Фибробласти. Функции на фибробластите

Основната дейност на съвр естетична медицина- предотвратяване на стареенето с помощта на високи технологии. Като резултат научно изследванеУстановен е модел, че клетките имат способността да се регенерират. Тези свойства притежават и фибробластите, чиято регенерация води до подмладяване на кожата и премахване на видимите дефекти по тях.

Функции и природа на фибробластите

Терминът "фибробласти" се състои от две латински думи, преведени буквално като "кълнове" и "влакна". По своята същност те са клетки съединителната тъкан, синтезиращи извънклетъчния матрикс (тъканна структура, която осигурява преноса химически веществаи механична подкрепа на кожните клетки). Фибробластите произвеждат вещества, които са предшественици на колагенови и еластинови влакна, хиалуронова киселина, фибрин.

Те идват от мезенхим - зародишна тъкан, която се намира в клетките на тялото на хората и животните. В активно състояние структурата на фибропластите предполага наличието на ядро ​​и процеси; в състояние на покой те намаляват по размер и придобиват вретеновидна форма.

Кожните фибробласти имат широк обхватфункции. Благодарение на тяхното присъствие в тялото протичат следните процеси:

• Активиране на процесите на синтез на колаген и еластин.
• Образуване на кръвоносни съдове.
• Насочване на клетките на имунната система към бактерии и чужди частици.
• Ускоряване на растежа на тъканите.
• Повишен клетъчен растеж.
• Заздравяване на увредени кожни участъци.
• Производство на редица протеини (протеогликан, ламинин и други).

Причини за промени, свързани с възрастта

Младостта на кожата се определя от цикличния процес на производство на колаген и еластин, които впоследствие се разграждат на съставните си части, които се използват от фибробластите за тяхното повторно производство. С течение на времето последните намаляват своята активност, престават да произвеждат колагенови и еластинови влакна, което в крайна сметка провокира стареенето на кожата.

Промени, свързани с възрасттазапочват да се появяват от 28 до 30 годишна възраст. Те се изразяват в загуба на еластичност и развитие на птоза, промяна в цвета на кожата, повишена сухота и образуване на бръчки. И всичко това поради факта, че всяко десетилетие фибробластите намаляват с 10% оригинален номер.

Попълване на фибробластите

Така че, за да се забави стареенето и да се върне младостта, е необходимо да се възстановят фибробластите. Повечето съвременни козметични техники водят само до временно ускоряване на синтеза на колагенови влакна, но не увеличават самите клетки. Дълго време беше общоприето, че това е просто невъзможно.

В момента науката е направила големи крачки напред и възстановяването на фибробластите вече не е фантазия. Тази процедуранаречена SPRS терапия и се практикува широко в Щатите, европейските страни, а отскоро и в Русия.

SPRS терапия: характеристики и принцип на изпълнение

Възстановяването на фибробластите не е лесно, изисква се преминаване през сложна процедура на инжектиране. Резултатите от прилагането му са удебеляване на кожата и повишаване на нейната еластичност, предотвратяване и намаляване на птозата. Бръчките също намаляват, пигментацията изчезва и белезите се изглаждат.

Терапията започва с вземане на клетките на пациента от кожата, разположена зад ушната мида. Получената проба се използва за диагностика и изследване, наречено биоматериал. Използва се за разработване на режим на лечение и изкуствено пресъздаване на фибробласти, които впоследствие ще бъдат инжектирани обратно в кожата с помощта на инжекции.

Клетките, отгледани от биоматериали на пациента, не се отхвърлят от тялото. След трансплантацията те остават активни година и половина, през които състоянието на кожата се подобрява.

Фибробластите не се препоръчват за инжектиране по време на обостряне на хронични заболявания, настинки, вирусни инфекции, придружени от повишена температуратела. Противопоказанията включват имунен дефицит, злокачествени образувания, инфекции и хронични болести V остър стадий. Преди провеждане на процедурата е необходима предварителна консултация със специалист за установяване на индивидуалните противопоказания.

Процедурата отнема не повече от час и се провежда в курс от 2 сесии с почивка от 5 до 7 седмици. Преди инжекциите е необходима локална анестезия.

Въвеждането на фибробласти е скъпо удоволствие. Пълна гама отуслуги, включително събиране, съхранение, изследване и администриране на биоматериали, се оценява на приблизително 400 000 рубли.

Видео: провеждане на SPRS терапия

Фибробластите са клетки на съединителната тъкан, които осигуряват производството на колаген и еластин, като по този начин поддържат младостта на нашата кожа. С течение на времето техният брой в тялото непрекъснато намалява, поради което се появяват външни признаци на промени, свързани с възрастта. Възстановяването на броя на фибробластите се извършва чрез инжекционна техника, базирана на изкуствено отгледани клетки.

Фибробласти- водещи клетки от свободна съединителна тъкан, произвеждащи компоненти на междуклетъчното вещество. Това са разклонени, вретеновидни или разперени клетки с размери около 20 микрона. В тях органелите на вътрешната метаболитна среда са добре развити. Ядрото на фибробласта е с овална форма, съдържа равномерно диспергиран хроматин и 2-3 нуклеоли. Цитоплазмата е ясно разделена на интензивно оцветена ендоплазма и слабо оцветена ектоплазма. Цитоплазмата на фибробластите (особено на младите) е базофилна. Той разкрива добре развит ендоплазмен ретикулум с голям брой рибозоми, прикрепени към мембраните под формата на вериги от 10-30 гранули. Тази ултраструктура на гранулирания ендоплазмен ретикулум е характерна за клетките, които активно синтезират протеин „за износ“. Има също множество свободни рибозоми и добре развит комплекс на Голджи. Митохондриите са големи, броят им е малък. Цитохимичните методи показват наличието на гликолитични ензими и хидролитични ензими на лизозоми (особено колагеназа) в цитоплазмата на фибробластите. Митохондриалните окислителни ензими са по-малко активни.

Мускулно-скелетна система на клеткатаосигурява тяхната подвижност, промяна на формата, прикрепване към субстрата, механично напрежение на филма, към който е прикрепена клетката в културата. На клетъчната повърхност има много микровили и везикуларни издатини. Фибробластите, суспендирани в течна среда, имат сферична форма. Фибробластът се разпръсква след прилепване към твърда повърхност, по която се движи поради псевдоподии.

Основната функция на фибробластите- синтез и секреция на протеини и гликозаминогликани, използвани за образуване на компоненти на междуклетъчното вещество на съединителната тъкан, както и производството и секрецията на фактори, стимулиращи колониите (гранулоцити, макрофаги). Фибробласти за дълго времезапазват способността си да се размножават. Фибробластите, които са завършили своя цикъл на развитие, се наричат ​​фиброцити. Това са дълголетни клетки. Клетъчната цитоплазма е изчерпана от органели, клетката става сплескана и пролиферативният потенциал намалява. Клетката обаче не губи способността си да участва в регулацията метаболитни процесив плат.

