Визначення групи крові за стандартними сироватками. Визначення групи крові стандартними сироватками – докладна інформація

• 1-я група: відсутні аглютиногени, у сироватці – аглютинини є;
• 2-я група: є А та бета;
• 3-я група: є В та альфа;
• 4-я група: є А, В, аглютинінів немає.

Техніка визначення

Техніка визначення групи крові за системою АВ0 заснована на візуальному спостереженні аглютинації.

Проводити дослідження потрібно при:

Запитайте лікаря клінічної лабораторної діагностики

Анна Поняєва. Закінчила нижегородську медичну академію(2007-2014) та Ординатуру з клініко-лабораторної діагностики (2014-2016).

"Люди блакитної крові", "королівська кров", "кровний брат" - існує багато виразів, які торкаються однієї з найважливіших системв організмі людини. Вона відповідає за тканинне харчування, дихання, обмін речовин, всмоктування та засвоювання поживних речовин. Роль кровоносної системискладно переоцінити. Тут немає дрібниць. Так, групова приналежність та резус-фактор відіграють велику роль у житті людини. Особливо це важливо для жінки. Визначення групи, біохімічний та інші аналізи передують будь-якому втручанню в організм пацієнта. Лікування практично кожного захворювання починається із взяття біологічного матеріалу для дослідження.

У Японії вважають, що характер людини повністю залежить від того, яка вона групова приналежність крові. У власників першої групи переважають такі якості, як самовпевненість та рішучість. Люди з другою групою крові надійні, але замкнуті у собі. Ті, хто мають третю, найчастіше честолюбні і розумні. У вимогливих, урівноважених людей тече у жилах кров четвертої групи. За цим принципом багато хто створює сім'ї, заводить друзів, роботодавці підшукують собі співробітників.

На Австралійському континенті мешкає дивовижна людинаДжеймс Харрісон. За свої 74 роки він встиг здати кров близько 1000 разів! Медики стверджують, що як мінімум 2 млн. новонароджених дітлахів зумів врятувати цей незвичайний донор. Він має не тільки саму рідкісною групою, але може похвалитися наявністю особливих антитіл, які допомагають немовлятам з тяжкою анемією успішно боротися з недугою.

Система АВО

У світі є 4 групи крові, що мають свої особливості. Перша група не містить білків антигенів А і В, тому вона є універсальною як донорська. Але людині, яка має таку групу крові, не можна переливати жодну іншу, крім першої. Друга група носить антигени А. Вона сумісна з першою та другою. Третя група крові має у своєму складі антигени В. І до неї ідеально підходить перша чи третя. Четверта група містить антигени А та В, і вона сумісна з кров'ю будь-якої групи. В даний час лікарі намагаються здійснювати переливання реципієнту тієї ж групи, що його власна.

Це загальноприйнята система, в якій працюють усі медичні закладисвіту. Визначення групи крові та резус-фактора проводять усім новонародженим дітям, людям перед будь-яким оперативним втручанням, переливання крові та її компонентів Особливо за цими показниками у жінок під час вагітності спостерігають акушери-гінекологи.

Методи визначення групи крові

Існує кілька способів визначення групової належності крові людини у лабораторних і навіть домашніх умовах:

1. За стандартними сироватками.
2. За стандартними еритроцитами.
3. Із застосуванням цоліклонів.
4. За групою крові батьків.

Важливо, що визначення групи крові та резус-фактора останнім способом не є достовірним. Цей метод можна назвати "домашнім". Він підходить в якості розваги дітям, що підросли, для кращого розуміння того, як же відбувається успадкування подібних ознак дитиною.

Як визначити групу крові, використовуючи цоліклони

Застосування цоліклонів - це простий і сучасний спосібвизначення групи крові людини та її резус-фактора. Препарат одержують із біологічного матеріалу мишей і повсюдно використовують у системі АВО. Плюси цоліклонів у тому, що вони швидше аглютинуються, тобто згортаються, з кров'ю і реакція стає більш вираженою. Найчастіше лаборанти використовують реагенти анти-А та анти-В, проте в деяких випадках працюють і з анти-АВ та анти-О. Визначення групи крові за допомогою цоліклонів потребує менше часу та підготовки.

