फ़ाइब्रोब्लास्ट। फ़ाइब्रोब्लास्ट के कार्य

आधुनिक की मुख्य गतिविधि सौंदर्य चिकित्सा- उच्च प्रौद्योगिकियों का उपयोग करके उम्र बढ़ने की रोकथाम। नतीजतन वैज्ञानिक अनुसंधानएक पैटर्न की पहचान की गई है कि कोशिकाओं में पुनर्जीवित होने की क्षमता होती है। फ़ाइब्रोब्लास्ट में भी ये गुण होते हैं, जिनके पुनर्जनन से त्वचा का कायाकल्प होता है और उन पर दिखाई देने वाले दोष ख़त्म हो जाते हैं।

फ़ाइब्रोब्लास्ट के कार्य और प्रकृति

शब्द "फाइब्रोब्लास्ट्स" दो लैटिन शब्दों से मिलकर बना है जिनका शाब्दिक अनुवाद "अंकुरित" और "फाइबर" है। अपने स्वभाव से वे कोशिकाएँ हैं संयोजी ऊतक, बाह्य कोशिकीय मैट्रिक्स (ऊतक संरचना जो स्थानांतरण सुनिश्चित करता है) को संश्लेषित करता है रासायनिक पदार्थऔर त्वचा कोशिकाओं का यांत्रिक समर्थन)। फ़ाइब्रोब्लास्ट ऐसे पदार्थों का उत्पादन करते हैं जो कोलेजन और इलास्टिन फाइबर, हायल्यूरोनिक एसिड, फ़ाइब्रिन के अग्रदूत होते हैं।

वे मेसेनचाइम से आते हैं - रोगाणु ऊतक जो मनुष्यों और जानवरों के शरीर की कोशिकाओं में पाए जाते हैं। सक्रिय अवस्था में, फ़ाइब्रोप्लास्ट की संरचना एक नाभिक और प्रक्रियाओं की उपस्थिति का अर्थ है; उनका आकार बढ़ा हुआ होता है और आराम की अवस्था में उनमें बड़ी संख्या में राइबोसोम होते हैं, वे आकार में कम हो जाते हैं और एक धुरी के आकार का आकार प्राप्त कर लेते हैं।

त्वचा के फ़ाइब्रोब्लास्ट में होता है विस्तृत श्रृंखलाकार्य. शरीर में उनकी उपस्थिति के कारण, निम्नलिखित प्रक्रियाएँ होती हैं:

• कोलेजन और इलास्टिन संश्लेषण प्रक्रियाओं का सक्रियण।
• रक्त वाहिकाओं का निर्माण.
• प्रतिरक्षा प्रणाली की कोशिकाओं को बैक्टीरिया और विदेशी कणों की ओर निर्देशित करना।
• ऊतक वृद्धि का त्वरण.
• कोशिका वृद्धि में वृद्धि.
• क्षतिग्रस्त त्वचा क्षेत्रों का उपचार.
• कई प्रोटीनों का उत्पादन (प्रोटियोग्लाइकन, लैमिनिन और अन्य)।

उम्र से संबंधित परिवर्तनों के कारण

त्वचा का यौवन कोलेजन और इलास्टिन के उत्पादन की चक्रीय प्रक्रिया द्वारा निर्धारित होता है, जो बाद में अपने घटक भागों में टूट जाते हैं, जिनका उपयोग फ़ाइब्रोब्लास्ट द्वारा उन्हें फिर से उत्पन्न करने के लिए किया जाता है। समय के साथ, बाद वाले अपनी गतिविधि कम कर देते हैं, कोलेजन और इलास्टिन फाइबर का उत्पादन बंद कर देते हैं, जो अंततः त्वचा की उम्र बढ़ने को भड़काता है।

उम्र से संबंधित परिवर्तन 28 से 30 वर्ष की आयु में दिखाई देने लगते हैं। वे लोच की हानि और पीटोसिस के विकास, त्वचा के रंग में परिवर्तन, शुष्कता में वृद्धि और झुर्रियों के गठन में व्यक्त होते हैं। और यह सब इस तथ्य के कारण है कि हर दशक में फ़ाइब्रोब्लास्ट 10% कम हो जाते हैं मूल संख्या.

फ़ाइब्रोब्लास्ट की पुनःपूर्ति

इसलिए, उम्र बढ़ने को धीमा करने और युवाओं को बहाल करने के लिए, फ़ाइब्रोब्लास्ट को बहाल करना आवश्यक है. अधिकांश आधुनिक कॉस्मेटिक तकनीकें केवल कोलेजन फाइबर के संश्लेषण में अस्थायी तेजी लाती हैं, लेकिन कोशिकाओं को स्वयं नहीं बढ़ाती हैं। लंबे समय तक यह आम तौर पर स्वीकार किया गया कि यह बिल्कुल असंभव था।

आजकल, विज्ञान ने काफी प्रगति की है, और फ़ाइब्रोब्लास्ट की बहाली अब कोई कल्पना नहीं है। यह कार्यविधिइसे एसपीआरएस थेरेपी कहा जाता है और यह राज्यों, यूरोपीय देशों और हाल ही में रूस में व्यापक रूप से प्रचलित है।

एसपीआरएस थेरेपी: कार्यान्वयन की विशेषताएं और सिद्धांत

फ़ाइब्रोब्लास्ट को पुनर्स्थापित करना आसान नहीं है; इसके लिए एक जटिल इंजेक्शन प्रक्रिया से गुजरना पड़ता है। इसके कार्यान्वयन के परिणाम त्वचा का मोटा होना और उसकी लोच में वृद्धि, पीटोसिस की रोकथाम और कमी है। झुर्रियाँ भी कम हो जाती हैं, रंजकता गायब हो जाती है और दाग भी ठीक हो जाते हैं।

थेरेपी की शुरुआत ऑरिकल के पीछे स्थित त्वचा से रोगी की कोशिकाओं के संग्रह से होती है। परिणामी नमूने का उपयोग निदान और अध्ययन के लिए किया जाता है, जिसे बायोमटेरियल कहा जाता है। इसका उपयोग एक उपचार आहार विकसित करने और कृत्रिम रूप से फ़ाइब्रोब्लास्ट को फिर से बनाने के लिए किया जाता है, जिसे बाद में इंजेक्शन का उपयोग करके त्वचा में वापस इंजेक्ट किया जाएगा।

रोगी बायोमटेरियल से विकसित कोशिकाओं को शरीर द्वारा अस्वीकार नहीं किया जाता है। प्रत्यारोपण के बाद, वे डेढ़ साल तक सक्रिय रहते हैं, इस दौरान त्वचा की स्थिति में सुधार होता है।

पुरानी बीमारियों, सर्दी, वायरल संक्रमण के साथ-साथ फाइब्रोब्लास्ट को इंजेक्शन द्वारा प्रशासित करने की अनुशंसा नहीं की जाती है उच्च तापमानशव. अंतर्विरोधों में इम्युनोडेफिशिएंसी शामिल है, घातक संरचनाएँ, संक्रमण और पुराने रोगोंवी तीव्र अवस्था. प्रक्रिया को अंजाम देने से पहले, व्यक्तिगत मतभेदों की पहचान करने के लिए किसी विशेषज्ञ से प्रारंभिक परामर्श की आवश्यकता होती है।

प्रक्रिया में एक घंटे से अधिक समय नहीं लगता है और 5 से 7 सप्ताह के ब्रेक के साथ 2 सत्रों के दौरान किया जाता है। इंजेक्शन से पहले, स्थानीय संज्ञाहरण की आवश्यकता होती है।

फ़ाइब्रोब्लास्ट का परिचय देना एक महँगा आनंद है। की पूरी रेंजबायोमैटेरियल्स के संग्रह, भंडारण, अनुसंधान और प्रशासन सहित सेवाओं का अनुमान लगभग 400,000 रूबल है।

वीडियो: एसपीआरएस थेरेपी का संचालन

फ़ाइब्रोब्लास्ट संयोजी ऊतक कोशिकाएं हैं जो कोलेजन और इलास्टिन का उत्पादन सुनिश्चित करती हैं, जिससे हमारी त्वचा की जवानी बनी रहती है। समय के साथ शरीर में इनकी संख्या लगातार कम होती जाती है, जिससे उम्र से संबंधित परिवर्तनों के बाहरी लक्षण दिखाई देने लगते हैं। फ़ाइब्रोब्लास्ट की संख्या की बहाली कृत्रिम रूप से विकसित कोशिकाओं पर आधारित इंजेक्शन तकनीक का उपयोग करके की जाती है।

fibroblasts- ढीले संयोजी ऊतक की अग्रणी कोशिकाएं, अंतरकोशिकीय पदार्थ के घटकों का निर्माण करती हैं। ये शाखित, धुरी के आकार की या फैली हुई कोशिकाएँ हैं जिनकी माप लगभग 20 माइक्रोन होती है। उनमें आंतरिक चयापचय वातावरण के अंग अच्छी तरह से विकसित होते हैं। फ़ाइब्रोब्लास्ट नाभिक आकार में अंडाकार होता है, इसमें समान रूप से फैले हुए क्रोमैटिन और 2-3 न्यूक्लियोली होते हैं। साइटोप्लाज्म स्पष्ट रूप से तीव्र रूप से रंगे हुए एंडोप्लाज्म और कमजोर रूप से रंगे हुए एक्टोप्लाज्म में विभाजित होता है। फ़ाइब्रोब्लास्ट (विशेष रूप से युवा) का साइटोप्लाज्म बेसोफिलिक होता है। यह एक अच्छी तरह से विकसित एंडोप्लाज्मिक रेटिकुलम को प्रकट करता है जिसमें 10-30 कणिकाओं की श्रृंखला के रूप में झिल्ली से बड़ी संख्या में राइबोसोम जुड़े होते हैं। दानेदार एंडोप्लाज्मिक रेटिकुलम की यह संरचना उन कोशिकाओं की विशेषता है जो सक्रिय रूप से "निर्यात के लिए" प्रोटीन का संश्लेषण करती हैं। यहां असंख्य मुक्त राइबोसोम और एक सुविकसित गोल्गी कॉम्प्लेक्स भी हैं। माइटोकॉन्ड्रिया बड़े होते हैं, उनकी संख्या कम होती है। साइटोकेमिकल विधियों ने फ़ाइब्रोब्लास्ट के साइटोप्लाज्म में लाइसोसोम (विशेष रूप से कोलेजनेज़) के ग्लाइकोलाइटिक एंजाइम और हाइड्रोलाइटिक एंजाइम की उपस्थिति को दिखाया है। माइटोकॉन्ड्रिया ऑक्सीडेटिव एंजाइम कम सक्रिय होते हैं।