Междуклетъчно вещество. Състои се от фибриларен и основен (аморфен) компонент. С помощта на хистоавторадиографски методи с въвеждането на белязани аминокиселини (3Н-пролин, 3Н-глицин и др.) Установено е, че протеиновите молекули се синтезират във фибробластни полизоми. Фибробластите могат едновременно да синтезират няколко вида специфични протеини и гликозаминогликани. За синтеза на колагенов протеин е от съществено значение наличието на витамин С, при дефицит на който колагеногенезата рязко се инхибира. Синтезът на междуклетъчните вещества протича по-интензивно при условия на намалена концентрация на кислород. Едновременно със синтеза на колаген фибробластът разрушава приблизително 2/3 от този протеин с помощта на ензима колагеназа, което предотвратява преждевременната тъканна склероза.

Синтезирани проколагенови молекулисе извеждат на повърхността на фибробластите чрез екзоцитоза. В този случай протеинът преминава от разтворима форма в неразтворима форма - тропоколаген. Комбинирането на молекулите на тропоколагена в супрамолекулни структури - колагенови фибрили - се извършва в непосредствена близост до клетъчната повърхност поради действието на специални вещества, секретирани от клетката. По-специално, на повърхността на фибробластите е открит протеин - фибронектин, който изпълнява адхезивни и други функции. Следващите етапи на фибрилогенеза възникват чрез полимеризация и агрегация на тропоколаген върху предварително образувани фибрили. В този случай узряването на колагеновите влакна може да се случи без пряка връзка с фибробластите.
Глюкозаминогликаниса регулатори на образуването на колаген и са част от основния (аморфен) компонент на междуклетъчното вещество.

Фибриларен компонентМеждуклетъчното вещество на рехавата съединителна тъкан включва три вида влакна - колагенови, еластични и ретикуларни. Те имат подобен механизъм на образуване, но се различават един от друг по химичен състав, ултраструктура и физични свойства. Колагеновият протеин се идентифицира по неговия аминокиселинен състав и последователността на аминокиселините в колагеновата молекула. В зависимост от вариацията на аминокиселините в полипептидната верига, имунните свойства, молекулното тегло и т.н., се разграничават 14 или повече разновидности на колагенови протеини, които са част от съединителната тъкан на органите. Всички те съставляват 4 основни типа или класа колаген.

Колаген тип 1среща се в съединителни и костна тъкан, както и в склерата и роговицата на окото; Тип II - в хрущялните тъкани; Тип III - в стената на кръвоносните съдове, в съединителната тъкан на кожата на плода; Тип IV-ro - в базалните мембрани.

Фибробласти(фибробластоцити) (от латински fibra - влакна, гръцки blastos - кълнове, зародиш) - клетки, които синтезират компоненти на междуклетъчното вещество: протеини (например колаген, еластин), протеогликани, гликопротеини.

В ембрионалния период се образуват редица мезенхимни клетки на ембриона диференциация на фибробластите, което включва:

· стволови клетки,

полустволови прогениторни клетки,

· неспециализирани фибробласти,

диференцирани фибробласти (зрели, активно функциониращи),

фиброцити (окончателно клетъчни форми),

миофибробласти и фиброкласти.

СЪС Главна функцияфибробластите са свързани с образуването на основното вещество и влакна (което се проявява ясно, например, по време на заздравяване на рани, развитие на белег, образуване на съединителнотъканна капсула около чуждо тяло).

Нискоспециализираните фибробласти са клетки с малко израстъци с кръгло или овално ядро ​​и малък нуклеол, базофилна цитоплазма, богата на РНК. Размерът на клетката не надвишава 20-25 микрона. В цитоплазмата на тези клетки се намират голям брой свободни рибозоми. Ендоплазменият ретикулум и митохондриите са слабо развити. Апаратът на Голджи е представен от групи от къси тръби и везикули.
На този етап от цитогенезата фибробластите имат много ниски нива на протеинов синтез и секреция. Тези фибробласти са способни на митотично възпроизвеждане.

Диференцираните зрели фибробласти са с по-големи размери. Това са активно функциониращи клетки.

В зрелите фибробласти се извършва интензивен биосинтез на колаген, еластинови протеини, протеогликани, които са необходими за образуването на основното вещество и влакна. Тези процеси се засилват при условия на ниска концентрация на кислород. Стимулиращи фактори за биосинтеза на колаген са също йони на желязо, мед, хром, аскорбинова киселина. Един от хидролитичните ензими е колагеназа- разгражда незрелия колаген вътре в клетките, което регулира интензивността на секрецията на колаген на клетъчно ниво.

Фибробластите са подвижни клетки. В тяхната цитоплазма, особено в периферния слой, има микрофиламенти, съдържащи протеини като актин и миозин. Движението на фибробластите става възможно само след като те са свързани с помощта на поддържащи фибриларни структури фибронектин- гликопротеин, синтезиран от фибробласти и други клетки, осигуряващ адхезията на клетките и неклетъчните структури. По време на движение фибробластът се сплесква и повърхността му може да се увеличи 10 пъти.

Плазмалема на фибробластите е важна рецепторна зона, която медиира ефектите на различни регулаторни фактори. Активирането на фибробластите обикновено се придружава от натрупване на гликоген и повишена активност на хидролитичните ензими. Енергията, генерирана от метаболизма на гликогена, се използва за синтезиране на полипептиди и други компоненти, секретирани от клетката.

Въз основа на способността им да синтезират фибриларни протеини, семейството на фибробластите включва ретикуларни клетки на ретикуларната съединителна тъкан на хематопоетичните органи, както и хондробласти и остеобласти от скелетната разновидност на съединителната тъкан.

Фиброцити- дефинитивни (крайни) форми на развитие на фибробласти. Тези клетки са с вретеновидна форма птеригоидни процеси. [Те съдържат малък брой органели, вакуоли, липиди и гликоген.] Синтезът на колаген и други вещества във фиброцитите е рязко намален.

Миофибробласти- клетки, подобни на фибробластите, съчетаващи способността да синтезират не само колаген, но и контрактилни протеини в значителни количества. Фибробластите могат да се трансформират в миофибробласти, които функционално са подобни на гладките мускулни клетки, но за разлика от последните имат добре развит ендоплазмен ретикулум. Такива клетки се наблюдават в гранулационната тъкан на зарастващи рани и в матката по време на бременност.

Фиброкласти- клетки с висока фагоцитна и хидролитична активност участват в "резорбцията" на междуклетъчното вещество по време на инволюцията на органа (например в матката след бременност). Те съчетават структурните характеристики на фибрилообразуващите клетки (развит гранулиран ендоплазмен ретикулум, апарат на Голджи, относително големи, но малко митохондрии), както и лизозомите с техните характерни хидролитични ензими. Комплексът от ензими, които отделят извън клетката, разгражда циментиращата субстанция на колагеновите влакна, след което настъпва фагоцитоза и вътреклетъчно смилане на колагена.

