Fibroblastlar. Fibroblastlarning funktsiyalari

Zamonaviyning asosiy faoliyati estetik tibbiyot- yuqori texnologiyalar yordamida qarishni oldini olish. Natijada ilmiy tadqiqot Hujayralarning yangilanish qobiliyatiga ega ekanligi aniqlandi. Fibroblastlar ham shunday xususiyatlarga ega bo'lib, ularning yangilanishi terining yangilanishiga va ulardagi ko'rinadigan nuqsonlarni bartaraf etishga olib keladi.

Fibroblastlarning funktsiyalari va tabiati

"Fibroblastlar" atamasi so'zma-so'z "nihol" va "tola" deb tarjima qilingan ikkita lotin so'zidan iborat. Tabiatan ular hujayralardir biriktiruvchi to'qima, hujayradan tashqari matritsani sintez qilish (ko'chirishni ta'minlaydigan to'qimalar tuzilishi kimyoviy moddalar va teri hujayralarini mexanik qo'llab-quvvatlash). Fibroblastlar kollagen va elastin tolalari, gialuron kislotasi, fibrinning prekursorlari bo'lgan moddalarni ishlab chiqaradi.

Ular mezenximadan kelib chiqadi - odam va hayvonlar tanasi hujayralarida joylashgan germinal to'qima. Faol holatda fibroplastlarning tuzilishi yadro va jarayonlarning mavjudligini anglatadi; ular kattalashgan kattalikka ega va ko'p sonli ribosomalarni o'z ichiga oladi; dam olish holatida ular hajmi kamayadi va shpindel shakliga ega bo'ladi.

Teri fibroblastlari mavjud keng funktsiyalari. Ularning organizmda mavjudligi tufayli quyidagi jarayonlar sodir bo'ladi:

• Kollagen va elastin sintez jarayonlarini faollashtirish.
• Qon tomirlarining shakllanishi.
• Immun tizimi hujayralarini bakteriyalar va begona zarralarga yo'naltirish.
• To'qimalarning o'sishini tezlashtirish.
• Hujayra o'sishining kuchayishi.
• Terining shikastlangan joylarini davolash.
• Bir qator oqsillarni ishlab chiqarish (proteoglikan, laminin va boshqalar).

Yoshga bog'liq o'zgarishlarning sabablari

Terining yoshligi kollagen va elastin ishlab chiqarishning tsiklik jarayoni bilan belgilanadi, keyinchalik ular fibroblastlar tomonidan ularni qayta ishlab chiqarish uchun ishlatiladigan tarkibiy qismlarga bo'linadi. Vaqt o'tishi bilan, ular kollagen va elastin tolalarini ishlab chiqarishni to'xtatib, ularning faolligini pasaytiradi, bu esa terining qarishini keltirib chiqaradi.

Yoshga bog'liq o'zgarishlar 28 yoshdan 30 yoshgacha paydo bo'la boshlaydi. Ular elastiklikning yo'qolishi va ptozisning rivojlanishi, terining rangi o'zgarishi, quruqlikning kuchayishi va ajinlar paydo bo'lishida ifodalanadi. Va bularning barchasi har o'n yilda fibroblastlarning 10% ga kamayishi bilan bog'liq. asl raqam.

Fibroblastlarni to'ldirish

Shunday qilib, qarishni sekinlashtirish va yoshlikni tiklash uchun fibroblastlarni tiklash kerak. Ko'pgina zamonaviy kosmetika usullari faqat kollagen tolalari sintezining vaqtincha tezlashishiga olib keladi, lekin hujayralarning o'zlarini ko'paytirmaydi. Uzoq vaqt davomida bu shunchaki imkonsiz ekanligi umumiy qabul qilindi.

Hozirgi kunda ilm-fan oldinga katta qadam tashladi va fibroblastlarni qayta tiklash endi xayoliy emas. Ushbu protsedura SPRS terapiyasi deb ataladi va shtatlarda, Evropa mamlakatlarida va yaqinda Rossiyada keng qo'llaniladi.

SPRS terapiyasi: xususiyatlari va amalga oshirish printsipi

Fibroblastlarni tiklash oson emas, bu murakkab in'ektsiya protsedurasidan o'tishni talab qiladi. Uni amalga oshirish natijalari terining qalinlashishi va uning elastikligini oshirish, ptozisning oldini olish va kamaytirishdir. Ajinlar ham kamayadi, pigmentatsiya yo'qoladi va chandiqlar tekislanadi.

Terapiya aurikulning orqasida joylashgan teridan bemorning hujayralarini yig'ish bilan boshlanadi. Olingan namuna biomaterial deb ataladigan diagnostika va o'rganish uchun ishlatiladi. U davolash rejimini ishlab chiqish va fibroblastlarni sun'iy ravishda qayta yaratish uchun ishlatiladi, keyinchalik ular in'ektsiya yordamida teriga qayta yuboriladi.

Bemorning biomateriallaridan o'stirilgan hujayralar organizm tomonidan rad etilmaydi. Transplantatsiya qilinganidan keyin ular bir yarim yil davomida faol bo'lib qoladilar, bu davrda terining holati yaxshilanadi.

Surunkali kasalliklar, shamollash, virusli infektsiyalarning kuchayishi paytida fibroblastlarni in'ektsiya yo'li bilan yuborish tavsiya etilmaydi. ko'tarilgan harorat jismlar. Qo'llash mumkin bo'lmagan holatlar immunitet tanqisligi, malign shakllanishlar, infektsiyalar va surunkali kasalliklar V o'tkir bosqich. Jarayonni amalga oshirishdan oldin, individual kontrendikatsiyalarni aniqlash uchun mutaxassis bilan oldindan maslahatlashuv talab qilinadi.

Jarayon bir soatdan ko'p bo'lmagan vaqtni oladi va 5 dan 7 haftagacha tanaffus bilan 2 seans kursida amalga oshiriladi. In'ektsiyadan oldin lokal behushlik talab qilinadi.

Fibroblastlarni kiritish qimmat zavqdir. To'liq assortiment biomateriallarni yig'ish, saqlash, tadqiq qilish va boshqarishni o'z ichiga olgan xizmatlar taxminan 400 000 rublga baholanadi.

Video: SPRS terapiyasini o'tkazish

Fibroblastlar biriktiruvchi to'qima hujayralari bo'lib, ular kollagen va elastin ishlab chiqarishni ta'minlaydi, shuning uchun terimizning yoshligini saqlaydi. Vaqt o'tishi bilan ularning tanadagi soni doimiy ravishda kamayadi, buning natijasida yoshga bog'liq o'zgarishlarning tashqi belgilari paydo bo'ladi. Fibroblastlar sonini tiklash sun'iy ravishda o'stirilgan hujayralarga asoslangan in'ektsiya texnikasi yordamida amalga oshiriladi.

Fibroblastlar- hujayralararo moddaning tarkibiy qismlarini ishlab chiqaradigan bo'sh biriktiruvchi to'qimalarning etakchi hujayralari. Bu taxminan 20 mikron o'lchamdagi shoxlangan, shpindel shaklidagi yoki yoyilgan hujayralardir. Ularda ichki metabolik muhitning organellalari yaxshi rivojlangan. Fibroblast yadrosi oval shaklda, bir tekis tarqalgan xromatin va 2-3 yadrochadan iborat. Sitoplazma kuchli bo'yalgan endoplazma va zaif bo'yalgan ektoplazmaga aniq bo'linadi. Fibroblastlarning (ayniqsa, yosh) sitoplazmasi bazofildir. Unda 10-30 donachali zanjir shaklida membranalarga birikkan ko‘p sonli ribosomalar bilan yaxshi rivojlangan endoplazmatik to‘r aniqlanadi. Donador endoplazmatik retikulumning bu ultrastrukturasi oqsilni "eksport uchun" faol sintez qiladigan hujayralarga xosdir. Shuningdek, ko'plab erkin ribosomalar va yaxshi rivojlangan Golji kompleksi mavjud. Mitoxondriyalar katta, ularning soni kam. Sitokimyoviy usullar fibroblastlar sitoplazmasida glikolitik fermentlar va lizosomalarning gidrolitik fermentlari (ayniqsa, kollagenaza) mavjudligini ko'rsatdi. Mitoxondriya oksidlovchi fermentlari kamroq faoldir.

Hujayraning mushak-skelet tizimi kulturada ularning harakatchanligini, shaklining o'zgarishini, substratga biriktirilishini, hujayra biriktirilgan plyonkaning mexanik kuchlanishini ta'minlaydi. Hujayra yuzasida ko'plab mikrovilli va vesikulyar proektsiyalar mavjud. Suyuq muhitda to'xtatilgan fibroblastlar sharsimon shaklga ega. Fibroblast qattiq sirtga yopishgandan so'ng tarqaladi va u psevdopodiya tufayli harakatlanadi.

