Идэвхгүй наалдуулах урвал. Шууд бус агглютинацийн урвал. Шууд бус буюу идэвхгүй гемагглютинацийн урвал (IRHA, RPHA). Урвуу RNGA. Идэвхгүй гемагглютинацийг дарангуйлах урвал (PHA).
Эдгээр урвалуудгэж нэрлэдэг шууд бус (идэвхгүй), Тэд янз бүрийн корпускуляр хэсгүүдийн гадаргуу дээр зохиомлоор шингээгдсэн Ag (эсвэл AT) ашигладаг тул.
Шууд бус буюу идэвхгүй гемагглютинацийн урвал (RNGA, RPGA) нь хамгийн мэдрэмтгий ийлдэс судлалын урвалуудын нэг юм. Энэ нь AT-ийн янз бүрийн улаан эсүүд дээр тогтсон Ag-тэй харилцан үйлчлэх чадвар дээр суурилдаг бөгөөд дараа нь агглютин болдог. Оношлогооны тогтвортой байдлыг хангахын тулд цусны улаан эсийг хэлбэржүүлдэг.
Урвуу RNGAцусны ийлдэс дэх Ag-ийг илрүүлэхэд ашигладаг; Энэ зорилгоор эритроцит дээр Ag биш, харин AT тогтоогддог. Энэ төрлийн урвалыг халдварт өвчнийг оношлох, жирэмслэлтийг тогтоох, илрүүлэхэд өргөн ашигладаг хэт мэдрэг байдалэм гэх мэт.
Тоормосны хариу үйлдэл идэвхгүй гемагглютинаци (RTPGA) - Цаашдын хөгжил RNGA; тодорхой утгаараа түүний онцлогийг хянадаг. Дургүй RNGA, гурван бүрэлдэхүүн хэсгийг агуулсан; Ag, AT ба Ag (AT) нь эритроцитуудад шингэдэг. Эхлээд Ag нь AT (стандарт антисерум) -тай урвалд ордог бөгөөд дараа нь ижил Ag (эсвэл AT) -аар мэдрэмтгий эритроцитуудыг холимогт нэмнэ. Хэрэв Ag-ийн AT-тай харилцан үйлчлэлийн явцад системд чөлөөт AT (эсвэл Ag) үлдэхгүй бол эритроцитын диагностикумын наалдац ажиглагдахгүй.
Энэ нь цусны улаан эс буюу төвийг сахисан бодисыг ашигладаг синтетик материал(жишээлбэл, латекс тоосонцор), түүний гадаргуу дээр эсрэгтөрөгч (нян, вирус, эд) эсвэл эсрэгбиемүүд шингэдэг. Тохиромжтой ийлдэс эсвэл эсрэгтөрөгчийг нэмсэн тохиолдолд тэдгээрийн наалдац үүсдэг. Антигенээр мэдрэмтгий болсон цусны улаан эсийг антиген эритроцит диагностикум гэж нэрлэдэг бөгөөд эсрэгбиемийг илрүүлэх, титрлэхэд ашигладаг. Эритроцитууд эсрэгбиемүүдэд мэдрэмтгий байдаг. иммуноглобулин эритроцитийн оношлогоо гэж нэрлэгддэг ба эсрэгтөрөгчийг илрүүлэхэд ашигладаг.
Идэвхгүй гемагглютинацийн урвал нь бактерийн улмаас үүссэн өвчнийг оношлоход ашиглагддаг. хижиг халууралтмөн паратифийн халууралт, цусан суулга, бруцеллёз, тахал, холер гэх мэт), эгэл биетэн (хумхаа) болон вирус (томуу, аденовирусын халдвар, вируст гепатитБ, улаанбурхан, хачигт энцефалит, Крымын цусархаг халууралт гэх мэт), мөн зарим дааврыг тодорхойлохын тулд өвчтөний мэдрэмтгий байдлыг тодорхойлох. эмпенициллин, инсулин зэрэг гормонууд.
Идэвхгүй гемагглютинацийн урвал (RPHA). Идэвхгүй гемагглютинацийн тест нь мэдрэмтгий арга юм ийлдэс судлалын оношлогооэрт болон буцаан оношлох, түүнчлэн вакцин хийлгэсэн хүмүүсийн дархлааны байдлыг тодорхойлоход ашигладаг. Туляремитай өвчтөнд эсрэгбие нь ихэвчлэн өвчний 1, 2 дахь долоо хоногийн төгсгөлд илэрдэг бөгөөд 1-1.5 сарын дараа RPHA титрүүд хүрдэг. хамгийн их гүйцэтгэл(1: 100000-1: 20000, ховор өндөр), дараа нь тэд буурч, 1: 100-1: 200 түвшинд удаан хугацаагаар үлддэг.
Вакцин хийлгэсэн хүмүүст эсрэгбие байнга илэрдэг боловч вакцин хийснээс хойш 1-1.5 сарын дараа 1: 2000-1: 5000-аас хэтрэхгүй, 1: 20-1: 80 бага түвшинд хэдэн жилийн турш үлддэг.
RPHA-ийн үе шатыг тодорхойлох эсрэгтөрөгч нь туляреми эритроцитийн оношлогоо (антиген) юм. Уг эм нь формалинжуулсан хонины улаан цусны эсүүд бөгөөд туляремийн эсрэгтөрөгчөөр мэдрэмтгий, шингэн ба хуурай хэлбэрээр байдаг. Шингэн бэлдмэл - 10% -ийн концентрацитай формальдегидийн уусмал дахь цусны улаан эсийн 10% суспенз. Хуурай лиофильжүүлсэн бэлдмэл нь цусны улаан эсийг хадгалах бодисгүй вакуумаар хатаасан 10% суспенз юм. Хэрэглэхийн өмнө шошгон дээрх зааврын дагуу шингэлнэ. Полистирол хавтан дахь урвалыг тохируулахын тулд эдгээр эмийг хоёуланг нь 2.5% -ийн концентрацитай, бичил хэсгүүдэд урвалыг тохируулахдаа 0.5% -ийн концентрацид хэрэглэнэ.
