بيت اللثة طرق البحث عن فيروس نقص المناعة البشرية. طرق تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية

طرق البحث عن فيروس نقص المناعة البشرية. طرق تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية

1. الطرق المصليةيعد الكشف عن الأجسام المضادة (AT) لفيروس نقص المناعة البشرية هو المعيار لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية (تتمتع أنظمة اختبار ELISA القائمة على الببتيدات الاصطناعية بحساسية ونوعية تصل إلى 100٪ تقريبًا). يتيح لك اختبار ELISA اكتشاف حالات الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، والتي قد تكون مؤشرات على الإصابة المبكرة أو، على العكس من ذلك، التطور المتقدم المتأخر للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية (ص 24 Ag)

2. الاختبارات التأكيدية- التخثر المناعي (IB)، والتألق المناعي غير المباشر (IIF)، والهطول المناعي الإشعاعي (RIP).

أ) توصي منظمة الصحة العالمية باعتبار المصل المحتوي على أجسام مضادة لبروتينين مغلفين وأحد البروتينات الداخلية لفيروس نقص المناعة البشرية إيجابيا. يجب تقييم المرضى الذين تكون نتائجهم إيجابية بواسطة ELISA ولكن لديهم نتائج غير محددة بواسطة IB سريريًا ويتم تقييمهم بوسائل أخرى، الفحص الطبيومناعياً، وبعد 3 إلى 6 أشهر، يجب فحص مصل الدم بحثاً عن الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية.

ب) طريقة التألق المناعي غير المباشر (IIF) - تستخدم كاختبار تأكيدي في العديد من المختبرات أو كاختبار فحص.

ج) الترسيب المناعي الإشعاعي هو طريقة حساسة ومحددة للغاية تعتمد على استخدام الأحماض الأمينية الموسومة بالنظائر المشعة. تعتبر هذه الطريقة حساسة للغاية للكشف عن الأجسام المضادة للبروتينات السطحية، وبالتالي فهي محددة للغاية، حيث أن مكونات الفيروس هذه موجودة في جميع الأفراد المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية تقريبًا بعد التحول المصلي.

3. الطرق البيولوجية الجزيئية: طريقة التهجين الجزيئي للأحماض النووية PCR

1) كطريقة تأكيدية بديلة وإضافية للكشف عن وجود الفيروس في الجسم فيما يتعلق بالطرق المصلية التشخيص المختبري;

2) الطريقة الأولى تحليل محددعند التشخيص المبكر للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، عندما لا تتوفر بعد أجسام مضادة محددة مضادة للفيروسات؛

3) لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية عند الأطفال حديثي الولادة من أمهات مصابات بفيروس نقص المناعة البشرية؛

4) تحديد الحمل الفيروسي ووصف العلاج المضاد للفيروسات القهقرية ومراقبة تنفيذه؛

5) كوسيلة للتوضيح في حالة عدم وضوح النتائج المصلية وفي حالة وجود تناقض بين الاختبارات المصلية والثقافية؛

6) عند دراسة الشركاء الجنسيين للأشخاص المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية؛

7) كوسيلة للتشخيص التفريقي لفيروس نقص المناعة البشرية-1 وفيروس نقص المناعة البشرية-2؛

4. الطريقة الفيروسية.

1. مبادئ العلاج المضاد للفيروسات القهقرية: يجب أن يبدأ العلاج قبل تطور نقص المناعة بشكل كبير. يجب أن يشمل العلاج الأولي مجموعات من ثلاثة أدوية على الأقل؛ يجب أن يتضمن تعديل العلاج استبدال أو إضافة عقارين جديدين على الأقل؛ ومن المهم للغاية قياس مستوى خلايا CD4+ والحمل الفيروسي؛ إن انخفاض الحمل الفيروسي إلى مستوى أقل من حد الكشف بالطرق الحساسة يعكس التأثير الأمثل للعلاج.

2. هناك ثلاث مجموعات من الأدوية المضادة للفيروسات القهقرية الحديثة:

أ) مثبطات المنتسخة العكسية النيوكليوزيدية (NRTIs):زيدوفودين (أزيدوثيميدين، ريتروفير)؛ ديدانوسين (دي دي، فيديكس)؛ زالسيتابين (ddC، hivid)؛ ستافودين (زيريت، d4T)؛ لاميفودين (3TC، إبيفير)؛ أباكافير. اديفوفير؛ كومبيفير (زيدوفودين + أباكافير) ؛ تريزيفير (زيدوفودين + لاميفودين + أباكافير) ؛ أديفوفير (مثبطات المنتسخة العكسية للنيوكليوتيدات).

ب) مثبطات المنتسخة العكسية غير النيوكليوزيدية (NNRTIs):ديلافيردين(ريسكريبتور); نيفيرابين (فيراموني) ؛ efavirenz

ج) مثبطات الأنزيم البروتيني (PI):ساكوينافير. ريتونافير (نورفير) ؛ إندينافير (كريكسيفان) ؛ نلفينافير (فيراسيبت) ؛ أمبرينافير (أجينيراس)؛ لوبينافير (ألوفيران) ؛ كاليترا (لوبينافير + ريتونافير).

3. لا يمكن للعلاج الأحادي بأي دواء أن يوفر قمعًا واضحًا وطويل الأمد لتكاثر فيروس نقص المناعة البشرية. علاوة على ذلك، مع العلاج الأحادي، هناك خطر متزايد لظهور سلالات مقاومة وتطور مقاومة متصالبة للأدوية من نفس المجموعة. الاستثناء الوحيد هو استخدام الزيدوفودين كعلاج وحيد لتقليل خطر انتقال فيروس نقص المناعة البشرية في الفترة المحيطة بالولادة.

4. المعيار الأكثر أهمية لفعالية العلاج هو ديناميكيات الحمل الفيروسي، والتي ينبغي تحديدها: بدون علاج - كل 6-12 شهرًا، أثناء العلاج - كل 3-6 أشهر، وأيضًا 4-8 أسابيع بعد العلاج بدء العلاج المضاد للفيروسات.

بالإضافة إلى العلاج المضاد للفيروسات القهقرية، من الضروري علاج الأمراض الثانوية.

34.3 الإيدز (المتغيرات السريرية، الأمراض الانتهازية).

الأمراض الانتهازية- الأمراض الشديدة والتقدمية التي تتطور على خلفية زيادة كبت المناعة ولا تحدث لدى شخص لديه جهاز مناعي يعمل بشكل طبيعي (الأمراض التي تحدد مرض الإيدز).

أ) المجموعة الأولى- هذه هي الأمراض التي تتميز فقط بنقص المناعة الشديد (مستوى CD4 +< 200 кл/мкл) и поэтому определяют клинический диагноз: 1. Кандидоз пищевода, трахеи, бронхов. 2. Внелегочный криптококкоз. 3. Криптоспоридиоз с диареей более 1 месяца. 4. Цитомегаловирусная инфекция с поражением различных органов, помимо печени, селезенки или лимфоузлов. 5. Инфекции, обусловленные вирусом простого герпеса, проявляющиеся язвами на коже и слизистых оболочках. 6. Саркома Капоши у лиц, моложе 60 лет. 7. Первичная лимфома мозга у лиц, моложе 60 лет. 8. Лимфоцитарная интерстициальная пневмония и/или легочная лимфоидная гиперплазия у детей в возрасте до 12 лет. 9. Диссеминированная инфекция, вызванная атипичными микобактериями с внелегочной локализацией. 10. Пневмоцистная пневмония. 11. Прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия. 12. Токсоплазмоз с поражением головного мозга, легких, глаз у больного старше 1 месяца.

ب) المجموعة الثانية- الأمراض التي يمكن أن تتطور على خلفية نقص المناعة الحاد وفي بعض الحالات بدونها: 1. الالتهابات البكتيرية مجتمعة أو متكررة عند الأطفال دون سن 13 عامًا (أكثر من حالتين خلال عامين من الملاحظة): تسمم الدم والالتهاب الرئوي ، التهاب السحايا، آفات العظام أو المفاصل، الخراجات الناجمة عن المستدمية النزلية، العقديات. 2. داء الكروانيات المنتشر (التوطين خارج الرئة). 3. اعتلال الدماغ بفيروس نقص المناعة البشرية 4. داء النوسجات المنتشر بالتوطين خارج الرئة. 5. داء المتشابهات مع الإسهال الذي يستمر لأكثر من شهر. 6. ساركوما كابوزي تصيب الأشخاص في أي عمر. 7. الأورام اللمفاوية في الخلايا البائية (باستثناء مرض هودجكين) أو الأورام اللمفاوية ذات النمط المناعي غير المعروف. 8. السل خارج الرئة. 9. تسمم الدم بالسالمونيلا متكرر. 10. ضمور فيروس نقص المناعة البشرية.

الأكثر شيوعًا هي الالتهاب الرئوي بالمتكيسة الرئوية والتهاب السحايا والدماغ بالمكورات العقدية وعدوى الفيروس المضخم للخلايا المعممة (التهاب الدماغ والتهاب الشبكية والتهاب المريء والتهاب الكبد والتهاب القولون) والإنتان المسببات المختلطة والشكل المعمم لساركوما كابوزي والسل الرئوي.

تحدث كل هذه الأمراض مع تلف واحد أو أكثر من الأعضاء والأنظمة: الدماغ والرئتين والكبد والجهاز الهضمي وتتقدم بشدة. تظهر الأمراض التي تحدد مرض الإيدز في مجموعات مختلفة، وحتى العلاج المناسب لا يحقق التأثير المتوقع.

المتغيرات السريرية لمرض الإيدز: الإيدز المعدية والعصبية والأورام، اعتمادا على مدى انتشار العيادات المختلفة.

فيروس نقص المناعة البشرية: التشخيص والعلاج والوقاية

لقد كانت متلازمة نقص المناعة المكتسب واحدة من المشاكل الرئيسية للمجتمع الحديث لأكثر من أربعين عاما. ولذلك، فإن تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية يجذب الآن الكثير من الاهتمام والموارد. ففي نهاية المطاف، كلما تم اكتشاف الفيروس الذي يدمر جهاز المناعة في الجسم بشكل أسرع، زادت فرص تجنب الموت.

يخفي الاختصار فيروس نقص المناعة البشرية تعريف فيروس نقص المناعة البشرية - وهو أحد أخطر الفيروسات الموجودة حاليًا. تحت تأثيره، يتم قمع جميع الخصائص الوقائية للجسم بعمق. وهذا بدوره يؤدي إلى ظهور الأورام الخبيثة المختلفة والالتهابات الثانوية.

يمكن أن تتطور الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية بطرق مختلفة. في بعض الأحيان يدمر المرض شخصا لمدة 3-4 سنوات، ولكن في بعض الحالات يمكن أن يستمر أكثر من 20 عاما. ومن الجدير بالذكر أن هذا الفيروس غير مستقر ويموت بسرعة إذا كان خارج جسم المضيف.

يمكن أن ينتقل فيروس نقص المناعة البشرية بشكل مصطنع، من خلال الاتصال بالدم ومن خلال آلية الاتصال الحيوي.

إذا كان هناك اتصال واحد مع حامل الفيروس، فإن خطر الإصابة بالعدوى سيكون منخفضا، ولكن مع التفاعل المستمر فإنه يزيد بشكل كبير. إن تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية أمر لا ينبغي إهماله، خاصة عند تغيير الشركاء الجنسيين

يجدر الانتباه إلى طريق العدوى بالحقن. يمكن أن يحدث أثناء عمليات نقل الدم الملوث، والحقن باستخدام الإبر الملوثة بدماء الأشخاص المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية، وكذلك أثناء الإجراءات الطبية غير المعقمة (الوشم، والثقب، وإجراءات طب الأسنان باستخدام أدوات لم يتم علاجها بشكل صحيح) .