Fibroblastlarning asosiy vazifasi- biriktiruvchi to'qimalarning hujayralararo moddasining tarkibiy qismlarini shakllantirish uchun ishlatiladigan oqsillar va glikozaminoglikanlarning sintezi va sekretsiyasi, shuningdek, koloniyalarni ogohlantiruvchi omillarni (granulotsitlar, makrofaglar) ishlab chiqarish va sekretsiyasi. Fibroblastlar uzoq vaqt ko'payish qobiliyatini saqlab qoladi. Rivojlanish siklini tugatgan fibroblastlarga fibrositlar deyiladi. Bular uzoq umr ko'radigan hujayralardir. Hujayra sitoplazmasi organoidlardan mahrum bo'ladi, hujayra tekislanadi va ko'payish salohiyati kamayadi. Biroq, hujayra tartibga solishda ishtirok etish qobiliyatini yo'qotmaydi metabolik jarayonlar matoda.

Hujayralararo modda. Fibrillyar va asosiy (amorf) komponentlardan iborat. Belgilangan aminokislotalarni (3H-prolin, 3H-glisin va boshqalar) kiritish bilan gistotoradiografiya usullaridan foydalangan holda, oqsil molekulalari fibroblast polisomalarida sintezlanishi aniqlandi. Fibroblastlar bir vaqtning o'zida bir nechta turdagi o'ziga xos oqsillarni va glikozaminoglikanlarni sintez qila oladi. Kollagen oqsilining sintezi uchun vitamin C ning mavjudligi muhim ahamiyatga ega, uning etishmasligi bilan kollagenogenez keskin inhibe qilinadi. Hujayralararo moddalarning sintezi kislorod kontsentratsiyasining kamayishi sharoitida intensivroq sodir bo'ladi. Kollagen sintezi bilan bir vaqtda fibroblast kollagenaza fermenti yordamida ushbu oqsilning taxminan 2/3 qismini yo'q qiladi, bu erta to'qimalar sklerozining oldini oladi.

Sintezlangan prokollagen molekulalari fibroblastlar yuzasiga ekzotsitoz orqali chiqariladi. Bunday holda, oqsil eriydigan shakldan erimaydigan - tropokollagenga o'tadi. Tropokollagen molekulalarining supramolekulyar tuzilmalarga birlashishi - kollagen fibrillalari - hujayradan ajralib chiqadigan maxsus moddalarning ta'siri tufayli hujayra yuzasiga bevosita yaqin joyda sodir bo'ladi. Xususan, fibroblastlar yuzasida yopishqoq va boshqa funktsiyalarni bajaradigan oqsil - fibronektin topildi. Fibrillogenezning keyingi bosqichlari polimerizatsiya va tropokollagenning avval hosil bo'lgan fibrillalarda agregatsiyasi orqali sodir bo'ladi. Bunday holda, kollagen tolalarining pishishi fibroblastlar bilan bevosita bog'lanmagan holda sodir bo'lishi mumkin.
Glikozaminoglikanlar kollagen hosil bo'lishining regulyatorlari bo'lib, hujayralararo moddaning asosiy (amorf) komponentining bir qismidir.

Fibrillyar komponent Bo'shashgan biriktiruvchi to'qimalarning hujayralararo moddasi uch turdagi tolalarni o'z ichiga oladi - kollagen, elastik va retikulyar. Ular o'xshash shakllanish mexanizmiga ega, ammo ular bir-biridan farq qiladi kimyoviy tarkibi, ultrastruktura va jismoniy xususiyatlar. Kollagen oqsili aminokislotalar tarkibi va kollagen molekulasidagi aminokislotalarning ketma-ketligi bilan aniqlanadi. Polipeptid zanjiridagi aminokislotalarning o'zgarishiga, immunitet xususiyatlariga, molekulyar og'irligiga va boshqalarga qarab, organlarning biriktiruvchi to'qimalarining bir qismi bo'lgan kollagen oqsillarining 14 yoki undan ortiq navlari farqlanadi. Ularning barchasi kollagenning 4 ta asosiy turini yoki sinfini tashkil qiladi.

1-toifa kollagen bog‘lovchida topilgan va suyak to'qimasi, shuningdek, ko'zning sklera va shox pardasida; II tip - xaftaga tushadigan to'qimalarda; III tip - qon tomirlari devorida, homila terisining biriktiruvchi to'qimasida; IV-ro turi - bazal membranalarda.

Fibroblastlar(fibroblastotsitlar) (lotincha fibra - tola, yunoncha blastos - nihol, nihol) - hujayralararo moddaning tarkibiy qismlarini sintez qiluvchi hujayralar: oqsillar (masalan, kollagen, elastin), proteoglikanlar, glikoproteinlar.

Embrion davrida embrionning bir qator mezenxima hujayralari paydo bo'ladi fibroblastlarni farqlash, unga quyidagilar kiradi:

· ildiz hujayralari,

yarim ildiz progenitor hujayralar,

· maxsus bo'lmagan fibroblastlar,

tabaqalashtirilgan fibroblastlar (etuk, faol ishlaydigan),

fibrotsitlar (aniq hujayra shakllari),

miofibroblastlar va fibroklastlar.

BILAN asosiy funksiyasi fibroblastlar asosiy modda va tolalarning hosil bo'lishi bilan bog'liq (bu, masalan, yara bitishi, chandiq to'qimalarining rivojlanishi, begona jism atrofida biriktiruvchi to'qima kapsulasi shakllanishi paytida aniq namoyon bo'ladi).

Kam ixtisoslashgan fibroblastlar yumaloq yoki oval yadroli va kichik yadroli, bazofil sitoplazmasi, RNK ga boy bo'lgan kam ishlov berilgan hujayralardir. Hujayra hajmi 20-25 mikrondan oshmaydi. Bu hujayralar sitoplazmasida ko'p miqdorda erkin ribosomalar mavjud. Endoplazmatik retikulum va mitoxondriya kam rivojlangan. Golji apparati qisqa naychalar va pufakchalar klasterlari bilan ifodalanadi.
Sitogenezning ushbu bosqichida fibroblastlarda oqsil sintezi va sekretsiyasi juda past bo'ladi. Ushbu fibroblastlar mitotik ko'payish qobiliyatiga ega.

Differentsial etuk fibroblastlar hajmi kattaroqdir. Bu faol ishlaydigan hujayralardir.

Yetuk fibroblastlarda asosiy modda va tolalar hosil boʻlishi uchun zarur boʻlgan kollagen, elastin oqsillari, proteoglikanlarning intensiv biosintezi amalga oshiriladi. Bu jarayonlar kislorodning past konsentratsiyasi sharoitida kuchayadi. Kollagen biosintezini rag'batlantiruvchi omillar, shuningdek, temir, mis, xrom ionlari, askorbin kislotasi. Gidrolitik fermentlardan biri kollagenaz- hujayralar darajasida kollagen sekretsiyasining intensivligini tartibga soluvchi hujayralar ichidagi pishmagan kollagenni parchalaydi.

Fibroblastlar harakatchan hujayralardir. Ularning sitoplazmasida, ayniqsa periferik qatlamda aktin va miyozin kabi oqsillarni o'z ichiga olgan mikrofilamentlar mavjud. Fibroblastlarning harakati faqat fibrillyar tuzilmalarni qo'llab-quvvatlash bilan bog'langandan keyingina mumkin bo'ladi fibronektin- fibroblastlar va boshqa hujayralar tomonidan sintez qilingan glikoprotein, hujayralar va hujayra bo'lmagan tuzilmalarning yopishishini ta'minlaydi. Harakat paytida fibroblast tekislanadi va uning yuzasi 10 marta oshishi mumkin.

Fibroblastlarning plazmalemmasi turli tartibga soluvchi omillar ta'sirida vositachilik qiluvchi muhim retseptor zonasi hisoblanadi. Fibroblastlarning faollashishi odatda glikogenning to'planishi va gidrolitik fermentlarning faolligi oshishi bilan birga keladi. Glikogen almashinuvi natijasida hosil bo'lgan energiya polipeptidlarni va hujayra tomonidan ajratilgan boshqa komponentlarni sintez qilish uchun ishlatiladi.

Fibrillyar oqsillarni sintez qilish qobiliyatiga ko'ra, fibroblastlar oilasiga gematopoetik organlarning retikulyar biriktiruvchi to'qimasining retikulyar hujayralari, shuningdek, biriktiruvchi to'qimalarning skeletlari topilgan xondroblastlar va osteoblastlar kiradi.

Fibrotsitlar- fibroblast rivojlanishining aniq (yakuniy) shakllari. Bu hujayralar shpindel shaklida bo'ladi pterygoid jarayonlar. [Ular oz sonli organellalar, vakuolalar, lipidlar va glikogenni o'z ichiga oladi.] Fibrositlarda kollagen va boshqa moddalarning sintezi keskin kamayadi.

Miyofibroblastlar- fibroblastlarga o'xshash hujayralar, nafaqat kollagenni, balki kontraktil oqsillarni ham sezilarli miqdorda sintez qilish qobiliyatini birlashtiradi. Fibroblastlar miyofibroblastlarga aylanishi mumkin, ular funktsional jihatdan silliqga o'xshaydi mushak hujayralari, lekin ikkinchisidan farqli o'laroq, ular yaxshi rivojlangan endoplazmatik retikulumga ega. Bunday hujayralar shifobaxsh yaralarning granulyatsiya to'qimalarida va homiladorlik davrida bachadonda kuzatiladi.

