Diagnostické techniky moderní doba umožňuje určit konkrétní nemoc v laboratoři pomocí speciální analýzy. Jedním z nich je enzymatický imunosorbentní krevní test, který může potvrdit dříve stanovenou diagnózu.
Enzymová imunoanalýza ELISA je jednou z nejúčinnějších a moderní metody umožňující identifikovat poruchy spojené s imunitním a hormonální nerovnováha, stejně jako onkologické procesy. Během testu lze v krvi detekovat protilátky produkované při infekci v těle. Vezmeme-li v úvahu tuto nuanci, může být nemoc detekována i v nejranější fázi jejího vývoje.
Co je základem techniky?
Výsledky analýzy ELISA jsou založeny na získání chemické reakce o enzymech, které slouží jako speciální identifikační znaky pro rozpoznávání protilátek. Následně během imunochemických reakcí začnou protilátky interagovat s určitými antigeny. To vše dává důvod to tvrdit falešné výsledky při darování krve pro ELISA jsou minimální.
Studie nám umožňuje určit množství imunitní buňky, jejich vlastnosti, stejně jako přítomnost potřebných protilátek
Výsledek je považován za pozitivní, když je zjištěno zbarvení roztoku. Barva indikuje, že antigeny interagují s protilátkou. Pokud se nic takového nestane, výsledek je negativní.
(odkaz na 3. článek v tomto souboru), což vám umožní posoudit schopnost těla odolávat infekční choroby a ukazující fázi onemocnění, zaujímá důležité místo enzymový imunosorbentní test (ELISA). Provedení této studie vám umožní komplexně posoudit aktivitu ochranné funkce krve a identifikovat stav imunodeficience u infekčních patologií, stejně jako krevních onemocnění, autoimunitních procesů a hormonálních problémů.
Jak je možné pokrýt tolik cílů v jedné analýze a jaké indikace existují pro její realizaci? Zkusme na to přijít.
Co je krevní test prováděný metodou ELISA?
Tento laboratorní test, která umožňuje určit přítomnost specifických protilátek (ochranných krevních faktorů proteinové povahy) vůči určitým antigenům (patogenním agens). Z protilátek mají primární význam imunoglobuliny, které mohou existovat ve formě imunokomplexů.
Imunoglobuliny jsou produkovány jako výsledek komplexních lidských neurohumorálních reakcí, ke kterým dochází jako reakce na zavedení cizích antigenů. Každý typ patogenního agens produkuje své vlastní specifické protilátky. Působí tak, že se „navážou“ antigen nebo patologický mikroorganismus, vytvoří se komplexní sloučenina „antigen-protilátka“, následuje neutralizace, enzymatická lýza, fagocytózní reakce a odstranění z těla.
Poznámka:Právě přítomností určitých komplexů určuje metoda ELISA typ patogenu nebo škodlivé látky přítomné u pacienta.
Vědět základní principy Můžete se podívat, jak funguje lidský imunitní systém tohle video Posouzení:
Co jsou imunoglobuliny?
Bylo objeveno a studováno 5 hlavních tříd imunoglobulinů – IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. role zbytku nebyla dosud plně objasněna a je předmětem vědeckého výzkumu.
Poznámka:nejdůležitější v praktické lékařství Důležité jsou imunoglobuliny tříd A, M a G. Informační obsah definice vychází z různých časových období jejich výskytu, maxima a zániku.
Podívejme se na tento problém podrobněji.
Hlavním úkolem imunoglobulin A (IgA) spočívá v ochranných funkcích sliznic dýchací trakt, gastrointestinální trakt a močového systému. Při akutním nástupu onemocnění je nemožné je identifikovat. Tyto ochranné komplexy se objevují až od 2. týdne počátku onemocnění, někdy i později. Většina imunoglobulinu A je koncentrována ve slizničních tkáních. Přibližně asi 80 %. Zbývající protilátky cirkulují v krvi. Hlavní funkcí je neutralizace a ničení mikroorganismů. Po odeznění akutní projevy onemocnění, začne množství těchto imunoglobulinů klesat a zcela vymizí až 8 týdnů po propuknutí onemocnění. Pokud je IgA detekován později, znamená to chronický proces.