Следните клетки от фиброзна съединителна тъкан вече не принадлежат към диференциацията на фибробластите.

Кожните фибробласти формират основата на съединителната тъкан. Те са производители на хиалуронова киселина, колагенови влакна и еластин. Промените, свързани с възрастта, забавят функционирането на фибробластите, което кара кожата да стане тънка и отпусната. Благодарение на клетъчната инжекционна технологиятялото самостоятелно стартира функцията за подмладяване на структурата на дермата.

Същността на фибробластите

Кожни фибробласти- това са клетки от съединителнотъканния слой на дермата, чиито предшественици са били стволови клетки. Те идват в две форми:

1. Активни - големи клетки, оборудвани с плоско ядро ​​с овална форма, голям брой рибозоми и процеси. Те се характеризират с интензивно делене, производство на колаген и други компоненти на матрицата.
2. Неактивни (фиброцити) - клетките са малко по-малки и имат вретеновидна форма. Образуват се от фибробласти и не могат да се делят. Участват в синтеза на фибри и регенерацията на рани.

С остаряването на тялото броят на фибробластите намалява и тяхната активност намалява. Това води до влошаване на синтеза на междуклетъчни вещества. Този процес се отразява върху кожата под формата на изтъняване, сухота и отпуснатост. Разтяга се и се образуват бръчки.

Функции

Една от основните функции на фибробластите е производството и регенерацията на междуклетъчно вещество. Чрез образуване на растежни фактори, компоненти на извънклетъчния матрикс, ензими, те допринасят за разрушаването и нов синтез на колаген и хиалуронова киселина. Благодарение на непрекъснатия процес се обновява междуклетъчното вещество. В допълнение, те произвеждат клетъчни растежни фактори:

• Основната е, че се стимулира растежа на всички дермални клетки, произвежда се фибронектин за защитни реакции;
• Трансформиране - синтезират се колагенови и еластинови влакна, образуват се кръвоносни съдове, клетките на имунната система се насочват към чужди агенти, бактерии;
• Епидермална - активира се тъканна пролиферация, клетъчен растеж и транспорт на кератиноцитите;
• Растежът на кератиноцитите е епителизация, увреждането се регенерира.

Факторите на растеж на фибробластите са представени от многофункционални протеини, които са митогени и също така извършват ендокринни, регулаторни, структурна функция. Благодарение на фибробластите се произвеждат протеини, важни за кожата: протеогликани, тинасцин, нидоген и ламинин.

Същността на техниката

SPRS терапияе техника за инжекционно подмладяване на кожата с помощта на фибробласти, елиминираща самата причина за стареенето на кожата. Патентът за технологията за интрадермална трансплантация на автофибробласти принадлежи на американската компания FibrocellScience. Чрез клетъчната технология стана възможно отглеждането на фибробласти от частица човешка кожа (биопсия). Собственият биоматериал елиминира проблема с тъканната съвместимост и риска от инфекция. Автоложните клетки се възприемат положително имунна системаи са в състояние да функционират пълноценно.

Пробата може да се вземе на всяка възраст, но е за предпочитане да се направи в млада възраст. Препоръчителната възраст е от 20 до 30 години. Можете да запазите парче кожа по време на всяка операция и да поставите изолираните от нея клетки в криогенно хранилище за много години. Температура от -196 градуса ви позволява да ги съхранявате през целия си живот, като ги използвате при необходимост. Това ще ви позволи да извършвате ефективни козметични процедури по всяко време.

Собствените фибробласти, заедно със стволовите клетки, имат свойството да поддържат потенциал по време на стареене. Под локална анестезияВзема се малка проба от кожата на пациента зад ухото, пъпа или областта на предмишницата. Тези зони са най-малко изложени на ултравиолетова радиация. Размерът му е около 4 мм. Изолираните от него фибробласти се поставят в специални флакони.

Когато се култивират в среда с фетален серум, в младите клетки се стимулира способността за пролиферация, а старите се отмиват. Има „подмладяване” на културата. След един месец броят на клетките се увеличава няколко хиляди пъти. След реактивиране клетъчната култура се трансплантира в пациента и активно запълва дермата. След месец и половина размножените фибробласти се инжектират в кожата на лицето на пациента, включително около очите, както и в областта на шията, деколтето и ръцете.

Процедура

Курсът се състои от 3-5 сесии, интервалите между които варират от 3 до 6 седмици. Етапи на процедурата:

• преглед на пациента за идентифициране на съществуващи противопоказания;
• вземане на материал;
• култивиране на фибробласти;
• инжектиране на клетъчен материал в кожата по два метода: тунелен - в дълбоки кожни гънки, папулозна мезотерапия;
• защита на кожата от ултравиолетова радиация чрез нанасяне на крем.

Пациентите отбелязват, че процедурата е болезнена, така че се използва анестетичен крем Emla. Количеството на използваното лекарство е до 3 ml на сесия. Периодът на възстановяване продължава 2-3 дни. След процедурата е забранено прилагането на козметика. В продължение на две седмици трябва да се въздържате от посещение на сауна или баня. Кожата трябва да се предпазва от слънцето, като се маже с крем с висока степен на защита. Препоръчва се процедурата да се повтаря веднъж годишно. Резултатът е подобряване на състоянието на кожата на лицето за няколко месеца.

Ефективност и предимства на метода

Подмладяването с фибробласти дава първите резултати след 1,5-2 месеца. Пълен ефектот процедурата се появява след шест месеца и продължава 2-3 години. Започва засилено производство на растежни фактори и извънклетъчен матрикс. Фибробластите преминават през естествени фази на цикъла: те се активират, синтезират еластин, колаген и други вещества, след което започва фазата на разграждане, заменяйки ги с нови фибробласти.

Използването им е широко разпространено в медицината - срещу изгаряния, за регенерация на тъканите по време на трофични язви, рани Тяхното значение в козметологията е голямо. Младостта на кожата се формира от броя на фибробластите. Поставени в дермата, порасналите фибробласти се интегрират в тъканта, започвайки производството на колаген и еластин. В резултат на това кожата става еластична, придобива равномерен цвят, а фините бръчки изчезват.

Но не трябва да очаквате стягащ ефект от процедурата. Тази техника е насочена към подобряване на качествените характеристики на кожата. Основните предимства на SPRS терапията:

• лекарството работи с гени, което елиминира нарушаването на първичната структура на кожата;
• активират се естествените процеси на подмладяване;
• безопасност, без риск от отхвърляне, алергична реакция;
• дългосрочно запазване на резултата.

В рамките на 6 месеца бръчките около очите се изглаждат с 90%. Деколтето и шията изглеждат по-млади с 95%, бузите с 87%. Гънките около устата са намалени с 55%.

Противопоказания

Въпреки пълната безопасност, процедурата има някои противопоказания:

• бременност, период на кърмене;
• нарушено съсирване на кръвта;
• злокачествени новообразувания;
• автоимунни заболявания;
• предразположение към образуване на белези;
• ARVI;
• възпаление на кожата.

