Hyperlipidemia (hyperlipemia) - pagtaas ng konsentrasyon kabuuang lipid parang plasma physiological phenomenon maaaring obserbahan 1-4 na oras pagkatapos kumain. Ang hyperlipemia ng nutrisyon ay mas malinaw, mas mababa ang antas ng mga lipid sa dugo ng pasyente sa isang walang laman na tiyan.
Ang konsentrasyon ng mga lipid sa dugo ay nagbabago sa ilalim ng isang bilang ng mga kondisyon ng pathological:
Nephrotic syndrome, lipoid nephrosis, talamak at talamak na nephritis;
Biliary cirrhosis ng atay, talamak na hepatitis;
Labis na katabaan - atherosclerosis;
Hypothyroidism;
Pancreatitis, atbp.
Ang pag-aaral ng mga antas ng kolesterol (CH) ay sumasalamin lamang sa patolohiya ng metabolismo ng lipid sa katawan. Ang hypercholesterolemia ay isang dokumentadong kadahilanan ng panganib coronary atherosclerosis. Ang CS ay isang mahalagang bahagi ng lamad ng lahat ng mga selula; ang mga espesyal na katangian ng physicochemical ng mga kristal ng CS at ang conformation ng mga molekula nito ay nakakatulong sa kaayusan at kadaliang kumilos ng mga phospholipid sa mga lamad kapag nagbabago ang temperatura, na nagpapahintulot sa lamad na maging nasa intermediate phase state. ("gel - likidong kristal") at panatilihin physiological function. Ginagamit ang CS bilang pasimula sa biosynthesis ng steroid hormones (gluco- at mineralocorticoids, sex hormones), bitamina D 3, pati na rin ang mga acid ng apdo. Karaniwan, maaari nating makilala ang 3 pool ng kolesterol:
A - mabilis na pagpapalitan (30 g);
B – dahan-dahang pagpapalitan (50 g);
B – napakabagal na pagpapalitan (60 g).
Ang endogenous cholesterol ay na-synthesize sa makabuluhang dami sa atay (80%). Ang exogenous cholesterol ay pumapasok sa katawan bilang bahagi ng mga produktong hayop. Ang transportasyon ng kolesterol mula sa atay patungo sa mga extrahepatic na tisyu ay isinasagawa
LDL. Ang pag-alis ng kolesterol mula sa atay mula sa extrahepatic tissues papunta sa atay ay ginawa ng mga mature na anyo ng HDL (50% - LDL, 25% HDL, 17% VLDL, 5% -CM).
Hyperlipoproteinemia at hypercholesterolemia (pag-uuri ng Fredrickson):
Uri 1 - hyperchylomicronemia;
uri 2 - a - hyper-β-lipoproteinemia, b - hyper-β at hyperpre-β-lipoproteinemia;
uri 3 - dys-β-lipoproteinemia;
uri 4 - hyper-pre-β-lipoproteinemia;
Uri 5 - hyper-pre-β-lipoproteinemia at hyperchylomicronemia.
Ang pinaka-atherogenic ay mga uri 2 at 3.
Ang Phospholipids ay isang pangkat ng mga lipid na naglalaman, bilang karagdagan sa phosphoric acid (isang mahalagang sangkap), alkohol (karaniwang glycerol), mga residu ng fatty acid at mga nitrogenous na base. Sa klinikal at laboratoryo na kasanayan, mayroong isang paraan para sa pagtukoy ng antas ng kabuuang phospholipids, ang antas kung saan tumataas sa mga pasyente na may pangunahin at pangalawang hyperlipoproteinemia IIa at IIb. Ang pagbaba ay nangyayari sa isang bilang ng mga sakit:
Nutritional dystrophy;
Pagkabulok ng mataba na atay,
Portal cirrhosis;
Pag-unlad ng atherosclerosis;
Hyperthyroidism, atbp.
Ang lipid peroxidation (LPO) ay isang libreng radikal na proseso, ang pagsisimula nito ay nangyayari sa pagbuo ng mga reaktibong species ng oxygen - superoxide ion O 2 . ; hydroxyl radical H O . ; hydroperoxide radical HO 2 . ; singlet oxygen O 2 ; hypochlorite ion ClO - . Ang mga pangunahing substrate ng LPO ay mga polyunsaturated fatty acid na matatagpuan sa istruktura ng mga phospholipid sa lamad. Ang pinakamalakas na katalista ay iron metal ions. Ang SEX ay isang prosesong pisyolohikal na mayroon mahalaga para sa katawan, dahil kinokontrol nito ang pagkamatagusin ng lamad, nakakaapekto sa paghahati at paglaki ng cell, nagsisimula ng phagosynthesis, ay isang landas para sa biosynthesis ng ilang mga biyolohikal na sangkap(prostaglandin, thromboxanes). Ang antas ng lipid peroxidation ay kinokontrol ng antioxidant system ( ascorbic acid, uric acid, β-carotene, atbp.). Ang pagkawala ng balanse sa pagitan ng dalawang sistema ay humahantong sa pagkamatay ng mga selula at mga istruktura ng cellular.
Para sa mga layunin ng diagnostic, kaugalian na matukoy ang nilalaman ng mga produktong lipid peroxidation (diene conjugates, malondialdehyde, Schiff base) at ang konsentrasyon ng pangunahing natural na antioxidant - alpha-tocopherol sa plasma at mga pulang selula ng dugo na may pagkalkula ng MDA/TF koepisyent. Ang isang mahalagang pagsubok para sa pagtatasa ng LPO ay ang pagtukoy sa permeability ng erythrocyte membranes.
2. Pagpapalitan ng pigment isang hanay ng mga kumplikadong pagbabago ng iba't ibang kulay na sangkap sa katawan ng tao at hayop.
