаходяться наприкінці періоду трофоплазматичного зростання, тобто у фазі заповнення жовтком. Є овоцити молодших генерацій. Іноді зустрічаються залишки дегенеруючих зрілих ікринок (у статевозрілих риб)
	Яєчники досягають максимальних розмірів, вони наповнені икринками, що випливають при слабкому погладжуванні черевця (а після гіпофізарних ін'єкцій – і без будь-якого натискання). Ікринки, що овулювали, прозорі, кулясті	Овоцити старшої генерації досягли дефінітивних розмірів. Глибоки жовтка зливаються (у більшості видів). Ядро невиразне. Овоцити виходять із фолікулів. Є овоцити молодших генерацій
	Вибій, яєчник після нересту. Стінки яєчника спадаються, стають в'ялими, непрозорими, складчастими, червонувато-синюватого кольору. Спустошений яєчник сильно зменшується в обсязі	Спустілі фолікули, дегенерують зрілі ікринки, що залишилися невметаними, овоцити молодих генерації

Через деякий час запалення проходить, яєчник поступово світлішає, стає світло-рожевим і перетворюється на стадію II.

Таблиця 5 Шкала зрілості гонад. Самці .

Стадія не повторюється

	Насінники представлені тонкими білуватими або трохи рожевими тяжами. Кровоносні судини на їх поверхні не видно	Поряд із сперматогоніями виявляються сперматоцити I порядку
	Насінники на всьому протязі сплощені, в кінцевому відділі звужені, щільні, пружні, білуватого або рожевого кольору від безлічі дрібних кровоносних судин. На поперечному розрізі насінник виглядає гострокутним, краї його не спливаються; молоки не виділяються	Мікроскопічна картина дуже строката. У сім'яниках, наприклад, циприноїдного типу поряд з ампулами, заповненими сперматоцитами I та II порядків та сперматидами, зустрічаються ампули, що містять сперматозоїди. Є й сперматогонії – на периферії.
	Насінники великі, молочно-білого кольору, менш пружні. При натисканні на черевце виділяються невеликі краплі молок. При розрізі насінників краю спливаються від сперми, що виділяється.	Різко збільшено кількість ампул зі сформованими сперматозоїдами. Інші ампули містять сперматиди, тобто продовжується асинхронність у розвитку клітин, що готуються до нересту.
	Нерестовий стан; сперма рясно виділяється при найслабшому погладжуванні черевця або навіть без дотику Насінники найбільшого розміру, вони еластичні, молочно-білі або трохи кремового відтінку	Ампули сім'яників у периферичній та центральній частинах заповнені сперматозоїдами, що лежать на периферії як би хвилями
	Вибій, стан після нересту. Насінники, звільнені від сперми, малі, м'які, рожеві з бурим відтінком, на розрізі різко кутасті	Стінки насіннєвих канальців спалися, потовщені. Просвіти канальців вузькі, у яких зустрічаються окремі невиметані сперматозоїди. У пристінних ділянках лежать сперматогонії

У багаторазово нерестуючих риб заліза переходить потім у ІІ стадію

Розвиток сечостатевої системив еволюції риб призвело до відокремлення статевих проток від видільних.

У круглоротих спеціальних статевих проток немає. З статевої залози, що розривається, статеві продукти випадають в порожнину тіла, з неї - через статеві пори - в сечостатевий синус, а потім через сечостатевий отвір виводяться назовні.

Статеві залози, гонади – сім'яники у самців і яєчники або ястики у самок – стрічкоподібні або мішковидні утворення, що висять на складках очеревини – брижі – у порожнині тіла, над кишечником, під плавальною бульбашкою. Будова гонад, подібна в основі, у різних груп риб має деякі особливості, У круглоротих статева залоза непарна, у справжніх риб гонади переважно парні. Варіації у формі гонад у різних видівголовним чином виражаються в частковому або повному злитті парних залоз в одну непарну (самки тріски, окуня, бельдюги, самці піщанки) або в ясно вираженій асиметрії розвитку: часто гонади бувають різні за обсягом і масою (мийва, срібний карась та ін), аж до зникнення однієї з них. З внутрішньої сторони стінок яєчника в щілинну порожнину його відходять поперечні яйця несучі пластинки, на яких розвиваються статеві клітини. Основу пластинок складають сполучнотканинні тяжи з численними відгалуженнями. Уздовж тяжів проходять сильно розгалужені кровоносні судини. Зрілі статеві клітини випадають з пластинок, що яйце несуть, в порожнину яєчника, яка може бути розташована в центрі його (наприклад, окуневі) або збоку (наприклад, коропові).

