Fibroblastlar. Fibroblastların funksiyaları

Müasirin əsas fəaliyyəti estetik tibb- yüksək texnologiyalardan istifadə etməklə qocalmanın qarşısının alınması. Nəticə olaraq elmi araşdırma Hüceyrələrin regenerasiya qabiliyyətinə malik olduğu bir nümunə müəyyən edilmişdir. Fibroblastlar da bu xüsusiyyətlərə malikdir, onların bərpası dərinin cavanlaşmasına və onlarda görünən qüsurların aradan qaldırılmasına səbəb olur.

Fibroblastların funksiyaları və təbiəti

"Fibroblastlar" termini hərfi mənada "cücərti" və "lif" kimi tərcümə olunan iki latın sözündən ibarətdir. Təbiətlərinə görə hüceyrələrdir birləşdirici toxuma, hüceyrədənkənar matrisin sintezi (köçürülməsini təmin edən toxuma quruluşu kimyəvi maddələr və dəri hüceyrələrinin mexaniki dəstəyi). Fibroblastlar kollagen və elastin liflərinin, hialuron turşusunun, fibrinin prekursorları olan maddələr istehsal edir.

Onlar mezenximadan gəlir - insan və heyvanların bədəninin hüceyrələrində olan germinal toxuma. Aktiv vəziyyətdə, fibroplastların quruluşu bir nüvənin və proseslərin mövcudluğunu nəzərdə tutur, onlar böyük bir ölçüyə malikdir və istirahət vəziyyətində çox sayda ribosom ehtiva edir, ölçüləri azalır və iğ şəklində bir forma alır;

Dərinin fibroblastları var geniş diapazon funksiyaları. Bədəndə mövcudluğu sayəsində aşağıdakı proseslər baş verir:

• Kollagen və elastin sintezi proseslərinin aktivləşdirilməsi.
• Qan damarlarının əmələ gəlməsi.
• İmmunitet sistemi hüceyrələrini bakteriyalara və yad hissəciklərə yönəldir.
• Dokuların böyüməsinin sürətləndirilməsi.
• Hüceyrə artımının artması.
• Zədələnmiş dəri sahələrinin sağalması.
• Bir sıra zülalların istehsalı (proteoqlikan, laminin və başqaları).

Yaşla bağlı dəyişikliklərin səbəbləri

Dərinin gəncliyi kollagen və elastinin istehsalının tsiklik prosesi ilə müəyyən edilir, sonradan onların tərkib hissələrinə parçalanır və fibroblastlar onları yenidən istehsal etmək üçün istifadə olunur. Zamanla, sonuncular öz fəaliyyətini azaldır, kollagen və elastin lifləri istehsal etməyi dayandırır və nəticədə dərinin qocalmasına səbəb olur.

Yaşla bağlı dəyişikliklər 28-30 yaşlarında görünməyə başlayır. Onlar elastikliyin itirilməsi və ptozisin inkişafı, dəri rənginin dəyişməsi, quruluğun artması, qırışların yaranması ilə ifadə olunur. Və bütün bunlar hər on ildən bir fibroblastların 10% azalması ilə əlaqədardır. orijinal nömrə.

Fibroblastların doldurulması

Beləliklə, qocalmanı yavaşlatmaq və gəncliyi bərpa etmək üçün fibroblastları bərpa etmək lazımdır. Ən müasir kosmetik üsullar yalnız kollagen liflərinin sintezinin müvəqqəti sürətləndirilməsinə gətirib çıxarır, lakin hüceyrələrin özlərini artırmır. Uzun müddət bunun sadəcə qeyri-mümkün olduğu ümumiyyətlə qəbul edildi.

Hal-hazırda elm irəliyə doğru böyük addımlar atıb və fibroblastların bərpası artıq fantaziya deyil. Bu prosedur SPRS terapiyası adlanır və ABŞ-da, Avropa ölkələrində və daha yaxınlarda Rusiyada geniş şəkildə tətbiq olunur.

SPRS terapiyası: xüsusiyyətləri və icra prinsipi

Fibroblastların bərpası asan deyil, kompleks inyeksiya prosedurundan keçmək lazımdır. Onun həyata keçirilməsinin nəticələri dərinin qalınlaşması və elastikliyinin artması, ptozisin qarşısının alınması və azalmasıdır. Qırışlar da azalır, piqmentasiya yox olur və çapıqlar hamarlanır.

Terapiya aurikülün arxasında yerləşən dəridən xəstənin hüceyrələrinin toplanması ilə başlayır. Alınan nümunə biomaterial adlanan diaqnostika və tədqiqat üçün istifadə olunur. Müalicə rejimini inkişaf etdirmək və fibroblastları süni şəkildə yenidən yaratmaq üçün istifadə olunur, sonradan inyeksiyalardan istifadə edərək dəriyə enjekte edilir.

Xəstə biomateriallarından yetişdirilən hüceyrələr bədən tərəfindən rədd edilmir. Transplantasiyadan sonra onlar bir il yarım aktiv olaraq qalırlar, bu müddət ərzində dəri vəziyyəti yaxşılaşır.

Xroniki xəstəliklərin, soyuqdəymələrin, viral infeksiyaların kəskinləşməsi zamanı fibroblastların inyeksiya yolu ilə tətbiqi tövsiyə edilmir. yüksəlmiş temperatur orqanlar. Əks göstərişlər arasında immun çatışmazlığı, bədxassəli formasiyalar, infeksiyalar və xroniki xəstəliklər V kəskin mərhələ. Prosedurdan əvvəl fərdi əks göstərişləri müəyyən etmək üçün bir mütəxəssislə ilkin məsləhətləşmə tələb olunur.

Prosedur bir saatdan çox çəkmir və 5 ilə 7 həftəlik fasilə ilə 2 seans kursunda aparılır. Enjeksiyondan əvvəl lokal anesteziya tələb olunur.

Fibroblastların tətbiqi bahalı bir zövqdür. Tam çeşid biomaterialların toplanması, saxlanması, tədqiqi və idarəsi daxil olmaqla xidmətlər təxminən 400.000 rubl qiymətləndirilir.

Video: SPRS terapiyasının aparılması

Fibroblastlar kollagen və elastin istehsalını təmin edən birləşdirici toxuma hüceyrələridir, buna görə də dərimizin gəncliyini qoruyur. Zamanla bədəndəki onların sayı durmadan azalır, buna görə yaşa bağlı dəyişikliklərin xarici əlamətləri görünür. Fibroblastların sayının bərpası süni şəkildə böyüdülmüş hüceyrələrə əsaslanan inyeksiya texnikasından istifadə etməklə həyata keçirilir.

Fibroblastlar- hüceyrələrarası maddənin komponentlərini istehsal edən boş birləşdirici toxumanın aparıcı hüceyrələri. Bunlar təqribən 20 mikron ölçüdə budaqlanmış, milşəkilli və ya yayılmış hüceyrələrdir. Daxili metabolik mühitin orqanoidləri onlarda yaxşı inkişaf etmişdir. Fibroblast nüvəsi oval formadadır, bərabər dağılmış xromatin və 2-3 nüvəcikdən ibarətdir. Sitoplazma aydın şəkildə intensiv boyanmış endoplazmaya və zəif boyanmış ektoplazmaya bölünür. Fibroblastların (xüsusilə gənclərin) sitoplazması bazofildir. O, 10-30 qranuldan ibarət zəncir şəklində membranlara birləşmiş çoxlu sayda ribosomları olan yaxşı inkişaf etmiş endoplazmatik retikulumu aşkar edir. Qranulyar endoplazmatik retikulumun bu ultrastrukturu "ixrac üçün" zülal sintez edən hüceyrələr üçün xarakterikdir. Çoxsaylı sərbəst ribosomlar və yaxşı inkişaf etmiş Qolji kompleksi də var. Mitoxondrilər böyükdür, onların sayı azdır. Sitokimyəvi üsullar fibroblastların sitoplazmasında qlikolitik fermentlərin və lizosomların hidrolitik fermentlərinin (xüsusilə kollagenaza) olduğunu göstərmişdir. Mitoxondriyanın oksidləşdirici fermentləri daha az aktivdir.

Hüceyrənin əzələ-skelet sistemi kulturada onların hərəkətliliyini, formasının dəyişməsini, substrata yapışmasını, hüceyrənin bağlandığı plyonkanın mexaniki gərginliyini təmin edir. Hüceyrə səthində çoxlu mikrovilli və vezikulyar çıxıntılar var. Maye mühitdə asılmış fibroblastlar sferik formaya malikdir. Fibroblast, psevdopodiya səbəbindən hərəkət etdiyi möhkəm bir səthə yapışdıqdan sonra yayılır.