Ang pinakakilalang pigment ng dugo ay hemoglobin (isang chromoprotein na binubuo ng bahagi ng protina ng globin at isang pangkat ng prostetik na kinakatawan ng 4 na hemes, bawat heme ay binubuo ng 4 na pyrrole nuclei, na magkakaugnay ng mga tulay na methine, sa gitna ay mayroong isang iron ion na may oxidation state na 2 +) . Ang average na habang-buhay ng isang erythrocyte ay 100-110 araw. Sa pagtatapos ng panahong ito, nangyayari ang pagkasira at pagkasira ng hemoglobin. Nagsisimula na ang proseso ng disintegrasyon vascular bed, nagtatapos sa mga elemento ng cellular ng sistema ng phagocytic mononuclear cells (Kupffer cells ng atay, histiocytes nag-uugnay na tisyu, mga selula ng plasma utak ng buto). Ang Hemoglobin sa vascular bed ay nagbubuklod sa plasma haptoglobin at nananatili sa vascular bed nang hindi dumadaan sa renal filter. Dahil sa parang trypsin na pagkilos ng beta chain ng haptoglobin at ang mga pagbabago sa conformational na dulot ng impluwensya nito sa porphyrin ring ng heme, ang mga kondisyon ay nilikha para sa mas madaling pagkasira ng hemoglobin sa mga elemento ng cellular ng phagocytic mononuclear system. -molekular na berdeng pigment verdoglobin(kasingkahulugan: verdohemoglobin, choleglobin, pseudohemoglobin) ay isang kumplikadong binubuo ng globin, isang sirang porphyrin ring system at ferric iron. Ang karagdagang mga pagbabagong-anyo ay humantong sa pagkawala ng iron at globin sa pamamagitan ng verdoglobin, bilang isang resulta kung saan ang porphyrin ring ay nagbubukas sa isang kadena at isang mababang molekular na timbang na berdeng bile pigment ay nabuo - biliverdin. Halos lahat ng ito ay enzymatically naibalik sa pinakamahalagang pula-dilaw na pigment ng apdo - bilirubin, na isang karaniwang bahagi ng plasma ng dugo.Sa ibabaw lamad ng plasma ang hepatocyte ay sumasailalim sa dissociation. Sa kasong ito, ang inilabas na bilirubin ay bumubuo ng isang pansamantalang nauugnay sa mga lipid ng lamad ng plasma at gumagalaw sa pamamagitan nito dahil sa aktibidad ng ilang mga sistema ng enzyme. Ang karagdagang pagpasa ng libreng bilirubin sa cell ay nangyayari sa pakikilahok ng dalawang protina ng carrier sa prosesong ito: ligandin (ito ang nagdadala ng pangunahing halaga ng bilirubin) at protina Z.
Ang Ligandin at protina Z ay matatagpuan din sa mga bato at bituka, samakatuwid, sa kaso ng hindi sapat na pag-andar ng atay, sila ay libre upang mabayaran ang pagpapahina ng mga proseso ng detoxification sa organ na ito. Parehong natutunaw sa tubig, ngunit walang kakayahang lumipat sa lipid layer ng lamad. Sa pamamagitan ng pagbubuklod ng bilirubin sa glucuronic acid, ang likas na toxicity ng libreng bilirubin ay higit na nawawala. Hydrophobic, lipophilic libreng bilirubin, madaling dissolving sa lamad lipids at dahil diyan ay matalim sa mitochondria, uncouples paghinga at oxidative phosphorylation sa kanila, disrupts protina synthesis, ang daloy ng potassium ions sa pamamagitan ng lamad ng mga cell at organelles. Ito ay may negatibong epekto sa kalagayan ng sentral sistema ng nerbiyos, na nagiging sanhi sa mga pasyente ng isang bilang ng mga katangian mga sintomas ng neurological.
Bilirubin glucuronides (o nakatali, conjugated bilirubin), hindi tulad ng libreng bilirubin, agad na tumutugon sa diazo reagent ("direktang" bilirubin). Dapat tandaan na sa mismong plasma ng dugo, ang bilirubin na hindi pinagsama sa glucuronic acid ay maaaring maiugnay sa albumin o hindi. Ang huling bahagi (bilirubin na hindi nauugnay sa albumin, lipid, o iba pang bahagi ng dugo) ay ang pinakanakakalason.
Bilirubin glucuronides, salamat sa mga sistema ng enzyme ng mga lamad, aktibong gumagalaw sa kanila (laban sa gradient ng konsentrasyon) sa mga duct ng apdo, pinalabas kasama ng apdo sa lumen ng bituka. Sa loob nito, sa ilalim ng impluwensya ng mga enzyme na ginawa ng bituka microflora, ang glucuronide bond ay nasira. Ang inilabas na libreng bilirubin ay nababawasan upang bumuo ng unang mesobilirubin at pagkatapos ay mesobilinogen (urobilinogen) sa maliit na bituka. Karaniwan, ang isang tiyak na bahagi ng mesobilinogen ay nasisipsip sa maliit na bituka at sa itaas na bahagi ng colon, sa pamamagitan ng sistema. portal na ugat pumapasok sa atay, kung saan ito ay halos ganap na nawasak (sa pamamagitan ng oksihenasyon), nagiging dipyrrolic compound - propent-diopent at mesobileucane.
Ang mesobilinogen (urobilinogen) ay hindi pumapasok sa pangkalahatang sirkulasyon. Ang bahagi nito, kasama ang mga produkto ng pagkasira, ay muling ipinadala sa lumen ng bituka bilang bahagi ng apdo (enterohepotic circulation). Gayunpaman, kahit na may pinakamaliit na pagbabago sa atay, ito pag-andar ng hadlang ay higit na "tinatanggal" at ang mesobilinogen ay unang pumapasok sa pangkalahatang sirkulasyon ng dugo at pagkatapos ay sa ihi. Ang karamihan nito ay nakadirekta mula sa maliit na bituka sa makapal, kung saan sa ilalim ng impluwensya ng anaerobic microflora (Escherichia coli at iba pang bakterya) ito ay sumasailalim sa karagdagang pagbawas sa pagbuo ng stercobilinogen. Ang nagreresultang stercobilinogen (araw-araw na halaga 100-200 mg) ay halos ganap na excreted sa feces. Sa hangin, nag-oxidize ito at nagiging stercobilin, na isa sa mga pigment ng feces. Ang isang maliit na bahagi ng stercobilinogen ay nasisipsip sa pamamagitan ng mauhog lamad ng malaking bituka sa inferior vena cava system, na inihatid sa dugo sa mga bato at pinalabas sa ihi.
Kaya sa ihi malusog na tao Walang mesobilinogen (urobilinogen), ngunit naglalaman ito ng ilang stercobilin (na kadalasang maling tinatawag na "urobilin")
Upang matukoy ang nilalaman ng bilirubin sa serum ng dugo (plasma), kemikal at physico-chemical na pamamaraan pag-aaral, kabilang ang colorimetric, spectrophotometric (manual at automated), chromatographic, fluorimetric at ilang iba pa.
