Diagnostika je nejdůležitějším krokem v léčbě jakéhokoli onemocnění. V závislosti na správné diagnóze nejen úspěšná léčba, ale také možnost předcházet rozvoji komplikací a doprovodné patologie. Co je sérologické vyšetření? Toto je metoda diagnostická analýza biologický vzorek pacienta na přítomnost protilátek a antigenů. Test umožňuje identifikovat desítky onemocnění, fázi onemocnění a sledovat léčbu.
Proč je studium předepsáno?
Tenhle typ lékařský výzkumširoce používané v různých oblastech medicíny. Reakce fixace komplementu nebo CFR je zaměřena na identifikaci specifických buněk v krevním séru, protilátek, které tělo produkuje v boji proti infekcím a virům.
Izoserologická studie je zaměřena na stanovení krevní skupiny pacienta, Rh faktoru a dalších krevních parametrů.
- Sérologické krevní testy se v gynekologii používají k detekci pohlavně přenosných chorob. Sérologická titrace se používá i pro komplexní vyšetření nastávajících maminek (toxoplazmóza, HIV, syfilis aj.). Při registraci těhotných žen je to povinný test.
- V pediatrii se sérologické testy používají k potvrzení diagnózy „dětských“ onemocnění (plané neštovice, zarděnky, spalničky atd.), pokud příznaky nejsou výrazné a nelze onemocnění určit na základě klinických indikací.
- Sérologické testy umožňují venerologům rychle a přesně stanovit diagnózu. Na podobné příznaky a stížností, krevní test dokáže detekovat protilátky na syfilis, giardiázu, ureplazmózu, chlamydie, herpes a další onemocnění.
- Gastroenergologové, hepatologové a specialisté na infekční onemocnění používají k diagnostice virové hepatitidy sérologické krevní testy.
- Podezření na jakoukoli infekční popř virové onemocnění může pocházet od terapeuta. Pro potvrzení se používají sérologické reakce na specifické protilátky v těle. Provádí se analýza na encefalitidu, brucelózu, černý kašel, virus dengue, virus imunodeficience, alergie atd.
- Sérologická diagnostika hraje o hospitalizaci důležitá role. Tato diagnostická metoda dokáže ukázat, v jaké fázi vývoje se nemoc nachází a zda je nutná okamžitá hospitalizace nebo stačí ambulantní léčba.
Vzorek slin a stolice lze použít jako biologický materiál pro výzkum, ale nejčastěji se používá žilní krev pacienta. Testy pro sérologické testy by měly být odebrány z kubitální žíly v laboratorním prostředí. Před provedením testu byste se měli poradit se svým lékařem a připravit se.
Příprava na analýzu
Tento typ výzkumu se provádí v městských i komerčních institucích. Je lepší si vybrat ve prospěch laboratoře, která má nejmodernější vybavení a má pouze pozitivní recenze o své práci. Pro zaneprázdněné pacienty může laboratoř zajistit odběr krve pro RBC doma.
V tomto případě pacient nemusí ztrácet čas na cestě a fronty jsou odstraněny.
Příprava na odběr žilní krve zahrnuje několik kroků: hlavní pravidla. Před testem byste neměli jíst jídlo, to znamená, že test se provádí na lačný žaludek. Při darování krve je potřeba být v klidu a nebát se. Před zákrokem byste neměli podstupovat další zákroky (radiografie, ultrazvukové vyšetření atd.). Pár týdnů před odběrem krve se termín po dohodě s ošetřujícím lékařem ruší. léky. Některá doporučení závisí na onemocnění, pro které se test provádí. Například při testování na hepatitidu 2 dny před testem vyřadit ze stravy tučná jídla a alkohol.
Fluorescenční reakce
Jedním z typů sérologických reakcí je fluorescence neboli RIF. Tato výzkumná metoda se provádí pomocí činidla, které zvýrazní požadované protilátky v krevním séru. Pro provedení přímé sérologické reakce nebo PIF se specifické protilátky označí fluorescenční látkou. Jedná se o nejrychlejší typ výzkumu, který se provádí v jedné fázi.
Další metoda, nazývaná nepřímá nebo RNIF, se provádí ve 2 fázích. V první nemají specifické buňky (protilátky) fluorescenční značky a ve druhé se k detekci komplexu antigen-protilátka používají vhodně značené protilátky. Reakce záře se objeví až po kontaktu se specifickou protilátkou. Výsledek manipulací posuzuje speciální zařízení, které vyhodnocuje intenzitu záření a také určuje tvar a velikost zkoumaných objektů. Infekční agens se určuje s 90-95% spolehlivostí v závislosti na typu a stádiu onemocnění.