RPGA тохируулах техник. Туршилтын ийлдсийг физиологийн уусмалаар 1:5 (1:10) шингэлж, 56 градусын температурт 30 минутын турш халаана. Үүний дараа хонины эритроцитуудын эсрэгбиемүүдийг арилгахын тулд ийлдсийг 50% формалинжуулсан хонины эритроцитийн суспензээр эмчилнэ. Үүнийг хийхийн тулд цусны улаан эсийг 1 мл ийлдэс тутамд 2 дусал (0.05 мл) хэмжээгээр нэмж, сэгсэрч сайтар холино. Цусны сийвэнг эритроцитууд бүрэн тогтох хүртэл үлдээх эсвэл тасалгааны температурт нэг цагийн дараа центрифуг хийж, дараа нь шинжилгээнд бэлдэнэ.
Шингэрүүлэх шингэнийг 0.5 мл-ийн эзэлхүүнтэй полистирол хавтан дээрх худгийн эгнээнд хийнэ. Сийвэнгийн урьдчилсан судалгааны явцад тэдгээрийг богино эгнээний хавтангаар (6 цооногоор) урвалд оруулах замаар турших нь зүйтэй. Хэрэв эсрэгбие нь богино цувралд илэрсэн бол ийлдсийг урт цуврал шингэрүүлэлтээр (12 цооногоор) дахин шалгана. Шингэрүүлэх шингэнийг асгасны дараа мөр бүрийн эхний нүхэнд (богино эсвэл урт) 0.5 мл туршилтын ийлдсийг 1:5 харьцаатай шингэлнэ. Дараа нь ижил хэмжээний ийлдэсийг хоёр дахин шингэрүүлэлтээр титрлэнэ. Тиймээс ийлдсийн шингэрүүлэлтийг богино цувралд 1:10-аас 1:320, урт цувралд 1:10-аас 1:20480 хооронд авдаг. Ийлдэсийг титрлэсний дараа цооног бүрт мэдрэмтгий эритроцитуудын 2.5% суспензээс нэг дусал (0.05 мл) нэмнэ. Нэг төрлийн суспензийг олж авах хүртэл ялтсуудын агууламжийг сайтар сэгсэрнэ. Хөдөлгөөнгүй ширээний гадаргуу дээр ялтсуудыг өрөөний температурт үлдээнэ. Урвалын урьдчилсан бүртгэлийг 2-3 цагийн дараа хийж, цусны улаан эсийг худагт бүрэн тунасны дараа титрийг эцсийн байдлаар тодорхойлно. Урвалын хувьд дараахь хяналтыг өгсөн болно: 1) 0.5 мл-ийн эзэлхүүнээр 1:10 харьцаагаар шингэлсэн сорилтын ийлдэс + мэдрэмтгий бус эритроцитуудын 2.5% суспензийн 1 дусал; 2) шингэрүүлсэн шингэнийг 0.5 мл эзэлхүүнээр + 2.5% -ийн мэдрэмтгий бус эритроцитийн суспензийн 1 дусал; 3) шингэрүүлсэн шингэнийг 0.5 мл эзэлхүүнээр + мэдрэмтгий эритроцитуудын 2.5% суспензийн 1 дусал. Бүх хяналтууд нь тодорхой сөрөг хариу үйлдэл үзүүлэх ёстой.
RPGA-ийн нягтлан бодох бүртгэл, үнэлгээ. урвалыг үнэлдэг дараах диаграм:
1) огцом эерэг хариу үйлдэл(++++) - цусны улаан эсүүд нүхний ёроолд жигд давхаргад "шүхэр" хэлбэрээр унадаг бөгөөд энэ нь ихэвчлэн ирмэг нь хайлсан байдаг;
2) эерэг урвал (+++) - цусны улаан эсүүд худгийн ёроолын 2/3-аас багагүй хэсгийг эзэлдэг;
3) сул эерэг урвал (++) - агглютинат нь жижиг бөгөөд худгийн хамгийн төвд байрладаг;
4) эргэлзээтэй хариу урвал (+) - худгийн төв хэсэгт эритроцитын тунадасны эргэн тойронд агглютинатын бие даасан үр тариа байдаг;
5) сөрөг (-) - нүхний ёроолд цусны улаан эсүүд "товчлуур" эсвэл гөлгөр, хурц ирмэгтэй жижиг цагираг хэлбэрээр байрладаг.
Сийвэнгийн титрийг сийвэнгийн хамгийн сүүлийн шингэрүүлэлт дээр үндэслэн тооцдог бөгөөд энэ нь маш тодорхой хариу үйлдэл үзүүлсэн (дор хаяж гурван нэмэлт). 1:100 ба түүнээс дээш шингэрүүлэлт нь оношлогооны титр гэж тооцогддог боловч RA-ийн нэгэн адил түүний өсөлтийг хянах шаардлагатай.
Туляремийн RPGA нь нэлээд өвөрмөц бөгөөд заримыг нь илрүүлдэг хөндлөн урвалзөвхөн бруцеллёзын ийлдэстэй. Ялгаварлан оношлох RPGA дахь титрүүдийн өндрөөр боломжтой бөгөөд энэ нь гомолог антигентэй харьцуулахад хамаагүй өндөр байдаг.