Ang isa sa mga mahalagang subjective na palatandaan ng isang disorder ng metabolismo ng pigment ay ang hitsura ng jaundice, na kadalasang napapansin kapag ang antas ng bilirubin sa dugo ay 27-34 µmol/l o higit pa. Ang mga sanhi ng hyperbilirubinemia ay maaaring: 1) tumaas na hemolysis ng mga pulang selula ng dugo (higit sa 80% kabuuang bilirubin kinakatawan ng unconjugated pigment); 2) may kapansanan sa paggana ng selula ng atay at 3) naantala ang pag-agos ng apdo (ang hyperbilirubinemia ay hepatic na pinagmulan kung higit sa 80% ng kabuuang bilirubin ay conjugated bilirubin). Sa unang kaso, pinag-uusapan nila ang tinatawag na hemolytic jaundice, sa pangalawa - tungkol sa parenchymal jaundice (maaaring sanhi ng namamana na mga depekto sa mga proseso ng transportasyon ng bilirubin at glucuronidation nito), sa pangatlo - tungkol sa mekanikal (o nakahahadlang). , congestive) paninilaw ng balat.
May parenchymal form ng jaundice Ang mga mapanirang-dystrophic na pagbabago ay napapansin sa mga selulang parenchymal ng atay at mga infiltrative sa stroma, na humahantong sa pagtaas ng presyon sa atay mga duct ng apdo. Ang pagwawalang-kilos ng bilirubin sa atay ay pinadali din ng isang matalim na pagpapahina ng mga metabolic na proseso sa mga apektadong hepatocytes, na nawawalan ng kakayahang normal na magsagawa ng iba't ibang mga biochemical at physiological na proseso, lalo na, ilipat ang nakagapos na bilirubin mula sa mga cell patungo sa apdo laban sa isang gradient ng konsentrasyon. Ang pagtaas sa konsentrasyon ng conjugated bilirubin sa dugo ay humahantong sa hitsura nito sa ihi.
Ang pinaka "pino" na tanda ng pinsala sa atay sa hepatitis ay ang hitsura mesobilinogen(urobilinogen) sa ihi.
Sa parenchymal jaundice, ang konsentrasyon ng nakatali (conjugated) bilirubin sa dugo ay tataas pangunahin. Ang nilalaman ng libreng bilirubin ay tumataas, ngunit sa isang mas mababang lawak.
Ang pathogenesis ng obstructive jaundice ay batay sa pagtigil ng daloy ng apdo sa bituka, na humahantong sa pagkawala ng stercobilinogen mula sa ihi. Sa congestive jaundice, ang nilalaman ng conjugated bilirubin sa dugo ay tumataas pangunahin. Ang extrahepatic cholestatic jaundice ay sinamahan ng isang triad mga klinikal na palatandaan: Kukupas ang kulay ng dumi, maitim na ihi at makating balat. Ang intrahepatic cholestasis ay clinically manifested sa pamamagitan ng pangangati ng balat at jaundice. Sa pananaliksik sa laboratoryo hyperbilirubinemia (dahil sa nauugnay), bilirubinuria, nadagdagan ang alkaline phosphatase na may normal na mga halaga transaminases sa serum ng dugo.
Hemolytic jaundice ay sanhi ng hemolysis ng mga pulang selula ng dugo at, bilang isang resulta, nadagdagan ang pagbuo ng bilirubin. Ang pagtaas ng libreng bilirubin ay isa sa mga pangunahing palatandaan ng hemolytic jaundice.
SA klinikal na kasanayan makilala ang congenital at nakuha na functional hyperbilirubinemia, na sanhi ng isang paglabag sa pag-aalis ng bilirubin mula sa katawan (ang pagkakaroon ng mga depekto sa enzyme at iba pang mga sistema para sa paglipat ng bilirubin sa pamamagitan ng mga lamad ng cell at ang glucuronidation nito sa kanila). Ang Gilbert's syndrome ay isang hereditary benign chronic disease na nangyayari sa katamtamang non-hemolytic unconjugated hyperbilirubinemia. Post-hepatitis hyperbilirubinemia Kalka - nakuha enzyme defect na humahantong sa isang pagtaas sa antas ng libreng bilirubin sa dugo, congenital familial non-hemolytic jaundice ng Crigler - Nayjar (kawalan ng glucuronyltransferase sa hepatocytes), jaundice na may congenital hypothyroidism (thyroxine stimulates ang enzyme glucuronyltransferase system), physiological jaundice ng mga bagong silang, drug jaundice, atbp.
Ang mga kaguluhan sa metabolismo ng pigment ay maaaring sanhi ng mga pagbabago hindi lamang sa mga proseso ng heme decomposition, kundi pati na rin sa pagbuo ng mga precursor nito - porphyrins (cyclic organic compounds batay sa isang porphin ring na binubuo ng 4 na pyrroles na konektado ng methine bridges). Porfiria – pangkat namamana na mga sakit, na sinamahan ng isang genetic deficiency sa aktibidad ng mga enzyme na kasangkot sa biosynthesis ng heme, kung saan ang isang pagtaas sa nilalaman ng porphyrins o ang kanilang mga precursor ay napansin sa katawan, na nagiging sanhi ng isang bilang ng mga klinikal na palatandaan (labis na pagbuo ng mga produktong metabolic, nagiging sanhi ng pag-unlad ng mga sintomas ng neurological at (o) pagtaas ng photosensitivity ng balat).
Ang pinakamalawak na ginagamit na mga pamamaraan para sa pagtukoy ng bilirubin ay batay sa pakikipag-ugnayan nito sa isang diazoreagent (Ehrlich's reagent). Ang pamamaraang Jendrassik-Grof ay naging laganap. Sa pamamaraang ito, ang pinaghalong caffeine at sodium benzoate sa acetate buffer ay ginagamit bilang isang "liberator" ng bilirubin. Ang enzymatic na pagpapasiya ng bilirubin ay batay sa oksihenasyon nito sa pamamagitan ng bilirubin oxidase. Posible upang matukoy ang unconjugated bilirubin sa pamamagitan ng iba pang mga pamamaraan ng enzymatic oxidation.
Sa kasalukuyan, ang pagpapasiya ng bilirubin gamit ang mga pamamaraan ng "dry chemistry" ay nagiging laganap, lalo na sa mabilis na mga diagnostic.
Mga bitamina.
Ang mga bitamina ay mahahalagang sangkap na mababa ang molekular na pumapasok sa katawan na may pagkain mula sa labas at kasangkot sa regulasyon ng mga prosesong biochemical sa antas ng enzyme.
Mga pagkakatulad at pagkakaiba sa pagitan ng mga bitamina at hormone.
Pagkakatulad- umayos ang metabolismo sa katawan ng tao sa pamamagitan ng mga enzyme:
· Mga bitamina ay bahagi ng mga enzyme at mga coenzymes o cofactor;
· Mga hormone o kinokontrol ang aktibidad ng mga umiiral na enzyme sa cell, o mga inducers o repressors sa biosynthesis ng mga kinakailangang enzymes.
Pagkakaiba:
· Mga bitamina- mababang molekular na timbang mga organikong compound, mga exogenous na salik na kumokontrol sa metabolismo at nagmumula sa pagkain mula sa labas.
