Ժամանակակից հիմնական գործունեությունը էսթետիկ բժշկություն- բարձր տեխնոլոգիաների կիրառմամբ ծերացման կանխարգելում. Որպես արդյունք գիտական հետազոտությունՀայտնաբերվել է օրինաչափություն, ըստ որի բջիջներն ունեն վերածնվելու հատկություն: Այս հատկություններն ունեն նաեւ ֆիբրոբլաստները, որոնց վերականգնումը հանգեցնում է մաշկի երիտասարդացմանն ու դրանց վրա տեսանելի արատների վերացմանը։
Ֆիբրոբլաստների գործառույթներն ու բնույթը
«Ֆիբրոբլաստներ» տերմինը բաղկացած է երկու լատիներեն բառերից, որոնք թարգմանվում են բառացիորեն որպես «բողբոջ» և «մանրաթել»: Իրենց բնույթով դրանք բջիջներ են շարակցական հյուսվածքիսինթեզելով արտաբջջային մատրիցը (հյուսվածքային կառուցվածք, որն ապահովում է փոխանցումը քիմիական նյութերև մաշկի բջիջների մեխանիկական աջակցություն): Ֆիբրոբլաստները արտադրում են նյութեր, որոնք հանդիսանում են կոլագենի և էլաստինի մանրաթելերի, հիալուրոնաթթվի, ֆիբրինի պրեկուրսորները։
Նրանք գալիս են մեզենխիմից՝ բողբոջային հյուսվածքից, որը հայտնաբերված է մարդկանց և կենդանիների մարմնի բջիջներում: Ակտիվ վիճակում ֆիբրոպլաստների կառուցվածքը ենթադրում է միջուկի առկայություն և պրոցեսներ, որոնք ունեն մեծ քանակությամբ ռիբոսոմներ հանգստի վիճակում, դրանք նվազում են չափերով և ձեռք են բերում պտտվող ձև:
Մաշկի ֆիբրոբլաստներն ունեն լայն շրջանակգործառույթները։ Օրգանիզմում դրանց առկայության շնորհիվ տեղի են ունենում հետևյալ գործընթացները.
- Կոլագենի և էլաստինի սինթեզի գործընթացների ակտիվացում։
- Արյան անոթների ձևավորում.
- Իմունային համակարգի բջիջների ուղղում դեպի բակտերիաներ և օտար մասնիկներ:
- Հյուսվածքների աճի արագացում.
- Բջիջների աճի ավելացում:
- Վնասված մաշկի տարածքների բուժում:
- մի շարք սպիտակուցների (պրոտեոգլիկան, լամինին և այլն) արտադրություն։
Տարիքային փոփոխությունների պատճառները
Մաշկի երիտասարդությունը որոշվում է կոլագենի և էլաստինի արտադրության ցիկլային գործընթացով, որոնք հետագայում բաժանվում են իրենց բաղադրիչ մասերի, որոնք օգտագործվում են ֆիբրոբլաստների կողմից՝ դրանք վերարտադրելու համար: Վերջիններս ժամանակի ընթացքում նվազեցնում են իրենց ակտիվությունը՝ դադարեցնելով կոլագենի և էլաստին մանրաթելերի արտադրությունը, ինչը, ի վերջո, հրահրում է մաշկի ծերացումը։
Տարիքային փոփոխություններսկսում են ի հայտ գալ 28-ից 30 տարեկանում: Դրանք արտահայտվում են առաձգականության կորստով և պտոզի զարգացմամբ, մաշկի գույնի փոփոխությամբ, չորության ավելացմամբ և կնճիռների ձևավորմամբ։ Եվ այս ամենը պայմանավորված է նրանով, որ յուրաքանչյուր տասնամյակ ֆիբրոբլաստները նվազում են 10%-ով բնօրինակ համարը.
Ֆիբրոբլաստների համալրում
Այսպիսով, ծերացումը դանդաղեցնելու և երիտասարդությունը վերականգնելու համար անհրաժեշտ է վերականգնել ֆիբրոբլաստները. Ժամանակակից կոսմետիկ տեխնիկայի մեծ մասը հանգեցնում է միայն կոլագենի մանրաթելերի սինթեզի ժամանակավոր արագացմանը, բայց չեն մեծացնում բջիջները: Երկար ժամանակ ընդունված էր, որ դա ուղղակի անհնար է։
Մեր օրերում գիտությունը մեծ առաջընթաց է գրանցել, և ֆիբրոբլաստների վերականգնումն այլևս ֆանտազիա չէ։ Այս ընթացակարգըկոչվում է SPRS թերապիա և լայնորեն կիրառվում է նահանգներում, եվրոպական երկրներում և, վերջերս, Ռուսաստանում:
SPRS թերապիա. իրականացման առանձնահատկությունները և սկզբունքը
Ֆիբրոբլաստների վերականգնումը հեշտ չէ, այն պահանջում է ներարկման բարդ ընթացակարգ: Դրա իրականացման արդյունքներն են մաշկի խտացումն ու առաձգականության բարձրացումը, պտոզի կանխարգելումն ու նվազեցումը։ Նվազում են նաև կնճիռները, անհետանում են պիգմենտացիան, և սպիները հարթվում են։
Թերապիան սկսվում է ականջի ետևում գտնվող մաշկից հիվանդի բջիջների հավաքմամբ: Ստացված նմուշն օգտագործվում է ախտորոշման և ուսումնասիրության համար, որը կոչվում է կենսանյութ: Այն օգտագործվում է բուժման ռեժիմ մշակելու և ֆիբրոբլաստների արհեստական վերստեղծման համար, որոնք հետագայում ներարկումների միջոցով նորից ներարկվելու են մաշկի մեջ:
Հիվանդի կենսանյութերից աճեցված բջիջները մարմնի կողմից չեն մերժվում: Փոխպատվաստումից հետո նրանք ակտիվ են մնում մեկուկես տարի, որի ընթացքում մաշկի վիճակը բարելավվում է։
Ֆիբրոբլաստները խորհուրդ չի տրվում ներարկվել քրոնիկ հիվանդությունների, մրսածության, վիրուսային վարակների սրման ժամանակ, որոնք ուղեկցվում են բարձր ջերմաստիճանմարմիններ. Հակացուցումները ներառում են իմունային անբավարարություն, չարորակ գոյացություններ, վարակների և քրոնիկ հիվանդություններՎ սուր փուլ. Նախքան ընթացակարգը կատարելը, անհրաժեշտ է նախնական խորհրդատվություն մասնագետի հետ՝ անհատական հակացուցումները բացահայտելու համար։
Պրոցեդուրան տևում է ոչ ավելի, քան մեկ ժամ և իրականացվում է 2 դասընթացի ընթացքում՝ 5-ից 7 շաբաթ ընդմիջումով։ Ներարկումներից առաջ անհրաժեշտ է տեղային անզգայացում:
Ֆիբրոբլաստների ներմուծումը թանկ հաճույք է։ Ամբողջ տեսականինծառայությունները, ներառյալ կենսանյութերի հավաքագրումը, պահեստավորումը, հետազոտությունը և կառավարումը, գնահատվում է մոտավորապես 400,000 ռուբլի:
Տեսանյութ՝ SPRS թերապիայի անցկացում
Ֆիբրոբլաստները շարակցական հյուսվածքի բջիջներ են, որոնք ապահովում են կոլագենի և էլաստինի արտադրությունը՝ հետևաբար պահպանելով մեր մաշկի երիտասարդությունը։ Ժամանակի ընթացքում նրանց թիվն օրգանիզմում անշեղորեն նվազում է, ինչի պատճառով ի հայտ են գալիս տարիքային փոփոխությունների արտաքին նշաններ։ Ֆիբրոբլաստների քանակի վերականգնումն իրականացվում է արհեստականորեն աճեցված բջիջների վրա հիմնված ներարկման տեխնիկայի միջոցով։
Ֆիբրոբլաստներ- չամրացված շարակցական հյուսվածքի առաջատար բջիջներ, որոնք արտադրում են միջբջջային նյութի բաղադրիչներ: Սրանք ճյուղավորված, պտտաձև կամ փռված բջիջներ են՝ մոտ 20 մկմ: Դրանցում լավ զարգացած են ներքին նյութափոխանակության միջավայրի օրգանելները։ Ֆիբրոբլաստային միջուկը օվալաձեւ է, պարունակում է հավասարապես ցրված քրոմատին և 2-3 միջուկ։ Ցիտոպլազմը հստակորեն բաժանված է ինտենսիվ ներկված էնդոպլազմայի և թույլ ներկված էկտոպլազմայի: Ֆիբրոբլաստների (հատկապես երիտասարդների) ցիտոպլազմը բազոֆիլ է։ Այն բացահայտում է լավ զարգացած էնդոպլազմիկ ցանց՝ 10-30 հատիկանոց շղթաների տեսքով թաղանթներին կցված մեծ քանակությամբ ռիբոսոմներով։ Հատիկավոր էնդոպլազմիկ ցանցի այս ուլտրակառույցը բնորոշ է բջիջներին, որոնք ակտիվորեն սինթեզում են սպիտակուցը «արտահանման համար»: Կան նաև բազմաթիվ ազատ ռիբոսոմներ և լավ զարգացած Գոլջիի համալիր: Միտոքոնդրիաները մեծ են, նրանց թիվը՝ փոքր։ Ցիտոքիմիական մեթոդները ցույց են տվել ֆիբրոբլաստների ցիտոպլազմում գլիկոլիտիկ ֆերմենտների և լիզոսոմների (հատկապես կոլագենազի) հիդրոլիտիկ ֆերմենտների առկայությունը։ Միտոքոնդրիայի օքսիդատիվ ֆերմենտները պակաս ակտիվ են:
Բջջի մկանային-կմախքային համակարգապահովում է դրանց շարժունակությունը, ձևի փոփոխությունը, կցումը ենթաշերտին, թաղանթի մեխանիկական լարվածությունը, որին բջիջը կցված է կուլտուրայում։ Բջջի մակերեսին կան բազմաթիվ միկրովիլիներ և վեզիկուլյար ելուստներ: Հեղուկ միջավայրում կասեցված ֆիբրոբլաստները ունեն գնդաձև ձև: Ֆիբրոբլաստը տարածվում է պինդ մակերեսին կպչելուց հետո, որի երկայնքով շարժվում է պսևդոպոդիայի պատճառով։
Ֆիբրոբլաստների հիմնական գործառույթը- սպիտակուցների և գլիկոզամինոգլիկանների սինթեզ և սեկրեցիա, որոնք օգտագործվում են շարակցական հյուսվածքի միջբջջային նյութի բաղադրիչները ձևավորելու համար, ինչպես նաև գաղութ խթանող գործոնների (գրանուլոցիտներ, մակրոֆագեր) արտադրություն և սեկրեցիա: Ֆիբրոբլաստներ երկար ժամանակովպահպանել բազմանալու ունակությունը. Ֆիբրոբլաստները, որոնք ավարտել են իրենց զարգացման ցիկլը, կոչվում են ֆիբրոցիտներ: Սրանք երկարակյաց բջիջներ են: Բջջի ցիտոպլազմը սպառվում է օրգանելներից, բջիջը դառնում է տափակ, և պրոլիֆերատիվ պոտենցիալը նվազում է։ Այնուամենայնիվ, բջիջը չի կորցնում կարգավորմանը մասնակցելու ունակությունը նյութափոխանակության գործընթացներըգործվածքի մեջ։
