Paragon dojrzali producenci, których komórki jajowe i nasienie nadają się do zapłodnienia, - istotny element prace nad sztuczną hodowlą jesiotra.
Wcześniej pozyskiwanie takich ryb było możliwe jedynie w pobliżu naturalnych tarlisk lub bezpośrednio na tarliskach, gdzie trzeba było organizować specjalne połowy. Spośród złowionych ryb tylko niewielka część (nie więcej niż 1-4%) miała dojrzałe jaja i plemniki.
Przy tak zawodnym sposobie pozyskiwania dojrzałych produktów organizowanie sztucznej hodowli na dużą skalę stało się niezwykle trudne.
Ekologiczne i fizjologiczne metody stymulacji dojrzewania produktów rozrodczych
Aby przenieść hodowlę jesiotrów na planowe podstawy, konieczne było opanowanie procesu przenoszenia producentów do stanu tarłowego w celu uzyskania dojrzałych jaj i samego plemnika.
Istnieją dwa sposoby rozwiązania tego problemu. Jeden z nich - środowiskowy - został opracowany przez akademika Akademii Nauk AzSSR A. N. Derzhavina. Uważał, że przy hodowli buhajów należy stworzyć warunki środowiskowe odpowiadające naturalnym, w których następuje rozwój potomstwa. Ponieważ w naturze jaja i plemniki dojrzewają podczas tarła ryb pod prąd, A. N. Derzhavin uznał ten czynnik za główny czynnik wpływający na przyspieszenie dojrzewania produktów rozrodczych. Do przetrzymywania i pozyskiwania dojrzałych tarli zalecił stosowanie owalnych klatek o długości 25 m, szerokości 6 m i głębokości do 1,2 m, w których tworzono prąd i symulowano warunki rzeczne (szybkie prądy itp.). Na dnie takich klatek umieszcza się kamyki. Doprowadzenie wody do klatki jest mechaniczne, przepływ wody wynosi 20 l/s. Poprawę cyrkulacji wody osiąga się poprzez zamontowanie w środkowej części klatki na całej jej długości betonowej ściany o długości 19 m. W każdej klatce umieszcza się 50 ryb; osobno kobiety i mężczyźni. Wraz z panującą w klatkach tworzą się sprzyjające warunki temperaturowe i tlenowe. Jednak doświadczenie z takimi klatkami pokazało, że dojrzewa w nich tylko jedna trzecia tarlików, trudno też określić moment, w którym należy sięgnąć po kawior.
Fizjologiczna metoda stymulacji dojrzewania produktów rozrodczych, opracowana przez profesora N. L. Gerbilsky'ego, nie ma tych wad. Polega na wprowadzeniu do mięśni ciała kobiety i mężczyzny acetonowanego preparatu przysadki mózgowej, od których chcą uzyskać dojrzałe komórki jajowe lub nasienie.
Badania wykazały, że w organizmie ryby ważnym regulatorem dojrzewania komórek rozrodczych jest wyrostek mózgowy – przysadka mózgowa, która łączy system nerwowy ciało z gonadami. Przysadka mózgowa, gruczoł dokrewny, wytwarza specjalne substancje - hormony, pod wpływem których producenci przechodzą w stan tarła.
Przysadka mózgowa składa się z dwóch części: mózgowej - neurohypofizy i gruczołowej - adenohypofizy. Hormony gonadotropowe produkowane są przez komórki gruczołowe gruczolaka przysadkowego.
Najlepsze rezultaty uzyskuje się łącząc ekologiczne i fizjologiczne metody stymulacji funkcji płciowych hodowców jesiotrów. Kombinację przeprowadza się w następującej kolejności: najpierw hodowcy trzymani są w specjalnych zbiornikach, a następnie wykonuje się zastrzyk przysadki mózgowej.
Osadzanie gospodarstw w celu utrzymania producentów
Producenci trzymani są w specjalnych zbiornikach przeznaczonych do łowienia ryb jigowych. Istnieją dwa główne typy gospodarstw jigowych. Jeden z nich został zaprojektowany przez prof. B. N. Kazansky, drugi - przez hodowców ryb Kura (hodowla klatkowa typu Kurin).
Beregowoe farma jigowa projekty B. N. Kazansky'ego. Farma klatkowa zaprojektowana przez B. N. Kazansky'ego ma ziemne stawy do długoterminowej rezerwy i znajdujące się w ich pobliżu betonowe baseny klatkowe, przeznaczone do krótkotrwałego utrzymania hodowców.
Samice i samce trzymane są oddzielnie.
Staw ziemny składa się z dwóch części: głównej, rozbudowanej, o głębokości do 2,5 m oraz zwężonej, płytszej o głębokości 0,5-1 m. W tej części stawu powstają warunki symulujące podejście do zasięgu tarła. W części rozszerzonej o większej głębokości warunki zbliżone są do warunków zimowisk.
Staw dla samic ma następujące wymiary: długość 130 m (część poszerzona 100 m i zwężona 30 m), szerokość 20-25 m w części poszerzonej i 4-6 m w części zwężonej. Dno rozszerzonej części jest ziemne, a na zwężonym odcinku wyłożone jest drobnymi gładkimi kostkami brukowymi na zubożonym betonie; Kamyczki są rozrzucone na styku poszerzonych i zwężonych części.
Dopływ wody do stawów jest mechaniczny, dopływ wody odbywa się poprzez żelbetową tacę lub rurę. Woda odprowadzana jest poprzez konstrukcję drenażową, która zapewnia zarówno całkowite odwodnienie stawu, jak i możliwość odprowadzania wody o różnym poziomie. Poziom wody reguluje się za pomocą piaskarek. Stały przepływ wody z 30 l/s można zwiększyć do 300 l/s.
Hodowla klatkowa typu Kura. Jest to staw ziemny o wymiarach 75x12 m, podzielony na trzy części za pomocą betonowej konstrukcji przegrodowej, pośrodku której znajduje się otwór do montażu żaluzji.
W pierwszym odcinku o długości 105 m i głębokości 3 m, producenci przetrzymywani są przez długi czas – od 1 do 1,5 miesiąca. Napełnianie wodą trwa 10-12 godzin, a zrzucanie trwa 5-6 godzin.
Kiedy zbliża się temperatura tarła, tarlaki przenoszone są do drugiego obszaru, czyli owalnego betonowego basenu z pionowymi ścianami. W basenie o długości 7 m, szerokości 5 m i głębokości 1 m przeprowadza się wstępne krótkotrwałe przetrzymywanie samic i samców przed wstrzyknięciem (1-3 dni). Przejście z pierwszego do drugiego odcinka odbywa się w formie płynnego wynurzania: sprzęt wędkarski – hamulce służące do odłowu tarlaków, ciągnięte są po specjalnych prowadnicach za pomocą wciągarek elektrycznych z pilot. Druga sekcja jest napełniana wodą w ciągu 30 minut.
W trzecim miejscu producenci są wstrzykiwani i utrzymywani po wstrzyknięciu przysadki mózgowej. Na tym obszarze znajdują się 2 betonowe baseny z pionowymi ścianami. Długość basenu wynosi 5 m, szerokość 3,5, głębokość 1 m. Napełnienie i spuszczenie wody zajmuje 15 minut. Nad basenem znajduje się baldachim. Przenoszenie hodowców z drugiej do trzeciej sekcji, a także ich dostarczanie do działu operacyjnego, w którym pozyskiwany jest kawior, odbywa się za pomocą samobieżnego wciągnika elektrycznego w kołyskach.
Wczesną wiosną z osadnika dopływa cieplejsza woda, co pozwala na wcześniejsze zastrzyki ryb. Producenci przebywają w basenach przez 1-3 dni. Dopływ i odpływ wody z basenów jest niezależny. Woda dostarczana jest za pomocą rury (fletu) umieszczonej po drugiej stronie basenu. Strumienie wody z fletu skierowane są w przeciwnych kierunkach. W wyniku tego zaopatrzenia w wodę poprawia się reżim tlenowy.
W basenie zasadzono 50 hodowców bieługi, 80 jesiotra lub jesiotra i 100 jesiotra gwiaździstego. Zużycie wody w basenach wynosi 30 l/s. Trzecia działka ogrodzona jest płotem, wokół którego posadzono drzewa.
Producenci zbiorów
Aby uzyskać więcej efektywne wykorzystanie producentów zajmujących się hodowlą ryb bardzo ważne ma wiedzę na temat wewnątrzgatunkowych grup biologicznych.
Badanie stad poszczególne gatunki fish umożliwił acad. L. S. Berg stwierdził obecność wewnątrzgatunkowych grup biologicznych w niektórych z nich. Dalsze rozwinięcie tego zagadnienia należy do prof. N. L. Gerbilsky.
Doktryna wewnątrzgatunkowych grup biologicznych opiera się na uznaniu faktu wewnątrzgatunkowej różnorodności biologicznej właściwej dla wszystkich gatunków zwierząt i roślin. U ryb jest to związane przede wszystkim z procesem rozmnażania i można je ustalić, znając czas i miejsce tarła, różnice w cyklu płciowym, temperaturę tarła, stan tarlaków w okresie ich wpływania do rzek oraz długość pobytu tarlaków w rzece przed tarłem.
Biologiczna analiza stada jesiotrów pozwala na wybór właściwej lokalizacji wylęgarni ryb, pozwala określić terminy jigowania i przetrzymywania tarli, a także rozwiązać kwestię możliwości uzyskania od nich dojrzałych produktów rozrodczych w dolnym biegu rzeki i podwójne wykorzystanie stawów do odchowu młodych ryb w ciągu jednego sezonu wegetacyjnego. Znając wewnątrzgatunkowe grupy biologiczne, można ustalić harmonogram sezonowy, który pozwala na najbardziej racjonalne wykorzystanie zbiorników i wyposażenia przedsiębiorstw hodowli ryb.
Jako przykład podamy grupy biologiczne jesiotra Kura.
Profesorowie N.L. Gerbilsky i B.N. Kazansky odkryli, że krzyżowanie buhajów jesiotrów z różnych grup biologicznych zwiększa ich żywotność w okresie embrionalnym.
Autor stwierdził, że młode osobniki uzyskane ze skrzyżowania buhajów jesiotrów różnych grup biologicznych przewyższają młode osobniki rodziców należących do tej samej grupy biologicznej pod wieloma ważnymi wskaźnikami hodowli ryb: intensywniej żerują i szybciej rosną, mają wyższy wskaźnik otłuszczenia, wyższą zawartość białka i pierwiastków popiołu.
Pozyskiwanie tarlaków jesiotrów należących do różnych grup biologicznych do celów hodowli ryb odbywa się w różnym czasie.
Tak więc wczesną wiosną jesiotra zbiera się w delcie Wołgi w drugiej połowie kwietnia - na początku maja i wykorzystuje się go do uzyskania dojrzałych produktów płciowych po krótkotrwałej rezerwie w maju. Jesiotra ozimego wybiegu jesiennego zbiera się w październiku, a po długim okresie leżakowania w drugiej połowie kwietnia następnego roku uzyskuje się z niego kawior i nasienie.