Hlavní a první markery akutní fáze rozvíjející se patologie jsou imunoglobuliny třídy M (IgM). Jsou zjištěny do 5. dne nástupu onemocnění. Jejich přítomnost v krvi lze zjistit zhruba do 6 týdnů. Pak začnou rychle mizet.
Reziduální imunitní odpověď je charakterizována přítomností v krvi imunoglobuliny třídy G (IgG). Vzhled těchto faktorů v krvi je detekován přibližně měsíc po nástupu onemocnění. V budoucnu mohou být určeny na mnoho měsíců, let a dokonce i na celý život, naplňující ochrannou funkci od návratu (relapsu) nemoci a v některých případech znemožnění sekundárního rozvoje patologie. Pokud se množství imunoglobulinu G začne znovu zvyšovat, lze mít podezření reinfekce. Podobný závěr lze učinit provedením dvou nebo tří vzorků odebraných v intervalu 2 týdnů.
Imunoglobulin D (IgD) nachází se na B-lymfocytech, nachází se v nízkých koncentracích v zdravých lidí. Po 10 letech života dosahuje svých maximálních hodnot. Množství imunoglobulinu D se během těhotenství u pacientek zvyšuje systémová onemocnění pojivové tkáně, onemocnění způsobená imunodeficiencí.
Indikace pro použití krevních testů enzymové imunoanalýzy
Stanovení protilátek proti přítomnosti v těle patogenní mikroby, což způsobuje:
- trichomoniáza;
- ureaplasmóza a
Dochází ke zvýšení množství imunoglobulinů a s.
Diagnostika se provádí za účelem zjištění:
- herpetická onemocnění;
- skupiny virová hepatitida;
- virus Epstein-Barrové;
- cytomegoalovirus.
Pomocí ELISA můžete určit přítomnost protilátek proti 600 typům alergenů, zjistit stav imunodeficience, vést komplexní vyšetření před transplantačními operacemi proveďte komplexní analýzu ke stanovení účinnosti léčby.
ELISA je doplňková metoda detekce rakovinných buněk.
Jak se provádí krevní ELISA?
Pro enzymovou imunoanalýzu se ve většině případů používá krev pacienta, někdy se odebírá tkáň sklovitý, míšní mok, plodová voda.
Krev se odebírá injekční jehlou do injekční stříkačky z kubitální žíly. Studie se provádí na prázdný žaludek. Je třeba mít na paměti, že některé zdravotní zásoby může ovlivnit výsledek analýzy. Před darováním krve se musíte zdržet kouření a pití alkoholu. Užívání drog může zkreslit výsledky.
V případě negativních hodnot imunoglobulinů IgM, IgG, IgA lze hovořit o nepřítomnosti onemocnění nebo jeho počáteční fázi, také je možný výsledek s minusy, pokud plné zotavení po uplynutí značné doby.
Pokud nejsou detekovány IgA a IgM a IgG je pozitivní, pak se vší pravděpodobností mluvíme o vytvořené imunitě po infekčním onemocnění nebo po očkování.
Když vysoký titr IgM s negativními hodnotami IgG, IgA můžeme usoudit, že jde o akutní infekční onemocnění.
Simultánní pozitivní hodnoty výsledků imunoglobulinů - IgA, IgM, IgG jsou charakteristické pro akutní fázi relapsu stávajícího chronického onemocnění.
Pro chronická infekce, která je v doznívající fázi procesu (remise), ELISA ukazuje negativní hodnoty imunoglobulinu M (IgM), zatímco výsledek imunoglobulinů G (IgG) a A (IgA) bude pozitivní.
Výhody metody enzymového imunotestu krve
Hlavní výhody metody ELISA jsou:
- nízké náklady na analýzu;
- diagnostická specifičnost, přesnost;
- dynamická kontrola (opakování analýzy ke stanovení účinnosti léčby a stádií onemocnění);
- možnost provádění hromadných vyšetření v oblastech infekce;
- rychlost získávání výsledků;
- relativní jednoduchost analýzy;
- možnost použití informační technologie při zpracování;
- bezpečnost a bezbolestnost pro pacienta.