Fibroblastların əsas funksiyası- birləşdirici toxumanın hüceyrələrarası maddəsinin komponentlərini yaratmaq üçün istifadə olunan zülalların və qlikozaminoqlikanların sintezi və ifrazı, həmçinin koloniya stimullaşdırıcı amillərin (qranulositlər, makrofaqlar) istehsalı və ifrazı. Fibroblastlar uzun müddətəçoxalma qabiliyyətini saxlayır. İnkişaf dövrünü tamamlamış fibroblastlara fibrositlər deyilir. Bunlar uzunömürlü hüceyrələrdir. Hüceyrə sitoplazması orqanoidlərlə tükənir, hüceyrə yastılaşır və proliferativ potensialı azalır. Bununla belə, hüceyrə tənzimləmədə iştirak etmək qabiliyyətini itirmir metabolik proseslər parçada.

Hüceyrələrarası maddə. Fibrilyar və əsas (amorf) komponentlərdən ibarətdir. İşarələnmiş amin turşularının (3H-prolin, 3H-glisin və s.) tətbiqi ilə histoautorradioqrafiya üsullarından istifadə edərək, zülal molekullarının fibroblast polisomlarında sintez olunduğu müəyyən edilmişdir. Fibroblastlar eyni vaxtda bir neçə növ spesifik zülal və qlikozaminoqlikan sintez edə bilir. Kollagen zülalının sintezi üçün C vitamininin olması vacibdir, onun çatışmazlığı ilə kollagenogenez kəskin şəkildə inhibə olunur. Hüceyrələrarası maddələrin sintezi oksigen konsentrasiyasının azalması şəraitində daha intensiv şəkildə baş verir. Kollagen sintezi ilə eyni vaxtda fibroblast, vaxtından əvvəl toxuma sklerozunun qarşısını alan kollagenaza fermentindən istifadə edərək bu zülalın təxminən 2/3 hissəsini məhv edir.

Prokollagen molekullarının sintezi ekzositoz yolu ilə fibroblastların səthinə çıxarılır. Bu zaman zülal həll olunan formadan həll olunmayana - tropokollagenə keçir. Tropokollagen molekullarının supramolekulyar strukturlara - kollagen fibrillərinə birləşməsi hüceyrənin ifraz etdiyi xüsusi maddələrin təsiri nəticəsində hüceyrə səthinin bilavasitə yaxınlığında baş verir. Xüsusilə, fibroblastların səthində yapışqan və digər funksiyaları yerinə yetirən fibronektin zülal aşkar edilmişdir. Fibrilogenezin sonrakı mərhələləri əvvəllər əmələ gələn fibrillərdə tropokollagenin polimerləşməsi və aqreqasiyası ilə baş verir. Bu vəziyyətdə kollagen liflərinin yetişməsi fibroblastlarla birbaşa əlaqə olmadan baş verə bilər.
Qlikozaminoqlikanlar kollagenin formalaşmasının tənzimləyiciləridir və hüceyrələrarası maddənin əsas (amorf) komponentinin bir hissəsidir.

Fibrilyar komponent Boş birləşdirici toxumanın hüceyrələrarası maddəsinə üç növ lif daxildir - kollagen, elastik və retikulyar. Bənzər bir formalaşma mexanizminə malikdirlər, lakin bir-birlərindən fərqlənirlər kimyəvi birləşmə, ultrastruktur və fiziki xassələri. Kollagen zülalı onun amin turşusu tərkibi və kollagen molekulunda amin turşularının ardıcıllığı ilə müəyyən edilir. Polipeptid zəncirindəki amin turşularının dəyişməsindən, immun xüsusiyyətlərindən, molekulyar çəkisindən və s. asılı olaraq, orqanların birləşdirici toxumasının bir hissəsi olan 14 və daha çox növ kollagen zülalları fərqlənir. Onların hamısı kollagenin 4 əsas növünü və ya sinfini təşkil edir.

Tip 1 kollagen birləşdirici və tapılır sümük toxuması, həmçinin gözün sklera və buynuz qişasında; II tip - qığırdaqlı toxumalarda; III tip - qan damarlarının divarında, fetus dərisinin birləşdirici toxumasında; IV-ro növü - zirzəmi membranlarında.

Fibroblastlar(fibroblastositlər) (latınca fibra - lif, yunanca blastos - cücərti, cücərti) - hüceyrələrarası maddənin komponentlərini sintez edən hüceyrələr: zülallar (məsələn, kollagen, elastin), proteoqlikanlar, qlikoproteinlər.

Embrional dövrdə embrionun bir sıra mezenximal hüceyrələri əmələ gəlir fibroblast diferensasiyası, bura daxildir:

· kök hüceyrələri,

yarımgövdəli progenitör hüceyrələr,

· ixtisaslaşmamış fibroblastlar,

fərqli fibroblastlar (yetkin, aktiv fəaliyyət göstərir),

fibrositlər (qəti hüceyrə formaları),

miofibroblastlar və fibroklastlar.

İLƏ əsas funksiyası fibroblastlar əsas maddənin və liflərin əmələ gəlməsi ilə əlaqələndirilir (bu, məsələn, yaraların sağalması zamanı, çapıq toxumasının inkişafı, yad cismin ətrafında birləşdirici toxuma kapsulunun formalaşması zamanı aydın şəkildə özünü göstərir).

Aşağı ixtisaslaşdırılmış fibroblastlar yuvarlaq və ya oval nüvəli və kiçik nüvəli, RNT ilə zəngin olan bazofil sitoplazması olan az işlənmiş hüceyrələrdir. Hüceyrə ölçüsü 20-25 mikrondan çox deyil. Bu hüceyrələrin sitoplazmasında çoxlu sayda sərbəst ribosomlar olur. Endoplazmatik retikulum və mitoxondriya zəif inkişaf etmişdir. Golgi aparatı qısa borular və veziküllərin çoxluqları ilə təmsil olunur.
Sitogenezin bu mərhələsində fibroblastlarda zülal sintezi və ifrazı çox aşağı səviyyədə olur. Bu fibroblastlar mitotik çoxalma qabiliyyətinə malikdir.

Diferensiallaşmış yetkin fibroblastlar daha böyük ölçüdə olur. Bunlar aktiv fəaliyyət göstərən hüceyrələrdir.

Yetkin fibroblastlarda əsas maddənin və liflərin əmələ gəlməsi üçün zəruri olan kollagenin, elastin zülallarının, proteoqlikanların intensiv biosintezi həyata keçirilir. Bu proseslər aşağı oksigen konsentrasiyası şəraitində güclənir. Kollagen biosintezi üçün stimullaşdırıcı amillər də dəmir, mis, xrom, askorbin turşusu. Hidrolitik fermentlərdən biri də kollagenaz- hüceyrə səviyyəsində kollagenin ifrazının intensivliyini tənzimləyən hüceyrələrin daxilində yetişməmiş kollageni parçalayır.

Fibroblastlar hərəkətli hüceyrələrdir. Onların sitoplazmasında, xüsusən periferik təbəqədə aktin və miyozin kimi zülalları olan mikrofilamentlər var. Fibroblastların hərəkəti yalnız fibrilyar strukturları istifadə edərək dəstəkləyənlərə bağlandıqdan sonra mümkün olur fibronektin- fibroblastlar və digər hüceyrələr tərəfindən sintez edilən, hüceyrələrin və hüceyrə olmayan strukturların yapışmasını təmin edən qlikoprotein. Hərəkət zamanı fibroblast düzləşir və səthi 10 dəfə arta bilər.

Fibroblastların plazmalemması müxtəlif tənzimləyici amillərin təsirinə vasitəçilik edən mühüm reseptor zonasıdır. Fibroblastların aktivləşməsi adətən glikogenin yığılması və hidrolitik fermentlərin aktivliyinin artması ilə müşayiət olunur. Glikogen mübadiləsi nəticəsində yaranan enerji polipeptidləri və hüceyrə tərəfindən ifraz olunan digər komponentləri sintez etmək üçün istifadə olunur.

Fibrilyar zülalları sintez etmək qabiliyyətinə əsasən, fibroblast ailəsinə qanyaradıcı orqanların retikulyar birləşdirici toxumasının retikulyar hüceyrələri, həmçinin birləşdirici toxumanın skelet növünün xondroblastları və osteoblastları daxildir.

Fibrositlər- fibroblast inkişafının qəti (son) formaları. Bu hüceyrələr mil şəklindədir pterygoid proseslər. [Onlarda az sayda orqanoidlər, vakuollar, lipidlər və qlikogen var.] Fibrositlərdə kollagenin və digər maddələrin sintezi kəskin şəkildə azalır.

Miyofibroblastlar- təkcə kollageni deyil, həm də əhəmiyyətli miqdarda kontraktil zülalları sintez etmək qabiliyyətini birləşdirən fibroblastlara bənzər hüceyrələr. Fibroblastlar funksional olaraq hamarla oxşar olan miofibroblastlara çevrilə bilər əzələ hüceyrələri, lakin sonuncudan fərqli olaraq yaxşı inkişaf etmiş endoplazmatik retikuluma malikdirlər. Belə hüceyrələr sağalmış yaraların qranulyasiya toxumasında və hamiləlik dövründə uşaqlıq yolunda müşahidə edilir.