Fibroklastlar- yuqori fagotsitik va gidrolitik faollikka ega bo'lgan hujayralar, organlar involyutsiyasi davrida (masalan, homiladorlikdan keyin bachadonda) hujayralararo moddaning "rezorbsiyasi" da ishtirok etadilar. Ular fibril hosil qiluvchi hujayralarning strukturaviy xususiyatlarini (rivojlangan donador endoplazmatik retikulum, Golji apparati, nisbatan katta, ammo oz sonli mitoxondriyalar), shuningdek, lizosomalarning xarakterli gidrolitik fermentlari bilan birlashtiradi. Ular hujayradan tashqarida ajralib chiqadigan fermentlar majmuasi kollagen tolalarining sementlashtiruvchi moddasini parchalaydi, shundan so'ng fagotsitoz va kollagenning hujayra ichidagi hazm bo'lishi sodir bo'ladi.

Tolali biriktiruvchi to'qimalarning quyidagi hujayralari endi fibroblast differentsiatsiyasiga tegishli emas.

Teri fibroblastlari biriktiruvchi to'qimalarning asosini tashkil qiladi. Ular gialuron kislotasi, kollagen tolalari va elastin ishlab chiqaruvchilari. Yoshga bog'liq o'zgarishlar fibroblastlarning faoliyatini sekinlashtiradi, bu esa terining ingichka va xiralashishiga olib keladi. Uyali aloqa uchun rahmat in'ektsiya texnologiyasi tana mustaqil ravishda dermis tuzilishini yoshartirish funktsiyasini ishga tushiradi.

Fibroblastlarning mohiyati

Teri fibroblastlari- bular dermisning biriktiruvchi to'qima qatlamining hujayralari bo'lib, ularning salaflari ildiz hujayralari edi. Ular ikki shaklda keladi:

1. Faol - yassi oval shaklidagi yadro, ko'p sonli ribosomalar va jarayonlar bilan jihozlangan yirik hujayralar. Ular intensiv bo'linish, kollagen va boshqa matritsa komponentlarini ishlab chiqarish bilan tavsiflanadi.
2. Faol bo'lmagan (fibrotsitlar) - hujayralar biroz kichikroq va shpindel shakliga ega. Ular fibroblastlardan hosil bo'lib, bo'linmaydi. Elyaf sintezi va yaralarni tiklashda ishtirok eting.

Tana qarishi bilan fibroblastlar soni kamayadi va ularning faolligi pasayadi. Bu hujayralararo moddalar sintezining yomonlashishiga olib keladi. Bu jarayon terida yupqalash, quruqlik va sarkma shaklida namoyon bo'ladi. U cho'ziladi va ajinlar paydo bo'ladi.

Funksiyalar

Fibroblastlarning asosiy funktsiyalaridan biri hujayralararo moddani ishlab chiqarish va qayta tiklashdir. O'sish omillarini, hujayradan tashqari matritsaning tarkibiy qismlarini, fermentlarni hosil qilib, ular kollagen va gialuron kislotasining yo'q qilinishiga va yangi sinteziga hissa qo'shadi. To'xtovsiz jarayon tufayli hujayralararo modda yangilanadi. Bundan tashqari, ular hujayra o'sish omillarini ishlab chiqaradilar:

• Asosiysi, barcha dermal hujayralarning o'sishi rag'batlantiriladi, himoya reaktsiyalari uchun fibronektin ishlab chiqariladi;
• Transformatsiya - kollagen va elastin tolalari sintezlanadi, qon tomirlari hosil bo'ladi, immun tizimining hujayralari begona agentlarga, bakteriyalarga yo'naltiriladi;
• Epidermal - to'qimalarning ko'payishi, hujayralar o'sishi va keratinotsitlarni tashish faollashadi;
• Keratinositlarning o'sishi epitelizatsiya, zarar qayta tiklanadi.

Fibroblast o'sish omillari mitogenlar bo'lgan ko'p funktsiyali oqsillar bilan ifodalanadi va endokrin, tartibga solish, strukturaviy funktsiya. Fibroblastlar tufayli teri uchun muhim oqsillar ishlab chiqariladi: proteoglikanlar, tinassin, nidogen va laminin.

Texnikaning mohiyati

SPRS terapiyasi fibroblastlar yordamida terini in'ektsiya bilan yoshartirish usuli bo'lib, terining qarishi sababini yo'q qiladi. Avtofibroblastlarni intradermal transplantatsiya qilish texnologiyasiga patent Amerikaning FibrocellScience kompaniyasiga tegishli. Hujayra texnologiyasi orqali inson terisi zarrasidan (biopsiya) fibroblastlarni etishtirish mumkin bo'ldi. O'z biomateriali to'qimalarning uyg'unligi muammosini va infektsiya xavfini yo'q qiladi. Otologik hujayralar ijobiy qabul qilinadi immun tizimi va to'liq ishlashga qodir.

Namuna har qanday yoshda olinishi mumkin, lekin uni yoshligida qilish afzaldir. Tavsiya etilgan yosh - 20 yoshdan 30 yoshgacha. Har qanday operatsiya vaqtida terining bir bo'lagini saqlab qolishingiz va undan ajratilgan hujayralarni ko'p yillar davomida kriyojenik saqlashga joylashtirishingiz mumkin. -196 daraja harorat ularni hayot davomida saqlashga, kerak bo'lganda foydalanishga imkon beradi. Bu istalgan vaqtda samarali kosmetik muolajalarni amalga oshirish imkonini beradi.

O'z fibroblastlari, ildiz hujayralari bilan birga, qarish davrida potentsialni saqlab qolish xususiyatiga ega. ostida lokal behushlik Bemordan quloq, kindik yoki bilak orqasidagi terining kichik namunasi olinadi. Ushbu hududlar ultrabinafsha nurlanishiga eng kam ta'sir qiladi. Uning o'lchami taxminan 4 mm. Undan ajratilgan fibroblastlar maxsus flakonlarga joylashtiriladi.

Ular xomilalik zardobli muhitda o'stirilganda yosh hujayralarda ko'payish qobiliyati rag'batlantiriladi va eskilari yuviladi. Madaniyatning "yosharishi" mavjud. Bir oydan keyin hujayralar soni bir necha ming marta ortadi. Qayta faollashtirilgandan so'ng, hujayra madaniyati bemorga ko'chiriladi va dermisni faol ravishda to'ldiradi. Bir yarim oy o'tgach, ko'paygan fibroblastlar bemorning yuz terisiga, shu jumladan ko'z atrofida, shuningdek, bo'yin, dekolte va qo'llarga AOK qilinadi.

Jarayon

Kurs 3-5 seansdan iborat bo'lib, ular orasidagi intervallar 3 dan 6 haftagacha. Jarayonning bosqichlari:

• mavjud kontrendikatsiyalarni aniqlash uchun bemorni tekshirish;
• materialni olish;
• fibroblastlarni etishtirish;
• ikki usul yordamida teriga hujayrali materialni kiritish: tunnel - chuqur teri burmalariga, papulyar mezoterapiya;
• kremni qo'llash orqali terini ultrabinafsha nurlanishidan himoya qilish.

Bemorlarning ta'kidlashicha, protsedura og'riqli, shuning uchun Emla anestetik kremi ishlatiladi. Amaldagi preparatning miqdori bir seans uchun 3 ml gacha. Qayta tiklash davri 2-3 kun davom etadi. Jarayondan so'ng kosmetik vositalarni qo'llash taqiqlanadi. Ikki hafta davomida siz sauna yoki hammomga tashrif buyurishdan bosh tortishingiz kerak. Terini yuqori darajada himoyalangan krem ​​bilan yog'lash orqali quyoshdan himoyalangan bo'lishi kerak. Jarayonni yiliga bir marta takrorlash tavsiya etiladi. Natijada bir necha oy davomida yuz terisining holati yaxshilanadi.

Usulning samaradorligi va afzalliklari

Fibroblastlar bilan yoshartirish 1,5 yoki 2 oydan keyin birinchi natijalarni beradi. To'liq effekt Jarayonning ta'siri olti oydan keyin paydo bo'ladi va 2-3 yil davom etadi. O'sish omillari va hujayradan tashqari matritsaning ishlab chiqarilishi kuchayadi. Fibroblastlar tsiklning tabiiy fazalaridan o'tadi: ular faollashadi, elastin, kollagen va boshqa moddalarni sintez qiladi, keyin degradatsiya bosqichi boshlanadi, ularni yangi fibroblastlar bilan almashtiradi.

Ularning qo'llanilishi tibbiyotda keng tarqalgan - kuyishlarga qarshi, davomida to'qimalarni qayta tiklash uchun trofik yaralar, yaralar Ularning kosmetologiyadagi ahamiyati katta. Terining yoshligi fibroblastlar sonidan hosil bo'ladi. Dermisga joylashtirilgan o'sib chiqqan fibroblastlar to'qimalarga singib, kollagen va elastin ishlab chiqarishni boshlaydi. Natijada teri elastik bo'ladi, tekis rangga ega bo'ladi va nozik ajinlar yo'qoladi.