Má krevní ELISA nějaké nevýhody?
Hlavním negativním aspektem studie je možnost získání falešně negativních a falešně pozitivních dat. Příčinou nedorozumění mohou být technické nedostatky nebo užívání léků, které mohou obraz zkreslit.
ELISA se používá k detekci:
- (ascaris, pinworms);
- akutní a chronická forma opisthorchiáza;
- trichinelóza;
- přítomnost Giardia (jako další analýza);
- formy leishmaniózy;
- amébóza;
- obsah toxoplazmy;
Závěrem je třeba poznamenat, že moderní imunologie je neustále ve stádiu vývoje a hledá nové metody pro diagnostiku a léčbu nemocí.
Stepanenko Vladimir, chirurg
Jak se provádí studie ELISA?
Mechanismus reakce
Enzymová imunoanalýza je založena na imunitní reakce antigen s protilátkou a připojení enzymové značky k protilátkám umožňuje zohlednit výsledek reakce antigen-protilátka objevením se enzymatické aktivity nebo změnou její úrovně. Mechanismus reakce může být prezentován takto:
|
K první reakci dochází mezi detekovaným Ig (Ab) a purifikovaným patogenním antigenem (Ag), fixovaným na povrchu jamek imunologické tablety. |
|
|
|
K identifikaci vytvořených imunitních komplexů se provádí druhá imunologická reakce, při které navázaný specifický Ig působí jako antigen a konjugát představující Ig (Ab) na odpovídající lidský Ig, značený enzymem -peroxidázou (K). , se používá jako protilátky proti němu. |
|
|
Dále dochází k enzymatické reakci katalyzované enzymatickou částí molekuly konjugátu, substrátem pro tuto reakci je bezbarvá látka - chromogen, který při reakci tvoří barevnou látku. Intenzita barvy v jamce závisí určitým způsobem na množství imunoglobulinů obsažených ve vzorku. |
Výpočet výsledků
Provádění enzymového imunotestu
Pro sérodiagnostiku se používají 96jamkové polystyrenové destičky, na jejichž stěnách je antigen předem adsorbován. Testované sérum se přidá do buňky tablety. V tomto případě jsou na něj navázány protilátky homologní s antigenem. Nenavázané protilátky se odstraní promytím. Dále se k buňkám přidají protilátky proti lidským imunoglobulinům (protilátky) značené enzymem. Pokud byly v testovaném séru přítomny detekovatelné protilátky, pak v této fázi budou působit jako antigeny, se kterými budou značené protilátky reagovat. Přídavek chromogenní látky (barviva) po promytí nám umožní zohlednit reakci vyvíjející se barvy v buňkách. Intenzita zbarvení je úměrná množství enzymu, potažmo množství protilátek Při měření optické hustoty (OD) kapaliny v cele a jejím porovnání s kontrolním vzorkem se koncentrace protilátek počítá v jednotkách objemu. Nejčastěji se používá výpočet výsledků v jednotkách optické hustoty. Je třeba vzít v úvahu, že každý testovací systém má své vlastní indikátory pro záznam výsledků a indikátory normality a patologie, kterými by se měl řídit při interpretaci Výsledek.
Jaké infekce lze detekovat testem ELISA?
Především v moderní venerologii se používá pro diagnostiku syfilis (v kombinaci s dalšími reakcemi), HIV infekce, virové hepatitidy. omezenou hodnotu pro diagnostiku chlamydiové infekce, cytomegalovirové infekce a dalších herpetických infekcí.Metoda ELISA se používá také ke stanovení protilátek na různá infekční onemocnění, hormonální hladiny, autoprotilátky a různé markery onkologická onemocnění.