- samice w pobliżu owulacji mają ciało szczupłe, natomiast u ryb mniej dojrzałych jest ono bardzo grube i tłuste;
- u dojrzałych ryb szypułka ogonowa (od tylnego brzegu płetwy grzbietowej do początku łopatki ogonowej) ma przekrój owalny, tj. jego wysokość jest znacznie większa niż szerokość, co świadczy o utracie wagi ryby. U mniej dojrzałych ryb szypułka ogonowa jest grubsza i niższa;
- u osobników dojrzałych pysk jest spiczasty na skutek utraty wagi, u ryb mniej dojrzałych pysk i cała głowa są grubsze;
- Robaki dojrzałych ryb są mniej ostre, skóra jest bardziej pokryta gęstym śluzem.
Aby skupić się na tych znakach, musisz mieć duże doświadczenie w pracy z producentami.
A.E. Andronov (1979) opracował metodę selekcji samic jesiotra na podstawie pomiaru jaj. Wśród samic jesiotra gwiaździstego migrujących do rzeki występuje wiele niedojrzałych ryb, w których gonadach znajduje się dużo niskiej jakości małego kawioru, dlatego konieczne jest wybranie samic z największym kawiorem. Jaja mierzy się sondą posiadającą skalę o podziałce 2 mm i znaku zerowego w odległości 31 mm od początku szczeliny o średnicy 3 mm. U samic wybranych do hodowli ryb 15 jaj powinno tworzyć rząd kończący się co najmniej na drugiej podziałce skali sondy.
Drugą opcją wyboru samic jesiotra gwiaździstego jest określenie stopnia polaryzacji (skrajnej pozycji) jądra. Kawior usunięty sondą umieszcza się w płynie Serra (6 części formaldehydu, 3 części alkoholu, 1 część lodowatego kwasu octowego), przemywa wodą i kroi brzytwą wzdłuż osi zwierzęco-wegetatywnej.
Położenie jądra w jajach ocenia się pod lupą 7×10 na podstawie odległości jądra od skorupy bieguna zwierzęcego. Samice jesiotra gwiaździstego uważa się za dobre, jeśli ich jądro przesunęło się z pierwotnego położenia na odległość nieprzekraczającą promienia jaja.
Badacz Instytutu Badawczego Rybołówstwa Azov L.V. Badenko opracował metodę selekcji producentów w oparciu o wskaźniki fizjologiczne, która pozwala bardziej obiektywnie ocenić wartość producentów dla celów hodowli ryb. Metoda opiera się na fakcie, że jesiotr podczas migracji tarłowych wpływa do rzek w różny sposób stan fizjologiczny. Wyjaśnia to zarówno nierówna dojrzałość produktów reprodukcyjnych, jak i różne poziomy gromadzenie się w organizmie substancji rezerwowych. Tak więc, według L.F. Golovanenko, należy zarezerwować wyczerpanych hodowców, którzy nie nadają się do uzyskania kawioru i nasienia, a także osobniki, które mają produkty płciowe w IV niepełnym stadium dojrzałości, i można wstrzykiwać ryby w IV stadium dojrzałości bezpośrednio po zbiorach w kopalniach.
Oczywiste jest, jak ważna jest ocena stada lęgowego wybranego do hodowli ryb. Najłatwiej to zrobić poprzez badanie krwi. Okazało się, że najbardziej jednoznaczną odpowiedź na pytanie o jakość producentów dają takie wskaźniki, jak zawartość hemoglobiny i skład białek surowicy. Na ich podstawie L.V. Badenko zaleca wybór producentów.
Na początku tarła samice mają znaczny poziom tłuszczu i białka, mają wysokie tempo metabolizmu i oddychania, dlatego takie ryby należy odłowić w pierwszej kolejności. Zwykle mają poziom tłuszczu, białka, metabolizmu i oddychania charakterystyczny dla ryb składających w pełni dojrzałe jaja.
Preparat sporządza się z połowów niewodów, wybierając producentów o optymalnej wadze do pracy (nie więcej niż 15-20 kg dla jesiotra i jesiotra gwiaździstego oraz 100 kg dla bieługi), bez urazów, siniaków itp.
Przy określaniu masy ryb zabrania się ważenia wybranych producentów na skalach dziesiętnych w miejscu odbioru, gdyż ważenie bez wody negatywnie wpływa na stan ryb. Masę ciała należy określić za pomocą specjalnej tabeli, która zawiera dane dotyczące stosunku długości ciała do masy.
Duże znaczenie ma także dobór wieku producentów. Zdaniem A.A. Popowej najlepsze potomstwo rodzą jesiotry przychodzące na tarło po raz drugi i trzeci.
Producenci są przygotowani w taki sposób, aby mieć rezerwę na wypadek odpadów w transporcie i dojrzewaniu: dla bieługi i jesiotra gwiaździstego od 20 do 30%, a dla jesiotra od 10 do 30% masy Łączna przygotowanych producentów.
Producenci wybierani są bezpośrednio z niewodu wyładunkowego. Pojedynczo ostrożnie układa się je na płóciennym noszach i przenosi na mały statek do połowu żywych ryb (mattenka), na który można zebrać nie więcej niż 10 osobników. Matka dostarczana jest do dużego statku z żywymi rybami, którym producenci są transportowani do wylęgarni jesiotrów. W niesamobieżnym slocie na żywe ryby typu Astrachań sadzi się 5 belug lub 10 jesiotrów, taką samą liczbę cierni lub 16 jesiotrów gwiaździstych. Długość szczeliny typu Astrachań wynosi 13 m, szerokość 5 m i głębokość 0,8 m, szybkość ładowania: jeden jesiotr na 1,5-2 m 3, jeden jesiotr na 1 m 3 i jedna bieługa na 5-7 m 3. Aby zapobiec obrażeniom ryb, ramy szczelin są przykryte struganymi deskami.
Producenci dostarczeni do wylęgarni ryb przenoszeni są na molo za pomocą specjalnego dźwigu o udźwigu 500 kg. Ryby transportowane są w płóciennej kołysce wypełnionej wodą, zawieszonej na metalowej rurowej ramie. Od góry przykryty jest płóciennym fartuchem.
Po podniesieniu na pomost kołyska jest natychmiast instalowana na rurowym stojaku z tyłu samochodu lub podwozia samobieżnego i transportowana do stawu. Kołyskę można także przemieszczać elektryczną kolejką jednoszynową. Następnie kołyskę wraz z rybą opuszcza się po pochyłej płaszczyźnie do zbiornika. Ryby można również transportować i rozładowywać za pomocą kolejki jednoszynowej i podnośnika towarowego. Przy tej metodzie transportu kołyska z producentami jest zdejmowana z podwozia za pomocą podnośnika, przenoszona nad stawem, a następnie opuszczana. Do wewnątrzzakładowego transportu producentów wykorzystywane są także tory jednoszynowe z wciągnikami elektrycznymi.
Ze stawów tarlaków wyłapują je za pomocą włók (wytężonych narzędzi połowowych) wyposażonych w pływak i obciążniki. Pływak składa się z piankowych pływaków umieszczonych na górze. Do dolnej ramy przymocowane są obciążniki wykonane z wypalanej gliny. Do końców skrzydeł przywiązane są drewniane klocki zwane nagami. Długość przeciągu jest o 40-50% większa niż szerokość stawu, a wysokość o 30-40% większa niż największa głębokość zbiornika.
Ryby łowi się najczęściej w jednym, podłużnym rzucie. Ciągną niewód za brzegi po obu stronach zbiornika. Zatapianie odbywa się na płytkim obszarze przy przodzie stawu. Miejsce tonięcia wzmocnione jest zasypką skalną i żwirową. Do tej sekcji podłączony jest podwieszony tor podnoszący, który ma na celu zmechanizować podnoszenie producentów.
Złapane tarlaki umieszcza się w kołysce lub na noszach i doprowadza do podnośnika, który dostarcza ryby do klatek, gdzie tarlaki są wstrzykiwane.
Po użyciu dragi wiesza się na wieszakach do wyschnięcia.
Przygotowanie przysadki mózgowej
Przysadkę mózgową najlepiej zbierać wiosną, w okresie lęgowym. W tym czasie produkty rozrodcze ryb znajdują się w fazie IV, a maksymalna ilość hormonów gromadzi się w przysadce mózgowej.
Niemożliwe jest pobranie przysadki mózgowej z tarła ryb, ponieważ zawarte w nich wcześniej hormony są całkowicie zużywane w okresie lęgowym. Do odłowu nie można wykorzystać przysadki mózgowej niedojrzałych ryb. Jednocześnie T.I. Faleeva zauważa, że przysadkę mózgową można zbierać jesienią i zimą.
Aby usunąć przysadkę mózgową, otwiera się czaszkę żywej lub świeżej ryby za pomocą stalowej trepany, która jest metalowym prętem wyposażonym w rączkę. Na dolnym końcu pręta zamontowany jest cylinder, który można przesuwać w pionie wzdłuż pręta i zabezpieczać śrubą. U podstawy cylindra znajdują się zaostrzone i rozstawione zęby, które wcinają się w tkankę podczas obrotu trepany. Jego średnica wynosi 30 mm. Trefiny służą do pozyskiwania przysadki mózgowej z jesiotra bieługi. duże rozmiary o średnicy 35-40 mm.
Trepanę umieszcza się na środku głowy ryby, za oczami. Aby dokładnie zamontować trepanę, cylinder podnosi się do pełnej pojemności, w wyniku czego dolny spiczasty koniec pręta wystaje poza krawędź cylindra. Następnie obróć uchwyt i po wykonaniu kilku obrotów podnieś pręt, aby uniknąć zniszczenia przysadki mózgowej. Następnie trepanę wkręca się całkowicie i usuwa się wycięty czop składający się z kości i chrząstki. W czapce czaszki powstaje dziura, która, kiedy prawidłowa instalacja Trefina znajduje się powyżej dołu przysadki mózgowej. Do uzyskania przysadki mózgowej wykorzystuje się także elektrotrefinę, czyli wiertarkę elektryczną, która znacznie ułatwia i przyspiesza preparację przysadki mózgowej.
Mózg i płyn są usuwane z jamy czaszki. Na tym kończą się operacje przygotowawcze i można przystąpić do usuwania przysadki mózgowej.
Przysadkę mózgową usuwa się za pomocą używanej w chirurgii łyżki Volkmanna, która ma ostre krawędzie i długą rączkę. W żadnym wypadku nie należy pobierać tkanki gruczołu pęsetą, ponieważ może to spowodować uszkodzenie przysadki mózgowej i sprawić, że nie będzie się nadawał do wstrzyknięcia. Za pomocą łyżki Volkmanna można łatwo usunąć przysadkę mózgową i przenieść ją do naczynia. Usuniętą przysadkę mózgową odtłuszcza się i odwadnia, po czym aceton wlewa się do naczynia z dobrze zamykaną pokrywką (dzbanek). Po usunięciu każdego przysadki mózgowej kombajn umieszcza go w acetonie. Po usunięciu wszystkich przysadek mózgowych umieszcza się je w nowej porcji acetonu na 12 godzin, następnie ponownie opróżnia i wlewa nową porcję, w której odtłuszczanie następuje po 6-8 godzinach. Przysadkę mózgową wyjętą z butelki suszy się na bibule filtracyjnej.