Միջբջջային նյութ. Բաղկացած է ֆիբրիլային և հիմնական (ամորֆ) բաղադրիչներից։ Օգտագործելով հիստոավտորադիոգրաֆիայի մեթոդները՝ պիտակավորված ամինաթթուների (3H-պրոլին, 3H-գլիցին և այլն) ներդրմամբ, պարզվեց, որ սպիտակուցի մոլեկուլները սինթեզվում են ֆիբրոբլաստային պոլիսոմներում։ Ֆիբրոբլաստները կարող են միաժամանակ սինթեզել մի քանի տեսակի հատուկ սպիտակուցներ և գլիկոզամինոգլիկաններ: Կոլագենի սպիտակուցի սինթեզի համար անհրաժեշտ է վիտամին C-ի առկայությունը, որի դեֆիցիտի դեպքում կոլագենոգենեզը կտրուկ արգելակվում է։ Միջբջջային նյութերի սինթեզն ավելի ինտենսիվ է տեղի ունենում թթվածնի նվազած կոնցենտրացիայի պայմաններում։ Կոլագենի սինթեզի հետ միաժամանակ ֆիբրոբլաստը ոչնչացնում է այս սպիտակուցի մոտավորապես 2/3-ը՝ օգտագործելով կոլագենազ ֆերմենտը, որը կանխում է հյուսվածքների վաղաժամ սկլերոզը։
Սինթեզված պրոկոլագենի մոլեկուլներէկզոցիտոզով բերվում են ֆիբրոբլաստների մակերես։ Այս դեպքում սպիտակուցը լուծվող ձևից անցնում է չլուծվողի` տրոպոկոլագենի: Տրոպոկոլագենի մոլեկուլների համակցումը վերմոլեկուլային կառուցվածքների՝ կոլագենի մանրաթելերի մեջ, առաջանում է բջջի մակերեսի անմիջական հարևանությամբ՝ բջջի կողմից արտազատվող հատուկ նյութերի ազդեցությամբ: Մասնավորապես, ֆիբրոբլաստների մակերեսին հայտնաբերվել է սպիտակուց՝ ֆիբրոնեկտին, որը կատարում է կպչուն և այլ գործառույթներ։ Ֆիբրիլոգենեզի հետագա փուլերը տեղի են ունենում նախկինում ձևավորված մանրաթելերի վրա տրոպոկոլագենի պոլիմերացման և ագրեգացման միջոցով: Այս դեպքում կոլագենի մանրաթելերի հասունացումը կարող է տեղի ունենալ առանց ֆիբրոբլաստների հետ անմիջական կապի։
Գլիկոզամինոգլիկաններկոլագենի ձևավորման կարգավորիչներ են և միջբջջային նյութի հիմնական (ամորֆ) բաղադրիչի մի մասն են։
Fibrillar բաղադրիչՉամրացված շարակցական հյուսվածքի միջբջջային նյութը ներառում է երեք տեսակի մանրաթելեր՝ կոլագեն, առաձգական և ռետիկուլյար: Նրանք ունեն ձևավորման նմանատիպ մեխանիզմ, բայց տարբերվում են միմյանցից քիմիական բաղադրությունը, ուլտրակառույց և ֆիզիկական հատկություններ: Կոլագենի սպիտակուցը ճանաչվում է իր ամինաթթուների կազմով և կոլագենի մոլեկուլում ամինաթթուների հաջորդականությամբ: Կախված պոլիպեպտիդային շղթայում ամինաթթուների տատանումներից, իմունային հատկություններից, մոլեկուլային քաշից և այլն, առանձնանում են կոլագենի սպիտակուցների 14 կամ ավելի տեսակներ, որոնք օրգանների շարակցական հյուսվածքի մաս են կազմում։ Նրանք բոլորը կազմում են կոլագենի 4 հիմնական տեսակ կամ դասեր։
1-ին տիպի կոլագենհայտնաբերվել է կապակցական և ոսկրային հյուսվածքինչպես նաև աչքի սկլերայում և եղջերաթաղանթում; II տիպ - աճառային հյուսվածքներում; III տիպ - արյան անոթների պատի մեջ, պտղի մաշկի միացնող հյուսվածքում; IV-ro տիպ - նկուղային թաղանթներում:
Ֆիբրոբլաստներ(ֆիբրոբլաստոցիտներ) (լատիներեն fibra - մանրաթել, հունարեն blastos - ծիլ, սաղմ) - բջիջներ, որոնք սինթեզում են միջբջջային նյութի բաղադրիչները `սպիտակուցներ (օրինակ, կոլագեն, էլաստին), պրոտեոգլիկաններ, գլիկոպրոտեիններ:
Սաղմնային շրջանում սաղմի մի շարք մեզենխիմային բջիջներ են առաջանում ֆիբրոբլաստների տարբերակում, որը ներառում է.
· Ցողունային բջիջները,
կիսա-ցողունային նախաբջիջներ,
· ոչ մասնագիտացված ֆիբրոբլաստներ,
տարբերակված ֆիբրոբլաստներ (հասուն, ակտիվ գործող),
ֆիբրոցիտներ (վերջնական բջիջների ձևերը),
միոֆիբրոբլաստներ և ֆիբրոկլաստներ:
ՀԵՏ հիմնական գործառույթըֆիբրոբլաստները կապված են հիմնական նյութի և մանրաթելերի ձևավորման հետ (ինչը հստակ դրսևորվում է, օրինակ, վերքերի բուժման ժամանակ, սպի հյուսվածքի զարգացում, օտար մարմնի շուրջ շարակցական հյուսվածքի պարկուճի ձևավորում):
Ցածր մասնագիտացված ֆիբրոբլաստները քիչ մշակված բջիջներ են՝ կլոր կամ օվալաձև միջուկով և փոքր միջուկով՝ բազոֆիլ ցիտոպլազմով, հարուստ ՌՆԹ-ով։ Բջջի չափը չի գերազանցում 20-25 միկրոնը։ Այս բջիջների ցիտոպլազմայում հայտնաբերվում են մեծ քանակությամբ ազատ ռիբոսոմներ։ Էնդոպլազմիկ ցանցը և միտոքոնդրիումները թույլ են զարգացած։ Գոլջիի ապարատը ներկայացված է կարճ խողովակների և վեզիկուլների կլաստերներով:
Ցիտոգենեզի այս փուլում ֆիբրոբլաստներն ունեն սպիտակուցի սինթեզի և սեկրեցիայի շատ ցածր մակարդակ: Այս ֆիբրոբլաստները ունակ են միտոտիկ վերարտադրության:
Տարբերակված հասուն ֆիբրոբլաստները չափերով ավելի մեծ են։ Սրանք ակտիվ գործող բջիջներ են:
Հասուն ֆիբրոբլաստներում իրականացվում է կոլագենի, էլաստինի սպիտակուցների, պրոտեոգլիկանների ինտենսիվ կենսասինթեզ, որոնք անհրաժեշտ են հիմնական նյութի և մանրաթելերի ձևավորման համար։ Այս գործընթացները ուժեղացվում են թթվածնի ցածր կոնցենտրացիայի պայմաններում: Կոլագենի կենսասինթեզի խթանող գործոններն են նաև երկաթի, պղնձի, քրոմի իոնները, ասկորբինաթթու. Հիդրոլիտիկ ֆերմենտներից մեկն է կոլագենազ- քայքայում է բջիջների ներսում չհասունացած կոլագենը, որը կարգավորում է կոլագենի սեկրեցիայի ինտենսիվությունը բջջային մակարդակում:
Ֆիբրոբլաստները շարժուն բջիջներ են: Նրանց ցիտոպլազմայում, հատկապես ծայրամասային շերտում, կան միկրոթելեր, որոնք պարունակում են այնպիսի սպիտակուցներ, ինչպիսիք են ակտինը և միոզինը։ Ֆիբրոբլաստների շարժումը հնարավոր է դառնում միայն այն բանից հետո, երբ նրանք կապվում են օժանդակ ֆիբրիլային կառույցներին, օգտագործելով ֆիբրոնեկտին- ֆիբրոբլաստների և այլ բջիջների կողմից սինթեզված գլիկոպրոտեին, որն ապահովում է բջիջների և ոչ բջջային կառուցվածքների կպչունությունը: Շարժման ընթացքում ֆիբրոբլաստը դառնում է հարթ, և դրա մակերեսը կարող է աճել 10 անգամ:
Ֆիբրոբլաստների պլազմալեման կարևոր ընկալիչ գոտի է, որը միջնորդում է տարբեր կարգավորիչ գործոնների ազդեցությունը: Ֆիբրոբլաստների ակտիվացումը սովորաբար ուղեկցվում է գլիկոգենի կուտակումով և հիդրոլիտիկ ֆերմենտների ակտիվության բարձրացմամբ։ Գլիկոգենի նյութափոխանակության արդյունքում առաջացած էներգիան օգտագործվում է պոլիպեպտիդների և բջջի կողմից արտազատվող այլ բաղադրիչների սինթեզման համար:
Ֆիբրիլյար սպիտակուցներ սինթեզելու ունակության հիման վրա ֆիբրոբլաստների ընտանիքը ներառում է արյունաստեղծ օրգանների ցանցային կապ հյուսվածքի ցանցային բջիջները, ինչպես նաև շարակցական հյուսվածքի կմախքի բազմազանության խոնդրոբլաստները և օստեոբլաստները:
Ֆիբրոցիտներ- ֆիբրոբլաստների զարգացման վերջնական (վերջնական) ձևերը. Այս բջիջները ունեն spindle ձեւավորված հետ pterygoid գործընթացները. [Դրանք պարունակում են փոքր քանակությամբ օրգանելներ, վակուոլներ, լիպիդներ և գլիկոգեն։] Ֆիբրոցիտներում կոլագենի և այլ նյութերի սինթեզը կտրուկ նվազում է։
Միոֆիբրոբլաստներ- ֆիբրոբլաստներին նման բջիջներ, որոնք համատեղում են ոչ միայն կոլագենը, այլև կծկվող սպիտակուցները զգալի քանակությամբ սինթեզելու ունակությունը: Ֆիբրոբլաստները կարող են վերածվել միոֆիբրոբլաստների, որոնք ֆունկցիոնալ առումով նման են հարթին մկանային բջիջներ, բայց ի տարբերություն վերջիններիս ունեն լավ զարգացած էնդոպլազմիկ ցանց։ Նման բջիջները նկատվում են բուժիչ վերքերի հատիկավոր հյուսվածքում և հղիության ընթացքում արգանդում։
Ֆիբրոկլաստներ- բարձր ֆագոցիտային և հիդրոլիտիկ ակտիվություն ունեցող բջիջները, օրգանների ինվոլյուցիայի ընթացքում (օրինակ, հղիությունից հետո արգանդում) մասնակցում են միջբջջային նյութի «ռեզորբցիային»: Նրանք համատեղում են ֆիբրիլ առաջացնող բջիջների կառուցվածքային առանձնահատկությունները (զարգացած հատիկավոր էնդոպլազմիկ ցանց, Գոլջիի ապարատ, համեմատաբար մեծ, բայց քիչ միտոքոնդրիաներ), ինչպես նաև լիզոսոմներն իրենց բնորոշ հիդրոլիտիկ ֆերմենտներով։ Բջջից դուրս նրանց արտազատվող ֆերմենտների համալիրը քայքայում է կոլագենի մանրաթելերի ցեմենտացնող նյութը, որից հետո տեղի է ունենում ֆագոցիտոզ և կոլագենի ներբջջային մարսում։
Թելքավոր շարակցական հյուսվածքի հետևյալ բջիջներն այլևս չեն պատկանում ֆիբրոբլաստների տարբերակմանը.