Ammo protseduradan qattiqlashtiruvchi ta'sirni kutmasligingiz kerak. Ushbu uslub terining sifat xususiyatlarini yaxshilashga qaratilgan. SPRS terapiyasining asosiy afzalliklari:

• preparat genlar bilan ishlaydi, bu terining birlamchi tuzilishining buzilishini bartaraf qiladi;
• tabiiy yoshartirish jarayonlari faollashadi;
• xavfsizlik, rad etish xavfi yo'q, allergik reaktsiya;
• natijani uzoq muddatli saqlash.

6 oy ichida ko'z atrofidagi ajinlar 90% tekislanadi. Dekolte va bo'yin 95%, yonoqlar 87% yoshroq ko'rinadi. Og'iz atrofidagi burmalar 55% ga kamayadi.

Qo'llash mumkin bo'lmagan holatlar

To'liq xavfsizlikka qaramay, protsedura bir qator kontrendikatsiyaga ega:

• homiladorlik, laktatsiya davri;
• qon ivishining buzilishi;
• malign neoplazmalar;
• otoimmün kasalliklar;
• chandiq shakllanishiga moyillik;
• ARVI;
• teri ustida yallig'lanish.

Sessiyadan keyingi kun davomida terida qizarish va mikrogematomalar kuzatilishi mumkin. Ertasi kuni semptomlar yo'qoladi.

Autofibroblast transplantatsiyasi texnologiyasi Roszdravnadzorning rasmiy ruxsatiga ega. Uning xavfsizligi hujayra hayotiyligini laboratoriya monitoringi bilan tasdiqlanadi.

RU 2536992 patent egalari:

Ixtiro biotexnologiya sohasiga, xususan uyali texnologiyalarga taalluqlidir va tibbiyotda qo'llanilishi mumkin. Usul nomidagi IPVE kriyobankidan M-20 liniyasining diploid hujayralarini masshtablashni o'z ichiga oladi. M.P. Chumakov Rossiya Tibbiyot fanlari akademiyasi 16-o'tishning ishchi hujayralari bankini olish uchun 7-o'tishning urug'lik hujayralari bankining ampulasidan. Bunday holda, terapevtik va / yoki diagnostika maqsadlarida foydalanish uchun yaroqli bo'lgan 20-33 bo'lakli hujayralar trombotsitlardan kelib chiqadigan o'sish omili PDGF bo'lgan odamning 10% fibrinolitik faol plazmasi (FAP) bo'lgan ozuqaviy muhitda etishtirish orqali olinadi. konsentratsiyasi 155 dan 342 pg/ml gacha. Ixtiro insonning diploid fibroblast hujayralarining proliferativ faolligini oshirish imkonini beradi. 1 ish haqi fayllar, 2 ta jadval.

Ixtiro biotexnologiya, immunologiya, tibbiyotga, xususan, insonning diploid fibroblast hujayralarining proliferativ xususiyatlarini oshirish usuliga, shu jumladan terapevtik va diagnostika maqsadlarida, shu jumladan inson interferonlarining virusga qarshi faolligini aniqlash, hujayralarni almashtirish uchun foydalanishga tegishli. terapiya.

Inson diploid hujayra liniyalari (HDCL) o'tish paytida barqaror biologik va genetik xususiyatlarni saqlab qolish qobiliyatida ma'lum bo'lgan barcha turdagi hujayra madaniyatiga nisbatan shubhasiz afzalliklarga ega. Vaktsinalarni ishlab chiqarish uchun mo'ljallangan LDCC sertifikati Jahon sog'liqni saqlash tashkiloti tomonidan ishlab chiqilgan yagona talablarga muvofiq amalga oshiriladi. nomidagi Klinik yuqumli kasalliklar davlat ilmiy-tadqiqot instituti tomonidan ishlab chiqilgan LDKCH vaktsinasini sertifikatlashning milliy mezonlari uchun ushbu tavsiyalar asos qilib olingan. L.A. Tarasevich va SSSR Sog'liqni saqlash vazirligi [ Ko'rsatmalar“Uzluksiz hujayra liniyalarini sertifikatlash - tibbiy ishlab chiqarish va nazorat qilish uchun substratlar immunobiologik preparatlar» RD-42-28-10-89. SSSR Sog'liqni saqlash vazirligi. M., 1989. - B. 16]. Inson diploid hujayralarining sertifikatlangan liniyasi cheklangan umrga ega va barqaror biologik, madaniy va genetik xususiyatlarga ega, u ifloslantiruvchi moddalardan (bakteriyalar, zamburug'lar, mikoplazmalar, viruslar) tozalanadi va immuniteti zaif hayvonlarda o'simta hosil bo'lishiga olib kelmaydi. Diploid hujayra chizig'i kamida 200 kriyovialdan iborat erta o'tish darajasida (10-o'tishgacha) sertifikatlangan urug 'hujayralari bankiga ega bo'lishi kerak. Urug' hujayralarini bir yoki bir nechta krioviallardan 16-o'tish darajasiga o'tkazish orqali hujayralarning ishchi banki olinadi, undan ishlab chiqarish yoki ishlab chiqarish uchun zarur ishlab chiqaruvchi kulturalarni olish mumkin. tadqiqot ishi. Rossiyada va xorijda sanab o'tilgan talablarga muvofiq sertifikatlangan inson diploid hujayralarining (Wi-38, MRC-5, M-22 va boshqalar) faqat bir nechta qatorlari mavjud. Sertifikatlangan LDCVlar poliomielit, qizamiq, qizilcha, quturish, nafas olish va boshqalarga qarshi vaktsinalar ishlab chiqarishda qo'llaniladi. sitomegalovirus infektsiyalari, shuningdek interferon [T.K. Borisova, L.L. Mironova, O.I. Konyushko, V.D. Popova, V.P. Grachev, N.R. Shuxmina, V.V. Zverev. Inson diploid hujayralarining mahalliy shtammlari vaktsinalarni ishlab chiqarish uchun substratdir. Tibbiy virusologiya. Materiallar ilmiy-amaliy konferensiya « Haqiqiy muammolar tibbiy virusologiya, M.P.ning 100 yilligiga bag'ishlangan. Chumakov." M. 2009. XXVI jild. 305-307-betlar; L.L. Mironova, V.D. Popova, O.I. Konyushko. Transplantatsiya qilinadigan hujayralarning asl liniyalari bankini yaratish va ularni virusologik amaliyotda qo'llash tajribasi. Biotexnologiya. 2000, p. 41-47]. LDCN virusli infektsiyalarni tashxislash va toksiklikni tahlil qilish uchun in vitroda keng qo'llaniladi turli dorilar va almashtirish terapiyasi uchun mahsulotlar [RF Patenti № 2373944, 23.06.2008. Davolash usuli kuyish yarasi. A.S. Ermolov, S.V. Smirnov, V.B. Xvatov, L.L. Mironov; S.V. Smirnov, V.B. Hvatov. Innovatsion texnologiyalar nomidagi Shoshilinch tibbiy yordam ilmiy-tadqiqot institutida kuyishlarni mahalliy davolash. N.V. Sklifosovskiy. Kitobda: Yangi iqtisodiyot. Rossiyaning innovatsion portreti. M., Strategik hamkorlik markazi, 2009. 388-390-betlar].

IPVE da im. M.P. Chumakov RAMS 20-asrning 80-yillarida 8-10 haftalik inson embrionlarining terisi va mushaklaridan bir nechta diploid hujayralar qatorlari o'rnatildi. Ushbu ish diagnostik maqsadlarda inson diploid hujayralari ishlab chiqarishni o'zgartirish va hujayralarni almashtirish terapiyasiga, ya'ni proliferativ xususiyatlarga ega diploid fibroblast hujayralarini ishlab chiqarishga bag'ishlangan.

Prototip. RF Patenti 1993 yil 22 martdagi 1440029-son [Mironova L.L., Preobrazhenskaya N.K., Solovyova M.N., Orlova T.G. Stobetskiy V.I., Kryuchkova G.P., Karmysheva V.Ya., Kudinova S.I., Popova V.D., Alpatova G.A. IPVE va NIIEiM im. N.F. Gamaleya. Inson interferonlarining virusga qarshi faolligini va virus tarqalishini aniqlash uchun test tizimi sifatida ishlatiladigan diploid inson embrion terisi va mushak hujayralarining shtammi].

Ushbu LDCC shtammi M-21 deb nomlanadi, ammo M-21 fibroblast madaniyati etarli darajada proliferativ faollikka ega emas edi, bu mono qatlam hosil bo'lish vaqtini qisqartirdi va hujayralar va materiallarning sarfini oshirdi va bu oxir-oqibat uning zaxiralarining to'liq tugashiga olib keldi. Natijada, inson interferonlarining virusga qarshi faolligini aniqlash va boshqa tibbiy va biologik maqsadlar uchun mos keladigan, tejamkorroq, yuqori proliferativ faolligi bilan ajralib turadigan, urug' va ishchi hujayralar qatoriga ega bo'lgan yangi hujayra liniyasiga ehtiyoj paydo bo'ldi. Bu chiziq M-20 deb belgilangan. 7-o'tish darajasida urug 'hujayralari banki tayyorlandi. 2012 yilda 7-o'tish yo'lining ampulasidan 16-o'tish darajasidagi ishchi hujayralar banki yaratilgan. nomidagi Eksperimental fizika tomirlar institutida 7 va 16-darajali o'tish joylaridagi urug'lik va ishchi hujayralar banklari saqlanadi. M.P. Chumakov RAMS va ikkalasini ham ta'minlashga imkon beradi ishlab chiqarish jarayonlari, va ilmiy tadqiqotlar.