Propojený imunosorbentní test
Pro studie ELISA se sérologické reakce provádějí za použití jedinečných stabilních činidel. Značené látky jsou připojeny ke specifickému (požadovanému) typu protilátky. Výsledkem je, že sérologie poskytuje kvalitativní nebo kvantitativní hodnocení ze vzorku krve pacienta. Pokud substrát nemá výrazné značky, je výsledek považován za negativní. V případě kvalitativního výzkumu pozitivní výsledek pouze indikují přítomnost protilátek v biologickém vzorku.
Sérodiagnostika s kvantitativním stanovením protilátkových buněk poskytuje úplnější obraz. Na základě součtu detekovaných buněk může lékař říci, zda je nemoc in počáteční fáze akutní nebo jde o exacerbaci chronické formy onemocnění. Při stanovení diagnózy se bere v úvahu také klinický obraz a stížnosti pacienta.
Funkce výzkumu
Při testování na brucelózu je krevní sérum monitorováno na samozadržování bez antigenu. To vám umožní zvýšit spolehlivost testu. Výsledek testu na brucelózu může být pozitivní, negativní nebo nevyjádřený, tedy sporný. Pokud jsou získány pochybné výsledky, doporučuje se opakovaný odběr krve. Brucelóza se diagnostikuje i na základě výsledků hemokultur, vyšetření kostní dřeně a mozkomíšního moku.
Výhody a nevýhody sérologie
Široké uplatnění má diagnostika pomocí sérologických metod moderní medicína. Tento test je zvláště důležitý při identifikaci virových a infekčních onemocnění. Stejný typ testů se používá při geografickém screeningu a zdravotních průzkumech k prevenci epidemiologických ohnisek.
Sérologické testy mají řadu výhod.
- Jakýkoli typ sérologického testu má vysokou spolehlivost.
- Sérologické testy se provádějí poměrně rychle. Výsledek RSC je znám do 24 hodin a můžete jej získat přes internet, aniž byste opustili svůj domov. V speciální případy V případě hospitalizace se test provádí do několika hodin.
- RSC umožňuje sledovat vývoj onemocnění a sledovat účinnost léčby.
- Metody sérologického výzkumu jsou levné a dostupné pacientům.
Sérologické testy mají také některé nevýhody. Aby vyšetření poskytlo co nejspolehlivější informace, měl by být krevní test proveden s přihlédnutím k inkubační době onemocnění.
Herpes simplex typu 1 a 2 lze stanovit pouze 2 týdny po infekci a testování na virus imunodeficience se provádí 1, 3 a 6 měsíců po kontaktu s pacientem.
Spolehlivost studie může být ovlivněna lidskými faktory. Pokud pacient zanedbá pravidla pro přípravu na studii nebo laborant udělá chybu při zpracování vzorku krve, může dojít k falešnému nebo pochybnému výsledku. Tato situace se vyskytuje přibližně v 5 % případů. Ošetřující lékař zpravidla na základě klinických indikací snadno vypočítá chybu RSC.
Sérologické vyšetření krve je moderní a spolehlivým způsobem identifikace takových nebezpečných nemocí jako je HIV, hepatitida, brucelóza, pohlavně přenosné choroby atd. Tato část medicíny je zaměřena na studium lidské krevní plazmy a její imunologické vlastnosti. Sérologická metoda je široce používána a náklady na výzkum v soukromých laboratořích jsou relativně nízké. K provedení analýzy je použito moderní vybavení, které minimalizuje vliv lidského faktoru na výsledky výzkumu.
V kontaktu s
Co ukazuje sérologický krevní test? Diagnostická opatření- Toto je nejdůležitější fáze léčby jakékoli nemoci. Úspěch léčby závisí nejen na předepsaných lécích, ale do značné míry také na tom, jak správně byla stanovena diagnóza.
Kromě toho diagnostika pomáhá předcházet komplikacím a doprovodné nemoci. Pomocí sérologického vyšetření krve pacienta se zjišťuje přítomnost protilátek a antigenů. Studie pomáhá najít mnoho nemocí, určit jejich fázi a sledovat průběh léčby.
Co je sérologie?
Sérologie je obor imunologie, který studuje reakce antigenů na protilátky. Tento obor medicíny se zabývá studiem krevní plazmy a jejích imunologických vlastností.
Dnes je sérologický krevní test na protilátky spolehlivým způsobem, jak odhalit virus lidské imunodeficience, hepatitidu, brucelózu, pohlavně přenosné choroby a další život ohrožující onemocnění. Pojďme zjistit, v jakých případech je předepsán.
Indikace pro použití
Sérologický krevní test je nezbytný k identifikaci původce onemocnění, pokud je obtížné stanovit diagnózu.