Jak interpretovat výsledky ELISA
Studium přítomnosti a hladiny protilátek různé třídy v některých případech pomáhá určit fáze infekční proces
|
Fáze onemocnění |
IgM |
IgA |
IgG |
|
Primární fáze |
|||
|
Primární fáze |
|||
|
Primární fáze |
|||
|
Exacerbace chronické fáze |
|||
|
Chronická fáze |
|||
|
Minulost (vyléčená infekce) |
|||
|
Zotavení |
snížení titru 2-4krát poté úspěšná léčba |
snížení titru o 4-8 krát 1-1,5 měsíce po úspěšné léčbě |
|
|
Negativní výsledek |
Bohužel tohle důležitou výhodou ELISA, jak kvantifikace protilátky nemají v praktické práci velký význam - tzn. neumožňuje přesnou diagnózu a neovlivňuje dávkování a načasování preskripce léky.
Jaká je role metody ELISA v diagnostice syfilis
Metoda ELISA v diagnostice syfilis byla poprvé použita v roce 1975. V současné době je široce používána pro sérologickou diagnostiku syfilis v Rusku a používá se jako konfirmační test na syfilis, obvykle se provádí studie, která identifikuje tzv. celkové protilátky proti antigenům Treponema pallidum (IgM a IgG), i když v některých případech je možné stanovit pouze „časné“ protilátky třídy M. ELISA na syfilis je pozitivní po 3 týdnech od okamžiku infekce a zůstává pozitivní po poměrně dlouhou dobu čas dlouho i po léčbě (někdy i celoživotně).Nepoužívá se proto ELISA jako test k potvrzení vyléčení syfilis.Ve většině případů se provádí pouze kvalitativní stanovení ELISA-t.j. pouze pozitivní nebo negativní výsledek, i když je možné i kvantitativní stanovení.
(ELISA) je metoda laboratorního testování krve, založená na hledání speciálních buněk – protilátek proti různé nemoci. Metoda umožňuje nejen identifikovat patogen, ale také určit, v jaké fázi se nachází patologický proces. To druhé je velmi důležité pro prognózu a další léčba trpěliví.
Výhody a nevýhody metody
Mezi všemi moderní metody diagnostická ELISA je nejinovativnější a technicky nejpřesnější. Jeho hlavní výhody jsou:
- Schopnost vyhledávat všechny existující protilátky proti infekčním onemocněním v krvi pacienta.
- Vysoká dostupnost výzkumné metody. Dnes může testy ELISA provádět jakákoli středně velká laboratoř.
- Téměř 100% specificita a senzitivita metody.
- Schopnost vyhledávat protilátky a antigeny, stejně jako stanovit fázi patologického procesu a sledovat jeho dynamiku díky porovnávání veličin.
Tento počet výhod oproti jiným testům zcela zastiňuje jedinou nevýhodu testu: je schopen detekovat protilátky, nikoli však samotný patogen.
Klíčové pojmy pro hodnocení analýzy
Abyste pochopili, co je analýza ELISA, co to je a jak se provádí, musíte se seznámit se základními pojmy, které používají odborníci.
- Protilátka- protein, který je produkován buňkami lidského imunitního systému (lymfocyty typu B). Odpovídají specifická reakce ke vstupu cizího činitele nebo látky do těla. Dalším názvem pro protilátky jsou imunoglobuliny, patří k nim různé třídy: A, E, M, G. Liší se od sebe hmotností, reakční rychlostí, poločasem rozpadu a řadou dalších charakteristik. Normálně lidská krev obsahuje především imunoglobuliny třídy G. Pokud dojde k infekci, prudce se zvýší množství imunoglobulinů A a M. Imunoglobuliny E se účastní alergických reakcí.
- Antigen- zahraniční agent, který má organického původu a vysokou molekulovou hmotností. Nejčastěji představuje patogeny nebo jejich biologicky aktivní látky.
- Komplex antigen-protilátka neboli imunitní komplex je přímou kombinací cizí látky a imunoglobulinu, která vede k rozvoji imunitní reakce.
Podstata a rozsah metody
Pacienti mají často otázku: ELISA analýza, co to je, jak se provádí a k čemu slouží? O metodě můžete přístupným způsobem hovořit stručným popisem jejích fází.
Přípravná fáze. Laboratorní lékař používá speciální destičku s 96 jamkami. Na povrch každé jamky je aplikován antigen specifického patogenu.