На спеціальному планшеті роблять два написи відповідно до назв цоліклонів, що використовуються. Під ними наносять невелику краплю крові, що досліджується, поруч - трохи реагенту. Скляною чи будь-якою іншою чистою паличкою перемішують обидві рідини, потім протягом двох хвилин повільно похитують планшет для кращого з'єднання та згортання білків. За реакцією аглютинації судять про результати. Повна відсутністьсклеювання говорить про те, що кров, що досліджується, належить до першої групи. Склеювання з цоліклоном анти-А доводить, що вона відноситься до другої групи. Якщо спостерігається реакція з реагентом анти-, значить, у пацієнта кров третьої групи. При аглютинації з обома цоліклонами ясно, що досліджуваний матеріал містить антигени А і В. Отже, є кров'ю четвертої групи.

Визначення групи крові та резус-фактора за допомогою цоліклонів є найбільш зручним та поширеним у цей час. Для того щоб дізнатися резусну приналежність, потрібно на планшет нанести кілька крапель цоліклону анти-D-супер і одну - досліджувану біологічної рідини. Далі потрібно їх змішати. Наявність реакції згортання свідчить, що пацієнт має позитивний резус-фактор. Відповідно відсутність аглютинації означає те, що резус негативний.

Визначення групи крові стандартними сироватками

І тут використовують стандартні сироватки чотирьох відомих груп. Кожного реагенту беруть по дві серії, щоб забезпечити найточніший результат. Для полегшення роботи сироватки забарвлені кожна у свій колір: О(І) - безбарвна, А(ІІ) - синя, В(ІІІ) - червона, АВ(IV) - жовта. На спеціальний планшет наносять сироватки перших трьох груп дві серії кожної. Поруч капають по одній краплі крові, що досліджується, взятої з пальця. Планшет акуратно похитують до повного перемішування і реакції аглютинації судять про результати. Визначення групи крові - це завжди скрупульозна маніпуляція, яка потребує уважності та зосередження.

Стандартні еритроцити для визначення групи крові

Визначення групи крові стандартними еритроцитами – це ще один високоточний метод виявлення групової належності. Його проводять з використанням стандартних еритроцитів, одержаних з матеріалу донора. Сироватку центрифугованої крові наносять на планшет у два ряди по три краплі у кожному. Біля кожної з них поміщають трохи еритроцитарної маси в наступному порядку: О(І), А(ІІ), В(ІІІ) – по дві серії. Так само як і при визначенні групи іншими методами, у цьому випадку ретельно перемішують краплі крові та реагенти та судять про результати згортання білка.

Визначення групової приналежності дитини до крові батьків

Визначення групи крові за батьками – це, мабуть, єдиний «домашній» метод. Згідно із законом успадкування дитина бере від батька та матері по одному антигену. У таблиці нижче представлені всі можливі варіантиуспадкування дитиною групи крові.

Визначення групи крові дитини за таблицею може дати уявлення про успадкування генів та дозволить з користю провести час. Цей спосіб не є точним. Але він досить інформативний. Зрозуміло, визначення групи крові за батьками – це не самий найкращий методДля достовірного результату варто звернутися до клініки.

Збір крові

Для визначення групової приналежності беруть матеріал з пальця та з вени. Для аналізу використовують як цільну кров, так і сироватку, яку отримують в результаті центрифугування пробірки з біологічним матеріалом. Дітям при народженні визначення групи крові та резус-фактора проводять, застосовуючи матеріал, взятий із п'яти.

Аналіз беруть в амбулаторії або стаціонарі в умовах повної асептики та з використанням засобів антисептики. Маніпуляцію може робити тільки людина з медичною освітоюа проведенням реакції повинен займатися лаборант. Аналіз проводять кілька разів різні медпрацівники, щоб унеможливити вплив людського фактора на результат дослідження. Існують прилади, які здатні точно і достовірно визначити групу крові та резус-фактор, але навіть після використання техніки завжди проводиться повторна перевірка, адже тут не можна помилятися.

Підготовка до здачі крові на аналіз

Група крові та резус-фактор не змінюються протягом усього життя і не залежать від прийому їжі, стану здоров'я, зовнішніх факторів. Тому перед здаванням аналізу не потрібно специфічної підготовки. Однак, щоб знизити ризик погіршення якості дослідження, важливо здавати матеріал натще, а вечеря має бути легкою і обов'язково не пізніше 18.00.

Група крові на рукаві

У житті відбуваються різні ситуації, ніхто не застрахований від травм чи нещасних випадків. Кожній людині потрібно знати свою групу крові, адже при настанні надзвичайних обставин ця інформація може врятувати життя в буквальному значенні слова. Не дарма в паспорт медпрацівники ставлять усім охочим відповідний друк. Бережіть своє здоров'я та своїх рідних людей!