وفي الوقت نفسه، يجدر معرفة أنه لا داعي للخوف من الاتصال وانتقال الفيروس منزليًا. ولكن تظل الحقيقة: أن الشخص معرض بشدة للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. وإذا أصيب موضوع يزيد عمره عن 35 عاما، فإن تطور الإيدز يحدث بشكل أسرع بكثير من أولئك الذين لم يتغلبوا بعد على علامة الثلاثين عاما.

وبطبيعة الحال، فإن أفضل طريقة لتحديد المشكلة، أو عدم وجودها، هي من خلال تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية. ولكن ما هي الأسباب التي قد تجعل الشخص يقود؟ صورة صحيةالحياة، اذهب وتفحص نفسك من العدوى؟ وبطبيعة الحال، لا بد من تبرير مثل هذه المبادرة بطريقة أو بأخرى. لذلك، من المهم معرفة الأعراض التي قد تشير إلى عمليات مدمرة تعمل على تثبيط جهاز المناعة.

ومن غير المرجح أن يكون من الممكن تحديد مرحلة حضانة الفيروس دون فحص الدم، لأن الجسم في هذا الوقت لا يتفاعل بعد بأي شكل من الأشكال مع العناصر المعادية.

يمكن أيضًا أن تمر المرحلة الثانية (المظاهر الأولية) دون أن يلاحظها أحد دون مساعدة الطبيب. ولكن في بعض الأحيان يحدث تكرار نشط للفيروس، ويبدأ الجسم في الاستجابة لهذا - هناك حمى، ومختلف الطفح الجلدي متعدد الأشكال، والمتلازمة الخطية والتهاب البلعوم. في المرحلة الثانية من الممكن إضافة أمراض ثانوية مثل الهربس والالتهابات الفطرية والالتهاب الرئوي وغيرها.

تتميز المرحلة الثالثة الكامنة بزيادة تدريجية في نقص المناعة. نظرا لحقيقة أن خلايا نظام الحماية تموت، تزداد ديناميكيات إنتاجها، وهذا يجعل من الممكن التعويض عن خسائر كبيرة. في هذه المرحلة هناك عدة العقد الليمفاويةالانتماء إلى أنظمة مختلفة يمكن أن تصبح ملتهبة. لكنها قوية الأحاسيس المؤلمةومع ذلك، لا يتم مراعاتها. في المتوسط، تستمر فترة الكمون من 6 إلى 7 سنوات، ولكن يمكن أن تستمر حتى 20 سنة.

خلال مرحلة الأمراض الثانوية وهي المرحلة الرابعة تظهر الالتهابات المصاحبة للفطريات والبكتيريا الأولية والفيروسية الأصل، وكذلك التكوينات الخبيثة. كل هذا يحدث على خلفية نقص المناعة الشديد.

طرق تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية

نتحدث عن القمع العميق الات دفاعيةالجسم بسبب تعرضه للفيروس، ومن الجدير بالذكر أن مستقبل المريض في هذه الحالة يعتمد بشكل مباشر على التشخيص الدقيق وفي الوقت المناسب.

لهذا الغرض في الطب الحديثيتم استخدام أنظمة اختبار مختلفة، والتي تعتمد على اختبارات الدم المناعية الكيميائية والامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم. تتيح هذه التقنيات تحديد وجود الأجسام المضادة التي تنتمي إلى فئات مختلفة. تساعد هذه النتيجة على زيادة محتوى المعلومات بشكل كبير لطرق الخصوصية التحليلية والسريرية والحساسية عند التعامل مع الأمراض المعدية.

ومن المثير للاهتمام أيضًا حقيقة أن طريقة تفاعل البوليميراز المتسلسل هي التي مكنت من الارتقاء بتشخيص فيروس نقص المناعة البشرية إلى مستوى جديد تمامًا. مجموعة متنوعة من المواد البيولوجية مناسبة للبحث: بلازما الدم، الخزعة، الكشط، المصل، السائل النخاعي أو السائل الجنبي.

إذا تحدثنا عن طرق البحث المختبري، فهي تركز في المقام الأول على تحديد العديد من الأمراض الرئيسية. نحن نتحدث عن الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، والسل، وجميع الأمراض المنقولة جنسيا، والتهاب الكبد الفيروسي.

تُستخدم أيضًا الاختبارات الجينية والمصلية الجزيئية لتحديد فيروس نقص المناعة. في الحالة الأولى، يتم تحديد الحمض النووي الريبوزي (RNA) للفيروس والحمض النووي (DNA) للفيروس، وفي الحالة الثانية، يتم تحليل الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية (HIV) والكشف عن مستضد P24.

في العيادات التي تستخدم، إذا جاز التعبير، الأساليب الكلاسيكيةالتشخيص، يتم استخدام بروتوكول الاختبار المصلي القياسي في الغالب.

التشخيص المبكر لفيروس نقص المناعة البشرية

يعد هذا النوع من تحديد حقيقة العدوى ضروريًا لتحديد خطر تلف جهاز المناعة في أقرب وقت ممكن. هذا، أولا، يسمح لك بتجنب انتشار العدوى، وثانيا، التأثير على المرض في المرحلة الأولية.

إذا نظرنا إلى مثال روسيا، فقد تم تقديم تصنيف سريري للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية في الجيش والبحرية في الاتحاد الروسي. وقد أدى ذلك إلى نتائج إيجابية: فقد أصبحت عملية التشخيص السريري المبكر أسهل بكثير.

تشمل الأعراض الشائعة التي تشير إلى تلف محتمل لجهاز المناعة الصداع والتعرق الليلي والتعب غير المحفز. ومن الممكن أيضًا الإصابة بالحمى المصحوبة بعلامات التهاب اللوزتين. وهذا يعني أن ترتفع درجة الحرارة إلى 38 درجة أو أعلى، وفي نفس الوقت تتضخم اللوزتين، ويظهر الألم أثناء البلع. كل هذا يكمله فقدان الوزن السريع. علاوة على ذلك، فإن هذه الأعراض غالبا ما تكون معقدة.

وفي بعض الحالات الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية المراحل الأولىقد يتجلى في شكل تغيرات مختلفة في حالة الجلد. نحن نتحدث عن البقع، الوردية، البثور، الدمامل، وما إلى ذلك. يشمل التشخيص المبكر لفيروس نقص المناعة البشرية أيضًا التعامل مع أعراض مثل تضخم عام أو محدود في الغدد الليمفاوية المحيطية.

إذا كان هناك نمو متزامن لعدة عقد ليمفاوية، يستمر لمدة ثلاثة أشهر أو أكثر، وفي مجموعات مختلفة، باستثناء منطقة الفخذأي أن هناك كل الأسباب للشك في وجود فيروس في جهاز المناعة البشري.

الحديث عن التشخيص في المزيد فترة متأخرة، عليك الانتباه إلى المظهر نقص المناعة الثانوية، والذي يحدث غالبًا تحت ستار الأعراض السريرية المختلفة. نحن نتحدث عن المظاهر التالية:

  • اعتلال عقد لمفية محيطية معمم غير محفز.
  • ألم مفصلي من مسببات غير معروفة، والتي لها مسار متموج.
  • ARVI (ARI) والآفات الالتهابية في الرئتين و الجهاز التنفسيالتي تجعل نفسها تشعر بها في كثير من الأحيان؛
  • حمى مجهولة المصدر وحمى منخفضة الدرجة لفترة طويلة؛
  • التسمم العام ، الذي يتجلى من خلال الضعف غير الدافع ، تعبوالخمول وما إلى ذلك.
  • تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية على مرحلة متأخرةيشمل فحصًا لمرض مثل ساركوما كابوزي، والذي يتجلى في ظهور أورام متعددة، غالبًا في الجزء العلوي من الجسم عند الشباب، يليه تطور ديناميكي وانتشار ورم خبيث.

    تفاعل البوليميراز المتسلسل

    عند النظر في طرق مختلفة لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، فإن هذا الأمر يستحق الاهتمام بشكل خاص. وتجدر الإشارة على الفور إلى أن اختبار الدم هذا يمكن أن يستهدف الخصائص الكمية والنوعية.

    ويمكن تعريف الغرض من هذه الطريقة للكشف عن الفيروس على النحو التالي:

  • تنفيذ التشخيص المبكرعدوى فيروس نقص المناعة البشرية؛
  • توضيح وجود نتائج مشكوك فيها نتيجة لدراسة المناعية؛
  • تحديد مرحلة معينة من المرض.
  • مراقبة فعالية العلاج الذي يهدف إلى قمع الفيروس.

وإذا كنا نتحدث عن العدوى الأولية، تجدر الإشارة إلى أن هذه التقنية تجعل من الممكن تحديد الحمض النووي الريبي لفيروس نقص المناعة البشرية في دم المريض بعد 14 يومًا من لحظة الإصابة. هذه نتيجة جيدة جدا وفي هذه الحالة، فإن نتيجة الدراسة نفسها سيكون لها تعبير نوعي: إما إيجابية (الفيروس موجود) أو سلبية.

التعبير الكمي PCR

يُستخدم هذا النوع من تفاعل البوليميراز المتسلسل لتحديد المعدل المحتمل لتطور مرض الإيدز والتنبؤ بالعمر المتوقع للمريض.

إن التحديد الكمي لخلايا الحمض النووي الريبي لفيروس نقص المناعة البشرية في الدم يجعل من الممكن فهم متى يدخل المرض المرحلة السريرية.

تجدر الإشارة إلى أن طرق التشخيص المختبري لفيروس نقص المناعة البشرية تعطي نتائج أكثر دقة إذا تم تحديد المادة الحيوية المطلوبة للتحليل بشكل صحيح وتم جمعها بكفاءة.

من أجل إجراء مراقبة عالية الجودة للأشخاص المصابين، من الضروري (إن أمكن) استخدامها نهج معقدلدراسة الحالة المناعية للمريض. نحن نتحدث عن التحديد الكمي والوظيفي لجميع أجزاء نظام الدفاع: المناعة الخلوية والخلطية والمقاومة غير المحددة في حد ذاتها.

التشخيص المختبري

على نحو متزايد، في الظروف المختبرية الحديثة، يتم استخدام طريقة متعددة المراحل لتقييم حالة الجهاز المناعي. غالبًا ما تتضمن هذه التقنية تحديد مجموعة فرعية من الغلوبولين المناعي والخلايا الليمفاوية في الدم. وهذا يعني أنه يتم أخذ نسبة خلايا CD4/CD8 بعين الاعتبار. إذا أظهرت النتيجة أقل من 1.0، فهناك سبب للشك في نقص المناعة.

التشخيص المختبري للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية يجب أن يشمل هذا الاختبار، حيث أن هذا الفيروس يتميز بتلف انتقائي للخلايا الليمفاوية CD4، مما يؤدي إلى انتهاك ملحوظ للنسبة المذكورة أعلاه (أقل من 1.0).

لتقييم الحالة المناعية، يمكن للأطباء إجراء اختبار لوجود عيوب "جسيمة" أو عامة في جهاز المناعة الخلطية والخلوية. نحن نتحدث عن نقص غاما غلوبولين الدم أو فرط غاما غلوبولين الدم في المرحلة النهائية، وكذلك انخفاض في إنتاج السيتوكينات، وزيادة في تركيز المجمعات المناعية المنتشرة، وضعف استجابة الخلايا الليمفاوية للمولدات المخففة والمستضدات.