Fáze 1. Odebírá se krev, která se následně po kapkách aplikuje do jamky. Jamka zahájí reakci mezi antigenem a protilátkou v krvi.
Fáze 2. Reakce s tvorbou imunitních komplexů je v díře v plném proudu. V důsledku toho vzniká látka určité barvy. Intenzita barvy závisí na množství protilátek v krvi pacienta proti každému konkrétnímu patogenu.
Fáze 3. Vyhodnocení výsledku fotometrií. K tomuto účelu se používá speciální zařízení zvané spektrofotometr. Slouží k porovnání hustoty materiálu v otvoru a kontrolního vzorku. Dále zařízení podle matematická analýza generuje výsledek.
Vyhodnocení výsledků a účel ELISA
Interpretace výsledku závisí na několika důležitých nuancích:
- Optická hustota studny.
- Výrobce destičky s jamkami (testovací systémy).
- Laboratoř, ve které byla studie provedena.
Vzhledem k těmto nuancím byste nikdy neměli porovnávat dva výsledky z různých testovacích systémů nebo z různých laboratoří.
Dalším důležitým bodem ovlivňujícím analýzu ELISA je tzv. avidita protilátek. Tento parametr charakterizuje množství antigenu a sílu vazby v komplexu antigen-protilátka. Jeho definice je založena na ošetření imunitního komplexu močovinou za účelem vyřešení proteinových struktur. To vám umožní zničit slabé vazby mezi antigenem a protilátkou a ponechat pouze silné. Význam studie avidity spočívá v tom, že ji lze použít ke stanovení doby trvání infekce. Tato informace je nesmírně důležitá pro stanovení diagnózy u těhotných žen.
Krevní test metodou ELISA slouží:
- Hledání různých patogenních antigenů.
- Ke studiu hormonálních hladin.
- Pro vyšetření na přítomnost autoimunitní patologie.
- K detekci markerů rakoviny.
Odrůdy ELISA
Analýza ELISA má následující typy:
- Nepřímý.
- Rovný.
- Konkurenční.
- Metoda blokování.
Ale ve skutečnosti se dnes používá pouze metoda zvaná ELISA (enzyme linked immunosorbent assay). Je založena na výše popsané reakci tvorby komplexu antigen-protilátka se změnou barvy na povrchu jamky.
Zvláštní pozornost si zaslouží samotný kvantitativní krevní test ELISA. Nejedná se o typ analýzy, ale o způsob hodnocení výsledků. Díky němu se vypočítá počet protilátek a určí se jejich třídy. Výsledek závisí na optické hustotě vzorku, testovacím systému, na kterém byla analýza ELISA provedena, a také na laboratoři.
Nemoci zjištěné testem ELISA
ELISA je krevní test, který vám umožní identifikovat velké množství rozličný infekční choroby. Kromě toho jsou virové i virové infekce detekovány se stejnou přesností. bakteriální onemocnění. Například pomocí tvorby imunitních komplexů lze prokázat přítomnost antigenů patogenů následujících onemocnění:
Kromě toho vám ELISA umožňuje detekovat:
- Rakovinové markery - TNF (tumor nekrotizující faktor), PSA (prostatický specifický antigen), CEA (karcinoembryonální antigen), CA-125 (ovariální nádorový marker)
- Těhotenským hormonem je hCG (lidský choriový gonadotropin).
- Porušení rozmnožovací systém: hormony ženského a mužského reprodukčního systému.
- Patologie štítné žlázy.
Je důležité zmínit, že test ELISA na HIV je dnes hlavním způsobem diagnostiky této nebezpečné nemoci.
Materiál pro ELISA a odběrová technika
K provedení ELISA je pacientovi odebrána krev nalačno. Dále se z krve získá sérum, které se přímo použije k analýze. Kromě toho lze provést ELISA mozkomíšního moku(mozkomíšní mok), hlen cervikálního kanálu (cervixu), plodová voda a dokonce i sklivec (oční koule).
Před darováním krve je pacient upozorněn, že by žádnou neměl brát léky a léčba antibiotiky a antivirotika Doporučuje se skončit alespoň dva týdny před odběrem krve.