Do leczenia przysadki mózgowej można stosować wyłącznie bezwodny, chemicznie czysty aceton. Objętość acetonu powinna być 10-15 razy większa niż masa zawartych w nim przysadek mózgowych. Ponowne użycie aceton nasycony wodą jest niedopuszczalny.
W celu długotrwałego przechowywania wysuszone przysadki mózgowe umieszcza się w plastikowych torebkach i etykietuje.
Wskazane jest wybranie przysadki mózgowej o tej samej masie do oddzielnych worków, aby w warunkach polowych w wylęgarni ryb można było dokładnie obliczyć stosowane dawki.
Pobranie przysadki mózgowej należy przeprowadzić centralnie dla kilku roślin jednocześnie z określeniem aktywności gonadotropowej produkowanego leku na obiektach badawczych.
Scentralizowane zaopatrzenie przez doświadczonych specjalistów pozwala nam zapewnić wysoką jakość przysadki mózgowej i możliwość stosowania optymalnych dawek.
Określanie jakości przysadki mózgowej
Aby określić ilość hormonów znajdujących się w przysadce mózgowej i jakość powstałych leków, przeprowadza się badania biologiczne, które sprowadzają się do wyjaśnienia różnych reakcji narządów zwierząt, które otrzymały zastrzyk badanych leków. Zazwyczaj do testów biologicznych wykorzystuje się bocje i żaby.
Po wstrzyknięciu przysadki mózgowej bochenek zawsze daje wymierną, wyraźną reakcję. Określenie jednostki aktywności przysadki mózgowej ryb odbywa się za pomocą koncepcji jednostki bocji (v.u.) ustalonej przez B.N. Kazansky'ego.
Jednostka Loacha- jest to ilość hormonu gonadotropowego niezbędna do spowodowania, 50-80 godzin po wstrzyknięciu, dojrzewania jaj i owulacji u samic bocianów zimowych w IV stadium dojrzałości o masie 35-45 g przy temperaturze wody 16-18° C w warunkach laboratoryjnych.
W celu określenia aktywności testowego preparatu przysadkowego w jednostkach Loach kilku grupom samic podaje się jednocześnie zastrzyki przysadkowe z różnymi dawkami przysadki mózgowej. Najniższa dawka, co spowodowało dojrzewanie i odpowiada jednostce bochenka. Wiedząc o tym, można porównać zawartość hormonu gonadotropowego w różnych przysadkach mózgowych.
Wykorzystanie bocji jako obiektu badawczego jest utrudnione ze względu na ograniczone rozmieszczenie ich w naturalnych zbiornikach wodnych.
Bardziej przystępnym obiektem są żaby. Można je łatwo pozyskać w wymaganej ilości o każdej porze roku. Pozytywną reakcją u żab jest pojawienie się ruchliwych plemników w kloace po wstrzyknięciu zawiesiny przysadki mózgowej do grzbietowych worków limfatycznych. Reakcja ta zachodzi bardzo szybko - po 40-50 minutach. To druga zaleta pracy z żabami w porównaniu z bocianami.
Samce żab odławia się późną jesienią w miejscach, w których gromadzą się w celu zimowania. Trzymane są w wodzie o temperaturze 1,5°C, przy małym przepływie i przy słabym oświetleniu.
Testowanie leku należy przeprowadzać co roku o tej samej porze. Tak więc w delcie Wołgi robią to w pierwszej połowie marca.
Żaby wyprowadza się ze stanu zimowego poprzez powolne podnoszenie temperatury wody i doprowadzanie jej po tygodniu do 16-18°C. Najlepsze wyniki badania daje temperatura 18-23°C.
Kontrolę przeprowadza się w następujący sposób. Najpierw wybiera się partie po 8-10 przysadek mózgowych, różniących się kolorem i wielkością. Następnie waży się je na wadze analitycznej z dokładnością do 0,1 mg. Odważony preparat uciera się w moździerzu, stopniowo nawilżając, aż do uzyskania jednorodnej kremowej konsystencji. Następnie do preparatu dodaje się roztwór soli fizjologicznej i zawiesina jest gotowa do wstrzyknięcia.
Wstrzyknięcie przeprowadza się jednocześnie u 5 żab. W sumie testuje się 3 grupy żab. Każdej grupie wstrzykuje się określoną dawkę: 0,2; 0,3 i 0,4 mg suchego preparatu przysadki mózgowej.
Wskaźnik aktywność biologiczna Preparat testowy przysadki mózgowej to minimalna dawka wagowa, która powoduje reakcję plemników u ponad połowy wstrzykniętych żab. Aktywność biologiczną leku oblicza się, dzieląc jednostkę przez wskaźnik wagowy minimalnej skutecznej dawki.
Jedna jednostka żab(tj.) to aktywność minimalnej dawki wagowej leku, która powoduje spermację u samca żaby.
Acetonowany preparat przysadki mózgowej powinien charakteryzować się standardową, znaną wcześniej aktywnością, która wynosi 3,3 jednostki żabiej.
Stosowanie leku pozwoli na bardziej ekonomiczne wykorzystanie pobranego przysadki mózgowej. Ponadto w przypadkach, gdy po wstrzyknięciu przysadki mózgowej nie obserwuje się dojrzewania producentów, ułatwiona jest analiza przyczyn tego zjawiska.
Należy także pamiętać, że dawkę podawanego leku na jednostkę masy producentów należy obliczyć z uwzględnieniem aktywności biologicznej każdej partii przysadki mózgowej.
Oprócz powyższej metody oznaczania aktywności acetonowanej przysadki mózgowej istnieje kilka innych metod takiego badania. W szczególności B.F. Goncharov zaproponował zastosowanie systemu dojrzewania jaj poza organizmem w celu określenia jakości przysadki mózgowej. Kontrolę przeprowadza się w następujący sposób. Próbkę kawioru pobiera się sondą i umieszcza w roztworze fizjologicznym zawierającym 0,1% roztwór krystalicznej albuminy. Dodaje się tam również zawiesinę przysadki mózgowej. Jeśli samica jest przygotowana do dojrzewania, wówczas pęcherzyk embrionalny rozpuszcza się.
Zaletami proponowanej metody jest czułość, możliwość uzyskania dużego materiału cyfrowego oraz możliwość wykorzystania jej bezpośrednio w wylęgarniach ryb w sezonie pracy z producentami.
W przypadku tej metody dawkę wstrzykniętego przysadki mózgowej oblicza się w miligramach acetonowanego przysadki mózgowej na 1 kg masy producenta lub w miligramach na mężczyznę lub kobietę.
Prawidłowe dawkowanie w dużej mierze determinuje jakość powstałych produktów seksualnych. Jeżeli dawka będzie niewystarczająca, nie nastąpi dojrzewanie hodowców. Ze zwiększoną dawką lek hormonalny jakość komórek jajowych lub nasienia spada.
W niższych temperaturach (w zakresie temperatury tarła) do dojrzewania tarlaków wymagane są większe dawki leku, w temperaturach zbliżonych do Górna granica temperatury tarła, ilość leku hormonalnego maleje. Dojrzałym mężczyznom w porównaniu z kobietami należy podawać mniej leków hormonalnych.
Wylęgarnie jesiotrów otrzymują acetonowane przysadki mózgowe o określonej aktywności gonadotropowej. Jednak nie zawsze pozostaje ona stała. Kiedy przysadka mózgowa jest przechowywana przez ponad rok, jej aktywność gonadotropowa maleje. Proces pogarszania się jakości przysadki mózgowej zostaje spowolniony, gdy przechowuje się ją w hermetycznie zamkniętym pojemniku, w suchym pomieszczeniu, w niskiej temperaturze.
Zastrzyk przysadki mózgowej
Wysuszony przysadkę mózgową rozciera się tłuczkiem na proszek w czystym moździerzu szklanym lub porcelanowym, następnie odważa się wymaganą dawkę na wadze analitycznej lub skrętnej dla każdej partii nastrzykiwanych producentów oddzielnie dla samic i samców.
Odważoną porcję dodaje się do roztworu fizjologicznego (6,5 g chemicznie czystej soli kuchennej rozpuszczonej w 1 litrze wody destylowanej) i jeszcze trochę mieli. Następnie do tej masy dodaje się kolejną porcję roztworu fizjologicznego w takiej ilości, aby na jednego producenta przypadało 2 cm3 zawiesiny. Następnie dokładnie wstrząsa się kilkakrotnie za pomocą strzykawki i przenosi do butelki z szeroką szyjką i szlifowanym korkiem.
Przed rozpoczęciem wstrzykiwania zawartość butelki należy kilkakrotnie dokładnie wymieszać. Zawiesinę wstrzykuje się w mięśnie pleców za pomocą strzykawki. Po wstrzyknięciu igłę należy ostrożnie usunąć. Miejsce nakłucia skóry uciska się palcem, a następnie delikatnie masuje. Należy to zrobić, aby uniknąć wycieku wstrzykniętego leku.
Gdy temperatura wody jest o 2-3°C niższa od temperatury tarła, dawkę przysadki mózgowej zwiększa się o 30-50%.
Podają zastrzyki przysadkowe pozytywne rezultaty dopiero po ukończeniu czwartego etapu dojrzałości produktów reprodukcyjnych u producentów. Wskaźnikiem tego stanu komórek jajowych jest przemieszczenie ich istniejących jąder w kierunku kanału (mikropylu), przez który plemnik przedostaje się do wnętrza komórki jajowej.
Czwarty etap u mężczyzn charakteryzuje się zakończeniem procesu tworzenia plemników. U takich samców przeważają dojrzałe, w pełni uformowane plemniki.
Dobre rezultaty uzyskuje się już po jednorazowym wstrzyknięciu acetonowanego leku. Czasami jednak nie są one wystarczająco skuteczne. Taka sytuacja ma miejsce, gdy stan ogólny producentów ulega pogorszeniu lub rozwój jaj nie jest całkowicie zakończony. W takiej sytuacji czasami wskazane jest wykonanie wielokrotnych wstrzyknięć małych dawek leku. Należy jednak zawsze pamiętać, że zwiększone dawki preparatu przysadki mózgowej w porównaniu do dawek potwierdzonych naukowo prowadzą do obniżenia jakości powstałych dojrzałych komórek rozrodczych. Wyjaśnia to fakt, że acetonowany proszek przysadki mózgowej zawiera również hormony, które nie są bezpośrednio potrzebne do dojrzewania komórek rozrodczych. W rezultacie, skutki uboczne ciało wchodzi w stan dużego napięcia (stresu).
Sukces zastrzyków przysadkowych zależy w dużej mierze od sposobu utrzymania hodowców. Na wszystkich etapach tej operacji – przed, w trakcie i po wprowadzeniu preparatu przysadki mózgowej do organizmu ryby – z samicami i samcami należy obchodzić się bardzo ostrożnie, aby zapobiec zranieniu. W zbiornikach przeznaczonych dla hodowców musi panować dobry reżim tlenowy, samice i samce należy trzymać oddzielnie. Przed iniekcją przenosi się je do małych betonowych basenów lub klatek, w których powstają optymalne warunki w celu zapewnienia dojrzewania produktów rozrodczych po wprowadzeniu do organizmu leku hormonalnego.