Ushbu ixtiro va eng yaqin analog (prototip) o'rtasidagi farq 10% fibrinolitik faol plazma (FAP) dan foydalanilganda M-20 hujayralarining proliferativ faolligining oshishi hisoblanadi.

Shunday qilib, ixtiro ob'ekti nomidagi veterinariya fizikasi instituti kriobankidan hujayralarni etishtirish orqali tibbiy va biologik maqsadlarda diploid odam fibroblast hujayralarining proliferativ xususiyatlarini oshirish usuli hisoblanadi. M.P. Chumakov nomidagi Rossiya Tibbiyot fanlari akademiyasi, unda xarakterli M-20 liniyasining diploid hujayralari qo'llaniladi, ular ampuladan 7-o'tishning urug' hujayralari va 16-yo'lakning ishchi hujayralari banki olinadi, hujayralar bilan. Insonning 10% fibrinolitik faol plazmasini (FAP) o'z ichiga olgan ozuqaviy muhitda etishtirish orqali olingan terapevtik va / yoki diagnostika maqsadlarida foydalanish uchun yaroqli 20-33 o'tish joylari. Hujayralarni o'stirishda 10% FAP bo'lgan DMEM ozuqa vositasidan foydalaniladi.

Yuqoridagi usul bilan olingan xarakterli M-20 liniyasining inson diploid hujayralari yuqori proliferativ faollikka ega va terapevtik va / yoki diagnostika maqsadlarida foydalanish uchun javob beradi.

Usulni amalga oshirish sxemasi:

1. nomidagi IPVE 7-o'tishning urug'lik hujayralari bankidan bitta kriovial ishlatiladi. M.P. Chumakova RAMS

2. nomidagi IPVE 16-o'tish darajasida ishchi hujayralar bankini tayyorlash. M.P. Chumakova RAMS

3. 16-o'tishning ishchi hujayralari bankidan M-20 liniyasining fibroblastlarini tiklash (IPVE M.P. Chumakov nomidagi Rossiya Tibbiyot fanlari akademiyasi).

4. Fibroblastlarning bir qatlamli kulturasini olish M-20 liniyasi, 17-bo'lim.

5. Kriyoprezervatsiya jarayonida DNKning mumkin bo'lgan shikastlanishini tiklash uchun M-20 liniyasining fibroblastlarining biologik xususiyatlarini uch marta o'tish orqali tiklash (20-chi o'tishgacha).

6. 10% fibrinolitik faol plazma (PDGF tarkibi 155 dan 342 pg/ml gacha) bo'lgan ozuqaviy muhit yordamida M-20 liniyasining fibroblastlarini 20 dan 33 gacha o'tish yo'lidan ko'paytirish orqali diagnostik maqsadlarda va hujayralarni almashtirish terapiyasi uchun hujayra madaniyatini olish.

Taklif etilayotgan usul yuqori proliferativ faollikka ega bo'lgan va diagnostika va/yoki foydalanish uchun yaroqli hujayralar ishlab chiqarishni ta'minlaydi. dorivor maqsadlarda.

Ushbu texnik natijaga M-20 liniyasining inson fibroblastlarini ozuqaviy muhitda 10% fibrinolitik faol plazma (FAP) qo'shilgan holda etishtirish orqali erishiladi, bu o'sishni rag'batlantiruvchi ta'sirga ega va hujayra madaniyatining proliferativ faolligini oshiradi.

FAP - klinik qo'llaniladigan transfuzion vosita bo'lib, u o'limdan keyingi dastlabki 6 soat ichida to'satdan miyokard infarkti, o'tkir yurak etishmovchiligi, miya qon ketishidan vafot etgan odamlarning qonidan olinadi [SSSR Sog'liqni saqlash vazirligining iyundagi 482-son buyrug'i. 1972 yil 14-sonli "Terapevtik-profilaktika muassasalari va poliklinikalarni jasad to'qimalari bilan ta'minlashni yaxshilash to'g'risida" ilik va qon"]. O'limdan keyingi qon to'liq transfüzyon vositasi bo'lib, u bir qator biologik xususiyatlarga ega - birinchi navbatda fibrinolitik potentsialni oshiradi. Shu munosabat bilan, shuningdek, postmortem qon fibrinolizini chaqirish taklif etiladi. O'limdan keyingi qon quyishning asosiy ko'rsatkichlari: o'tkir qon yo'qotish, shok, turli xil kelib chiqadigan anemiya, kuyish shikastlanishi, metabolik almashinuv paytida. ekzogen zaharlanish, jarrohlikda ekstrakorporeal aylanishdan foydalanganda AIKni to'ldirish [E.G. Tsurinova. Fibrinoliz qonini quyish. M., 1960, 159 b.; S.V. Rijkov. To'plash vaqti va o'lim sababiga qarab fibrinoliz qonini tayyorlash va qo'llash imkoniyatlari. Muallifning qisqacha mazmuni. dok. diss. L., 1968, 21 b.; G.A. Pafomov. To'satdan vafot etgan qonning biologik xususiyatlari va uni jarrohlik amaliyotida qo'llash. Diss. dok. asal. Sci. M., 1971, 355 b.; K.S. Simonyan, K.P. Gutiontova, E.G. Tsurinova. Transfuziologiya nuqtai nazaridan o'limdan keyingi qon. M., Tibbiyot, 1975, 271 b.]. Hozirgi vaqtda o'limdan keyingi qon komponentlari qo'llaniladi: fibrinolitik faol plazma, qizil qon hujayralari massasi, leykotsitlar massasi, trombotsitlar massasi [G.Ya. Levin. Gemokoagulyatsiya xususiyatlari va klinik qo'llash jasad qonining plazmasi va trombotsitlari. Muallifning qisqacha mazmuni. dok. diss. M., 1978, 31 b.; V.B. Hvatov. To'satdan vafot etgan odamlarning qon plazmasidan fibrinolitik va antiprotenaz ta'sirga ega preparatlar. Diss. dok. Med Sciences, 1984, 417 pp.; V.B. Xvatov Plazmakinaza - o'limdan keyingi plazmadan yangi trombolitik preparat In: Tromboz va tromboliz edd. E.I. Chazov, V.V. Smirnov). Maslahatchilar byurosi, N.Y., L, 1986, p. 283-310; V.B. Hvatov. O'limdan keyingi qondan foydalanishning tibbiy va biologik jihatlari. SSSR Tibbiyot fanlari akademiyasining axborotnomasi, 1991, 9. 18-24-betlar; V.B. Hvatov. Jasad qoni - masalaning tarixi va hozirgi holati. Muammo gematol. va toshib ketish. qon, 1997, 1. S. 51-59]. Organ donorlaridan olingan murda qonining tarkibiy qismlari klinik foydalanishda ham olingan [2001 yil 20 dekabrdagi 460-sonli “Miya o'limi tashxisi asosida odamning o'limini aniqlash bo'yicha yo'riqnomaga” muvofiq yuragi urib ketgan vafot etgan shaxs; Adliya vazirligining 2002 yil 17 yanvardagi 3170-son ro'yxati. Organlar, to'qimalar va hujayralarni transplantatsiya qilish Rossiya Federatsiyasining "Odam organlari va (yoki) to'qimalarini transplantatsiyasi to'g'risida" gi qonuniga muvofiq amalga oshiriladi - o'zgartirishlar kiritilgan. Federal qonunlar 2000 yil 20 iyundagi 91-F3-son, 2006 yil 16 oktyabrdagi 160-F3-son; V.B. Xvatov, S.V. Juravel, V.A. Gulyaev, E.N. Kobzeva, M.S. Makarov. Organ donorlari qonining hujayra tarkibiy qismlarining biologik foydaliligi va funktsional faolligi. Transplantologiya, 2011, 4, p. 13-19; Xubutiya M.Sh., Xvatov V.B., Gulyaev V.A. va hokazo. Transplantatsiya paytida globulyar qon hajmini va immunomodulator ta'sirlarni qoplash usuli. Ixtiro uchun RF patenti No 2452519, nashr. 06/10/2012, byulleten. № 16].