RPHA-г бичил хэмжээст суулгах техник. RPGA-ийг Такачи төрлийн микротитратор (эсвэл микропипетк бүхий дугуй ёроолтой микроплит) ашиглан бичил хэмжээст хийж болох бөгөөд энэ нь материалыг 25 мкл ба 50 мкл хэмжээтэй титрлэх боломжийг олгодог. Урвалын техник, бүх үйлдлүүдийн дараалал нь полистирол хавтанг судлахтай ижил байна. Гэсэн хэдий ч микро аргын мэдрэмж нь макро аргынхаас ихэвчлэн нэг шингэрүүлэлт (жишээ нь 2 дахин) бага байдаг гэдгийг санах нь зүйтэй.
Микротитраторт урвалыг тохируулахын тулд дусаагуурын пипетк ашиглан худаг бүрт 50 мкл эзэлхүүнтэй шингэлэх шингэн нэмнэ. Дараа нь 50 мкл толгойтой титратор ашиглан сорилтын ийлдэсийг толгойг нь дүрж цуглуулдаг. Шингэн нь титраторын толгойг дүүргэсэн эсэхийг шалгаарай. Сийвэнтэй титраторыг эхний худаг руу шилжүүлж, дотор нь байлгана босоо байрлал, хэд хэдэн хийх эргэлтийн хөдөлгөөнүүдхоёр талын аялал. Дараа нь титраторыг дараагийн худаг руу шилжүүлж, дахин давтан хийнэ. Титрлэлтийг хэд хэдэн эгнээнд нэгэн зэрэг хийж болно. Бүх цувралыг титрлэсний дараа титраторыг нэрмэл усаар (2 хэсгийг сольж) эргүүлэх хөдөлгөөнөөр угааж, арчдас ашиглан толгойноос усыг зайлуулж, шатаагч дөл дээр шатаана.
Титрлэсний дараа цооногуудад 25 мкл эритроцитын оношлогооны шингэн хийнэ. Бичил хэмжээ дэх RPHA-ийн оношлогооны концентраци 0.5% байх ёстой (жишээлбэл, цусны улаан эсийн 2.5% суспензийг 5 дахин шингэлнэ). Цусны улаан эсийг нэмсний дараа ялтсуудыг нэгэн төрлийн суспенз авах хүртэл бага зэрэг сэгсэрнэ. Үр дүнг 1-1.5 цагийн дотор бүртгэх боломжтой бөгөөд энэ нь микротитр дэх RPGA-ийн чухал давуу тал юм. Нэмж дурдахад, энэ техник нь бүх урвалын найрлага, туршилтын ийлдэсийг бага хэмжээгээр шаарддаг.
Дараах схемийн дагуу урвалыг харгалзан үзнэ.
1) "+" - цусны улаан эсүүд худгийн ёроолд доод тал нь 2/3-ыг эзэлдэг "шүхэр" хэлбэрээр жигд давхаргад унах бүрэн гемагглютинаци;
2) "+-" - хэсэгчилсэн гемагглютинаци, цусны улаан эсүүд жижиг хэмжээтэй сул цагираг хэлбэрээр ёроол руу унадаг;
3) "-" - цусны улаан эсүүд гөлгөр ирмэг бүхий жижиг товчлуур эсвэл цагираг хэлбэрээр ёроол руу унах үед цус задрахгүй байх.
RPHA-д олж авсан эерэг үр дүнгийн өвөрмөц байдлыг гурван бүрэлдэхүүн хэсгийн урвал - идэвхгүй гемагглютинацийг дарангуйлах урвал (PHA) ашиглан шалгаж болно.
RTPGA-г тохируулах техник. Энэхүү урвалыг RPGA эерэг үр дүн нь эргэлзээтэй эсвэл эпидемиологийн онцгой ач холбогдолтой үед түүний өвөрмөц байдлыг баталгаажуулахад ашигладаг. Урвалын механизм нь үхсэн туляремийн бактерийн суспензийг туршилтын ийлдсэнд нэмэхэд гемагглютинацийг тодорхой дарангуйлах явдал юм. Гурван бүрэлдэхүүн хэсэг нь урвалд харилцан үйлчилдэг: сорилтын ийлдэс, өвөрмөц туляремийн эсрэгтөрөгч ба антиген эритроцитын оношлогоо RTPHA нь ихэвчлэн 7-8 цооногийн эгнээнд байрладаг. RTPGA-тай зэрэгцүүлэн давтан RPGA суулгахыг зөвлөж байна. 0.25 мл шингэлэх шингэнийг хоёр эгнээ цооног руу хийнэ, дараа нь 0.25 мл эзэлхүүнтэй туршилтын ийлдсийг хоёр эгнээний эхний нүхэнд хийж, титрлэнэ. Хоёр ижил эгнээний сийвэнгийн шингэрүүлэлтийг авна. Хоёр дахь эгнээний бүх нүхэнд 0.25 мл шингэлэх шингэн, эхний эгнээний нүхэнд туляремийн бактерийн суспензээс 0.25 мл нэмнэ. Tularemia diagnosticum (1 мл-т 25 тэрбум туляремийн нян агуулсан), өмнө нь 50 удаа шингэлж хэрэглэдэг. Энэ суспенз нь 1 мл-т 500 сая буюу 0.25 мл-ийн эзэлхүүнтэй 125 сая бактери агуулдаг. Антиген нэмсний дараа хавтанг тасалгааны температурт 1 цаг байлгасны дараа хоёр эгнээний бүх нүхэнд нэг дусал (0.05 мл) эритроцит диагностикум нэмж, хавтанг сэгсэрч, хавтгай ширээн дээр үлдээнэ. Нягтлан бодох бүртгэлийг 2-3 цагийн дараа хийдэг.