تجدر الإشارة إلى أن التشخيص المختبري لفيروس نقص المناعة البشرية يتكون من مرحلتين رئيسيتين:

  1. مختبر الفحص. إذا تم الحصول على نتيجة إيجابية في اختبار ELISA (مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم)، فسيتم تكرارها مرتين أخريين في نفس النظام ودون تغيير المصل. وفي حال أدى اثنان من الفحوصات الثلاثة إلى الكشف عن تأثير الفيروس، يتم إرسال المصل لإجراء المزيد من الاختبارات إلى مختبر مرجعي.
  2. أما المرحلة الثانية، والتي تتضمن طرق التشخيص المختبري للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، فهي تحديد حالة الجهاز المناعي. يتم إجراؤه في المختبر المرجعي المذكور أعلاه. هنا، يتم اختبار المصل الإيجابي مرة أخرى في ELISA، ولكن باستخدام نظام اختبار مختلف، والذي يختلف عن النظام السابق في تكوين المستضدات أو الأجسام المضادة أو شكل الاختبارات نفسها. إذا تم تحديد نتيجة سلبية، يتم إجراء اختبار متكرر في نظام اختبار ثالث. إذا لم يتم الكشف في نهاية المطاف عن تأثير الفيروس، فسيتم تسجيل عدم الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. ولكن إذا كانت النتيجة إيجابية، يتم فحص المصل بطريقة خطية أو مناعية.

وفي نهاية المطاف، تؤدي مثل هذه الخوارزمية إلى نتائج إيجابية أو محايدة أو سلبية.

يجب أن يعرف كل مواطن أن تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية متاح له. يمكن التعرف على مرض الإيدز في مؤسسات نظام الرعاية الصحية الخاص أو البلدي أو الحكومي.

وبطبيعة الحال، فإن تحديد الفيروس لن يكون ذا فائدة تذكر في غياب أساليب مختلفة للتأثير على العدوى. وعلى الرغم من أنه لا يوجد حتى الآن لقاح قادر على تحييد الفيروس تماما، فإن التشخيص المختص وعلاج فيروس نقص المناعة البشرية والوقاية اللاحقة يمكن أن يحسن بشكل كبير حالة المريض، وبالتالي إطالة حياته. يتم تأكيد هذه الأطروحة من خلال حقيقة أن متوسط ​​العمر المتوقع للرجال الذين بدأوا علاج فيروس نقص المناعة البشرية في الوقت المناسب هو 38 عامًا. تعيش النساء اللاتي يبدأن بمحاربة فيروس نقص المناعة البشرية في المتوسط ​​41 عامًا.

بعد إجراء التشخيص، يعتمد علاج فيروس نقص المناعة البشرية على استخدام العديد من التقنيات. أحد أكثر هذه العلاجات شيوعًا هو العلاج النشط المضاد للفيروسات القهقرية، المعروف أيضًا باسم HAART. إذا تم تطبيق هذا النوع من العلاج بسرعة وبشكل صحيح، فيمكنك إبطاء تطور مرض الإيدز بشكل كبير أو إيقافه تمامًا.

جوهر HAART هو أنه يتم استخدام العديد من المستحضرات الصيدلانية في وقت واحد، والغرض منها هو التأثير على آليات مختلفة لتطوير فيروس نقص المناعة البشرية.

بعد أن تحدد طرق تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية المختلفة حقيقة الإصابة، يمكن استخدام الأدوية التي لها التأثيرات التالية:

  • المناعية.استقرار الجهاز المناعييرتفع مستوى الخلايا اللمفاوية التائية، ويتم استعادة الحماية ضد الالتهابات المختلفة.
  • مرضي.يتم منع تطور مرض الإيدز وأي من مظاهره، وتمتد حياة المرضى مع الحفاظ على جميع وظائف الجسم.
  • فيروسي.يتم حظر تكاثر الفيروس، ونتيجة لذلك يتم تقليل الحمل الفيروسي ويتم إصلاحه لاحقًا عند مستوى منخفض.
  • ومن الصعب المبالغة في تقدير أهمية مثل هذه التدابير للتأثير على المرض مثل التشخيص والعلاج والوقاية من الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. ولذلك، فإن أفضل ما يمكن القيام به بعد ظهور نتيجة اختبار إيجابية للعدوى هو البدء فورًا في محاربة المرض. هناك طريقة أخرى يمكن أن تساعد في القيام بذلك وهي العلاج الفيروسي.

    في هذه الحالة، نتحدث عن استخدام الأدوية التي لا تسمح للفيروس بالالتصاق بالخلايا اللمفاوية التائية ودخول الجسم. تسمى هذه الأدوية مثبطات الاختراق. مثال ملموس هو Celsentry.

    يمكن استخدام مثبطات الأنزيم البروتيني الفيروسي لقمع فيروس نقص المناعة البشرية. الغرض من هذه المجموعة من الأدوية هو منع إصابة الخلايا الليمفاوية الجديدة بالعدوى. هذه هي الأدوية مثل Viracept، Reyataz، Kaletra، إلخ.

    المجموعة الثالثة من الأدوية الموضعية هي مثبطات المنتسخة العكسية. وهي ضرورية لمنع الإنزيم الذي يسمح للفيروس RNA بالتكاثر في نواة الخلية الليمفاوية. يمكن أن يكون لهذه الأساليب تأثير كبير على مشكلة مثل الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. إن تشخيص مرض الإيدز وعلاجه والوقاية منه هو عمل الأطباء المؤهلين، لذلك يجب عليهم وضع خوارزمية استخدام الأدوية.

    إذا لزم الأمر، يمكن أيضًا استخدام التدخلات المناعية والسريرية.

    تقترح منظمة الصحة العالمية الطرق التاليةمكافحة الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية:

  • الوقاية من انتقال العدوى الجنسية. وتشمل هذه البرامج الجنس المحمي، وتوزيع الواقي الذكري، وعلاج الأمراض التي تنتقل عن طريق الاتصال الجنسي، والبرامج التعليمية.
  • بالنسبة للنساء الحوامل اللاتي تم تشخيص إصابتهن بفيروس نقص المناعة البشرية - التشخيص والوقاية باستخدام الاستخدام المناسب مواد كيميائيةبالإضافة إلى الاستشارة والعلاج المهني.
  • تنظيم الوقاية من خلال منتجات الدم. في هذه الحالة، نحن نتحدث عن المعالجة المضادة للفيروسات وفحص الجهات المانحة.
  • الاجتماعية و الرعاىة الصحيةالمرضى وأسرهم.
  • للتأكد من أن تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية لا يكشف عن وجود الفيروس، يجب عليك المتابعة قواعد بسيطةحماية:

  • إذا لامس دم شخص مصاب الجلد، فيجب غسله فورًا بالماء والصابون، ثم معالجة منطقة التلامس بالكحول؛
  • إذا كان الضرر ناتجًا عن جسم يحتوي على عناصر فيروس، فيجب ضغط الجرح وعصر الدم للخارج ومعالجة المنطقة ببيروكسيد الهيدروجين وكي الحواف باليود؛
  • لا تستخدم أبدًا المحاقن التي تم اختراق عقمها؛
  • استخدمي الواقي الذكري أثناء الجماع، ومن الأفضل أن تقومي في البداية بفحص شريكك للتأكد من عدم إصابته بالعدوى.
  • بفضل حقيقة أن تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية لا يزال قائما، فإن الآلاف من الأشخاص لديهم الفرصة لبدء العلاج في الوقت المحدد وزيادة متوسط ​​العمر المتوقع بشكل كبير. الشيء الرئيسي هو عدم تجاهل الأعراض الواضحة وعدم الخوف من الذهاب إلى الطبيب.

    التشخيص المختبري للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية

    يخضع ما يلي لاختبار الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية:

    2. الأشخاص الذين لديهم تشخيص مشتبه به أو مؤكد لـ: العدوى البكتيرية لدى الأطفال دون سن 13 عامًا، المتعددة والمتكررة؛ داء المبيضات في المريء أو القصبة الهوائية أو القصبات الهوائية أو الرئتين. سرطان عنق الرحم الغازية. داء الكروانيات المنتشر أو خارج الرئة. داء المستخفيات خارج الرئة. داء الكريبتوسبوريديوسيس مع الإسهال لمدة شهر أو أكثر. عدوى الفيروس المضخم للخلايا في الأعضاء الأخرى، باستثناء الكبد والطحال والغدد الليمفاوية في المرضى الذين تزيد أعمارهم عن شهر واحد. التهاب الشبكية الفيروسي المضخم للخلايا مع فقدان الرؤية. العدوى الهربسية، التي تسبب تقرحات متعددة البؤر لا تشفى خلال شهر واحد، أو التهاب الشعب الهوائية، والالتهاب الرئوي، والتهاب المريء. داء النوسجات المنتشر أو خارج الرئة. داء المتباينات مع الإسهال لأكثر من شهر واحد. السل واسع الانتشار أو خارج الرئة. السل الرئوي لدى البالغين أو المراهقين الذين تزيد أعمارهم عن 13 عامًا. السل خارج الرئة. مرض آخر تسببه المتفطرات غير المتفطرة السلية المنتشرة أو خارج الرئة. الالتهاب الرئوي الناجم عن المكورات الرئوية. اعتلال بيضاء الدماغ متعدد البؤر التدريجي. تسمم الدم بالسالمونيلا (باستثناء السالمونيلا التيفية)، المتكرر؛ تسمم الدماغ عند الأطفال الأكبر من شهر واحد. ساركوما كابوزي؛ الالتهاب الرئوي الخلالي اللمفاوي عند الأطفال دون سن 13 عامًا ؛ سرطان الغدد الليمفاوية في بوركيت. سرطان الغدد الليمفاوية المناعي. سرطان الغدد الليمفاوية في الدماغ الأولي. متلازمة الهزال، التهاب الكبد B، النقل HBsAg. كريات الدم البيضاء المعدية; الهربس النطاقي المتكرر لدى الأشخاص الذين تزيد أعمارهم عن 60 عامًا. الأمراض المنقولة جنسيا.

    في مختبر متخصص للغاية يتم تنفيذ ما يلي:

    أ) تحديد الأجسام المضادة والمستضدات والمجمعات المناعية المنتشرة في الدم؛ زراعة الفيروس وتحديد مادته الجينية وإنزيماته؛

    ب) تقييم وظائف الجزء الخلوي لجهاز المناعة. الدور الرئيسي ينتمي إلى طرق التشخيص المصلية التي تهدف إلى تحديد الأجسام المضادة، وكذلك المستضدات المسببة للأمراض في الدم وغيرها السوائل البيولوجيةجسم.

    يتم إجراء اختبار الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية من أجل:

    أ) سلامة عمليات نقل الدم وزراعته؛

    ب) المراقبة والاختبار من أجل مراقبة انتشار الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ودراسة ديناميكيات انتشاره لدى مجموعة سكانية معينة؛

    ج) تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، أي الاختبار الطوعي لمصل الدم للأشخاص الأصحاء عملياً أو المرضى الذين يعانون من علامات وأعراض سريرية مختلفة مشابهة للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية أو الإيدز.

    يعتمد نظام التشخيص المختبري للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية على مبدأ من ثلاث مراحل. المرحلة الأولى هي الفحص، الذي يهدف إلى إجراء اختبارات الدم الأولية لوجود الأجسام المضادة لبروتينات فيروس نقص المناعة البشرية. المرحلة الثانية مرجعية - تسمح بمساعدة خاصة التقنيات المنهجيةتوضيح (تأكيد) النتيجة الإيجابية الأولية التي تم الحصول عليها في مرحلة الفحص. المرحلة الثالثة هي مرحلة الخبراء، وتهدف إلى التحقق النهائي من وجود ونوعية علامات الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية التي تم تحديدها في المراحل السابقة من التشخيص المختبري. تعود الحاجة إلى عدة مراحل من التشخيص المختبري في المقام الأول إلى الاعتبارات الاقتصادية.