To'satdan vafot etgan odamlarning qonidan fibrinolitik faol plazma olinadi, uning fibrinolitik faol xususiyatlarini saqlab qolish uchun konservant Glyugitsir (qon: saqlovchi nisbati 4: 1) bilan tayyorlanadi. Qonning hujayra elementlaridan plazmani ajratish aseptik va antiseptiklarning barcha qoidalariga rioya qilgan holda steril qutida amalga oshiriladi va konservalangan donor qonidan donor plazmasini olishga o'xshaydi. Jarrohlik va travmatologiyada FAPning klinik qo'llanilishi jarohatni davolashni rag'batlantirish ta'sirini aniqladi [I.Yu. Klyukvin, M.V. Zvezdina, V.B. Xvatov, F.A. Burdiga. Tishlash yaralarini davolash usuli. Rossiya Federatsiyasining ixtiro uchun patenti No 2372927, nashriyot, 2009 yil 20 noyabr, byulleten. № 32]. Biz bu ta'sirni FAPda faollashtirilgan trombotsitlar tomonidan chiqariladigan o'sishni rag'batlantiruvchi omillar mavjudligi bilan bog'ladik. Keyinchalik FAPda trombotsitlardan kelib chiqadigan o'sish omilini (PDGF) aniqladik. FAP ning inson hujayra madaniyatida o'sishni rag'batlantiruvchi ta'siri maxsus tadqiqotlarda ko'rsatilgan. 10% konsentratsiyada o'rganilgan FAP namunalari ma'lum miqdordagi hujayralarni o'z ichiga olgan M-20 liniyasining inson fibroblastlari hujayra suspenziyasiga qo'shildi va hosil bo'lgan aralashmaning 10 ml o'sish yuzasi maydoni bo'lgan madaniyat kolbalariga joylashtirildi. 25 sm 2. Hujayralar 3-4 kun davomida 5% CO 2 atmosferasida va 37 ° C da o'stirildi. 3 marta o'tkazilgandan so'ng, o'sgan hujayralar Fuchs-Rosenthal kamerasida hisoblab chiqildi va o'sgan hujayralar sonining ekilgan hujayralar soniga nisbati - proliferatsiya indeksi aniqlandi (1-jadvalda).

Amalga oshirilgan tajribalardan kelib chiqadiki, FAPning o'sish xususiyatlari yuqori proliferativ faollikni ta'minlaydi va homila sigir zardobidan farq qilmaydi. Bundan tashqari, FAP inson trombotsitlarining o'sish omillarini o'z ichiga oladi, ya'ni. allogenik tip, homila sigir zardobidan farqli o'laroq - ksenogen tip. Bu fakt almashtirish terapiyasi paytida hujayra transplantatsiyasi uchun hal qiluvchi ahamiyatga ega. E'tibor bering, M-20 hujayra madaniyatiga o'sishni rag'batlantiruvchi ta'sir, xususan, 155 dan 342 pg / ml gacha bo'lgan konsentratsiyada FAPda PDGF mavjudligiga bog'liq. Ushbu ma'lumotlar R&D Systems kompaniyasining Qantikine, Human PDGF-BB Immunoassay to'plami va Thermo kompaniyasining Multiskan Ascent tizimi yordamida olingan. FAPdagi PDGF-BB kontsentratsiyasi uning qon zardobidagi tarkibiga o'xshaydi. Shunday qilib, qon donorlari va tekshirilgan bemorlarning zardobida PDGF miqdori 110 dan 880 pg / l gacha, o'rtacha 244 pg / ml ni tashkil etdi, plazmada esa PDGF miqdori 0-2 pg / ml gacha o'zgarib turadi.

Taklif etilayotgan texnik yechimni yaxshiroq tushunish uchun "tibbiy va biologik maqsadlar uchun M-20 liniyasining inson diploid hujayralarini ishlab chiqarish" uchun biz quyidagi misolni keltiramiz.

M-20 liniyasining hujayralari, 16-o'tish, ishchi bankdan tiklanadi. Buning uchun hujayrali kriovial suyuq azotdan chiqariladi va ichiga joylashtiriladi suv hammomi 38 ° C haroratda va eritilgandan so'ng, tarkibi 10% FAP (PDGF miqdori 155 dan 342 pg / ml gacha) bo'lgan DMEM ozuqaviy muhiti bo'lgan madaniy idishga o'tkaziladi, 1 nisbatda antibiotik gentamitsin qo'shiladi. 1 litr ozuqaviy muhit uchun ml 4% eritma. Bir qavat hosil qilish uchun hujayralar atmosferada 37°C va 5% CO 2 da 4-5 kun davomida ekiladi. Hujayralarning monoqatlami hosil bo'lgandan so'ng, kriokonservatsiyadan keyin DNKni tiklash uchun zarur bo'lgan 3 ta ketma-ket o'tish amalga oshiriladi. Keyin hujayralar 20-bo'lakdan 33-bo'lakgacha takrorlanadi. Ushbu o'tish joylaridagi hujayralar biomedikal maqsadlar uchun mo'ljallangan. Olingan hujayra liniyasi JSST va GNIISiK nomidagi MIBP talablariga muvofiq batafsil tavsiflangan. L.A. Tarasevich, shu jumladan M-20 hujayra liniyasining HLA tiplanishi, shuningdek, uning sitokin spektrini o'rganish. M-20 liniyasi va M-22 liniyasining xususiyatlarining qiyosiy tavsifini beramiz (2-jadval). M 22 liniyasi (inson diploid fibroblastlari) vaktsina substrati sifatida litsenziyalangan va har qanday turdagi tibbiy virusli vaktsinalarni ishlab chiqarish uchun tasdiqlangan, shuningdek, II-IIIA darajali kuyish yaralarini davolash uchun ishlatiladi [Ixtiro uchun RF patenti № 2373944. , 23.06.2008. Kuyish yarasini davolash usuli. A.S. Ermolov, S.V. Smirnov, V.B. Xvatov, L.L. Mironova, O.I. Klnyushko, E.A. Jirkova, B.C. Bocharova].

nomidagi IPVE da M-20 liniyasi o'rnatildi. M.P. Chumakov RAMS 1986 yilda sog'lom ayoldan abort qilish natijasida olingan 10 haftalik inson embrionining terisi va mushaklaridan. Saraton, jinsiy yo'l bilan yuqadigan kasalliklar, gepatit yoki sil kasalligi tarixi yo'q edi; genetik va tug'ma kasalliklar oilada kuzatilmagan. Hujayra madaniyat muhiti DMEM 10% FAP bilan to'ldirilgan. Urug'lik nisbati 1: 3-1: 4 haftada ikki marta 7 × 10 4 hujayra / ml hujayralarni ekish dozasi bilan. Hujayra monoqatlami 1-3 yadroli va mayda xromatin bo'laklari bo'lgan oval yadroli, yo'naltirilgan bir hil shpindel shaklidagi hujayralardan iborat. IN hayot davrasi chiziqni rivojlanishning 3 bosqichiga ajratish mumkin: shakllanish 1-3 o'tish, faol o'sish 4-40 va qarish 41-52, keyin o'lim sodir bo'ladi. Chiziq hujayralari inson karyotipiga ega 2m=46, XY. Chiziq yuqori genetik barqarorlik bilan ajralib turadi: hujayralarning 93,3-96,9% diploid xromosomalar to'plamiga ega, poliploid to'plami bo'lgan hujayralar 1,6% dan ko'p emas. Bo'shliqlar, uzilishlar yoki halqa xromosomalari kuzatilmadi. G-6PDE va ​​LDE izoenzimlarining bandlari soni va ularning elektroforetik harakatchanligi inson eritrotsitlari bilan mos keladi. G-6FDG sekin turi. Tanlangan ozuqaviy muhitga ekish paytida bakteriyalar, zamburug'lar yoki mikoplazmalar bilan ifloslanish aniqlanmadi. Bundan tashqari, DNK floroxromlari Hochst 33258 va olivomitsin bilan bo'yashda mikoplazma bilan ifloslanish aniqlanmadi, shuningdek, PCR usuli. Emizganlar va katta yoshli oq sichqonlarda o'tkazilgan tajribalarda viruslar bilan ifloslanish, gvineya cho'chqalari, quyon va tovuq embrionlari, shuningdek, gomologik va heterolog hujayra madaniyatida. Shish paydo bo'lishini nazorat qilish. Chiziq hujayralari immunosupressiv hayvonlarga kiritilganda, shish paydo bo'lmagan. Hech qanday teskari transkriptaza aniqlanmadi. HLA belgilari: I sinf: A*(02.03)/B*(07.40)/CW*(03.07). II sinf: DRB1*(15.16)/DQB1*(05.06). 20-o'tish darajasidagi M-20 liniyasining hujayralari a-interferon (IFNa) va interleykinlar uchun mRNK ishlab chiqaradi: IL1b, 2, 4, 6, 8, 10, 18.

Shunday qilib, tavsiya etilgan chiziq diploiddir - u cheklangan umrga ega, hayot davomida normal inson hujayralarining karyotipini saqlaydi, ifloslantiruvchi moddalardan xoli va onkogen salohiyatga ega emas. U JSST tavsiyalari va nomidagi GNIISiK MIBP talablariga muvofiq xavfsizlik uchun tavsiflangan. L.A. Tarasevich. IPVE da im. M.P. Chumakov RAMSda ishlab chiqarish va ilmiy tadqiqotlarning barcha ehtiyojlarini qondira oladigan urug'lik va ishchi hujayralar banklari mavjud. M-20 liniyasining hujayralari turli viruslar tomonidan infektsiyaga sezgir. Bundan tashqari, M-20 liniyasining sitokin spektri o'rganildi. Hujayralarning sitokin spektrini bilish bemorlarning interferon holatini aniqlashda natijalarni aniqroq baholash va terapevtik va profilaktik preparatlarni qo'llash bo'yicha asosli tavsiyalar berishga imkon beradi.