Określanie czasu dojrzewania producentów
Po wprowadzeniu przysadki mózgowej ryby rozpoczynają okres dojrzewania (do uzyskania dojrzałych jaj), którego czas trwania zależy od temperatury wody i stanu początkowego samic.
A. S. Ginzburg i T. A. Detlaf ustalili, że przy tej samej średniej temperaturze okres dojrzewania jest zawsze znacznie krótszy niż okres rozwoju embrionalnego (4-6 razy). Wynika z tego, że wraz ze wzrostem lub spadkiem temperatury odpowiednio zmienia się czas trwania okresów dojrzewania i rozwoju embrionalnego. Identyfikacja takiego wzorca umożliwiła A. S. Ginzburgowi i T. A. Detlaffowi skonstruowanie wykresów prawdopodobnych czasów dojrzewania samic jesiotra w różnych temperaturach w zależności od czasu trwania ich rozwoju embrionalnego.
Wykresy przedstawiają krzywe wskazujące przewidywany czas osiągnięcia dojrzałości po wstrzyknięciu przysadki mózgowej. Korzystając z wykresów, można również określić czas oglądania samic i pobierania próbek, obliczając najpierw średnią temperaturę w okresie dojrzewania.
Obliczenia dokonuje się w następujący sposób. O godzinie 19:00 w wigilię dnia odbioru jaj i o godzinie 7:00 rano w dniu odbioru jaj obliczana jest średnia temperatura, począwszy od chwili wstrzyknięcia tarlaków. Potem dalej pozioma oś znajdź punkt odpowiadający średniej temperaturze w okresie dojrzewania i przywróć z niego prostopadłą, aż przetnie się z krzywymi. Punkt przecięcia z krzywą pokazuje, po ilu godzinach dojrzewają pierwsze samice. Otrzymaną liczbę godzin dodaje się do czasu wstrzyknięcia i określa się czas rozpoczęcia oglądania samic. Punkt przecięcia z krzywą pozwala w ten sam sposób określić moment dojrzewania wielu samic.
Korzystając z tego harmonogramu, można określić czas wstrzyknięcia zawiesiny przysadki mózgowej samicom jesiotra w celu uzyskania kawioru w czasie dogodnym do pracy. Dzięki temu ułatwia się współpracę z producentami, zmniejsza się liczba niezbędnych wizyt samic, poprawia się jakość kawioru i zmniejszają się straty powstałe w wyniku jego przejrzałości lub niedojrzałości.
Obliczając wymagany wskaźnik, najpierw określ średnią temperaturę na dzień przed wstrzyknięciem. Następnie na poziomej osi wykresu dojrzewania kobiet znajduje się punkt odpowiadający tej temperaturze i przywracana jest z niego prostopadła, aż przetnie się z krzywą. Z punktu przecięcia prostopadłą obniża się na oś pionową i na tej podstawie określa się liczbę godzin, jakie upłynną w danej średniej temperaturze od wstrzyknięcia do dojrzewania pierwszych samic. Obliczoną w ten sposób liczbę godzin odejmuje się od godziny rozpoczęcia dnia roboczego i uzyskuje się godzinę, w której należy zaszczepić samice.
Metodę określania stopnia dojrzałości gonad żeńskich bez otwierania ryby zaproponował także V.Z. Trusov. Metoda ta sprowadza się do pobrania kilku jaj z jajnika kobiety za pomocą sondy. Przenosi się je pęsetą do probówki z formaldehydem. Probówki przenosi się do pomieszczenia, w którym zainstalowany jest mikrotom zamrażający. Jaja układa się na stole w taki sposób, aby sekcje maszynki do golenia mikrotomu przechodziły przez bieguny zwierzęce i wegetatywne. Następnie jaja zalewa się wodą z pipety do oczu, po czym stół przykrywa się metalową nakrętką i skrawki zamraża się dodając dwutlenek węgla z balonu.
Skrawki wykonuje się do momentu pojawienia się rdzenia wyraźnie widocznego gołym okiem lub pod lupą. Jeśli leży blisko błon, wówczas stan gonady żeńskiej znajduje się w IV fazie dojrzałości.
Metoda określania stopnia dojrzałości gonad żeńskich zaproponowana przez V.Z. Trusova jest stosunkowo prosta, niezawodna i zajmuje niewiele czasu: analizę jednej próbki można przeprowadzić w ciągu 5-8 minut.
Dojrzewanie samic jest również monitorowane poprzez bezpośrednią obserwację. Kontrola jest intensyfikowana w ciągu ostatnich sześciu godzin – najbardziej prawdopodobnego okresu dojrzewania w danej temperaturze.
Jeszcze prostszą, ekspresową metodę określania dojrzałości gonad u hodowców jesiotrów opracował prof. B. N. Kazansky, Yu. A. Feklov, S. B. Podushka i A. N. Molodtsov. Istota metody polega na tym, że z tylnej części jajnika pobiera się próbkę kawioru za pomocą sondy, którą wprowadza się do jamy ciała pod kątem 30°, co pozwala uniknąć kontaktu z ważnymi narządami. Bagnet posiada końcówkę wypełnioną jajami oraz pręt umożliwiający jego opróżnienie.
Całkowita długość sondy wynosi 125 mm, końcówka 65 mm, w tym część zaostrzona 20 mm. Zewnętrzna średnica pręta wynosi 4,5 mm. Sonda kończy się uchwytem umieszczonym prostopadle do pręta. Aby określić stopień ukończenia czwartego etapu dojrzałości, jaja wyekstrahowane sondą gotuje się przez 2 minuty. Stwardniałe jaja są cięte żyletką wzdłuż osi od słupa zwierzęcego do słupa wegetatywnego. Skrawki ogląda się pod lupą lub przez lornetkę. Stopień polaryzacji jaja zależy od położenia jądra względem bieguna zwierzęcia. Wskaźnik polaryzacji wyznacza się ze wzoru zaproponowanego przez Yu.A. Feklova: l = A/B, gdzie l jest współczynnikiem polaryzacji; A to odległość od rdzenia do powłoki; B to największa odległość wzdłuż osi od zwierzęcia do bieguna wegetatywnego.
Jak mniejsza wartość l, im bardziej spolaryzowane jest jajo i tym większe jest zakończenie IV etapu dojrzałości gonad. Największą polaryzację oocytu obserwuje się przy l = l/30: l/40.
Jeśli brzuch samicy po dotknięciu okaże się bardziej miękki niż przed wstrzyknięciem, oznacza to możliwe dojrzewanie jaj u tego osobnika. Aby się o tym przekonać, należy pod samicę podłożyć nosze do ryb z wodą, podnieść je i ustawić na kozłach. W tym czasie ryba wykonuje gwałtowne ruchy, a jeśli jaja są dojrzałe, można zobaczyć jaja wypuszczone na nosze. Gdy samica się uspokoi, należy ją przewrócić na bok i dotknąć jej brzucha. U osoby dojrzałej po masowaniu tylnej części brzucha kawior wypływa swobodnie strumieniem.
Zatem, jak zauważają A. S. Ginzburg i T. A. Detlaf, wskaźnikami otwierania się samic są miękki odwłok, jaja wyrzucane silnym strumieniem i tonące ściana jamy brzusznej kiedy kobieta wstaje.
Konieczne jest natychmiastowe pozyskanie jaj od w pełni dojrzałej samicy.
Uzyskanie dojrzałego kawioru
Prace nad uzyskaniem dojrzałych produktów rozrodczych, obejmujące zbiór, zapłodnienie i mycie jaj, prowadzone są w dział operacyjny, który zwykle znajduje się w wylęgarni. Posiada sprzęt do pozyskiwania produktów rozrodczych taki jak wyciągarka, zacisk i lodówka (KX-6B), w której przechowywane są producenci bez kawioru i nasienia (kawior i nasienie są pozyskiwane przed dostarczeniem do punktu skupu) ). Na dziale operacyjnym znajdują się stoły produkcyjne o wymiarach 126x84x90 cm typu SPSM-4.
Dojrzałą samicę ogłusza się mocnym uderzeniem w nos drewnianym młotkiem, po czym wykrwawia się ją do sucha poprzez przecięcie tętnicy ogonowej lub skrzelowej, przemywa wodą i suszy. Aby zapobiec przedostawaniu się krwi do misy z kawiorem, miejsce nacięcia zawiązuje się bandażem. Gotową do otwarcia rybę podnosi się za głowę przez poprzeczkę lub blok i zabezpiecza. Brzuch nacina się od dołu do góry, od otworu płciowego na odległość 15-20 cm, nacięcie wykonuje się płytko i lekko z boku linii środkowej. Aby uniknąć ewentualnej utraty jaj, ogon samicy trzyma się nad miednicą. Część dojrzałego kawioru swobodnie spływa jego krawędzią do basenu. Następnie odwłok przycina się do płetw piersiowych, a pozostałe, swobodnie oddzielone jaja przenosi się do miednicy. Do zapłodnienia można również wykorzystać łagodne jaja znajdujące się w jajowodach.
Ilość uzyskanych jaj zależy od wagi samicy.
Jaja od różnych samic nie są mieszane. Wszystkie operacje z kawiorem przeprowadzane są z zachowaniem szczególnej ostrożności. Kawior można zbierać wyłącznie w misach z nienaruszoną emalią. W misce o pojemności 12-15 litrów umieszcza się nie więcej niż 2 kg kawioru.
Zapłodnione są wyłącznie pełnoprawne, dojrzałe jaja, które muszą być identyfikowalne.
Niedojrzałe jaja różnią się od dojrzałych tym, że mają ten sam kolor we wszystkich obszarach. Dojrzałe jaja bardzo powoli odbarwiają wodny roztwór błękitu metylenowego. Rozwiązanie to w ogóle nie odbarwia jaj niedojrzałych, natomiast jaja przejrzałe odbarwiają się znacznie szybciej niż dojrzałe. Ta metoda określania jakości hodowlanej kawioru z jesiotra została opracowana przez M. F. Verniduba, profesora nadzwyczajnego Leningradzkiego Uniwersytetu Państwowego. Sprowadza się to do następującej procedury: 2 cm 3 kawioru (bez płynu wnękowego) umieszcza się w butelce lub szczelnie zamkniętej probówce wypełnionej 10 cm 3 świeżo przygotowanego roztworu błękitu metylenowego (jedna kropla 0,05% wodnego roztworu farba na 10 cm 3 wody), kilka razy Wstrząśnij raz i uwzględnij czas, w którym roztwór odbarwi się.
W niektórych przypadkach odbarwienie nie następuje w zwykłym czasie dla kawioru tej jakości.
Określanie gotowości jaj do zapłodnienia
L. T. Gorbaczowa, pracownica Instytutu Badawczego Rybołówstwa Azow, zaproponowała ocenę gotowości jaj do zapłodnienia w fabryce na podstawie szybkości, z jaką skorupki jaj stają się lepkie po zapłodnieniu.