कोशिका का मस्कुलोस्केलेटल तंत्रउनकी गतिशीलता, आकार में परिवर्तन, सब्सट्रेट से लगाव, फिल्म का यांत्रिक तनाव जिससे कोशिका संस्कृति में जुड़ी हुई है, सुनिश्चित करती है। कोशिका की सतह पर कई माइक्रोविली और वेसिकुलर प्रक्षेपण होते हैं। तरल माध्यम में निलंबित फ़ाइब्रोब्लास्ट का आकार गोलाकार होता है। फ़ाइब्रोब्लास्ट एक ठोस सतह से चिपककर फैल जाता है, जिसके साथ यह स्यूडोपोडिया के कारण चलता है।

फ़ाइब्रोब्लास्ट का मुख्य कार्य- प्रोटीन और ग्लाइकोसामिनोग्लाइकेन्स का संश्लेषण और स्राव संयोजी ऊतक के अंतरकोशिकीय पदार्थ के घटकों के निर्माण के साथ-साथ कॉलोनी-उत्तेजक कारकों (ग्रैनुलोसाइट्स, मैक्रोफेज) के उत्पादन और स्राव के लिए उपयोग किया जाता है। fibroblasts कब काफैलने की क्षमता बनाए रखें। फ़ाइब्रोब्लास्ट जिन्होंने अपना विकास चक्र पूरा कर लिया है, फ़ाइब्रोसाइट्स कहलाते हैं। ये दीर्घजीवी कोशिकाएँ हैं। कोशिका कोशिकाद्रव्य में अंगक समाप्त हो जाते हैं, कोशिका चपटी हो जाती है, और प्रसार क्षमता कम हो जाती है। हालाँकि, सेल विनियमन में भाग लेने की क्षमता नहीं खोता है चयापचय प्रक्रियाएंकपड़े में.

अंतरकोशिकीय पदार्थ. तंतुमय और बुनियादी (अनाकार) घटकों से मिलकर बनता है। लेबल किए गए अमीनो एसिड (3H-प्रोलाइन, 3H-ग्लाइसिन, आदि) की शुरूआत के साथ हिस्टोऑटोरैडियोग्राफी विधियों का उपयोग करते हुए, यह स्थापित किया गया कि प्रोटीन अणुओं को फ़ाइब्रोब्लास्ट पॉलीसोम में संश्लेषित किया जाता है। फ़ाइब्रोब्लास्ट एक साथ कई प्रकार के विशिष्ट प्रोटीन और ग्लाइकोसामिनोग्लाइकेन्स को संश्लेषित कर सकते हैं। कोलेजन प्रोटीन के संश्लेषण के लिए, विटामिन सी की उपस्थिति आवश्यक है, जिसकी कमी से कोलेजनोजेनेसिस तेजी से बाधित होता है। अंतरकोशिकीय पदार्थों का संश्लेषण कम ऑक्सीजन सांद्रता की स्थितियों में अधिक तीव्रता से होता है। कोलेजन के संश्लेषण के साथ-साथ, फ़ाइब्रोब्लास्ट एंजाइम कोलेजनेज़ का उपयोग करके इस प्रोटीन के लगभग 2/3 को नष्ट कर देता है, जो समय से पहले ऊतक स्केलेरोसिस को रोकता है।

संश्लेषित प्रोकोलेजन अणुएक्सोसाइटोसिस द्वारा फ़ाइब्रोब्लास्ट की सतह पर लाया जाता है। इस मामले में, प्रोटीन घुलनशील रूप से अघुलनशील रूप - ट्रोपोकोलेजन में परिवर्तित हो जाता है। सुपरमॉलेक्यूलर संरचनाओं में ट्रोपोकोलेजन अणुओं का संयोजन - कोलेजन फ़ाइब्रिल्स - कोशिका द्वारा स्रावित विशेष पदार्थों की क्रिया के कारण कोशिका की सतह के तत्काल आसपास के क्षेत्र में होता है। विशेष रूप से, फ़ाइब्रोब्लास्ट की सतह पर एक प्रोटीन पाया गया - फ़ाइब्रोनेक्टिन, जो चिपकने वाला और अन्य कार्य करता है। फाइब्रिलोजेनेसिस के बाद के चरण पहले से बने फाइब्रिल पर ट्रोपोकोलेजन के पोलीमराइजेशन और एकत्रीकरण से होते हैं। इस मामले में, कोलेजन फाइबर की परिपक्वता फ़ाइब्रोब्लास्ट के साथ सीधे संबंध के बिना हो सकती है।
ग्लाइकोसअमिनोग्लाइकन्सकोलेजन निर्माण के नियामक हैं और अंतरकोशिकीय पदार्थ के मुख्य (अनाकार) घटक का हिस्सा हैं।

तंतुमय घटकढीले संयोजी ऊतक के अंतरकोशिकीय पदार्थ में तीन प्रकार के फाइबर शामिल होते हैं - कोलेजन, लोचदार और जालीदार। उनके गठन का तंत्र समान है, लेकिन वे एक-दूसरे से भिन्न हैं रासायनिक संरचना, अल्ट्रास्ट्रक्चर और भौतिक गुण। कोलेजन प्रोटीन की पहचान उसके अमीनो एसिड संरचना और कोलेजन अणु में अमीनो एसिड के अनुक्रम से होती है। पॉलीपेप्टाइड श्रृंखला में अमीनो एसिड की भिन्नता, प्रतिरक्षा गुण, आणविक भार आदि के आधार पर, कोलेजन प्रोटीन की 14 या अधिक किस्मों को प्रतिष्ठित किया जाता है, जो अंगों के संयोजी ऊतक का हिस्सा होते हैं। वे सभी कोलेजन के 4 मुख्य प्रकार या वर्ग बनाते हैं।

टाइप 1 कोलेजनसंयोजक और में पाया गया हड्डी का ऊतक, साथ ही आंख के श्वेतपटल और कॉर्निया में; टाइप II - कार्टिलाजिनस ऊतकों में; प्रकार III - रक्त वाहिकाओं की दीवार में, भ्रूण की त्वचा के संयोजी ऊतक में; IV-ro प्रकार - बेसमेंट झिल्लियों में।

fibroblasts(फाइब्रोब्लास्टोसाइट्स) (लैटिन फाइब्रा से - फाइबर, ग्रीक ब्लास्टोस - अंकुरित, रोगाणु) - कोशिकाएं जो अंतरकोशिकीय पदार्थ के घटकों को संश्लेषित करती हैं: प्रोटीन (उदाहरण के लिए, कोलेजन, इलास्टिन), प्रोटीयोग्लाइकेन्स, ग्लाइकोप्रोटीन।

भ्रूण काल ​​में, भ्रूण की कई मेसेनकाइमल कोशिकाएं उत्पन्न होती हैं फ़ाइब्रोब्लास्ट विभेदन, जो भी शामिल है:

· मूल कोशिका,

अर्ध-तना पूर्वज कोशिकाएँ,

· अविशिष्ट फ़ाइब्रोब्लास्ट,

विभेदित फ़ाइब्रोब्लास्ट (परिपक्व, सक्रिय रूप से कार्यशील),

फ़ाइब्रोसाइट्स (निश्चित) कोशिका आकृतियाँ),

मायोफाइब्रोब्लास्ट और फ़ाइब्रोक्लास्ट।

साथ मुख्य समारोहफ़ाइब्रोब्लास्ट मुख्य पदार्थ और तंतुओं के निर्माण से जुड़े होते हैं (जो स्पष्ट रूप से प्रकट होता है, उदाहरण के लिए, घाव भरने के दौरान, निशान ऊतक का विकास, एक विदेशी शरीर के चारों ओर एक संयोजी ऊतक कैप्सूल का निर्माण)।

कम विशिष्ट फ़ाइब्रोब्लास्ट एक गोल या अंडाकार नाभिक और एक छोटे न्यूक्लियोलस, बेसोफिलिक साइटोप्लाज्म, आरएनए से भरपूर कुछ प्रक्रियाओं वाली कोशिकाएं हैं। सेल का आकार 20-25 माइक्रोन से अधिक नहीं होता है। इन कोशिकाओं के कोशिका द्रव्य में बड़ी संख्या में मुक्त राइबोसोम पाए जाते हैं। एंडोप्लाज्मिक रेटिकुलम और माइटोकॉन्ड्रिया खराब विकसित होते हैं। गोल्गी तंत्र को छोटी नलिकाओं और पुटिकाओं के समूहों द्वारा दर्शाया जाता है।
साइटोजेनेसिस के इस चरण में, फ़ाइब्रोब्लास्ट में प्रोटीन संश्लेषण और स्राव का स्तर बहुत कम होता है। ये फ़ाइब्रोब्लास्ट माइटोटिक प्रजनन में सक्षम हैं।