Մաշկի ֆիբրոբլաստները կազմում են շարակցական հյուսվածքի հիմքը: Նրանք հիալուրոնաթթվի, կոլագենի մանրաթելերի և էլաստինի արտադրողներ են։ Տարիքային փոփոխությունները դանդաղեցնում են ֆիբրոբլաստների գործունեությունը, ինչի հետևանքով մաշկը դառնում է բարակ և թուլացած: Բջջայինի շնորհիվ ներարկման տեխնոլոգիամարմինը ինքնուրույն սկսում է դերմիսի կառուցվածքը երիտասարդացնելու գործառույթը:
Ֆիբրոբլաստների էությունը
Մաշկի ֆիբրոբլաստներ- սրանք դերմիսի շարակցական հյուսվածքի շերտի բջիջներ են, որոնց նախորդները ցողունային բջիջներն էին: Նրանք գալիս են երկու ձևով.
- Ակտիվ - խոշոր բջիջներ, որոնք հագեցած են հարթ օվալաձև միջուկով, մեծ քանակությամբ ռիբոսոմներով և պրոցեսներով: Դրանք բնութագրվում են ինտենսիվ բաժանմամբ, կոլագենի և մատրիցային այլ բաղադրիչների արտադրությամբ։
- Ոչ ակտիվ (ֆիբրոցիտներ) - բջիջները մի փոքր ավելի փոքր են և ունեն spindle- ի ձև: Դրանք ձևավորվում են ֆիբրոբլաստներից և չեն կարող բաժանվել։ Մասնակցեք մանրաթելերի սինթեզին և վերքերի վերականգնմանը:
Մարմնի ծերացման հետ ֆիբրոբլաստների թիվը նվազում է, իսկ ակտիվությունը՝ նվազում։ Սա հանգեցնում է միջբջջային նյութերի սինթեզի վատթարացման: Այս պրոցեսն արտացոլվում է մաշկի վրա նոսրացման, չորության և թուլացման տեսքով։ Այն ձգվում է և առաջանում են կնճիռներ։
Գործառույթներ
Ֆիբրոբլաստների հիմնական գործառույթներից մեկը միջբջջային նյութի արտադրությունն ու վերականգնումն է։ Ձևավորելով աճի գործոններ, արտաբջջային մատրիցայի բաղադրիչներ, ֆերմենտներ, նրանք նպաստում են կոլագենի և հիալուրոնաթթվի ոչնչացմանը և նոր սինթեզին: Անդադար գործընթացի շնորհիվ միջբջջային նյութը թարմացվում է։ Բացի այդ, նրանք արտադրում են բջիջների աճի գործոններ.
- Հիմնականն այն է, որ բոլոր մաշկային բջիջների աճը խթանվում է, ֆիբրոնեկտին արտադրվում է պաշտպանիչ ռեակցիաների համար.
- Փոխակերպում - սինթեզվում են կոլագենի և էլաստինի մանրաթելերը, ձևավորվում են արյան անոթներ, իմունային համակարգի բջիջներն ուղղվում են օտար գործակալներին, բակտերիաներին.
- Էպիդերմալ - ակտիվանում են հյուսվածքների բազմացումը, բջիջների աճը և կերատինոցիտների տեղափոխումը.
- Կերատինոցիտների աճը էպիթելացում է, վնասը վերականգնվում է։
Ֆիբրոբլաստների աճի գործոնները ներկայացված են բազմաֆունկցիոնալ սպիտակուցներով, որոնք միտոգեններ են և նաև կատարում են էնդոկրին, կարգավորող, կառուցվածքային գործառույթ. Ֆիբրոբլաստների շնորհիվ արտադրվում են մաշկի համար կարևոր սպիտակուցներ՝ պրոտեոգլիկաններ, տինասցին, նիդոգեն և լամինին։
Տեխնիկայի էությունը
SPRS թերապիաֆիբրոբլաստների միջոցով մաշկի երիտասարդացման ներարկման տեխնիկա է՝ վերացնելով մաշկի ծերացման բուն պատճառը: Ավտոֆիբրոբլաստների ներմաշկային փոխպատվաստման տեխնոլոգիայի արտոնագիրը պատկանում է FibrocellScience ամերիկյան ընկերությանը։ Բջջային տեխնոլոգիայի միջոցով հնարավոր է դարձել մարդու մաշկի մասնիկից ֆիբրոբլաստներ աճեցնել (բիոպսիա): Սեփական կենսանյութը վերացնում է հյուսվածքների համատեղելիության խնդիրը և վարակվելու վտանգը։ Ավտոլոգային բջիջները դրական են ընկալվում իմմունային համակարգև կարողանում են լիարժեք գործել:
Նմուշը կարելի է վերցնել ցանկացած տարիքում, սակայն նախընտրելի է դա անել երիտասարդ ժամանակ։ Առաջարկվող տարիքը 20-ից 30 տարեկան է: Դուք կարող եք պահպանել մաշկի մի կտոր ցանկացած վիրահատության ժամանակ և երկար տարիներ տեղադրել դրանից մեկուսացված բջիջները կրիոգեն պահեստում։ -196 աստիճան ջերմաստիճանը թույլ է տալիս դրանք պահել ողջ կյանքի ընթացքում՝ անհրաժեշտության դեպքում օգտագործելով: Դա թույլ կտա ցանկացած պահի արդյունավետ կոսմետիկ պրոցեդուրաներ իրականացնել։
Սեփական ֆիբրոբլաստները ցողունային բջիջների հետ միասին ունեն ծերացման ընթացքում ներուժը պահպանելու հատկություն։ Տակ տեղային անզգայացումՄաշկի փոքր նմուշը վերցվում է հիվանդից ականջի, անոթի կամ նախաբազկի հատվածի հետևում: Այս տարածքները ամենաքիչն են ենթարկվում ուլտրամանուշակագույն ճառագայթման: Դրա չափը մոտ 4 մմ է: Դրանից մեկուսացված ֆիբրոբլաստները տեղադրվում են հատուկ սրվակների մեջ։
Երբ դրանք մշակվում են պտղի շիճուկով միջավայրում, երիտասարդ բջիջներում խթանվում է բազմանալու ունակությունը, իսկ հին բջիջները լվանում են: Տեղի է ունենում մշակույթի «երիտասարդացում». Մեկ ամիս անց բջիջների թիվը մի քանի հազար անգամ ավելանում է։ Վերաակտիվացումից հետո բջջային մշակույթը փոխպատվաստվում է հիվանդի մեջ և ակտիվորեն լցնում դերմիսը: Մեկուկես ամիս հետո բազմապատկված ֆիբրոբլաստները ներարկվում են հիվանդի դեմքի մաշկին, ներառյալ աչքերի շուրջը, ինչպես նաև պարանոցի, դեկոլտեի և ձեռքերի մեջ:
Ընթացակարգը
Դասընթացը բաղկացած է 3-5 սեանսից, որոնց միջև ընդմիջումները տատանվում են 3-ից 6 շաբաթ: Ընթացակարգի փուլերը.
- հիվանդի հետազոտություն՝ առկա հակացուցումները հայտնաբերելու համար.
- նյութի ընդունում;
- ֆիբրոբլաստների մշակում;
- բջջային նյութի ներարկում մաշկի մեջ՝ օգտագործելով երկու եղանակ՝ թունել՝ մաշկի խոր ծալքեր, պապուլյար մեզոթերապիա;
- պաշտպանելով մաշկը ուլտրամանուշակագույն ճառագայթումից՝ կրեմ քսելով։
Հիվանդները նշում են, որ պրոցեդուրան ցավոտ է, ուստի օգտագործվում է Emla անզգայացնող քսուք։ Օգտագործված դեղամիջոցի քանակը կազմում է մինչև 3 մլ մեկ նստաշրջանի համար: Վերականգնման շրջանը տեւում է 2-3 օր։ Գործընթացից հետո արգելվում է կիրառել կոսմետիկա։ Երկու շաբաթվա ընթացքում դուք պետք է ձեռնպահ մնաք սաունա կամ լոգարան այցելելուց: Մաշկը պետք է պաշտպանել արևից՝ այն քսելով պաշտպանվածության բարձր աստիճանով կրեմով։ Խորհուրդ է տրվում կրկնել ընթացակարգը տարին մեկ անգամ։ Արդյունքը մի քանի ամսվա ընթացքում դեմքի մաշկի վիճակի բարելավումն է։
Մեթոդի արդյունավետությունն ու առավելությունները
Ֆիբրոբլաստներով երիտասարդացումը տալիս է առաջին արդյունքները 1,5 կամ 2 ամիս հետո։ Ամբողջական էֆեկտՊրոցեդուրայի ազդեցությունն ի հայտ է գալիս վեց ամիս հետո և տևում է 2-3 տարի։ Սկսվում է աճի գործոնների և արտաբջջային մատրիցայի ուժեղացված արտադրությունը: Ֆիբրոբլաստներն անցնում են ցիկլի բնական փուլերը՝ ակտիվանում են, սինթեզում են էլաստին, կոլագեն և այլ նյութեր, ապա սկսվում է քայքայման փուլը՝ դրանք փոխարինելով նոր ֆիբրոբլաստներով։
Դրանց օգտագործումը լայն տարածում ունի բժշկության մեջ՝ այրվածքների դեմ, ընթացքում հյուսվածքների վերականգնման համար տրոֆիկ խոցեր, վերքեր Նրանց նշանակությունը կոսմետոլոգիայում մեծ է։ Մաշկի երիտասարդությունը ձևավորվում է ֆիբրոբլաստների քանակով։ Տեղադրված դերմիսում՝ աճեցված ֆիբրոբլաստները ինտեգրվում են հյուսվածքի մեջ՝ սկսելով կոլագենի և էլաստինի արտադրությունը: Արդյունքում մաշկը դառնում է առաձգական, ձեռք է բերում հարթ գույն, իսկ նուրբ կնճիռները անհետանում են։
Բայց դուք չպետք է ակնկալեք խստացնող ազդեցություն ընթացակարգից: Այս տեխնիկան ուղղված է մաշկի որակական բնութագրերի բարելավմանը։ SPRS թերապիայի հիմնական առավելությունները.