През деня след сесията могат да се наблюдават зачервявания по кожата и микрохематоми. На следващия ден симптомите изчезват.

Технологията за трансплантация на автофибробласти има официално разрешение от Roszdravnadzor. Безопасността му се потвърждава от лабораторен мониторинг на жизнеспособността на клетките.

Собственици на патент RU 2536992:

Изобретението се отнася до областта на биотехнологиите, по-специално до клетъчните технологии, и може да се използва в медицината. Методът включва мащабиране на диплоидни клетки от линията M-20 от криобанката на IPVE на името на. М.П. Чумаков на Руската академия на медицинските науки от ампула от банка от семенни клетки от пасаж 7, за да се получи банка от работещи клетки от пасаж 16. В този случай клетки от 20-33 пасажа, подходящи за използване за терапевтични и/или диагностични цели, се получават чрез култивиране в хранителна среда, съдържаща 10% фибринолитично активна плазма (FAP) на човек, съдържащ тромбоцитен растежен фактор PDGF в концентрация от 155 до 342 pg/ml. Изобретението позволява да се увеличи пролиферативната активност на диплоидни човешки фибробластни клетки. 1 заплата файлове, 2 мас.

Изобретението се отнася до биотехнология, имунология, медицина, по-специално до метод за повишаване на пролиферативните свойства на диплоидни човешки фибробластни клетки за използване на такива клетки за терапевтични и диагностични цели, включително за определяне на антивирусната активност на човешки интерферони, за клетъчно заместване терапия.

Човешките диплоидни клетъчни линии (HDCL) имат неоспорими предимства пред всички известни видове клетъчни култури в способността им да поддържат стабилни биологични и генетични характеристики по време на пасажи. Сертифицирането на LDCC, предназначено за производство на ваксини, се извършва в съответствие с единните изисквания, разработени от Световната здравна организация. Тези препоръки са взети като основа за националните критерии за сертифициране на ваксина LDKCH, разработени от Държавния изследователски институт по клинични инфекциозни болести на име. Ел Ей Тарасевич и Министерството на здравеопазването на СССР [ Насоки“Сертификация на непрекъснати клетъчни линии – субстрати за производство и контрол на медицински имунобиологични препарати» РД-42-28-10-89. Министерство на здравеопазването на СССР. М., 1989. - С. 16]. Сертифицираната линия от човешки диплоидни клетки има ограничен живот и има стабилни биологични, културни и генетични характеристики, не съдържа замърсители (бактерии, гъбички, микоплазми, вируси) и не причинява образуване на тумори при имуносупресирани животни. Диплоидната клетъчна линия трябва да има сертифицирана банка от семенни клетки на ранни нива на пасаж (до пасаж 10), състояща се от най-малко 200 криовиала. Чрез пасиране на семенни клетки от една или няколко криостъкло до 16-то ниво на пасаж се получава работеща банка от клетки, от която могат да се получат необходимите култури производители за производство или за изследователска работа. В Русия и в чужбина има само няколко човешки диплоидни клетъчни линии (Wi-38, MRC-5, M-22 и др.), Сертифицирани съгласно изброените изисквания. Сертифицирани LDCV се използват в производството на ваксини срещу полиомиелит, морбили, рубеола, бяс, респираторни и цитомегаловирусни инфекции, както и интерферон [T.K. Борисова, Л.Л. Миронова, О.И. Конюшко, В.Д. Попова, В.П. Грачев, Н.Р. Шухмина, В.В. Зверев. Домашни щамове на човешки диплоидни клетки са субстрат за производството на ваксини. Медицинска вирусология. Материали научно-практическа конференция « Реални проблемимедицинска вирусология, посветен на 100-годишнината на М.П. Чумаков“. М. 2009. Том XXVI. стр. 305-307; Л.Л. Миронова, В.Д. Попова, О.И. Конюшко. Опит в създаването на банка от оригинални линии трансплантируеми клетки и използването им във вирусологичната практика. Биотехнология. 2000, стр. 41-47]. LDCN се използват широко in vitro за диагностика на вирусни инфекции и анализ на токсичността различни лекарстваи продукти за заместваща терапия [RF патент № 2373944, 23.06.2008 г. Метод на лечение рана от изгаряне. КАТО. Ермолов, С.В. Смирнов, В.Б. Хватов, Л.Л. Миронов; С.В. Смирнов, В.Б. Хватов. Иновативни технологиилокално лечение на изгаряния в Изследователския институт по спешна медицина на името на. Н.В. Склифосовски. В книгата: Нова икономика. Иновативен портрет на Русия. М., Център за стратегическо партньорство, 2009. стр. 388-390].

В IPVE im. М.П. Чумаков RAMS през 80-те години на 20 век са установени няколко линии диплоидни клетки от кожата и мускулите на човешки ембриони на възраст 8-10 седмици. Тази работа е посветена на модифицирането на производството на човешки диплоидни клетки за диагностични цели и клетъчна заместителна терапия, а именно производството на диплоидни човешки фибробластни клетки с повишени пролиферативни свойства.

Прототип. Патент на РФ № 1440029 от 22 март 1993 г. [Миронова Л.Л., Преображенская Н.К., Соловьова М.Н., Орлова Т.Г. Стобецки В.И., Крючкова Г.П., Кармишева В.Я., Кудинова С.И., Попова В.Д., Алпатова Г.А. ИПВЕ и НИИЕиМ им. Н.Ф. Гамалея. Щам от диплоидни човешки ембрионални кожни и мускулни клетки, използвани като тестова система за определяне на антивирусната активност на човешки интерферони и размножаване на вируса].

Този щам LDCC е обозначен като M-21, но фибробластната култура M-21 има недостатъчна пролиферативна активност, което намалява времето за образуване на монослой и увеличава консумацията на клетки и материали и това в крайна сметка води до пълното изчерпване на нейните резерви. В резултат на това възникна необходимост от нова клетъчна линия, подходяща за определяне на антивирусната активност на човешки интерферони и други медицински и биологични цели, по-рентабилна, характеризираща се с висока пролиферативна активност и притежаваща банки от семена и работни клетки. Тази линия е обозначена с M-20. На ниво 7-ми пасаж беше подготвена банка от семенни клетки. През 2012 г. от ампула на банката на пасаж 7 беше направена банка от работни клетки на ниво 16-ти пасаж. Банки от семена и работни клетки на нива 7 и 16 пасажи се съхраняват в Института по плавателни съдове и експериментална физика на името на. М.П. Chumakov RAMS и ни позволяват да предоставим и двете производствени процеси, и научни изследвания.

Разликата между настоящото изобретение и най-близкия аналог (прототип) е повишаването на пролиферативната активност на М-20 клетки при използване на 10% фибринолитично активна плазма (FAP).