Termíny pro příjem a dekódování výsledků
Doba, za kterou dostane odpověď z laboratoře, nezávisí na rychlosti její práce, ale na tom, v jaké fázi se nemoc nachází a jaké protilátky se již v krvi objevily. Takže například: imunoglobuliny M se objevují přibližně 2 týdny po odběru krve na analýzu a znamenají, že proces je ve stádiu primární infekce nebo došlo k exacerbaci chronické infekce. Zároveň se při primární infekci objevují protilátky tříd M a G. Navíc může být detekován po 4 týdnech.
IgA se objeví po 2-3 týdnech buď samostatně, nebo společně s M, tzn akutní infekce nebo společně s G, což naznačuje chronický proces.
Takový různé termíny Výskyt protilátek v krvi donutí pacienta dlouho čekat na výsledek. Po provedení testu ELISA je přijatelné počkat déle než měsíc. Určitou dobu trvá i rozluštění a výklad lékařem.
Seznam dostupných diagnostických metod se v posledních desetiletích rychle rozšiřuje, diagnostici se snaží spojit výhody všech dosavadních testů v nových metodách a zbavit se všech jejich dosavadních nevýhod.
V Nedávno stále více na seznamu diagnostické postupy zahrnuje enzymovou imunoanalýzu - moderní a poměrně nový test, o kterém je běžnému člověku, který není spojen s medicínou, známo jen málo. Přesto si tato technika rychle získává řady svých příznivců mezi kvalifikovaným zdravotnickým personálem. Můžete se pokusit zjistit, co to je a v jakých případech by se měl používat, tím, že se seznámíte s jeho vlastnostmi a hlavními charakteristikami.
Enzymová imunoanalýza je instrumentální laboratorní technika založená na molekulární reakci „antigen-protilátka“, která umožňuje detekovat specifické proteiny v biologické materiály(vzorky pro výzkum). Takovými proteiny mohou být enzymy, různé mikroorganismy (viry, bakterie, houby), prvoci atd.
Po objevení metody dostala název ELISA test, který nemá nic společného se jménem objevitelů, ale jde o zkratku celého názvu v angličtině – enzyme-linked immunosorbent assay. Tento název používají lékaři po celém světě, někteří lékaři v rusky mluvících zemích tak nazývají tento typ výzkumu.
Hlavním principem metody je molekulární reakce „antigen-protilátka“.
Antigen je jakákoli cizí molekula, která vstupuje do Lidské tělo jako součást mikroba, který nemoc způsobuje. Antigeny jsou obvykle proteinové molekuly. Kromě mikroorganismů mohou být takovým „cizincem“ cizí krvinky, které neodpovídají skupině nebo Rh faktoru.
V reakci na vstup takového antigenu do těla se spustí imunitní reakce, která je zaměřena na ochranu proti jakýmkoli cizím molekulám. K tomu dochází v důsledku syntézy speciálních činidel imunitní systém- protilátky (imunoglobuliny). Každá protilátka je vhodná pouze pro specifický antigen a neutralizuje patogenního „cizince“ tím, že se na něj naváže do jediného komplexu. Je to proces takové vazby, který se nazývá reakce „antigen-protilátka“.
Typy protilátek
Všechny protilátky (imunoglobuliny) jsou rozděleny do 5 typů podle toho, v jaké fázi imunitní odpovědi se objevují:
Pro diagnostiku ELISA jsou nejčastěji důležité hladiny imunoglobulinů IgG, IgM a IgA. Podle jejich titrů můžete zjistit, zda člověk prodělal onemocnění již dříve nebo se nakazil nedávno, zda si vytvořil imunitu nebo zda je jeho tělo bezbranné vůči patologii.
Výhody a nevýhody enzymové imunoanalýzy
Na tento moment ELISA je jednou z nejpřesnějších a nejcitlivějších metod. Byl přijat odborníky v různých oblastech medicíny a stále rozšiřuje rozsah jeho použití.
Výhody metody
- Vysoká přesnost získaných dat.