- դեղը աշխատում է գեների հետ, ինչը վերացնում է մաշկի առաջնային կառուցվածքի խախտումը.
- ակտիվանում են բնական երիտասարդացման գործընթացները.
- անվտանգություն, մերժման վտանգ չկա, ալերգիկ ռեակցիա;
- արդյունքի երկարաժամկետ պահպանում.
6 ամսվա ընթացքում աչքերի շուրջ կնճիռները հարթվում են 90%-ով։ Դեկոլտեն ու պարանոցն ավելի երիտասարդ տեսք ունեն 95%-ով, այտերը՝ 87%-ով։ Բերանի շուրջ ծալքերը կրճատվում են 55%-ով:
Հակացուցումներ
Չնայած ամբողջական անվտանգությանը, ընթացակարգը ունի որոշ հակացուցումներ.
- հղիություն, լակտացիա;
- արյան մակարդման խանգարում;
- չարորակ նորագոյացություններ;
- աուտոիմուն հիվանդություններ;
- սպիների առաջացման նախատրամադրվածություն;
- ARVI;
- բորբոքում մաշկի վրա.
Նիստից հետո օրվա ընթացքում կարող են նկատվել մաշկի կարմրություն և միկրոհեմատոմաներ։ Հաջորդ օրը ախտանշանները անհետանում են։
Autofibroblast փոխպատվաստման տեխնոլոգիան ունի պաշտոնական թույլտվություն Roszdravnadzor-ից: Դրա անվտանգությունը հաստատվում է բջիջների կենսունակության լաբորատոր մոնիտորինգով:
RU 2536992 արտոնագրի սեփականատերերը.
Գյուտը վերաբերում է կենսատեխնոլոգիայի, մասնավորապես բջջային տեխնոլոգիաների ոլորտին և կարող է օգտագործվել բժշկության մեջ։ Մեթոդը ներառում է M-20 գծի դիպլոիդ բջիջների մասշտաբավորում IPVE-ի անվան կրիոբանկից: Մ.Պ. Չումակովի անվան Ռուսաստանի բժշկական գիտությունների ակադեմիան 7-րդ անցուղու սերմերի բջիջների բանկի ամպուլից՝ 16-րդ հատվածի աշխատանքային բջիջների բանկ ստանալու համար: Այս դեպքում 20-33 անցուղիների բջիջները, որոնք հարմար են թերապևտիկ և/կամ ախտորոշիչ նպատակներով օգտագործելու համար, ձեռք են բերվում սնուցող միջավայրում 10% ֆիբրինոլիտիկ ակտիվ պլազմա (FAP) պարունակող սննդային միջավայրում մշակելով, որը պարունակում է թրոմբոցիտներից ստացված աճի գործոն PDGF: կոնցենտրացիան 155-ից 342 pg/ml: Գյուտը թույլ է տալիս բարձրացնել մարդու դիպլոիդ ֆիբրոբլաստային բջիջների պրոլիֆերատիվ ակտիվությունը։ 1 աշխատավարձ ֆայլեր, 2 աղյուսակ.
Գյուտը վերաբերում է կենսատեխնոլոգիային, իմունաբանությանը, բժշկությանը, մասնավորապես՝ մարդու դիպլոիդ ֆիբրոբլաստային բջիջների բազմացման հատկությունների բարձրացման մեթոդին՝ թերապևտիկ և ախտորոշիչ նպատակներով, այդ թվում՝ մարդու ինտերֆերոնների հակավիրուսային ակտիվությունը որոշելու, բջիջների փոխարինման համար օգտագործելու համար։ թերապիա.
Մարդու դիպլոիդ բջջային գծերը (HDCL) անհերքելի առավելություններ ունեն բոլոր հայտնի տեսակի բջջային կուլտուրաների նկատմամբ՝ անցումների ընթացքում կայուն կենսաբանական և գենետիկական բնութագրերը պահպանելու ունակությամբ: Պատվաստանյութերի արտադրության համար նախատեսված LDCC-ի հավաստագրումն իրականացվում է Առողջապահության համաշխարհային կազմակերպության կողմից մշակված միասնական պահանջներին համապատասխան: Այս առաջարկությունները հիմք են ընդունվել LDKCH պատվաստանյութի հավաստագրման ազգային չափանիշների համար, որոնք մշակվել են Կլինիկական վարակիչ հիվանդությունների պետական գիտահետազոտական ինստիտուտի կողմից: Լ.Ա. Տարասևիչը և ԽՍՀՄ առողջապահության նախարարությունը [ Ուղեցույցներ«Շարունակական բջջային գծերի սերտիֆիկացում` սուբստրատներ բժշկական արտադրության և հսկողության համար իմունոկենսաբանական պատրաստուկներ» RD-42-28-10-89. ԽՍՀՄ առողջապահության նախարարություն. Մ., 1989. - P. 16]: Մարդու դիպլոիդ բջիջների սերտիֆիկացված գիծն ունի սահմանափակ կյանքի տևողությունը և ունի կայուն կենսաբանական, մշակութային և գենետիկական բնութագրեր, այն զերծ է աղտոտիչներից (բակտերիաներ, սնկեր, միկոպլազմաներ, վիրուսներ) և չի առաջացնում իմունային ճնշված կենդանիների ուռուցքի ձևավորում: Դիպլոիդ բջջային գիծը պետք է ունենա սերմերի սերմերի բջիջների սերտիֆիկացված բանկ վաղ անցման մակարդակներում (մինչև անցում 10), որը բաղկացած է առնվազն 200 կրիովիալներից: Մեկ կամ մի քանի կրիովիալներից սերմերի բջիջները փոխանցելով 16-րդ անցման մակարդակ՝ ստացվում է բջիջների աշխատանքային բանկ, որտեղից կարելի է ձեռք բերել անհրաժեշտ արտադրող մշակույթներ արտադրության համար կամ հետազոտական աշխատանք. Ռուսաստանում և արտերկրում կան միայն մի քանի տող մարդկային դիպլոիդ բջիջներ (Wi-38, MRC-5, M-22 և այլն), որոնք հավաստագրված են թվարկված պահանջներին համապատասխան: Հավաստագրված LDCV-ներն օգտագործվում են պոլիոմիելիտի, կարմրուկի, կարմրախտի, կատաղության, շնչառական համակարգի և դեմ պատվաստանյութերի արտադրության մեջ: ցիտոմեգալովիրուսային վարակներ, ինչպես նաև ինտերֆերոն [T.K. Բորիսովա, Լ.Լ. Միրոնովա, Օ.Ի. Կոնյուշկո, Վ.Դ. Պոպովա, Վ.Պ. Գրաչովը, Ն.Ռ. Շուխմինա, Վ.Վ. Զվերևը. Մարդու դիպլոիդ բջիջների կենցաղային շտամները պատվաստանյութերի արտադրության հիմք են: Բժշկական վիրուսաբանություն. Նյութեր գիտագործնական կոնֆերանս « Իրական խնդիրներբժշկական վիրուսաբանություն՝ նվիրված Մ.Պ.-ի 100-ամյակին. Չումակովը»։ M. 2009. Հատոր XXVI. էջ 305-307; Լ.Լ. Միրոնովա, Վ.Դ. Պոպովա, Օ.Ի. Կոնյուշկո. Փոխպատվաստվող բջիջների օրիգինալ գծերի բանկ ստեղծելու և վիրուսաբանական պրակտիկայում դրանց օգտագործման փորձ: Կենսատեխնոլոգիա. 2000, էջ. 41-47]։ LDCN-ները լայնորեն օգտագործվում են in vitro վիրուսային վարակների ախտորոշման և թունավորության վերլուծության համար տարբեր դեղերև փոխարինող թերապիայի ապրանքներ [ՌԴ արտոնագիր No 2373944, 06/23/2008. Բուժման մեթոդ այրվածքային վերք. Ա.Ս. Էրմոլով, Ս.Վ. Սմիրնովը, Վ.Բ. Խվատով, Լ.Լ. Միրոնով; Ս.Վ. Սմիրնովը, Վ.Բ. Հվատով. Նորարարական տեխնոլոգիաներայրվածքների տեղային բուժում անհետաձգելի բժշկության գիտահետազոտական ինստիտուտում։ Ն.Վ. Սկլիֆոսովսկի. Գրքում՝ Նոր տնտեսագիտություն. Ռուսաստանի նորարարական դիմանկարը. Մ., Ռազմավարական գործընկերության կենտրոն, 2009. էջ 388-390]:
IPVE-ում իմ. Մ.Պ. Chumakov RAMS-ը 20-րդ դարի 80-ական թվականներին 8-10 շաբաթական մարդու սաղմերի մաշկից և մկաններից ստեղծվել են դիպլոիդ բջիջների մի քանի տողեր: Այս աշխատանքը նվիրված է մարդու դիպլոիդ բջիջների արտադրության փոփոխմանը ախտորոշիչ նպատակներով և բջիջների փոխարինող թերապիայի համար, մասնավորապես՝ մարդու դիպլոիդ ֆիբրոբլաստային բջիջների արտադրությունը՝ աճող պրոլիֆերատիվ հատկություններով:
Նախատիպ. ՌԴ արտոնագիր No 1440029 1993 թվականի մարտի 22-ի [Mironova L.L., Preobrazhenskaya N.K., Solovyova M.N., Orlova T.G. Stobetsky V.I., Kryuchkova G.P., Karmysheva V.Ya., Kudinova S.I., Popova V.D., Alpatova G.A. IPVE և NIIEiM im. Ն.Ֆ. Գամալեյա. Մարդու սաղմի մաշկի և մկանային բջիջների դիպլոիդ շտամ, որն օգտագործվում է որպես մարդու ինտերֆերոնների հակավիրուսային ակտիվությունը և վիրուսների տարածման փորձարկման համակարգ:
Այս LDCC շտամը նշանակված է M-21, սակայն ֆիբրոբլաստային մշակույթը M-21 ուներ անբավարար բազմացման ակտիվություն, ինչը նվազեցրեց միաշերտի ձևավորման ժամանակը և ավելացրեց բջիջների և նյութերի սպառումը, և դա ի վերջո հանգեցրեց դրա պաշարների ամբողջական սպառմանը: Արդյունքում, անհրաժեշտություն առաջացավ մարդկային ինտերֆերոնների հակավիրուսային ակտիվությունը և այլ բժշկական և կենսաբանական նպատակներով որոշելու համար հարմար նոր բջջային գիծ, որն ավելի ծախսարդյունավետ է, բնութագրվում է բարձր պրոլիֆերատիվ ակտիվությամբ և ունենալով սերմերի և աշխատանքային բջիջների բանկեր: Այս գիծը նշանակված է M-20: Անցման 7-րդ մակարդակում պատրաստվել է սերմերի բջիջների բանկ: 2012 թվականին 7-րդ անցուղու ափի ամպուլայից պատրաստվել է 16-րդ անցուղու մակարդակի աշխատանքային խցերի բանկ։ Սերմերի և աշխատանքային բջիջների բանկերը 7-րդ և 16-րդ մակարդակներում պահվում են փորձարարական ֆիզիկայի անոթների ինստիտուտում: Մ.Պ. Chumakov RAMS-ը և թույլ տվեք տրամադրել երկուսն էլ արտադրական գործընթացները, և գիտական հետազոտություններ։
Սույն գյուտի և ամենամոտ անալոգի (նախատիպի) միջև տարբերությունը M-20 բջիջների պրոլիֆերատիվ ակտիվության բարձրացումն է 10% ֆիբրինոլիտիկ ակտիվ պլազմայի (FAP) օգտագործման ժամանակ:
Այսպիսով, գյուտի առարկան բժշկական և կենսաբանական նպատակներով մարդու դիպլոիդ ֆիբրոբլաստային բջիջների բազմացման հատկությունների բարձրացման մեթոդ է՝ բջիջներ մշակելով IPVE-ի անվան կրիոբանկից: Մ.Պ. Չումակովի անվան Ռուսաստանի բժշկական գիտությունների ակադեմիան, որում օգտագործվում են բնութագրված M-20 գծի դիպլոիդ բջիջները, որոնք մասշտաբվում են 7-րդ անցուղու սերմերի բջիջների բանկի ամպուլից և ստացվում է 16-րդ անցուղու աշխատանքային բջիջների բանկ՝ բջիջներով։ 20-33 հատվածներից, որոնք հարմար են թերապևտիկ և/կամ ախտորոշիչ նպատակներով օգտագործելու համար, որոնք ստացվել են մարդու 10% ֆիբրինոլիտիկ ակտիվ պլազմա (FAP) պարունակող սննդարար միջավայրում աճեցմամբ: Բջիջներ մշակելիս գերադասելի է օգտագործել սնուցող միջավայրը DMEM 10% FAP-ով:
Հատկանշված M-20 գծի մարդու դիպլոիդ բջիջները, որոնք ստացվել են վերը նշված մեթոդով, ունեն բարձր պրոլիֆերատիվ ակտիվություն և հարմար են թերապևտիկ և/կամ ախտորոշիչ նպատակներով օգտագործելու համար:
Մեթոդի իրականացման սխեման.