K provedení této reakce jsou do plazmy zavedeny antigeny patogenů a poté laboratorní asistent studuje probíhající proces. Nebo provedou obrácenou reakci: do infikované krve se vstříknou protilátky, aby se určila specifická identita patogenu.
Rozsah použití
Tento výzkum se používá v různých odvětvích medicíny. Tato reakce identifikuje specifické buňky a protilátky produkované tělem pro boj s infekcemi a viry.
Kromě toho se krevní skupina člověka určuje pomocí sérologické metody.
Podobný sérologický krevní test se používá v gynekologii k diagnostice pohlavně přenosných chorob. Tato metoda se také používá pro komplexní průzkumy těhotné ženy (průkaz toxoplazmózy, HIV, syfilis atd.). Absolvování tohoto testu je povinné při registraci na prenatální poradně.
U dětí se sérologická reakce používá k potvrzení diagnózy takzvaných „dětských“ onemocnění (plané neštovice, spalničky, zarděnky atd.), pokud příznaky nemají výrazné projevy a není možné onemocnění identifikovat analýzou klinických indikací. .
Detekce pohlavně přenosných chorob
Pro venerology je toto vyšetření skutečně nenahraditelné a umožňuje velmi přesně stanovit diagnózu.
Při neostrém klinickém obraze lze rychle detekovat přítomnost protilátek sérologickým krevním testem na syfilis, giardiázu, ureaplasmózu, chlamydie, herpes a další onemocnění.
Virová a infekční onemocnění
Sérologický rozbor aktivně využívají gastroenterologové, hepatologové a specialisté na infekční onemocnění k diagnostice virové hepatitidy.
Dešifrování sérologického krevního testu umožňuje určit stadium onemocnění a odpovědět na otázku, jak je nutná hospitalizace. tento moment. Jak se správně připravit?
Příprava na zkoušku
Sérologické krevní testy se provádějí na veřejných i komerčních klinikách. Přednost by měla mít laboratoř s moderním vybavením a kvalifikovaným personálem.
Biologické vzorky pro testování mohou být sliny a výkaly, ale ve většině případů se používá žilní krev pacienta. Krev na sérologické vyšetření se odebírá z loketní žíly v laboratoři. Před provedením testu byste se měli poradit se svým lékařem o přípravě na tento postup.
Chcete-li se připravit na sérologický test, musíte dodržovat několik jednoduchých pravidel.
Krev se daruje klidný stav před jídlem, tedy nalačno. Předtím byste neměli podstupovat další testy, jako je rentgen, ultrazvuk atd.
Několik týdnů před darováním krve je nutné se vyvarovat užívání antibakteriálních a některých dalších léků. Některá doporučení v tomto případě závisí na onemocnění, pro které se test provádí. Například test na hepatitidu zahrnuje vyloučení tučných jídel a alkoholu 48 hodin před zákrokem.
Fluorescenční reakce
Mezi typy sérologických reakcí patří fluorescenční reakce. Tato technika využívá činidlo, které osvětluje protilátky v krevním séru.
Nastavení přímé sérologické reakce zahrnuje značení specifických protilátek fluorescenční látkou. Tato reakce je nejrychlejší a probíhá v jedné fázi.
Další možnost provedení takové analýzy se nazývá nepřímá nebo RNIF. Provádí se ve dvou fázích. V prvním kroku nejsou protilátky značeny fluorescenčními značkami a ve druhém jsou vhodně značené protilátky použity k identifikaci antigenů a protilátek. Záře nastává až po navázání na specifickou protilátku.
Co ukazuje sérologický krevní test? Výsledek celé procedury posuzuje speciální přístroj, který analyzuje sílu záření a odhalí tvar a velikost studovaného objektu. Původci infekčních onemocnění jsou detekováni s výsledkem, jehož spolehlivost je 90-95% v závislosti na typu a stádiu patologie.
Propojený imunosorbentní test
Tyto typy sérologického testování používají jedinečná stabilní činidla. Zdá se, že označené látky ulpívají na požadovaných protilátkách. V důsledku toho získáme kvalitativní nebo kvantitativní výsledek.
Pokud nebudou nalezeny žádné výrazné markery, bude výsledek považován za negativní. Pokud je během kvalitativní studie zjištěna přítomnost protilátek v biologických vzorcích, pak je výsledek testu považován za pozitivní. Na kvantifikace analýza buněk poskytuje přesnější výsledek.
Analýzou indikátorů analýzy (například součtu detekovaných buněk) odborník určí, zda je onemocnění v počáteční fázi, tj. akutní stadium nebo to eskalovalo chronická forma patologie. Za účelem stanovení diagnózy bere lékař v úvahu nejen údaje sérologické studie, ale také klinický obraz nemocí.