· Mga hormone– mataas na molekular na timbang na mga organikong compound, endogenous na mga kadahilanan, na synthesize sa mga glandula ng endocrine ng katawan bilang tugon sa mga pagbabago sa panlabas o panloob na kapaligiran katawan ng tao, at kinokontrol din ang metabolismo.
Ang mga bitamina ay inuri sa:
1. Natutunaw sa taba: A, D, E, K, A.
2. Nalulusaw sa tubig: pangkat B, PP, H, C, THFA (tetrahydrofolic acid), pantothenic acid(B 3), P (rutin).
Bitamina A (retinol, antixerophthalmic) - ang kemikal na istraktura ay kinakatawan ng isang β-ionone ring at 2 isoprene residues; Ang pangangailangan ng katawan ay 2.5-30 mg bawat araw.
Ang pinakaunang at tiyak na tanda hypovitaminosis A - hemeralopia (pagkabulag sa gabi) - may kapansanan sa takip-silim na paningin. Nangyayari dahil sa kakulangan visual na pigment- rhodopsin. Ang Rhodopsin ay naglalaman ng retinal (bitamina A aldehyde) bilang isang aktibong grupo - na matatagpuan sa mga retinal rod. Nakikita ng mga cell na ito (rods) ang mga signal ng liwanag na mababa ang intensity.
Rhodopsin = opsin (protina) + cis-retinal.
Kapag ang rhodopsin ay nasasabik sa pamamagitan ng liwanag, ang cis-retinal, bilang resulta ng mga enzymatic rearrangements sa loob ng molekula, ay nagiging all-trans-retinal (sa liwanag). Ito ay humahantong sa isang conformational rearrangement ng buong rhodopsin molecule. Ang Rhodopsin ay naghihiwalay sa opsin at trans-retinal, na isang trigger na nagpapasigla sa mga dulo optic nerve isang salpok na pagkatapos ay ipinapadala sa utak.
Sa dilim, bilang isang resulta ng mga reaksyon ng enzymatic, ang trans-retinal ay binago pabalik sa cis-retinal at, pagsasama sa opsin, ay bumubuo ng rhodopsin.
Ang bitamina A ay nakakaapekto rin sa mga proseso ng paglaki at pag-unlad takip ng epithelium. Samakatuwid, na may kakulangan sa bitamina, ang pinsala sa balat, mauhog na lamad at mata ay sinusunod, na nagpapakita ng sarili sa pathological keratinization ng balat at mauhog na lamad. Ang mga pasyente ay nagkakaroon ng xerophthalmia - pagkatuyo ng kornea ng mata, dahil ang lacrimal canal ay naharang bilang isang resulta ng keratinization ng epithelium. Dahil ang mata ay tumigil sa paghuhugas ng mga luha, na may bactericidal effect, conjunctivitis, ulceration at paglambot ng kornea - keratomalacia - bumuo. Sa kakulangan ng bitamina A, maaari ring magkaroon ng pinsala sa gastrointestinal mucosa, respiratory at genitourinary tract. Ang paglaban ng lahat ng mga tisyu sa mga impeksyon ay may kapansanan. Sa pag-unlad ng kakulangan sa bitamina sa pagkabata, nangyayari ang pagpapahinto ng paglago.
Sa kasalukuyan, ang pakikilahok ng bitamina A sa pagprotekta sa mga lamad ng cell mula sa mga oxidant ay ipinakita - iyon ay, ang bitamina A ay may isang antioxidant function.
Mga lipid ay tinatawag na mga taba na pumapasok sa katawan kasama ng pagkain at nabubuo sa atay. Ang dugo (plasma o serum) ay naglalaman ng 3 pangunahing klase ng mga lipid: triglycerides (TG), cholesterol (CS) at mga ester nito, phospholipids (PL).
Ang mga lipid ay nakakaakit ng tubig, ngunit karamihan sa kanila ay hindi natutunaw sa dugo. Ang mga ito ay dinadala sa isang estado na nakatali sa protina (sa anyo ng mga lipoprotein o, sa madaling salita, lipoproteins). Ang mga lipoprotein ay naiiba hindi lamang sa komposisyon, kundi pati na rin sa laki at density, ngunit ang kanilang istraktura ay halos pareho. gitnang bahagi(core) ay kinakatawan ng kolesterol at mga ester nito, mga fatty acid, triglyceride. Ang shell ng molekula ay binubuo ng mga protina (apoprotein) at mga lipid na nalulusaw sa tubig (phospholipids at non-esterified cholesterol). Ang panlabas na bahagi ng apoproteins ay may kakayahang bumuo ng mga bono ng hydrogen na may mga molekula ng tubig. Kaya, ang mga lipoprotein ay maaaring bahagyang matunaw sa taba at bahagyang sa tubig.
Ang mga chylomicron, pagkatapos na makapasok sa dugo, ay bumagsak sa glycerol at fatty acid, na nagreresulta sa pagbuo ng mga lipoprotein. Ang mga residue ng chylomicron na naglalaman ng kolesterol ay pinoproseso sa atay.
Ang kolesterol at triglyceride ay nabubuo sa atay sa napakababang density ng lipoprotein (VLDL), na naglalabas ng ilan sa mga triglyceride sa peripheral tissue, habang ang natitira ay babalik sa atay at na-convert sa low-density lipoproteins (LDL).
Ang L PN II ay mga transporter ng kolesterol para sa mga peripheral tissue, na ginagamit upang bumuo ng mga lamad ng cell at mga metabolic na reaksyon. Sa kasong ito, ang non-esterified cholesterol ay pumapasok sa plasma ng dugo at nagbubuklod sa high-density lipoproteins (HDL). Ang esterified cholesterol (nakatali sa mga ester) ay na-convert sa VLDL. Pagkatapos ay umuulit ang cycle.
Ang dugo ay naglalaman din ng intermediate density lipoproteins (IDL), na mga labi ng chylomicrons at VLDL at naglalaman ng malaking halaga ng kolesterol. Ang DILI sa mga selula ng atay na may partisipasyon ng lipase ay na-convert sa LDL.
Ang plasma ng dugo ay naglalaman ng 3.5-8 g/l ng mga lipid. Ang pagtaas sa mga antas ng lipid ng dugo ay tinatawag na hyperlipidemia, at ang pagbaba ay tinatawag na hypolipidemia. Ang tagapagpahiwatig ng kabuuang lipid ng dugo ay hindi nagbibigay ng isang detalyadong larawan ng estado ng taba metabolismo sa katawan.
Ang dami ng pagpapasiya ng mga tiyak na lipid ay may kahalagahan sa diagnostic. Ang komposisyon ng lipid ng plasma ng dugo ay ipinakita sa talahanayan.