1. Մեկ կրիովիալ օգտագործվում է IPVE-ի անվան 7-րդ անցուղու սերմնաբջիջների բանկից: Մ.Պ. Չումակովա RAMS
2. Աշխատանքային բջիջների բանկի պատրաստում IPVE-ի անվան 16-րդ անցման մակարդակում: Մ.Պ. Չումակովա RAMS
3. M-20 գծի ֆիբրոբլաստների վերականգնում 16-րդ անցուղու աշխատանքային բջիջների ափից (IPVE անունով M.P. Chumakov, Ռուսաստանի բժշկական գիտությունների ակադեմիա):
4. Ֆիբրոբլաստների միաշերտ կուլտուրայի ստացում M-20 տող, հատված 17.
5. M-20 գծի ֆիբրոբլաստների կենսաբանական հատկությունների վերականգնում եռապատիկ անցումով (մինչև 20-րդ հատվածը ներառյալ)՝ կրիոպահպանման գործընթացում ԴՆԹ-ի հնարավոր վնասը վերականգնելու համար։
6. Բջջային կուլտուրաների ստացում ախտորոշիչ նպատակներով և բջիջների փոխարինման թերապիա՝ M-20 գծի ֆիբրոբլաստները 20-ից 33-րդ հատվածից վերարտադրելով՝ օգտագործելով 10% ֆիբրինոլիտիկ ակտիվ պլազմա պարունակող սննդարար միջավայր (PDGF պարունակությամբ 155-ից 342 pg/ml):
Առաջարկվող մեթոդը ապահովում է բջիջների արտադրությունը բարձր պրոլիֆերատիվ ակտիվությամբ և հարմար ախտորոշման և/կամ օգտագործման համար. բուժիչ նպատակներով.
Այս տեխնիկական արդյունքը ձեռք է բերվում M-20 գծի մարդկային ֆիբրոբլաստների մշակմամբ սննդային միջավայրում 10% ֆիբրինոլիտիկ ակտիվ պլազմայի (FAP) ավելացմամբ, որն ունի աճի խթանման ազդեցություն և ուժեղացնում է բջիջների կուլտուրայի բազմացման ակտիվությունը:
FAP-ը կլինիկականորեն օգտագործվող փոխներարկման միջոց է, որը ստացվում է մահից հետո առաջին 6 ժամվա ընթացքում սրտամկանի ինֆարկտից, սրտի սուր անբավարարությունից, ուղեղային արյունահոսությունից հանկարծամահ եղած մարդկանց արյունից [ԽՍՀՄ Առողջապահության նախարարության հունիսի 482 հրաման. 14, 1972 «Բուժական և պրոֆիլակտիկ հաստատությունների և կլինիկաների դիակային հյուսվածքներով ապահովելու բարելավման մասին, Ոսկրածուծիև արյուն»]։ Հետմահու արյունը ամբողջական փոխներարկման միջավայր է, որն ունի մի շարք կենսաբանական հատկություններ՝ հիմնականում ֆիբրինոլիտիկ ներուժի բարձրացում: Այս առումով առաջարկվում է նաև անվանել հետմահու արյան ֆիբրինոլիզ։ Հետմահու արյան փոխներարկման հիմնական ցուցումները՝ արյան սուր կորուստ, շոկ, տարբեր ծագման անեմիա, այրվածքային վնասվածք, նյութափոխանակության փոխարինում ժամանակ։ էկզոգեն թունավորում, լրացնելով ԱԻԿ-ը վիրաբուժության մեջ արտամարմնային շրջանառությունն օգտագործելիս [E.G. Ցուրինովան. Ֆիբրինոլիզի արյան փոխներարկում. Մ., 1960, 159 էջ; Ս.Վ. Ռիժկով. Ֆիբրինոլիզի արյան օգտագործման պատրաստում և հնարավորություններ՝ կախված հավաքման ժամանակից և մահվան պատճառից: Հեղինակային համառոտագիր. դոկ. դիսս. L., 1968, 21 pp. Գ.Ա. Պաֆոմովը. Հանկարծ մահացածի արյան կենսաբանական բնութագրերը և դրա օգտագործումը վիրաբուժական պրակտիկայում. Դիսս. դոկ. մեղր. Գիտ. Մ., 1971, 355 էջ; Կ.Ս. Սիմոնյան, Կ.Պ. Գուտիոնտովա, Է.Գ. Ցուրինովան. Հետմահու արյունը տրանսֆուզիոլոգիայի առումով. M., Medicine, 1975, 271 pp.]: Ներկայումս օգտագործվում են հետմահու արյան բաղադրիչներ՝ ֆիբրինոլիտիկ ակտիվ պլազմա, կարմիր արյան բջիջների զանգված, լեյկոցիտային զանգված, թրոմբոցիտային զանգված [Գ.Յա. Լևին. Հեմոկագուլյացիոն հատկություններ և կլինիկական կիրառությունդիակների արյան պլազմա և թրոմբոցիտներ: Հեղինակային ռեֆերատ. դոկ. դիսս. Մ., 1978, 31 էջ; Վ.Բ. Հվատով. Հանկարծ մահացած մարդկանց արյան պլազմայից ֆիբրինոլիտիկ և հակապրոտենազային գործողության պատրաստուկներ. Դիսս. դոկ. Med Sciences, 1984, 417 pp.; Վ.Բ. Խվատով Պլազմակինազա - նոր թրոմբոլիտիկ պատրաստուկ հետմահու պլազմայից In. Thrombosis and Thrombolysis edd. Է.Ի. Չազովը, Վ.Վ. Սմիրնով): Consultants Bureau, N.Y., L, 1986, p. 283-310; Վ.Բ. Հվատով. Հետմահու արյան օգտագործման բժշկական և կենսաբանական ասպեկտները. Տեղեկագիր ԽՍՀՄ բժշկական գիտությունների ակադեմիայի, 1991 թ., 9. էջ 18-24; Վ.Բ. Հվատով. Դիակի արյուն - պատմություն և խնդրի ներկա վիճակը: Խնդիր հեմատոլ. եւ վարարել. արյուն, 1997, 1. S. 51-59]: Կլինիկական կիրառություն են ստացել նաև օրգանների դոնորներից ստացված դիակային արյան բաղադրիչները [մահացած անձը բաբախող սրտով՝ համաձայն «Ուղեղի մահվան ախտորոշման հիման վրա անձի մահը պարզելու ցուցումների» 2001 թվականի դեկտեմբերի 20-ի թիվ 460, Արդարադատության նախարարության գրանցման թիվ 3170 17.01.2002թ.] ։ Օրգանների, հյուսվածքների և բջիջների փոխպատվաստումն իրականացվում է Ռուսաստանի Դաշնության «Մարդու օրգանների և (կամ) հյուսվածքների փոխպատվաստման մասին» օրենքի համաձայն՝ փոփոխված: Դաշնային օրենքներ 2000 թվականի հունիսի 20-ի թիվ 91-F3, 2006 թվականի հոկտեմբերի 16-ի թիվ 160-F3; Վ.Բ. Խվատով, Ս.Վ. Ժուրավել, Վ.Ա. Գուլյաև, Է.Ն. Կոբզևա, Մ.Ս. Մակարով. Օրգանների դոնորների արյան բջջային բաղադրիչների կենսաբանական օգտակարությունը և ֆունկցիոնալ ակտիվությունը. Փոխպատվաստում, 2011, 4, էջ. 13-19; Խուբուտիա Մ.Շ., Խվատով Վ.Բ., Գուլյաև Վ.Ա. և այլն փոխպատվաստման ժամանակ գնդային արյան ծավալի և իմունոմոդուլացնող ազդեցությունների փոխհատուցման մեթոդ: ՌԴ արտոնագիր գյուտի համար No 2452519, հրապարակ. 06/10/2012, տեղեկագիր. Թիվ 16]։
Ֆիբրինոլիտիկ ակտիվ պլազմա ստացվում է հանկարծամահ եղող մարդկանց արյունից, որը պատրաստվում է կոնսերվանտ Գլյուգիցիրով (արյուն՝ կոնսերվանտների հարաբերակցությունը 4:1), որպեսզի պահպանի իր ֆիբրինոլիտիկ ակտիվ հատկությունները: Արյան բջջային տարրերից պլազմայի բաժանումն իրականացվում է ստերիլ տուփի մեջ ասեպտիկ և հակասեպտիկաների բոլոր կանոններին համապատասխան և նման է դոնորային պլազմայի ստացմանը դոնորի պահածոյացված արյունից: FAP-ի կլինիկական օգտագործումը վիրաբուժության և վնասվածքաբանության մեջ բացահայտել է վերքերի բուժման խթանման ազդեցությունը [I.Yu. Կլյուկվին, Մ.Վ. Զվեզդինա, Վ.Բ. Խվատովը, Ֆ.Ա. Բուրդիգա. Կծած վերքերի բուժման մեթոդ. Ռուսաստանի Դաշնության գյուտի արտոնագիր թիվ 2372927, հրապարակում, 2009 թվականի նոյեմբերի 20, տեղեկագիր: Թիվ 32]։ Մենք այս ազդեցությունը կապեցինք FAP-ում աճը խթանող գործոնների առկայության հետ, որոնք արտազատվում են ակտիվացված թրոմբոցիտներով: Հետագայում մենք FAP-ում հայտնաբերեցինք թրոմբոցիտներից ստացված աճի գործոնը (PDGF): FAP-ի աճը խթանող ազդեցությունը մարդու բջիջների կուլտուրայում ցուցադրվել է հատուկ ուսումնասիրություններում: Հետազոտված FAP նմուշները 10% կոնցենտրացիայում ավելացվել են M-20 գծի մարդկային ֆիբրոբլաստների բջջային կասեցմանը, որը պարունակում է հայտնի թվով բջիջներ, և ստացված խառնուրդի 10 մլ տեղադրվել է աճի մակերեսով կուլտուրայի կոլբայի մեջ: 25 սմ 2. Բջիջները աճեցվել են 3-4 օր 5% CO 2 մթնոլորտում և 37°C ջերմաստիճանում: Երեք անգամ անցնելուց հետո աճեցված բջիջները հաշվվել են Ֆուկս-Ռոզենտալ խցիկում և որոշվել է աճեցված բջիջների քանակի հարաբերակցությունը տնկված բջիջների քանակին՝ տարածման ինդեքսը (Աղյուսակ 1-ում):