Odamning diploid hujayralari - tavsiya etilgan usul bilan olingan proliferativ faolligi kuchaygan M-20 shtammining fibroblastlari diagnostik maqsadlarda, xususan, inson qon zardobidagi interferon (IFN) faolligini aniqlash uchun, shuningdek, dorivor maqsadlarda ishlatilishi mumkin. , masalan, mahalliy davolash uchun bedsores , tishlash yaralari, uzoq muddatli davolanmaydigan va kuygan yaralar.

1. Odamning diploid fibroblast hujayralarining proliferativ xususiyatlarini oshirish usuli, xarakterli M-20 liniyasining diploid hujayralari nomidagi tomirlar instituti kriobankidan. M.P. Chumakov RAMS ampulasidan 7-oʻtish yoʻlining urugʻ hujayralari va 16-yoʻlakning ishchi hujayralari banki olinadi, davolash va/yoki diagnostika maqsadlarida foydalanish uchun yaroqli 20-33 yoʻlak hujayralari olinadi. 155 dan 342 pg/ml gacha bo'lgan konsentratsiyada trombotsitlardan kelib chiqadigan o'sish omili PDGF bo'lgan 10% fibrinolitik faol plazma (FAP) odamni o'z ichiga olgan ozuqaviy muhitda etishtirish.

2. 1-bandga muvofiq usul, bunda hujayralarni o'stirishda 10% FAP bo'lgan DMEM ozuqa muhiti qo'llaniladi.

Shunga o'xshash patentlar:

Ixtiro farmatsevtika sanoatiga, ya'ni ishlab chiqarishda inson plasental perfuzat hujayralaridan foydalanishga tegishli. dori odamda o'simta hujayralarining ko'payishini bostirish.

Ixtirolar guruhi biotexnologiya va onkologiya sohasiga tegishli. Usul quyidagilarni o'z ichiga oladi: a) keyingi proteomik va to'liq transkriptomik tahlillar uchun tug'ruqdan keyingi to'qimalarga xos multipotent otolog ildiz hujayralarini (ASC) va/yoki otolog progenitor hujayralarni (APC) izolyatsiya qilish; b) ASC va/yoki APC va/yoki multipotent allogen HLA-haploident ildiz hujayralarini (HLA-CK) ularning proteomik profilini keyinchalik qayta qurish uchun izolyatsiya qilish; c) bemorning o'simtasidan CSClarni izolyatsiya qilish; d) ASC va/yoki APC va RSC proteomik tahlili; e) ASC va/yoki APC va CSC larning to'liq transkriptom tahlili; f) har biri ASC va/yoki APC va CSC proteomik profillarida mavjud bo'lgan oqsillar to'plamini aniqlash; g) kanserogenez natijasida neoplastik transformatsiyaga uchramagan CSClarda hujayra ichidagi signalizatsiya yo'llarini aniqlash va aniqlangan signalizatsiya yo'llarining membrana qabul qiluvchilari bo'lgan maqsadli oqsillarni aniqlash uchun oldindan belgilangan oqsillar to'plamini tahlil qilish; h) CSClarning to'liq transkriptome gen ekspresyon profilini tahlil qilish va CSClarda aniqlangan signalizatsiya yo'llarining tarkibiy qismlarining yaxlitligi va funktsional ahamiyatini tasdiqlash; i) maqsadli oqsillarni faollashtirishga qodir ligand oqsillarini aniqlash; Kimga) qiyosiy tahlil ASA va/yoki APC ning toʻliq transkriptomik profillari maʼlum transkriptom maʼlumotlar bazalarida mavjud boʻlgan transkriptomik profillar, ASA va/yoki APC va/yoki HLA-CK ning gen ekspresyon profilini oʻzgartirishga qodir boʻlgan perturbogenlarni aniqlash, ularning proteomik profilini qayta qurish uchun ajratilgan. ilgari ma'lum ligand oqsillarining sekretsiya yo'nalishi; k) ASA va/yoki APC va/yoki HLA-CK proteomik profilini perturbogenlar tomonidan o'zgartirilgan transkriptomik profilni olish uchun qayta qurish. uyali tizimlar, bemorning RSC ga tartibga soluvchi ta'sir ko'rsatishga qodir.

Ixtiro biotexnologiya sohasiga, xususan uyali texnologiyalarga taalluqlidir va tibbiyotda qo'llanilishi mumkin. Promonotsitlarni o'z ichiga olgan monotsitik nasl hujayralarida boyitilgan mononuklear hujayralar yoki embrion bo'lmagan ildiz hujayralari populyatsiyasi sub'ektdagi ishemiyani davolash uchun ishlatiladi.

Ixtiro biotexnologiya va hujayra texnologiyasi sohasiga tegishli. Da'vo qilingan ixtiro madaniyatda farqlana boshlaydigan pluripotent, multipotent va/yoki o'z-o'zini yangilaydigan hujayralarni yaratishga qaratilgan. Har xil turlar hujayralar va in vivo jonli ravishda keyingi farqlash qobiliyatiga ega.

Ixtiro tibbiyot sohasiga tegishli bo'lib, yordamchi reproduktiv texnologiyalar usullarida sperma tanlashda qo'llanilishi mumkin. Usul bir tomchi sperma va bir tomchi madaniy muhitni Petri idishiga bir-biridan 5 sm dan oshmaydigan masofada joylashtirishni, tomchilarni yopishqoqlik parametrlari 1-4 Pa s bo'lgan yopishqoq muhit chizig'i bilan bog'lashni o'z ichiga oladi. keyin idishni tarkibi bilan 30-90 daqiqa davomida simulyatsiya qilish sharoitida inkubatsiya qiling tabiiy muhit bachadon bo'yni kanali ayol jinsiy tizimi.

Ixtiro tibbiyot, biotexnologiya va hujayra texnologiyasi sohasiga tegishli. Odam hujayra chizig'ini ifodalovchi pluripotent ildiz hujayralarini hosil bo'lgan endoderma nasl-nasabiga xos belgilarni ifodalovchi hujayralarga ajratish usuli pluripotent ildiz hujayralarini faolin A o'z ichiga olmaydi va ma'lum vaqt davomida GDF-8 ni o'z ichiga olgan muhit bilan davolashni o'z ichiga oladi. , pluripotent ildiz hujayralarining hosil bo'lgan endodermaning nasl-nasabiga xos belgilarni ifodalovchi hujayralarga differensiatsiyasi uchun etarli.

Ushbu ixtiro immunologiya sohasiga tegishli. RAB6KIFL oqsilidan (KIFL20A) ajratilgan oligopeptidning HLA-A*0201 molekulasi bilan kompleksning bir qismi sifatida sitotoksik T-limfotsitlarni (CTL) qo'zg'atishga qodir bo'lgan variantlari taklif qilingan.

Ixtiro oziq-ovqat sanoati sohasiga tegishli bo'lib, pivo tayyorlash usuli bo'lib, achchiqni filtrlashdan so'ng, lekin sutni qaynatishdan oldin termostabil proteaza qo'shishni o'z ichiga oladi, bunda proteazaning issiqlik barqarorligi bu proteazning faolligini bildiradi. bo'yicha o'lchanadigan faoliyatining kamida 70% keyingi usulga: proteaz 100 mmol süksin kislotasi, 100 mmol HEPES, 100 mmol CHES, 100 mmol CABS, 1 mmol CaCl2, 150 mmol KCl, 0,01% Triton, X- va 100 mmolni o'z ichiga olgan tahlil tamponida 1 mg / ml konsentratsiyaga suyultiriladi. c pH NaOH bilan 5,5 ga sozlangan; shundan so'ng proteaz i) muzda va ii) 70 ° C da 10 minut oldin inkubatsiya qilinadi; proteaza faol bo'lgan substrat 0,01% Triton X-100 da suspenziya qilinadi: reaksiyani boshlash uchun probirkaga 20 mkl proteaza qo'shiladi va Eppendorf termomikserida 70°C, 1400 aylanish tezligida 15 daqiqa davomida inkubatsiya qilinadi; naychalarni muzga qo'yish orqali reaktsiya to'xtatiladi; namunalar 14000 g haroratda 3 daqiqa davomida sovuq santrifüj qilinadi va supernatantning optik zichligi OD590 o'lchanadi; proteazsiz namunalarning olingan OD590 qiymati proteaz bilan ishlov berilgan namunalarning olingan OD590 qiymatidan ayiriladi; 100% faollik sifatida muz ustida inkubatsiya qilingan namunalardagi proteaza faolligiga nisbatan 70°C da oldindan inkubatsiya qilingan namunalardagi proteaza faolligi foizini hisoblab, proteazning termostabilligini aniqlang.