Lipid na komposisyon ng plasma ng dugo
| Lipid fraction | Normal na tagapagpahiwatig | |
| Pangkalahatang mga lipid | 4.6-10.4 mmol/l | |
| Phospholipids | 1.95-4.9 mmol/l | |
| Lipid phosphorus | 1.97-4.68 mmol/l | |
| Mga neutral na taba | 0-200 mg% | |
| Triglyceride | 0.565-1.695 mmol/l (serum) | |
| Non-esterified fatty acids | 400-800 mmol/l | |
| Libreng mga fatty acid | 0.3-0.8 µmol/l | |
| Kabuuang kolesterol (may mga pamantayang partikular sa edad) | 3.9-6.5 mmol/l (pinag-isang paraan) | |
| Libreng kolesterol | 1.04-2.33 mmol/l | |
| Mga ester ng kolesterol | 2.33-3.49 mmol/l | |
| HDL | M | 1.25-4.25 g/l |
| AT | 2.5-6.5 g/l | |
| LDL | 3-4.5 g/l | |
Ang mga dyslipidemia ay nahahati sa pangunahin, na nauugnay sa mga inborn error ng metabolismo, at pangalawa. Ang mga sanhi ng pangalawang dyslipidemia ay pisikal na hindi aktibo at labis na nutrisyon, alkoholismo, diabetes mellitus, hyperthyroidism, liver cirrhosis, at talamak na pagkabigo sa bato. Bilang karagdagan, maaari silang bumuo sa panahon ng paggamot na may glucocorticosteroids, B-blockers, progestins at estrogens. Ang pag-uuri ng dyslipidemias ay ipinakita sa talahanayan.
Pag-uuri ng dyslipidemias
| Uri | Tumaas na antas ng dugo | |
| Mga lipoprotein | Mga lipid | |
| ako | Mga chylomicron | Kolesterol, triglycerides |
| Naka-on | LDL | Cholesterol (hindi palaging) |
| Uri | Tumaas na antas ng dugo | |
| Mga lipoprotein | Mga lipid | |
| Nb | LDL, VLDL | Kolesterol, triglycerides |
| III | VLDL, LPPP | Kolesterol, triglycerides |
| IV | VLDL | Cholesterol (hindi palaging), triglycerides |
| V | Mga Chylomicron, VLDL | Kolesterol, triglycerides |
– isang pangkat ng magkakaiba kemikal na istraktura at pisikal at kemikal na mga katangian ng mga sangkap. Sa serum ng dugo ang mga ito ay pangunahing kinakatawan ng mga fatty acid, triglycerides, kolesterol at phospholipids.
Triglyceride ay ang pangunahing anyo ng pag-iimbak ng lipid sa adipose tissue at transportasyon ng lipid sa dugo. Ang isang pag-aaral ng mga antas ng triglyceride ay kinakailangan upang matukoy ang uri ng hyperlipoproteinemia at masuri ang panganib ng pagbuo mga sakit sa cardiovascular.
Cholesterol gumaganap mahahalagang tungkulin: kasama sa mga lamad ng cell, ay isang precursor ng bile acids, steroid hormones at bitamina D, at gumaganap bilang isang antioxidant. Humigit-kumulang 10% ng populasyon ng Russia ang mayroon tumaas na antas kolesterol sa dugo. Ang kundisyong ito ay asymptomatic at maaaring humantong sa malubhang sakit(atherosclerotic vascular lesions, coronary heart disease).
Ang mga lipid ay hindi matutunaw sa tubig, kaya dinadala sila ng serum ng dugo kasama ng mga protina. Ang mga lipid+protein complex ay tinatawag lipoprotein. At ang mga protina na kasangkot sa transportasyon ng lipid ay tinatawag mga apoprotein.
Mayroong ilang mga klase sa suwero ng dugo lipoprotein: chylomicrons, very low density lipoproteins (VLDL), low density lipoproteins (LDL) at high density lipoproteins (HDL).
Ang bawat bahagi ng lipoprotein ay may sariling pag-andar. synthesized sa atay at transport pangunahing triglyceride. naglalaro mahalagang papel sa atherogenesis. Low-density lipoproteins (LDL) mayaman sa kolesterol, naghahatid ng kolesterol sa mga peripheral tissue. Ang mga antas ng VLDL at LDL ay nagtataguyod ng pagtitiwalag ng kolesterol sa vascular wall at itinuturing na mga atherogenic na kadahilanan. High density lipoproteins (HDL) lumahok sa reverse transport ng kolesterol mula sa mga tisyu, inaalis ito mula sa mga overloaded na mga selula ng tisyu at inililipat ito sa atay, na "ginagamit" ito at nag-aalis nito mula sa katawan. Mataas Antas ng HDL ay itinuturing na isang antiatherogenic factor (pinoprotektahan ang katawan mula sa atherosclerosis).
Ang papel na ginagampanan ng kolesterol at ang panganib ng pagbuo ng atherosclerosis ay nakasalalay sa kung aling mga fraction ng lipoprotein ito kasama. Upang masuri ang ratio ng atherogenic at antiatherogenic lipoproteins, ginagamit ito atherogenic index.
Apolipoproteins- Ito ay mga protina na matatagpuan sa ibabaw ng lipoproteins.
Apolipoprotein A (ApoA protein) ay ang pangunahing bahagi ng protina ng lipoproteins (HDL), na nagdadala ng kolesterol mula sa mga peripheral tissue cells patungo sa atay.
Apolipoprotein B (ApoB protein) ay bahagi ng lipoproteins na nagdadala ng mga lipid sa mga peripheral tissue.
Ang pagsukat ng konsentrasyon ng apolipoprotein A at apolipoprotein B sa serum ng dugo ay nagbibigay ng pinaka-tumpak at hindi malabo na pagpapasiya ng ratio ng mga atherogenic at antiatherogenic na katangian ng lipoproteins, na tinasa bilang ang panganib ng pagbuo ng mga atherosclerotic vascular lesyon at coronary heart disease sa susunod na limang taon .
Sa pag-aaral profile ng lipid kasama ang mga sumusunod na indicator: cholesterol, triglycerides, VLDL, LDL, HDL, atherogenicity coefficient, cholesterol/triglycerides ratio, glucose. Nagbibigay ang profile na ito buong impormasyon tungkol sa metabolismo ng lipid, ay nagbibigay-daan sa iyo upang matukoy ang mga panganib ng pagbuo ng atherosclerotic vascular lesions, coronary heart disease, kilalanin ang pagkakaroon ng dyslipoproteinemia at i-type ito, at gayundin, kung kinakailangan, piliin ang tamang lipid-lowering therapy.