Կատարված փորձերից հետևում է, որ FAP-ի աճի հատկությունները ապահովում են բարձր պրոլիֆերատիվ ակտիվություն և չեն տարբերվում պտղի տավարի շիճուկի հատկություններից: Ավելին, FAP-ը պարունակում է մարդու թրոմբոցիտների աճի գործոններ, այսինքն. ալոգեն տիպ, ի տարբերություն պտղի տավարի շիճուկի՝ քսենոգեն տիպ: Այս փաստը որոշիչ է փոխարինող թերապիայի ընթացքում բջիջների փոխպատվաստման համար: Նշենք, որ M-20 բջիջների կուլտուրայի վրա աճը խթանող ազդեցությունը պայմանավորված է, մասնավորապես, PDGF-ի առկայությամբ FAP-ում 155-ից 342 pg/ml կոնցենտրացիայով: Այս տվյալները ստացվել են R&D Systems-ի Qantikine, Human PDGF-BB Immunoassay հավաքածուի և Thermo-ի Multiskan Ascent համակարգի միջոցով: PDGF-BB-ի կոնցենտրացիան FAP-ում նման է շիճուկում դրա պարունակությանը: Այսպիսով, արյան դոնորների և հետազոտված հիվանդների շիճուկում PDGF-ի պարունակությունը տատանվում էր 110-ից մինչև 880 պգ/լ, միջինը 244 պգ/մլ, մինչդեռ պլազմայում PDGF-ի պարունակությունը տատանվում էր 0-2 պգ/մլ-ի սահմաններում:
«M-20 գծի մարդկային դիպլոիդ բջիջների արտադրություն բժշկական և կենսաբանական նպատակներով» առաջարկվող տեխնիկական լուծումը ավելի լավ հասկանալու համար մենք տալիս ենք հետևյալ օրինակը։
Մ-20 գծի 16-րդ հատվածի բջիջները վերականգնվել են աշխատանքային բանկից։ Դա անելու համար բջիջներով կրիովիալը հանվում է հեղուկ ազոտից և տեղադրվում մեջ ջրային լոգանք 38°C ջերմաստիճանում և հալվելուց հետո պարունակությունը տեղափոխվում է 10% FAP պարունակող DMEM սնուցող միջավայրով կուլտուրայի տարա (PDGF պարունակությամբ 155-ից 342 պգ/մլ), հակաբիոտիկ գենտամիցին ավելացվում է 1 արագությամբ: մլ 4% լուծույթ 1 լիտր սննդային միջավայրի համար: Միաշերտ ձևավորելու համար բջիջները մշակվում են 4-5 օր 37°C ջերմաստիճանում և 5% CO 2 մթնոլորտում: Բջիջների միաշերտի ձևավորումից հետո կատարվում են 3 հաջորդական անցումներ, որոնք անհրաժեշտ են կրիոպահպանումից հետո ԴՆԹ-ի վերականգնման համար։ Այնուհետև բջիջները կրկնօրինակվում են 20-րդ հատվածից մինչև 33-րդ հատվածը: Այս հատվածների բջիջները նախատեսված են կենսաբժշկական նպատակներով։ Ստացված բջջային գիծը մանրամասնորեն բնութագրվել է ԱՀԿ-ի և GNIISiK MIBP-ի պահանջներին համապատասխան: Լ.Ա. Տարասևիչը, ներառյալ M-20 բջջային գծի HLA տիպավորումը, ինչպես նաև դրա ցիտոկինային սպեկտրի ուսումնասիրությունը: Մենք տրամադրում ենք M-20 գծի և M-22 գծի հատկությունների համեմատական նկարագրությունը (Աղյուսակ 2): Line M 22 (մարդու դիպլոիդ ֆիբրոբլաստներ) լիցենզավորված է որպես պատվաստանյութի սուբստրատ և հաստատված է ցանկացած տեսակի բժշկական վիրուսային պատվաստանյութերի արտադրության համար, ինչպես նաև օգտագործվում է II-IIIA աստիճանի այրվածքների վերքերի բուժման համար [ՌԴ արտոնագիր թիվ 2373944 գյուտի համար: , 23.06.2008թ. Այրվածքի վերքի բուժման մեթոդ. Ա.Ս. Էրմոլով, Ս.Վ. Սմիրնովը, Վ.Բ. Խվատով, Լ.Լ. Միրոնովա, Օ.Ի. Կլնյուշկո, Է.Ա. Ժիրկովա, մ.թ.ա. Բոչարովա]:
M-20 գիծը տեղադրվել է IPVE անունով: Մ.Պ. Չումակով RAMS-ը 1986 թվականին 10-շաբաթյա մարդկային սաղմի մաշկից և մկաններից, որը ստացվել է առողջ կնոջից աբորտի արդյունքում: Չի եղել քաղցկեղի, սեռական ճանապարհով փոխանցվող հիվանդությունների, հեպատիտի կամ տուբերկուլյոզի պատմություն; գենետիկ և բնածին հիվանդություններընտանիքում չի նկատվել. Բջջային կուլտուրայի միջավայր DMEM համալրված 10% FAP-ով: Սերմնացանի հարաբերակցությունը 1:3-1:4 է շաբաթական երկու անգամ՝ 7×104 բջիջ/մլ բջիջների սերմնավորման չափաբաժնով: Բջջային միաշերտը բաղկացած է կողմնորոշված միատարր սպինձաձև բջիջներից՝ օվալաձև միջուկներով, որոնք պարունակում են 1-3 միջուկներ և քրոմատինի փոքր կուտակումներ։ IN կյանքի ցիկլԳիծը կարելի է առանձնացնել զարգացման 3 փուլերի՝ ձևավորում 1-3 անցուղի, ակտիվ աճ 4-40 և ծերացում 41-52, հետո մահ է լինում։ Գծի բջիջներն ունեն մարդու կարիոտիպ 2m=46, XY։ Գիծը բնութագրվում է բարձր գենետիկական կայունությամբ. բջիջների 93,3-96,9%-ն ունի քրոմոսոմների դիպլոիդ հավաքածու, պոլիպլոիդ հավաքածուով բջիջները՝ ոչ ավելի, քան 1,6%: Չի նկատվել բացեր, ճեղքեր կամ օղակային քրոմոսոմներ: G-6PDE և LDE իզոֆերմենտների շերտերի քանակը և դրանց էլեկտրոֆորետիկ շարժունակությունը համընկնում են մարդու էրիթրոցիտների հետ: G-6FDG դանդաղ տիպ: Ընտրովի սննդանյութերի վրա ցանելու ժամանակ բակտերիաներով, սնկերով կամ միկոպլազմայով աղտոտվածություն չի հայտնաբերվել: Բացի այդ, միկոպլազմայով վարակվածություն չի հայտնաբերվել ԴՆԹ-ի ֆտորոքրոմներով Hochst 33258-ով և օլիվոմիցինով ներկելիս, ինչպես նաև PCR մեթոդ. Վիրուսներով վարակվածությունը կաթնասունների և չափահաս սպիտակ մկների վրա կատարված փորձերի ժամանակ, ծովախոզուկներ, ճագարների և հավի սաղմերը, ինչպես նաև հոմոլոգ և հետերոլոգ բջիջների կուլտուրաների վրա։ Ուռուցքածինության վերահսկում. Երբ գծի բջիջները կիրառվել են իմունային ճնշված կենդանիների մոտ, ուռուցքներ չեն ձևավորվել: Հակադարձ տրանսկրիպտազ չի հայտնաբերվել: HLA մարկերներ՝ I դաս՝ A*(02.03)/B*(07.40)/CW*(03.07): II դաս՝ DRB1*(15.16)/DQB1*(05.06): M-20 գծի բջիջները 20-րդ անցման մակարդակում արտադրում են mRNA α-ինտերֆերոնի (IFNα) և ինտերլեյկինների համար՝ IL1β, 2, 4, 6, 8, 10, 18:
Այսպիսով, առաջարկվող գիծը դիպլոիդ է. այն ունի սահմանափակ կյանքի տևողությունը, ողջ կյանքի ընթացքում պահպանում է նորմալ մարդկային բջիջների կարիոտիպը, զերծ է աղտոտիչներից և չունի օնկոգեն ներուժ: Այն բնութագրվել է անվտանգության համար՝ համաձայն ԱՀԿ-ի առաջարկություններին և անվանվող GNIISiK MIBP-ի պահանջներին: Լ.Ա. Տարասևիչ. IPVE-ում իմ. Մ.Պ. Chumakov RAMS-ում կան սերմերի և աշխատանքային բջիջների բանկեր, որոնք կարող են բավարարել արտադրության և գիտական հետազոտությունների բոլոր կարիքները: M-20 գծի բջիջները զգայուն են տարբեր վիրուսներով վարակվելու նկատմամբ: Բացի այդ, ուսումնասիրվել է M-20 գծի ցիտոկինային սպեկտրը: Բջիջների ցիտոկինային սպեկտրի իմացությունը հնարավորություն է տալիս ավելի ճշգրիտ գնահատել արդյունքները հիվանդների ինտերֆերոնի կարգավիճակը որոշելիս և տալ տեղեկացված առաջարկություններ թերապևտիկ և պրոֆիլակտիկ դեղամիջոցների օգտագործման վերաբերյալ:
Մարդու դիպլոիդ բջիջները՝ M-20 շտամի ֆիբրոբլաստները, որոնք ստացվել են առաջարկվող մեթոդով, կարող են օգտագործվել ախտորոշիչ նպատակներով, մասնավորապես՝ որոշելու ինտերֆերոնի (IFN) ակտիվությունը մարդու արյան շիճուկում, ինչպես նաև բժշկական նպատակներով։ օրինակ՝ անկողնային խոցերի, կծած վերքերի, երկարատև չբուժվող և այրվածքային վերքերի տեղական բուժման համար։
1. Մարդու դիպլոիդ ֆիբրոբլաստային բջիջների պրոլիֆերատիվ հատկությունների բարձրացման մեթոդ, որը բնութագրվում է նրանով, որ բնութագրված M-20 գծի դիպլոիդ բջիջները Անոթների ինստիտուտի կրիոբանկից: Մ.Պ. Chumakov RAMS-ը մասշտաբվում է 7-րդ անցուղու սերմերի բջիջների բանկի ամպուլից և 16-րդ անցուղու աշխատանքային բջիջների բանկը, մինչդեռ 20-33 հատվածների բջիջները, որոնք հարմար են թերապևտիկ և/կամ ախտորոշիչ նպատակներով օգտագործելու համար, ստացվում են. մշակում սննդային միջավայրում, որը պարունակում է 10% ֆիբրինոլիտիկ ակտիվ պլազմա (FAP), որը պարունակում է մարդու թրոմբոցիտներից ստացված աճի գործոն PDGF 155-ից 342 պգ/մլ կոնցենտրացիայով:
2. Մեթոդը ըստ պահանջի 1-ի, որտեղ 10% FAP-ով սնուցող միջավայրը DMEM օգտագործվում է բջիջներ մշակելիս:
Նմանատիպ արտոնագրեր.
