Hyperlipidémie (hyperlipémie) - zvýšení koncentrace celkové lipidy jako plazma fyziologický jev lze pozorovat 1-4 hodiny po jídle. Nutriční hyperlipémie je tím výraznější, čím nižší je hladina lipidů v krvi pacienta nalačno.
Koncentrace lipidů v krvi se mění pod řadou patologické stavy:
Nefrotický syndrom lipoidní nefróza, akutní a chronická nefritida;
Biliární cirhóza jater, akutní hepatitida;
Obezita - ateroskleróza;
hypotyreóza;
Pankreatitida atd.
Studium hladin cholesterolu (CH) odráží pouze patologii metabolismu lipidů v těle. Hypercholesterolémie je zdokumentovaný rizikový faktor koronární ateroskleróza. CS je nezbytnou součástí membrány všech buněk; speciální fyzikálně-chemické vlastnosti krystalů CS a konformace jeho molekul přispívají k uspořádanosti a pohyblivosti fosfolipidů v membránách při změnách teploty, což umožňuje membráně být ve stavu přechodné fáze („gel – tekutý krystal“) a konzervujte fyziologické funkce. CS se používá jako prekurzor při biosyntéze steroidních hormonů (gluko- a mineralokortikoidy, pohlavní hormony), vitaminu D 3 a také žlučových kyselin. Obvykle můžeme rozlišit 3 zásoby cholesterolu:
A - rychlá výměna (30 g);
B – pomalá výměna (50 g);
B – velmi pomalá výměna (60 g).
Endogenní cholesterol je syntetizován ve významných množstvích v játrech (80 %). Exogenní cholesterol se do těla dostává jako součást živočišných produktů. Transport cholesterolu z jater do extrahepatálních tkání se provádí
LDL. Odstranění cholesterolu z jater z extrahepatálních tkání do jater je produkováno zralými formami HDL (50 % - LDL, 25 % HDL, 17 % VLDL, 5 % -CM).
Hyperlipoproteinémie a hypercholesterolémie (Fredricksonova klasifikace):
Typ 1 – hyperchylomikronemie;
typ 2 - a - hyper-p-lipoproteinémie, b - hyper-p a hyperpre-p-lipoproteinémie;
typ 3 – dys-β-lipoproteinémie;
typ 4 – hyper-pre-β-lipoproteinémie;
Typ 5 – hyper-pre-β-lipoproteinémie a hyperchylomikronemie.
Nejvíce aterogenní jsou typy 2 a 3.
Fosfolipidy jsou skupinou lipidů obsahující kromě kyseliny fosforečné (esenciální složka) alkohol (obvykle glycerol), zbytky mastných kyselin a dusíkaté báze. V klinické a laboratorní praxi existuje metoda stanovení hladiny celkových fosfolipidů, jejichž hladina se zvyšuje u pacientů s primární a sekundární hyperlipoproteinémií IIa a IIb. K poklesu dochází u řady onemocnění:
Nutriční dystrofie;
tuková degenerace jater,
portální cirhóza;
Progrese aterosklerózy;
Hypertyreóza atd.
Lipidová peroxidace (LPO) je proces volných radikálů, k jehož iniciaci dochází za vzniku reaktivních forem kyslíku - superoxidového iontu O 2 . ; hydroxylový radikál HO . ; hydroperoxidový radikál HO2 . ; singletový kyslík 02; chlornanový ion ClO - . Hlavními substráty LPO jsou polynenasycené mastné kyseliny nacházející se ve struktuře membránových fosfolipidů. Nejsilnějším katalyzátorem jsou ionty železa. SEX je fyziologický proces, který má Důležité pro tělo, protože reguluje propustnost membrán, ovlivňuje dělení a růst buněk, začíná fagosyntézu, je cestou pro biosyntézu určitých biologické látky(prostaglandiny, tromboxany). Úroveň peroxidace lipidů je řízena antioxidačním systémem ( kyselina askorbová, kyselina močováβ-karoten atd.). Ztráta rovnováhy mezi těmito dvěma systémy vede ke smrti buněk a buněčných struktur.