Ixtiro hujayra biologiyasi, hujayra transplantologiyasi va to‘qima muhandisligi sohalariga tegishli. To'qimalar va organlarda yog 'to'qimalarining stroma hujayralarining angiogen faolligini oshirish usuli yog' to'qimalarining stroma hujayralarini ajratib olish, izolyatsiya qilingan hujayralarni o'simta nekrozi omil-alfa ishtirokida 5 yoki 100 ng / ml miqdorida 24-72 soat davomida etishtirishni o'z ichiga oladi. , keyin to'qimalar yoki organlarga transplantatsiya.

Ixtiro biotexnologiya, hujayra texnologiyasi va to'qimalar jarrohligi sohalariga tegishli. Silliq mushak hujayralari kulturasini olish usuli qon tomirining bo'lagini kesib, uni istalgan o'lchamda 2 mm dan oshmaydigan o'lchamdagi bo'laklarga bo'lib maydalash va bo'laklarni ilgari surtilgan tirnalgan kultura kolbasida inkubatsiya qilishdan iborat. 10% embrion homila zardobini o'z ichiga olgan madaniy muhitni o'z ichiga olgan kolbaning pastki qismiga kamida 10 kun, lekin 24 kundan ortiq bo'lmagan, CO2 inkubatorida 37 ° C haroratda, ushbu bo'lakning ko'rsatilgan qismi bilan tavsiflanadi. qon tomir - ko'tarilgan oyoq-qo'lning bo'lagi torakal aorta, koronar arteriyani aylanib o'tish jarayonida kesiladi va ko'tarilgan ko'krak aortasining bo'laklari 0,1% kollagenazni o'z ichiga olgan madaniy muhitda kamida 30 daqiqa, lekin 60 daqiqadan ko'p bo'lmagan haroratda 37 ° C haroratda saqlanadi. Inkubatsiyadan oldin °C, so'ngra hujayra madaniyati muhiti bilan yuviladi.

Ushbu usul bilan olingan inson pluripotent ildiz hujayralari va mezenximal ildiz hujayralaridan mezenximal ildiz hujayralarini olish usuli // 2528250

Ixtiro genetik muhandislik, to'qimalar texnologiyasi va tibbiyot sohalariga tegishli. Odamning pluripotent ildiz hujayralaridan mezenxima hujayralarini olish usuli inson pluripotent ildiz hujayralaridan embrioid tanalarni olish, embrioid tanalarni mezenximal ildiz hujayralariga o'z-o'zidan farqlash uchun embrioid tanalarni biriktirish, mezenximal hujayralarni ko'paytirish bilan birga etishtirishni o'z ichiga oladi. mezenximal ildiz hujayralarining o'ziga xosligini saqlab qolish , va bu erda o'z-o'zidan bosqich differentsiatsiyasi induksiyasi tashqi sitokin qo'shmasdan otolog sitokin halqalarini shakllantirish orqali sodir bo'ladi, shuningdek, tegishli hujayralar, ulardan foydalanish, ishga olish va madaniyat usuli.

Ixtiro molekulyar biologiya, biokimyo va tibbiyot sohalariga tegishli. Katta yoshdagi yog 'to'qimalarining ildiz hujayralarining migratsiyasini rag'batlantirish uchun kompozitsiya taklif etiladi, u faol moddasi sifatida kattalar yog' to'qimalaridan 1x107 dan 1x1010 gacha bo'lgan miqdorda inson mezenximasining ildiz hujayralarini o'z ichiga oladi, hujayra yuzasida kimyokin yoki o'sish omili retseptorini ifodalaydi yoki bu ildiz hujayralaridan sekretsiya mahsuloti kemokin yoki o'sish omili retseptorlarini o'z ichiga oladi; bunda kattalardagi yog 'to'qimalarining ildiz hujayralarining ajralib chiqadigan mahsuloti adiponektindir; va insonning katta yoshli yog 'to'qimalarining ildiz hujayralari tarkibida kimyokin yoki o'sish omili bo'lgan aralashma bilan astarlangan.

Ixtiro biotexnologiya va tibbiyotga tegishli. Ko'p patentli mezenxima hujayralari (MMSC) ishtirokida kindik qoni mononuklear hujayralarini (pcBMC) ex vivo kengaytirish usuli taklif qilingan, bu yog 'to'qimalarining stromal-tomir fraktsiyasidan MMSC ni bir qatlamga erishilgunga qadar etishtirishni o'z ichiga oladi. 5% muhitda O2 kontsentratsiyasi, MMSC monoqatlamiga pcMNC suspenziyasini qo'shish, 5% muhitda O2 kontsentratsiyasida 72 soat davomida etishtirish, biriktirilmagan psMNClarni tanlash va muhitni almashtirish, biriktirilgan psMNCs bilan MMSClarni etishtirishni davom ettirish 5% muhitda O2 konsentratsiyasida 7 kun davomida.

Ixtiro biotexnologiya va tibbiyot sohasiga tegishli. Samarali miqdorda olingan CD73+/CD90+/CD105+/CK19+ fenotipi, ozuqaviy muhit, eritropoetin, epidermal o'sish omili va kollagenga ega bo'lgan inson amniotik suyuqlikdan ildiz hujayralarini o'z ichiga olgan kompozitsiya taklif etiladi.

Ixtiro tibbiyot va hujayra texnologiyasi sohasiga tegishli. Submandibulyar duktal ildiz hujayralari populyatsiyasini o'z ichiga olgan hujayra mahsuloti tuprik bezi, CD49f+/EpCAM+ fenotipi bilan tavsiflanadi va 0,1-40 mM konsentratsiyada valpik kislota bilan ishlov berish va kollagen gelida etishtirishdan so'ng, ifoda profilini 1AAT+/PEPCK+/G6P+/TDO+/CYP P4503A13+ ga o'zgartirish, shuningdek, acquiring karbamid va albuminni sintez qilish.

Ixtiro biotexnologiya, hujayra va to‘qima muhandisligi sohasiga tegishli. C-kit va/yoki sca-1 va/yoki MDR1 sirt belgilarini ifodalovchi sutemizuvchilar yuragi rezident ildiz hujayralarini olish usuli tasvirlangan, bunda miokard to'qimalarining namunalari ajratiladi, maydalanadi, kollagenaza va tripsin bilan ishlov beriladi va ezilgan namunalarning eksplant kulturasi orqali fibronektin bilan qoplangan kultura idishida o‘stiriladi, so‘ngra immunoseleksiya o‘tkaziladi.

Ixtiro biokimyo, biotexnologiya va tibbiyot sohalariga tegishli. 21 aminokislotadan iborat uzunlikdagi immunitet reaktsiyasining eruvchan supressorining N-terminal fragmenti taklif etiladi, bu regulyator T-limfotsitlarning shakllanishini rag'batlantirishga imkon beruvchi 1-sonli aminokislotalar ketma-ketligiga ega. 0,1-50 mkg/ml konsentratsiyada yuborilganda Seq ID NO: 1 bilan immun javobning eruvchan supressorining N-terminal qismi bilan tartibga soluvchi T-limfotsitlar hosil bo'lishini rag'batlantirish usuli.

Ixtiro farmatsevtika sanoatiga tegishli bo'lib, teri bakterial infektsiyalarini mahalliy davolash va ular bilan bog'liq yaralarni davolash uchun mo'ljallangan, tarkibida framitsetin sulfat va krem ​​asosiga kiritilgan biopolimer bo'lib, quyidagi guruhlarning har biridan kamida bitta moddani o'z ichiga olgan dermatologik kremdir. : konservant; ketostearil spirti, ketomakrogol 1000, polisorbat-80 va Span-80 dan tashkil topgan guruhdan tanlangan asosiy va ikkilamchi emulsifikator; mumsimon mahsulot sifatida kerosin; propilen glikol, heksilen glikol va polietilen glikol-400 dan tashkil topgan guruhdan tanlangan birgalikda erituvchi; nitrat kislota yoki sut kislotasi va suv va aytilgan biopolimer afzalroq xitozandir.

Ixtiro biotexnologiya sohasiga, xususan uyali texnologiyalarga taalluqlidir va tibbiyotda qo'llanilishi mumkin. Usul nomidagi IPVE kriyobankidan M-20 liniyasining diploid hujayralarini masshtablashni o'z ichiga oladi. M.P. Chumakov Rossiya Tibbiyot fanlari akademiyasi 16-o'tishning ishchi hujayralari bankini olish uchun 7-o'tishning urug'lik hujayralari bankining ampulasidan. Bunday holda, terapevtik va diagnostika maqsadlarida foydalanish uchun mos bo'lgan 20-33 o'tishli hujayralar 155 dan 342 pgml gacha bo'lgan konsentratsiyada trombotsitlar hosil bo'lgan o'sish omili PDGF ni o'z ichiga olgan 10 fibrinolitik faol odam plazmasini o'z ichiga olgan ozuqaviy muhitda etishtirish orqali olinadi. Ixtiro insonning diploid fibroblast hujayralarining proliferativ faolligini oshirish imkonini beradi. 1 ish haqi fayllar, 2 ta jadval.