Як відбувається визначення групи крові за стандартними сироватками? Напевно, спостерігаючи за діями лаборанта і за хімічною реакцією, що відбувається на спеціальній планшетці, подібне питання задавали собі багато хто. Нічого загадкового в цьому процесі немає, а механізм встановлення групової приналежності ґрунтується на реакції аглютинації, яка відбувається при взаємодії компонентів крові аглютиногенів та елементів сироватки.

Основні характеристики груп

Визначення групи зі стандартних сироваток засноване на тому, що в крові людини містяться, у різних комбінаціях аглютиногени (А та В) та аглютинини (a та b). При зустрічі однойменних аглютиніну і аглютиногену відбувається швидка аглютинація, а на планшетці цей процес виглядатиме як розпад однорідної кров'яної плями на безліч дрібних цяток.

• 0 (I) - містить тільки аглютиніни a та b;
• A (II) - є антиген А та аглютинін b;
• (III) - є аглютиноген B і антитіло а;
• АВ (IV) – у сироватці немає антитіл, а на поверхні еритроциту розташовується аглютеногенний комплекс АВ.

Тип крові за допомогою стандартних сироваткових розчинів визначається протягом 5-10 хвилин і не вимагає додаткової підготовкипацієнта для дослідження. Цим способом можна досліджувати як венозну, і периферичну кров, отримуючи однаковий результат.

У екстрених випадках(Підготовка до термінової операції або необхідність негайного поповнення крововтрати) проводять змішування, капаючи кров з проколу на пальці хворого прямо на планшетку з налитими на неї стандартними сироватками.

Техніка проведення аналізу

Для дослідження застосовується плоска планшетка із заглибленнями у ній. Поглиблення розташовані по 3 ряд (є 2 ряди) і є одне внизу.

Над кожною парою заглиблень для зручності лаборанта написано І, ІІ або ІІІ і для нанесення до осередків відповідних стандартних сироваток.

1. У першому ряду у відповідні осередки наливається кілька крапель сироваткового розчину I, II та III виду (відповідно до найменуванням поглиблення).
2. У другий ряд дублюються аналогічні розчини, але інший серії виготовлення (необхідний контроль для уникнення хибної аглютинації через неякісну сироватки).
3. У розчини скляною паличкою додаються краплі венозної або периферичної крові.
4. Перемішування, щоб уникнути випадкового пошкодження еритроцитів, проводиться плавним похитуванням планшетки.
5. Далі матеріал залишається на 5 хвилин, після чого проводиться оцінка отриманого результату.

Оцінюється вид і структура рідин за типом розчину, також перевіряється відповідність з аналогічним розчином у розташованому осередку.

Якщо, наприклад, у одному поглибленні з цифрою II відбулася аглютинація, а іншому з аналогічним реактивом немає, то визначення групи крові з допомогою сироваткових складів вважається неправильним. Його необхідно повторити, використовуючи сироватки 2 інших серій.

Оцінка результатів

Тип крові стандартними сироватковими реактивами визначається на підставі видимої реакції аглютинації, і результат може бути наступним:

1. I - основні та контрольні краплі на лабораторній тарілочці залишилися без змін.
2. II - хімічна реакціявідбулася в осередках I та III.
3. III – спостерігається аглютинація у поглибленні I та II.
4. IV - є зміни у всіх ємностях лабораторної тарілочки.

При визначенні IV типу завжди проводиться контроль із сироваткою IV, щоб запобігти хибно позитивний результат. У контрольному змішуванні через 5 хвилин не повинно відбутися жодних змін.

Методом визначення типу крові за допомогою стандартних сироваткових реактивів користуються майже у всіх лабораторіях. Швидкий та доступний спосібдозволяє протягом декількох хвилин визначити групу.

Отримані дані враховуються лише у тому випадку, коли аглютинація яскраво виражена. Слабка хімічна реакція може бути через старі реактиви або через неправильне проведення аналізу. Результат не може вважатися достовірним. У сумнівних випадках, крім дослідження стандартними сироватковими складами, можуть бути зроблені для уточнення групи тести з цоліклонами або еритротест.

За допомогою стандартних сироваткових складів визначення групи можливе за кілька хвилин. Метод дуже простий і вимагає від лаборанта спеціальних навичок.

Кров має особливі імуногенетичні властивості, за якими всіх людей можна розділити на певні групи. Кожна людина повинна знати, до якої групи крові вона належить. Це може знадобитися при наданні екстреної медичної допомоги, коли неможливо з якоїсь причини провести достовірне визначеннягрупи крові. Дослідниками було підтверджено. Визначивши свою групу крові, людина зможе дізнатися про особливості свого здоров'я та вчасно профілактувати хвороби.