विभेदित परिपक्व फ़ाइब्रोब्लास्ट आकार में बड़े होते हैं। ये सक्रिय रूप से कार्य करने वाली कोशिकाएँ हैं।

परिपक्व फ़ाइब्रोब्लास्ट में, कोलेजन, इलास्टिन प्रोटीन, प्रोटीयोग्लाइकेन्स का गहन जैवसंश्लेषण किया जाता है, जो मुख्य पदार्थ और फाइबर के निर्माण के लिए आवश्यक हैं। इन प्रक्रियाओं को कम ऑक्सीजन सांद्रता की स्थितियों में बढ़ाया जाता है। कोलेजन जैवसंश्लेषण के लिए उत्तेजक कारक लौह, तांबा, क्रोमियम के आयन भी हैं। एस्कॉर्बिक अम्ल. हाइड्रोलाइटिक एंजाइमों में से एक है कोलेजिनेस- कोशिकाओं के अंदर अपरिपक्व कोलेजन को तोड़ता है, जो सेलुलर स्तर पर कोलेजन स्राव की तीव्रता को नियंत्रित करता है।

फ़ाइब्रोब्लास्ट गतिशील कोशिकाएँ हैं। उनके साइटोप्लाज्म में, विशेष रूप से परिधीय परत में, एक्टिन और मायोसिन जैसे प्रोटीन युक्त माइक्रोफिलामेंट्स होते हैं। फ़ाइब्रोब्लास्ट की गति तभी संभव हो पाती है जब वे फ़ाइब्रिलर संरचनाओं का उपयोग करके समर्थन करने के लिए बाध्य होते हैं फ़ाइब्रोनेक्टिन- फ़ाइब्रोब्लास्ट और अन्य कोशिकाओं द्वारा संश्लेषित एक ग्लाइकोप्रोटीन, जो कोशिकाओं और गैर-सेलुलर संरचनाओं के आसंजन को सुनिश्चित करता है। गति के दौरान, फ़ाइब्रोब्लास्ट चपटा हो जाता है, और इसकी सतह 10 गुना बढ़ सकती है।

फ़ाइब्रोब्लास्ट का प्लाज़्मालेम्मा एक महत्वपूर्ण रिसेप्टर ज़ोन है जो विभिन्न नियामक कारकों के प्रभावों की मध्यस्थता करता है। फ़ाइब्रोब्लास्ट का सक्रियण आमतौर पर ग्लाइकोजन के संचय और हाइड्रोलाइटिक एंजाइमों की बढ़ी हुई गतिविधि के साथ होता है। ग्लाइकोजन चयापचय द्वारा उत्पन्न ऊर्जा का उपयोग कोशिका द्वारा स्रावित पॉलीपेप्टाइड और अन्य घटकों को संश्लेषित करने के लिए किया जाता है।

फाइब्रिलर प्रोटीन को संश्लेषित करने की उनकी क्षमता के आधार पर, फाइब्रोब्लास्ट परिवार में हेमेटोपोएटिक अंगों के जालीदार संयोजी ऊतक की जालीदार कोशिकाएं, साथ ही संयोजी ऊतक के कंकाल प्रकार के चोंड्रोब्लास्ट और ओस्टियोब्लास्ट शामिल हैं।

फ़ाइब्रोसाइट्स- फ़ाइब्रोब्लास्ट विकास के निश्चित (अंतिम) रूप। ये कोशिकाएँ धुरी के आकार की होती हैं pterygoid प्रक्रियाएँ. [इनमें कम संख्या में ऑर्गेनेल, रिक्तिकाएं, लिपिड और ग्लाइकोजन होते हैं।] फ़ाइब्रोसाइट्स में कोलेजन और अन्य पदार्थों का संश्लेषण तेजी से कम हो जाता है।

पेशीतंतुकोशिकाएं- फ़ाइब्रोब्लास्ट के समान कोशिकाएं, न केवल कोलेजन को संश्लेषित करने की क्षमता रखती हैं, बल्कि महत्वपूर्ण मात्रा में सिकुड़ा हुआ प्रोटीन भी बनाती हैं। फ़ाइब्रोब्लास्ट मायोफ़ाइब्रोब्लास्ट में बदल सकते हैं, जो कार्यात्मक रूप से चिकने के समान होते हैं मांसपेशियों की कोशिकाएं, लेकिन बाद वाले के विपरीत उनके पास एक अच्छी तरह से विकसित एंडोप्लाज्मिक रेटिकुलम है। ऐसी कोशिकाएं ठीक होने वाले घावों के दानेदार ऊतकों और गर्भावस्था के दौरान गर्भाशय में देखी जाती हैं।

फ़ाइब्रोक्लास्ट- उच्च फागोसाइटिक और हाइड्रोलाइटिक गतिविधि वाली कोशिकाएं, अंग के शामिल होने की अवधि के दौरान अंतरकोशिकीय पदार्थ के "पुनरुत्थान" में भाग लेती हैं (उदाहरण के लिए, गर्भावस्था के बाद गर्भाशय में)। वे फाइब्रिल-गठन कोशिकाओं (विकसित दानेदार एंडोप्लाज्मिक रेटिकुलम, गोल्गी तंत्र, अपेक्षाकृत बड़े लेकिन कुछ माइटोकॉन्ड्रिया) की संरचनात्मक विशेषताओं के साथ-साथ लाइसोसोम को उनके विशिष्ट हाइड्रोलाइटिक एंजाइमों के साथ जोड़ते हैं। कोशिका के बाहर उनके द्वारा स्रावित एंजाइमों का परिसर कोलेजन फाइबर के सीमेंटिंग पदार्थ को तोड़ देता है, जिसके बाद कोलेजन का फागोसाइटोसिस और इंट्रासेल्युलर पाचन होता है।

रेशेदार संयोजी ऊतक की निम्नलिखित कोशिकाएँ अब फ़ाइब्रोब्लास्ट विभेदन से संबंधित नहीं हैं।

त्वचा के फ़ाइब्रोब्लास्ट संयोजी ऊतक का आधार बनते हैं। वे हयालूरोनिक एसिड, कोलेजन फाइबर और इलास्टिन के उत्पादक हैं। उम्र से संबंधित परिवर्तन फ़ाइब्रोब्लास्ट के कामकाज को धीमा कर देते हैं, जिससे त्वचा पतली और परतदार हो जाती है। सेल्यूलर को धन्यवाद इंजेक्शन तकनीकशरीर स्वतंत्र रूप से डर्मिस की संरचना को फिर से जीवंत करने का कार्य शुरू करता है।

फ़ाइब्रोब्लास्ट का सार

त्वचा के फ़ाइब्रोब्लास्ट- ये डर्मिस की संयोजी ऊतक परत की कोशिकाएं हैं, जिनके पूर्ववर्ती स्टेम कोशिकाएं थीं। वे दो रूपों में आते हैं:

1. सक्रिय - बड़ी कोशिकाएँ, एक सपाट अंडाकार आकार के नाभिक, बड़ी संख्या में राइबोसोम और प्रक्रियाओं से सुसज्जित। उन्हें गहन विभाजन, कोलेजन और अन्य मैट्रिक्स घटकों के उत्पादन की विशेषता है।
2. निष्क्रिय (फाइब्रोसाइट्स) - कोशिकाएं थोड़ी छोटी होती हैं और धुरी के आकार की होती हैं। वे फ़ाइब्रोब्लास्ट से बनते हैं और विभाजित नहीं हो सकते। फाइबर संश्लेषण और घाव पुनर्जनन में भाग लें।

जैसे-जैसे शरीर की उम्र बढ़ती है, फ़ाइब्रोब्लास्ट की संख्या कम हो जाती है और उनकी गतिविधि कम हो जाती है। इससे अंतरकोशिकीय पदार्थों के संश्लेषण में गिरावट आती है। यह प्रक्रिया त्वचा पर पतलेपन, रूखेपन और ढीलेपन के रूप में दिखाई देती है। इसमें खिंचाव होता है और झुर्रियां पड़ जाती हैं।

कार्य

फ़ाइब्रोब्लास्ट का एक मुख्य कार्य अंतरकोशिकीय पदार्थ का उत्पादन और पुनर्जनन है। विकास कारक, बाह्य मैट्रिक्स के घटक, एंजाइम बनाकर, वे कोलेजन और हाइलूरोनिक एसिड के विनाश और नए संश्लेषण में योगदान करते हैं। नॉन-स्टॉप प्रक्रिया के लिए धन्यवाद, अंतरकोशिकीय पदार्थ का नवीनीकरण होता है। इसके अलावा, वे कोशिका वृद्धि कारक उत्पन्न करते हैं:

• मुख्य बात यह है कि सभी त्वचीय कोशिकाओं की वृद्धि उत्तेजित होती है, सुरक्षात्मक प्रतिक्रियाओं के लिए फ़ाइब्रोनेक्टिन का उत्पादन होता है;
• परिवर्तन - कोलेजन और इलास्टिन फाइबर को संश्लेषित किया जाता है, रक्त वाहिकाओं का निर्माण होता है, प्रतिरक्षा प्रणाली की कोशिकाओं को विदेशी एजेंटों, बैक्टीरिया की ओर निर्देशित किया जाता है;
• एपिडर्मल - ऊतक प्रसार, कोशिका वृद्धि, और केराटिनोसाइट परिवहन सक्रिय होते हैं;
• केराटिनोसाइट्स की वृद्धि उपकलाकरण है, क्षति पुनर्जीवित होती है।