Яєчник безпосередньо зливається з яйцеводом, що виводить яйця назовні. У деяких форм (лососеві, корюшкові, вугрові) яєчники не замкнуті і зрілі яйця випадають у порожнину тіла, а вже через неї через спеціальні протоки виводяться з організму. Насінники більшості риб – парні мішковидні утворення. Зрілі статеві клітини по вивідних протоках – сім'япроводах – виводяться у зовнішнє середовище через спеціальний статевий отвір (у самців лососів, оселедців, щуки та деяких інших) або через сечостатевий отвір, розташований позаду ануса (у самців більшості кісткових риб).

У насінниках перкоїдного типу насіннєві канальці тягнуться від стінок насінника радіально. Вони прямі, вивідна протока розташована в центрі сім'яника. Насінник на поперечному зрізі має трикутну форму.

Крізь власну (Z. radiata) і драглисту оболонку проходить канал (мікропілі), через який сперматозоїд проникає в яйцеклітину при заплідненні. У костистих риб одне мікропиле, у осетрових – кілька: у севрюги – до 13, білуги – до 33, чорноморсько-азовського осетра – до 52. Тому поліспермія можлива лише у осетрових риб, але не в костистих. При овуляції фолікулярна і сполучнотканинна оболонки лопаються і залишаються на яйценесучих пластинках, а звільнений з них овоцит, оточений власною і драглистими оболонками, випадає в порожнину яєчника або порожнину тіла. Тут яйця, що овулюють, знаходяться в порожнинній (оваріальній) рідини, зберігаючи відносно тривалий час здатність до запліднення (табл. 3). У воді або поза порожнинною рідиною вони цю здатність швидко втрачають.

У акул і схилів, яким властиве внутрішнє запліднення, запліднене яйце, просуваючись по статевих шляхах, оточується ще однією – третинною – оболонкою. Рогоподібна речовина цієї оболонки утворює тверду капсулу, що надійно захищає зародок у зовнішньому середовищі.

Таблиця 3 Збереження яйцями здатності до запліднення

Білуга Huso huso 12-13,5 Щука Esox lucius 3,5 10 24 Судак Lucioperca lucioperca 4-10

У однієї самки овоцити (а після овуляції - ікринки) неоднакові за величиною: найбільші можуть перевершувати найдрібніші в 1,5-2 рази. Це залежить від їхнього розташування на яйценосній платівці: овоцити, що лежать поблизу кровоносних судин, краще постачаються. поживними речовинамиі досягають більших розмірів.

Характерними рисами розвитку сім'яників є сильна нерівномірність (асинхронність) розвитку органу загалом. Особливо сильно ця нерівномірність проявляється у вперше дозрівають риб, але цілком чітко виражена і у нерестуючих повторно статевозрілих особин. В результаті практично всі самці нерестують порційно і протягом тривалого від них можна отримувати сперму.

Процес дозрівання статевих клітин у різних риб відбувається, загалом, за однією схемою. У міру розвитку статевих клітин усередині яєчників та насінників змінюються і зовнішній вигляд, та розміри гонад. Це спонукало скласти так звану шкалу зрілості гонад, користуючись якою можна було б за зовнішніми ознаками гонад визначити ступінь зрілості статевих продуктів, що дуже важливо у наукових та промислових дослідженнях. Найчастіше використовують універсальну 6-бальну шкалу, в основі якої лежать загальні ознаки різних видівриб. Запропоновано також інші шкали, в яких враховують особливості дозрівання певних груп риб. Так, для яєчників коропових та окуневих В. М. Мейєном запропоновано 6-бальну шкалу, а для насінників С. І. Кулаєва – 8-бальну.