Fibroklastlar- yüksək faqositik və hidrolitik aktivliyə malik hüceyrələr, orqan involutioni dövründə (məsələn, hamiləlikdən sonra uşaqlıqda) hüceyrələrarası maddənin "rezorbsiyasında" iştirak edirlər. Onlar fibril əmələ gətirən hüceyrələrin struktur xüsusiyyətlərini (inkişaf etmiş dənəvər endoplazmatik retikulum, Qolci aparatı, nisbətən böyük, lakin az mitoxondriya), həmçinin lizosomları xarakterik hidrolitik fermentlərlə birləşdirir. Onların hüceyrədən kənarda ifraz etdikləri fermentlər kompleksi kollagen liflərinin sementləşdirici maddəsini parçalayır, bundan sonra kollagenin faqositoz və hüceyrədaxili həzmi baş verir.

Lifli birləşdirici toxumanın aşağıdakı hüceyrələri artıq fibroblast diferensiasiyasına aid deyil.

Dəri fibroblastları birləşdirici toxumanın əsasını təşkil edir. Onlar hialuron turşusu, kollagen lifləri və elastin istehsalçılarıdır. Yaşla bağlı dəyişikliklər fibroblastların fəaliyyətini ləngidir, dərinin nazik və solğun olmasına səbəb olur. Mobil sayəsində enjeksiyon texnologiyası bədən müstəqil olaraq dermisin strukturunu cavanlaşdırmaq funksiyasını işə salır.

Fibroblastların mahiyyəti

Dəri fibroblastları- bunlar dermisin birləşdirici toxuma təbəqəsinin hüceyrələridir, sələfləri kök hüceyrələr idi. Onlar iki formada olur:

1. Aktiv - yastı oval formalı nüvə, çoxlu sayda ribosom və proseslərlə təchiz olunmuş böyük hüceyrələr. Onlar intensiv bölünmə, kollagen və digər matris komponentlərinin istehsalı ilə xarakterizə olunur.
2. Qeyri-aktiv (fibrositlər) - hüceyrələr bir qədər kiçikdir və mil şəklindədir. Onlar fibroblastlardan əmələ gəlir və bölünə bilmirlər. Lif sintezində və yaranın bərpasında iştirak edin.

Orqanizm yaşlandıqca fibroblastların sayı azalır və onların fəaliyyəti azalır. Bu, hüceyrələrarası maddələrin sintezinin pisləşməsinə səbəb olur. Bu proses dəridə incəlmə, quruluq, sallanma şəklində əks olunur. Uzanır və qırışlar əmələ gətirir.

Funksiyalar

Fibroblastların əsas funksiyalarından biri hüceyrələrarası maddənin istehsalı və bərpasıdır. Böyümə faktorlarını, hüceyrədənkənar matrisin komponentlərini, fermentləri meydana gətirərək, kollagenin və hialuron turşusunun məhvinə və yeni sintezinə kömək edirlər. Fasiləsiz proses sayəsində hüceyrələrarası maddə yenilənir. Bundan əlavə, onlar hüceyrə böyüməsi faktorlarını istehsal edirlər:

• Əsas odur ki, bütün dermal hüceyrələrin böyüməsi stimullaşdırılır, qoruyucu reaksiyalar üçün fibronektin istehsal olunur;
• Transformasiya edən - kollagen və elastin lifləri sintez olunur, qan damarları əmələ gəlir, immun sisteminin hüceyrələri xarici agentlərə, bakteriyalara yönəldilir;
• Epidermal - toxumaların yayılması, hüceyrə böyüməsi və keratinositlərin daşınması aktivləşdirilir;
• Keratinositlərin böyüməsi epitelizasiyadır, zədələnmə bərpa olunur.

Fibroblast böyümə faktorları mitogenlər olan çoxfunksiyalı zülallarla təmsil olunur və həmçinin endokrin, tənzimləyici, struktur funksiyası. Fibroblastlar sayəsində dəri üçün vacib olan zülallar istehsal olunur: proteoqlikanlar, tinassin, nidogen və laminin.

Texnikanın mahiyyəti

SPRS terapiyası dərinin qocalmasının səbəbini aradan qaldıran fibroblastlardan istifadə edərək dərinin inyeksiya ilə cavanlaşdırılması üsuludur. Avtofibroblastların dəridaxili transplantasiyası texnologiyasının patenti Amerikanın FibrocellScience şirkətinə məxsusdur. Hüceyrə texnologiyası vasitəsilə insan dərisinin hissəciklərindən (biopsiya) fibroblastlar yetişdirmək mümkün olub. Öz biomaterialı toxuma uyğunluğu problemini və infeksiya riskini aradan qaldırır. Otoloji hüceyrələr müsbət qəbul edilir immun sistemi və tam fəaliyyət göstərə bilirlər.

Nümunə istənilən yaşda götürülə bilər, lakin gənc olanda bunu etmək daha yaxşıdır. Tövsiyə olunan yaş həddi 20-30 yaş arasıdır. İstənilən əməliyyat zamanı dərinin bir hissəsini saxlaya və ondan təcrid olunmuş hüceyrələri uzun illər kriogen anbarda yerləşdirə bilərsiniz. -196 dərəcə temperatur onları həyat boyu saxlamağa, lazım olduqda istifadə etməyə imkan verir. Bu, istənilən vaxt effektiv kosmetik prosedurları həyata keçirməyə imkan verəcəkdir.

Öz fibroblastları, kök hüceyrələrlə birlikdə qocalma zamanı potensialı saxlamaq xüsusiyyətinə malikdir. Altında yerli anesteziya Xəstədən qulaq, göbək və ya ön kol nahiyəsinin arxasından kiçik bir dəri nümunəsi götürülür. Bu ərazilər ultrabənövşəyi radiasiyaya ən az məruz qalır. Onun ölçüsü təxminən 4 mm-dir. Ondan təcrid olunmuş fibroblastlar xüsusi flakonlara yerləşdirilir.

Onlar fetal zərdablı mühitdə becərildikdə gənc hüceyrələrdə çoxalma qabiliyyəti stimullaşdırılır, köhnələri isə yuyulur. Mədəniyyətin “cavanlaşması” var. Bir aydan sonra hüceyrələrin sayı bir neçə min dəfə artır. Yenidən aktivləşdirildikdən sonra hüceyrə mədəniyyəti xəstəyə köçürülür və dermi aktiv şəkildə doldurur. Bir ay yarımdan sonra çoxalmış fibroblastlar xəstənin üz dərisinə, o cümlədən göz ətrafına, həmçinin boyun, dekolte və qollara yeridilir.

Prosedur

Kurs 3-5 seansdan ibarətdir, aralarındakı intervallar 3 ilə 6 həftə arasında dəyişir. Prosedurun mərhələləri:

• mövcud əks göstərişləri müəyyən etmək üçün xəstənin müayinəsi;
• material götürmək;
• fibroblast becərilməsi;
• iki üsuldan istifadə edərək hüceyrə materialının dəriyə yeridilməsi: tunel - dərin dəri kıvrımlarına, papulyar mezoterapiya;
• krem tətbiq etməklə dərini ultrabənövşəyi radiasiyadan qorumaq.

Xəstələr prosedurun ağrılı olduğunu qeyd edirlər, ona görə də Emla anestezik kremindən istifadə olunur. İstifadə olunan dərmanın miqdarı bir seansda 3 ml-ə qədərdir. Bərpa müddəti 2-3 gün davam edir. Prosedurdan sonra kosmetika tətbiq etmək qadağandır. İki həftə ərzində sauna və ya hamamı ziyarət etməkdən çəkinməlisiniz. Dərini yüksək qoruma dərəcəsi olan kremlə yağlayaraq günəşdən qorunmalıdır. Proseduru ildə bir dəfə təkrarlamaq tövsiyə olunur. Nəticə bir neçə ay ərzində üz dərisinin vəziyyətində yaxşılaşmadır.

Metodun effektivliyi və üstünlükləri

Fibroblastlarla cavanlaşma 1,5 və ya 2 aydan sonra ilk nəticəni verir. Tam effekt Prosedurun təsiri altı aydan sonra görünür və 2-3 il davam edir. Böyümə faktorlarının və hüceyrədənkənar matrisin gücləndirilmiş istehsalı başlayır. Fibroblastlar dövrün təbii fazalarından keçir: aktivləşir, elastin, kollagen və digər maddələri sintez edir, sonra deqradasiya mərhələsi başlayır, onları yeni fibroblastlarla əvəz edir.

Onların istifadəsi tibbdə geniş yayılmışdır - yanıqlara qarşı, toxumaların bərpası zamanı trofik xoralar, yaralar Onların kosmetologiyada əhəmiyyəti böyükdür. Dərinin gəncliyi fibroblastların sayına görə formalaşır. Dermisdə yerləşdirilən fibroblastlar toxumalara daxil olur və kollagen və elastin istehsalına başlayır. Nəticədə dəri elastik olur, bərabər rəng alır, incə qırışlar yox olur.