RTPGA-ийн нягтлан бодох бүртгэл, үнэлгээ. Хэрэв шинжилгээний ийлдэс нь туляремийн өвөрмөц эсрэгбие агуулсан бол тэдгээрийг нэмсэн антигенээр саармагжуулж, эхний эгнээний цооногуудад гемагглютинаци үүсэхгүй, эсвэл сийвэнгийн титр өндөр байвал цус багадалт (2-4) ажиглагдана. RPHA-тай эгнээнээс худгийн . Энэ тохиолдолд үр дүнгийн онцлог нь батлагдсан. Хэрэв гемагглютинацийг хоёр эгнээнд тэмдэглэсэн бол, i.e. Хэрэв RTPGA болон RPGA-ийн үр дүн давхцаж байвал энэ нь шинжилгээний ийлдсэнд туляремийн эсрэгбие байхгүй байгааг илтгэнэ. Энэ тохиолдолд RPGA-ийн үндсэн үр дүнг өвөрмөц бус гэж үзнэ.
RTHG-ийг бичил эзлэхүүнээр тогтоох арга. RPGA шиг RTPGA-г Такачи төрлийн микротитр ашиглан бичил хэмжээст хийж болно. Үүнийг хийхийн тулд 0.25 мкл шингэлэх шингэнийг тус бүр 7-8 цооногтой хоёр эгнээнд микроплитуудын нүхэнд хийнэ. Дараа нь титратор ашиглан туршилтын ийлдсээс 0.25 мкл нэмж, хоёр эгнээнд титрлэнэ. Үүний дараа эхний эгнээний цооног бүрт 25 мкл туляремийн эсрэгтөрөгч (түүний концентраци нь 1 мл-т 500 сая туляремийн бактери байдаг), хоёрдугаар эгнээнд 25 мкл шингэлэх шингэн нэмнэ. Хавтанг тасалгааны температурт 1 цаг байлгасны дараа хоёр эгнээний бүх нүхэнд 25 мкл антиген zritrocytic diagnosticum (0.5% концентраци) нэмнэ. Нягтлан бодох бүртгэл, үр дүнгийн үнэлгээг макро боть дахь урвалын нэгэн адил гүйцэтгэдэг.
идэвхгүй гемагглютинацийн урвал) эсрэгтөрөгч эсвэл эсрэгбиемийг илрүүлэх, тодорхойлох арга нь тэдгээрийн дэргэд тохиолддог, тэдгээрийн гадаргуу дээр харгалзах өвөрмөц буюу эсрэгтөрөгчийг шингээж авсан цусны улаан эсийг наалдуулах үзэгдэлд үндэслэсэн.
1. Анагаах ухааны жижиг нэвтэрхий толь бичиг. - М.: Анагаах ухааны нэвтэрхий толь бичиг. 1991-96 2. Эхлээд эрүүл мэндийн тусламж үйлчилгээ. - М .: Оросын агуу нэвтэрхий толь бичиг. 1994 3. Нэвтэрхий толь бичиг эмнэлгийн нэр томъёо. - М.: Зөвлөлтийн нэвтэрхий толь бичиг. - 1982-1984 он.
Бусад толь бичгүүдээс "Шууд бус гемагглютинацийн урвал" гэж юу болохыг харна уу.
шууд бус гемагглютинацийн урвал- RNGA Лабораторийн шинжилгэээритроцитын оношлогоо ашиглан. [Вакцин судлал, дархлаажуулалтын үндсэн нэр томъёоны англи-орос толь бичиг. Дэлхийн Эрүүл Мэндийн Байгууллага, 2009] Сэдвүүд Вакцинологи, дархлаажуулалт Синоним RNGA EN... ... Техникийн орчуулагчийн гарын авлага
- (RNHA; идэвхгүй гемагглютинацийн урвалын синоним) нь эсрэгтөрөгч эсвэл эсрэгбиемүүдийг илрүүлэх, тодорхойлох арга бөгөөд тэдгээрийн дэргэд үүсдэг, гадаргуу дээр нь өмнө нь шингэсэн эритроцитуудын агглютинацийн үзэгдэлд үндэслэсэн... .. . Том эмнэлгийн толь бичиг
- (RPHA) шууд бус гемагглютинацийн урвалыг үзнэ үү... Том эмнэлгийн толь бичиг
Энэ хуудас нь толь бичиг юм. # А... Википедиа
Мал эмнэлгийн нэвтэрхий толь бичигт батлагдсан үндсэн товчлолууд- a., aa, artena, arteriae aa ana (тэнцүү) ЗХУ-ын Анагаах Ухааны Академи ЗХУ-ын Анагаах Ухааны Академи ЗХУ-ын Шинжлэх Ухааны Академи ЗХУ-ын ШУА Бак. Бацилла бактери. Бактери BSSR Беларусийн SSR c., зуун. зуун, зуун v., vv. vena, venae ВАСХНИЛ Бүх Холбооны Ленин одон ба... ...
Энэ нэр томъёо нь өөр утгатай, тахал-г үзнэ үү. Махан идэштний өвчин (Карегийн өвчин) цочмог болон цочмог хэлбэрийн халдварт өвчин вируст өвчин, халуурах, салст бүрхүүлийн катрин үрэвсэл, арьсны гэмтэл, төвийн ... ... Википедиа илэрдэг.