Pro diagnostické účely je zvykem stanovit obsah produktů peroxidace lipidů (dienové konjugáty, malondialdehyd, Schiffovy báze) a koncentraci hlavního přírodního antioxidantu - alfa-tokoferolu v plazmě a červených krvinkách s výpočtem MDA/TF. součinitel. Nedílným testem pro hodnocení LPO je stanovení permeability membrán erytrocytů.
2. Výměna pigmentů soubor složitých přeměn různobarevných látek v lidském a zvířecím těle.
Nejznámějším krevním barvivem je hemoglobin (chromoprotein, který se skládá z proteinové části globinu a prostetické skupiny reprezentované 4 hemy, každý hem se skládá ze 4 pyrrolových jader, která jsou propojena methinovými můstky, ve středu je iont železa s oxidačním stavem 2 +) . Průměrná délka života erytrocytu je 100-110 dní. Na konci tohoto období dochází k destrukci a destrukci hemoglobinu. Proces rozpadu začíná již v cévní řečiště, končí v buněčných elementech systému fagocytárních mononukleárních buněk (Kupfferovy buňky jater, histiocyty pojivové tkáně, plazmatické buňky kostní dřeně). Hemoglobin v cévním řečišti se váže na plazmatický haptoglobin a je zadržován v cévním řečišti, aniž by prošel ledvinovým filtrem. Trypsinovým působením beta řetězce haptoglobinu a konformačními změnami způsobenými jeho vlivem v porfyrinovém kruhu hemu se vytvářejí podmínky pro snadnější destrukci hemoglobinu v buněčných elementech fagocytárního mononukleárního systému. - molekulární zelený pigment verdoglobin(synonyma: verdohemoglobin, choleglobin, pseudohemoglobin) je komplex skládající se z globinu, porušeného porfyrinového kruhového systému a trojmocného železa. Další přeměny vedou ke ztrátě železa a globinu verdoglobinem, v důsledku čehož se porfyrinový kruh rozvine do řetězce a vytvoří se nízkomolekulární zelený žlučový pigment - biliverdin. Téměř celý je enzymaticky obnoven na nejdůležitější červenožlutý pigment žluči - bilirubin, která je běžnou součástí krevní plazmy.Na povrchu plazmatická membrána hepatocyt podléhá disociaci. V tomto případě uvolněný bilirubin tvoří dočasnou asociaci s lipidy plazmatické membrány a pohybuje se přes ni v důsledku aktivity určitých enzymových systémů. K dalšímu průchodu volného bilirubinu do buňky dochází za účasti dvou nosných proteinů v tomto procesu: ligandinu (transportuje hlavní množství bilirubinu) a proteinu Z.
Ligandin a protein Z se nacházejí také v ledvinách a střevech, proto při nedostatečné funkci jater volně kompenzují oslabení detoxikačních procesů v tomto orgánu. Oba jsou docela rozpustné ve vodě, ale postrádají schopnost pohybovat se přes lipidovou vrstvu membrány. Vazbou bilirubinu na kyselinu glukuronovou se inherentní toxicita volného bilirubinu do značné míry ztrácí. Hydrofobní, lipofilní volný bilirubin, snadno se rozpouštějící v membránových lipidech a následně pronikající do mitochondrií, rozpojuje dýchání a oxidativní fosforylaci v nich, narušuje syntézu proteinů, průtok draselných iontů membránou buněk a organel. To má negativní dopad na stav centrály nervový systém, což u pacientů způsobuje řadu charakteristických neurologické příznaky.