- Citlivost (umožňuje detekovat požadovanou látku i při minimální přítomnosti patogenu ve vzorku).
- Možnost diagnostiky v prvních dnech nemoci nebo v inkubační době.
- Rychlost získávání dat ve srovnání s jinými metodami s podobnou přesností.
- Vysoká automatizace procesu a minimální lidská účast, což snižuje chybovost interpreta.
- Získání údajů o stadiu patologického procesu a účinnosti zvolené terapie.
- Bezbolestné a minimálně invazivní při odběru materiálu.
Nevýhody metody
- Ve většině případů umožňuje určit reakci těla na patogenní agens, a nikoli samotný patogen.
- Před testem musí být přesně známo podezření na onemocnění, protože test je vysoce specifický.
- Pravděpodobnost falešných hodnot způsobených technickými problémy, užíváním léků nebo současnou přítomností několika chronická onemocnění nebo porušení metabolické procesy v těle pacienta.
- Interpretaci výsledků by měl provádět pouze vysoce kvalifikovaný odborník, protože k interpretaci získaných dat je nutné mít znalosti speciální trénink a velké zásoby lékařských znalostí v určité oblasti.
- ELISA je poměrně vzácný test, proto se neprovádí ve všech diagnostických laboratořích.
- Metoda je poměrně nákladná, protože kromě činidel musí mít laboratoř četné drahé vybavení a vzorky antigenů vyrobených ve speciálních ústavech.
V jakých případech se používá enzymatická imunoanalýza?
Úplný seznam indikací enzymové imunoanalýzy je velmi široký a zahrnuje téměř všechna odvětví medicíny.
Nejčastěji se ELISA používá pro následující účely:
- detekce infekčních onemocnění;
- diagnostika pohlavně přenosných chorob;
- definice imunitní stav nebo některá autoimunitní onemocnění;
- identifikace nádorových markerů;
- stanovení hormonů.
V případě infekčních a virová onemocnění Tato technika nám umožňuje identifikovat následující patologie:
Kromě toho vám ELISA umožňuje rychle a efektivně určit stav infarktu, posoudit reprodukční potenciál těla, identifikovat alergie, jejich zdroj atd.
K provedení se používá technika enzymové imunoanalýzy klinické testy při vývoji nových léků a při posuzování jejich vlivu na lidský organismus.
Typy vzorků a metody jejich výběru pro výzkum
Nejčastěji je testovacím materiálem pro enzymovou imunoanalýzu krev, která se odebírá pacientovi z antekubitální žíly. Odběr vzorku se provádí nalačno, převážně ráno. Po odběru vzorků jsou ty vytvořené buňky, které interferují s výzkumem, odděleny a odstraněny z krve, přičemž zůstane pouze sérum.
Při diagnostice urogenitálních infekcí se materiálem často stávají stěry ze slizničních tkání pohlavních orgánů, hlen z močové trubice nebo děložního čípku, vzorky z konečníku, škrábance z erozí či vředů v oblasti třísel a z jiných částí těla. Výtěry lze také odebrat z ústní dutina, stejně jako z nosohltanu.
Někdy se enzymová imunoanalýza používá v porodnické a gynekologické praxi během těhotenství ke stanovení stavu plodové vody. V tomto případě se vzorkem stává plodová voda. K tomu se odebírá malé množství tekutiny propíchnutím plodového vaku dlouhou jehlou. Veškeré manipulace jsou prováděny sterilními nástroji, aby se minimalizovala možná rizika.
Často se materiál stává cerebrospinální nebo serózní tekutinou. To se stane, když lokální anestezie, který se podává injekčně.
Specialista vysílající do studie by měl objasnit, jaký typ materiálů je potřebný pro enzymovou imunoanalýzu. Často se odebírají vzorky několika typů nebo z různých míst najednou. Lékař, který vydává doporučení na tento typ vyšetření, by měl pacienta také informovat o přípravách na darování biomateriálu.