- (ренес) нь шээс үүсгэх функцээр дамжуулан биеийн химийн гомеостазыг зохицуулдаг хосолсон гадагшлуулах болон дотоод шүүрлийн эрхтэн юм. АНАТОМИЙН ФИЗИОЛОГИЙН НООРОГЧ Бөөр нь хэвлийн хэвлийн хөндийд (Retroperitoneal space) ... ... дээр байрладаг. Анагаах ухааны нэвтэрхий толь бичиг
I (трихинеллез; ижил утгатай: трихиноз, "хавгарсан") нематодын бүлгийн гельминтозууд нь халуурах, миалгиа, нүүрний хавдар, арьсны тууралт, цусны эозинофили, хүнд тохиолдолд гэмтэл дотоод эрхтнүүдболон төв ...... Анагаах ухааны нэвтэрхий толь бичиг
- (нематодоз) дугуй хорхойн нематодоор үүсгэгдсэн гельминтозууд анги Нематода. Бусад helminthiases дунд N. байна хамгийн өндөр үнэ цэнэхүний эмгэг судлалын хувьд тэдгээрийн дийлэнх нь геогельминтоз юм (Гелминтиазыг үзнэ үү); өндөг эсвэл авгалдайны хөгжил ... ... Анагаах ухааны нэвтэрхий толь бичиг
халдварт эпидидимит- Будаа. 1. Халдварт эпидидимиттэй хонины зүүн төмсөг томрох. Цагаан будаа. 1. Халдварт эпидидимиттэй хонины зүүн төмсөг томрох. хонины халдварт эпидидимит (Epididymitis infectiosa arietum), архаг халдварт... ... Мал эмнэлгийн нэвтэрхий толь бичиг
Шууд бус гемагглютинацийн урвалыг үзнэ үү... Том эмнэлгийн толь бичиг
Хариултыг өгсөн:
1) полисахарид, уураг, бактерийн ханд болон бусад өндөр тархалттай бодис, риккетси, вирус, агглютининтай нэгдлүүд нь ердийн RA-д харагдахгүй байх;
2) эдгээр өндөр тархалттай бодис, жижиг бичил биетний эсрэгбиемүүдийг өвчтөний ийлдэс илрүүлэх.
Шууд бус буюу идэвхгүй агглютинацийг эсрэгбие нь идэвхгүй тоосонцор (латекс, целлюлоз, полистирол, барийн исэл гэх мэт эсвэл хонины цусны улаан эс, I(0)-хүний цусны бүлэг) дээр урьдчилан шингэсэн эсрэгтөрөгчтэй харилцан үйлчлэх урвал гэж ойлгогддог.
Идэвхгүй гемагглютинацийн урвал (RPHA) -д цусны улаан эсүүд. Антигенээр дүүрсэн цусны улаан эсүүд энэ эсрэгтөрөгчийн өвөрмөц эсрэгбиемүүдтэй хамт наалдаж, тунадас үүсгэдэг. Антиген мэдрэмтгий эритроцитуудыг RPGA-д эсрэгбиемийг илрүүлэх (серодиагностик) эритроцитийн оношлогоо болгон ашигладаг. Хэрэв цусны улаан эсүүд эсрэгбиемүүдээр дүүрсэн бол (эритроцит эсрэгбиеийн оношлогоо) эсрэгтөрөгчийг илрүүлэхэд ашиглаж болно.
Цагаан будаа. 3. RPGA схем: эсрэгтөрөгчөөр (3) ачаалагдсан цусны улаан эсүүд (1) нь тусгай эсрэгбиемүүдээр холбогддог (4).
Тайзлах. Полистирол хавтангийн нүхэнд ийлдсийн цуврал шингэрүүлэлтийг бэлтгэдэг. Эцсийн өмнөх цооногт 0.5 мл илэрхий эерэг ийлдэс, сүүлчийн нүхэнд 0.5 мл физиологийн уусмал (хяналт) нэмнэ. Дараа нь 0.1 мл шингэрүүлсэн эритроцит диагностикумыг бүх нүхэнд хийж, сэгсэрч, 2 цагийн турш термостатад хийнэ.
Нягтлан бодох бүртгэл. IN эерэг тохиолдолэритроцитууд нүхний ёроолд атираат эсвэл ирмэгтэй (урвуутай шүхэр) эсийн жигд давхарга хэлбэрээр, сөрөг талд нь товчлуур эсвэл цагираг хэлбэрээр суурьшдаг.
Зураг 4. RNGA (RPGA) нягтлан бодох бүртгэл.
Ботулинумын хорыг илрүүлэхийн тулд хийсэн рентген шинжилгээний үр дүнг бүртгэх.
Ботулизмын үүсгэгч Clostridium botulinum нь долоон сероварын (A, B, C, D, E, F, G) хорт бодисыг үүсгэдэг боловч A, B, E сероварууд илүү түгээмэл байдаг.Бүх хорт бодисууд нь эсрэгтөрөгчийн шинж чанараараа ялгаатай бөгөөд боломжтой байдаг. төрлийн тусгай ийлдэс ашиглан урвалд ялгах. Энэ зорилгоор идэвхгүй (шууд бус) гемагглютинацийн урвалыг өвчтөний ийлдэс, хорт бодис байгаа гэж таамаглаж, цусны улаан эсүүд A, B, E төрлийн антиоксидант ботулиний ийлдэсүүдийн эсрэгбиемүүдээр дүүргэж болно. ийлдэс нь хяналтын үүрэг гүйцэтгэдэг.
Цагаан будаа. 3. RNGA-ийн мэдэгдэл, үр дүн.
Нягтлан бодох бүртгэл. Эерэг тохиолдолд цусны улаан эсүүд нүхний ёроолд атираат эсвэл муруй ирмэгтэй (урвуутай шүхэр) жигд давхарга хэлбэрээр байрладаг; сөрөг тохиолдолд товчлуур эсвэл цагираг хэлбэрээр суурьшдаг. .
Дүгнэлт: Өвчтөний ийлдэсээс Е төрлийн ботулинум токсин илэрсэн.
Гемагглютинацийг дарангуйлах урвал (HRT).
Цагаан будаа. 8. Гемагглютинацийг дарангуйлах урвал (HAI) (схем).