По този начин, обектът на изобретението е метод за повишаване на пролиферативните свойства на диплоидни човешки фибробластни клетки за медицински и биологични цели чрез култивиране на клетки от криобанката на Института по ветеринарна физика на името на. М.П. Чумаков на Руската академия на медицинските науки, в която се използват диплоидни клетки от характеризираната линия М-20, които се мащабират от ампулата на банка от семенни клетки от пасаж 7 и се получава банка от работещи клетки от пасаж 16, с клетки от пасажи 20-33, подходящи за използване за терапевтични и/или диагностични цели, получени чрез култивиране в хранителна среда, съдържаща 10% фибринолитично активна плазма (FAP) на човек. При култивиране на клетки за предпочитане се използва хранителна среда DMEM с 10% FAP.

Човешки диплоидни клетки от характеризираната М-20 линия, получени по горния метод, имат висока пролиферативна активност и са подходящи за използване за терапевтични и/или диагностични цели.

Схема на изпълнение на метода:

1. Използва се една криовиала от банката със семенни клетки от 7-ия пасаж на IPVE, кръстен след. М.П. Чумакова RAMS

2. Подготовка на банка от работещи клетки на ниво пасаж 16 на IPVE на име. М.П. Чумакова RAMS

3. Възстановяване на фибробласти от линията М-20 от банката на работещи клетки на пасаж 16 (IPVE на името на М. П. Чумаков, Руската академия на медицинските науки).

4. Получаване на монослойна култура от фибробласти линия М-20, пасаж 17.

5. Възстановяване на биологичните свойства на фибробластите от линията М-20 чрез трикратно пасажиране (до 20-ти пасаж включително) за възстановяване на евентуално увреждане на ДНК по време на процеса на криоконсервация.

6. Получаване на клетъчни култури за диагностични цели и клетъчно-заместителна терапия чрез репликация на фибробласти от линия М-20 от пасаж 20 до 33 с помощта на хранителна среда, съдържаща 10% фибринолитично активна плазма (със съдържание на PDGF от 155 до 342 pg/ml).

Предложеният метод осигурява производството на клетки с висока пролиферативна активност и подходящи за използване в диагностични и/или лечебни цели.

Този технически резултат се постига чрез култивиране на човешки фибробласти от линия М-20 в хранителна среда с добавяне на 10% фибринолитично активна плазма (FAP), която има растежно-стимулиращ ефект и повишава пролиферативната активност на клетъчната култура.

FAP е клинично използвана трансфузионна среда, която се получава от кръвта на хора, починали внезапно от инфаркт на миокарда, остра сърдечна недостатъчност, мозъчен кръвоизлив, през първите 6 часа след смъртта [заповед на Министерството на здравеопазването на СССР № 482 от юни 14, 1972 г. „За подобряване на осигуряването на терапевтични и профилактични институции и клиники с трупни тъкани, костен мозъки кръв"]. Кръвта след смъртта е пълна трансфузионна среда, която има редица биологични свойства - преди всичко повишен фибринолитичен потенциал. В тази връзка се предлага също така да се нарече постмортална фибринолиза на кръвта. Основните показания за кръвопреливане след смъртта: остра кръвозагуба, шок, анемия от различен произход, изгаряне, метаболитно заместване по време на екзогенно отравяне, запълване на AIK при използване на екстракорпорално кръвообращение в хирургия [E.G. Цуринова. Преливане на фибринолиза кръв. М., 1960, 159 с.; С.В. Рижков. Подготовка и възможности за използване на кръв за фибринолиза в зависимост от времето на вземане и причината за смъртта. Автореферат. док. дис. Л., 1968, 21 с.; Г.А. Пафомов. Биологични характеристики на кръвта на внезапно починали и нейното използване в хирургическата практика. дис. док. пчелен мед. Sci. М., 1971, 355 с.; К.С. Симонян, К.П. Гутионтова, Е.Г. Цуринова. Посмъртна кръв в аспекта на трансфузиологията. М., Медицина, 1975, 271 стр.]. Понастоящем се използват кръвни компоненти след смъртта: фибринолитично активна плазма, маса на червените кръвни клетки, левкоцитна маса, тромбоцитна маса [G.Ya. Левин. Хемокоагулационни свойства и клинично приложениеплазма и тромбоцити от трупна кръв. Автореферат. док. дис. М., 1978, 31 с.; В.Б. Хватов. Препарати с фибринолитично и антипротеназно действие от кръвна плазма на внезапно починали хора. дис. док. Med Sciences, 1984, 417 стр.; В.Б. Хватов Плазмакиназа - нов тромболитичен препарат от постмортална плазма В: Тромбоза и тромболиза изд. Е.И. Чазов, В.В. Смирнов). Consultants Bureau, N.Y., L, 1986, p. 283-310; В.Б. Хватов. Медицински и биологични аспекти на използването на посмъртна кръв. Бюлетин на Академията на медицинските науки на СССР, 1991, 9. стр. 18-24; В.Б. Хватов. Трупна кръв - история и актуално състояние на проблема. проблем хематол. и преливане. кръв, 1997, 1. С. 51-59]. Компонентите на трупна кръв, получени от донори на органи, също са получили клинична употреба [починало лице с биещо сърце съгласно „Инструкции за установяване на смъртта на лице въз основа на диагноза мозъчна смърт” от 20 декември 2001 г. № 460, Министерство на правосъдието рег. № 3170 от 17 януари 2002 г.] . Трансплантацията на органи, тъкани и клетки се извършва в съответствие със Закона на Руската федерация „За трансплантацията на човешки органи и (или) тъкани“ - с измененията. Федерални закониот 20 юни 2000 г. № 91-Ф3, от 16 октомври 2006 г. № 160-Ф3; В.Б. Хватов, С.В. Журавел, В.А. Гуляев, E.N. Кобзева, М.С. Макаров. Биологична полезност и функционална активност на клетъчните компоненти на кръвта на донорите на органи. Трансплантология, 2011, 4, с. 13-19; Хубутия М.Ш., Хватов В.Б., Гуляев В.А. и др. Метод за компенсиране на обема на глобуларната кръв и имуномодулиращи ефекти по време на трансплантация. RF патент за изобретение № 2452519, публ. 06/10/2012, бюлетин. № 16].