Ancaq prosedurdan sıxıcı bir təsir gözləməməlisiniz. Bu texnika dərinin keyfiyyət xüsusiyyətlərini yaxşılaşdırmaq məqsədi daşıyır. SPRS terapiyasının əsas üstünlükləri:

• dərman dərinin ilkin strukturunun pozulmasını aradan qaldıran genlərlə işləyir;
• təbii cavanlaşma prosesləri aktivləşdirilir;
• təhlükəsizlik, rədd edilmə riski yoxdur, allergik reaksiya;
• nəticənin uzunmüddətli qorunması.

6 ay ərzində göz ətrafındakı qırışlar 90% hamarlanır. Dekolte və boyun 95%, yanaqlar 87% cavan görünür. Ağız ətrafındakı qıvrımlar 55% azalır.

Əks göstərişlər

Tam təhlükəsizliyə baxmayaraq, prosedur bir sıra əks göstərişlərə malikdir:

• hamiləlik, laktasiya dövrü;
• qan laxtalanmasının pozulması;
• bədxassəli neoplazmalar;
• otoimmün xəstəliklər;
• çapıq meydana gəlməsinə meyl;
• ARVI;
• dəridə iltihab.

Seansdan sonrakı gün ərzində dəridə qızartı və mikrohematomalar müşahidə oluna bilər. Ertəsi gün simptomlar yox olur.

Autofibroblast transplantasiyası texnologiyası Roszdravnadzordan rəsmi icazəyə malikdir. Onun təhlükəsizliyi hüceyrə canlılığının laboratoriya monitorinqi ilə təsdiqlənir.

RU 2536992 patentinin sahibləri:

İxtira biotexnologiya sahəsinə, xüsusən də hüceyrə texnologiyalarına aiddir və tibbdə istifadə oluna bilər. Metod, M-20 xəttinin diploid hüceyrələrinin adını daşıyan IPVE-nin kriyobankından miqyaslamağı əhatə edir. M.P. Chumakov Rusiya Tibb Elmləri Akademiyası 16-cı keçidin işçi hüceyrələrinin bankını əldə etmək üçün 7-ci keçidin toxum hüceyrə bankının ampulasından. Bu halda, terapevtik və/və ya diaqnostik məqsədlər üçün istifadə üçün yararlı olan 20-33 keçidli hüceyrələr, tərkibində trombositlərdən qaynaqlanan böyümə faktoru PDGF olan şəxsin 10% fibrinolitik aktiv plazma (FAP) olan qida mühitində kultivasiya yolu ilə əldə edilir. konsentrasiyası 155-342 pg/ml. İxtira diploid insan fibroblast hüceyrələrinin proliferativ aktivliyini artırmağa imkan verir. 1 maaş fayl, 2 cədvəl.

İxtira biotexnologiyaya, immunologiyaya, təbabətə, xüsusən də diploid insan fibroblast hüceyrələrinin proliferativ xüsusiyyətlərinin artırılması metoduna aiddir, bu cür hüceyrələrin terapevtik və diaqnostik məqsədlər üçün istifadəsi, o cümlədən insan interferonlarının antiviral aktivliyinin müəyyən edilməsi, hüceyrələrin dəyişdirilməsi üçün terapiya.

İnsan diploid hüceyrə xətləri (HDCL) keçidlər zamanı sabit bioloji və genetik xüsusiyyətləri saxlamaq qabiliyyətinə görə bütün məlum hüceyrə mədəniyyətləri növlərinə nisbətən danılmaz üstünlüklərə malikdir. Peyvəndlərin istehsalı üçün nəzərdə tutulan LDCC-nin sertifikatlaşdırılması Ümumdünya Səhiyyə Təşkilatı tərəfindən hazırlanmış vahid tələblərə uyğun olaraq həyata keçirilir. Bu tövsiyələr adına Klinik Yoluxucu Xəstəliklər Dövlət Elmi-Tədqiqat İnstitutu tərəfindən hazırlanmış LDKCH peyvəndinin sertifikatlaşdırılması üçün milli meyarlar üçün əsas götürülür. L.A. Taraseviç və SSRİ Səhiyyə Nazirliyi [ Təlimatlar“Davamlı hüceyrə xətlərinin sertifikatlaşdırılması - tibbi istehsalı və nəzarəti üçün substratlar immunobioloji preparatlar» RD-42-28-10-89. SSRİ Səhiyyə Nazirliyi. M., 1989. - S. 16]. İnsan diploid hüceyrələrinin sertifikatlaşdırılmış xətti məhdud ömrünə malikdir və sabit bioloji, mədəni və genetik xüsusiyyətlərə malikdir, çirkləndiricilərdən (bakteriyalar, göbələklər, mikoplazmalar, viruslar) təmizdir və immunosupressiv heyvanlarda şiş əmələ gəlməsinə səbəb olmur. Diploid hüceyrə xətti ən azı 200 kriovialdan ibarət erkən keçid səviyyələrində (10-cu keçidə qədər) sertifikatlaşdırılmış toxum hüceyrə bankına malik olmalıdır. Toxum hüceyrələrini bir və ya bir neçə kriyovialdan 16-cı keçid səviyyəsinə keçirərək, istehsal və ya istehsal üçün lazımi istehsalçı kulturaları əldə edə bilən işləyən hüceyrə bankı əldə edilir. tədqiqat işi. Rusiyada və xaricdə sadalanan tələblərə uyğun olaraq sertifikatlaşdırılmış insan diploid hüceyrələrinin (Wi-38, MRC-5, M-22 və s.) yalnız bir neçə xətti var. Sertifikatlı LDCV-lər poliomielit, qızılca, məxmərək, quduzluq, tənəffüs yoluxucu xəstəliklərə qarşı peyvəndlərin istehsalında istifadə olunur. sitomeqalovirus infeksiyaları, həmçinin interferon [T.K. Borisova, L.L. Mironova, O.I. Konyuşko, V.D. Popova, V.P. Qraçov, N.R. Şuxmina, V.V. Zverev. İnsan diploid hüceyrələrinin yerli suşları vaksinlərin istehsalı üçün substratdır. Tibbi virusologiya. Materiallar elmi-praktik konfrans « Aktual problemlər tibbi virusologiya, M.P.-nin 100 illiyinə həsr olunmuş. Çumakov." M. 2009. XXVI cild. səh. 305-307; L.L. Mironova, V.D. Popova, O.I. Konyuşko. Transplantasiya edilə bilən hüceyrələrin orijinal xətləri bankının yaradılması və onların virusoloji praktikada istifadəsi təcrübəsi. Biotexnologiya. 2000, səh. 41-47]. LDCN virus infeksiyalarının diaqnostikası və toksiklik təhlili üçün in vitro geniş şəkildə istifadə olunur müxtəlif dərmanlar və əvəzedici terapiya üçün məhsullar [RF Patenti No 2373944, 23.06.2008. Müalicə üsulu yanıq yarası. A.S. Ermolov, S.V. Smirnov, V.B. Xvatov, L.L. Mironov; S.V. Smirnov, V.B. Hvatov. İnnovativ texnologiyalar adına Elmi-Təcili Tibbi Yardım İnstitutunda yanıqların lokal müalicəsi. N.V. Sklifosovski. Kitabda: Yeni İqtisadiyyat. Rusiyanın yenilikçi portreti. M., Strateji Tərəfdaşlıq Mərkəzi, 2009. s.388-390].

IPVE-də im. M.P. Chumakov RAMS 20-ci əsrin 80-ci illərində, 8-10 həftəlik insan embrionlarının dəri və əzələlərindən bir neçə diploid hüceyrə xətti quruldu. Bu iş diaqnostik məqsədlər üçün insan diploid hüceyrələrinin istehsalını dəyişdirməyə və hüceyrə əvəzedici terapiyaya, yəni artan proliferativ xüsusiyyətlərə malik diploid insan fibroblast hüceyrələrinin istehsalına həsr edilmişdir.

Prototip. RF Patenti No 1440029 22 mart 1993-cü il [Mironova L.L., Preobrazhenskaya N.K., Solovyova M.N., Orlova T.G. Stobetsky V.I., Kryuchkova G.P., Karmysheva V.Ya., Kudinova S.I., Popova V.D., Alpatova G.A. IPVE və NIIEiM im. N.F. Qamaleya. İnsan interferonlarının antiviral aktivliyini və virusun yayılmasını təyin etmək üçün test sistemi kimi istifadə edilən diploid insan embrion dəri və əzələ hüceyrələrinin ştammı].

Bu LDCC ştammı M-21 olaraq təyin edilmişdir, lakin M-21 fibroblast mədəniyyəti qeyri-kafi proliferativ aktivliyə malik idi, bu da monolayerin əmələ gəlməsi vaxtını azaldıb, hüceyrə və materialların istehlakını artırdı və bu, son nəticədə onun ehtiyatlarının tam tükənməsinə səbəb oldu. Nəticədə insan interferonlarının virus əleyhinə fəaliyyətini təyin etmək üçün və digər tibbi-bioloji məqsədlər üçün uyğun olan, daha qənaətcil, yüksək proliferativ aktivliyi ilə seçilən, toxum və işçi hüceyrə banklarına malik yeni hüceyrə xəttinə ehtiyac yarandı. Bu xətt M-20 təyin edilmişdir. 7-ci keçid səviyyəsində toxum hüceyrə bankı hazırlanmışdır. 2012-ci ildə 7-ci keçid bankının ampulasından 16-cı keçid səviyyəsində işləyən hüceyrələr bankı hazırlanmışdır. adına Gəmilər və Eksperimental Fizika İnstitutunda 7 və 16-cı səviyyəli keçidlərdə toxum və işçi hüceyrələrin bankları saxlanılır. M.P. Chumakov RAMS və hər ikisini təmin etməyə imkan verir istehsal prosesləri, və elmi tədqiqat.