Групову систему AB0 відкрив світові Ландштейнер ще 1900 року. Пізніше вивчалися інші відмінності крові людини та тварин (наприклад, ).

Приналежність до групи крові закріплена в генетичному коді та успадковується з іншими індивідуальними ознаками. Формування антигенного відбувається у внутрішньоутробному періоді, і він не змінює своїх специфічних властивостей все життя людини.

Елементи кров'яної системи

У рідкій рухомій плазмі крові рівномірно розподілені клітинні елементи: еритроцити, лейкоцити та тромбоцити. Форменні елементизаймають до 35-45% загального обсягу крові. Крім цього, в плазмі знаходяться жирові частинки клітин, так званий «кров'яний пил» (гемоконії). можуть містити у своєму складі специфічні антигени (аглютиногени A та B). У плазмі можуть виявлятися антитіла (аглютиніни α і β). Комбінації антигенів та антитіл дозволяють класифікувати групи крові за системою AB0.

Інші види групових систем крові обирають лише присутність антигенів в еритроцитах. Антитіла до них зазвичай з'являються при вливанні реципієнту невідповідної крові, імунологічної та плоду.

Відповідно до системи AB0 ​​всіх людей поділяють такі групи:

• Перша 0 (I) () – у червоних кров'яних тільцях немає антигенів, а в сироватці виявляються аглютинини α та β
• Друга A (II) містить у своєму складі аглютиноген A
• Третя B (III) () – присутній аглютиноген B
• Четверта AB (IV) – разом фіксуються еритроцитарні аглютиногени A та B.

Система AB0 дозволяє уникнути небезпечних наслідківпри неправильному переливанні крові. Для ідеальної сумісностікрові потрібно, щоб кров донора відповідала такій же групі в системі AB0, що кров пацієнта. Переливання чужорідної групи крові може викликати імунологічну несумісність та призведе до трансфузійних ускладнень. Перед обов'язково вивчають склад крові та проводять ряд аналізів на сумісність.

Лабораторні компоненти

Для визначення типу групи крові пацієнту не потрібно спеціальної підготовки, необхідно лише утриматися від вживання алкоголю і не приймати жодних лікарських засобівнапередодні аналізу.

У лабораторію беруть із собою направлення від лікаря. Добре наперед придбати одноразовий набір для взяття крові або шприц – це надійно захистить від можливого інфікування у процесі відбору проб. чи вени. У немовлякров зазвичай беруть із п'яти.

В основі визначення типу крові лежить реакція аглютинації, при цьому утворюються пластівці склеєних між собою еритроцитів. Набір для лабораторного дослідженняна групу крові включає стандартні сироватки та еритроцити у вигляді розчину, контрольні реактиви, фізіологічний розчин (натрію хлорид 0,9%-ний) та спеціальні білі пластинки із пластику або порцеляни, піпетки.

Для достовірного в лабораторії повинна бути температура повітря в межах 21-24 ° C і яскраве освітлення. Усі витратні компоненти обов'язково перевіряють на відповідність єдиної серії, термінів використання та умов зберігання. Неприпустима наявність суспензії, осаду, помутніння в розчинах еритроцитів та сироватці.

Визначення сироватками

На білій платівці відзначають по порядку назви груп крові 0, A, B. Великі краплі стандартної сироватки груп 0(I), A(II), B(III) наносять на пластину навпроти її напису, а поряд сироватки іншої серії: виходить два ряди крапель.

Використання різних серій реагентів застосовують для виключення помилки. Кожну краплю стандартної сироватки акуратно змішують із невеликою краплею крові пацієнта. Усі маніпуляції виконують піпеткою чи паличкою зі скла. Потім пластину трохи похитують та оцінюють результат дослідження у кожній краплі. Якщо протягом п'яти хвилин утворюються пластівці з аглютинованих еритроцитів, результат приймають за позитивний.

Для виключення можливої ​​помилки, кожну краплю крові на пластині змішують із краплею фізрозчину та очікують ще п'ять хвилин. Якщо пластівці починають осідати у всіх краплях, то проводять контроль реакції шляхом змішування досліджуваної крові і стандартного розчину сироватки групи AB(IV). У разі склеювання еритроцитів повинно реєструватися.