Урвалын зарчим нь AT-ийн янз бүрийн вирусыг холбож, саармагжуулах чадварт суурилдаг тул цусны улаан эсийг агглютинжуулах боломжгүй болгодог. Харааны хувьд энэ нөлөө нь гемагглютинацийг "дарангуйлах" хэлбэрээр илэрдэг. RTGA нь вирусын халдварыг оношлоход тусгай антигемагглютининыг тодорхойлох, Ag-ийн шинж чанарыг харуулдаг гемагглютининаар янз бүрийн вирусыг тодорхойлоход ашиглагддаг.
Вирусыг тодорхойлох нь тухайн төрлийн тусгай ийлдэс бүхий RTGA урвалаар хийгддэг. Урвалын үр дүнг hemaglutination байхгүй тохиолдолд харгалзан үзнэ. H0N1, H1N1, H2N2, H3N2 болон бусад антиген бүхий А хэлбэрийн вирусын дэд төрлүүдийг RTGA-д ижил төрлийн өвөрмөц ийлдэс бүхий багцаар ялгаж болно.
Цагаан будаа. 9. Томуугийн вирүсийг тодорхойлох RTGA үр дүн
Домог: - гемагглютинацийг дарангуйлах (товчлуур); - гемагглютинаци (шүхэр).
Дүгнэлт: Судалгаанд хамрагдсан материал нь H3N2 эсрэгтөрөгчтэй томуугийн А төрлийн вирүсийг агуулж байна
Шууд бус (идэвхгүй) гемагглютинацийн урвал (IRHA) нь цусны улаан эсүүд нь уусдаг эсрэгтөрөгчийг гадаргуу дээр шингээж авбал шингэсэн эсрэгтөрөгчийн эсрэгбиемүүдтэй харьцахдаа агглютинжих чадварыг олж авдагт суурилдаг. RNGA диаграммыг Зураг дээр үзүүлэв. 34. RNGA нь хэд хэдэн халдварын оношлогоонд өргөн хэрэглэгддэг.
Цагаан будаа. 34. Идэвхгүй гемагглютинацийн урвалын схем (RPHA). A - эритроцитын оношийг олж авах: B - RPGA: 1 - эритроцит: 2 - судалж буй эсрэгтөрөгч; 3 - эритроцитийн оношлогоо; 4 - судалж буй эсрэгтөрөгчийн эсрэгбие: 5 - агглютинат
Урвалыг тохируулах. Туршилтын ийлдсийг 56 хэмд 30 минутын турш халааж, 1:10 - 1:1280 харьцаатай дараалан шингэлж, 0.25 мл-ээр туршилтын хоолой эсвэл нүхэнд хийнэ, 2 дусал эритроцитийн оношлогоо (антиген шингэсэн эритроцитууд) ) дараа нь нэмнэ.
Хяналт: мэдэгдэж буй дархлааны ийлдэс бүхий эритроцитийн оношлогооны суспенз; хэвийн ийлдэс бүхий оношилгоог түдгэлзүүлэх; шинжилгээний ийлдэс бүхий хэвийн улаан эсийн суспенз. Эхний хяналтанд агглютинац үүсэх ёстой, хоёр, гуравдугаарт энэ нь үүсэх ёсгүй.
RIGA-г ашигласнаар мэдэгдэж буй эсрэгбие нь цусны улаан эсэд шингэсэн тохиолдолд үл мэдэгдэх эсрэгтөрөгчийг илрүүлэх боломжтой.
Гемагглютинацийн урвалыг Такачи микротитратор ашиглан 0.025 мл (микрометод) эзэлхүүнтэй хийж болно.
1. Энэ нь юуг харуулж байна вэ? эерэг үр дүнЦусны улаан эс болон вирус байгаа эсэхийг шалгаж буй материал хоорондын RHA?
2. Цусны улаан эсэд вирус болон түүнд харгалзах ийлдсийг нэмбэл цусны улаан эсийн наалдац үүсэх үү? Энэ үзэгдлийг илчлэх урвалын нэр юу вэ?
Дасгал хийх
RIGA үр дүнг харгалзан үзэж, бүртгүүлнэ үү.
Хур тунадасны урвал
Хур тунадасны урвалд уусдаг эсрэгтөрөгч (лизат, ханд, гаптен) ба электролитийн дэргэд тусгай эсрэгбиемээс бүрдэх өвөрмөц дархлааны цогцолбор тунадас үүсдэг.
Энэ урвалын үр дүнд үүссэн үүлэрхэг цагираг буюу тунадасыг тунадас гэж нэрлэдэг. Энэ урвал нь эсрэгтөрөгчийн хэсгүүдийн хэмжээгээр наалдуулах урвалаас голчлон ялгаатай байдаг.
Хур тунадасны урвалыг ихэвчлэн хэд хэдэн халдварын оношлогоонд эсрэгтөрөгчийг тодорхойлоход ашигладаг. боом өвчин, менингит гэх мэт); шүүхийн анагаах ухаанд - цус, эр бэлгийн эс гэх мэт төрлийг тодорхойлох; ариун цэврийн болон эрүүл ахуйн судалгаанд - бүтээгдэхүүний хуурамч байдлыг тогтоох; Түүний тусламжтайгаар амьтан, ургамлын филогенетик харилцааг тодорхойлдог. Урвалын хувьд танд хэрэгтэй:
1. Эсрэгбие (тундас) - бүхий дархлааны ийлдэс өндөр титрэсрэгбие (1:100000-аас багагүй). Тунадасжуулж буй ийлдсийн титр нь түүний урвалд ордог эсрэгтөрөгчийн хамгийн их шингэрүүлэлтээр тодорхойлогддог. Сийвэнг ихэвчлэн шингэлээгүй эсвэл 1:5 - 1:10 шингэрүүлсэн хэлбэрээр хэрэглэдэг.