Vlastnosti tohoto testu
Provedení této analýzy není vždy schopno poskytnout 100% jistotu, že bylo zjištěno určité onemocnění. Stává se, že výsledky mohou být nejednoznačné a jsou nutné jiné postupy.
Například během testu na brucelózu je krevní sérum kontrolováno na samozadržování bez antigenu. To výrazně zvyšuje spolehlivost testování. Test na brucelózu může být pozitivní nebo negativní a může také vyvolat pochybnosti.
Pokud obdržíte pochybné výsledky, které nemají jednoznačnou interpretaci, doporučuje se absolvovat test znovu. Kromě toho lze brucelózu zjistit hemokulturami, testováním Kostní dřeň a mozkomíšním moku.
Výhody sérologického krevního testu
Diagnostické techniky využívající sérologické reakce jsou v moderní době široce používány lékařská praxe. Zvláště často se to provádí při určování virových a infekčních patologií.
Stejné testy se používají při provádění geografického screeningu a lékařské vyšetření aby se zabránilo epidemiologickému šíření infekce.
Mezi výhody metody patří:
- Vysoká míra důvěry.
- Rychlá reakce a výsledky. Výsledky RSC jsou známy do 24 hodin. Ve zvláštní situaci, v nemocničním prostředí, bude analýza hotová za několik hodin.
- Sledování vývoje onemocnění a účinnosti terapie.
- Nízká cena a dostupnost pro pacienty.
Nevýhody metody
Sérologické studie však mají i své nevýhody.
Patří mezi ně skutečnost, kterou by analýza měla vzít v úvahu inkubační doba nemocí, aby bylo možné získat spolehlivější obraz.
Například definice herpes simplex první nebo druhý typ je možný až po 14 dnech od okamžiku infekce. Analýza na přítomnost viru imunodeficience se provádí 30 dní, 90 dní a šest měsíců po kontaktu s infikovanou osobou.
Spolehlivost výsledků může samozřejmě ovlivnit i lidský faktor: zanedbání pravidel přípravy na odběr krve nebo chyba laboranta při provádění reakce.
Podle statistik lze v 5 % případů získat chybný výsledek. Zkušený lékař Při vyšetření pacienta po prostudování klinického obrazu může ve většině případů vypočítat chybu.
Sérologický výzkum (testy)— laboratorní výzkumné metody založené na detekci protilátek nebo antigenů v biologický materiál trpěliví. Nejčastěji se k analýze používá krev, méně často - moč, sliny, hnisavý výtok nebo vzorky tkáně odebrané během biopsie.
Oblast použití
- Stanovení krevní skupiny.
- Identifikace specifických nádorových proteinů – nádorových markerů (např. při podezření na rakovinu vaječníků, prostaty, Měchýř, žaludek atd.).
- Diagnostika virových, bakteriálních, plísňových, protozoálních infekcí (HIV, syfilis, toxoplazmóza, chlamydie, zarděnky, herpes, helmintiázy, klíšťová encefalitida atd.).
- Stanovení hormonů, enzymů a léčiv obsažených ve studovaném biomateriálu v minoritních koncentracích (méně než 10−10 g/l).
Podstatou metody jsou sérologické testy
Sérologické testy se liší v použité technice, ale všechny jsou výsledkem interakce antigenů (cizí sloučeniny) s odpovídajícími protilátkami. Studie se skládá ze dvou navazujících fází. První fáze je charakterizována interakcí mezi antigeny a protilátkami s tvorbou imunitních komplexů ( pozitivní reakce). Ve druhé fázi se objevují vnější znaky, potvrzující přítomnost stejných komplexů (v závislosti na typu reakce to může být zákal testovacího roztoku, změna jeho barvy, ztráta vloček atd.). Absence viditelných fyzikálních jevů je považována za negativní výsledek testu.
Příprava na sérologické studie
Záleží na typu výzkumu. O vlastnostech dodávky specifická analýza musí říct lékařský specialista při registraci do procedury.
Potřebný sérologický test můžete absolvovat na klinice Spectra. Rozbory objednáváme od nejlepších laboratoří v hlavním městě, pracujících podle evropských norem, což zaručuje rychlé a spolehlivé výsledky. Naši lékaři vám pomohou rozluštit závěr a dají doporučení pro další diagnostiku.
Wassermannův test (RW) je nejpopulárnější imunologický test používaný k diagnostice syfilis od svého objevu v roce 1906. RW patří do skupiny komplement fixačních reakcí (FFR) a je založena na schopnosti krevního séra pacienta se syfilidou tvořit komplex s odpovídajícími antigeny. Moderní metody RSC používané k diagnostice syfilis se svými antigeny výrazně liší od klasické Wassermannovy reakce, nicméně je pro ně tradičně zachován termín „Wassermannova reakce“.