Фибринолитично активната плазма се получава от кръвта на внезапно починали хора, приготвена с консерванта Глюгицир (съотношение кръв:консервант 4:1) за запазване на фибринолитично активните й свойства. Отделянето на плазмата от клетъчните елементи на кръвта се извършва в стерилна кутия при спазване на всички правила за асептика и антисептика и е подобно на получаването на донорска плазма от консервирана донорска кръв. Клиничното използване на FAP в хирургията и травматологията разкрива ефекта на стимулиране на заздравяването на рани [I.Yu. Клюквин, М.В. Звездина, В.Б. Хватов, Ф.А. Бурдига. Метод за лечение на рани от ухапвания. Патент за изобретение на Руската федерация № 2372927, публикация, 20 ноември 2009 г., бюлетин. № 32]. Свързахме този ефект с наличието на растежно-стимулиращи фактори във FAP, секретирани от активирани тромбоцити. Впоследствие идентифицирахме тромбоцитен растежен фактор (PDGF) във FAP. Стимулиращият растежа ефект на FAP в човешки клетъчни култури е показан в специални изследвания. Изследваните проби от FAP при концентрация от 10% се добавят към клетъчна суспензия от човешки фибробласти от линия М-20, съдържаща известен брой клетки, и 10 ml от получената смес се поставят в колби за култура с растежна повърхност от 25 cm 2 . Клетките се отглеждат в продължение на 3-4 дни в атмосфера от 5% CO 2 и при 37°С. След 3-кратно пасиране порасналите клетки се преброяват в камера на Fuchs-Rosenthal и се определя отношението на броя на порасналите клетки към броя на засадените клетки - индексът на пролиферация (в таблица 1).

От проведените експерименти следва, че растежните свойства на FAP осигуряват висока пролиферативна активност и не се различават от тези на феталния говежди серум. Освен това FAP съдържа човешки тромбоцитни растежни фактори, т.е. алогенен тип, за разлика от феталния говежди серум - ксеногенен тип. Този факт е решаващ за клетъчна трансплантация по време на заместителна терапия. Имайте предвид, че стимулиращият растежа ефект върху клетъчната култура M-20 се дължи по-специално на присъствието на PDGF във FAP в концентрация от 155 до 342 pg/ml. Тези данни са получени с помощта на комплекта Qantikine, човешки PDGF-BB имуноанализ от R&D Systems и системата Multiskan Ascent от Thermo. Концентрацията на PDGF-BB във FAP е подобна на съдържанието му в кръвния серум. Така в серума на кръводарители и изследвани пациенти съдържанието на PDGF варира от 110 до 880 pg/l, средно 244 pg/ml, докато в плазмата съдържанието на PDGF варира от 0-2 pg/ml.

За по-добро разбиране на предложеното техническо решение „производство на човешки диплоидни клетки от линията М-20 за медицински и биологични цели“ предоставяме следния пример.

Клетки от линия М-20, пасаж 16, се възстановяват от работната банка. За да направите това, криопробирката с клетки се изважда от течен азот и се поставя вътре водна баняпри температура 38°C и след размразяване съдържанието се прехвърля в съд за култура с хранителна среда DMEM, съдържаща 10% FAP (със съдържание на PDGF от 155 до 342 pg/ml), добавя се антибиотик гентамицин в разход 1 ml 4% разтвор на 1 литър хранителна среда. За да се образува монослой, клетките се култивират в продължение на 4-5 дни при 37°C и 5% CO 2 в атмосфера. След образуването на монослой от клетки се извършват 3 последователни пасажа, необходими за възстановяване на ДНК след криоконсервация. След това клетките се репликират от пасаж 20 до пасаж 33. Клетките от тези пасажи са предназначени за биомедицински цели. Получената клетъчна линия се характеризира подробно в съответствие с изискванията на СЗО и GNIISiK MIBP на името на. Ел Ей Тарасевич, включително HLA типизиране на клетъчната линия M-20, както и изследване на неговия цитокинов спектър. Предоставяме сравнително описание на свойствата на линията M-20 и линията M-22 (Таблица 2). Линия M 22 (човешки диплоидни фибробласти) е лицензирана като субстрат за ваксина и одобрена за производство на всякакви видове медицински вирусни ваксини, а също така се използва за лечение на рани от изгаряния от II-IIIA степен [Патент на RF за изобретение № 2373944 , 23.06.2008 г. Метод за лечение на рана от изгаряне. КАТО. Ермолов, С.В. Смирнов, В.Б. Хватов, Л.Л. Миронова, О.И. Клнюшко, Е.А. Жиркова, B.C. Бочарова].

Линия M-20 е инсталирана на името на IPVE. М.П. Chumakov RAMS през 1986 г. от кожата и мускулите на 10-седмичен човешки ембрион, получен в резултат на аборт от здрава жена. Няма анамнеза за рак, полово предавани болести, хепатит или туберкулоза; генетични и вродени заболяванияне се наблюдава в семейството. Среда за клетъчна култура DMEM, допълнена с 10% FAP. Съотношението на посяване е 1:3-1:4 два пъти седмично с доза на засяване на клетки от 7×104 клетки/ml. Клетъчният монослой се състои от ориентирани хомогенни вретеновидни клетки с овални ядра, съдържащи 1-3 нуклеоли и малки бучки хроматин. IN жизнен цикъллинията може да бъде разграничена в 3 фази на развитие: формиране 1-3 пасажа, активен растеж 4-40 и стареене 41-52, след което настъпва смърт. Клетките от линията са с човешки кариотип 2m=46, XY. Линията се характеризира с висока генетична стабилност: 93,3-96,9% от клетките имат диплоиден набор от хромозоми, клетките с полиплоиден набор са не повече от 1,6%. Не са наблюдавани пропуски, прекъсвания или пръстенови хромозоми. Броят на лентите на изоензимите G-6PDE и LDE и тяхната електрофоретична подвижност съвпадат с тези за човешките еритроцити. G-6FDG бавен тип. При засяване върху селективни хранителни среди не е установено замърсяване с бактерии, гъбички или микоплазми. В допълнение, не е открито замърсяване с микоплазми при оцветяване с ДНК флуорохроми Hochst 33258 и оливомицин, както и PCR метод. Заразяване с вируси при експерименти с кърмачета и възрастни бели мишки, морски свинчета, зайци и пилешки ембриони, както и върху хомоложни и хетероложни клетъчни култури. Контрол на туморогенността. Когато клетките от линията се прилагат на имуносупресирани животни, тумори не се образуват. Не е открита обратна транскриптаза. HLA маркери: Клас I: A*(02.03)/B*(07.40)/CW*(03.07). Клас II: DRB1*(15.16)/DQB1*(05.06). Клетките от линията M-20 на ниво 20-ти пасаж произвеждат иРНК за α-интерферон (IFNα) и интерлевкини: IL1β, 2, 4, 6, 8, 10, 18.

По този начин предложената линия е диплоидна - има ограничена продължителност на живота, запазва кариотипа на нормалните човешки клетки през целия живот, не съдържа замърсители и няма онкогенен потенциал. Той е характеризиран за безопасност в съответствие с препоръките на СЗО и изискванията на Държавния научноизследователски институт по клинични инфекциозни болести на име. Ел Ей Тарасевич. В IPVE im. М.П. Chumakov RAMS има банки от семена и работни клетки, които могат да отговорят на всички нужди на производството и научните изследвания. Клетките от линията М-20 са чувствителни към инфекция от различни вируси. Допълнително е изследван цитокиновият спектър на линия М-20. Познаването на цитокиновия спектър на клетките позволява по-точно да се оценят резултатите при определяне на интерфероновия статус на пациентите и да се дават информирани препоръки за употребата на терапевтични и профилактични лекарства.