Mga indikasyon
Tumaas na konsentrasyonkolesterol Mayroon itong halaga ng diagnostic na may pangunahing familial hyperlipidemia (mga namamana na anyo ng sakit); pagbubuntis, hypothyroidism, nephrotic syndrome, obstructive liver disease, pancreatic disease ( talamak na pancreatitis, malignant neoplasms), Diabetes mellitus.
Nabawasan ang konsentrasyonkolesterol may diagnostic value para sa mga sakit sa atay (cirrhosis, hepatitis), gutom, sepsis, hyperthyroidism, megaloblastic anemia.
Tumaas na konsentrasyontriglyceride may diagnostic value para sa pangunahing hyperlipidemia (mga namamana na anyo ng sakit); labis na katabaan, labis na pagkonsumo carbohydrates, alkoholismo, diabetes mellitus, hypothyroidism, nephrotic syndrome, talamak pagkabigo sa bato, gout, talamak at talamak na pancreatitis.
Nabawasan ang konsentrasyontriglyceride may diagnostic value para sa hypolipoproteinemia, hyperthyroidism, malabsorption syndrome.
Very low density lipoproteins (VLDL) ginagamit upang masuri ang dyslipidemia (mga uri ng IIb, III, IV at V). Ang mataas na konsentrasyon ng VLDL sa serum ng dugo ay hindi direktang nagpapakita ng mga atherogenic na katangian ng serum.
Tumaas na konsentrasyonlow density lipoprotein (LDL) may diagnostic value para sa pangunahing hypercholesterolemia, dislipoproteinemia (uri IIa at IIb); para sa labis na katabaan, obstructive jaundice, nephrotic syndrome, diabetes mellitus, hypothyroidism. Ang pagpapasiya ng mga antas ng LDL ay kinakailangan para sa pagrereseta ng pangmatagalang paggamot, ang layunin kung saan ay upang mabawasan ang mga konsentrasyon ng lipid.
Tumaas na konsentrasyon may diagnostic value para sa liver cirrhosis at alcoholism.
Nabawasan ang konsentrasyonhigh density lipoprotein (HDL) may diagnostic value para sa hypertriglyceridemia, atherosclerosis, nephrotic syndrome, diabetes mellitus, talamak na impeksyon, labis na katabaan, paninigarilyo.
Pagpapasiya ng antas apolipoprotein A ipinahiwatig para sa maagang pagtatasa ng panganib ng coronary heart disease; pagkilala sa mga pasyente na may namamana na predisposisyon sa atherosclerosis sa isang medyo sa murang edad; pagsubaybay sa paggamot na may mga gamot na nagpapababa ng lipid.
Tumaas na konsentrasyonapolipoprotein A may diagnostic value para sa mga sakit sa atay at pagbubuntis.
Nabawasan ang konsentrasyonapolipoprotein A ay may diagnostic na halaga para sa nephrotic syndrome, talamak na pagkabigo sa bato, triglyceridemia, cholestasis, sepsis.
Halaga ng diagnosticapolipoprotein B- ang pinakatumpak na tagapagpahiwatig ng panganib ng pagbuo ng mga sakit sa cardiovascular, ay ang pinaka-sapat na tagapagpahiwatig ng pagiging epektibo ng statin therapy.
Tumaas na konsentrasyonapolipoprotein B ay may diagnostic value para sa dyslipoproteinemia (IIa, IIb, IV at V type), coronary heart disease, diabetes mellitus, hypothyroidism, nephrotic syndrome, mga sakit sa atay, Itsenko-Cushing syndrome, porphyria.
Nabawasan ang konsentrasyonapolipoprotein B may diagnostic value para sa hyperthyroidism, malabsorption syndrome, talamak na anemya, nagpapaalab na sakit joints, multiple myeloma.
Pamamaraan
Ang pagpapasiya ay isinasagawa sa "Architect 8000" biochemical analyzer.
Paghahanda
para pag-aralan ang lipid profile (kolesterol, triglycerides, HDL-C, LDL-C, Apo-proteins ng lipoproteins (Apo A1 at Apo-B)
Ito ay kinakailangan upang pigilin ang sarili mula sa pisikal na aktibidad, pag-inom ng alak, paninigarilyo at mga gamot, mga pagbabago sa diyeta nang hindi bababa sa dalawang linggo bago ang koleksyon ng dugo.
Ang dugo ay kinukuha lamang sa walang laman na tiyan, 12-14 na oras pagkatapos ng huling pagkain.
Mas mabuti pagtanggap sa umaga mga gamot isagawa pagkatapos gumuhit ng dugo (kung maaari).
Ang mga sumusunod na pamamaraan ay hindi dapat gawin bago mag-donate ng dugo: mga iniksyon, pagbutas, pangkalahatang masahe katawan, endoscopy, biopsy, ECG, x-ray na pagsusuri, lalo na sa pagpapakilala ng isang contrast agent, dialysis.
Kung ito ay hindi gaanong mahalaga mag-ehersisyo ng stress– Kailangan mong magpahinga ng hindi bababa sa 15 minuto bago mag-donate ng dugo.
Ang pagsusuri sa lipid ay hindi ginagawa kapag Nakakahawang sakit, dahil may pagbaba sa antas ng kabuuang kolesterol at HDL-C, anuman ang uri ng nakakahawang ahente o ang klinikal na kondisyon ng pasyente. Ang profile ng lipid ay dapat lamang suriin pagkatapos magaling na pasyente.
Napakahalaga na ang mga rekomendasyong ito ay mahigpit na sinusunod, dahil sa kasong ito lamang makukuha ang maaasahang mga resulta ng pagsusuri sa dugo.
Para sa quantitative determination ng kabuuang lipids sa blood serum, ang colorimetric na paraan na may phosphovanillin reagent ay kadalasang ginagamit. Ang mga karaniwang lipid ay tumutugon pagkatapos ng hydrolysis na may sulfuric acid na may phosphovanillin reagent upang bumuo ng pulang kulay. Ang intensity ng kulay ay proporsyonal sa nilalaman ng kabuuang lipid sa serum ng dugo.
1. Magdagdag ng mga reagents sa tatlong test tubes ayon sa sumusunod na diagram:
2. Paghaluin ang laman ng mga test tube at iwanan sa dilim sa loob ng 40-60 minuto. (ang kulay ng solusyon ay nagbabago mula dilaw hanggang rosas).
3. Paghaluin muli at sukatin ang optical density sa 500-560 nm (berdeng filter) laban sa isang blind sample sa isang cuvette na may kapal ng layer na 5 mm.