V krvi infikované osoby se objevují protilátky produkované imunitním systémem. Původce onemocnění Treponema pallidum obsahuje antigen kardiolipin, který způsobuje tvorbu protilátek detekovaných RW. Pozitivní Wassermanova reakce pouze indikuje přítomnost takových protilátek v krvi člověka a na tomto základě je učiněn závěr o přítomnosti onemocnění.
Ukazatelem výsledku studie v RSC je hemolytická reakce. Reakce zahrnuje dvě složky: ovčí červené krvinky a hemolytické sérum. Hemolytické sérum se získává imunizací králíka ovčími červenými krvinkami. Inaktivuje se po dobu 30 minut při teplotě 56°C. Výsledky RSC jsou hodnoceny v závislosti na přítomnosti nebo nepřítomnosti hemolýzy ve zkumavkách. Přítomnost hemolýzy se vysvětluje tím, že pokud v testovaném séru nejsou žádné syfilitické protilátky, pak nedochází k reakci antigen-protilátka a veškerý komplement jde do reakce ovčích erytrocytů a hemolyzinu. A pokud existují specifické protilátky, komplement se zcela spotřebuje na reakci antigen-protilátka a nedochází k hemolýze.
Všechny složky pro Wassermanovu reakci se odebírají ve stejném objemu - 0,5 nebo 0,25 ml. Pro silnou fixaci komplementu na specifický komplex se směs testovaného séra, antigenu a komplementu umístí do termostatu při teplotě 37° na 45-60 minut. (reakce I. fáze), načež se přidá hemolytický systém skládající se z ovčích erytrocytů a hemolytického séra (reakce II. fáze). Dále se zkumavky opět umístí na 30-60 minut do termostatu, dokud nedojde k hemolýze u kontroly, ve které se antigen nahradí fyziologickým roztokem a místo testovaného séra se přidá fyziologický roztok. Antigeny pro Wassermanovu reakci se vyrábějí v hotové formě s uvedením titru a způsobu ředění.
Maximální pozitivita Wassermanovy reakce je obvykle označena počtem křížků: ++++ (silně pozitivní reakce) - označuje úplné zpoždění hemolýzy; +++ (pozitivní reakce) - odpovídá výraznému zpoždění hemolýzy, ++ (slabě pozitivní reakce) - průkaz částečného zpoždění hemolýzy, + (pochybná reakce) - odpovídá mírnému zpoždění hemolýzy. Negativní RW je charakterizována kompletní hemolýzou ve všech zkumavkách.
Někdy jsou však možné falešně pozitivní výsledky - to je způsobeno skutečností, že kardiolipin je také v určitém množství obsažen v buňkách Lidské tělo. Lidský imunitní systém nevytváří protilátky proti „vlastnímu“ kardiolipinu, ale existují výjimky z tohoto pravidla, díky nimž dochází u zcela zdravého člověka k pozitivní Wassermanově reakci. Zvláště často je to pozorováno po závažných virových a jiných onemocněních - zápal plic, malárie, onemocnění jater a krve, během těhotenství, tzn. ve chvílích silného oslabení imunitního systému.
Pokud má lékař u pacienta podezření na falešně pozitivní výsledek Wassermanovy reakce, může mu předepsat sérii další výzkum, které se obvykle používají při diagnostice pohlavně přenosných chorob.
Nemoci a případy, kdy může lékař předepsat krevní test na RW
Provedení postupu pro odběr krve na RW
Krev pro RW se daruje pouze nalačno. Poslední jídlo by mělo být nejpozději 6 hodin před testem. Zdravotnický pracovník pacienta posadí nebo položí na lehátko a odebere 8-10 ml krve z loketní žíly.
Pokud je třeba provést analýzu u kojence, vzorek se odebere z kraniální nebo jugulární žíly.
Příprava na krevní test na RW
1-2 dny před testem byste měli přestat pít alkohol. Nedoporučuje se ani tučná jídla – mohou zkreslit výsledky. Během období přípravy na analýzu byste se měli zdržet užívání digitalisových léků.
Kontraindikace
Výsledek analýzy bude nepravdivý, pokud:
- osoba je nemocná infekční chorobou nebo se z ní právě zotavila,
- v ženě období menstruace,
- těhotná v posledních týdnech před porodem,
- prvních 10 dní po narození,
- prvních 10 dnů života dítěte.