2. Антиген - уураг буюу липоид полисахаридын шинж чанартай ууссан бодисууд (бүрэн антиген ба гаптенууд).
3. Изотоник уусмал.
Хур тунадасны урвалыг явуулах үндсэн аргууд нь: цагираган тунадасны урвал ба агар (гель) дахь тунадасны урвал.
Анхаар! Хур тунадасны урвалд оролцдог бүх бүрэлдэхүүн хэсгүүд нь бүрэн ил тод байх ёстой.
Цагираган хур тунадасны урвал. Пастерийн соруур ашиглан тунадасны хоолойд 0.2-0.3 мл (5-6 дусал) ийлдэс нэмнэ (ийлдэс нь хоолойн хананд хүрэх ёсгүй). Ижил эзэлхүүн дэх эсрэгтөрөгчийг ийлдэс дээр сайтар нааж, нимгэн Пастерийн соруураар туршилтын хоолойн ханын дагуу хийнэ. Туршилтын хоолойг налуу байрлалд хадгална. Зөв давхрагатай үед ийлдэс болон эсрэгтөрөгчийн хооронд тодорхой хил хязгаар байх ёстой. Шингэнийг холихгүйн тулд туршилтын хоолойг тавиур дээр болгоомжтой байрлуулна. Хэрэв урвал эерэг байвал эсрэгтөрөгч ба эсрэгбиеийн интерфейс дээр үүлэрхэг "цагираг" үүсдэг - тунадас (48-р зургийг үз).
Урвалыг хэд хэдэн хяналт дагалддаг (Хүснэгт 18). Туршилтын хоолойд урвалын бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг нэмэх дараалал нь маш чухал юм. Та антиген дээр ийлдэс түрхэж болохгүй (хяналтад - изотоник уусмал дээр), учир нь ийлдсийн харьцангуй нягт нь туршилтын хоолойн ёроолд живж, шингэний хоорондох хил хязгаар харагдахгүй болно.
Хүснэгт 18. Цагираган тунадасны урвалыг тохируулах схем
Анхаарна уу. + "бөгж" байгаа эсэх; - "бөгж" байхгүй.
Үр дүнг 5-30 минутын дараа, зарим тохиолдолд нэг цагийн дараа тэмдэглэдэг бөгөөд энэ нь үргэлж хяналтаас эхэлдэг. 2-р туршилтын хоолой дахь "цагираг" нь дархлааны ийлдэс нэвтрэх чадварыг илтгэнэ тодорхой хариу үйлдэлхаргалзах эсрэгтөрөгчтэй. 3-5 туршилтын хоолойд "цагираг" байх ёсгүй - бие биедээ тохирох эсрэгбие ба эсрэгтөрөгч байхгүй. 1-р хоолой дахь "цагираг" - эерэг урвалын үр дүн нь туршилтын эсрэгтөрөгч нь авсан дархлааны ийлдэстэй тохирч байгааг харуулж байна, "цагираг" байхгүй (зөвхөн 2-р хоолойд "цагираг") нь тэдгээрийн нийцэхгүй байгааг харуулж байна - сөрөг урвалын үр дүн.
Агар (гель) дахь хур тунадасны урвал. Урвалын онцлог нь эсрэгтөрөгч ба эсрэгбиеийн харилцан үйлчлэл нь өтгөн орчинд, өөрөөр хэлбэл гель хэлбэрээр явагддаг. Үүссэн тунадас нь орчны зузаанд булингартай судал үүсгэдэг. Туузан байхгүй байгаа нь урвалын бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн хоорондын зөрүүг илтгэнэ. Энэ урвалыг биоанагаахын судалгаанд, ялангуяа сахуу өвчний үүсгэгч бодис дахь хорт бодис үүсэхийг судлахад өргөн ашигладаг.
Хяналтын асуултууд
1. Агглютинаци ба хур тунадасны урвалын гол ялгаа нь юу вэ?
2. Хур тунадасны урвалд үүлэрхэг найрлагыг яагаад ашиглаж болохгүй вэ?
Дасгал хийх
1. Цагираган тунадасны урвалыг тохируулж, үр дүнг тоймлон зур.
2. Агар дахь тунадасжих урвалын эсрэгтөрөгчийн эсрэгбиеийн харилцан үйлчлэлийн мөн чанарыг судалж, үр дүнг тоймлон зур (багшаасаа аяга аваарай).
Лизисийн урвал (дархлааны цитолиз)
Дархлаа задрах нь эсрэгбиеийн нөлөөн дор эсийг татан буулгах явдал юм заавал оролцохнэмэлт. Урвалын хувьд танд хэрэгтэй:
1. Антиген - микроб, цусны улаан эс эсвэл бусад эсүүд.
2. Эсрэгбие (лизин) - дархлааны ийлдэс, бага давтамжтай өвчтөний ийлдэс. Бактериолитик ийлдэс нь бактерийн задралд оролцдог эсрэгбиемүүдийг агуулдаг; гемолитик - цусны улаан эсийн задралыг дэмждэг гемолизин; спирохетын задралын хувьд спирохетолизин, эсүүд - итолизин гэх мэт шаардлагатай байдаг.
3. Нэмэлт. Сийвэн дэх ихэнх нэмэлт Гвинейн гахай. Энэ ийлдэс (хэд хэдэн амьтдын холимог) ихэвчлэн нэмэлт болгон ашигладаг. Шинэ (уугуул) нэмэлт нь тогтворгүй бөгөөд халаах, сэгсрэх, хадгалахад амархан устдаг тул хүлээн авснаас хойш хоёр хоногоос илүүгүй хугацаанд хэрэглэж болно. Комплементыг хадгалахын тулд түүнд 2% нэмнэ борын хүчилба 3% натрийн сульфат. Энэ нэмэлтийг 4 хэмийн температурт хоёр долоо хоног хүртэл хадгалах боломжтой. Хуурай нэмэлтийг ихэвчлэн ашигладаг. Хэрэглэхийн өмнө энэ нь анхны эзэлхүүнийг (шошгон дээр заасан) изотоник уусмалд уусгана.