Hazırkı ixtira ilə ən yaxın analoq (prototip) arasındakı fərq 10% fibrinolitik aktiv plazmadan (FAP) istifadə edərkən M-20 hüceyrələrinin proliferativ aktivliyinin artmasıdır.

Belə ki, ixtiranın obyekti adına IPVE-nin kriobankından hüceyrələrin becərilməsi yolu ilə tibbi və bioloji məqsədlər üçün diploid insan fibroblast hüceyrələrinin proliferativ xüsusiyyətlərinin artırılması üsuludur. M.P. Çumakov Rusiya Tibb Elmləri Akademiyası, burada xarakterik M-20 xəttinin diploid hüceyrələri istifadə olunur, 7-ci keçidin toxum hüceyrələri bankının ampulasından və hüceyrələrlə 16-cı keçidin işçi hüceyrələri bankının ampulasından alınır. terapevtik və/və ya diaqnostik məqsədlər üçün istifadə üçün yararlı olan keçidlərin 20-33, insanın 10% fibrinolitik aktiv plazma (FAP) olan qida mühitində becərilməsi ilə əldə edilir. Hüceyrələrin becərilməsi zamanı 10% FAP tərkibli DMEM qidalandırıcı mühitdən istifadə edilir.

Yuxarıda göstərilən üsulla əldə edilən xarakterik M-20 xəttinin insan diploid hüceyrələri yüksək proliferativ aktivliyə malikdir və terapevtik və/yaxud diaqnostik məqsədlər üçün istifadəyə yararlıdır.

Metodun həyata keçirilməsi sxemi:

1. adına İPVE-nin 7-ci keçidinin toxum hüceyrələrinin bankından bir kriovial istifadə olunur. M.P. Çumakova RAMS

2. adına İPVE-nin 16-cı keçidi səviyyəsində işçi hüceyrələr bankının hazırlanması. M.P. Çumakova RAMS

3. M-20 xəttinin fibroblastlarının 16-cı keçidin işçi hüceyrələrinin bankından bərpası (Rusiya Tibb Elmləri Akademiyası M.P.Çumakov adına İPVE).

4. Fibroblastların M-20 xəttinin monolaylı mədəniyyətinin alınması, keçid 17.

5. Kriokonservasiya prosesi zamanı mümkün DNT zədələnməsini bərpa etmək üçün M-20 xəttinin fibroblastlarının bioloji xüsusiyyətlərinin üçqat keçidlə (20-ci keçid daxil olmaqla) bərpası.

6. 10% fibrinolitik aktiv plazma (PDGF tərkibi 155-dən 342 pq/ml-ə qədər) olan qidalı mühitdən istifadə etməklə 20-ci keçiddən 33-cü keçidə qədər M-20 xəttinin fibroblastlarının təkrarlanması yolu ilə diaqnostik məqsədlər və hüceyrə əvəzedici terapiya üçün hüceyrə kulturalarının əldə edilməsi.

Təklif olunan üsul yüksək proliferativ aktivliyə malik və diaqnostik və/yaxud istifadəyə yararlı hüceyrələrin istehsalını təmin edir. dərman məqsədləri.

Bu texniki nəticə böyümə stimullaşdırıcı təsirə malik olan və hüceyrə kulturasının proliferativ aktivliyini gücləndirən 10% fibrinolitik aktiv plazmanın (FAP) əlavə edilməsi ilə qida mühitində M-20 xəttinin insan fibroblastlarının becərilməsi ilə əldə edilir.

FAP kliniki olaraq istifadə olunan transfuzion mühitdir, ölümdən sonra ilk 6 saat ərzində miokard infarktı, kəskin ürək çatışmazlığı, beyin qanaması nəticəsində qəflətən vəfat etmiş insanların qanından alınır [SSRİ Səhiyyə Nazirliyinin iyun 482 saylı əmri. 14, 1972-ci il “Terapevtik-profilaktika müəssisələrinin və klinikaların meyit toxumaları ilə təminatının yaxşılaşdırılması haqqında; sümük iliyi və qan"]. Postmortem qan, bir sıra bioloji xüsusiyyətlərə malik olan tam transfuziya mühitidir - ilk növbədə fibrinolitik potensialın artması. Bununla əlaqədar olaraq, postmortem qan fibrinolizi adlandırmaq da təklif olunur. Postmortem qanköçürmə üçün əsas göstəricilər: kəskin qan itkisi, şok, müxtəlif mənşəli anemiya, yanıq zədəsi, zamanı metabolik əvəzetmə ekzogen zəhərlənmə, cərrahiyyədə ekstrakorporeal dövriyyədən istifadə edərkən AİK-nin doldurulması [E.G. Tsurinova. Fibrinoliz qanının köçürülməsi. M., 1960, 159 s.; S.V. Rıjkov. Fibrinoliz qanının yığılma vaxtından və ölüm səbəbindən asılı olaraq hazırlanması və istifadə imkanları. Müəllifin xülasəsi. dok. diss. L., 1968, 21 s.; G.A. Pafomov. Qəfil ölənlərin qanının bioloji xüsusiyyətləri və cərrahi praktikada istifadəsi. Diss. dok. bal. Sci. M., 1971, 355 s.; K.S. Simonyan, K.P. Qutiontova, E.G. Tsurinova. Transfuziologiya aspektində ölümdən sonrakı qan. M., Tibb, 1975, 271 s.]. Hal-hazırda, postmortem qan komponentləri istifadə olunur: fibrinolitik aktiv plazma, qırmızı qan hüceyrəsi kütləsi, leykosit kütləsi, trombosit kütləsi [G.Ya. Levin. Hemokoaqulyasiya xüsusiyyətləri və klinik tətbiqi meyit qanının plazma və trombositləri. Müəllifin xülasəsi. dok. diss. M., 1978, 31 s.; V.B. Hvatov. Qəfil ölən insanların qan plazmasından fibrinolitik və antiprotenaz təsirli preparatlar. Diss. dok. Med Elmləri, 1984, 417 s.; V.B. Xvatov Plazmakinaz - postmortem plazmadan yeni trombolitik preparat In: Tromboz və tromboliz edd. E.İ. Çazov, V.V. Smirnov). Məsləhətçilər Bürosu, N.Y., L, 1986, s. 283-310; V.B. Hvatov. Ölümdən sonra qandan istifadənin tibbi və bioloji aspektləri. SSRİ Tibb Elmləri Akademiyasının bülleteni, 1991, 9. s. 18-24; V.B. Hvatov. Meyit qanı - məsələnin tarixi və hazırkı vəziyyəti. Problem hematol. və daşqın. qan, 1997, 1. S. 51-59]. Orqan donorlarından alınan meyit qanının komponentləri də kliniki istifadəyə verilmişdir [20 dekabr 2001-ci il tarixli, 460 nömrəli “Beyin ölümü diaqnozu əsasında şəxsin ölümünün müəyyən edilməsi haqqında Təlimat”a əsasən ürəyi döyünən vəfat etmiş şəxs, Ədliyyə Nazirliyinin 17 yanvar 2002-ci il tarixli, 3170 nömrəli qeydiyyatı] . Orqanların, toxumaların və hüceyrələrin transplantasiyası Rusiya Federasiyasının "İnsan orqanlarının və (və ya) toxumalarının transplantasiyası haqqında" Qanununa uyğun olaraq həyata keçirilir - dəyişikliklər. Federal qanunlar 20 iyun 2000-ci il tarixli, 91-F3 nömrəli, 16 oktyabr 2006-cı il tarixli, 160-F3 nömrəli; V.B. Xvatov, S.V. Juravel, V.A. Quliyev, E.N. Kobzeva, M.S. Makarov. Orqan donorlarının qanının hüceyrə komponentlərinin bioloji faydalılığı və funksional fəaliyyəti. Transplantologiya, 2011, 4, s. 13-19; Xubutiya M.Ş., Xvatov V.B., Qulyayev V.A. s. Transplantasiya zamanı qlobular qan həcmini və immunomodulyator təsirləri kompensasiya etmək üsulu. RF patenti ixtira No 2452519, nəşr. 06/10/2012, bülleten. № 16].