Bilirubinové glukuronidy (nebo vázaný, konjugovaný bilirubin), na rozdíl od volného bilirubinu, okamžitě reagují s diazoreagenciem („přímý“ bilirubin). Je třeba mít na paměti, že v krevní plazmě samotné může být bilirubin, který není konjugován s kyselinou glukuronovou, spojen s albuminem nebo ne. Poslední frakce (bilirubin, který není spojen s albuminem, lipidy nebo jinými složkami krve) je nejtoxičtější.
Bilirubinové glukuronidy díky enzymovým systémům membrán přes ně aktivně procházejí (proti koncentračnímu gradientu) do žlučovody, vylučován spolu se žlučí do lumen střeva. V něm dochází vlivem enzymů produkovaných střevní mikroflórou k porušení glukuronidové vazby. Uvolněný volný bilirubin je redukován za vzniku nejprve mezobilirubinu a poté mezobilinogenu (urobilinogenu) v tenkém střevě. Normálně je určitá část mezobilinogenu absorbována v tenkém střevě a v horní části tlustého střeva prostřednictvím systému portální žíla vstupuje do jater, kde je téměř úplně zničen (oxidací) a mění se na dipyrrolové sloučeniny - propent-diopent a mesobileukan.
Mezobilinogen (urobilinogen) se nedostává do celkového oběhu. Část spolu s produkty destrukce je opět posílána do střevního lumen jako součást žluči (enterohepotický oběh). Nicméně, i při těch nejmenších změnách v játrech, to bariérová funkce je z velké části „odstraněn“ a mezobilinogen vstupuje nejprve do celkového krevního oběhu a poté do moči. Převážná část je směrována z tenké střevo do tlustého, kde pod vlivem anaerobní mikroflóry (Escherichia coli a další bakterie) podléhá další redukci za vzniku stercobilinogenu. Výsledný sterkobilinogen (denní množství 100-200 mg) je téměř úplně vyloučen stolicí. Na vzduchu oxiduje a mění se na stercobilin, což je jeden z pigmentů výkalů. Malá část sterkobilinogenu se vstřebává přes sliznici tlustého střeva do systému dolní duté žíly, krví se dodává do ledvin a vylučuje se močí.
Tedy v moči zdravý člověk Neexistuje žádný mezobilinogen (urobilinogen), ale obsahuje nějaký stercobilin (který se často nesprávně nazývá „urobilin“).
Ke stanovení obsahu bilirubinu v krevním séru (plazmě), chemické a fyzikálně-chemické metody studie, včetně kolorimetrických, spektrofotometrických (ručních a automatizovaných), chromatografických, fluorimetrických a některých dalších.
Jedním z důležitých subjektivních příznaků poruchy metabolismu pigmentů je výskyt žloutenky, která se obvykle objevuje při hladině bilirubinu v krvi 27-34 µmol/l a více. Příčiny hyperbilirubinémie mohou být: 1) zvýšená hemolýza červených krvinek (více než 80 % celkový bilirubin reprezentovaný nekonjugovaným pigmentem); 2) zhoršená funkce jaterních buněk a 3) opožděný odtok žluči (hyperbilirubinémie je jaterního původu, pokud více než 80 % celkového bilirubinu tvoří konjugovaný bilirubin). V prvním případě hovoří o tzv. hemolytické žloutence, ve druhém – o parenchymální žloutence (může být způsobena dědičnými vadami v procesech transportu bilirubinu a jeho glukuronidaci), ve třetím – o mechanickém (nebo obstrukčním , městnavý) žloutenka.
S parenchymální formou žloutenky destruktivně-dystrofické změny jsou zaznamenány v parenchymálních buňkách jater a infiltrativní ve stromatu, což vede ke zvýšení tlaku v játrech žlučovody. Stagnaci bilirubinu v játrech napomáhá i prudké oslabení metabolických procesů v postižených hepatocytech, které ztrácejí schopnost normálně provádět různé biochemické a fyziologické procesy, zejména přenášet vázaný bilirubin z buněk do žluči proti koncentračnímu gradientu. Zvýšení koncentrace konjugovaného bilirubinu v krvi vede k jeho výskytu v moči.