    في الممارسة العملية، يتم استخدام العديد من الاختبارات التي تسمح بتحديد الأشخاص المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية بدرجة كافية من الموثوقية:

    اختبار ELISA (مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم) للكشف عن المستوى الأول، يتميز بحساسية عالية، على الرغم من أنه أقل خصوصية من ما يلي؛

    اللطخة المناعية (لطخة غربية)، وهو اختبار محدد للغاية وأكثر استخدامًا يسمح لك بالتمييز بين فيروس نقص المناعة البشرية-1 وفيروس نقص المناعة البشرية-2؛

    اختبار مستضد الدم p25 فعال في المراحل الأوليةعدوى؛

    تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR).

    في حالات الفحص الجماعي لعينات الدم، يوصى باختبار مخاليط الأمصال من مجموعة من الأشخاص، مجمعة بطريقة لا يتجاوز التخفيف النهائي لكل عينة 1:100. إذا كان خليط المصل الحالي إيجابيا، يتم اختبار كل مصل في الخليط الإيجابي. لا تؤدي هذه الطريقة إلى فقدان الحساسية في كل من ELISA وimmunoblot، ولكنها تقلل من تكاليف العمالة وتكلفة الفحص الأولي بنسبة 60-80٪.

    أثناء التشخيص المصلي الأولي لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية، يتم تحديد إجمالي الأجسام المضادة باستخدام اختبارات الفحص - ELISA وتفاعلات التراص. في المرحلة الثانية (التحكيم)، يتم استخدام اختبار أكثر تعقيدًا - كتلة مناعية، والتي لا تسمح فقط بتأكيد أو رفض الاستنتاج الأولي، ولكن أيضًا للقيام بذلك على مستوى تحديد الأجسام المضادة للبروتينات الفردية للفيروس.

    مقايسة الممتز المناعي المرتبط(ELISA) هي الطريقة الرئيسية والأكثر استخدامًا لتحديد الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية. لكن عيوب استخدام ELISA في التشخيص المصلي لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية تشمل كثرة ايجابيات مزيفة. في هذا الصدد، فإن النتيجة في اختبار ELISA ليست الأساس لاستنتاج حول إيجابية فيروس نقص المناعة البشرية للموضوع. ويرجع ذلك إلى عدم كفاية تنقية الممتص المناعي من بروتينات الصابورة؛ الارتباط التلقائي للأجسام المضادة في الدم بالبلاستيك، إذا كانت مناطقه التي لا يشغلها الممتص المناعي غير مسدودة بشكل كافٍ أو لا يتم حظرها على الإطلاق بواسطة بروتين محايد خاص؛ التفاعل المتبادلمع بروتينات الامتصاص المناعي لفيروس نقص المناعة البشرية من البروتينات المختلفة الموجودة في دم الأشخاص الذين يعانون من عمليات مرضية معينة، غالبًا ما تكون مناعية ذاتية، مثل التصلب المتعدد، ومرض الذئبة الحمراء، والسل؛ مع التبرعات المتكررة، والأمراض المعدية والسرطانية، والحروق، والحمل، وعمليات نقل الدم المتكررة، وزرع الأعضاء والأنسجة، وكذلك الأشخاص الذين يخضعون لغسيل الكلى؛ مع وجود عامل الروماتويد في الدم، والذي غالبا ما يثير ردود فعل إيجابية كاذبة لفيروس نقص المناعة البشرية. وجود أجسام مضادة في دم الأشخاص الذين يتم فحصهم لبروتينات هفوة فيروس نقص المناعة البشرية، وقبل كل شيء، لبروتين p24 (من الواضح أن الأجسام المضادة تتشكل للفيروسات القهقرية الخارجية أو الداخلية التي لم يتم تحديدها بعد). نظرًا لأنه يتم تصنيع مضاد p24 دون فشل في المراحل المبكرة من التحول المصلي لفيروس نقص المناعة البشرية، يتم إجراء المزيد من المراقبة المناعية للأفراد الذين لديهم أجسام مضادة لبروتينات هفوة فيروس نقص المناعة البشرية، بالإضافة إلى استبعادهم من التبرع.

    تتزايد باستمرار حساسية ونوعية المقايسات المناعية الإنزيمية. ونتيجة لذلك، فإن الجيل الرابع من ELISAs ليس أقل شأنا في قدراته التشخيصية من التطعيم المناعي ويمكن استخدامه ليس فقط في الفحص، ولكن أيضًا في المرحلة التأكيدية لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية [Smolskaya T. T.، 1997].

    اللطخة المناعيةهي الطريقة النهائية للتشخيص المصلي، مما يسمح للشخص بالتوصل إلى نتيجة نهائية حول إيجابية أو سلبية فيروس نقص المناعة البشرية للموضوع.

    هناك علاقة واضحة بين نتائج دراسة الأمصال في التطعيم المناعي وتقنية ELISA - الأمصال الإيجابية المزدوجة في ELISA مع أنظمة اختبار مختلفة في 97-98٪ من الحالات ثم يتبين أنها إيجابية لفيروس نقص المناعة البشرية في التطعيم المناعي. إذا تبين أن الأمصال إيجابية في اختبار ELISA في نظام واحد فقط من نظامي الاختبار المستخدمين، ففي البقعة المناعية يتم اكتشافها إيجابية فقط في 4٪ من الحالات. في 5% من الحالات، عند إجراء دراسات تأكيدية على الأفراد الذين لديهم بيانات إيجابية، يمكن أن تعطي ELISA المناعية نتائج "غير مؤكدة"، ومن بينها، في حوالي 20% من الحالات، تكون النتائج "غير المؤكدة" ناجمة عن الأجسام المضادة لبروتينات هفوة فيروس نقص المناعة البشرية -1. (ص55، ص25، ص18). يعد وجود الأجسام المضادة لبروتينات هفوة فيروس نقص المناعة البشرية (HIV-1) فقط سببًا لذلك فحص إضافيمصل الدم لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية -2.

    يتم إجراء تقييم نتائج التطعيم المناعي بدقة وفقًا للتعليمات المرفقة مع نظام الاختبار. إذا لم توفر التعليمات إرشادات حول كيفية تفسير النتائج، فيجب استخدام معايير منظمة الصحة العالمية.

    إذا تم الحصول على نتائج بحثية إيجابية في المرحلة المرجعية للتشخيص المختبري لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية وتم الحصول على نتيجة سلبية لاختبار النشاف المناعي، فسيتم إجراء تشخيص خبير إلزامي متكرر بعد 6 أشهر من الفحص الأول.

    إذا ظلت نتائج التطعيم المناعي بعد 12 شهرًا من دراسة العينة الأولى سلبية أو غير محددة، ففي حالة عدم وجود عوامل خطر أو أعراض سريرية أو عوامل أخرى مرتبطة بالعدوى بفيروس نقص المناعة البشرية، تتم إزالة الموضوع من مراقبة المستوصف.

    من بين الطرق المصلية، في حالة النتائج غير المحددة، يتم استخدام اللطخة المناعية كتشخيص خبير الهطول المناعي الإشعاعي(قطع). وهو يعتمد على استخدام البروتينات الفيروسية الموسومة باليود المشع، ويتم اكتشاف الرواسب باستخدام عدادات بيتا. تشمل عيوب الطريقة التكلفة العالية للمعدات والحاجة إلى تجهيز أماكن خاصة لهذه الأغراض.

    يخضع الأشخاص الذين تم تشخيص إصابتهم بفيروس نقص المناعة البشرية للمراقبة الديناميكية المستمرة مع الفحص المختبري الإلزامي كل 6 أشهر.

    يكشف تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) عن تسلسلات النيوكليوتيدات المتضاعفة مسبقًا الخاصة بجينوم مسبب المرض المحدد. إن التكاثر المعزول للجين أو شظاياه، والذي يسمى التضخيم، يجعل من الممكن إجراء PCR في المختبر باستخدام إنزيم بوليميريز الحمض النووي القابل للحرارة. في غضون 2-3 ساعات، يتيح لك تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) الحصول على ملايين النسخ من منطقة معينة من الفيروس. أثناء الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، من الحمض النووي الريبي (RNA) الخلوي، بما في ذلك الحمض النووي الريبي (RNA) للفيروس، إذا تم استنساخه في خلية أو تم دمجه في جينومها، باستخدام النسخ العكسي والتهجين مع "مسبارات" قليل النوكليوتيد المسمى، يتم الحصول على كمية كافية من الحمض النووي الفيروسي من أجل التحليل، الذي يتم تحديده وتوصيفه كميًا، كما هو الحال فيما يتعلق بالانتماء إلى جينوم فيروس نقص المناعة البشرية، باستخدام علامة مشعة أو أي علامة مسبار أخرى، مما يحدد تماثل الحمض النووي وتسلسلات الأحماض الأمينية الخاصة بالفيروس. حساسية تفاعل البوليميراز المتسلسل هي اكتشاف الجينات الفيروسية في خلية واحدة من أصل خمسة آلاف خلية.

    لا يمكن استخدام PCR، بما في ذلك الكمي، إلا لتحديد الحمل الفيروسي في البلازما لتحديد ما إذا كان سيتم بدء العلاج الدوائي للمريض أو تغيير الأدوية المضادة للفيروسات القهقرية. لا يمكن التوصية باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، لأنه حتى أحدث الأساليب والكواشف يمكنها تحديد الحمل الفيروسي بما لا يقل عن مستوى معين - 50 نسخة/مل. كما أن تعقيد اختبار تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وتكلفته المرتفعة (حوالي 200 دولار) ينفي استخدامه على نطاق واسع كوسيلة للتشخيص المختبري الروتيني للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. وبالتالي، يظل PCR لا غنى عنه فقط لتقييم الحمل الفيروسي في البلازما لدى المرضى الذين تم تشخيص إصابتهم بفيروس نقص المناعة البشرية بالفعل من أجل حل مشكلة علاج المريض.

    تظهر مراحل التشخيص المختبري لعدوى فيروس العوز المناعي البشري بشكل تخطيطي في الشكل. 1.

    أرز. 1. مراحل التشخيص المختبري للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية

    أثناء الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، هناك فترة "نافذة مختبرية مظلمة" عندما تكون كمية الأجسام المضادة ضد فيروس نقص المناعة البشرية غير كافية لحساسية أنظمة الاختبار. وتتراوح هذه الفترة من أسبوع إلى ثلاثة أشهر من لحظة الإصابة بالفيروس، وذلك حسب مستوى حساسية نظام الاختبار. ونظرا لهذه الظاهرة، تنشأ صعوبات أثناء الفحص التبرع بالدممن الأشخاص المقيمين في الفترة المذكورة من الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. لذلك، تم في معظم دول العالم إدخال نظام استخدام الدم فقط بعد تخزينه لمدة 3-6 أشهر من أجل إجراء إعادة الفحص الإلزامي للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية لدى المتبرعين بهذه الجرعات من الدم ومكوناته .

    منصة المظاهر الأوليةتتميز بنشاط العملية التكرارية. يتسبب فيروس الدم الناتج ومضادات الدم في تكوين أجسام مضادة محددة من فئة IgM: anti-p24، anti-gp41، anti-gp120. يمكن اكتشاف المستضد p24 لدى بعض الأشخاص المصابين في الدم بواسطة ELISA بعد أسبوعين من الإصابة ويمكن اكتشافه حتى الأسبوع الثامن. التالي في بالطبع السريريةتتميز الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية بارتفاع ثانٍ في مستوى بروتين p24 في الدم، ويحدث أثناء تكون مرحلة الإيدز.

    إن ظهور الانقلاب المصلي الكامل، عندما يتم تسجيل مستوى عالٍ من الأجسام المضادة IgG المحددة للبروتينات الهيكلية لفيروس نقص المناعة البشرية gp41، p24، gpl20 في الدم المحيطي، يسهل بشكل كبير تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. تم تصميم معظم الأدوات التجارية للإشارة إلى هذه الأجسام المضادة فقط.