Aby określić, kiedy przystąpić do inseminacji jaj, które zostały już usunięte z jamy ciała samicy, pobiera się 100-150 jaj, inseminuje plemnikiem i określa czas, w którym jaja znajdujące się w próbce przylegają do szalki Petriego. Następnie, według specjalnego harmonogramu, ustala się termin, w którym należy dokonać inseminacji wszystkich jaj. W przypadku kawioru z jesiotra za najlepszy stan do zapłodnienia uważa się taki, w którym co najmniej 90–95% wszystkich zapłodnionych jaj skleja się w ciągu 9–16 minut; w przypadku kawioru sevruga stan ten odpowiada czasowi 6-10 minut. Taki kawior rozwija się normalnie.
Przejrzały kawior z jesiotra zaczyna się kleić po 4-6 minutach, a jesiotr gwiaździsty - po 2-4 minutach. Takie jaja powodują zwiększoną śmiertelność w okresie inkubacji.
Do nawożenia stosuje się wyłącznie kawior wysokiej jakości, którego wskaźnikami są:
- obecność na biegunie embrionalnym plamki o innym kolorze niż druga połowa jaja;
- jaja o regularnym okrągłym kształcie i jednakowej wielkości oraz zabarwione blastomery powstałe po pojawieniu się dwóch bruzd bruzdkowych;
- pojawienie się po 6-12 minutach u jesiotra i po 5-10 minutach u jesiotra gwiaździstego wąska szczelina pomiędzy powłoka zewnętrzna oraz jaja z próbki jaja szybko wypłukane z płynu z jamy ustnej (w jajach przejrzałych proces ten rozpoczyna się wcześniej, w jajach niedojrzałych - później);
- pewna masa jaj; 1 g dojrzałego kawioru bieługi powinien zawierać 35-40 jaj, jesiotr - 45-50 jaj, jesiotr gwiaździsty - 75-90 jaj.
Jeśli znajdziesz błąd, zaznacz fragment tekstu i kliknij Ctrl+Enter.
Produkty płciowe pozyskiwane są z ryb trzema sposobami: metodą odcedzania, metodą sekcji i metodą łączoną.
Naciągnięcie.
Przed odcedzeniem odwłok i płetwę odbytową przeciera się suchą szmatką (ryc. 1), a następnie głowę ryby wraz z płetwą odbytową owija się drugą suchą szmatką. Jeśli ryba jest mała, odcedzanie może wykonać jedna osoba. Głowę ryby dociska się łokciem lewej ręki do ciała, a dłonią tej ręki trzyma się łodygę ogona w takiej pozycji, aby otwór narządów płciowych znajdował się nad krawędzią czystego naczynia (emaliowanego lub plastikowego) miednicy), a brzuch jest lekko wygięty na zewnątrz. Pod wpływem nacisku ścian jamy brzusznej część kawioru zostaje uwolniona z otworu narządów płciowych, opada na brzeg naczynia i spływa na dno. Nie dopuść, aby jajka spadły bezpośrednio na dno naczynia, ponieważ łatwo je uszkodzić. Po ustaniu swobodnego przepływu jaj brzuch samicy lekko ściska się i masuje palcami prawa ręka do płetwy odbytowej. Kiedy pojawią się grudki kawioru i krople krwi, wysiłek zostaje zatrzymany. Jeśli samica jest duża, jaja odcedzają dwie osoby: jedna trzyma głowę ryby, druga trzyma łodygę ogona nad krawędzią naczynia i jednocześnie wolną ręką odcedza jaja. Metodę odcedzania z powodzeniem zastosowano w przypadku łososia, karpia, siei i niektórych jesiotrów (sterletów).
Z ryb składających tarło porcyjne kawior pobiera się przez odcedzenie.
Ryc.1. Odcedzający kawior
Sperma jest również filtrowana w ten sam sposób. Dojrzałego samca trzyma się nad naczyniem i masuje jego brzuch, aż plemniki zaczną wypływać z otworu genitalnego. U dużych samców plemniki są filtrowane za pomocą gumowej sondy wprowadzonej do otworu płciowego. Plemnik dojrzewa porcjami, więc w razie potrzeby można go pobrać od samców kilkukrotnie. Metodą odcedzania pobiera się plemniki od samców wszystkich gatunków ryb sztucznie hodowanych.
Otwarcie(ryc. 2). Metodę dysekcji stosuje się do zbierania kawioru z ryb nieożywionych. Ta metoda zbierania kawioru z jesiotra jest najczęstsza.
Dojrzałą samicę jesiotra unieruchamia się uderzeniem drewnianego młotka, po czym wykrwawia się ją poprzez przecięcie tętnicy ogonowej lub skrzelowej, przemywa wodą i wyciera do sucha. Aby zapobiec przedostawaniu się krwi do misy z kawiorem, miejsce nacięcia zawiązuje się bandażem. Gotową do sekcji samicę podwiesza się za głowę za pomocą specjalnego podnośnika i zabezpiecza. Brzuch nacina się poniżej otworu płciowego o 15-20 cm, nacięcie wykonuje się płytko i nieco z boku od linii środkowej. Aby uniknąć ewentualnej utraty jaj, ogon samicy trzyma się nad miednicą, a część dojrzałych jaj swobodnie spływa do miednicy wzdłuż jej krawędzi. Następnie odwłok przycina się do środkowych płetw, a pozostałe, swobodnie oddzielone jaja przenosi się do basenu. Do zapłodnienia można również wykorzystać łagodne jaja znajdujące się w jajowodzie.
Ryc.2. Wybór kawioru metodą otwierania
Metoda łączona. W tej metodzie wszystkie operacje są łączone, część kawioru jest pobierana z ryby przez odcedzenie, a pozostała część przez otwarcie, czego nie można uzyskać ze względów czysto technicznych.
W Ostatnio Powszechnie stosowane są nowe metody pozyskiwania kawioru z jesiotra, zwane metodami dożylnego pobierania produktów rozrodczych. I.A. W 1969 roku Burtsev opracował metodę dożylnego pobierania kawioru z ryb jesiotra, nazwaną „metodą cesarskie cięcie" Zaproponowano im częściowe otwarcie jamy brzusznej mieszańców samic jesiotra, a następnie chirurgiczne zszycie nacięcia. Metoda ta znalazła później szerokie zastosowanie w komercyjnej hodowli ryb. Nad odbytem samicy wykonuje się małe nacięcie (10-15 cm), przez które można zebrać jaja. Metoda ta jest jednak dość pracochłonna i nie wszyscy producenci przeżywają tę operację.
Obecnie powszechnie stosowana jest metoda „nacięcia jajowodu” (Podushka, 1986). Po dojrzeniu samicy jesiotra wykonuje się nacięcie w jednym z jajowodów. Jajniki jesiotra nie mają własnej jamy, a kawior po dojrzewaniu trafia bezpośrednio do jamy ciała. Jajowody to dwie długie rurki zlokalizowane w grzbietowo-bocznych częściach jamy brzusznej. Po wykonaniu nacięcia w ogonowej części jednego z jajowodów, owulowane jaja mogą przedostać się do otworu płciowego bezpośrednio z jamy ciała, omijając jajowody. Głębokość wprowadzenia skalpela do jajowodu zależy od wielkości ryby i wynosi od jednego do kilku centymetrów. Jaja swobodnie wypływają z otworu płciowego. Cięcie jajowodów jest dość trudne prosta obsługa a przeżywalność ryb na polu jest bliska 100%. Metoda ta jest powszechnie stosowana na wielu fermach jesiotrów (ryc. 3).
Skale dojrzałości (dla osobników jednocześnie rozmnażających się):
1) nieletni(juv) osobniki (niedojrzałe), płeć jest nie do odróżnienia gołym okiem. Gonady wyglądają jak cienkie nitki;
2) przygotowawczy: gonady zaczynają dojrzewać, można rozpoznać płeć, u większości ryb faza ta trwa przez całe lato;
U kobiet jajniki wyglądają jak przezroczyste sznurki, wzdłuż których biegną naczynia krwionośne. Jaja nie są widoczne gołym okiem.
U samców jądra mają wygląd spłaszczonych sznurków i są różowo-białawe;
3) dojrzewanie: jajniki zwiększają swoją objętość; ryby składające tarło wiosenne mogą pozostać na tym etapie od drugiej połowy lata do wiosny przyszłego roku.
U samic jaja są dobrze widoczne gołym okiem, mają różnorodny kształt i trudno je rozdzielić przy zeskrobaniu. Ich przezroczystość maleje i pod koniec etapu staje się nieprzezroczysta.
U mężczyzn jądra mają bardziej rozszerzoną przednią część, zwężającą się z tyłu. Przy cięciu poprzecznym ich krawędzie nie topią się;
4) dojrzałość: narządy płciowe osiągają prawie maksymalny rozwój (stadium krótkie)
U kobiet jajniki zwykle wypełniają 2/3 jamy brzusznej. Jajka są duże, przezroczyste, łatwo od siebie oddzielane, a po naciśnięciu wypływają.
Mężczyźni mają jądra biały i wypełnione są płynnym mlekiem, a przy przecięciu jądra w poprzek jego krawędzie są zaokrąglone. Po naciśnięciu brzucha uwalniają się krople nasienia, często z krwią;
5) tarło(płyn)
U samic lekki nacisk na brzuch powoduje uwolnienie jaj.
U mężczyzn lekki nacisk na brzuch powoduje uwolnienie plemników;
6)Nokaut: produkty rozrodcze są całkowicie usuwane (krótki etap)
U kobiet jajniki są zwiotczałe, objęte stanem zapalnym i mają ciemnoczerwony kolor. Często pozostaje niewielka ilość jaj.
U mężczyzn jądra są zwiotczałe, ze stanem zapalnym i mają ciemnoczerwony kolor;
6-2) Etap odzyskiwania- gonady regenerują się po tarle i uzyskują elastyczny kształt, ale obszary jajników i jąder w pobliżu otworu moczowo-płciowego pozostają w stanie zapalnym.
Zalety:
Stosowany w warunkach polowych w PBA
Umożliwia jednoznaczną identyfikację dynamiki wewnątrzgatunkowej
Wady:
Subiektywność
Wskaźniki ilościowe:
Współczynnik dojrzałości to stosunek masy gonad do masy ciała ryby,%
Wskaźnik dojrzałości to procent CV gonad, obliczony. w niektórych okresach dojrzałości gonad do max KZ.
54. Płodność ryb: podstawowe pojęcia i metody ich wykrywania.
Płodność zależy od wieku i warunków środowiskowych.
Płodność bezwzględna (indywidualna) - liczba jaj, które samica może złożyć w 1 sezonie tarłowym.
Wraz ze wzrostem masy i rozmiaru ciała wzrasta płodność
Względna płodność indywidualna to liczba jaj na jednostkę masy samicy.
Płodność robocza to liczba jaj pobranych w celu rozrodu od 1 samicy.
Płodność gatunku to liczba jaj składanych przez samicę w ciągu całego jej życia.
Płodność populacji to liczba jaj złożonych przez populację w ciągu 1 sezonu tarłowego.
Metoda określania płodności
Zrobione w 4. etapie dojrzałości.
Przyjmuje się go metodą wagową lub objętościową.
Określ płodność według porcji
Przeanalizuj jajka i wybierz porcje.