Գյուտը վերաբերում է դեղագործական արդյունաբերությանը, մասնավորապես արտադրության մեջ մարդու պլասենցայի պերֆուզիոն բջիջների օգտագործմանը դեղճնշել ուռուցքային բջիջների տարածումը անհատի մեջ.
Գյուտերի խումբը վերաբերում է կենսատեխնոլոգիայի և ուռուցքաբանության ոլորտին։ Մեթոդը ներառում է. ա) հետծննդյան հյուսվածքին հատուկ բազմաֆունկցիոնալ ավտոլոգ ցողունային բջիջների (ASCs) և/կամ autologous progenitor բջիջների (APCs) մեկուսացում դրանց հետագա պրոտեոմային և ամբողջական տրանսկրիպտոմիկ անալիզների համար. բ) ASC-ների և/կամ APC-ների և/կամ բազմաուժեղ ալոգենիկ HLA-հապլոիդենտ ցողունային բջիջների (HLA-CK) մեկուսացում` դրանց պրոտեոմային պրոֆիլի հետագա վերափոխման համար. գ) CSC-ների մեկուսացում հիվանդի ուռուցքից. դ) ASC-ի և/կամ APC-ի և RSC-ի պրոտեոմիկ անալիզ. ե) ASC-ների և/կամ APC-ների և CSC-ների ամբողջական տրանսկրիպտոմային վերլուծություն. զ) մի շարք սպիտակուցների որոշում, որոնցից յուրաքանչյուրը պարունակվում է ինչպես ASC-ի, այնպես էլ/կամ APC-ի և CSC-ի պրոտեոմիկ պրոֆիլներում. է) նախապես սահմանված սպիտակուցների վերլուծություն՝ հայտնաբերելու ներբջջային ազդանշանային ուղիները CSC-ներում, որոնք չեն ենթարկվել նորագոյացությունների փոխակերպման՝ քաղցկեղի հետևանքով, և որոշել թիրախային սպիտակուցները, որոնք հայտնաբերված ազդանշանային ուղիների մեմբրանային ընդունողներ են. ը) CSC-ների ամբողջական տրանսկրիպտոմային գենային արտահայտման պրոֆիլի վերլուծություն և CSC-ներում հայտնաբերված ազդանշանային ուղիների կառուցվածքային բաղադրիչների ամբողջականության և ֆունկցիոնալ նշանակության հաստատում. թ) թիրախային սպիտակուցները ակտիվացնելու ընդունակ լիգանդի սպիտակուցների նույնականացում. Դեպի) համեմատական վերլուծություն ASA-ի և/կամ APC-ի ամբողջական տրանսկրիպտոմիական պրոֆիլները՝ տրանսկրիպտոմիկ պրոֆիլներով, որոնք պարունակվում են տրանսկրիպտոմային հայտնի տվյալների բազաներում, բացահայտելու պերտուրբոգենները, որոնք կարող են փոփոխել ASA-ի և/կամ APC-ի և/կամ HLA-CK-ի գենային արտահայտման պրոֆիլը, որը մեկուսացված է վերափոխելու իրենց պրոտեոմային պրոֆիլը, որոշակի լիգանդի սպիտակուցների ավելի վաղ սեկրեցիայի ուղղությունը. ժա) ASA-ի և/կամ APC-ի և/կամ HLA-CK-ի պրոտեոմիկ պրոֆիլի վերափոխում պերտուրբոգենների միջոցով՝ տարբեր տեսակի տրանսկրիպտոմիկ պրոֆիլի ձևափոխված ստանալու համար. բջջային համակարգեր, որը կարող է կարգավորիչ ազդեցություն ունենալ հիվանդի RSC-ի վրա:
Գյուտը վերաբերում է կենսատեխնոլոգիայի, մասնավորապես բջջային տեխնոլոգիաների ոլորտին և կարող է օգտագործվել բժշկության մեջ։ Միամիջուկային բջիջների կամ ոչ սաղմնային ցողունային բջիջների պոպուլյացիան, որը հարստացված է պրոմոնոցիտներ պարունակող մոնոցիտային տոհմի բջիջներով, օգտագործվում է սուբյեկտի մոտ իշեմիայի բուժման համար:
Գյուտը վերաբերում է կենսատեխնոլոգիայի և բջջային տեխնոլոգիայի ոլորտին։ Հայտարարված գյուտը նպատակաուղղված է ստեղծելու պլյուրիպոտենտ, բազմաուժ և/կամ ինքնավերականգնվող բջիջներ, որոնք կարող են սկսել տարբերվել մշակույթում. Տարբեր տեսակներբջիջները և ունակ են հետագա տարբերակման in vivo:
Գյուտը վերաբերում է բժշկության ոլորտին և կարող է օգտագործվել վերարտադրողական օժանդակ տեխնոլոգիաների մեթոդներում սերմնահեղուկի ընտրության համար։ Մեթոդը ներառում է սերմնահեղուկի մի կաթիլ և կուլտուրայի մի կաթիլ Petri ափսեի մեջ դնելով միմյանցից ոչ ավելի, քան 5 սմ հեռավորության վրա, կաթիլները միացնելով մածուցիկ միջավայրի շերտով 1-4 Պա վ մածուցիկության պարամետրերով, այնուհետև 30-90 րոպե ինկուբացնել պարունակությամբ ուտեստը մոդելավորման պայմաններում բնական միջավայր արգանդի վզիկի ջրանցքկանանց վերարտադրողական տրակտը.
Գյուտը վերաբերում է բժշկության, կենսատեխնոլոգիայի և բջջային տեխնոլոգիայի ոլորտին։ Մարդու բջիջների գիծը ներկայացնող պլյուրիպոտենցիալ ցողունային բջիջները բջիջների մեջ, որոնք արտահայտում են ձևավորված էնդոդերմային շառավղին բնորոշ մարկերներ տարբերելու մեթոդը ներառում է ցողունային բջիջների մշակումը այնպիսի միջավայրով, որը բնութագրվում է նրանով, որ այն չի պարունակում ակտիվին A և պարունակում է GDF-8 որոշ ժամանակով: , որը բավարար է ցողունային պլյուրիպոտենցիալ բջիջների համար տարբերվելու բջիջների, որոնք արտահայտում են ձևավորված էնդոդերմի տոհմին բնորոշ մարկերներ։
Սույն գյուտը վերաբերում է իմունոլոգիայի ոլորտին։ Առաջարկվել են RAB6KIFL սպիտակուցից (KIFL20A) մեկուսացված օլիգոպեպտիդի տարբերակներ, որոնք ունակ են առաջացնել ցիտոտոքսիկ T լիմֆոցիտներ (CTL)՝ որպես HLA-A*0201 մոլեկուլով համալիրի մաս:
Գյուտը վերաբերում է սննդի արդյունաբերության ոլորտին և գարեջրի պատրաստման մեթոդ է, որը ներառում է խաշածաղկի մեջ ջերմակայուն պրոթեզերոնի ավելացում՝ զտելուց հետո, բայց նախքան եռացնելը, որտեղ պրոթեզերոնի ջերմային կայունությունը նշանակում է, որ այս պրոթեզերոնի ակտիվությունը իր գործունեության առնվազն 70%-ը՝ չափված ըստ հաջորդ մեթոդինՊրոտեազը նոսրացվում է մինչև 1 մգ/մլ կոնցենտրացիայի մեջ 100 մմոլ սուկինինաթթու, 100 մմոլ HEPES, 100 մմոլ CHES, 100 մմոլ CABS, 1 մմոլ CaCl2, 150 մմոլ KCl, 0,010% Տրիտոն և 0,010% պարունակող փորձարկման բուֆեր: գ pH-ը կարգավորվում է 5,5-ի NaOH-ով; որից հետո պրոթեզերոնը նախաինկուբացվում է i) սառույցի մեջ և ii) 10 րոպե 70°C ջերմաստիճանում; Ենթաշերտը, որի վրա պրոթեզերան ակտիվ է, կասեցվում է 0,01% Triton X-100-ում. ռեակցիան սկսելու համար փորձանոթին ավելացվում է 20 մկլ պրոթեզեր և ինկուբացվում է Էպպենդորֆի ջերմախառնիչում 70°C, 1400 պտ/րոպում 15 րոպե; ռեակցիան դադարեցվում է՝ խողովակները սառույցի մեջ դնելով. նմուշները ցենտրիֆուգվում են սառը 14000 գ-ում 3 րոպե, և չափվում է վերին նյութի օպտիկական խտությունը OD590; առանց պրոթեզերոնի նմուշների ստացված OD590 արժեքը հանվում է պրոտեազով մշակված նմուշների ստացված OD590 արժեքից. որոշել պրոթեզերոնի ջերմակայունությունը՝ հաշվարկելով պրոթեզերոնի ակտիվության տոկոսը 70°C-ում նախաինկուբացված նմուշներում՝ համեմատած սառույցի վրա ինկուբացված նմուշների պրոթեզերոնի ակտիվության հետ՝ որպես 100% ակտիվություն:
Գյուտը վերաբերում է բջջային կենսաբանության, բջիջների փոխպատվաստման և հյուսվածքների ճարտարագիտության ոլորտներին: Հյուսվածքներում և օրգաններում ճարպային հյուսվածքի ստրոմալ բջիջների անգիոգեն ակտիվության բարձրացման մեթոդը ներառում է ճարպային հյուսվածքի ստրոմալ բջիջների մեկուսացումը, մեկուսացված բջիջների մշակումը ուռուցքային նեկրոզի գործոն-ալֆայի առկայության դեպքում 5 կամ 100 նգ/մլ քանակությամբ 24-72 ժամվա ընթացքում: , որին հաջորդում է փոխպատվաստումը հյուսվածքների կամ օրգանների մեջ :