Nejjemnějším příznakem poškození jater u hepatitidy je vzhled mezobilinogen(urobilinogen) v moči.
Při parenchymální žloutence se zvyšuje především koncentrace vázaného (konjugovaného) bilirubinu v krvi. Obsah volného bilirubinu se zvyšuje, ale v menší míře.
Patogeneze obstrukční žloutenky je založena na zastavení toku žluči do střeva, což vede k vymizení sterkobilinogenu z moči. Při městnavé žloutence se zvyšuje především obsah konjugovaného bilirubinu v krvi. Extrahepatální cholestatická žloutenka je doprovázena triádou klinické příznaky: Zbarvená stolice, tmavá moč a svědění kůže. Intrahepatální cholestáza se klinicky projevuje svěděním kůže a žloutenkou. Na laboratorní výzkum hyperbilirubinémie (v důsledku přidružené), bilirubinurie, zvýšená alkalická fosfatáza s normální hodnoty transamináz v krevním séru.
Hemolytická žloutenka jsou způsobeny hemolýzou červených krvinek a v důsledku toho zvýšenou tvorbou bilirubinu. Zvýšení volného bilirubinu je jedním z hlavních příznaků hemolytické žloutenky.
V klinická praxe rozlišovat vrozenou a získanou funkční hyperbilirubinémii, způsobenou porušením eliminace bilirubinu z těla (přítomnost defektů v enzymových a jiných systémech pro přenos bilirubinu přes buněčné membrány a jeho glukuronidace v nich). Gilbertův syndrom je dědičné benigní chronické onemocnění, které se vyskytuje se středně těžkou nehemolytickou nekonjugovanou hyperbilirubinémií. Posthepatitidní hyperbilirubinémie Kalka - získaný enzymový defekt vedoucí ke zvýšení hladiny volného bilirubinu v krvi, vrozená familiární nehemolytická žloutenka Crigler - Nayjar (nepřítomnost glukuronyltransferázy v hepatocytech), žloutenka s vrozenou hypotyreózou (tyroxin stimuluje enzym glukuronyltransferázový systém), fyziologická žloutenka novorozenců, léková žloutenka atd. .
Poruchy v metabolismu pigmentu mohou být způsobeny změnami nejen v procesech rozkladu hemu, ale i při tvorbě jeho prekurzorů – porfyrinů (cyklické organické sloučeniny na bázi porfyrinového kruhu sestávajícího ze 4 pyrrolů spojených methinovými můstky). Porfiria – skupina dědičné choroby, provázený genetickým deficitem aktivity enzymů podílejících se na biosyntéze hemu, při kterém je v organismu zjištěn zvýšený obsah porfyrinů nebo jejich prekurzorů, což způsobuje řadu klinických příznaků (nadměrná tvorba metabolických produktů, způsobuje rozvoj neurologických symptomů a (nebo) zvýšenou fotosenzitivitu kůže).
Nejpoužívanější metody stanovení bilirubinu jsou založeny na jeho interakci s diazoreagens (Ehrlichovo činidlo). Metoda Jendrassik-Grof se rozšířila. Při této metodě se jako „osvoboditel“ bilirubinu používá směs kofeinu a benzoátu sodného v acetátovém pufru. Enzymatické stanovení bilirubinu je založeno na jeho oxidaci bilirubinoxidázou. Nekonjugovaný bilirubin je možné stanovit jinými metodami enzymatické oxidace.
V současné době je stanovení bilirubinu metodami „suché chemie“ stále rozšířenější, zejména v rychlé diagnostice.
Vitamíny.
Vitamíny jsou nezbytné nízkomolekulární látky, které se dostávají do těla s potravou zvenčí a podílejí se na regulaci biochemických procesů na enzymové úrovni.
Podobnosti a rozdíly mezi vitamíny a hormony.