55. Cechy określania etapów dojrzałości i płodności u gatunków ryb odbywających tarło porcyjne. Płodność to liczba jaj, które samica może złożyć w ciągu jednego sezonu tarłowego. U ryb składających tarło płodność określa się na podstawie liczby porcji, jeżeli ryba składa tarło w 2-3 porcjach, można to określić metodą wizualną, w przypadku > 3 porcji należy wykonać badania histologiczne. Metody oceny stopnia dojrzałości gonad: 1) histologiczne (wykonuje się skrawki i określa stopień dojrzałości oocytu i plemnika), 2) skala dojrzałości (młoda, przygotowawcza, dojrzewanie, dojrzałość, tarło, wylęganie), 3) ilościowe wskaźniki dojrzałości gonad. masa gonad i masa ciała ryby. Dla jajnika ryb w okresach tarła charakterystyczne są: oocyty nierozwinięte lub oocyty w różnych fazach dojrzałości. Każda porcja może poprzedzać drugą o 2-3 tygodnie. Wielkość porcji ocenia się na podstawie pomiaru średnicy jaj w jajniku w okresie przedtarłowym i tarłowym.
Rozwój układ moczowo-płciowy w ewolucji ryb doprowadziło do oddzielenia się przewodów rozrodczych od przewodów wydalniczych.
Cyklostomy nie mają specjalnych przewodów rozrodczych. Z pękniętej gonady produkty płciowe dostają się do jamy ciała, z niej - przez pory narządów płciowych - do zatoki moczowo-płciowej, a następnie przez otwór moczowo-płciowy są wydalane.
U ryb chrzęstnych układ rozrodczy jest połączony z układem wydalniczym. U samic większości gatunków jaja są uwalniane z jajników przez kanały Müllera, które działają jak jajowody i otwierają się do kloaki; Kanał Wolffa to moczowód. U samców wilków kanał pełni funkcję nasieniowodu, a także otwiera się do kloaki poprzez brodawkę moczowo-płciową.
U ryb kostnych kanały Wolffa służą jako moczowody, kanały Müllera są u większości gatunków zredukowane, a produkty rozrodcze są wydalane przez niezależne przewody płciowe, które otwierają się do otworu moczowo-płciowego lub narządów płciowych.
U samic (większość gatunków) dojrzałe jaja są uwalniane z jajnika przez krótki przewód utworzony przez błonę jajnika. U mężczyzn kanaliki jąder łączą się z nasieniowodem (niepołączonym z nerką), który otwiera się na zewnątrz przez otwór moczowo-płciowy lub narządy płciowe.
Gruczoły płciowe, gonady - jądra u mężczyzn i jajniki lub jajniki u kobiet - formacje przypominające wstążki lub worki wiszące na fałdach otrzewnej - krezki - w jamie ciała, nad jelitami, pod pęcherzem pławnym. Struktura gonad, które są podobne w rdzeniu, ma pewne cechy szczególne u różnych grup ryb: u cyklostomów gonada jest nieparzysta, u prawdziwych ryb gonady są przeważnie sparowane. Różnice w kształcie gonad u różnych gatunków wyrażają się głównie w częściowym lub całkowitym połączeniu par gruczołów w jeden niesparowany (samica dorsza, okonia, węgorza, samca myszoskoczka) lub w wyraźnie wyrażonej asymetrii rozwoju: często gonady są różne pod względem objętości i wagi (gromadnik, karaś srebrny itp.), aż do całkowitego zniknięcia jednego z nich. Od wewnętrznej strony ścian jajnika poprzeczne płytki zawierające jaja wystają do jego szczelinowej jamy, na której rozwijają się komórki rozrodcze. Podstawą płytek są sznury tkanki łącznej z licznymi rozgałęzieniami. Wzdłuż sznurów biegną silnie rozgałęzione naczynia krwionośne. Dojrzałe komórki rozrodcze spadają z płytek składających jaja do jamy jajnika, która może znajdować się pośrodku (na przykład okoń) lub z boku (na przykład karpiowate).
Jajnik łączy się bezpośrednio z jajowodem, który wyprowadza jaja. W niektórych postaciach (łosoś, stynka, węgorz) jajniki nie są zamknięte, a dojrzałe jaja wpadają do jamy ciała, a stamtąd specjalnymi kanałami są usuwane z organizmu. Jądra większości ryb to sparowane struktury przypominające worki. Dojrzałe komórki rozrodcze są uwalniane do środowiska zewnętrznego przez przewody wydalnicze – nasieniowody – przez specjalny otwór narządowy (u samców łososia, śledzia, szczupaka i niektórych innych) lub przez otwór moczowo-płciowy zlokalizowany za odbytem (u samców większości ryb kostnoszkieletowych). .
Rekiny, płaszczki i chimery mają dodatkowe gruczoły płciowe (przednią część nerki, która staje się narządem Leydiga); wydzielina gruczołów miesza się z plemnikami.
U niektórych ryb koniec nasieniowodu jest rozszerzony i tworzy pęcherzyk nasienny (niehomologiczny z narządami o tej samej nazwie u wyższych kręgowców).
Wiadomo o funkcji gruczołowej pęcherzyka nasiennego u niektórych przedstawicieli ryb kostnych. Z wewnętrznych ścian jądra odchodzą do wewnątrz kanaliki nasienne, zbiegając się do przewodu wydalniczego. W zależności od umiejscowienia kanalików jądra ryb kostnych dzielą się na dwie grupy: karpiowate lub zjadliwe, - u karpia, śledzia, łososia, suma, szczupaka, jesiotra, dorsza itp.; perkoid lub promieniowy, - u perciformes, cierników itp.
W jądrach typu karpiowatego kanaliki nasienne skręcają się w różnych płaszczyznach i bez określonego układu. Dzięki temu na poprzecznych przekrojach histologicznych widoczne są ich poszczególne obszary o nieregularnym kształcie (tzw. ampułki). Przewód wydalniczy znajduje się w górnej części jądra. Krawędzie jądra są zaokrąglone.
W jądrach typu perkoidalnego kanaliki nasienne rozciągają się promieniowo od ścian jądra. Są proste, przewód wydalniczy znajduje się pośrodku jądra. Jądro w przekroju ma kształt trójkątny.
Wzdłuż ścian kanalików (ampułek) znajdują się duże komórki - pierwotne komórki nasienne, pierwotne spermatogonie i przyszłe plemniki.
Komórki rozrodcze pojawiają się na wczesnym etapie rozwoju embrionalnego w fałdach narządów płciowych rozciągających się wzdłuż jamy ciała. U młodych łososi (łosoś różowy, łosoś kumpel, łosoś sockeye, łosoś masu, łosoś coho i łosoś atlantycki) pierwotne komórki rozrodcze znajdują się na etapie tworzenia pierwotnych przewodów nerkowych. W zarodku łososia atlantyckiego pierwotne komórki rozrodcze zidentyfikowano w wieku 26 dni. W narybku rybnym gonady występują już w postaci włosowatych sznurków.
Oogonia – przyszłe jaja – powstają w wyniku podziału podstawowych komórek nabłonka zarodkowego, są to okrągłe, bardzo małe komórki, niewidoczne gołym okiem. Po podziałach owogonialnych oogonia przekształca się w oocyt. Następnie w trakcie oogenezy – rozwoju komórek jajowych – wyróżnia się trzy okresy: okres szlaku synaptycznego, okres wzrostu (mały – protoplazmatyczny i duży – trofoplazmatyczny) oraz okres dojrzewania.
Każdy z tych okresów dzieli się na kilka faz. Okres szlaku synaptycznego charakteryzuje się głównie transformacją jądra komórkowego (oocytu). Następnie następuje okres małego wzrostu protoplazmy, kiedy następuje wzrost wielkości oocytu w wyniku akumulacji cytoplazmy. Tutaj rozwój oocytów dzieli się na fazę młodzieńczą i fazę pęcherzyka jednowarstwowego.
W fazie młodzieńczej oocyty są jeszcze stosunkowo małe, najczęściej okrągłe, z cienką, bezstrukturalną, tzw. pierwotną (wytwarzaną przez samo jajo) otoczką, do której przylegają poszczególne komórki pęcherzykowe, a na zewnątrz - łączną komórki tkanki. Jądro oocytu ma wyraźnie widoczne cienka skorupa; Jest okrągły i duży i prawie zawsze leży pośrodku. Wzdłuż obwodu jądra znajdują się liczne jąderka, większość z nich sąsiaduje z otoczką. W fazie pęcherzyka jednowarstwowego własna błona staje się grubsza, a nad nią tworzy się błona pęcherzykowa z sąsiadującymi pojedynczymi komórkami tkanki łącznej.
W tej samej fazie w oocycie często można wykryć strefę witellogenną. Strefa ta ma strukturę komórkową, piankową i pojawia się w cytoplazmie wokół jądra, w pewnej odległości od niego (strefa okołojądrowa). Pod koniec fazy (i okresu) oocyty powiększyły się tak bardzo, że można je odróżnić za pomocą szkła powiększającego lub nawet gołym okiem.
Podczas powstawania komórki jajowej wraz z przemianami jądra powstają i gromadzą się w niej składniki odżywcze skoncentrowane w żółtku (białka i lipidy) oraz wtrącenia czysto lipidowe, które następnie w trakcie rozwoju zarodka wykorzystywane są do jego potrzeb plastycznych i energetycznych. Proces ten rozpoczyna się w okresie dużego wzrostu oocytu, kiedy na jego obwodzie pojawiają się wakuole zawierające węglowodany. Zatem okres dużego (trofoplazmatycznego) wzrostu oocytu charakteryzuje się wzrostem nie tylko ilości protoplazmy, ale także akumulacją składników odżywczych i substancji troficznych - białka i tłuszczu.
W okresie dużego wzrostu następuje wakuolizacja cytoplazmy, pojawienie się żółtka i wypełnienie nim oocytu. Okres wielkiego wzrostu również składa się z kilku faz. W fazie wakuolizacji cytoplazmy oocyty, powiększone w porównaniu z fazą poprzednią, mają nieco kanciasty kształt pod wpływem ciśnienia sąsiadujących komórek. Błony oocytu – jego własna, pęcherzykowa tkanka łączna – stały się wyraźniejsze. Na obwodzie oocytu tworzą się pojedyncze małe wakuole, które w miarę zwiększania się liczby tworzą mniej lub bardziej gęstą warstwę. Są to przyszłe pęcherzyki korowe lub granulki. Zawartość wakuoli składa się z węglowodanów (polisacharydów), które po zapłodnieniu jaja przyczyniają się do wchłaniania wody pod skorupą i tworzenia przestrzeni periwitelinowej. U niektórych gatunków (łosoś, karp) w cytoplazmie przed wakuolami pojawiają się wtręty tłuszczowe. W jądrze jąderka rozciągają się głębiej od otoczki. W kolejnej fazie – początkowej akumulacji żółtka – na obrzeżu oocytu pomiędzy wakuolami pojawiają się oddzielne, drobne kuleczki żółtka, których liczba gwałtownie wzrasta, tak że pod koniec fazy zajmują prawie całe osocze oocytu .