U primární syfilis se Wassermanova reakce stává pozitivní po 6-8 týdnech onemocnění (v 90% případů) a je zaznamenána následující dynamika:
- v prvních 15-17 dnech po infekci je reakce u většiny pacientů většinou negativní;
- v 5.–6. týdnu onemocnění se reakce stává pozitivní přibližně u 1/4 pacientů;
- v 7-8 týdnech onemocnění se RW stává u většiny pozitivní.
U sekundární syfilis je RW vždy pozitivní. Společně s ostatními sérologické reakce(RPGA, ELISA, RIF) umožňuje nejen detekovat přítomnost patogenu, ale také zjistit přibližnou dobu infekce.
S rozvojem syfilitické infekce ve 4. týdnu onemocnění, po propuknutí primárního syfilomu, přechází Wassermanova reakce z negativní do pozitivní a zůstává tak v sekundárním čerstvém i v sekundárním rekurentním období syfilis. V latentním sekundárním období a bez léčby může být RW negativní, takže když dojde ke klinickému relapsu syfilis, stane se opět pozitivní. Negativní Wassermanova reakce proto v latentním období syfilis neindikuje její nepřítomnost nebo vyléčení, ale slouží pouze jako příznivý prognostický příznak.
Při aktivních lézích terciárního období syfilis se pozitivní RW vyskytuje přibližně ve 3/4 případů onemocnění. Když aktivní projevy terciárního období syfilis vymizí, často se změní na negativní. V tomto případě negativní Wassermanova reakce u pacientů neznamená, že nemají syfilitickou infekci.
U časné kongenitální syfilis je RW pozitivní téměř ve všech případech a je cennou metodou pro ověření onemocnění. U pozdní vrozené syfilis její výsledky odpovídají výsledkům získaným v terciárním období získané syfilis.
Velký praktický význam má studium Wassermanovy reakce v krvi pacientů se syfilidou podstupujících léčbu. U některých pacientů i přes ráznou antisyfilitickou terapii nedochází k negativitě Wassermanovy reakce – jedná se o tzv. sérorezistentní syfilis. V v tomto případě Nemá smysl provádět nekonečnou antisyfilitickou terapii, dosahující přechodu pozitivní RW na negativní.
Z výše uvedeného vyplývá, že negativní Wassermanova reakce není vždy známkou nepřítomnosti syfilitické infekce v těle.
Pozitivní Wassermanova reakce je možná u lidí s řadou dalších onemocnění a stavů, které nesouvisejí se syfilis:
Vše výše uvedené naznačuje, že pozitivní výsledek Wassermanovy reakce ještě není bezpodmínečným důkazem přítomnosti syfilitické infekce.
Zotavení po testování
Po odběru krve lékaři doporučují správné a vyvážená strava, stejně jako co nejvíce tekutiny. Můžete si dovolit teplý čaj a čokoládu. Bude užitečné se zdržet fyzická aktivita a v žádném případě nepít alkohol.
Normy
Normálně by měla být pozorována hemolýza v krvi - to je zvažováno negativní reakce na syfilis (Wassermannova reakce je negativní). Pokud hemolýza chybí, hodnotí se stupeň reakce, který závisí na stadiu onemocnění (označeno znaménkem „+“). Zároveň byste měli vědět, že 3-5 % mají absolutně zdravých lidí reakce může být falešně pozitivní. Zároveň v prvních 15-17 dnech po infekci může být reakce u nemocných lidí falešně negativní.
Reakce fixace komplementu (FFR) probíhá ve dvou fázích: v první fázi se antigen spojí s testovaným sérem, u kterého se předpokládá přítomnost protilátek, přidá se komplement a inkubuje se v termostatu 30 minut.
Druhá fáze: přidat hemolytický systém (ovčí červené krvinky + hemolytické sérum). Po inkubaci v termostatu po dobu 30 minut se vezme v úvahu výsledek.
S pozitivní RSC tvoří sérové protilátky, které se zkombinují s antigenem, imunitní komplex, který na sebe naváže komplement a nedojde k hemolýze. Pokud je reakce negativní (v testovaném séru nejsou žádné protilátky), komplement zůstane volný a dojde k hemolýze.
RSC se používá pro sérologickou diagnostiku syfilis, kapavky, tyfu a dalších onemocnění.
Imunitní reakce využívající značené antigeny a protilátky jsou založeny na skutečnosti, že jedna ze složek zapojených do reakce (antigeny nebo protilátky) je kombinována s nějakým druhem značky, kterou lze snadno detekovat. Jako značky se používají fluorochromy (RIF), enzymy (ELISA), radioizotopy (RIA) a elektronově husté sloučeniny (IEM).