Fibrinolitik aktiv plazma qəfil dünyasını dəyişən insanların qanından fibrinolitik aktiv xüsusiyyətlərini qorumaq üçün qoruyucu Qlyugitsir (qan: qoruyucu nisbət 4:1) ilə hazırlanır. Plazmanın qanın hüceyrə elementlərindən ayrılması steril qutuda bütün aseptik və antiseptik qaydalarına riayət etməklə aparılır və konservləşdirilmiş donor qanından donor plazmasının alınmasına bənzəyir. FAP-ın cərrahiyyə və travmatologiyada klinik istifadəsi yaraların sağalmasını stimullaşdıran təsirini aşkar etdi [I.Yu. Klyukvin, M.V. Zvezdina, V.B. Xvətov, F.A. Burdyga. Dişləmə yaralarının müalicəsi üsulu. Rusiya Federasiyasının ixtira patenti No 2372927, nəşriyyat, 20 noyabr 2009-cu il, bülleten. № 32]. Biz bu təsiri aktivləşdirilmiş trombositlər tərəfindən ifraz olunan FAP-da böyümə stimullaşdırıcı amillərin olması ilə əlaqələndirdik. Biz sonradan FAP-da trombositdən əldə edilən böyümə faktorunu (PDGF) müəyyən etdik. FAP-ın insan hüceyrə mədəniyyətində böyümə stimullaşdırıcı təsiri xüsusi tədqiqatlarda göstərilmişdir. 10% konsentrasiyada tədqiq edilmiş FAP nümunələri məlum sayda hüceyrə olan M-20 xəttinin insan fibroblastlarının hüceyrə suspenziyasına əlavə edildi və 10 ml əldə edilən qarışıq böyümə səthi sahəsi olan mədəniyyət kolbalarına yerləşdirildi. 25 sm 2. Hüceyrələr 3-4 gün ərzində 5% CO 2 atmosferində və 37°C temperaturda yetişdirildi. 3 qat keçiddən sonra böyüdülmüş hüceyrələr Fuchs-Rosenthal kamerasında sayılır və yetişdirilən hüceyrələrin sayının əkilmiş hüceyrələrin sayına nisbəti müəyyən edilir - yayılma indeksi (cədvəl 1-də).

Aparılan təcrübələrdən belə çıxır ki, FAP-ın böyümə xüsusiyyətləri yüksək proliferativ aktivliyi təmin edir və dölün iribuynuzlu zərdabından fərqlənmir. Üstəlik, FAP insan trombositlərinin böyümə faktorlarını ehtiva edir, yəni. allogen tip, fetal iribuynuzlu serumdan fərqli olaraq - ksenogen tip. Bu fakt əvəzedici terapiya zamanı hüceyrə transplantasiyası üçün həlledicidir. Qeyd edək ki, M-20 hüceyrə mədəniyyətinə böyümə stimullaşdırıcı təsir, xüsusən də 155-342 pg/ml konsentrasiyada FAP-da PDGF-nin olması ilə bağlıdır. Bu məlumatlar R&D Systems-dən Qantikine, Human PDGF-BB immunoassay dəsti və Thermo-dan Multiskan Ascent sistemindən istifadə etməklə əldə edilmişdir. FAP-da PDGF-BB konsentrasiyası onun qan serumundakı tərkibinə bənzəyir. Belə ki, qan donorlarının və müayinə olunan xəstələrin zərdabında PDGF miqdarı 110-880 pq/l, orta hesabla 244 pq/ml, plazmada isə PDGF miqdarı 0-2 pq/ml arasında dəyişmişdir.

Təklif olunan texniki həlli daha yaxşı başa düşmək üçün "tibbi və bioloji məqsədlər üçün M-20 xəttinin insan diploid hüceyrələrinin istehsalı" üçün aşağıdakı nümunəni təqdim edirik.

M-20 xəttinin hüceyrələri, keçid 16, işçi bankdan çıxarılır. Bunun üçün hüceyrələri olan kriovial maye azotdan çıxarılır və içəriyə yerləşdirilir su hamamı 38°C temperaturda və əridikdən sonra tərkibi 10% FAP (PDGF tərkibi 155-342 pq/ml) olan DMEM qidalı mühiti olan mədəniyyət qabına köçürülür, 1 nisbətində antibiotik gentamisin əlavə edilir. 1 litr qida mühitinə ml 4% məhlul. Bir təbəqə yaratmaq üçün hüceyrələr 4-5 gün ərzində 37°C-də və 5% CO 2-də atmosferdə becərilir. Hüceyrələrin monolayerinin əmələ gəlməsindən sonra kriokonservasiyadan sonra DNT təmiri üçün zəruri olan 3 ardıcıl keçid həyata keçirilir. Sonra hüceyrələr keçid 20-dən 33-cü keçidə qədər təkrarlanır. Bu keçidlərdən alınan hüceyrələr biotibbi məqsədlər üçün nəzərdə tutulub. Yaranan hüceyrə xətti ÜST-nin və adına GNIISiK MIBP-nin tələblərinə uyğun olaraq ətraflı təsvir edilmişdir. L.A. Taraseviç, o cümlədən M-20 hüceyrə xəttinin HLA tiplənməsi, həmçinin onun sitokin spektrinin tədqiqi. M-20 xəttinin və M-22 xəttinin xüsusiyyətlərinin müqayisəli təsvirini təqdim edirik (Cədvəl 2). M 22 xətti (insan diploid fibroblastları) peyvənd substratı kimi lisenziyaya malikdir və istənilən növ tibbi virus peyvəndinin istehsalı üçün təsdiq edilmişdir, həmçinin II-IIIA dərəcəli yanıq yaralarının müalicəsi üçün istifadə olunur [İxtira üçün RF Patenti No. 2373944 , 23/06/2008. Yanıq yarasının müalicəsi üsulu. A.S. Ermolov, S.V. Smirnov, V.B. Xvatov, L.L. Mironova, O.I. Klnyushko, E.A. Jirkova, B.C. Bocharova].

adına IPVE-də M-20 xətti quraşdırılmışdır. M.P. Chumakov RAMS 1986-cı ildə sağlam qadından abort nəticəsində əldə edilən 10 həftəlik insan embrionunun dəri və əzələlərindən. Xərçəng, cinsi yolla keçən xəstəliklər, hepatit və ya vərəm tarixi yox idi; genetik və anadangəlmə xəstəliklər ailədə müşahidə olunmayıb. Hüceyrə mədəniyyəti mühiti DMEM 10% FAP ilə əlavə edilmişdir. Toxum nisbəti həftədə iki dəfə 1: 3-1: 4 7 × 10 4 hüceyrə / ml hüceyrələrin toxum dozası ilə. Hüceyrə monolayeri 1-3 nüvəli və kiçik xromatin yığınları olan oval nüvələri olan yönümlü homogen milşəkilli hüceyrələrdən ibarətdir. IN həyat dövrü Xətti inkişafın 3 mərhələsinə ayırmaq olar: formalaşma 1-3 keçid, aktiv böyümə 4-40 və qocalma 41-52, sonra ölüm baş verir. Xəttin hüceyrələri insan karyotipinə malikdir 2m=46, XY. Xətt yüksək genetik sabitlik ilə xarakterizə olunur: hüceyrələrin 93,3-96,9% -i diploid xromosom dəstinə malikdir, poliploid dəsti olan hüceyrələr 1,6% -dən çox deyil. Boşluqlar, qırılmalar və ya üzük xromosomları müşahidə edilmədi. G-6PDE və LDE izoenzimlərinin zolaqlarının sayı və onların elektroforetik hərəkətliliyi insan eritrositləri üçün olanlarla üst-üstə düşür. G-6FDG yavaş növü. Seçilmiş qida mühitinə səpin zamanı bakteriya, göbələk və ya mikoplazma ilə çirklənmə aşkar edilməmişdir. Bundan əlavə, DNT floroxromları Hochst 33258 və olivomisin ilə boyandıqda mikoplazma ilə çirklənmə aşkar edilməmişdir, həmçinin PCR üsulu. əmziklər və yetkin ağ siçanlar üzərində aparılan təcrübələrdə viruslarla çirklənmə, qvineya donuzları, dovşan və toyuq embrionları, həmçinin homolog və heterolog hüceyrə kulturalarında. Şişin əmələ gəlməsinə nəzarət. Xəttin hüceyrələri immunosupressiyaya məruz qalan heyvanlara tətbiq edildikdə, şişlər əmələ gəlmədi. Heç bir əks transkriptaza aşkar edilmədi. HLA markerləri: Sinif I: A*(02.03)/B*(07.40)/CW*(03.07). II sinif: DRB1*(15.16)/DQB1*(05.06). 20-ci keçid səviyyəsindəki M-20 xəttinin hüceyrələri α-interferon (IFNα) və interleykinlər üçün mRNT istehsal edir: IL1β, 2, 4, 6, 8, 10, 18.