Човешки диплоидни клетки - фибробласти от щам М-20 с повишена пролиферативна активност, получени по предложения метод, могат да се използват за диагностични цели, по-специално за определяне на активността на интерферон (IFN) в човешки кръвен серум, както и за медицински цели , например за локално лечение на рани от залежаване, рани от ухапвания, дълготрайни незарастващи рани и рани от изгаряния.

1. Метод за повишаване на пролиферативните свойства на диплоидни човешки фибробластни клетки, характеризиращ се с това, че диплоидните клетки от характеризираната линия М-20 от криобанката на Института по съдовете им. М.П. Chumakov RAMS се мащабира от ампула от банка от семенни клетки от пасаж 7 и се получава банка от работещи клетки от пасаж 16, докато клетки от пасажи 20-33, подходящи за използване за терапевтични и/или диагностични цели, се получават чрез култивиране в хранителна среда, съдържаща 10% фибринолитично активна плазма (FAP) човешка, съдържаща тромбоцитен растежен фактор PDGF в концентрация от 155 до 342 pg/ml.

2. Метод съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че при култивиране на клетки се използва хранителна среда DMEM с 10% FAP.

Подобни патенти:

Изобретението се отнася до фармацевтичната индустрия, а именно до използването на човешки плацентарни перфузатни клетки в производството лекарствоза потискане на пролиферацията на туморни клетки в индивида.

Групата изобретения се отнася до областта на биотехнологиите и онкологията. Методът включва: а) изолиране на постнатални тъканно-специфични мултипотентни автоложни стволови клетки (ASCs) и/или автоложни прогениторни клетки (APCs) за техните последващи протеомни и пълни транскриптомни анализи; b) изолиране на ASCs и/или APCs и/или мултипотентни алогенни HLA-хаплоидентични стволови клетки (HLA-CK) за последващо ремоделиране на техния протеомен профил; в) изолиране на CSC от тумора на пациента; d) протеомен анализ на ASC и/или APC и RSC; д) пълен анализ на транскриптоми на ASC и/или APC и CSC; f) определяне на набор от протеини, всеки от които се съдържа в протеомните профили на ASC и/или APC и CSC; g) анализ на предварително определен набор от протеини за идентифициране на вътреклетъчни сигнални пътища в CSCs, които не са претърпели неопластична трансформация в резултат на карциногенеза, и за определяне на целеви протеини, които са мембранни акцептори на идентифицирани сигнални пътища; з) анализ на пълния профил на генна експресия на транскриптом на CSCs и потвърждение на целостта и функционалното значение на структурните компоненти на идентифицираните сигнални пътища в CSCs; i) идентифициране на лигандни протеини, способни да активират целеви протеини; Да се) сравнителен анализпълни транскриптомни профили на ASA и/или APC с транскриптомни профили, съдържащи се в известни бази данни с транскриптоми, за идентифициране на пертурбогени, способни да модифицират профила на генна експресия на ASA и/или APC и/или HLA-CK, изолирани за ремоделиране на техния протеомичен профил, в посока на секреция по-рано определени лигандни протеини; k) ремоделиране на протеомния профил на ASA и/или APC и/или HLA-CK от пертурбогени за получаване на модифициран транскриптомичен профил на различни клетъчни системи, способен да упражнява регулаторен ефект върху RSC на пациента.

Изобретението се отнася до областта на биотехнологиите, по-специално до клетъчните технологии, и може да се използва в медицината. Популация от мононуклеарни клетки или неембрионални стволови клетки, обогатени с клетки от моноцитната линия, съдържащи промоноцити, се използва за лечение на исхемия в субект.

Изобретението се отнася до областта на биотехнологиите и клетъчните технологии. Предявеното изобретение е насочено към създаване на плурипотентни, мултипотентни и/или самообновяващи се клетки, които са в състояние да започнат да се диференцират в култура в Различни видовеклетки и са способни на по-нататъшна диференциация in vivo.

Изобретението се отнася до областта на медицината и може да се използва за селекция на сперма в методите на асистираните репродуктивни технологии. Методът включва поставяне на капка сперма и капка културална среда в петриево блюдо на разстояние не повече от 5 cm една от друга, свързване на капките с лента от вискозна среда с параметри на вискозитет от 1-4 Pa s, след това съдът със съдържанието се инкубира за 30-90 минути при симулиращи условия естествена среда цервикален каналженски репродуктивен тракт.

Изобретението се отнася до областта на медицината, биотехнологиите и клетъчните технологии. Метод за диференциране на плурипотентни стволови клетки, представляващи човешка клетъчна линия, в клетки, експресиращи маркери, характерни за образуваната ендодермална линия, включва третиране на плурипотентните стволови клетки със среда, характеризираща се с това, че не съдържа активин А и съдържа GDF-8 за определен период от време , достатъчно за плурипотентните стволови клетки да се диференцират в клетки, експресиращи маркери, характерни за линията на образуваната ендодерма.

Настоящото изобретение се отнася до областта на имунологията. Предложени са варианти на олигопептида, изолиран от протеина RAB6KIFL (KIFL20A), които са способни да индуцират цитотоксични Т лимфоцити (CTL) като част от комплекс с молекулата HLA-A*0201.

Изобретението се отнася до областта на хранително-вкусовата промишленост и представлява метод за варене на бира, който включва добавяне на термостабилна протеаза към пивната мъст след филтриране на пивната мъст, но преди кипене на мъстта, при което топлинната стабилност на протеазата означава, че активността на тази протеаза е поне 70% от дейността си, измерена съгл към следващия метод: протеазата се разрежда до концентрация от 1 mg/ml в буфер за анализ, съдържащ 100 mmol янтарна киселина, 100 mmol HEPES, 100 mmol CHES, 100 mmol CABS, 1 mmol CaCl2, 150 mmol KCl, 0,01% Triton X-100 и c pH коригирано до 5.5 с NaOH; след което протеазата се инкубира предварително i) в лед и ii) 10 минути при 70°С; субстратът, към който протеазата е активна, се суспендира в 0,01% Triton X-100: за да започне реакцията, 20 μl протеаза се добавя към епруветката и се инкубира в термомиксер Eppendorf при 70°C, 1400 rpm за 15 минути; реакцията се спира чрез поставяне на епруветките в лед; пробите се центрофугират на студено при 14000 g за 3 минути и се измерва оптичната плътност OD590 на супернатантата; получената стойност на OD590 на пробите без протеаза се изважда от получената стойност на OD590 на пробите, третирани с протеаза; определяне на термостабилността на протеазата чрез изчисляване на процента на протеазната активност в проби, предварително инкубирани при 70°С, спрямо протеазната активност в проби, инкубирани върху лед като 100% активност.