4. Kalkulahin ang dami ng kabuuang lipid gamit ang formula:
kung saan ang D 1 ay ang extinction ng experimental sample sa cuvette;
D 2 - pagkalipol ng solusyon sa pagkakalibrate ng mga lipid sa cuvette;
Ang X ay ang konsentrasyon ng kabuuang lipid sa karaniwang solusyon.
Tukuyin ang konsepto ng "kabuuang mga lipid". Ihambing ang halaga na iyong nakuha sa mga normal na halaga. Anong mga proseso ng biochemical ang maaaring hatulan ng tagapagpahiwatig na ito?
Eksperimento 4. Pagpapasiya ng nilalaman ng b- at pre-b-lipoproteins sa serum ng dugo.
2. Set ng mga pipette.
3. Pamalo ng salamin.
5. Cuvettes, 0.5 cm.
Mga reagents. 1. Serum ng dugo.
2. Calcium chloride, 0.025 M na solusyon.
3. Heparin, 1% na solusyon.
4. Distilled water.
1. Ibuhos ang 2 ml ng 0.025 M calcium chloride sa isang test tube at magdagdag ng 0.2 ml ng blood serum.
2. Paghaluin at sukatin ang optical density ng sample (D 1) sa FEC-e sa wavelength na 630-690 nm (red filter) sa isang cuvette na may kapal na layer na 0.5 cm laban sa distilled water. Itala ang optical density D 1 na halaga.
3. Pagkatapos ay magdagdag ng 0.04 ml ng 1% heparin solution (1000 units sa 1 ml) sa cuvette at sukatin muli ang optical density D2 nang eksakto pagkatapos ng 4 na minuto.
Ang pagkakaiba sa mga halaga (D 2 - D 1) ay tumutugma sa optical density dahil sa sediment ng b-lipoproteins.
Kalkulahin ang nilalaman ng b- at pre-b-lipoproteins gamit ang formula:
kung saan ang 12 ay ang coefficient para sa conversion sa g/l.
Ipahiwatig ang lugar ng biosynthesis ng b-lipoproteins. Ano ang tungkulin ng mga ito sa katawan ng tao at hayop? Ihambing ang halaga na iyong nakuha sa mga normal na halaga. Sa anong mga kaso ang mga paglihis mula sa mga normal na halaga ay sinusunod?
Aralin Blg. 16. "Lipid metabolism (bahagi 2)"
Layunin ng aralin: pag-aralan ang mga proseso ng catabolism at anabolism ng mga fatty acid.
MGA TANONG PARA SA PAGSUSULIT:
1. Biochemical na mekanismo ng fatty acid oxidation.
2. Metabolismo ng mga katawan ng ketone: pagbuo, layunin ng biochemical. Anong mga kadahilanan ang nagdudulot ng pag-unlad ng ketosis sa mga hayop?
3. Biochemical na mekanismo ng fatty acid synthesis.
4. Biosynthesis ng triacylglycerols. Ang papel na biochemical ng prosesong ito.
5. Biosynthesis ng phospholipids. Ang papel na biochemical ng prosesong ito.
Petsa ng pagtatapos ________ Punto ____ Lagda ng guro ____________
Eksperimental na gawain.
Eksperimento 1. Ipahayag ang paraan para sa pagtukoy ng mga katawan ng ketone sa ihi, gatas, serum ng dugo (Lestrade test).
Mga device. 1. Rack na may mga test tube.
2. Set ng mga pipette.
3. Pamalo ng salamin.
4. Salain na papel.
Mga reagents. 1. Reagent powder.
3. Serum ng dugo.
4. Gatas.
1. Maglagay ng maliit na halaga (0.1-0.2 g) ng reagent powder sa filter paper sa dulo ng scalpel.
2. Maglipat ng ilang patak ng blood serum sa reagent powder.
Ang pinakamababang antas ng mga katawan ng ketone sa dugo na nagbibigay positibong reaksyon, katumbas ng 10 mg/100 ml (10 mg%). Ang rate ng pag-unlad ng kulay at intensity nito ay proporsyonal sa konsentrasyon ng mga katawan ng ketone sa sample ng pagsubok: kung ang kulay ng violet ay lilitaw kaagad - ang nilalaman ay 50-80 mg% o higit pa; kung ito ay lilitaw pagkatapos ng 1 minuto, ang sample ay naglalaman ng 30-50 mg%; ang pagbuo ng isang malabong kulay pagkatapos ng 3 minuto ay nagpapahiwatig ng pagkakaroon ng 10-30 mg% ketone na katawan.
Dapat tandaan na ang pagsubok ay higit sa 3 beses na mas sensitibo kapag tinutukoy ang aceto acetic acid kaysa sa acetone. Sa lahat ng mga katawan ng ketone sa suwero ng tao, ang acetoacetic acid ay nangingibabaw, ngunit sa dugo ng malusog na mga baka, 70-90% ng mga katawan ng ketone ay b-hydroxybutyric acid, at sa gatas ito ay nagkakahalaga ng 87-92%.
Gumawa ng konklusyon batay sa mga resulta ng iyong pananaliksik. Ipaliwanag kung bakit mapanganib sa katawan ng tao at hayop ang labis na pagbuo ng mga katawan ng ketone?
Ang mga ito ay may iba't ibang densidad at mga tagapagpahiwatig ng metabolismo ng lipid. Mayroong iba't ibang mga pamamaraan para sa dami ng pagpapasiya ng kabuuang lipid: colorimetric, nephelometric.
Prinsipyo ng pamamaraan. Ang mga produkto ng hydrolysis ng mga unsaturated lipid ay bumubuo ng isang pulang tambalan na may phosphovanillin reagent, ang intensity ng kulay na kung saan ay direktang proporsyonal sa nilalaman ng kabuuang mga lipid.
Karamihan sa mga lipid ay hindi matatagpuan sa dugo sa isang libreng estado, ngunit bilang bahagi ng protina-lipid complexes: chylomicrons, α-lipoproteins, β-lipoproteins. Maaaring paghiwalayin ang mga lipoprotein sa pamamagitan ng iba't ibang pamamaraan: centrifugation in mga solusyon sa asin iba't ibang densidad, electrophoresis, thin layer chromatography. Sa panahon ng ultracentrifugation, ang mga chylomicron at lipoprotein ng iba't ibang densidad ay nakahiwalay: mataas (HDL - α-lipoproteins), mababa (LDL - β-lipoproteins), napakababa (VLDL - pre-β-lipoproteins), atbp.