W osłonce właściwej pojawiają się cienkie kanaliki, nadając jej promieniste prążki (Zona radiata); Składniki odżywcze przedostają się przez nie do oocytu. Powyżej własną skorupę u niektórych ryb tworzy się kolejna błona wtórna - błona (pochodna komórek pęcherzykowych otaczających oocyt). Skorupka ta, o zróżnicowanej strukturze (galaretowata, plastra miodu lub kosmkowa), po opuszczeniu pęcherzyka jajowego przez oocyt, służy do mocowania jaja do podłoża. Błona pęcherzykowa staje się dwuwarstwowa. Granice rdzenia są wyraźne, ale stały się kręte i przypominają pazury.
Kolejna faza – wypełnienie oocytu żółtkiem – charakteryzuje się bardzo silnym wzrostem objętości żółtka, którego cząstki zamiast kulistego uzyskują wielopłaszczyznowy, grudkowaty kształt. Wakuole są dociskane do powierzchni oocytu.
Ze względu na dominację w tym czasie zmian ilościowych (bez znaczących przesunięć morfologicznych) część badaczy uważa za niewłaściwe wyodrębnianie tej fazy jako niezależnej. Pod koniec tej fazy oocyt osiąga swój ostateczny rozmiar. Widoczne są zmiany w żółtku i jądrze: jądro zaczyna się przesuwać (w stronę bieguna zwierzęcego), jego kontury stają się mniej wyraźne; Cząsteczki żółtka zaczynają się łączyć. Tworzenie powłoki wtórnej zostało zakończone.
Ostatnią fazą rozwoju jest faza dojrzałego oocytu. Cząsteczki żółtka u większości ryb (z wyjątkiem bocji, makropodów i niektórych karpiowatych) łączą się w jednorodną masę, oocyt staje się przezroczysty, cytoplazma koncentruje się na obrzeżach oocytu, a jądro traci swoje kontury. Przemiany rdzenia wchodzą w końcową fazę.
Jeden po drugim następują dwa etapy dojrzewania. W rezultacie powstaje jądro dojrzałego oocytu z haploidalną liczbą chromosomów i trzema ciałami redukcyjnymi, które nie biorą udziału w dalszy rozwój, oddzielone od jaja i zdegenerowane. Po drugim podziale dojrzewania rozwój mitotyczny jądra osiąga metafazę i pozostaje w tym stanie aż do zapłodnienia.
Dalszy rozwój (tworzenie przedjądra żeńskiego i oddzielenie ciała kierunkowego) następuje po zapłodnieniu.
Przez swoją własną (Z. radiata) przechodzi kanał (mikropyl), galaretowatą błonę, przez którą plemnik przedostaje się do komórki jajowej podczas zapłodnienia. Teleosts mają jeden mikropyl, jesiotry mają kilka: jesiotr gwiaździsty - do 13, bieługa - do 33, jesiotr czarnomorsko-azowski - do 52. Dlatego polispermia jest możliwa tylko u jesiotrów, ale nie u teleostów. Podczas owulacji błony pęcherzykowe i tkanki łącznej pękają i pozostają na płytkach zawierających jaja, a uwolniony z nich oocyt, otoczony własnymi i galaretowatymi błonami, wpada do jamy jajnika lub jamy ciała. Tutaj owulowane jaja znajdują się w płynie jamy (jajnika), utrzymując się względnie długi czas zdolność zapładniania (tab. 3). W wodzie lub poza płynem jamy ustnej szybko tracą tę zdolność.
U rekinów i płaszczek, które charakteryzują się zapłodnieniem wewnętrznym, zapłodnione jajo poruszające się wzdłuż dróg rodnych jest otoczone inną - trzeciorzędową - błoną. Substancja przypominająca róg tej skorupy tworzy twardą kapsułkę, która niezawodnie chroni zarodek w środowisku zewnętrznym.
Podczas rozwoju oocytów wraz z innymi zmianami następuje kolosalny wzrost ich wielkości: zatem w porównaniu z oogonią powstałą podczas ostatniego podziału oogonii, objętość dojrzałego oocytu zwiększa się u okonia 1 049 440 razy, u płoci - o 1 271 400 razy.
Tabela 3. Zachowanie zdolności zapładniającej przez jaja
| >8 |
U jednej samicy oocyty (a po owulacji jaja) nie są tej samej wielkości: największe mogą być 1,5–2 razy większe niż najmniejsze. Zależy to od ich umiejscowienia na blaszce jajorodnej: oocyty leżące w pobliżu naczyń krwionośnych są lepiej zaopatrzone w składniki odżywcze i osiągają większe rozmiary.
Charakterystyczną cechą procesu rozwoju plemników - spermatogenezy - jest wielokrotna redukcja komórek. Każda pierwotna spermatogonia dzieli się kilka razy, w wyniku czego dochodzi do gromadzenia się spermatogonii pod jedną błoną, zwanej cystą (etap reprodukcji). Ilość spermatogonii powstałej podczas ostatniego podziału nieznacznie wzrasta, w jej jądrze zachodzą przemiany mejotyczne, a spermatogonia przekształca się w spermatocyt pierwszego rzędu (stadium wzrostu). Następują wtedy dwa kolejne podziały (etap dojrzewania): spermatocyt pierwszego rzędu dzieli się na dwa spermatocyty drugiego rzędu, w wyniku podziału, z którego powstają dwa plemniki. W kolejnej – końcowej – fazie powstawania plemniki przekształcają się w plemniki. W ten sposób z każdego spermatocytu powstają cztery plemniki z połową (haploidalnym) zestawem chromosomów. Otoczka cysty pęka, a plemniki wypełniają kanaliki nasienne. Dojrzałe plemniki opuszczają jądro przez nasieniowody, a następnie przez przewód.
Charakterystyczną cechą rozwoju jąder jest silna nierówność (asynchronia) rozwoju narządu jako całości. Ta nierówność jest szczególnie wyraźna u ryb dojrzewających po raz pierwszy, ale dość wyraźnie wyraża się także u osobników w okresie tarła, które ponownie dojrzeją. W rezultacie prawie wszystkie samce składają tarło porcjami i można od nich uzyskać plemniki przez długi czas.
Proces dojrzewania komórek rozrodczych u różnych ryb przebiega zasadniczo według tego samego schematu. W miarę jak komórki rozrodcze rozwijają się w jajnikach i jądrach, wygląd i wielkość gonad. Stało się to przyczyną stworzenia tzw. skali dojrzałości gonad, za pomocą której możliwe byłoby określenie stopnia dojrzałości produktów rozrodczych na podstawie zewnętrznych cech gonad, co jest bardzo istotne w badaniach naukowych i komercyjnych. Częściej niż inni posługują się uniwersalną 6-punktową skalą, która opiera się na wspólnych cechach różne rodzaje ryba Zaproponowano także inne skale, które uwzględniają cechy dojrzewania niektórych grup ryb. Zatem dla jajników karpia i okonia V. M. Meyen zaproponował skalę 6-punktową, a dla jąder S. I. Kulaeva - skalę 8-punktową.
U zdecydowanej większości ryb inseminacja ma charakter zewnętrzny. Ryby chrzęstne, które charakteryzują się wewnętrzną inseminacją i żyworodnością, mają odpowiednie zmiany w strukturze aparatu rozrodczego. Rozwój ich zarodków następuje w tylnej części jajowodów, zwanej macicą. Spośród ryb kostnych żywotność jest typowa dla gambusii, labraksa i wielu innych ryby akwariowe. Ich młode rozwijają się w jajniku.
Tabela 4. Skala dojrzałości gonad. Kobiety
Etap się nie powtarza (zdarza się raz w życiu)
U niedojrzałych ryb ten etap następuje po etapie I; w jajnikach samic dojrzałych płciowo etap II następuje po ustąpieniu oznak przeszłego tarła, tj. po etapie VI
| III | Jajniki są okrągłe, koloru żółtopomarańczowego, zajmują około 1/3–1/2 długości jamy ciała. Wypełnione są małymi, nieprzezroczystymi, żółtawymi lub białawymi jajami, wyraźnie widocznymi gołym okiem. Po przecięciu jajnika jaja są trzymane w grudkach; płytki do składania jaj są nadal widoczne. Wzdłuż ścian jajnika biegną duże, rozgałęzione naczynia krwionośne | Oocyty leżą gęściej ze względu na wzrost ich rozmiaru. Są na początku okresu dużego (trofoplazmatycznego) wzrostu: większość oocytów przechodzi przez fazy wakuolizacji cytoplazmy i początek tworzenia żółtka. Są młodsze pokolenia. U samic, które już złożyły tarło, mogą wystąpić wchłanialne, niezarodzone jaja. |
| IV | Jajniki są znacznie powiększone i zajmują ponad połowę, czasem nawet 2/3 jamy ciała. Są koloru jasnopomarańczowego, szczelnie upakowane nieprzezroczystymi jajami. Ściany jajnika są przezroczyste. Podczas cięcia pojedyncze jaja wypadają. Płytki do składania jaj są nie do odróżnienia. Makroskopowo łatwo zauważyć przejście oocytów starszego pokolenia do następnej fazy: w jajniku zbliżonym do dojrzałości, wśród żółtych, mętnych oocytów pojawiają się pojedyncze większe i bardziej przezroczyste jaja. Liczba takich jaj rośnie. | Oocyty starszej generacji znajdują się w końcowej fazie wzrostu trofoplazmatycznego, czyli w fazie napełniania żółtkiem. Istnieją oocyty młodszych pokoleń. Czasami występują pozostałości zdegenerowanych dojrzałych jaj (u dojrzałych ryb) |
| V | Jajniki osiągają maksymalne rozmiary, wypełnione są jajami, które wypływają przy delikatnym głaskaniu brzucha (oraz po zastrzykach w przysadkę mózgową, nawet bez ucisku). Jaja owulowane są przezroczyste i kuliste | Oocyty starszej generacji osiągnęły swój ostateczny rozmiar. Grudki żółtka łączą się (u większości gatunków). Rdzeń jest nie do odróżnienia. Z pęcherzyków wyłaniają się oocyty. Obecne są oocyty młodszych pokoleń |
| VI | Ekstrakcja, jajnik po tarle. Ściany jajnika zapadają się, stają się zwiotczałe, nieprzejrzyste, pofałdowane i mają czerwonawo-niebieskawy kolor. Pusty jajnik znacznie zmniejsza swoją objętość | Puste pęcherzyki, zdegenerowane dojrzałe jaja pozostające niezłożone, oocyty młodego pokolenia |
Po pewnym czasie stan zapalny ustępuje, jajnik stopniowo się rozjaśnia, staje się jasnoróżowy i wchodzi w II etap.