    قد تنشأ صعوبات في اكتشاف الأجسام المضادة لدى المرضى المصابين بعدوى فيروس العوز المناعي البشري خلال فترات تفير الدم الضخم ومستضدات الدم، عندما يتم استخدام الأجسام المضادة المحددة الموجودة في الدم لربط الجزيئات الفيروسية، وتكون عملية التكاثر قبل إنتاج أجسام مضادة جديدة مضادة للفيروسات.

    في الأفراد الذين يعانون من ضعف في جهاز المناعة في البداية، تظهر فيروسات الدم ومستضدات الدم في وقت مبكر وتظل عند مستوى مرتفع حتى نتيجة المرض. في الوقت نفسه، يكون لدى هؤلاء المرضى محتوى منخفض من الأجسام المضادة الحرة لفيروس نقص المناعة البشرية، ويرجع ذلك إلى سببين - عدم كفاية إنتاج الأجسام المضادة بواسطة الخلايا الليمفاوية البائية وربط فيروسات فيروس نقص المناعة البشرية والبروتينات القابلة للذوبان بواسطة الأجسام المضادة، وبالتالي، فإن أنظمة الاختبار ذات فرط الحساسيةأو تعديلات على طرق الفحص التي تشمل خطوة إطلاق الأجسام المضادة من المجمعات المناعية.

    على الرغم من وفرة العلامات المحددة للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، فإن الأكثر تحديدًا في أغلب الأحيان هو وجود الأجسام المضادة الكلية لبروتينات فيروس نقص المناعة البشرية. يشير مصطلح "المجموع" إلى وجود فئتين من الأجسام المضادة (IgG وIgM) و مدى واسعالأجسام المضادة لمختلف البروتينات الهيكلية في المقام الأول لفيروس نقص المناعة البشرية.

    تحديد خلايا CD4. المؤشر السريري والمخبري الرئيسي لتشخيص مرحلة الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، ودرجة تدمير الجهاز المناعي لدى المرضى في الحياة اليوميةأصبح تحديد محتوى الخلايا الليمفاوية CD4+: انخفاض المستوى أقل من 200 خلية/مم3 هو المعيار الرئيسي لتشخيص مرض الإيدز. يعتبر جميع الأفراد المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية الذين لديهم عدد الخلايا الليمفاوية CD4 + 200 خلية / مم 3 أو أقل بحاجة إلى علاج مضاد للفيروسات والوقاية ضد الالتهاب الرئوي بالمتكيسة الرئوية. وعلى الرغم من أن ثلث الأشخاص المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية الذين لديهم عدد من الخلايا الليمفاوية CO4+ أقل من 200 خلية/ملم3 ليس لديهم الاعراض المتلازمةوقد أثبتت التجربة أن أعراضهم تتطور خلال الشهرين التاليين، لذلك يعتبرون جميعاً مرضى في مرحلة الإيدز.

    تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية

    كيفية معرفة ما إذا كان الشخص مصابا بفيروس نقص المناعة البشرية؟ الطريقة الأكثر شيوعًا لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية هي مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA). تُستخدم أنظمة اختبار الممتص المناعي المرتبط بالإنزيم للكشف عن الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في مصل الدم.

    يتم تأكيد الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية من خلال اختبارين مختلفين - اختبار الفحص والاختبار التأكيدي. نظرًا لحساسيتها العالية، قد تؤدي اختبارات الفحص إلى نتائج إيجابية كاذبة. لذلك، عادة عند تلقي الابتدائي نتيجة ايجابيةيتم أخذ نفس عينة الدم ويتم تكرار اختبار الفحص مرة أخرى، وإذا كانت النتيجة إيجابية مرة أخرى، عندها فقط يتم إجراء اختبار تأكيدي من نوع مختلف. يتم إجراء الاختبارات التأكيدية فقط على عينات الدم التي تكون نتيجة اختبارها إيجابية بشكل متكرر (وهي "تفاعلية").

    اختبار الفحص الأكثر شيوعًا هو مقايسة الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA). عادة، يتم استخدام التطعيم المناعي كاختبار تأكيدي. يضمن الجمع بين نوعين مختلفين من الاختبارات أن النتائج التي يتم الحصول عليها "دقيقة للغاية".

    تستخدم أنظمة اختبار الفحص بروتينات فيروس نقص المناعة البشرية التي تم إنشاؤها بشكل مصطنع والتي "تلتقط" أجسامًا مضادة محددة ينتجها الجسم استجابةً للبروتينات الفيروسية. وبمجرد التقاط الأجسام المضادة، "يمكن اكتشافها بواسطة الكواشف التي يتم استخدامها مع مؤشر، مثل الإنزيم، الذي يسبب تغير اللون". تتم قراءة تغييرات اللون بواسطة الجهاز الذي يحدد النتيجة. يعمل النشاف المناعي بطريقة مماثلة، ولكنه يستخدم مجالًا كهربائيًا لتمييز المكونات المختلفة بناءً على وزنها الجزيئي. وهذا يسمح باكتشاف الأجسام المضادة لمستضدات فيروسية محددة، والتي يتم بعد ذلك تصويرها على الورق على أنها "خطوط" يمكن تمييزها. يمكن لأنظمة الاختبار الحديثة اكتشاف الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية خلال 3-5 أسابيع لدى معظم الأشخاص.

    إذا كان هناك خطر الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، متى يمكنك إجراء الاختبار؟

    لا يمكن لمقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)، والتي تستخدم لتشخيص فيروس نقص المناعة البشرية، أن تظهر نتائجها إلا بعد عدة أسابيع من الإصابة. هذا النوع من التحليل لا يحدد الفيروس نفسه، بل الأجسام المضادة له. عند بعض الأشخاص، تكون الأجسام المضادة موجودة بكميات كافية في الدم بعد أسبوعين. ومع ذلك، يستغرق تكوين الأجسام المضادة وقتًا أطول لدى معظم الأشخاص (التحويل المصلي). لكي تكون نتيجة الاختبار موثوقة بما فيه الكفاية، من الضروري أن يكون قد مر حوالي 3 أشهر منذ حدوث الموقف الخطير. في بعض الأحيان يستغرق تكوين الأجسام المضادة وقتًا أطول - من 3 إلى 6 أشهر.

    إذا كانت نتيجة التحليل سلبية بعد 3 أشهر فهل من الضروري إعادة الاختبار بعد 6 أشهر؟

    بالنسبة للغالبية العظمى من الأشخاص، يكون الاختبار موثوقًا به تمامًا بعد 3 أشهر (تظهر الأجسام المضادة لدى معظم الأشخاص حتى قبل ذلك). يمكنك استبعاد احتمالية الإصابة تمامًا بإجراء الاختبار بعد 6 أشهر.

    كم من الوقت يجب أن أنتظر نتائج الاختبار؟

    ويعتمد ذلك على خصائص المختبر الذي يتم فيه إجراء الاختبار. يمكن إجراء اختبار ELISA في نفس اليوم، ولكن في معظم المختبرات يمكن أن تتراوح هذه الفترة من يوم إلى يومين إلى أسبوعين. وبالنظر إلى أن انتظار النتائج يمكن أن يكون فترة غير سارة للغاية، فمن الأفضل توضيح هذه المشكلة مقدما، قبل إجراء الاختبار. يمكنك أيضًا معرفة ما إذا كانت عطلات نهاية الأسبوع والعطلات ستؤثر على توقيت الاختبار.

    ما مدى موثوقية نتيجة الاختبار الإيجابية؟

    في بعض الأحيان يكون لفحص ELISA نتائج إيجابية كاذبة (في حوالي 1٪ من الحالات)، وقد يكون سبب هذه النتيجة هو الحمل أو الالتهابات الفيروسية المختلفة أو حادث بسيط. بعد الحصول على نتيجة إيجابية، أكثر اختبار دقيق- طخة مناعية، بناء على نتائج التشخيص. تكون نتيجة اللطخة المناعية الإيجابية بعد اختبار ELISA الإيجابي موثوقة بنسبة 99.9% - وهذه هي الدقة القصوى لأي اختبار طبي. إذا كانت البقعة المناعية سلبية، فهذا يعني أن الاختبار الأول كان إيجابيًا كاذبًا، وفي الواقع فإن الشخص ليس مصابًا بفيروس نقص المناعة البشرية.

    ما هي النتيجة غير المؤكدة (المشكوك فيها)؟

    إذا كانت نتيجة ELISA إيجابية أو سلبية، فيمكن أن تكون البقعة المناعية إيجابية أو سلبية أو غير محددة. نتيجة المناعية غير المحددة، أي. يمكن ملاحظة وجود بروتين واحد على الأقل للفيروس في الكتلة المناعية إذا حدثت العدوى مؤخرًا ولا يزال هناك عدد قليل من الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في الدم، وفي هذه الحالة ستصبح الكتلة المناعية إيجابية بعد مرور بعض الوقت. كما قد تظهر نتيجة غير مؤكدة في حالة عدم إصابة البعض بفيروس نقص المناعة البشرية الأمراض المزمنةالطبيعة الأيضية، أو أثناء الحمل. في هذه الحالة، إما أن تصبح البقعة المناعية سلبية أو سيتم العثور على سبب النتيجة غير المحددة.

    هل أحتاج إلى إجراء اختبار فيروس نقص المناعة البشرية عند التقدم لوظيفة؟

    وفقًا لتشريعات الاتحاد الروسي، قد يكون اختبار فيروس نقص المناعة البشرية إلزاميًا فقط للمتبرعين بالدم والمواطنين الأجانب والأشخاص عديمي الجنسية الراغبين في دخول أراضي الاتحاد الروسي لمدة تزيد عن ثلاثة أشهر، بالإضافة إلى العاملين الطبيين الذين يعملون مباشرة مع دم؛ الأشخاص في السجن. يخضع جميع المواطنين الآخرين لاختبار فيروس نقص المناعة البشرية طوعًا.

    عدوى فيروس نقص المناعة البشرية– مرض ناتج عن الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية (HIV).

    فيروس نقص المناعة البشرية هو فيروس RNA ينتمي إلى عائلة الفيروسات القهقرية.

    من الخصائص الشائعة للفيروسات القهقرية وجود إنزيم - النسخ العكسي (الراجع) الذي "يزيل" نسخة دقيقة وراثياً على شكل DNA من الحمض النووي الريبي (RNA). استنادًا إلى الشكل والبنية الجينومية والخصائص الأخرى، ينتمي فيروس نقص المناعة البشرية إلى عائلة الفيروسات البطيئة، أي فيروسات العدوى البطيئة. تشمل السمات العامة للأمراض التي تسببها فيروسات هذه العائلة ما يلي: فترة حضانة طويلة ليس لها تواريخ محددة (من شهر واحد إلى 10 سنوات أو أكثر)؛ بداية غير واضحة بدون أعراض للمرض. زيادة الصورة السريرية ببطء. يتم التسبب في المرض من خلال جهاز المناعة و السرعه العاليهالتباين الجيني للفيروس. كل هذا يعقد بشكل كبير تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية وعلاجها والوقاية منها.

    يوجد حاليًا نوعان معروفان من فيروس نقص المناعة البشرية: فيروس نقص المناعة البشرية -1 وفيروس نقص المناعة البشرية -2. يتميز المرض الناجم عن فيروس نقص المناعة البشرية -2 بديناميكيات بطيئة ومسار أطول.

    علم الأوبئة وطرق الانتقال:

    إن الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية هي مرض أنثروبوني، والمصدر الوحيد للعامل الممرض للشخص هو حامل الفيروس ومريض الإيدز.

    تتواجد الجسيمات الفيروسية (virions) في جميع السوائل البيولوجية في الجسم، ولكن بتركيزات متفاوتة. أعلى مستويات الفيروس موجودة في الدم والسائل المنوي.

    ينتقل الفيروس بثلاث طرق:

    - من الأم إلى الجنين/الوليد.