4. Изотоник уусмал.
Гемолизийн урвал(Хүснэгт 19). Урвалын хувьд танд хэрэгтэй:
1. Антиген - 0.3 мл эритроцитын тунадас, 9.7 мл изотоник уусмалаар угаасан хонины эритроцитийн 3% суспенз.
2. Эсрэгбие - хонины эритроцитуудын эсрэг цус задралын ийлдэс (гемолизин); ихэвчлэн үйлдвэрлэлд бэлтгэсэн, лиофилжуулсан ба титрийг шошгон дээр заасан байдаг.
Гемолизины титр нь цусны сийвэнгийн хамгийн их шингэрүүлэлт бөгөөд энэ үед цусны улаан эсийн 3%-ийн суспензийн бүрэн цус задрал нь комплементийн дэргэд явагддаг. Цус задрах урвалын хувьд гемолизиныг гурвалсан титрээр авна, өөрөөр хэлбэл титрээс 3 дахин бага шингэлнэ. Жишээлбэл, ийлдсийн титр 1:1200 бол ийлдсийг 1:400 (0.1 мл ийлдэс * ба 39.9 мл изотоник уусмал) шингэлнэ. Илүүдэл гемолизин шаардлагатай байдаг, учир нь түүний зарим нь бусад урвалын бүрэлдэхүүн хэсгүүдэд шингэж чаддаг.
* (Та 0.1 мл-ээс бага ийлдэс авч болохгүй - хэмжилтийн нарийвчлал алдагдах болно.)
3. Комплементийг 1:10 (0.2 мл нэмэлт ба 1.8 мл изотоник уусмал) шингэлнэ.
4. Изотоник уусмал.
Хүснэгт 19. Цус задралын урвалын схем
Үр дүнгийн нягтлан бодох бүртгэл. Хэрэв урвал зөв явагдсан бол 1-р туршилтын хоолойд цус задрал үүснэ - түүний агууламж ил тод болно. Удирдлагад шингэн нь үүлэрхэг хэвээр байна: 2-р хоолойд цус задрахад хангалттай комплемент байхгүй, 3-р хоолойд гемолизин байхгүй, 4-р хоолойд гемолизин ч байхгүй, 5-р хоолойд антиген байхгүй. эсрэгбиетэй таарахгүй байх,
Шаардлагатай бол цус задралын ийлдэсийг дараах схемийн дагуу титрлэнэ (Хүснэгт 20).
Титрлэхийн өмнө 1:100 (0.1 мл ийлдэс ба 9.9 мл изотоник уусмал) шингэрүүлсэн сийвэнгийн анхны шингэрүүлэлтийг бэлтгэ. шаардлагатай шингэрүүлэлтүүд, Жишээлбэл:
Эдгээр шингэрүүлэлтээс 0.5 мл ийлдэсийг титрлэлтийн туршилтын хоолойд хийнэ, үүнийг хүснэгтэд үзүүлэв. 20.
Хүснэгт 20. Цус задлагч ийлдсийн (гемолизин) титрлэлтийн схем.
Хүснэгтэнд өгсөн жишээнд. 20, цус задралын ийлдсийн титр 1:1200 байна.
Шинэхэн гемолитик ийлдэс хэрэглэх үед түүнд агуулагдах нэмэлт бодисыг устгахын тулд идэвхгүй болгох шаардлагатай. Үүнийг хийхийн тулд усан ваннд эсвэл термостат бүхий идэвхгүйжүүлэгчид 56 хэмд 30 минутын турш халаана. Сүүлчийн арга нь илүү дээр юм: энэ нь шар сүүний хэт халалт, өөрөөр хэлбэл денатурацийг арилгах боломжийг арилгадаг. Денатуратжуулсан ийлдэс нь шинжилгээнд тохиромжгүй байдаг.
Бактериолизийн урвал. Энэ урвалд тохирох (гомолог) ийлдэс байгаа үед комплемент бактерийг задалдаг. Урвалын схем нь гемолизийн урвалын схемтэй үндсэндээ төстэй юм. Үүний ялгаа нь хоёр цагийн инкубацийн дараа бүх туршилтын хоолойг Петрийн аяганд суулгаж, туршилтанд оруулсан бичил биетний задралд орсон эсэхийг олж мэдэх болно. Туршилтыг зөв хийсэн бол 2-5 туршилтын хуруу шилний өсгөвөр (хяналт) нь элбэг өсөлттэй байх ёстой. 1-р туршилтын хоолой (туршилт) -аас тарьсан өсөлтгүй эсвэл сул өсөлт нь микробын үхэл, өөрөөр хэлбэл тэдгээр нь эсрэгбиетэй ижил төстэй болохыг харуулж байна.
Анхаар! Бактериолизийн урвалыг асептик нөхцөлд хийх ёстой.
Хяналтын асуултууд
1. Натрийн хлоридын изотоник уусмалын оронд нэрмэл ус хэрэглэвэл цусны улаан эсэд юу тохиолдох вэ? Энэ үзэгдлийн үндэс нь юу вэ?
2. Комплемент байхгүй үед эритроцитууд гомолог дархлааны ийлдэстэй харилцан үйлчлэхэд ямар урвал үүсэх вэ?
Дасгал хийх
Цус задралын урвалыг тохируулна уу. Үр дүнг тэмдэглэж, зур.
Холбогдох мэдээлэл.