Ang mga fraction ng lipoprotein ay naiiba sa dami ng protina, ang kamag-anak na molekular na timbang ng mga lipoprotein, at ang porsyento ng mga indibidwal na sangkap ng lipid. Kaya, ang α-lipoproteins, na naglalaman ng isang malaking halaga ng protina (50-60%), ay may mas mataas na kamag-anak na density (1.063-1.21), habang ang β-lipoproteins at pre-β-lipoproteins ay naglalaman ng mas kaunting protina at isang malaking halaga ng mga lipid - hanggang sa 95% ng kabuuang kamag-anak na molekular na timbang at mababang kamag-anak na density (1.01-1.063).
Prinsipyo ng pamamaraan. Kapag ang serum LDL ay nakikipag-ugnayan sa heparin reagent, lumilitaw ang labo, ang intensity nito ay tinutukoy ng photometrically. Ang heparin reagent ay pinaghalong heparin at calcium chloride.
Materyal na pinag-aaralan: suwero ng dugo.
Mga reagents: 0.27% CaCl 2 solution, 1% heparin solution.
Kagamitan: micropipette, FEC, cuvette na may haba ng optical path na 5 mm, mga test tube.
PAG-UNLAD. Magdagdag ng 2 ml ng 0.27% CaCl 2 solution at 0.2 ml ng blood serum sa isang test tube at ihalo. Tukuyin ang optical density ng solusyon (E 1) laban sa isang 0.27% CaCl 2 na solusyon sa mga cuvettes gamit ang pulang filter (630 nm). Ang solusyon mula sa cuvette ay ibinuhos sa isang test tube, 0.04 ml ng isang 1% heparin solution ay idinagdag sa isang micropipette, halo-halong, at eksaktong 4 na minuto mamaya, ang optical density ng solusyon (E 2) ay tinutukoy muli sa ilalim ng parehong kundisyon.
Ang pagkakaiba sa optical density ay kinakalkula at pinarami ng 1000 - isang empirical coefficient na iminungkahi ni Ledvina, dahil ang pagbuo ng isang calibration curve ay nauugnay sa isang bilang ng mga kahirapan. Ang sagot ay ipinahayag sa g/l.
x(g/l) = (E 2 - E 1) 1000.
. Ang nilalaman ng LDL (b-lipoproteins) sa dugo ay nag-iiba depende sa edad, kasarian at karaniwan ay 3.0-4.5 g/l. Ang isang pagtaas sa konsentrasyon ng LDL ay sinusunod sa atherosclerosis, obstructive jaundice, talamak na hepatitis, malalang sakit atay, diabetes, glycogenosis, xanthomatosis at labis na katabaan, nabawasan sa b-plasmocytoma. Ang average na nilalaman ng LDL cholesterol ay tungkol sa 47%.
Pagpapasiya ng kabuuang kolesterol sa serum ng dugo batay sa reaksyon ng Liebermann-Burkhard (paraan ng Ilk)
Nagmumula ang exogenous cholesterol sa halagang 0.3-0.5 g produktong pagkain, at ang endogenous ay synthesize sa katawan sa halagang 0.8-2 g bawat araw. Lalo na maraming kolesterol ang na-synthesize sa atay, bato, adrenal glands, at arterial wall. Ang kolesterol ay na-synthesize mula sa 18 molekula ng acetyl-CoA, 14 molekula ng NADPH, 18 molekula ng ATP.
Kapag ang acetic anhydride at concentrated sulfuric acid ay idinagdag sa serum ng dugo, ang likido ay nagiging sunud-sunod na pula, asul at sa wakas. kulay berde. Ang reaksyon ay sanhi ng pagbuo ng green sulfonic acid cholesterylene.
Mga reagents: Liebermann-Burkhard reagent (isang pinaghalong glacial acetic acid, acetic anhydride at concentrated sulfuric acid sa ratio na 1:5:1), standard (1.8 g/l) cholesterol solution.
Kagamitan: mga tuyong test tube, tuyong pipette, FEC, cuvettes na may haba ng optical path na 5 mm, termostat.
PAG-UNLAD. Ang lahat ng mga test tube, pipette, cuvettes ay dapat na tuyo. Kailangan mong maging maingat kapag nagtatrabaho sa Liebermann-Burkhard reagent. Ang 2.1 ml ng Liebermann-Burkhard reagent ay inilalagay sa isang tuyong test tube, ang 0.1 ml ng non-hemolyzed blood serum ay idinagdag nang napakabagal sa dingding ng test tube, ang test tube ay inalog nang malakas, at pagkatapos ay na-thermostat sa loob ng 20 minuto sa 37ºC . Ang isang esmeralda berdeng kulay ay bubuo, na na-colorimeter sa FEC na may pulang filter (630-690 nm) laban sa Liebermann-Burkhard reagent. Ang optical density na nakuha sa FEC ay ginagamit upang matukoy ang konsentrasyon ng kolesterol ayon sa graph ng pagkakalibrate. Ang nahanap na konsentrasyon ng kolesterol ay pinarami ng 1000, dahil ang 0.1 ml ng serum ay kinuha sa eksperimento. Ang conversion factor sa SI units (mmol/l) ay 0.0258. Normal na nilalaman kabuuang kolesterol (libre at esterified) sa blood serum 2.97-8.79 mmol/l (115-340 mg%).
Pagbuo ng calibration graph. Mula sa isang karaniwang solusyon sa kolesterol, kung saan ang 1 ml ay naglalaman ng 1.8 mg ng kolesterol, kumuha ng 0.05; 0.1; 0.15; 0.2; 0.25 ml at inayos sa dami ng 2.2 ml na may Liebermann-Burkhard reagent (2.15; 2.1; 2.05; 2.0; 1.95 ml, ayon sa pagkakabanggit). Ang halaga ng kolesterol sa sample ay 0.09; 0.18; 0.27; 0.36; 0.45 mg. Ang nagreresultang karaniwang mga solusyon sa kolesterol, pati na rin ang mga tubo ng pagsubok, ay inalog nang masigla at inilagay sa isang termostat sa loob ng 20 minuto, pagkatapos ay i-photometer ang mga ito. Ang graph ng pagkakalibrate ay itinayo batay sa mga halaga ng pagkalipol na nakuha bilang resulta ng photometry ng mga karaniwang solusyon.
Klinikal at diagnostic na halaga. Kung ang metabolismo ng lipid ay nagambala, ang kolesterol ay maaaring maipon sa dugo. Ang pagtaas ng kolesterol sa dugo (hypercholesterolemia) ay sinusunod sa atherosclerosis, diabetes mellitus, obstructive jaundice, nephritis, nephrosis (lalo na lipoid nephrosis), hypothyroidism. Ang pagbaba ng kolesterol sa dugo (hypocholesterolemia) ay sinusunod sa anemia, pag-aayuno, tuberculosis, hyperthyroidism, cancer cachexia, parenchymal jaundice, pinsala sa central nervous system, febrile states, kapag pinangangasiwaan.