Tabela 5. Skala dojrzałości gonad. Mężczyźni
Etap nie jest powtarzany
| II | Jądra są reprezentowane przez cienkie białawe lub lekko różowawe sznurki. Naczynia krwionośne na ich powierzchni nie są widoczne | Oprócz spermatogonii występują spermatocyty pierwszego rzędu |
| III | Jądra są spłaszczone na całej długości, zwężone w końcowej części, gęste, elastyczne, białawe lub różowawe z wielu małych naczyń krwionośnych. Na przekroju jądro wygląda na ostre, jego krawędzie nie łączą się; mleko nie jest wydzielane | Obraz mikroskopowy jest bardzo pstrokaty. Na przykład w jądrach typu karpiowatego, wraz z ampułkami wypełnionymi spermatocytami pierwszego i drugiego rzędu oraz plemnikami, znajdują się ampułki zawierające plemniki. Istnieją również spermatogonie - na obrzeżach. |
| IV | Jądra są duże, mlecznobiałe, mniej elastyczne. Po naciśnięciu brzucha uwalniają się małe krople mleka. Po przecięciu jąder krawędzie odpływają od uwolnionych plemników. | Liczba ampułek z uformowanymi plemnikami gwałtownie wzrasta. Inne ampułki zawierają plemniki, co oznacza, że w rozwoju komórek przygotowanych do tarła trwa asynchronia. |
| V | Stan tarła; plemniki są uwalniane obficie przy najmniejszym głaskaniu brzucha lub nawet bez dotykania jąder największy rozmiar, są elastyczne, mają mlecznobiały lub lekko kremowy kolor | Ampułki jąder w części obwodowej i środkowej wypełnione są plemnikami leżącymi na obwodzie jak fale |
| VI | Wylot, stan po tarle. Jądra pozbawione plemników są małe, miękkie, różowawe z brązowawym odcieniem i mają ostro kanciasty przekrój | Ściany kanalików nasiennych zapadają się i pogrubiają. Światło kanalików jest wąskie i znajdują się w nich pojedyncze, nieprzemiatane plemniki. Spermatogonie leżą w obszarach ścian |
U ryb, które odbywają tarło wielokrotnie, żelazo przechodzi następnie do etapu II
Aby pomyślnie wdrożyć działania związane z hodowlą ryb i rekultywacją, wymagana jest dogłębna wiedza koło życia cenne gatunki ryb i najważniejsze ogniwo - reprodukcja.
Pojęcie hodowla ryb obejmuje: rozwój gonad, tarło, zapłodnienie, rozwój embrionalny i postembrionalny. Rozmnażanie możliwe jest dopiero po osiągnięciu przez ryby dojrzałości płciowej, tj. dojrzewanie ich produktów rozrodczych (u samic, jaj, u samców, plemników).
Dojrzałość płciowa u niektórych gatunków ryb występuje w godz w różnym wieku. Większość karpi, okoni łosoś osiągają dojrzałość płciową w wieku 6-12 lat. U niektórych gatunków ryb okres rozwoju komórek rozrodczych jest opóźniony na dłuższy czas. W ten sposób jesiotr osiąga dojrzałość płciową w wieku 6-12 lat (bieługa - 10-16 lat). Dojrzałość płciowa u samców następuje 1-2 lata wcześniej niż u samic.
Czynniki środowiskowe (przede wszystkim temperatura i warunki żywienia) mają ogromny wpływ na proces dojrzewania produktów rozrodu ryb. Niskie temperatury, a także niewystarczające odżywianie mogą zatrzymać dojrzewanie gonad. Prawidłowe dojrzewanie komórek rozrodczych – oogeneza u kobiet i spermatogeneza u mężczyzn – zachodzi tylko w sprzyjających warunkach środowiskowych. Każda komórka rozrodcza, zanim w końcu dojrzeje, musi przejść przez szereg etapów swojego rozwoju. W tym przypadku wyróżnia się dwa procesy: 1 – okres osiągania dojrzałości płciowej, rozpoczynający się od pojawienia się pierwotnych komórek rozrodczych, a kończący na powstaniu dojrzałych produktów rozrodczych; 2 – okresowe dojrzewanie określonej części produktu rozrodczego w okresie międzytarłowym (po osiągnięciu dojrzałości płciowej). Pierwszy okres jest dłuższy, drugi trwa różnie dla różnych gatunków ryb. W ten sposób karp i leszcz rozmnażają się co roku, ale jesiotry umierają po 3-5 latach, a łosoś pacyficzny umiera po tarle.
Stopień dojrzałości gonad można określić za pomocą skali dojrzałości. W przypadku karpi i okoni istnieją skale SI. Kulaev i V.A. Meyen, dla jesiotra - A.Ya. Nedoshivina, A.V. Lukin i I.N. Molchanova. Z. Sakun i N.A. Butskaya opracowała dwie uniwersalne skale dla wszystkich handlowych grup ryb. Na podstawie tych dwóch skal opracowano jedną uniwersalną skalę dojrzałości gonad kobiet i mężczyzn.
Rozwój żeńskich komórek rozrodczych (oogeneza) składa się z następujących etapów:
Etap I – niedojrzałe młode osobniki. Gonady wyglądają jak grube przezroczyste sznury przylegające do ścian jamy ciała. Reprezentowane są komórki rozrodcze u kobiet oogonia, lub młode oocyty w okresie wzrostu protoplazmatycznego.
Etap II – osobniki dojrzewające lub osobniki z wytworzeniem produktów rozrodczych po tarle. Jajniki są przezroczyste. Biegnie wzdłuż nich duże naczynie krwionośne. Oglądane przez szkło powiększające jajniki są wyraźnie widoczne oocyty okres wzrostu protoplazmy. Poszczególne oocyty zakończyły już wzrost i można je rozróżnić gołym okiem. Wokół oocytów tworzy się warstwa komórek pęcherzykowych wytworzona z nabłonka zarodkowego jajników.
Etap III - gonady są dalekie od dojrzałości, ale są już stosunkowo dobrze rozwinięte. Jajniki zajmują od jednej trzeciej do połowy objętości jamy brzusznej i zawierają małe, nieprzezroczyste oocyty, widoczne gołym okiem, zwykle różne odcienie żółty kolor. Kiedy jajnik pęka, tworzy się kilka grudek. Na tym etapie wzrost oocytów następuje nie tylko z powodu protoplazmy, ale także w wyniku gromadzenia się składników odżywczych w osoczu, reprezentowanych przez granulki żółtka i kropelki tłuszczu. Okres ten nazywa się okres wzrostu troficznego(duży) .
W zależności od pigmentu charakterystycznego dla różnych gatunków ryb, jajniki uzyskują inny odcień. W cytoplazmie oocytów pojawiają się wakuole zawierające substancje o charakterze węglowodanowym. Tworzy się błona oocytu. Najpierw na powierzchni oocytu tworzą się mikrokosmki. U podstawy mikrokosmków tworzy się cienka warstwa jednorodnego, pozbawionego struktury materiału. Wraz z gromadzeniem się wtrąceń żółtka w oocycie powstaje kolejna warstwa, składająca się z wiązek rurowych elementów strukturalnych. Następnie Warstwa wewnętrzna przechodzi w jednorodną warstwę zewnętrzną, a obie warstwy tworzą jedną powłokę. W zależności od biologii gatunku i ekologii tarła, zdolności adaptacyjnych podczas filogenezy i innych warunków, skorupa różnych gatunków ryb ma różną budowę. Tak więc u jesiotrów składa się z kilku warstw (złożonej muszli), u niektórych gatunków jest to jedna warstwa.
Podczas badania błony oocytu pod mikroskopem widoczne są promieniste prążki, stąd nazwa strefa radiata.
Oocyt z uformowaną strefą promienistą jest otoczony przez komórki pęcherzykowe, które tworzą błonę pęcherzykową, czyli pęcherzyk. U niektórych gatunków ryb nad strefą promienistą tworzy się kolejna skorupa (galaretka), na przykład u płoci. Niektóre gatunki ryb mają kosmkową skorupę.
Etap IV - gonady osiągnęły lub prawie osiągnęły pełny rozwój. Oocyty są duże i łatwo je od siebie oddzielić. Kolor jajników jest różny u różnych gatunków ryb. Zwykle jest żółty, pomarańczowy, u jesiotra jest szary lub czarny. Komórki rozrodcze są reprezentowane przez oocyty, które zakończyły wzrost trofoplazmatyczny i utworzyły błony i mikropyle. Na etapie 4, a także na etapach 2 i 3 dojrzałości u ryb wielopierścieniowych, jajniki zawierają oogonia i oocyty z okresu wzrostu protoplazmatycznego, które stanowią rezerwę na przyszłe tarło.
Skorupa jaja zawiera mikropyl, dzięki któremu plemniki mogą przedostać się do wnętrza komórki jajowej. Jesiotry mają ich kilka (jest to adaptacja gatunkowa). Jądro oocytu przesuwa się w stronę mikropylu. Jądro i żółtko są polarne. Jądro znajduje się na biegunie zwierzęcym, żółtko na biegunie wegetatywnym. Żółtko łączy się z tłuszczem.
Etap V – osobniki płynne. Jaja swobodnie wypływają z otworu płciowego. Po przejściu do etapu V jaja stają się przezroczyste. Jeśli pęcherzyk pęknie, jajo następnie wchodzi do jajowodu lub Jama brzuszna w zależności od budowy jajnika. Po owulacji następuje szybki proces dojrzewania – mejoza.
U jesiotrów jądra jądra rozpuszczają się, a jądro zmniejsza się. Powłoka jądra rozpuszcza się i rozpoczynają się podziały. Następnie oocyty ryb są uwalniane z błony pęcherzykowej.
Etap VI – osobniki rozmnażane. Produkty rozrodcze zostały zmiecione. Jajniki są małe, zwiotczałe. Pozostałe pęcherzyki, a także niezłożone jaja ulegają resorpcji. Po ponownym wchłonięciu pustych pęcherzyków jajniki przechodzą do II, a w niektórych przypadkach do III etap dojrzałość.
Rozważana skala etapów dojrzałości gonad może być wykorzystana do analizy ryb z tarłem jednorazowym, u których samice składają tarło tylko raz w roku. Jednakże u niektórych gatunków ryb tarło jest podzielone (wiele karpi, śledzi i okoni). Samice tych ryb składają tarło kilka razy w ciągu roku, a ich oocyty dojrzewają w różnym czasie.
Proces rozwój męskich komórek rozrodczych (spermatogeneza) obejmuje kilka etapów:
Etap I. Przedstawiono męskie komórki rozrodcze spermatogonia. Spermatogonia to pierwotne komórki rozrodcze, które powstają u samców ryb z nabłonka otrzewnej.
Etap II. Jądra wyglądają jak płaskie sznury o szarawym lub biało-różowym kolorze. Komórki płciowe są reprezentowane przez spermatogonie w stanie reprodukcji. Dzielą się kilkukrotnie, zwiększając ich liczbę, z każdej początkowej powstaje pięć (takie grupy nazywane są cystami).
Etap III. Jądra na tym etapie znacznie zwiększają swoją objętość, są gęste i elastyczne. Spermatogonia wchodzi w okres wzrostu i zamienia się w spermatocyty Zamawiam. Następnie zaczynają się dzielić i z każdego spermatocytu pierwszego rzędu powstają dwa spermatocyty drugiego rzędu, a następnie 4 spermatydy mniejszy rozmiar. Powstałe plemniki wchodzą w okres formowania i stopniowo przekształcają się w dojrzałe plemniki.
Etap IV. Jądra na tym etapie są największe i mają mlecznobiały kolor. Na tym etapie spermatogeneza jest zakończona, a kanaliki nasienne zawierają plemniki.
Etap V. Tworzy się płyn nasienny, co prowadzi do upłynnienia masy plemników, powodując ich wyciek.
Etap VI. Rozrodzone osobniki. Jądra są małe i zwiotczałe. Pozostałe plemniki są odsłonięte fagocytoza.