Beləliklə, təklif olunan xətt diploiddir - onun məhdud ömrü var, həyat boyu normal insan hüceyrələrinin karyotipini saxlayır, çirkləndiricilərdən təmizlənir və onkogen potensiala malik deyildir. ÜST-nin tövsiyələrinə və adına GNIISiK MIBP-nin tələblərinə uyğun olaraq təhlükəsizlik baxımından xarakterizə edilmişdir. L.A. Taraseviç. IPVE-də im. M.P. Chumakov RAMS-də istehsal və elmi tədqiqatların bütün ehtiyaclarını ödəyə bilən toxum və işçi hüceyrələrin bankları var. M-20 xəttinin hüceyrələri müxtəlif viruslar tərəfindən infeksiyaya həssasdır. Bundan əlavə, M-20 xəttinin sitokin spektri tədqiq edilmişdir. Hüceyrələrin sitokin spektri haqqında biliklər xəstələrin interferon vəziyyətini təyin edərkən nəticələri daha dəqiq qiymətləndirməyə və terapevtik və profilaktik dərmanların istifadəsi ilə bağlı məlumatlı tövsiyələr verməyə imkan verir.

İnsan diploid hüceyrələri - təklif olunan üsulla əldə edilən artan proliferativ aktivliyə malik M-20 ştammının fibroblastları diaqnostik məqsədlər üçün, xüsusən insan qan zərdabında interferonun (İFN) aktivliyini müəyyən etmək üçün, eləcə də dərman məqsədləri üçün istifadə edilə bilər. məsələn, yataq yaralarının, dişləmə yaralarının, uzun müddət sağalmayan və yanıq yaralarının yerli müalicəsi üçün.

1. diploid insan fibroblast hüceyrələrinin proliferativ xassələrini artırmaq üçün bir üsul, səciyyələndirilən M-20 xəttinin diploid hüceyrələrinin adına Damarlar İnstitutunun kriobankından. M.P. Çumakov RAMS 7-ci keçidin toxum hüceyrələri bankının ampulasından və 16-cı keçidin işçi hüceyrələri bankının ampulasından miqyaslanır, müalicəvi və/və ya diaqnostik məqsədlər üçün istifadəyə yararlı 20-33-cü keçid hüceyrələri isə əldə edilir. 155 - 342 pq/ml konsentrasiyada trombositdən qaynaqlanan böyümə faktoru PDGF olan 10% fibrinolitik aktiv plazma (FAP) olan qida mühitində becərmə.

2. Hüceyrələrin becərilməsi zamanı 10% FAP olan DMEM qida mühitinin istifadə olunduğu 1-ci bəndə uyğun üsul.

Oxşar patentlər:

İxtira əczaçılıq sənayesinə, yəni istehsalda insan plasental perfuzat hüceyrələrinin istifadəsinə aiddir. dərman bir şəxsdə şiş hüceyrələrinin yayılmasının qarşısını almaq.

İxtiralar qrupu biotexnologiya və onkologiya sahəsinə aiddir. Metod aşağıdakıları əhatə edir: a) sonrakı proteomik və tam transkriptomik analizlər üçün postnatal toxuma spesifik multipotent otoloji kök hüceyrələrin (ASC) və/və ya otoloji progenitor hüceyrələrin (APC) təcrid edilməsi; b) ASC və/və ya APC-lərin və/və ya çoxpotent allogen HLA-haploidentik kök hüceyrələrinin (HLA-CK) proteomik profilinin sonradan yenidən qurulması üçün təcrid edilməsi; c) CSC-lərin xəstənin şişindən təcrid edilməsi; d) ASC və/və ya APC və RSC-nin proteomik analizi; e) ASC və/və ya APC və CSC-lərin tam transkriptom analizi; f) hər biri həm ASC, həm də APC və CSC-nin proteomik profillərində olan zülallar dəstinin təyini; g) kanserogenez nəticəsində neoplastik transformasiyaya məruz qalmamış CSC-lərdə hüceyrədaxili siqnal yollarını müəyyən etmək və müəyyən edilmiş siqnal yollarının membran qəbulediciləri olan hədəf zülalları müəyyən etmək üçün əvvəllər müəyyən edilmiş zülallar dəstinin təhlili; h) CSC-lərin tam transkriptom gen ifadə profilinin təhlili və CSC-lərdə müəyyən edilmiş siqnal yollarının struktur komponentlərinin bütövlüyünün və funksional əhəmiyyətinin təsdiqi; i) hədəf zülalları aktivləşdirməyə qadir olan liqand zülallarının identifikasiyası; Kimə) müqayisəli təhlil ASA və/və ya APC-nin tam transkriptomik profilləri məlum transkriptom verilənlər bazalarında olan transkriptomik profillər, ASA və/və ya APC və/və ya HLA-CK-nın gen ifadə profilini dəyişdirə bilən perturbogenləri müəyyən etmək üçün, onların proteomik profilini yenidən modelləşdirmək üçün əvvəllər müəyyən ligand zülallarının ifraz istiqaməti; k) ASA və/yaxud APC və/və ya HLA-CK-nın proteomik profilinin perturbogenlər tərəfindən dəyişdirilməsi, müxtəlif transkriptomik profillərin dəyişdirilməsi. hüceyrə sistemləri, xəstənin RSC-yə tənzimləyici təsir göstərməyə qadirdir.

İxtira biotexnologiya sahəsinə, xüsusən də hüceyrə texnologiyalarına aiddir və tibbdə istifadə oluna bilər. Tərkibində promonositlər olan monositik nəsil hüceyrələrində zənginləşdirilmiş mononüvəli hüceyrələr və ya qeyri-embrion kök hüceyrələrin populyasiyası subyektdə işemiyanı müalicə etmək üçün istifadə olunur.

İxtira biotexnologiya və hüceyrə texnologiyası sahəsinə aiddir. İddia edilən ixtira mədəniyyətdə fərqlənməyə başlaya bilən pluripotent, multipotent və/və ya özünü yeniləyən hüceyrələrin yaradılmasına yönəlib. Müxtəlif növlər hüceyrələr və in vivo olaraq daha da diferensiasiya edə bilirlər.

İxtira tibb sahəsinə aiddir və köməkçi reproduktiv texnologiyalar üsullarında sperma seçilməsi üçün istifadə edilə bilər. Metod bir damcı sperma və bir damcı mədəniyyət mühitinin bir-birindən 5 sm-dən çox olmayan məsafədə Petri qabına yerləşdirilməsini, damcıların özlülük parametrləri 1-4 Pa s olan özlü mühit zolağı ilə birləşdirilməsini, sonra imitasiya şəraitində 30-90 dəqiqə ərzində məzmunu ilə yeməyi inkubasiya edin təbii mühit servikal kanal qadın reproduktiv sistemi.

İxtira tibb, biotexnologiya və hüceyrə texnologiyası sahəsinə aiddir. İnsan hüceyrə xəttini təmsil edən pluripotent kök hüceyrələrin formalaşmış endoderm nəsli üçün xarakterik olan markerləri ifadə edən hüceyrələrə diferensiallaşdırılması üsulu pluripotent kök hüceyrələrin tərkibində aktivin A olmadığı və müəyyən müddət ərzində GDF-8 ehtiva edən mühitlə müalicə edilməsini nəzərdə tutur. , pluripotent kök hüceyrələrin əmələ gələn endodermin nəsli üçün xarakterik olan markerləri ifadə edən hüceyrələrə differensiasiya etmək üçün kifayətdir.

Hazırkı ixtira immunologiya sahəsinə aiddir. HLA-A*0201 molekulu ilə kompleksin bir hissəsi kimi sitotoksik T-limfositləri (CTL) induksiya etməyə qadir olan RAB6KIFL zülalından (KIFL20A) təcrid olunmuş oliqopeptidin variantları təklif edilmişdir.

İxtira qida sənayesi sahəsinə aiddir və pivə bişirmə üsuludur ki, bu da şərabın süzülməsindən sonra, lakin şərab qaynadılmadan əvvəl ona termostabil proteazın əlavə edilməsini əhatə edir, burada proteazanın istilik sabitliyi bu proteazanın fəaliyyətinin uyğun olaraq ölçülən fəaliyyətinin ən azı 70%-i növbəti üsula: proteaz 100 mmol süksin turşusu, 100 mmol HEPES, 100 mmol CHES, 100 mmol CABS, 1 mmol CaCl2, 150 mmol KCl, 0,01% Triton, X- və 100 mmol HEPES ehtiva edən analiz tamponunda 1 mq/ml konsentrasiyaya qədər seyreltilir. c pH NaOH ilə 5,5-ə düzəldildi; bundan sonra proteaz i) buzda və ii) 10 dəqiqə 70°C-də inkubasiya edilir; proteazın aktiv olduğu substrat 0,01% Triton X-100-də dayandırılır: reaksiyaya başlamaq üçün sınaq borusuna 20 μl proteaz əlavə edilir və Eppendorf termomikserində 70°C, 1400 rpm-də 15 dəqiqə inkubasiya edilir; boruları buzun içinə qoyaraq reaksiya dayandırılır; nümunələr 3 dəqiqə ərzində 14000 q-da soyuqda sentrifuqalanır və supernatantın optik sıxlığı OD590 ölçülür; proteazsız nümunələrin alınmış OD590 dəyəri proteazla işlənmiş nümunələrin alınmış OD590 dəyərindən çıxılır; 100% aktivlik kimi buz üzərində inkubasiya edilmiş nümunələrdəki proteaz aktivliyinə nisbətən 70°C-də əvvəlcədən inkubasiya edilmiş nümunələrdə proteaz aktivliyinin faizini hesablamaqla proteazanın termostabilliyini müəyyən edin.