    لا ينتقل فيروس نقص المناعة البشرية من خلال الاتصالات المنزلية العادية أو من خلال الرذاذ المحمول جوا. ولم يتم تسجيل أي حالات انتقال فيروس نقص المناعة البشرية عن طريق لدغات الحشرات الماصة للدم.

    ومع ذلك، فإن فيروس نقص المناعة البشرية ليس معديًا مثل الأمراض المنقولة جنسيًا الأخرى. وهكذا، من بين أكثر من 1600 شريك جنسي للأشخاص المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية الذين تم فحصهم، أصيب 15٪ فقط بهذا الفيروس.

    يتم تحديد تطور الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية من خلال عاملين متفاعلين: الخاصية المسببة للأمراض الرئيسية لفيروس نقص المناعة البشرية، وهي إضعاف الجهاز المناعي للشخص المصاب، والاستجابة المناعية المحددة للجسم التي تتطور أثناء سير المرض.

    فيروس نقص المناعة البشرية هو فيروس شامل، ولكن الخلايا المستهدفة الرئيسية هي الخلايا التائية المساعدة، التي تحمل مئات من جزيئات مستقبلات CD4 + على أغشيةها. في الجسم، يتحول الفيروس من حالة أقل عدوانية إلى حالة أكثر عدوانية، ويتم التعبير عنها بانخفاض تدريجي في عدد الخلايا الليمفاوية CD4+ في الدم حتى اختفائها التام ويؤدي إلى تفاقمها. الصورة السريرية.

    من لحظة الإصابة حتى ظهور أجسام مضادة محددة مضادة للفيروسات، عادة ما يستغرق الأمر من 6 إلى 8 أسابيع. تسمى الفترة بين الإصابة وظهور الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في مصل الدم بفترة "النافذة".

    من ناحية، يعد الجهاز المناعي هدفًا للفيروس، ومن ناحية أخرى، فهو ينتج بنفسه أجسامًا مضادة محددة له. في الوقت نفسه، يحدث تطوير عمليات المناعة الذاتية في الجهاز المناعي، مما يؤدي إلى تفاقم عملية تدمير خلايا وأنسجة الجسم.

    تتميز الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية بغياب صورة سريرية محددة، وعادة ما يتم تشخيصها على أساس التاريخ الطبي الذي تم جمعه بعناية مع عدد من العلامات المؤكدة عن طريق التشخيص المختبري. في عام 1983، وضعت منظمة الصحة العالمية معايير معينة يمكن من خلالها تحديد وجود الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية في حالة عدم توفر التشخيص المصلي (معايير بانغي). وتشمل هذه:

    - فقدان وزن الجسم بنسبة تزيد عن 10% من وزنه الأصلي؛

    الإسهال المزمنلأكثر من شهر؛

    - حمى طويلة الأمد لمدة شهر (مستمرة أو متقطعة).

    - السعال المستمر لأكثر من شهر.

    - التهاب الجلد الحكة المعمم.

    - تاريخ الهربس النطاقي.

    - مزمن تقدمي أو منتشر العدوى الهربسية(الهربس البسيط)؛

    ويمكن تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية باستخدام هذه المعايير للمريض إذا تبين أنه مصاب به معًاعلى الأقل علامتان "كبيرتان" وعلامة واحدة "صغيرة". قد يكون الأساس الكافي لتشخيص مرض الإيدز هو اكتشاف ساركوما كابوزي المعممة أو التهاب السحايا بالمستخفيات لدى المريض. ونظراً لانخفاض حساسية ونوعية هذه المعايير، طلبت منظمة الصحة العالمية لاحقاً تأكيداً مصلياً للتشخيص.

    التصنيف السريري للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية:

    مرحلة المظاهر الأولية:

    أ. مرحلة الحمى الحادة.

    ب. المرحلة بدون أعراض.

    ب. اعتلال عقد لمفية معمم مستمر.

    مرحلة الأمراض الثانوية:

    أ. فقدان الوزن أقل من 10 كجم، سطحي بكتيري، فيروسي، الالتهابات الفطريةالجلد والأغشية المخاطية، الهربس النطاقي، التهاب البلعوم المتكرر، التهاب الجيوب الأنفية.

    ب. فقدان الوزن التدريجي لأكثر من 10 كجم، والإسهال غير المبرر، والحمى لأكثر من شهر واحد، والطلاوة المشعرة، والسل الرئوي، والآفات البكتيرية أو الفطرية أو الفيروسية أو الأولية المتكررة أو المستمرة اعضاء داخلية(بدون نشر) أو آفات عميقة في الجلد والأغشية المخاطية، الهربس النطاقي المتكرر والمنتشر، ساركوما كابوزي الموضعية.

    وجود الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية يعتمد على مرحلة المرض.

    الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في الدم

    نتيجة اختبار فيروس نقص المناعة البشرية

    ثانيا. المظاهر الأولية

    ب. مرحلة عدم ظهور الأعراض

    ثالثا. أمراض ثانوية

    وبعد دخول الفيروس إلى الجسم، يتكاثر في الدم. في 50٪ من الأفراد المصابين، قد تتطور الحالة البادرية خلال هذه الفترة، مصحوبة بارتفاع في درجة حرارة الجسم إلى 38.5-39.5 درجة مئوية وأعراض أخرى تشبه عدد كريات الدم البيضاء وتستمر من ثلاثة إلى 10 أيام. تمر هذه الحالة، مما يذكرنا بفترة الشفاء بعد الإصابة بالأنفلونزا.

    ابتداءً من 6-8 أسابيع من المرض، تحدث زيادة في مستوى الأجسام المضادة في الدم، أي الانقلاب المصلي. خلال هذه الفترة، قد يتطور تضخم العقد اللمفية المعمم ونقص المناعة الطفيف، ولكن في بعض المرضى تكون المظاهر السريرية للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ضئيلة. مع متلازمة نقص المناعة البشرية المكتسب الوخيم (الإيدز)، تتطور الالتهابات الانتهازية للأعضاء الداخلية بسرعة، مما يؤثر على الجهاز العصبي. ويلاحظ تنشيط النباتات الرمية على الجلد والأغشية المخاطية. تتطور ساركوما كابوزي وأورام أخرى. قد تصبح حالات العدوى مثل السل والزهري والفطار العميق وما إلى ذلك أكثر نشاطًا، ومن الأمراض المميزة للأشخاص المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية هو الالتهاب الرئوي بالمتكيسة الرئوية. في بعض المرضى، يتضخم الكبد والطحال، وهي علامة غير مواتية تشير إلى التقدم السريع للعملية. هناك أشكال دماغية من الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية - مثل التهاب السحايا الناجم عن فطريات الخميرة، وخراجات الدماغ التوكسوبلازما، والتهاب الدماغ الحاد وتحت الحاد، وأورام المخ المعزولة (الأورام اللمفاوية). قد يعاني المرضى من آفات الأوعية الدموية المختلفة.

    تشمل طرق التشخيص غير المحددة ما يلي: تحديد محتوى المجموعات السكانية الفرعية للخلايا اللمفاوية التائية في الدم، وتقييم نشاط تفاعل الخلايا اللمفاوية التائية في الدم المحيطي أو مادة الخزعة.

    تشمل طرق التشخيص المحددة ما يلي:

    — الكشف عن DNA أو RNA لفيروس نقص المناعة البشرية في الخلايا البشرية بواسطة PCR؛

    — الكشف عن الفيروسات المعدية الناضجة في السوائل والخلايا البيولوجية؛

    — تحديد البروتينات الفيروسية القابلة للذوبان (المستضدات)؛

    — تحديد الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية (ELISA، طخة مناعية، تفاعل التراص، الهطول المناعي الإشعاعي).

    طريقة الفحص التشخيصي الأكثر شيوعًا هي ELISA. قد تشير النتيجة السلبية إلى:

    — حول عدم وجود العدوى.

    - حول إجراء الدراسة قبل بداية الانقلاب المصلي (خلال فترة "النافذة" أو خلال فترات أخرى من اختفاء عيار الأجسام المضادة).

    النتائج الإيجابية يمكن أن تكون صحيحة أو خاطئة. ويمكن الحصول على نتائج إيجابية كاذبة عند فحص المرضى الذين يعانون من أمراض معدية أو مناعية ذاتية أو أورام مزمنة، والنساء الحوامل غير المصابات، والمرضى بعد عمليات نقل الدم والمرضى الذين يعانون من إدمان الكحول المزمن. أقرب وقت للكشف عن الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية هو 3-4 أسابيع من تاريخ الإصابة.

    التحليل التأكيدي. طخة مناعية.

    بعد اختبار الفحص، يتم فحص جميع النتائج الإيجابية في نظام مقايسة مناعية إنزيمية آخر، ثم في اختبار أكثر حساسية - المناعي. الأمصال المؤكدة بهذا الاختبار يمكن اعتبارها إيجابية حقيقية.

    قبل إجراء اختبار فيروس نقص المناعة البشرية، يجب استشارة المريض (استشارة ما قبل الاختبار) حول الأسباب التي تجعل الاختبار ضروريًا، وبعد الحصول على النتيجة، وفقًا لذلك، يجب إجراء استشارة ما بعد الاختبار لشرح النتيجة الدراسة. ويجب الحفاظ على السرية في جميع مراحل التشخيص والعلاج اللاحق.

    هناك أربعة طرق رئيسية لعلاج عدوى فيروس نقص المناعة البشرية: المسببة، والتحفيز المناعي، والإحلال المناعي، والطرق المسببة للأمراض (ضد الالتهابات الثانوية).

    نظائرها النيوكليوتيدية أو مثبطات الفئات الأخرى لديها القدرة على قمع إنزيم النسخ العكسي الفيروسي. أول دواء لعلاج مرضى الإيدز كان نظير النوكليوتيدات، أزيدوثيميدين. الدواء يسبب آثار جانبية، مما يؤثر في المقام الأول على تكون الدم، وفي معظم المرضى، مع الاستخدام طويل الأمد (أكثر من 6 أشهر)، تتطور المقاومة له. حاليًا، يتم استخدام أكثر من 10 أدوية جديدة - مثبطات الأنزيم البروتيني والنسخ العكسي. يعقد عملية الإنشاء بشكل كبير أدوية فعالةمعدل سريع لتحور فيروس نقص المناعة البشرية في الجسم، يصاحبه ظهور سلالات مقاومة للعلاج.

    فقط النهج المشترك هو الذي يمكن أن يحد من تكاثر الفيروس ويمنع تطور مقاومة الأدوية. أصبح العلاج الثلاثي المضاد للفيروسات القهقرية (مزيج من ثلاثة أدوية تعتمد على نظائرها النيوكليوزيدية ومثبطات الأنزيم البروتيني) هو العلاج القياسي.

    يتم إنتاجه بعدة طرق مختلفة. ويبدو أنه لا يوجد شيء أسهل من التعرف على هذا المرض من خلال أخذ عينات من الدم. ولكنه ليس كذلك. يمكن بالفعل اكتشاف تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية بهذه الطريقة، ولكن يتم إجراء المزيد من الأبحاث باستخدام طرق مختلفة. إنهم يحددون إلى حد كبير العلاج الذي سيتم وصفه للمريض وما هي التدابير التي سيتم اتخاذها لاحقًا. من بين الطرق الأكثر شيوعًا والفعالة للغاية تحليل الفحص والتنقيط المناعي. وينبغي النظر في كل واحد منهم بمزيد من التفصيل.