Propojený imunosorbentní test(ELISA), stejně jako jiné imunitní reakce, se používá: 1) k detekci neznámého antigenu pomocí známých protilátek nebo 2) k detekci protilátek v krevním séru pomocí známého antigenu. Zvláštností reakce je, že známá reakční složka je kombinována s enzymem (například peroxidázou). Přítomnost enzymu se určuje pomocí substrátu, který se působením enzymu zbarví. Nejpoužívanější je ELISA na pevné fázi.
1) Detekce antigenu. První fází je adsorpce specifických protilátek na pevnou fázi, která se používá jako polystyrenové nebo polyvinylchloridové povrchy jamek plastových panelů. Druhým stupněm je přídavek testovaného materiálu, u kterého se předpokládá přítomnost antigenu. Antigen se váže na protilátky. Poté se jamky promyjí. Třetí fází je přidání specifického séra obsahujícího protilátky proti danému antigenu, značené enzymem. Značené protilátky jsou připojeny k antigenům a přebytek je odstraněn promytím. Pokud tedy zkoumaný materiál obsahuje antigeny, vytvoří se na povrchu pevné fáze komplex protilátka-antigen-protilátka značený enzymem. K detekci enzymu se přidá substrát. Pro peroxidázu je substrátem orthofenylendiamin smíchaný s H 2 O 2 v tlumivém roztoku. Působením enzymu se tvoří produkty hnědé barvy.
2) Detekce protilátek. První fází je adsorpce specifických antigenů na stěnách jamek. Typicky jsou v komerčních testovacích systémech antigeny již adsorbovány na povrchu jamek. Druhou fází je přidání testovacího séra. V přítomnosti protilátek se tvoří komplex antigen-protilátka. Třetí stupeň - po promytí se do jamek přidají antiglobulinové protilátky (protilátky proti lidským globulinům), značené enzymem. Výsledky reakce jsou vyhodnoceny tak, jak je popsáno výše.
Jako kontroly se používají zjevně pozitivní a zjevně negativní vzorky, které jsou dostupné v komerčních systémech.
ELISA se používá k diagnostice mnoha infekční choroby, zejména infekce HIV, virová hepatitida.
Imunoblotting je typ ELISA (kombinace elektroforézy a ELISA). Biopolymery, jako jsou antigeny viru lidské imunodeficience, se separují pomocí gelové elektroforézy. Poté jsou oddělené molekuly přeneseny na povrch nitrocelulózy ve stejném pořadí, v jakém byly v gelu. Proces přenosu se nazývá blotování a výsledný tisk je blot. Tento otisk je ovlivněn testovacím sérem. Poté se přidá anti-lidské globulinové sérum značené peroxidázou, poté substrát, který působením enzymu získá hnědá barva. Hnědé pruhy se tvoří v místech, kde se protilátky spojily s antigeny. Metoda umožňuje detekovat protilátky proti jednotlivým virovým antigenům.
Radioimunoanalýza (RIA). Metoda umožňuje určit množství antigenu v testovaném vzorku. Nejprve se k imunitnímu séru přidá materiál pravděpodobně obsahující antigen, poté se přidá známý antigen značený radioizotopem, například I125. V důsledku toho se detekovatelný (neznačený) a známý značený antigen váže na omezené množství protilátek. Protože je značený antigen přidáván v určité dávce, je možné určit, která jeho část je navázána na protilátky a která část zůstala volná v důsledku kompetice s neznačeným antigenem a byla odstraněna. Množství značeného antigenu navázaného na protilátky se stanoví pomocí čítače. Je nepřímo úměrná množství detekovaného antigenu.
Imunoelektronová mikroskopie (IEM). Antigen, například virus chřipky, je připojen ke specifickému antiséru značenému elektrondenzní látkou. Jako značky se používají proteiny obsahující kovy (feritin, hemocyanin) nebo koloidní zlato. Při mikroskopování v elektronový mikroskop Pořizují fotografie, na kterých jsou viditelné viriony chřipky s nalepenými tmavými tečkami – molekulami značených protilátek.
Získaná imunita, její odlišnost od dědičné (specifická, vrozená). Typy získané imunity.
Úkol. Rodinné dítě Valery onemocnělo záškrtem. tři roky. Ostatní členové rodiny neonemocněli a matka měla v dětství záškrt a otec byl očkován difterickým toxoidem. Starší sestra Pětiletá Natasha nebyla kvůli zdravotním kontraindikacím svého času očkována difterickým toxoidem, a tak musela podstoupit nouzovou profylaxi pomocí antitoxického séra proti záškrtu. Mladší bratr Vitalij, tři měsíce, neonemocněl, přestože nebyl ničím očkovaný. V domě je kočka a pes, nejsou nemocní. U každého člena rodiny a u zvířat pojmenujte typ imunity, který jim zabránil onemocnět.