फ़ाइब्रोब्लास्ट वृद्धि कारकों का प्रतिनिधित्व बहुक्रियाशील प्रोटीन द्वारा किया जाता है जो माइटोजेन होते हैं और अंतःस्रावी, नियामक, कार्य भी करते हैं। संरचनात्मक कार्य. फ़ाइब्रोब्लास्ट के लिए धन्यवाद, त्वचा के लिए महत्वपूर्ण प्रोटीन का उत्पादन होता है: प्रोटीयोग्लाइकेन्स, टिनसिन, निडोजेन और लैमिनिन।

तकनीक का सार

एसपीआरएस थेरेपीफ़ाइब्रोब्लास्ट का उपयोग करके इंजेक्शन त्वचा कायाकल्प की एक तकनीक है, जो त्वचा की उम्र बढ़ने के मूल कारण को समाप्त करती है। ऑटोफाइब्रोब्लास्ट के इंट्राडर्मल प्रत्यारोपण की तकनीक का पेटेंट एक अमेरिकी कंपनी फाइब्रोसेलसाइंस का है। कोशिका प्रौद्योगिकी के माध्यम से मानव त्वचा के एक कण (बायोप्सी) से फ़ाइब्रोब्लास्ट विकसित करना संभव हो गया है। स्वयं का बायोमटेरियल ऊतक अनुकूलता की समस्या और संक्रमण के खतरे को समाप्त करता है। ऑटोलॉगस कोशिकाओं को सकारात्मक रूप से देखा जाता है प्रतिरक्षा तंत्रऔर पूर्ण रूप से कार्य करने में सक्षम हैं।

नमूना किसी भी उम्र में लिया जा सकता है, लेकिन युवावस्था में ऐसा करना बेहतर होता है। अनुशंसित आयु 20 से 30 वर्ष है। आप किसी भी ऑपरेशन के दौरान त्वचा के एक टुकड़े को बचा सकते हैं और उससे अलग की गई कोशिकाओं को कई वर्षों तक क्रायोजेनिक स्टोरेज में रख सकते हैं। -196 डिग्री का तापमान आपको आवश्यकतानुसार उनका उपयोग करते हुए, उन्हें जीवन भर संग्रहीत करने की अनुमति देता है। यह आपको किसी भी समय प्रभावी कॉस्मेटिक प्रक्रियाएं करने की अनुमति देगा।

स्टेम कोशिकाओं के साथ-साथ स्वयं के फ़ाइब्रोब्लास्ट में उम्र बढ़ने के दौरान क्षमता बनाए रखने का गुण होता है। अंतर्गत स्थानीय संज्ञाहरणरोगी के कान, नाभि या बांह के पीछे की त्वचा का एक छोटा सा नमूना लिया जाता है। ये क्षेत्र पराबैंगनी विकिरण के सबसे कम संपर्क में हैं। इसका आकार लगभग 4 मिमी है। इससे अलग किए गए फ़ाइब्रोब्लास्ट को विशेष शीशियों में रखा जाता है।

जब इन्हें भ्रूण के सीरम वाले माध्यम में विकसित किया जाता है, तो युवा कोशिकाओं में प्रसार की क्षमता उत्तेजित हो जाती है और पुरानी कोशिकाएं बह जाती हैं। संस्कृति का "कायाकल्प" हो रहा है। एक महीने के बाद कोशिकाओं की संख्या कई हजार गुना बढ़ जाती है। पुनर्सक्रियण के बाद, सेल कल्चर को रोगी में प्रत्यारोपित किया जाता है और सक्रिय रूप से त्वचा को भर देता है। डेढ़ महीने के बाद, बढ़े हुए फ़ाइब्रोब्लास्ट को रोगी के चेहरे की त्वचा में, आँखों के आसपास, साथ ही गर्दन, डायकोलेट और बाहों में इंजेक्ट किया जाता है।

प्रक्रिया

पाठ्यक्रम में 3-5 सत्र होते हैं, जिनके बीच का अंतराल 3 से 6 सप्ताह तक होता है। प्रक्रिया के चरण:

• मौजूदा मतभेदों की पहचान करने के लिए रोगी की जांच;
• सामग्री लेना;
• फ़ाइब्रोब्लास्ट खेती;
• दो तरीकों का उपयोग करके त्वचा में सेलुलर सामग्री का इंजेक्शन: सुरंग - गहरी त्वचा की परतों में, पपुलर मेसोथेरेपी;
• क्रीम लगाकर त्वचा को पराबैंगनी विकिरण से बचाना।

मरीज़ ध्यान दें कि प्रक्रिया दर्दनाक है, इसलिए इमला एनेस्थेटिक क्रीम का उपयोग किया जाता है। उपयोग की जाने वाली दवा की मात्रा प्रति सत्र 3 मिलीलीटर तक है। पुनर्प्राप्ति अवधि 2-3 दिनों तक चलती है। प्रक्रिया के बाद, सौंदर्य प्रसाधन लागू करना निषिद्ध है। दो सप्ताह तक आपको सौना या स्नानागार में जाने से बचना होगा। त्वचा को उच्च स्तर की सुरक्षा वाली क्रीम से चिकनाई देकर धूप से बचाना चाहिए। प्रक्रिया को साल में एक बार दोहराने की सलाह दी जाती है। इसके परिणामस्वरूप कई महीनों में चेहरे की त्वचा की स्थिति में सुधार होता है।

विधि की दक्षता और लाभ

फ़ाइब्रोब्लास्ट के साथ कायाकल्प 1.5 या 2 महीने के बाद पहला परिणाम देता है। पूर्ण प्रभावप्रक्रिया का प्रभाव छह महीने के बाद दिखाई देता है और 2-3 साल तक रहता है। वृद्धि कारकों और बाह्य कोशिकीय मैट्रिक्स का उन्नत उत्पादन शुरू होता है। फ़ाइब्रोब्लास्ट चक्र के प्राकृतिक चरणों से गुजरते हैं: वे सक्रिय होते हैं, इलास्टिन, कोलेजन और अन्य पदार्थों को संश्लेषित करते हैं, फिर गिरावट का चरण शुरू होता है, जिससे उन्हें नए फ़ाइब्रोब्लास्ट से बदल दिया जाता है।

उनका उपयोग चिकित्सा में व्यापक है - जलने के खिलाफ, ऊतक पुनर्जनन के लिए ट्रॉफिक अल्सर, घाव कॉस्मेटोलॉजी में इनका महत्व बहुत बड़ा है। त्वचा का यौवन फ़ाइब्रोब्लास्ट की संख्या से बनता है। त्वचा में रखे गए, विकसित फ़ाइब्रोब्लास्ट ऊतकों में एम्बेडेड होते हैं, जो कोलेजन और इलास्टिन का उत्पादन शुरू करते हैं। नतीजतन, त्वचा लोचदार हो जाती है, एक समान रंग प्राप्त कर लेती है और बारीक झुर्रियाँ गायब हो जाती हैं।

लेकिन आपको प्रक्रिया से सख्त प्रभाव की उम्मीद नहीं करनी चाहिए। इस तकनीक का उद्देश्य त्वचा की गुणवत्ता विशेषताओं में सुधार करना है। एसपीआरएस थेरेपी के मुख्य लाभ:

• दवा जीन के साथ काम करती है, जो त्वचा की प्राथमिक संरचना में व्यवधान को समाप्त करती है;
• प्राकृतिक कायाकल्प प्रक्रियाएं सक्रिय होती हैं;
• सुरक्षा, अस्वीकृति का कोई जोखिम नहीं, एलर्जी की प्रतिक्रिया;
• परिणाम का दीर्घकालिक संरक्षण।

6 महीने के अंदर आंखों के आसपास की झुर्रियां 90% तक ठीक हो जाती हैं। डायकोलेट और गर्दन 95% और गाल 87% तक युवा दिखते हैं। मुंह के चारों ओर सिलवटें 55% तक कम हो जाती हैं।

मतभेद

पूर्ण सुरक्षा के बावजूद, प्रक्रिया में कुछ मतभेद हैं:

• गर्भावस्था, स्तनपान अवधि;
• बिगड़ा हुआ रक्त का थक्का जमना;
• प्राणघातक सूजन;
• स्व - प्रतिरक्षित रोग;
• निशान बनने की प्रवृत्ति;
• एआरवीआई;
• त्वचा पर सूजन.

सत्र के बाद दिन के दौरान, त्वचा पर लालिमा और माइक्रोहेमेटोमास देखा जा सकता है। अगले दिन लक्षण गायब हो जाते हैं।

ऑटोफ़ाइब्रोब्लास्ट प्रत्यारोपण तकनीक को रोसज़्द्रवनादज़ोर से आधिकारिक अनुमति प्राप्त है। सेल व्यवहार्यता की प्रयोगशाला निगरानी से इसकी सुरक्षा की पुष्टि की जाती है।

पेटेंट आरयू 2536992 के मालिक:

यह आविष्कार जैव प्रौद्योगिकी के क्षेत्र से संबंधित है, विशेष रूप से सेलुलर प्रौद्योगिकियों से, और इसका उपयोग चिकित्सा में किया जा सकता है। इस विधि में नामित आईपीवीई के क्रायोबैंक से एम-20 लाइन की डिप्लोइड कोशिकाओं को स्केल करना शामिल है। एमपी। चुमाकोव रूसी चिकित्सा विज्ञान अकादमी ने मार्ग 7 के बीज कोशिका बैंक की एक शीशी से मार्ग 16 की कार्यशील कोशिकाओं का एक बैंक प्राप्त किया। इस मामले में, चिकित्सीय और/या नैदानिक ​​उद्देश्यों के लिए उपयोग के लिए उपयुक्त 20-33 मार्गों की कोशिकाएं, प्लेटलेट-व्युत्पन्न वृद्धि कारक पीडीजीएफ वाले व्यक्ति के 10% फाइब्रिनोलिटिक रूप से सक्रिय प्लाज्मा (एफएपी) वाले पोषक माध्यम में संवर्धन करके प्राप्त की जाती हैं। 155 से 342 पीजी/एमएल की सांद्रता। यह आविष्कार द्विगुणित मानव फ़ाइब्रोब्लास्ट कोशिकाओं की प्रसार गतिविधि को बढ़ाने की अनुमति देता है। 1 वेतन फ़ाइलें, 2 टेबल।

आविष्कार जैव प्रौद्योगिकी, इम्यूनोलॉजी, चिकित्सा से संबंधित है, विशेष रूप से चिकित्सीय और नैदानिक ​​​​उद्देश्यों के लिए ऐसी कोशिकाओं के उपयोग के लिए द्विगुणित मानव फाइब्रोब्लास्ट कोशिकाओं के प्रसार गुणों को बढ़ाने की एक विधि, जिसमें सेल प्रतिस्थापन के लिए मानव इंटरफेरॉन की एंटीवायरल गतिविधि का निर्धारण करना शामिल है। चिकित्सा.