İxtira hüceyrə biologiyası, hüceyrə transplantologiyası və toxuma mühəndisliyi sahəsinə aiddir. Toxumalarda və orqanlarda piy toxumasının stromal hüceyrələrinin angiogen aktivliyinin artırılması metoduna 24-72 saat ərzində 5 və ya 100 ng/ml miqdarda şiş nekrozu faktoru-alfanın iştirakı ilə piy toxumasının stromal hüceyrələrinin təcrid edilməsi, təcrid olunmuş hüceyrələrin kultivasiyası daxildir. , sonra toxuma və ya orqanlara transplantasiya.

İxtira biotexnologiya, hüceyrə texnologiyası və toxuma cərrahiyyəsi sahəsinə aiddir. Hamar əzələ hüceyrələrinin kulturasını əldə etmək üsulu qan damarının bir hissəsini kəsməkdən, onu istənilən ölçüdə 2 mm-dən çox olmayan ölçüdə parçalara ayırmaqdan və parçaları əvvəllər tətbiq olunan cızıqlarla bir mədəniyyət kolbasında inkubasiya etməkdən ibarətdir. tərkibində 10% embrion fetal zərdab olan mədəniyyət mühiti olan kolbanın dibinə, CO2 inkubatorunda 37°C temperaturda ən azı 10 gün, lakin 24 gündən çox olmayaraq, qan damarı yüksələn əzanın bir parçasıdır torakal aorta, koronar arteriya şuntlama əməliyyatı zamanı kəsilmiş və yuxarı qalxan torakal aorta parçasının sözügedən hissələri 0,1% kollagenaz tərkibli mədəni mühitdə ən azı 30 dəqiqə, lakin 60 dəqiqədən çox olmamaqla, 37 dərəcə istilikdə saxlanılır. İnkubasiyadan əvvəl °C, sonra hüceyrə kulturası ilə yuyulur.

İnsan pluripotent kök hüceyrələrindən və bu üsulla əldə edilən mezenximal kök hüceyrələrindən mezenximal kök hüceyrələrin alınması üsulu // 2528250

İxtira gen mühəndisliyi, toxuma texnologiyası və tibb sahəsinə aiddir. Pluripotent insan kök hüceyrə xəttlərindən mezenximal kök hüceyrələrin alınması üsuluna insan pluripotent kök hüceyrələrindən embrioid cisimlərin alınması, embrioid cisimlərin mezenximal kök hüceyrələrə kortəbii diferensiallaşmasına təkan vermək üçün embrioid cisimlərin Petri qabına yapışdırılması, mezenximal hüceyrələrin çoxalması zamanı kultivasiya daxildir. mezenximal kök hüceyrələrin şəxsiyyətinin saxlanması və xarici sitokin əlavə edilmədən otoloji sitokin döngələrinin meydana gəlməsi ilə kortəbii mərhələ diferensiallaşmasının induksiyası baş verdiyi yerlərdə, həmçinin müvafiq hüceyrələr, onların istifadəsi, işə götürülməsi və mədəniyyət üsulu.

İxtira molekulyar biologiya, biokimya və tibb sahəsinə aiddir. Hüceyrə səthində kemokin və ya böyümə faktoru reseptorunu ifadə edən 1x107-dən 1x1010-a qədər miqdarda yetkin piy toxumasından insan mezenximal kök hüceyrələrini aktiv tərkib hissəsi kimi ehtiva edən yetkin piy toxumasının kök hüceyrələrinin miqrasiyasını stimullaşdırmaq üçün kompozisiya təklif olunur. bu kök hüceyrələrdən olan ifrazat məhsuluna kemokin və ya böyümə faktoru reseptoru daxildir; burada yetkin piy toxumasının kök hüceyrələrinin ifraz olunan məhsulu adiponektindir; və insanın yetkin piy toxumasının kök hüceyrələrinin tərkibində kemokin və ya böyümə faktoru olan qarışıq ilə astarlandığı.

İxtira biotexnologiya və təbabətə aiddir. Çoxpatent mezenximal hüceyrələrin (MMSC) iştirakı ilə göbək qanın mononükleer hüceyrələrinin (pcBMC) ex vivo genişlənməsi üçün bir üsul təklif edilmişdir ki, bura piy toxumasının stromal-damar fraksiyasından MMSC-nin bir təbəqəyə çatana qədər kultivasiyası daxildir. 5% mühitdə O2 konsentrasiyası, MMSC monolayerinə pcMNC suspenziyasının əlavə edilməsi, 5% mühitdə O2 konsentrasiyasında 72 saat kultivasiya, əlavə olunmamış psMNC-lərin seçilməsi və mühitin dəyişdirilməsi, MMSC-lərin əlavə edilmiş psMNC-lərlə becərilməsinin davam etdirilməsi 5% mühitdə O2 konsentrasiyasında 7 gün ərzində.

İxtira biotexnologiya və tibb sahəsinə aiddir. CD73+/CD90+/CD105+/CK19+ fenotipi, qida mühiti, eritropoetin, epidermal böyümə faktoru və effektiv miqdarda qəbul edilən kollagen ilə insan amniotik mayesindən kök hüceyrələrdən ibarət kompozisiya təklif olunur.

İxtira tibb və hüceyrə texnologiyası sahəsinə aiddir. Submandibular kanalın kök hüceyrələrinin populyasiyasını ehtiva edən hüceyrə məhsulu tüpürcək vəzi, CD49f+/EpCAM+ fenotipi ilə səciyyələnir və 0,1-40 mM konsentrasiyada valproik turşusu ilə müalicədən və kollagen geldə becərildikdən sonra ifadə profilinin 1AAT+/PEPCK+/G6P+/TDO+/CYP P4503A13+ halqasına dəyişdirilməsi, həmçinin sidik cövhəri və albumini sintez etmək.

İxtira biotexnologiya, hüceyrə və toxuma mühəndisliyi sahəsinə aiddir. Səth markerləri c-kit və/və ya sca-1 və/və ya MDR1 ifadə edən məməli ürəyinin rezident kök hüceyrələrinin əldə edilməsi üsulu təsvir edilmişdir, bu müddət ərzində miokard toxumasının nümunələri təcrid olunur, əzilir, kollagenaza və tripsinlə müalicə olunur və əzilmiş nümunələrin eksplant kulturası ilə fibronektinlə örtülmüş mədəni qabda becərilir və sonra immunoseleksiya aparılır.

İxtira biokimya, biotexnologiya və tibb sahəsinə aiddir. İmmunitet reaksiyasının həll olunan supressorunun 21 aminturşu uzunluğunda N-terminal fraqmenti təklif edilmişdir, o, Seq ID NO: 1-ə uyğun olaraq amin turşusu ardıcıllığına malikdir, bu da tənzimləyici T-limfositlərin formalaşmasını stimullaşdırmağa imkan verir. 0,1-50 μg/ml konsentrasiyada tətbiq edildikdə, Seq ID NO: 1 ilə immun cavabın həll olunan supressorunun N-terminal fraqmenti ilə tənzimləyici T-limfositlərin formalaşmasının stimullaşdırılması üsulu kimi.

İxtira əczaçılıq sənayesinə aiddir və bakterial dəri infeksiyalarının yerli müalicəsi və əlaqəli yaraların sağalması üçün nəzərdə tutulmuş, tərkibində framisetin sulfat və aşağıdakı qrupların hər birindən ən azı bir maddə olan krem ​​bazasına daxil olan biopolimerdən ibarət dermatoloji kremdir. : konservant; ketostearil spirti, ketomakrogol 1000, polisorbat-80 və Span-80-dən ibarət qrupdan seçilmiş birincili və ikincili emulqator; mumlu bir məhsul kimi parafin; propilen qlikol, heksilen qlikol və polietilen qlikol-400-dən ibarət qrupdan seçilmiş birgə həlledici; azot turşusu və ya laktik turşu və su və sözügedən biopolimer tercihen xitosandır.

İxtira biotexnologiya sahəsinə, xüsusən də hüceyrə texnologiyalarına aiddir və tibbdə istifadə oluna bilər. Metod, M-20 xəttinin diploid hüceyrələrinin adını daşıyan IPVE-nin kriyobankından miqyaslamağı əhatə edir. M.P. Chumakov Rusiya Tibb Elmləri Akademiyası 16-cı keçidin işçi hüceyrələrinin bankını əldə etmək üçün 7-ci keçidin toxum hüceyrə bankının ampulasından. Bu zaman terapevtik və diaqnostik məqsədlər üçün istifadə üçün yararlı olan 20-33 keçiddən ibarət hüceyrələr 155-dən 342 pgml-ə qədər konsentrasiyada trombositlərdən əldə edilən böyümə faktoru PDGF olan 10 fibrinolitik aktiv insan plazması olan qida mühitində kultivasiya yolu ilə əldə edilir. İxtira diploid insan fibroblast hüceyrələrinin proliferativ aktivliyini artırmağa imkan verir. 1 maaş fayl, 2 cədvəl.