Co je to antigen? Jaké látky mohou být antigeny? Plnohodnotné antigeny a hapteny, jak se od sebe liší? Struktura antigenu. Jak se nazývá část molekuly antigenu, která určuje její specificitu? Pojmenujte antigeny, které znáte. Co jsou autoantigeny? Antigenní struktura mikrobiální buňky. Bičíkové a somatické antigeny; lokalizace, písmenné označení, chemická podstata, vztah k teplotě, způsob přípravy, praktické použití. Anatoxin, jeho vlastnosti, aplikace, produkce. Jaká tkáň tvoří imunitní systém těla? Určete centrální a periferních orgánů imunitní systém osoba. Popište proces tvorby humorální a buněčné imunitní odpovědi. Specifikujte buňky, které zachycují a štěpí antigen; buňky, které interagují a tvoří se humorální imunita, buněčná imunita; buňky, které se transformují a stávají se plazmatickými buňkami, které produkují protilátky; buňky, které stimulují tento proces; buňky, které potlačují imunitní odpověď; buňky, které zabíjejí nádorové buňky a virem infikované buňky. Co jsou protilátky? Jak získat imunitní sérum? Jak získat sérum, které by neutralizovalo tetanový toxin? Proti jakým antigenům se tvoří antitoxiny, aglutininy a hemolyziny? Jaké protilátky se tvoří, když se do těla dostane difterický toxoid? bakterie záškrtu? Chemická podstata a struktura protilátek. Jaké je aktivní místo imunoglobulinu? Uveďte třídy imunoglobulinů a jejich vlastnosti. Uveďte třídu imunoglobulinů, které mohou pronikat placentou. Do jaké třídy patří? sekreční imunoglobuliny? Dynamika akumulace protilátek. Jak se liší sekundární imunitní odpověď od primární? Jak v praktické lékařství jsou využívány znalosti o dynamice imunitní odpovědi? Co jsou imunitní reakce, jaký je jejich mechanismus, fáze reakce. V jakých 2 směrech se imunitní reakce využívají? Vyjmenujte imunitní reakce.
Úkol. Nahraďte chybějící slova „anatoxinem“ nebo „antitoxinem“: _________ je antigen, _________ je protilátka, __________ se vytváří po zavedení do těla aktivní imunita, __________ vytváří pasivní imunitu po zavedení do těla, __________ se získává imunizací zvířat, ___________ se získává z toxinu vystavením formalínu a teplu, ____________ neutralizuje toxiny, ___________ způsobuje v těle tvorbu protilátek.
Aglutinační reakce: co je aglutinace, co je antigen, co je protilátka; způsoby nastavení, jaké ovládací prvky se nastavují a proč; jak by měly ovládací prvky vypadat. Aglutinační séra, co obsahují, jak se získávají, k čemu se používají; Jaký je titr aglutinačního séra? Nepřímá (pasivní) hemaglutinační reakce: co při této reakci slouží jako antigen, jak se získává, mechanismus reakce. Co je diagnostika erytrocytů? Co je protilátková erytrocytární diagnostika? Precipitační reakce: co je to srážení, co slouží jako antigen; Jak získat precipitační sérum? Jaký je titr vysráženého séra? Metody tuhnutí, praktická aplikace.
Reakce fixace komplementu (CFR): princip CFR; co se tvoří, když imunitní sérum interaguje se specifickým antigenem; co se stane s doplňkem, pokud je přítomen během této interakce? Jaký je osud komplementu, pokud mezi antigenem a protilátkami neexistuje specifická afinita? Pokud je konečným výsledkem RSC hemolýza, znamená to pozitivní nebo negativní výsledek? Metodika pro zřízení RSC. Proč musí být testovací sérum inaktivováno? Hemolytické sérum: co obsahuje, jak se získává, jaký je titr a jak se určuje? Doplněk: chemická podstata, vztah k vysoká teplota, kde je obsažen? Jak může být komplement zničen? Co se prakticky používá jako doplněk?
Úkol. Na oblečení muže obviněného z vraždy byla nalezena krvavá skvrna. Jakou reakci lze použít k určení, zda se jedná o lidskou krev; co v této reakci bude antigen a co protilátky; Jaký diagnostický lék by měl být v laboratoři k dispozici pro tuto reakci, jak se připravuje?
Úkol. Jak použít srážecí reakci k určení, zda je vzorek masa dodaný k analýze velký dobytek nebo koňské maso; jaké diagnostické léky jsou potřeba?
Srážecí reakce v agarovém gelu, způsoby formulace, praktická aplikace.