मानव द्विगुणित कोशिका रेखाएं (एचडीसीएल) मार्ग के दौरान स्थिर जैविक और आनुवंशिक विशेषताओं को बनाए रखने की क्षमता में सभी ज्ञात प्रकार की कोशिका संस्कृतियों पर निर्विवाद लाभ रखती हैं। टीकों के उत्पादन के लिए लक्षित एलडीसीसी का प्रमाणीकरण विश्व स्वास्थ्य संगठन द्वारा विकसित समान आवश्यकताओं के अनुसार किया जाता है। इन सिफारिशों को स्टेट रिसर्च इंस्टीट्यूट ऑफ क्लिनिकल इंफेक्शियस डिजीज द्वारा विकसित वैक्सीन एलडीकेसीएच के प्रमाणीकरण के लिए राष्ट्रीय मानदंडों के आधार के रूप में लिया जाता है। एल.ए. तारासेविच और यूएसएसआर स्वास्थ्य मंत्रालय [ दिशा-निर्देश“निरंतर सेल लाइनों का प्रमाणीकरण - चिकित्सा के उत्पादन और नियंत्रण के लिए सब्सट्रेट इम्यूनोबायोलॉजिकल तैयारी»आरडी-42-28-10-89. यूएसएसआर स्वास्थ्य मंत्रालय। एम., 1989. - पी. 16]। मानव द्विगुणित कोशिकाओं की प्रमाणित पंक्ति का जीवनकाल सीमित होता है और इसमें स्थिर जैविक, सांस्कृतिक और आनुवंशिक विशेषताएं होती हैं, यह दूषित पदार्थों (बैक्टीरिया, कवक, माइकोप्लाज्मा, वायरस) से मुक्त होती है और प्रतिरक्षादमन वाले जानवरों में ट्यूमर के गठन का कारण नहीं बनती है। डिप्लोइड सेल लाइन में प्रारंभिक मार्ग स्तर (मार्ग 10 तक) पर एक प्रमाणित बीज सेल बैंक होना चाहिए, जिसमें कम से कम 200 क्रायोवियल शामिल हों। बीज कोशिकाओं को एक या कई क्रायोवियल से 16वें मार्ग स्तर तक पारित करके, कोशिकाओं का एक कार्यशील बैंक प्राप्त किया जाता है, जिससे उत्पादन के लिए या आवश्यक उत्पादक संस्कृतियाँ प्राप्त की जा सकती हैं। अनुसंधान कार्य. रूस और विदेशों में, सूचीबद्ध आवश्यकताओं के अनुसार प्रमाणित मानव द्विगुणित कोशिकाओं (वाई-38, एमआरसी-5, एम-22, आदि) की केवल कुछ पंक्तियाँ हैं। प्रमाणित एलडीसीवी का उपयोग पोलियो, खसरा, रूबेला, रेबीज, श्वसन और के खिलाफ टीकों के उत्पादन में किया जाता है। साइटोमेगालोवायरस संक्रमण, साथ ही इंटरफेरॉन [टी.के. बोरिसोवा, एल.एल. मिरोनोवा, ओ.आई. कोन्युश्को, वी.डी. पोपोवा, वी.पी. ग्रेचेव, एन.आर. शुखमीना, वी.वी. ज्वेरेव। मानव द्विगुणित कोशिकाओं के घरेलू उपभेद टीकों के उत्पादन के लिए एक सब्सट्रेट हैं। मेडिकल वायरोलॉजी. सामग्री वैज्ञानिक-व्यावहारिक सम्मेलन « वास्तविक समस्याएँमेडिकल वायरोलॉजी, म.प्र. की 100वीं वर्षगाँठ को समर्पित। चुमाकोव।" एम. 2009. खंड XXVI. पीपी. 305-307; एल.एल. मिरोनोवा, वी.डी. पोपोवा, ओ.आई. Konyushko. प्रत्यारोपण योग्य कोशिकाओं की मूल पंक्तियों का एक बैंक बनाने और वायरोलॉजिकल अभ्यास में उनके उपयोग का अनुभव। जैव प्रौद्योगिकी. 2000, पृ. 41-47]. वायरल संक्रमण के निदान और विषाक्तता विश्लेषण के लिए एलडीसीएन का व्यापक रूप से इन विट्रो में उपयोग किया जाता है विभिन्न औषधियाँऔर प्रतिस्थापन चिकित्सा के लिए उत्पाद [आरएफ पेटेंट संख्या 2373944, 06/23/2008। उपचार की विधि जले हुए घाव. जैसा। एर्मोलोव, एस.वी. स्मिरनोव, वी.बी. ख्वातोव, एल.एल. मिरोनोव; एस.वी. स्मिरनोव, वी.बी. ह्वातोव। नवीन प्रौद्योगिकियाँआपातकालीन चिकित्सा अनुसंधान संस्थान में जलने का स्थानीय उपचार। एन.वी. स्किलीफोसोव्स्की। पुस्तक में: न्यू इकोनॉमिक्स। रूस का एक अभिनव चित्र. एम., सेंटर फॉर स्ट्रैटेजिक पार्टनरशिप, 2009. पीपी. 388-390]।

आईपीवीई में मैं. एमपी। 20वीं सदी के 80 के दशक में चुमाकोव रैमएस में 8-10 सप्ताह के मानव भ्रूण की त्वचा और मांसपेशियों से द्विगुणित कोशिकाओं की कई पंक्तियाँ स्थापित की गईं। यह कार्य नैदानिक ​​उद्देश्यों और कोशिका प्रतिस्थापन चिकित्सा के लिए मानव द्विगुणित कोशिकाओं के उत्पादन को संशोधित करने के लिए समर्पित है, अर्थात् बढ़े हुए प्रसार गुणों के साथ द्विगुणित मानव फ़ाइब्रोब्लास्ट कोशिकाओं का उत्पादन।

प्रोटोटाइप. आरएफ पेटेंट संख्या 1440029 दिनांक 22 मार्च 1993 [मिरोनोवा एल.एल., प्रीओब्राज़ेन्स्काया एन.के., सोलोविओवा एम.एन., ओरलोवा टी.जी. स्टोबेट्स्की वी.आई., क्रायुचकोवा जी.पी., कर्मशेवा वी.वाई.ए., कुडिनोवा एस.आई., पोपोवा वी.डी., अल्पाटोवा जी.ए. IPVE और NIIEiM im। एन.एफ. गामालेया. मानव इंटरफेरॉन और वायरस प्रसार की एंटीवायरल गतिविधि का निर्धारण करने के लिए एक परीक्षण प्रणाली के रूप में उपयोग की जाने वाली द्विगुणित मानव भ्रूण त्वचा और मांसपेशियों की कोशिकाओं का एक तनाव]।

इस एलडीसीसी स्ट्रेन को एम-21 नामित किया गया है, हालांकि, फ़ाइब्रोब्लास्ट कल्चर एम-21 में अपर्याप्त प्रसार गतिविधि थी, जिससे मोनोलेयर गठन का समय कम हो गया और कोशिकाओं और सामग्रियों की खपत में वृद्धि हुई, और इससे अंततः इसके भंडार की पूरी कमी हो गई। परिणामस्वरूप, मानव इंटरफेरॉन और अन्य चिकित्सा और जैविक उद्देश्यों की एंटीवायरल गतिविधि निर्धारित करने के लिए उपयुक्त एक नई सेल लाइन की आवश्यकता पैदा हुई, जो अधिक लागत प्रभावी हो, उच्च प्रसार गतिविधि द्वारा विशेषता हो, और बीज और कामकाजी कोशिकाओं के बैंक हों। इस लाइन को एम-20 नामित किया गया है। मार्ग स्तर 7 पर, एक बीज कोशिका बैंक तैयार किया गया था। 2012 में, 16वें पैसेज स्तर पर कार्यशील कोशिकाओं का एक बैंक, पैसेज 7 के किनारे के एक एम्पुल से बनाया गया था। स्तर 7 और 16 मार्ग पर बीज और कार्यशील कोशिकाओं के बैंक प्रायोगिक भौतिकी संस्थान के नाम पर रखे गए हैं। एमपी। चुमाकोव RAMS और हमें दोनों प्रदान करने की अनुमति देता है उत्पादन प्रक्रियाएं, और वैज्ञानिक अनुसंधान।

वर्तमान आविष्कार और निकटतम एनालॉग (प्रोटोटाइप) के बीच का अंतर 10% फाइब्रिनोलिटिक रूप से सक्रिय प्लाज्मा (एफएपी) का उपयोग करने पर एम-20 कोशिकाओं की प्रसार गतिविधि में वृद्धि है।