Գյուտը վերաբերում է կենսատեխնոլոգիայի, բջջային տեխնոլոգիայի և հյուսվածքների վիրաբուժության ոլորտին։ Հարթ մկանային բջիջների կուլտուրա ստանալու մեթոդը բաղկացած է արյունատար անոթի բեկորից կտրելուց, այն 2 մմ-ից ոչ ավելի չափի ցանկացած հարթության մեջ կտորների մանրացնելուց և նախապես կիրառված քերծվածքներով կտորները կուլտուրայի կոլբայի մեջ ինկուբացնելուց: մինչև կոլբայի հատակը, որը պարունակում է 10% սաղմնային պտղի շիճուկ պարունակող կուլտուրական միջավայր, առնվազն 10 օր, բայց ոչ ավելի, քան 24 օր, CO2 ինկուբատորում 37°C ջերմաստիճանի դեպքում, որը բնութագրվում է նշված հատվածով: արյունատար անոթը բարձրացող վերջույթի բեկոր է կրծքային աորտաԿորոնար շնչերակ շրջանցման պրոցեդուրայի ընթացքում կտրված, և վերընթաց կրծքային աորտայի հատվածի նշված հատվածները պահվում են 0,1% կոլագենազ պարունակող կուլտուրայի մեջ առնվազն 30 րոպե, բայց ոչ ավելի, քան 60 րոպե, 37 ջերմաստիճանում։ °C ինկուբացիայից առաջ, այնուհետև լվանալ բջիջների կուլտուրայի միջավայրով:
Մեզենխիմալ ցողունային բջիջների ստացման մեթոդ՝ մարդու պլյուրիպոտենտ ցողունային բջիջներից և այս մեթոդով ստացված մեզենխիմալ ցողունային բջիջներից // 2528250
Գյուտը վերաբերում է գենետիկական ճարտարագիտության, հյուսվածքների տեխնոլոգիայի և բժշկության ոլորտին։ Մեզենխիմալ ցողունային բջիջների ստացման մեթոդը ներառում է մարդկային ցողունային ցողունային բջիջներից սաղմնային մարմիններ ստանալը, սաղմնային մարմինների կցումը Պետրիի ճաշատեսակին, որը հրահրում է սաղմնային մարմինների ինքնաբուխ տարբերակումը մեզենխիմալ ցողունային բջիջների, աճեցումը՝ ցողունային բջիջների բազմացման ընթացքում: պահպանելով մեզենխիմալ ցողունային բջիջների ինքնությունը, և որտեղ ինքնաբուխ փուլային տարբերակման ինդուկցիան տեղի է ունենում ավտոլոգային ցիտոկինային օղակների ձևավորմամբ՝ առանց արտաքին ցիտոկինի ավելացման, ինչպես նաև համապատասխան բջիջները, դրանց օգտագործումը, հավաքագրումը և մշակման եղանակը:
Գյուտը վերաբերում է մոլեկուլային կենսաբանության, կենսաքիմիայի և բժշկության ոլորտներին։ Առաջարկվում է կոմպոզիցիա՝ չափահաս ճարպային հյուսվածքի ցողունային բջիջների միգրացիան հրահրելու համար, որը որպես ակտիվ բաղադրիչ պարունակում է մարդու մեզենխիմալ ցողունային բջիջներ չափահաս ճարպային հյուսվածքից՝ 1x107-ից մինչև 1x1010, որոնք արտահայտում են քիմոկին կամ աճի գործոնի ընկալիչ բջջի մակերեսին, կամ Այս ցողունային բջիջներից արտազատող արտադրանքը ներառում է քիմոկին կամ աճի գործոնի ընկալիչ; որտեղ չափահաս ճարպային հյուսվածքի ցողունային բջիջների արտազատվող արտադրանքը ադիպոնեկտինն է. և որտեղ մարդու չափահաս ճարպային հյուսվածքի ցողունային բջիջները լցվում են քիմոկին կամ աճի գործոն պարունակող խառնուրդով:
Գյուտը վերաբերում է կենսատեխնոլոգիային և բժշկությանը։ Առաջարկվել է մի մեթոդ պորտալարի արյան միամիջուկային բջիջների (pcBMC) ընդլայնման համար ex vivo բազմապատենտ մեզենխիմալ բջիջների (MMSC) առկայության դեպքում, որը ներառում է MMSC-ի մշակումը ճարպային հյուսվածքի ստրոմալ-անոթային ֆրակցիայից մինչև միաշերտ ձեռք բերելը: O2 կոնցենտրացիան միջավայրում 5%, ավելացնելով pcMNC կասեցում MMSC միաշերտում, 72 ժամ մշակում O2 կոնցենտրացիայով 5% միջավայրում, չկցված psMNC-ների ընտրություն և միջավայրի փոխարինում, MMSC-ների շարունակական աճեցում կցված psMNC-ներով: 7 օրվա ընթացքում O2 կոնցենտրացիան 5% միջավայրում:
Գյուտը վերաբերում է կենսատեխնոլոգիայի և բժշկության ոլորտին։ Առաջարկվում է կոմպոզիցիա, որը պարունակում է մարդու ամնիոտիկ հեղուկի ցողունային բջիջներ՝ CD73+/CD90+/CD105+/CK19+ ֆենոտիպով, սնուցող միջավայր, էրիտրոպոետին, էպիդերմիսի աճի գործոն և կոլագեն՝ վերցված արդյունավետ քանակությամբ:
Գյուտը վերաբերում է բժշկության և բջջային տեխնոլոգիայի ոլորտին։ Բջջային արտադրանք, որը պարունակում է ենթածնոտային ծորանային ցողունային բջիջների պոպուլյացիան թքագեղձբնութագրվում է CD49f+/EpCAM+ ֆենոտիպով և 0,1-40 մՄ կոնցենտրացիայով վալպրոյաթթվով մշակելուց և կոլագենի գելում մշակումից հետո՝ փոխելով արտահայտման պրոֆիլը 1AAT+/PEPCK+/G6P+/TDO+/CYP P4503A13+, ինչպես նաև ձեռք բերելու ունակությունը։ միզանյութի և ալբումինի սինթեզման համար:
Գյուտը վերաբերում է կենսատեխնոլոգիայի, բջջային և հյուսվածքային ճարտարագիտության ոլորտին։ Նկարագրված է կաթնասունների սրտի ռեզիդենտ ցողունային բջիջների ստացման մեթոդ, որոնք արտահայտում են մակերեսային մարկերներ c-kit, և/կամ sca-1 և/կամ MDR1, որի ընթացքում սրտամկանի հյուսվածքի նմուշները մեկուսացվում, մանրացված են, մշակվում կոլագենազով և տրիպսինով և մշակվել է ֆիբրոնեկտինով պատված կուլտուրայի ափսեի վրա մանրացված նմուշների արտամղիչ կուլտուրայով, որին հաջորդում է իմունային ընտրությունը:
Գյուտը վերաբերում է կենսաքիմիայի, կենսատեխնոլոգիայի և բժշկության ոլորտներին։ Առաջարկվել է 21 ամինաթթուների երկարությամբ իմունային պատասխանի լուծվող ճնշիչի N-տերմինալ հատվածը, որն ունի ամինաթթուների հաջորդականություն՝ ըստ Seq ID NO: 1, ինչը թույլ է տալիս խթանել նաև կարգավորող T-լիմֆոցիտների ձևավորումը: որպես կարգավորիչ T-լիմֆոցիտների ձևավորումը խթանելու մեթոդ՝ իմունային պատասխանի լուծվող ճնշիչի N-տերմինալ հատվածով, հաջորդ ID NO:
Գյուտը վերաբերում է դեղագործական արդյունաբերությանը և մաշկաբանական քսուք է, որը նախատեսված է մաշկի բակտերիալ վարակների տեղական բուժման և հարակից վերքերի բուժման համար, որը պարունակում է ֆրամիցետին սուլֆատ և բիոպոլիմեր, որը ներառված է կրեմի հիմքում, որը պարունակում է առնվազն մեկ նյութ հետևյալ խմբերից յուրաքանչյուրից։ կոնսերվանտ; առաջնային և երկրորդային էմուլգատոր՝ ընտրված կետոստեարիլ սպիրտից, կետոմակրոգոլ 1000-ից, պոլիսորբատ-80-ից և սփան-80-ից բաղկացած խմբից; պարաֆին որպես մոմային արտադրանք; պրոպիլեն գլիկոլից, հեքսիլեն գլիկոլից և պոլիէթիլեն գլիկոլ-400-ից կազմված խմբից ընտրված համալուծիչ; ազոտական թթու կամ կաթնաթթու և ջուր, և նշված բիոպոլիմերը գերադասելի է խիտոզան:
Գյուտը վերաբերում է կենսատեխնոլոգիայի, մասնավորապես բջջային տեխնոլոգիաների ոլորտին և կարող է օգտագործվել բժշկության մեջ։ Մեթոդը ներառում է M-20 գծի դիպլոիդ բջիջների մասշտաբավորում IPVE-ի անվան կրիոբանկից: Մ.Պ. Չումակովի անվան Ռուսաստանի բժշկական գիտությունների ակադեմիան 7-րդ անցուղու սերմերի բջիջների բանկի ամպուլից՝ 16-րդ հատվածի աշխատանքային բջիջների բանկ ստանալու համար: Այս դեպքում 20-33 հատվածների բջիջները, որոնք հարմար են թերապևտիկ և ախտորոշիչ նպատակներով օգտագործման համար, ստացվում են սնուցող միջավայրում մշակելով, որը պարունակում է 10 ֆիբրինոլիտիկ ակտիվ մարդկային պլազմա, որը պարունակում է թրոմբոցիտներից ստացված աճի գործոն PDGF՝ 155-ից 342 pgml կոնցենտրացիայով: Գյուտը թույլ է տալիս բարձրացնել մարդու դիպլոիդ ֆիբրոբլաստային բջիջների պրոլիֆերատիվ ակտիվությունը։ 1 աշխատավարձ ֆայլեր, 2 աղյուսակ.