    تشخيص الإيدز: تحليل الفحص

    يتم استخدام اختبار الفحص أو طريقة اختبار ELISA في المرحلة الأولية لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. عند تطوير هذه الطريقة، تم إنشاء بروتينات الفيروس بشكل مصطنع في المختبر. يتفاعلون مع الأجسام المضادة بطريقة خاصة. يتم إنتاج هذا الأخير في الجسم عندما تظهر فيه خلايا مصابة بمرض رهيب. يتم التشخيص المختبري لفيروس نقص المناعة البشرية في هذه الحالة باستخدام الإنزيمات الاصطناعية. وعندما تتفاعل مع الأجسام المضادة، فإنها تتحول إلى لون معين. يتم وضع شريط به مؤشر، بعد وصول الدم إليه، تحت جهاز خاص يمكن من خلاله تحديد ما إذا كان الشخص مصابًا بهذا المرض أم لا. تتيح الطرق الحديثة لتشخيص فيروس نقص المناعة البشرية، بما في ذلك ELISA، تحديد حقيقة الإصابة أو عدم وجودها بدقة عالية. ولكن، مثل جميع المعدات، فإن جهاز تحليل الفحص به خطأ. ولهذا السبب، إذا لزم الأمر، يقوم المريض بإعادة إجراء الاختبار.

    ومن المهم أن نعرف أن اختبار ELISA يعد من أقدم الطرق لتحديد وجود فيروس نقص المناعة في الجسم. إن الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية هي تشخيص لا يمكن اكتشافه إلا بعد عدة أسابيع من الإصابة. عندما تدخل الخلايا المصابة إلى مجرى الدم، يبدأ جهاز المناعة في الجسم في المقاومة بنشاط. يتم إنتاج الأجسام المضادة، والتي يتم الكشف عنها عن طريق الاختبارات المعملية بعد أسبوعين أو ثلاثة أسابيع. يتيح التشخيص المبكر لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية باستخدام اختبار ELISA اكتشاف الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في دم الشخص. وهذا هو الفرق الرئيسي بين الأساليب الحديثة الأخرى.

    ومن الجدير بالذكر أن بعض الأشخاص لديهم أجسام مضادة لذلك هذا المرضالبدء في إنتاجها في وقت لاحق. من لحظة الإصابة إلى بداية هذه العملية، يمكن أن يستغرق الأمر من ثلاثة إلى ستة أسابيع. ولهذا السبب يوصي الخبراء الطبيون بإجراء اختبار فحص بعد أربعة إلى خمسة أسابيع من ممارسة الجنس دون وقاية أو أي سبب آخر للاشتباه في الإصابة العرضية.

    لقد تم تطوير طرق التشخيص المختبري لعدوى فيروس العوز المناعي البشري بواسطة ELISA على مدى فترة طويلة من الزمن. حتى الآن، هناك أربعة أجيال من الاختبارات. وأكثرها دقة وفعالية هي تلك التي تم تطويرها مؤخرًا. يتم إجراء التشخيص المختبري لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية والإيدز باستخدام الجيل الثالث والرابع من اختبارات ELISA باستخدام البروتينات والببتيدات المؤتلفة. تبلغ حساسية هذه الاختبارات للأجسام المضادة التي ينتجها الجسم 92 – 93%. نحن نتحدث عن طرق البحث الروسية. لقد تعلم الأوروبيون إجراء اختبارات مماثلة بحساسية تصل إلى 99٪.

    تُستخدم الأساليب الحديثة للتشخيص المختبري لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية استنادًا إلى ELISA ليس فقط للكشف عن وجود المرض. وباستخدام تحليل الفحص، من الممكن مراقبة انتشار فيروس نقص المناعة، وكذلك جمع مواد الاختبار قبل سحب الدم من المتبرعين.

    ELISA هي طريقة قياسية لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية: كيف يتم ذلك ولماذا تعطي نتيجة خاطئة؟

    يعد تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية والإيدز باستخدام ELISA إجراءً قياسيًا. يتم أخذ دم المريض من الوريد. خمسة ملليلتر من المادة كافية للتحليل. مرضي يتم تشخيص النوعين 2 و1 من فيروس نقص المناعة البشرية بعد ثماني ساعات على الأقل من تناوله. ينصح الأطباء بفعل ذلك في الصباح على معدة فارغة. وتعرف نتائج الدراسة الكاملة خلال يومين أو ثلاثة أيام. يتم إجراء الفحص السريع في وقت أقل. وكقاعدة عامة، يستغرق هذا بضع ساعات فقط. ومع ذلك، فإن الخطأ في هذه الحالة يزيد. يعد التشخيص السريع لفيروس نقص المناعة البشرية ضروريا في حالات الطوارئ، على سبيل المثال، عندما يحتاج المريض إلى عملية جراحية عاجلة. ويجب إجراء مثل هذا التحليل قبل التدخلات الجراحية غير المجدولة، لأنه إذا كان المريض يعاني من فيروس نقص المناعة، يلاحظ الأطباء زيادة تدابير السلامة. يعد التشخيص السريري لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية في فترة زمنية قصيرة ضروريًا أيضًا في الحالات التي يجب فيها جمع الدم المتبرع به بسرعة لإنقاذ مريض آخر.

    هناك حالات تم فيها تشخيص إصابة شخص ما بالإيدز أو فيروس نقص المناعة البشرية، ولكن نتيجة لذلك لم يتم تأكيد ذلك، أو العكس. لماذا يحدث هذا في حالة اختبار ELISA؟ قد تكون النتيجة السلبية الكاذبة بسبب حقيقة أن الدم تم إعداده بشكل غير صحيح للاختبار. في بعض الأحيان يكون السبب في ذلك هو التنفيذ غير السليم لمجموعته. لا يتم تأكيد النتيجة السلبية الكاذبة عند التحقق من تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية حتى لو تم أخذ مواد الدراسة في وقت مبكر جدًا. بعد كل شيء، يجب أن تكون قد مرت ثلاثة أسابيع على الأقل بعد الإصابة. هناك حالات تكون فيها نتيجة الكشف عن فيروس نقص المناعة إيجابية كاذبة. انها مرتبطة مع الحالة العامةالجهاز المناعي والهرموني في جسم الإنسان. في معظم الحالات، يعاني المريض من أمراض نتيجة نتيجة إيجابية كاذبة. نحن نتحدث عن التهاب الكبد الكحولي، حيث ينتج الكبد إنزيمات خاصة يمكن أن تسبب تشخيصًا غير صحيح لفيروس نقص المناعة البشرية. الحمل وبعض أمراض المناعة الذاتية، إلى جانب المايلوما المتعددة يمكن أن يسبب أيضًا نتيجة إيجابية كاذبة. يمكن أن تشمل هذه القائمة المرضى الذين يخضعون لغسيل الكلى والأشخاص الذين تم تطعيمهم قبل وقت قصير من التشخيص التفريقي لفيروس نقص المناعة البشرية.

    عند الحديث عن تحليل الفحص، من المهم ملاحظة أن طريقة البحث هذه تتطلب تأكيدًا. يقوم الأطباء دائمًا، قبل إجراء تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية بناءً عليه، بإرسال المريض لإجراء النشاف المناعي.

    الطرق الأساسية للتشخيص المختبري للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية: التطعيم المناعي

    يتم اكتشاف مرض الإيدز، الذي يرتبط تشخيصه وعلاجه ارتباطًا وثيقًا، بعدة طرق. كما ذكرنا سابقًا، اختبار ELISA واحد لا يكفي لتحديد التشخيص نهائيًا. يتم استكمال التشخيص التفريقي لعدوى فيروس العوز المناعي البشري في هذه الحالة عن طريق التطعيم المناعي. في الطب الحديث يطلق عليه الطريقة التأكيدية النهائية للتشخيص. في هذه الحالة، يتم استخدام البروتينات الموجودة في دم المريض للبحث. ويتم فصلهم في هلام خاص، وبعد ذلك تتاح للعاملين في المختبرات فرصة دراسة التركيب الجزيئي للدم.

    ويتراوح الوقت المستغرق لتشخيص فيروس نقص المناعة البشرية باستخدام هذه الطريقة من يوم إلى ثلاثة أيام. ومن أجل الدراسة، يتم أخذ الدم من وريد الشخص ووضعه على جهاز اختبار يحتوي على مادة هلامية. والنتيجة المشكوك فيها يمكن أن تحدث أثناء الحمل أو وجود عمليات أورام أو مرض السل. يمكن أن يحدث رد فعل سلبي كاذب للاختبار إذا تم إجراء الاختبار بشكل غير صحيح أو إذا تم إجراؤه مبكرًا جدًا. يجب أن تمر ثلاثة أسابيع على الأقل من لحظة الإصابة. بعد كل شيء، يعتمد الوقت الذي يتم بعده تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية بشكل مباشر على حالة الجهاز المناعي.

    طرق أخرى لتشخيص مرض الإيدز وفيروس نقص المناعة البشرية

    تُستخدم طرق التشخيص الإشعاعي للإيدز، كقاعدة عامة، في المراحل النهائية أو الثانوية. بمساعدتهم، من الممكن تحديد التغيرات التي تحدث في الجسم بسبب الأمراض الثانوية أو الالتهابات الانتهازية.

    يتم استخدام تشخيصات الرنين الحيوي لفيروس نقص المناعة البشرية، والتي تسمى أيضًا المسح غير الخطي، بشكل رئيسي في العيادات الخاصة للكشف عن فيروس نقص المناعة البشرية. يعتبر الطب الرسمي أن هذه الطريقة غير دقيقة وفعالة بما فيه الكفاية. ربما يؤدي تحسين التشخيص غير الخطي في المستقبل إلى تحديد هذا التشخيص الرهيب بالفعل في فترة الحضانة.

    تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية: الطريقة المصلية وخصائصها

    انها المقارنة تقنية جديدة، حيث تعتمد المعايير المختبرية لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية على مبدأ الجسم المضاد للمستضد. وفي حالة فيروس نقص المناعة، يتم البحث عن الأجسام المضادة للفيروس في جسم الإنسان. للقيام بذلك، يتم استخدام مستضد مشتق بشكل مصطنع، والذي يجب أن تتفاعل معه الأجسام المضادة. تسبب العلامات المصلية المحددة للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية تغيرات محددة في تكوين الدم. ومن الجدير بالذكر أن طريقة البحث هذه هي الأكثر فعالية في المرحلة الحادة، والتي تنتهي بالانقلاب المصلي. ويلي ذلك فترة كامنة بدون أعراض، حيث ليس من السهل العثور على المستضد.

    التشخيص المرجعي للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية: الوصف والميزات

    تعتبر القيم المرجعية لفيروس نقص المناعة البشرية هي الأكثر دقة في تحديد التشخيص. تجمع طريقة البحث هذه بين اختبار ELISA والتطعيم المناعي. يسمح المختبر المرجعي لتشخيص فيروس نقص المناعة البشرية بجمع العينات ومعالجتها لاحقًا بطريقتين. يتيح لك ذلك الحصول على النتيجة الأكثر دقة خلال 24 ساعة. إن إعادة فحص التحليل الذي تم الحصول عليه في المختبر المرجعي أمر ضروري فقط إذا كانت البيانات الواردة من اختبار ELISA والتطعيم المناعي تتعارض مع بعضها البعض. هذا كافي حدث نادر، والذي يحدث غالبًا عند الأشخاص المصابين بالأمراض المصاحبة الموصوفة أعلاه.

    يصبح تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية في الوقت المناسب إجراءً مهمًا للغاية، نظرًا لأن البدء المبكر في العلاج يمكن أن يحدد إلى حد كبير تطور المرض وإطالة عمر المريض. في السنوات الأخيرة، تم إحراز تقدم كبير في تحديد هذا المرض الرهيب: يتم استبدال أنظمة الاختبار القديمة بأنظمة أكثر تقدما، وأصبحت طرق الفحص أكثر سهولة، وتتزايد دقتها بشكل كبير.

    في هذا المقال سنتحدث عنه الأساليب الحديثةتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، والمعرفة التي تكون مفيدة لعلاج هذه المشكلة في الوقت المناسب والحفاظ على نوعية حياة طبيعية للمريض.