इस प्रकार, आविष्कार का उद्देश्य आईपीवीई के क्रायोबैंक से कोशिकाओं को विकसित करके चिकित्सा और जैविक उद्देश्यों के लिए द्विगुणित मानव फाइब्रोब्लास्ट कोशिकाओं के प्रसार गुणों को बढ़ाने की एक विधि है। एमपी। चुमाकोव रूसी चिकित्सा विज्ञान अकादमी, जिसमें विशिष्ट एम-20 लाइन की द्विगुणित कोशिकाओं का उपयोग किया जाता है, जिन्हें मार्ग 7 के बीज कोशिकाओं के एक बैंक के एम्पौल से स्केल किया जाता है और कोशिकाओं के साथ मार्ग 16 की कार्यशील कोशिकाओं का एक बैंक प्राप्त किया जाता है। किसी व्यक्ति के 10% फाइब्रिनोलिटिक रूप से सक्रिय प्लाज्मा (एफएपी) युक्त पोषक माध्यम में खेती द्वारा प्राप्त, चिकित्सीय और/या नैदानिक ​​​​उद्देश्यों के लिए उपयोग के लिए उपयुक्त मार्ग 20-33। कोशिकाओं का संवर्धन करते समय, अधिमानतः 10% FAP के साथ पोषक माध्यम DMEM का उपयोग किया जाता है।

उपरोक्त विधि द्वारा प्राप्त विशिष्ट एम-20 लाइन की मानव द्विगुणित कोशिकाओं में उच्च प्रसार गतिविधि होती है और चिकित्सीय और/या नैदानिक ​​उद्देश्यों के लिए उपयोग के लिए उपयुक्त होती हैं।

विधि के कार्यान्वयन की योजना:

1. आईपीवीई के 7वें मार्ग के नाम पर बीज कोशिकाओं के बैंक से एक क्रायोवियल का उपयोग किया जाता है। एमपी। चुमाकोवा RAMS

2. नामित आईपीवीई के मार्ग 16 के स्तर पर कार्यशील कोशिकाओं का एक बैंक तैयार करना। एमपी। चुमाकोवा RAMS

3. मार्ग 16 की कार्यशील कोशिकाओं के किनारे से एम-20 लाइन के फ़ाइब्रोब्लास्ट की पुनर्प्राप्ति (आईपीवीई का नाम एम.पी. चुमाकोव, रूसी चिकित्सा विज्ञान अकादमी के नाम पर रखा गया है)।

4. फ़ाइब्रोब्लास्ट लाइन एम-20 का एक मोनोलेयर कल्चर प्राप्त करना, मार्ग 17।

5. क्रायोप्रिजर्वेशन प्रक्रिया के दौरान संभावित डीएनए क्षति की मरम्मत के लिए तीन गुना पासेजिंग (20वें पासिंग तक) द्वारा एम-20 लाइन के फाइब्रोब्लास्ट के जैविक गुणों की बहाली।

6. 10% फ़ाइब्रिनोलिटिक रूप से सक्रिय प्लाज़्मा (155 से 342 पीजी/एमएल तक पीडीजीएफ सामग्री के साथ) युक्त पोषक माध्यम का उपयोग करके 20 से 33 तक एम-20 लाइन के फ़ाइब्रोब्लास्ट की प्रतिकृति बनाकर नैदानिक ​​​​उद्देश्यों और सेल रिप्लेसमेंट थेरेपी के लिए सेल कल्चर प्राप्त करना।

प्रस्तावित विधि उच्च प्रसार गतिविधि वाली कोशिकाओं का उत्पादन सुनिश्चित करती है और निदान और/या में उपयोग के लिए उपयुक्त है औषधीय प्रयोजन.

यह तकनीकी परिणाम एम-20 लाइन के मानव फ़ाइब्रोब्लास्ट को 10% फ़ाइब्रिनोलिटिक रूप से सक्रिय प्लाज़्मा (एफएपी) के साथ पोषक माध्यम में विकसित करके प्राप्त किया जाता है, जिसका विकास-उत्तेजक प्रभाव होता है और सेल संस्कृति की प्रसार गतिविधि को बढ़ाता है।

एफएपी एक चिकित्सकीय रूप से इस्तेमाल किया जाने वाला आधान माध्यम है, जो उन लोगों के रक्त से प्राप्त किया जाता है जिनकी मृत्यु के बाद पहले 6 घंटों में अचानक रोधगलन, तीव्र हृदय विफलता, मस्तिष्क रक्तस्राव से मृत्यु हो गई [यूएसएसआर स्वास्थ्य मंत्रालय का आदेश संख्या 482 जून 14, 1972 "शव ऊतकों के साथ चिकित्सीय और रोगनिरोधी संस्थानों और क्लीनिकों के प्रावधान में सुधार पर, अस्थि मज्जाऔर खून"]। पोस्टमॉर्टम रक्त एक पूर्ण आधान माध्यम है, जिसमें कई जैविक गुण होते हैं - मुख्य रूप से बढ़ी हुई फाइब्रिनोलिटिक क्षमता। इस संबंध में, पोस्टमॉर्टम रक्त फाइब्रिनोलिसिस को कॉल करने का भी प्रस्ताव है। पोस्टमॉर्टम रक्त आधान के लिए मुख्य संकेत: तीव्र रक्त हानि, सदमा, विभिन्न मूल के एनीमिया, जलने की चोट, दौरान चयापचय प्रतिस्थापन बहिर्जात विषाक्तता, सर्जरी में एक्स्ट्राकोर्पोरियल सर्कुलेशन का उपयोग करते समय एआईके भरना [ई.जी. त्सुरिनोवा। फाइब्रिनोलिसिस रक्त का आधान। एम., 1960, 159 पी.; एस.वी. Ryzhkov। संग्रह के समय और मृत्यु के कारण के आधार पर फाइब्रिनोलिसिस रक्त के उपयोग की तैयारी और संभावनाएं। लेखक का सार. डॉक्टर. डिस. एल., 1968, 21 पीपी.; जी.ए. पफोमोव। अचानक मृत व्यक्ति के रक्त की जैविक विशेषताएं और शल्य चिकित्सा अभ्यास में इसका उपयोग। डिस. डॉक्टर. शहद। विज्ञान. एम., 1971, 355 पीपी.; के.एस. सिमोनियन, के.पी. गुटियोन्तोवा, ई.जी. त्सुरिनोवा। ट्रांसफ़्यूज़ियोलॉजी के पहलू में पोस्टमार्टम रक्त। एम., मेडिसिन, 1975, 271 पीपी.] वर्तमान में, पोस्टमॉर्टम रक्त घटकों का उपयोग किया जाता है: फाइब्रिनोलिटिक रूप से सक्रिय प्लाज्मा, लाल रक्त कोशिका द्रव्यमान, ल्यूकोसाइट द्रव्यमान, प्लेटलेट द्रव्यमान [जी.वाई.ए. लेविन। हेमोकोएग्यूलेशन गुण और नैदानिक ​​आवेदनशव के रक्त का प्लाज्मा और प्लेटलेट्स। लेखक का सार. डॉक्टर. डिस. एम., 1978, 31 पी.; वी.बी. ह्वातोव। अचानक मृत लोगों के रक्त प्लाज्मा से फ़ाइब्रिनोलिटिक और एंटीप्रोटीनीज़ क्रिया की तैयारी। डिस. डॉक्टर. मेड साइंसेज, 1984, 417 पीपी.; वी.बी. ख्वातोव प्लाज़्माकिनेज - पोस्टमॉर्टम प्लाज्मा से एक नई थ्रोम्बोलाइटिक तैयारी इन: थ्रोम्बोसिस और थ्रोम्बोलिसिस एड। ई.आई. चाज़ोव, वी.वी. स्मिरनोव)। कंसल्टेंट्स ब्यूरो, एन.वाई., एल, 1986, पी. 283-310; वी.बी. ह्वातोव। मरणोपरांत रक्त के उपयोग के चिकित्सीय और जैविक पहलू। यूएसएसआर एकेडमी ऑफ मेडिकल साइंसेज का बुलेटिन, 1991, 9. पीपी 18-24; वी.बी. ह्वातोव। लाश का खून - इतिहास और मुद्दे की वर्तमान स्थिति। संकट hematol. और अतिप्रवाह. रक्त, 1997, 1. एस. 51-59]। अंग दाताओं से प्राप्त मृत रक्त के घटकों को भी नैदानिक ​​​​उपयोग प्राप्त हुआ है [20 दिसंबर, 2001 संख्या 460 के अनुसार "मस्तिष्क मृत्यु के निदान के आधार पर किसी व्यक्ति की मृत्यु का पता लगाने के लिए निर्देश" के अनुसार धड़कते दिल वाला एक मृत व्यक्ति। न्याय मंत्रालय पंजीकरण संख्या 3170 दिनांक 17 जनवरी 2002]। अंगों, ऊतकों और कोशिकाओं का प्रत्यारोपण रूसी संघ के कानून "मानव अंगों और (या) ऊतकों के प्रत्यारोपण पर" - संशोधित के अनुसार किया जाता है। संघीय कानूनदिनांक 20 जून 2000 क्रमांक 91-एफ3, दिनांक 16 अक्टूबर 2006 क्रमांक 160-एफ3; वी.बी. ख्वातोव, एस.वी. ज़ुरावेल, वी.ए. गुल्येव, ई.एन. कोबज़ेवा, एम.एस. मकारोव। अंग दाताओं के रक्त के सेलुलर घटकों की जैविक उपयोगिता और कार्यात्मक गतिविधि। ट्रांसप्लांटोलॉजी, 2011, 4, पृ. 13-19; खुबुतिया एम.एस.एच., ख्वातोव वी.बी., गुल्येव वी.ए. आदि। प्रत्यारोपण के दौरान गोलाकार रक्त की मात्रा और इम्यूनोमॉड्यूलेटरी प्रभावों की भरपाई के लिए एक विधि। आविष्कार संख्या 2452519 के लिए आरएफ पेटेंट, प्रकाशन। 06/10/2012, बुलेटिन। नंबर 16]।