Визначення групи крові на підставі одержаних результатів:

• Перша група - у жодній з крапель не відбулося склеювання еритроцитів
• – позитивна реакціякрові з сироватками груп 0(I) та B(III)
• Третя група – аглютинація крові зі стандартними сироватками 0(I) та A(II)
• – позитивний результат у трьох краплях та негативний із контрольною сироваткою AB(IV).

Існує перехресний спосіб визначення типу плазми, додатково використовують стандартні еритроцити. Цей спосіб визначення групи крові допомагає виявити плазмові групові антитіл α і β і відкриває більше повну характеристикукрові. Застосовують перехресний спосіб перед переливання крові. Відбір проб венозної крові проводять заздалегідь, її відстоюють та відокремлюють плазму від формених елементів.

Іноді замість стандартних сироваток застосовують розчини Цоліклон з моноклональними антитілами. Отримують їх за участю технологій генної інженерії.

При , дуже важливий кваліфікаційний рівень медичного працівника, його акуратність та уважність. Помилковий результат може спровокувати неправильний порядок нанесення реактивів, використання забруднених або мокрих піпеток, непридатних реагентів, нехтування контрольним дослідженням.

Рідкісність результатів

При аналізі медичних статистичних даних виявляється, що найпоширеніша перша група крові – до 65% від населення Землі. За нею слідує друга з результатом 25% і третя (близько 8% населення). Найрідкіснішим результатом щодо груп крові залишається четверта група, особливо з негативним резус-фактором.

Результати визначення групи крові реєструються медичним співробітником, які проводили аналіз, в амбулаторній картіабо документ, що засвідчує особу (паспорт). Обов'язково вноситься дата дослідження та підпис відповідального медичного працівника.

Визначення групи крові за допомогою стандартних парних ізогемаглютинуючих сироваток.

1Вступне слово:Ми проводимо визначення групи крові зі стандартними сироватками у процедурному кабінеті за призначенням лікаря. На мені шапочка, окуляри, маска, халат, фартух, рукавички. Руки попередньо оброблені гігієнічним способом.

2 Оснащення:

Стандартні сироватки двох серій

Досліджувана кров у пробірці

Тарілка визначення групи крові.

Чотири стерильні скляні палички (у склянці, чашці Петрі)

Ізотонічний розчин хлориду натрію (пробірка)

Стерильні піпетки 2 шт.

Місткість з 3% розчином хлораміну.

3 Проведення маніпуляції

Внести по краплі (0,1 мл) стандартних сироваток окремі лунки.

Внести на тарілку велику краплю крові поряд з лункою 4 групи, на відстані не менше 1 см від неї.

Окремими кінцями скляних паличок внести кров у сироватки (співвідношення 10:1), змішати

Похитувати тарілку 5 хв, спостерігати аглютинацію.

У лунки, в яких відбулася аглютинація, додати фізіологічний розчин (0,1 мл)

Похитувати тарілку, спостерігати аглютинацію.

Форма відповіді:

При визначенні групи крові зі стандартними сироватками

Аглютинація не спостерігається в жодній з лунок – перша група

Аглютинація спостерігається в першій та третій лунках – друга група

Аглютинація спостерігається в першій та другій лунках – третя група

Аглютинація спостерігається у всіх лунках - ймовірно четверта група

Визначаємо результат із сироваткою четвертої групи (аналогічно)

Форма відповіді:

Із сироваткою четвертої групи аглютинація не спостерігається – четверта група

Із сироваткою четвертої групи аглютинація не спостерігається – визначити групу крові неможливо, слід замінити сироватки.

Після проведення маніпуляції усі забруднені кров'ю предмети замочуємо у тривідсотковому розчині хлораміну на одну годину.

4 Можливі помилки:

Грубі помилки:

Не використання засобів захисту медпрацівника.

Повторне використання паличок.

Перенесення паличок, що контактували з кров'ю над лотком із чистими паличками.

Чи не відповідність картини аглютинації висновку про групову приналежність.

Не продезінфіковані предмети, що контактували з кров'ю

Чи не грубі помилки:

Час очікування аглютинації менше 5 хв.

Не внесений фізрозчин до лунок, у яких відбулася аглютинація.

Утримування паличок за кінці, а не за центр.

5 Критерії оцінювання:

Здав – відсутність грубих помилок, наявність трохи більше двох не грубих помилок.

Чи не здав - наявність грубих помилок, наявність більше двох не грубих помилок.

Під час грубої помилки викладач може попросити повторити відповідний етап маніпуляції. Якщо повторюється помилка – не здав. Допускається трохи більше одного повторення.