Таблиця 4 Шкала зрілості гонад. Самки

Стадія не повторюється (буває один раз у житті)

III	Яєчники округлої форми, жовтувато-жовтогарячого кольору, займають близько 1/3-1/2 довжини порожнини тіла. Вони наповнені дрібними непрозорими жовтуватими або білуватими икринками, добре помітними неозброєним оком. При розрізі яєчника ікринки тримаються грудками; яйценесучі платівки ще видно. По стінках яєчника проходять великі розгалужені кровоносні судини.	Овоцити лежать густіше внаслідок збільшення їх розмірів. Вони знаходяться на початку періоду великого (трофоплазматичного) зростання: основна маса овоцитів проходить фази ва куолізації цитоплазми і початку жовткоутворення. Є молодші генерації. У самок, що вже нерестували, можуть зустрітися невиметані ікринки, що резорбуються.
IV	Яєчники сильно збільшені в об'ємі та займають більше половини – іноді до 2/3 порожнини тіла. Вони світло-жовтогарячого кольору, туго набиті непрозорими икринками. Стінки яєчника прозорі. При розрізі їх випадають окремі ікринки. Яйценесучі платівки невиразні. Макроскопічно легко помітити перехід овоцитів старшої генерації в наступну фазу: у яєчнику, близькому до зрілості, серед жовтих каламутних овоцитів з'являються одиночні більші та прозоріші ікринки. Кількість таких ікринок зростає.	Овоцити старшої генерації знаходяться наприкінці періоду трофоплазматичного зростання, тобто у фазі заповнення жовтком. Є овоцити молодших генерацій. Іноді зустрічаються залишки дегенеруючих зрілих ікринок (у статевозрілих риб)
V	Яєчники досягають максимальних розмірів, вони наповнені икринками, що випливають при слабкому погладжуванні черевця (а після гіпофізарних ін'єкцій – і без будь-якого натискання). Ікринки, що овулювали, прозорі, кулясті	Овоцити старшої генерації досягли дефінітивних розмірів. Глибоки жовтка зливаються (у більшості видів). Ядро невиразне. Овоцити виходять із фолікулів. Є овоцити молодших генерацій
VI	Вибій, яєчник після нересту. Стінки яєчника спадаються, стають в'ялими, непрозорими, складчастими, червонувато-синюватого кольору. Спустошений яєчник сильно зменшується в обсязі	Спустілі фолікули, дегенерують зрілі ікринки, що залишилися невметаними, овоцити молодих генерації

Таблиця 5 Шкала зрілості гонад. Самці

Стадія не повторюється

II	Насінники представлені тонкими білуватими або трохи рожевими тяжами. Кровоносні судини на їх поверхні не видно	Поряд із сперматогоніями виявляються сперматоцити I порядку
III	Насінники на всьому протязі сплощені, в кінцевому відділі звужені, щільні, пружні, білуватого або рожевого кольору від безлічі дрібних кровоносних судин. На поперечному розрізі насінник виглядає гострокутним, краї його не спливаються; молоки не виділяються	Мікроскопічна картина дуже строката. У сім'яниках, наприклад, циприноїдного типу поряд з ампулами, заповненими сперматоцитами I та II порядків та сперматидами, зустрічаються ампули, що містять сперматозоїди. Є й сперматогонії – на периферії.
IV	Насінники великі, молочно-білого кольору, менш пружні. При натисканні на черевце виділяються невеликі краплі молок. При розрізі насінників краю спливаються від сперми, що виділяється.	Різко збільшено кількість ампул зі сформованими сперматозоїдами. Інші ампули містять сперматиди, тобто продовжується асинхронність у розвитку клітин, що готуються до нересту.
V	Нерестовий стан; сперма рясно виділяється при найслабшому погладжуванні черевця або навіть без дотику Насінники найбільшого розміру, вони еластичні, молочно-білі або трохи кремового відтінку	Ампули сім'яників у периферичній та центральній частинах заповнені сперматозоїдами, що лежать на периферії як би хвилями
VI	Вибій, стан після нересту. Насінники, звільнені від сперми, малі, м'які, рожеві з бурим відтінком, на розрізі різко кутасті	Стінки насіннєвих канальців спалися, потовщені. Просвіти канальців вузькі, у яких зустрічаються окремі невиметані сперматозоїди. У пристінних ділянках лежать сперматогонії