फाइब्रिनोलिटिक रूप से सक्रिय प्लाज्मा अचानक मृत लोगों के रक्त से प्राप्त किया जाता है, इसके फाइब्रिनोलिटिक रूप से सक्रिय गुणों को संरक्षित करने के लिए परिरक्षक ग्लुगित्सिर (रक्त: परिरक्षक अनुपात 4:1) के साथ तैयार किया जाता है। रक्त के सेलुलर तत्वों से प्लाज्मा का पृथक्करण सड़न रोकनेवाला और एंटीसेप्टिक्स के सभी नियमों के अनुपालन में एक बाँझ बॉक्स में किया जाता है और यह डिब्बाबंद दाता रक्त से दाता प्लाज्मा प्राप्त करने के समान है। सर्जरी और ट्रॉमेटोलॉजी में एफएपी के नैदानिक ​​​​उपयोग से घाव भरने को प्रोत्साहित करने के प्रभाव का पता चला है [आई.यू. क्लाइयुकविन, एम.वी. ज़्वेज़दीना, वी.बी. ख्वातोव, एफ.ए. बर्डीगा। काटने के घाव का इलाज करने की विधि. रूसी संघ के आविष्कार के लिए पेटेंट संख्या 2372927, प्रकाशन, 20 नवंबर 2009, बुलेटिन। संख्या 32]। हमने इस प्रभाव को सक्रिय प्लेटलेट्स द्वारा स्रावित एफएपी में विकास-उत्तेजक कारकों की उपस्थिति से जोड़ा है। हमने बाद में एफएपी में प्लेटलेट-व्युत्पन्न वृद्धि कारक (पीडीजीएफ) की पहचान की। मानव कोशिका संवर्धन में एफएपी का विकास-उत्तेजक प्रभाव विशेष अध्ययनों में दिखाया गया है। 10% सांद्रता पर अध्ययन किए गए FAP नमूनों को M-20 लाइन के मानव फ़ाइब्रोब्लास्ट के सेल सस्पेंशन में जोड़ा गया था, जिसमें कोशिकाओं की ज्ञात संख्या थी, और परिणामी मिश्रण के 10 मिलीलीटर को विकास सतह क्षेत्र के साथ कल्चर फ्लास्क में रखा गया था। ​25 सेमी 2. कोशिकाओं को 3-4 दिनों तक 5% CO2 के वातावरण और 37°C पर विकसित किया गया। 3-गुना पासिंग के बाद, विकसित कोशिकाओं को फुच्स-रोसेंथल कक्ष में गिना गया और विकसित कोशिकाओं की संख्या और लगाए गए कोशिकाओं की संख्या का अनुपात निर्धारित किया गया - प्रसार सूचकांक (तालिका 1 में)।

किए गए प्रयोगों से, यह पता चलता है कि एफएपी के विकास गुण उच्च प्रसार गतिविधि प्रदान करते हैं और भ्रूण गोजातीय सीरम से भिन्न नहीं होते हैं। इसके अलावा, एफएपी में मानव प्लेटलेट वृद्धि कारक शामिल हैं, अर्थात। एलोजेनिक प्रकार, भ्रूण गोजातीय सीरम के विपरीत - ज़ेनोजेनिक प्रकार। प्रतिस्थापन चिकित्सा के दौरान कोशिका प्रत्यारोपण के लिए यह तथ्य निर्णायक है। ध्यान दें कि एम-20 सेल कल्चर पर विकास-उत्तेजक प्रभाव, विशेष रूप से, 155 से 342 पीजी/एमएल की एकाग्रता पर एफएपी में पीडीजीएफ की उपस्थिति के कारण होता है। ये डेटा आर एंड डी सिस्टम्स से क्वांटिकाइन, ह्यूमन पीडीजीएफ-बीबी इम्यूनोएसे किट और थर्मो से मल्टीस्कैन एसेंट सिस्टम का उपयोग करके प्राप्त किए गए थे। एफएपी में पीडीजीएफ-बीबी की सांद्रता रक्त सीरम में इसकी सामग्री के समान है। इस प्रकार, रक्त दाताओं और जांच किए गए रोगियों के सीरम में, पीडीजीएफ सामग्री 110 से 880 पीजी/लीटर तक थी, औसतन 244 पीजी/एमएल, जबकि प्लाज्मा में पीडीजीएफ सामग्री 0-2 पीजी/एमएल से भिन्न थी।

प्रस्तावित तकनीकी समाधान "चिकित्सा और जैविक उद्देश्यों के लिए एम-20 लाइन के मानव द्विगुणित कोशिकाओं का उत्पादन" की बेहतर समझ के लिए, हम निम्नलिखित उदाहरण प्रदान करते हैं।

एम-20 लाइन, मार्ग 16 के सेल, कार्यशील बैंक से बरामद किए गए हैं। ऐसा करने के लिए, कोशिकाओं के साथ क्रायोवियल को तरल नाइट्रोजन से निकाला जाता है और अंदर रखा जाता है पानी का स्नान 38 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर और पिघलने के बाद, सामग्री को 10% एफएपी (155 से 342 पीजी/एमएल तक पीडीजीएफ सामग्री के साथ) युक्त डीएमईएम पोषक माध्यम के साथ एक संस्कृति पोत में स्थानांतरित किया जाता है, एंटीबायोटिक जेंटामाइसिन को 1 की दर से जोड़ा जाता है। प्रति 1 लीटर पोषक माध्यम में 4% घोल का एमएल। एक मोनोलेयर बनाने के लिए, कोशिकाओं को 4-5 दिनों के लिए 37°C और 5% CO2 के वातावरण में संवर्धित किया जाता है। कोशिकाओं की एक मोनोलेयर के निर्माण के बाद, लगातार 3 मार्ग निकाले जाते हैं, जो क्रायोप्रिजर्वेशन के बाद डीएनए की मरम्मत के लिए आवश्यक होते हैं। फिर कोशिकाओं को अनुच्छेद 20 से अनुच्छेद 33 तक दोहराया जाता है। इन मार्गों से कोशिकाएँ जैव-चिकित्सा प्रयोजनों के लिए अभिप्रेत हैं। परिणामी सेल लाइन को WHO और GNIISiK MIBP की आवश्यकताओं के अनुसार विस्तार से चित्रित किया गया था। एल.ए. तारासेविच, जिसमें एम-20 सेल लाइन की एचएलए टाइपिंग और इसके साइटोकिन स्पेक्ट्रम का अध्ययन भी शामिल है। हम एम-20 लाइन और एम-22 लाइन (तालिका 2) के गुणों का तुलनात्मक विवरण प्रदान करते हैं। लाइन एम 22 (मानव डिप्लोइड फ़ाइब्रोब्लास्ट) को एक वैक्सीन सब्सट्रेट के रूप में लाइसेंस प्राप्त है और किसी भी प्रकार के मेडिकल वायरल टीकों के उत्पादन के लिए अनुमोदित किया गया है, और इसका उपयोग II-IIIA डिग्री के जले हुए घावों के इलाज के लिए भी किया जाता है [आविष्कार संख्या 2373944 के लिए आरएफ पेटेंट , 06/23/2008। जले हुए घाव का इलाज करने की विधि. जैसा। एर्मोलोव, एस.वी. स्मिरनोव, वी.बी. ख्वातोव, एल.एल. मिरोनोवा, ओ.आई. क्ल्न्युश्को, ई.ए. ज़िरकोवा, बी.सी. बोचारोवा]।

लाइन एम-20 को आईपीवीई के नाम पर स्थापित किया गया था। एमपी। चुमाकोव ने 1986 में एक स्वस्थ महिला से गर्भपात के परिणामस्वरूप प्राप्त 10-सप्ताह के मानव भ्रूण की त्वचा और मांसपेशियों से रैमएस बनाया। कैंसर, यौन संचारित रोग, हेपेटाइटिस या तपेदिक का कोई इतिहास नहीं था; आनुवंशिक और जन्मजात बीमारियाँपरिवार में नहीं देखा गया. सेल कल्चर मीडियम डीएमईएम 10% एफएपी के साथ पूरक। 7×10 4 कोशिकाओं/मिलीलीटर की कोशिकाओं की बीजाई खुराक के साथ सप्ताह में दो बार बीजारोपण अनुपात 1:3-1:4 है। सेल मोनोलेयर में उन्मुख सजातीय धुरी के आकार की कोशिकाएं होती हैं जिनमें अंडाकार नाभिक होते हैं जिनमें 1-3 न्यूक्लियोली और क्रोमैटिन के छोटे समूह होते हैं। में जीवन चक्ररेखा को विकास के 3 चरणों में विभाजित किया जा सकता है: गठन 1-3 मार्ग, सक्रिय वृद्धि 4-40 और उम्र बढ़ने 41-52, फिर मृत्यु होती है। रेखा की कोशिकाओं में मानव कैरियोटाइप 2m=46, XY होता है। रेखा को उच्च आनुवंशिक स्थिरता की विशेषता है: 93.3-96.9% कोशिकाओं में गुणसूत्रों का द्विगुणित सेट होता है, पॉलीप्लोइड सेट वाली कोशिकाएं 1.6% से अधिक नहीं होती हैं। कोई अंतराल, टूटना या रिंग क्रोमोसोम नहीं देखा गया। आइसोन्ज़ाइम जी-6पीडीई और एलडीई के बैंड की संख्या और उनकी इलेक्ट्रोफोरेटिक गतिशीलता मानव एरिथ्रोसाइट्स के साथ मेल खाती है। G-6FDG धीमा प्रकार। चयनात्मक पोषक माध्यम पर बुआई करने पर बैक्टीरिया, कवक या माइकोप्लाज्मा से कोई संदूषण नहीं पाया गया। इसके अलावा, डीएनए फ्लोरोक्रोमेस होचस्ट 33258 और ओलिवोमाइसिन के साथ-साथ दाग लगाने पर कोई माइकोप्लाज्मा संदूषण नहीं पाया गया। पीसीआर विधि. दूध पीते बच्चों और वयस्क सफेद चूहों पर प्रयोगों में वायरस से संदूषण, गिनी सूअर, खरगोश और चिकन भ्रूण, साथ ही सजातीय और विषम कोशिका संस्कृतियों पर। ट्यूमरजन्यता का नियंत्रण. जब लाइन की कोशिकाओं को प्रतिरक्षादमन वाले जानवरों को प्रशासित किया गया, तो ट्यूमर नहीं बने। कोई रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस नहीं पाया गया। एचएलए मार्कर: कक्षा I: ए*(02.03)/बी*(07.40)/सीडब्ल्यू*(03.07)। कक्षा II: DRB1*(15.16)/DQB1*(05.06)। 20वें मार्ग स्तर पर एम-20 लाइन की कोशिकाएं α-इंटरफेरॉन (आईएफएनα) और इंटरल्यूकिन्स के लिए एमआरएनए का उत्पादन करती हैं: आईएल1β, 2, 4, 6, 8, 10, 18।