Příprava pro enzymovou imunoanalýzu
Aby se zvýšila přesnost údajů získaných po enzymatické imunoanalýze, příprava na výběr materiálu by měla být následující:
- 10 dní před studií vyloučit antibiotika, antivirotika a antimykotika;
- na jeden den je nutné vyloučit alkohol, kouření a užívání omamných látek;
- ve stejném období je nutné se vyvarovat fyzického přetížení;
- Upozorněte předepisujícího lékaře na všechny léky, které pacient užívá;
- Informujte svého lékaře, pokud jste těhotná nebo máte podezření, že jste těhotná.
Nejlepší je, když se testovací materiály odebírají ráno na lačný žaludek.
Pokud je cílem diagnózy zjištění stavu hormonálních hladin, pak je důležité zajistit klidný stav den předem a vyhnout se nervové napětí. U žen je darování krve na hormony jednoznačně dáno obdobím měsíční cyklus, kterou projedná lékař při objednání.
2-3 dny před odběrem vzorků musíte z nabídky vyloučit smažená a tučná jídla a před testováním na hepatitidu nejezte citrusové plody ani jiné oranžové nebo žluté ovoce a zeleninu.
Interpretace výsledků enzymového imunotestu
Výsledek kvalitativní studie je obvykle označen znaménkem „+“ (detekováno) nebo „-“ (nenalezeno).
Na základě přítomnosti nebo nepřítomnosti určitých skupin imunoglobulinů lze vyvodit následující závěry:
- JgM (-), JgG (-), JgA (-) - imunita vůči onemocnění zcela chybí (tělo se s tímto typem antigenu dříve nesetkal);
- JgM (-), JgG (+), JgA (-) - došlo k předchozí kolizi s tímto antigenem nebo vakcínou;
- JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) - akutní patologický proces (s největší pravděpodobností primární);
- JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) - chronický proces;
- JgM (+), JgG (+), JgA (+) - relaps;
- JgM (-) - fáze obnovy.
Kvantitativní hodnoty nesou velkou informační zátěž, ale interpretovat je může pouze ošetřující lékař na základě předchozích indikací, věku pacienta a norem pro každé konkrétní onemocnění. Z tohoto důvodu nemůžete sami hodnotit výsledky.
Jak dlouho musíte čekat na výsledky?
Tato technika má mnoho odrůd, v závislosti na tom, které období pro získání dat v ruce je určeno. Průměrná doba trvání Diagnostika ELISA trvá 4–6 hodin, což vám umožní poskytnout výsledky hned následující den.
Nejdelší metody trvají až 10 dní, například v případě infekce HIV.
Na naléhavá potřeba Je možné použít expresní metody, při kterých je odpověď získána během 1-2 hodin.
Kde mohu získat test ELISA?
Vzhledem k tomu, že zařízení pro tento typ diagnostiky je poměrně drahé, ne všechny laboratoře jej mohou zakoupit. Navíc testy obsahující specifické antigeny mají omezenou dobu použitelnosti (obvykle asi 1 rok), a proto vyžadují neustálou aktualizaci.
Z těchto důvodů vláda lékařské ústavy Laboratoře ELISA nejsou vždy dostupné. Nejčastěji je nutné kontaktovat velká soukromá lékařská nebo velká diagnostická centra.
K provedení testu ELISA musí mít laboratoř speciální licenci a personál a laboranti musí projít speciálním školením.
Nejčastěji konkrétní diagnostické centrum nebo laboratoř doporučuje lékař odesílající pacienta k vyšetření.
Náklady na enzymovou imunoanalýzu
Cena za tato studie závisí na regionu země a na úrovni kliniky poskytující službu. V Moskvě minimální cena pro stanovení jednoho antigenu začíná od 700 rublů. Pokud je potřeba identifikovat více imunoglobulinů najednou, cena se sečte.
Když naléhavá analýza náklady se zvyšují o 150-200 rublů. pro každý antigen.
I přes poměrně vysokou cenu umožňuje enzymatická imunoanalýza provést vyšetření pacienta co nejinformativnějším a nejrychlejším, což zkracuje dobu před zahájením léčby a umožňuje rychlejší stabilizaci stavu osoby.
Toto video představuje film „Základy enzymové imunoanalýzy“.