    طرق تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية

    في روسيا، يتم تنفيذ إجراء قياسي لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، والذي يتضمن مستويين:

    • نظام اختبار ELISA (تحليل الفحص)؛
    • التطعيم المناعي (IB).

    يمكن أيضًا استخدام طرق أخرى للتشخيص:

    • اختبارات سريعة.

    أنظمة اختبار إليسا

    في المرحلة الأولى من التشخيص، يتم استخدام اختبار الفحص (ELISA) للكشف عن الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، والذي يعتمد على بروتينات فيروس نقص المناعة البشرية التي تم إنشاؤها في المختبرات والتي تلتقط أجسامًا مضادة محددة يتم إنتاجها في الجسم استجابةً للعدوى. وبعد تفاعلها مع الكواشف (الإنزيمات) الخاصة بنظام الاختبار، يتغير لون المؤشر. بعد ذلك، تتم معالجة تغيرات اللون هذه باستخدام معدات خاصة تحدد نتيجة التحليل الذي يتم إجراؤه.

    يمكن أن تظهر اختبارات ELISA هذه النتائج في غضون أسابيع قليلة بعد الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. ولا يحدد هذا الاختبار وجود الفيروس، ولكنه يكشف عن إنتاج الأجسام المضادة له. في بعض الأحيان، يبدأ إنتاج الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في جسم الإنسان بعد أسبوعين من الإصابة، ولكن يتم إنتاجها عند معظم الأشخاص في وقت لاحق، بعد 3-6 أسابيع.

    هناك أربعة أجيال من اختبارات ELISA بحساسيات مختلفة. في السنوات الأخيرة، تم استخدام أنظمة اختبار الجيل الثالث والرابع بشكل متزايد، والتي تعتمد على الببتيدات الاصطناعية أو البروتينات المؤتلفة ولها خصوصية ودقة أكبر. ويمكن استخدامها لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، ومراقبة انتشار فيروس نقص المناعة البشرية، وضمان السلامة عند اختبار الدم المتبرع به. تبلغ دقة أنظمة اختبار ELISA من الجيل الثالث والرابع 93-99% (الاختبارات المنتجة في أوروبا الغربية أكثر حساسية - 99%).

    لإجراء اختبار ELISA، يتم أخذ 5 مل من الدم من وريد المريض. يجب أن تمر 8 ساعات على الأقل بين الوجبة الأخيرة والتحليل (عادة ما يتم إجراؤه في الصباح على معدة فارغة). يوصى بإجراء مثل هذا الاختبار في موعد لا يتجاوز 3 أسابيع بعد الإصابة المشتبه بها (على سبيل المثال، بعد الاتصال الجنسي غير المحمي مع شريك جنسي جديد).

    يتم الحصول على نتائج اختبار ELISA خلال 2-10 أيام:

    • النتيجة السلبية: تشير إلى عدم الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية ولا تتطلب الاتصال بأخصائي؛
    • نتيجة سلبية كاذبة: يمكن ملاحظتها المراحل الأولىالعدوى (تصل إلى 3 أسابيع)، مع مراحل متأخرةالإيدز مع كبت المناعة الشديد وإعداد الدم غير السليم.
    • نتيجة إيجابية كاذبة: يمكن ملاحظتها في بعض الأمراض وفي حالة تحضير الدم بشكل غير صحيح؛
    • نتيجة إيجابية: تشير إلى الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، وتتطلب إجراء فحص البكالوريا الدولية واتصال المريض بأخصائي في مركز الإيدز.

    لماذا يمكن أن يعطي اختبار ELISA نتائج إيجابية كاذبة؟

    يمكن أن تحدث نتائج اختبار ELISA الإيجابية الكاذبة بسبب معالجة الدم غير السليمة أو في المرضى الذين يعانون من الحالات والأمراض التالية:

    • ورم نقيي متعدد؛
    • الأمراض المعدية الناجمة عن فيروس ابشتاين بار.
    • الدولة بعد؛
    • أمراض المناعة الذاتية؛
    • على خلفية الحمل.
    • الحالة بعد التطعيم.

    للأسباب الموصوفة أعلاه، قد تكون هناك أجسام مضادة غير محددة متفاعلة في الدم، ولم يتم إنتاجها عن طريق الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية.

    في السنوات الأخيرة، انخفض تواتر النتائج الإيجابية الكاذبة بشكل ملحوظ بسبب استخدام أنظمة اختبار الجيل الثالث والرابع، التي تحتوي على ببتيد أكثر حساسية وبروتينات مؤتلفة (يتم تصنيعها باستخدام الهندسة الوراثيةفي المختبر). بعد إدخال اختبارات ELISA هذه، انخفض تكرار النتائج الإيجابية الكاذبة بشكل ملحوظ ويبلغ حوالي 0.02-0.5٪.

    النتيجة الإيجابية الكاذبة لا تعني أن الشخص مصاب بفيروس نقص المناعة البشرية. في مثل هذه الحالات، توصي منظمة الصحة العالمية بإجراء اختبار ELISA آخر (بالضرورة الجيل الرابع).

    يتم إرسال دم المريض إلى مختبر مرجعي أو تحكيمي يحمل علامة "تكرار" ويتم اختباره باستخدام نظام اختبار ELISA من الجيل الرابع. إذا كانت نتيجة التحليل الجديد سلبية، فإن النتيجة الأولى تعتبر خاطئة (إيجابية كاذبة) ولا يتم تنفيذ IS. إذا كانت النتيجة إيجابية أو مشكوك فيها خلال الاختبار الثاني، فيجب أن يخضع المريض للـ IB بعد 4-6 أسابيع لتأكيد أو دحض الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية.

    النشاف المناعي

    لا يمكن إجراء تشخيص نهائي للإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية إلا بعد الحصول على نتيجة إيجابية للتطعيم المناعي (IB). لتنفيذها، يتم استخدام شريط النيتروسليلوز، الذي يتم تطبيق البروتينات الفيروسية عليه.

    يتم أخذ عينات الدم لـ IB من الوريد. بعد ذلك، يخضع لعملية معالجة خاصة ويتم فصل البروتينات الموجودة في مصله في هلام خاص وفقًا لشحنتها ووزنها الجزيئي (يتم إجراء المعالجة باستخدام معدات خاصة تحت تأثير المجال الكهربائي). يتم وضع شريط النيتروسليلوز على هلام مصل الدم ويتم إجراء النشاف ("النشاف") في غرفة خاصة. تتم معالجة الشريط وإذا كانت المواد المستخدمة تحتوي على أجسام مضادة لفيروس نقص المناعة البشرية، فإنها ترتبط بالعصابات المستضدية الموجودة على البكالوريا الدولية وتظهر كخطوط.

    يعتبر IB إيجابيًا إذا:

    • وفقًا لمعايير مراكز مكافحة الأمراض والوقاية منها الأمريكية - يوجد خطين أو ثلاثة خطوط gp41، p24، gp120/gp160 على الشريط؛
    • وفقًا لمعايير إدارة الغذاء والدواء الأمريكية، يحتوي الشريط على خطين p24، p31 وخط gp41 أو gp120/gp160.

    في 99.9% من الحالات، تشير نتيجة البكالوريا الدولية الإيجابية إلى الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية.

    إذا لم تكن هناك خطوط، فإن IB سلبي.

    عند تحديد الخطوط مع gr160، gr120 و gr41، فإن البكالوريا الدولية مشكوك فيها. قد تحدث هذه النتيجة عندما:

    • أمراض الأورام.
    • حمل؛
    • عمليات نقل الدم المتكررة.

    في مثل هذه الحالات، يوصى بتكرار الدراسة باستخدام مجموعة أدوات من شركة أخرى. إذا ظلت النتيجة مشكوك فيها بعد البكالوريا الدولية الإضافية، فإن المراقبة ضرورية لمدة ستة أشهر (يتم إجراء البكالوريا الدولية كل 3 أشهر).

    تفاعل البوليميراز المتسلسل

    يمكن لاختبار PCR اكتشاف الحمض النووي الريبوزي (RNA) للفيروس. حساسيته عالية جدًا وتسمح باكتشاف الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية خلال 10 أيام بعد الإصابة. في بعض الحالات، قد يعطي تفاعل البوليميراز المتسلسل نتائج إيجابية كاذبة، لأنه حساسية عاليةقد تتفاعل أيضًا مع الأجسام المضادة للعدوى الأخرى.

    هذه التقنية التشخيصية باهظة الثمن وتتطلب معدات خاصة ومتخصصين مؤهلين تأهيلاً عاليًا. هذه الأسباب لا تجعل من الممكن إجراء اختبارات جماعية للسكان.

    يستخدم PCR في الحالات التالية:

    • للكشف عن فيروس نقص المناعة البشرية عند الأطفال حديثي الولادة المولودين من أمهات مصابات بفيروس نقص المناعة البشرية؛
    • للكشف عن فيروس نقص المناعة البشرية في "فترة النافذة" أو في حالة وجود عدوى بكتيرية مشكوك فيها؛
    • للسيطرة على تركيز فيروس نقص المناعة البشرية في الدم.
    • لدراسة دم المتبرعين.

    لا يؤدي اختبار PCR وحده إلى تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، ولكن يتم إجراؤه كفحص طريقة إضافيةالتشخيص لحل المواقف المثيرة للجدل.


    طرق صريحة

    واحدة من الابتكارات في تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية هي الاختبارات السريعة، والتي يمكن تقييم نتائجها في غضون 10-15 دقيقة. يتم الحصول على النتائج الأكثر فعالية ودقة باستخدام الاختبارات المناعية بناءً على مبدأ التدفق الشعري. وهي عبارة عن شرائط خاصة يُوضع عليها الدم أو سوائل الاختبار الأخرى (اللعاب والبول). في حالة وجود أجسام مضادة لفيروس نقص المناعة البشرية، بعد 10-15 دقيقة يظهر شريط ملون وشريط تحكم في الاختبار - نتيجة إيجابية. إذا كانت النتيجة سلبية، يظهر شريط التحكم فقط.

    كما هو الحال مع اختبارات ELISA، يجب تأكيد نتائج الاختبارات السريعة عن طريق تحليل IB. فقط بعد ذلك يمكن تشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية.

    تتوفر مجموعات اختبار منزلية سريعة. اختبار OraSure Technologies1 (الولايات المتحدة الأمريكية) معتمد من إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA)، وهو متاح بدون وصفة طبية ويمكن استخدامه للكشف عن فيروس نقص المناعة البشرية (HIV). بعد الاختبار، إذا كانت النتيجة إيجابية، ينصح المريض بالخضوع للفحص في مركز متخصص للتأكد من التشخيص.

    اختبارات أخرى للاستخدام المنزلي لم تتم الموافقة عليها بعد من قبل إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA) وقد تكون نتائجها مشكوك فيها للغاية.

    على الرغم من أن الاختبارات السريعة أقل دقة من اختبارات ELISA من الجيل الرابع، إلا أنها تستخدم على نطاق واسع لإجراء اختبارات إضافية للسكان.

    يمكنك إجراء اختبارات للكشف عن الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية في أي عيادة أو مستشفى المنطقة المركزي أو مراكز الإيدز المتخصصة. يتم تنفيذها على أراضي روسيا بسرية تامة أو بشكل مجهول. يمكن لكل مريض أن يتوقع الحصول على استشارة طبية أو نفسية قبل الاختبار أو بعده. سيكون عليك فقط دفع تكاليف اختبارات فيروس نقص المناعة البشرية في الإعلانات التجارية المؤسسات الطبيةوفي العيادات والمستشفيات العامة يتم إجراؤها مجانًا.

    اقرأ عن الطرق التي يمكن أن تصاب بها بفيروس نقص المناعة البشرية وما هي الخرافات الموجودة حول احتمالات الإصابة بالعدوى.



    جديد على الموقع

    >

    الأكثر شعبية