इस प्रकार, प्रस्तावित रेखा द्विगुणित है - इसका जीवनकाल सीमित है, जीवन भर सामान्य मानव कोशिकाओं के कैरियोटाइप को बरकरार रखता है, दूषित पदार्थों से मुक्त है और इसमें ऑन्कोजेनिक क्षमता नहीं है। इसे WHO की सिफारिशों और नामित GNIISiK MIBP की आवश्यकताओं के अनुसार सुरक्षा के लिए चिह्नित किया गया है। एल.ए. तारासेविच। आईपीवीई में मैं. एमपी। चुमाकोव रैमएस में बीज और कार्यशील कोशिकाओं के बैंक हैं जो उत्पादन और वैज्ञानिक अनुसंधान की सभी जरूरतों को पूरा कर सकते हैं। एम-20 लाइन की कोशिकाएं विभिन्न वायरस द्वारा संक्रमण के प्रति संवेदनशील हैं। इसके अतिरिक्त, एम-20 लाइन के साइटोकिन स्पेक्ट्रम का अध्ययन किया गया। कोशिकाओं के साइटोकिन स्पेक्ट्रम का ज्ञान रोगियों की इंटरफेरॉन स्थिति का निर्धारण करते समय परिणामों का अधिक सटीक मूल्यांकन करना और चिकित्सीय और रोगनिरोधी दवाओं के उपयोग पर सूचित सिफारिशें देना संभव बनाता है।

मानव द्विगुणित कोशिकाएं - प्रस्तावित विधि द्वारा प्राप्त बढ़ी हुई प्रसार गतिविधि के साथ तनाव एम -20 के फ़ाइब्रोब्लास्ट का उपयोग नैदानिक ​​​​उद्देश्यों के लिए किया जा सकता है, विशेष रूप से मानव रक्त सीरम में इंटरफेरॉन (आईएफएन) की गतिविधि को निर्धारित करने के लिए, साथ ही औषधीय प्रयोजनों के लिए भी। , उदाहरण के लिए, बेडसोर, काटने के घाव, लंबे समय तक ठीक न होने वाले और जले हुए घावों के स्थानीय उपचार के लिए।

1. द्विगुणित मानव फ़ाइब्रोब्लास्ट कोशिकाओं के प्रसार गुणों को बढ़ाने के लिए एक विधि, जिसका नाम इंस्टीट्यूट ऑफ वेसल्स के क्रायोबैंक से विशेषता एम -20 लाइन की उस द्विगुणित कोशिकाओं में रखा गया है। एमपी। चुमाकोव रैमएस को मार्ग 7 के बीज कोशिकाओं के एक बैंक के एक एम्पुल से स्केल किया जाता है और मार्ग 16 की कार्यशील कोशिकाओं का एक बैंक प्राप्त किया जाता है, जबकि मार्ग 20-33 की कोशिकाएं, चिकित्सीय और/या नैदानिक ​​​​उद्देश्यों के लिए उपयोग के लिए उपयुक्त होती हैं। 155 से 342 पीजी/एमएल की सांद्रता में प्लेटलेट-व्युत्पन्न वृद्धि कारक पीडीजीएफ युक्त 10% फाइब्रिनोलिटिक रूप से सक्रिय प्लाज्मा (एफएपी) मानव युक्त पोषक माध्यम में खेती।

2. दावे 1 के अनुसार विधि, जिसमें कोशिकाओं का संवर्धन करते समय 10% एफएपी के साथ पोषक माध्यम डीएमईएम का उपयोग किया जाता है।

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आविष्कारों का समूह जैव प्रौद्योगिकी और ऑन्कोलॉजी के क्षेत्र से संबंधित है। विधि में शामिल हैं: ए) उनके बाद के प्रोटिओमिक और पूर्ण-ट्रांसक्रिप्टोमिक विश्लेषण के लिए प्रसवोत्तर ऊतक-विशिष्ट मल्टीपोटेंट ऑटोलॉगस स्टेम सेल (एएससी) और/या ऑटोलॉगस पूर्वज कोशिकाओं (एपीसी) को अलग करना; बी) उनके प्रोटिओमिक प्रोफाइल के बाद के रीमॉडलिंग के लिए एएससी और/या एपीसी और/या मल्टीपोटेंट एलोजेनिक एचएलए-हैप्लोआइडेंटिकल स्टेम सेल (एचएलए-सीके) का अलगाव; ग) रोगी के ट्यूमर से सीएससी का अलगाव; घ) एएससी और/या एपीसी और आरएससी का प्रोटिओमिक विश्लेषण; ई) एएससी और/या एपीसी और सीएससी का पूर्ण प्रतिलेखीय विश्लेषण; च) प्रोटीन के एक सेट का निर्धारण, जिनमें से प्रत्येक एएससी और/या एपीसी और सीएससी दोनों के प्रोटिओमिक प्रोफाइल में निहित है; छ) सीएससी में इंट्रासेल्युलर सिग्नलिंग मार्गों की पहचान करने के लिए प्रोटीन के पहले से परिभाषित सेट का विश्लेषण, जिसमें कार्सिनोजेनेसिस के परिणामस्वरूप नियोप्लास्टिक परिवर्तन नहीं हुआ है, और लक्ष्य प्रोटीन निर्धारित करने के लिए जो पहचाने गए सिग्नलिंग मार्गों के झिल्ली स्वीकर्ता हैं; ज) सीएससी की पूर्ण ट्रांस्क्रिप्टोम जीन अभिव्यक्ति प्रोफ़ाइल का विश्लेषण और सीएससी में पहचाने गए सिग्नलिंग मार्गों के संरचनात्मक घटकों की अखंडता और कार्यात्मक महत्व की पुष्टि; i) लक्ष्य प्रोटीन को सक्रिय करने में सक्षम लिगैंड प्रोटीन की पहचान; को) तुलनात्मक विश्लेषणएएसए और/या एपीसी और/या एचएलए-सीके की जीन अभिव्यक्ति प्रोफ़ाइल को संशोधित करने में सक्षम पर्टर्बोजेन्स की पहचान करने के लिए ज्ञात ट्रांसक्रिपटॉमिक डेटाबेस में निहित ट्रांसक्रिप्टोमिक प्रोफाइल के साथ एएसए और/या एपीसी की पूर्ण ट्रांसक्रिप्टोमिक प्रोफाइल, उनके प्रोटिओमिक प्रोफाइल को फिर से तैयार करने के लिए पृथक किया गया है। स्राव की दिशा पहले कुछ लिगैंड प्रोटीन; k) विभिन्न की एक संशोधित ट्रांसक्रिप्टोमिक प्रोफ़ाइल प्राप्त करने के लिए पर्टर्बोजेन द्वारा एएसए और/या एपीसी और/या एचएलए-सीके की प्रोटिओमिक प्रोफ़ाइल की रीमॉडलिंग सेलुलर सिस्टम, रोगी के आरएससी पर नियामक प्रभाव डालने में सक्षम।

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इस विधि द्वारा प्राप्त मानव प्लुरिपोटेंट स्टेम कोशिकाओं और मेसेनकाइमल स्टेम कोशिकाओं से मेसेनकाइमल स्टेम कोशिकाएँ प्राप्त करने की विधि // 2528250

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यह आविष्कार जैव प्रौद्योगिकी और चिकित्सा से संबंधित है। मल्टीपेटेंट मेसेनकाइमल कोशिकाओं (एमएमएससी) की उपस्थिति में गर्भनाल रक्त मोनोन्यूक्लियर कोशिकाओं (पीसीबीएमसी) पूर्व विवो के विस्तार के लिए एक विधि प्रस्तावित की गई है, जिसमें वसा ऊतक के स्ट्रोमल-संवहनी अंश से एमएमएससी को संवर्धित करना शामिल है जब तक कि एक मोनोलेयर एक स्तर पर नहीं पहुंच जाता है। 5% के माध्यम में O2 सांद्रता, MMSC मोनोलेयर में एक PCMNC सस्पेंशन जोड़ना, 5% के माध्यम में O2 सांद्रता पर 72 घंटे तक खेती, अनासक्त psMNCs का चयन और माध्यम का प्रतिस्थापन, संलग्न psMNCs के साथ MMSCs की खेती जारी रखना 5% के माध्यम में O2 सांद्रता पर 7 दिनों के लिए।

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