Изобретението се отнася до областта на клетъчната биология, клетъчната трансплантология и тъканното инженерство. Метод за повишаване на ангиогенната активност на стромалните клетки на мастната тъкан в тъканите и органите включва изолиране на стромални клетки на мастната тъкан, култивиране на изолираните клетки в присъствието на тумор некрозис фактор-алфа в количества от 5 или 100 ng/ml за 24-72 часа , последвано от трансплантация в тъкани или органи .

Изобретението се отнася до областта на биотехнологиите, клетъчните технологии и тъканната хирургия. Методът за получаване на култура от гладкомускулни клетки се състои в изрязване на фрагмент от кръвоносен съд, смилането му на парчета до размер не повече от 2 mm във всяко измерение и инкубиране на парчетата в колба за култура с предварително нанесени драскотини към дъното на колбата, съдържаща културална среда, съдържаща 10% ембрионален фетален серум, за най-малко 10 дни, но не повече от 24 дни, при температура 37°C в CO2 инкубатор, характеризиращ се с това, че споменатият фрагмент от кръвоносен съд е фрагмент от възходящия крайник гръдна аорта, изрязани по време на процедурата за присаждане на коронарен артериален байпас, като посочените парчета от фрагмента на възходящата гръдна аорта се държат в хранителна среда, съдържаща 0,1% колагеназа, за най-малко 30 минути, но не повече от 60 минути, при температура 37°С. °C преди инкубиране и след това се промива със среда за клетъчна култура.

Метод за получаване на мезенхимни стволови клетки от човешки плурипотентни стволови клетки и мезенхимни стволови клетки, получени по този метод // 2528250

Изобретението се отнася до областта на генното инженерство, тъканните технологии и медицината. Метод за получаване на мезенхимни стволови клетки от плурипотентни човешки стволови клетъчни линии включва получаване на ембриоидни тела от човешки плурипотентни стволови клетки, прикрепване на ембриоидни тела към петриево блюдо за индуциране на спонтанна диференциация на ембриоидни тела в мезенхимни стволови клетки, култивиране с пролиферация на мезенхимни стволови клетки, докато поддържане на идентичността на мезенхимните стволови клетки и където индукцията на спонтанна стадийна диференциация възниква чрез образуване на автоложни цитокинови бримки без добавяне на външен цитокин, също и съответните клетки, тяхното използване, набиране и метод на култивиране.

Изобретението се отнася до областта на молекулярната биология, биохимията и медицината. Предлага се състав за индуциране на миграция на стволови клетки от зряла мастна тъкан, който съдържа като активна съставка човешки мезенхимни стволови клетки от зряла мастна тъкан в количество от 1x107 до 1x1010, които експресират хемокин или рецептор на растежен фактор върху клетъчната повърхност, или секреторен продукт от тези стволови клетки включва хемокин или рецептор на растежен фактор; където секретираният продукт на стволови клетки от мастна тъкан на възрастни е адипонектин; и където стволовите клетки от адипозна тъкан на възрастен човек се инициират със смес, съдържаща хемокин или растежен фактор.

Изобретението се отнася до биотехнологиите и медицината. Предложен е метод за експанзия на мононуклеарни клетки от кръв от пъпна връв (pcBMC) ex vivo в присъствието на мултипатентни мезенхимни клетки (MMSC), който включва култивиране на MMSC от стромално-съдовата фракция на мастната тъкан до достигане на монослой при Концентрация на O2 в среда от 5%, добавяне на pcMNC суспензия към MMSC монослоя, култивиране в продължение на 72 часа при концентрация на O2 в средата от 5%, селекция на неприкрепени psMNCs и замяна на средата, продължаване на култивирането на MMSCs с прикрепени psMNCs в продължение на 7 дни при концентрация на О2 в средата 5%.

Изобретението се отнася до областта на биотехнологиите и медицината. Предлага се състав, съдържащ стволови клетки от човешка амниотична течност с фенотип CD73+/CD90+/CD105+/CK19+, хранителна среда, еритропоетин, епидермален растежен фактор и колаген, взети в ефективно количество.

Изобретението се отнася до областта на медицината и клетъчните технологии. Клетъчен продукт, съдържащ популация от дуктални стволови клетки на субмандибуларната слюнчена жлеза, характеризиращ се с фенотип CD49f+/EpCAM+ и след третиране с валпроева киселина в концентрация 0,1-40 mM и култивиране в колагенов гел, променящ профила на експресия до 1AAT+/PEPCK+/G6P+/TDO+/CYP P4503A13+, както и придобиване на способността да синтезират урея и албумин.

Изобретението се отнася до областта на биотехнологиите, клетъчното и тъканно инженерство. Описан е метод за получаване на резидентни стволови клетки на сърцето на бозайник, експресиращи повърхностни маркери c-kit, и/или sca-1, и/или MDR1, по време на който проби от миокардна тъкан се изолират, раздробяват, третират с колагеназа и трипсин и култивирани върху културална чиния с покрита с фибронектин чрез експлант култура на натрошени проби, последвана от имуноселекция.

Изобретението се отнася до областта на биохимията, биотехнологиите и медицината. Предложен е N-терминален фрагмент на разтворим супресор на имунния отговор с дължина 21 аминокиселини, имащ аминокиселинната последователност съгласно Seq ID NO: 1, което позволява стимулиране на образуването и на регулаторни Т-лимфоцити, както и като метод за стимулиране образуването на регулаторни Т-лимфоцити с N-терминален фрагмент на разтворим супресор на имунния отговор с Seq ID NO: 1, когато се прилага в концентрация 0,1-50 μg/ml.

Изобретението се отнася до фармацевтичната индустрия и представлява дерматологичен крем, предназначен за локално лечение на бактериални кожни инфекции и за зарастване на свързани рани, съдържащ фрамицетин сулфат и биополимер, включен в основата на крема, който съдържа поне едно вещество от всяка от следните групи: : консервант ; първичен и вторичен емулгатор, избран от групата, състояща се от кетостеарилов алкохол, кетомакрогол 1000, полисорбат-80 и Span-80; парафин като восъчен продукт; съразтворител, избран от групата, състояща се от пропилей гликол, хексилен гликол и полиетилен гликол-400; азотна киселина или млечна киселина и вода и споменатият биополимер е за предпочитане хитозан.

Изобретението се отнася до областта на биотехнологиите, по-специално до клетъчните технологии, и може да се използва в медицината. Методът включва мащабиране на диплоидни клетки от линията M-20 от криобанката на IPVE на името на. М.П. Чумаков на Руската академия на медицинските науки от ампула от банка от семенни клетки от пасаж 7, за да се получи банка от работещи клетки от пасаж 16. В този случай клетки от 20-33 пасажа, подходящи за използване за терапевтични и диагностични цели, се получават чрез култивиране в хранителна среда, съдържаща 10 фибринолитично активна човешка плазма, съдържаща тромбоцитен растежен фактор PDGF в концентрация от 155 до 342 pgml. Изобретението позволява да се увеличи пролиферативната активност на диплоидни човешки фибробластни клетки. 1 заплата файлове, 2 мас.