Podobnosti- regulují metabolismus v lidském těle prostřednictvím enzymů:
· Vitamíny jsou součástí enzymů a jsou koenzymy nebo kofaktory;
· Hormony nebo regulují aktivitu existujících enzymů v buňce, nebo jsou induktory nebo represory v biosyntéze nezbytných enzymů.
Rozdíl:
· Vitamíny– nízká molekulová hmotnost organické sloučeniny, exogenní faktory regulující metabolismus a pocházejí z potravy zvenčí.
· Hormony– organické sloučeniny s vysokou molekulovou hmotností, endogenní faktory, syntetizované ve žlázách s vnitřní sekrecí těla v reakci na změny vnějších popř vnitřní prostředí v lidském těle a také regulují metabolismus.
Vitamíny se dělí na:
1. Rozpustné v tucích: A, D, E, K, A.
2. Ve vodě rozpustné: skupina B, PP, H, C, THFA (tetrahydrolistová kyselina), kyselina pantothenová(B 3), P (rutin).
Vitamín A (retinol, antixeroftalmikum) – chemická struktura je reprezentována β-iononovým kruhem a 2 isoprenovými zbytky; Potřeba těla je 2,5-30 mg denně.
Nejdříve a specifické znamení hypovitaminóza A - hemeralopie (šeroslepost) - zhoršené vidění za šera. Vyskytuje se v důsledku nedostatku vizuální pigment- rodopsin. Rhodopsin obsahuje retinal (aldehyd vitaminu A) jako aktivní skupinu – umístěnou v tyčinkách sítnice. Tyto buňky (tyčinky) vnímají světelné signály nízké intenzity.
Rhodopsin = opsin (protein) + cis-retinal.
Když je rhodopsin excitován světlem, cis-retinal se v důsledku enzymatických přestaveb uvnitř molekuly přemění na all-trans-retinal (ve světle). To vede ke konformačnímu přeskupení celé molekuly rodopsinu. Rhodopsin se disociuje na opsin a trans-retinal, což je spouštěč, který excituje v zakončeních zrakový nerv impuls, který se následně přenese do mozku.
Ve tmě se v důsledku enzymatických reakcí trans-retinal přemění zpět na cis-retinal a ve spojení s opsinem tvoří rodopsin.
Vitamin A také ovlivňuje procesy růstu a vývoje krycí epitel. Proto se při nedostatku vitaminu pozoruje poškození kůže, sliznic a očí, což se projevuje patologickou keratinizací kůže a sliznic. U pacientů se rozvine xeroftalmie - suchost rohovky oka, protože slzný kanál se ucpe v důsledku keratinizace epitelu. Od té doby, co se oko přestává vymývat slzami, které mají baktericidní účinek, vzniká zánět spojivek, ulcerace a měknutí rohovky - keratomalacie. Při nedostatku vitaminu A může dojít i k poškození sliznice trávicího traktu, dýchacích a genitourinárního traktu. Odolnost všech tkání vůči infekcím je narušena. S rozvojem nedostatku vitamínů v dětství dochází k retardaci růstu.
V současnosti je prokázána účast vitaminu A na ochraně buněčných membrán před oxidanty – tedy vitamin A má antioxidační funkci.
Lipidy se nazývají tuky, které se dostávají do těla s potravou a tvoří se v játrech. Krev (plazma nebo sérum) obsahuje 3 hlavní třídy lipidů: triglyceridy (TG), cholesterol (CS) a jeho estery, fosfolipidy (PL).
Lipidy jsou schopny přitahovat vodu, ale většina z nich se nerozpouští v krvi. Jsou transportovány ve stavu vázaném na protein (ve formě lipoproteinů nebo jinými slovy lipoproteinů). Lipoproteiny se liší nejen složením, ale i velikostí a hustotou, ale jejich struktura je téměř stejná. centrální část(jádro) je zastoupeno cholesterolem a jeho estery, mastné kyseliny triglyceridy. Obal molekuly se skládá z proteinů (apoproteinů) a lipidů rozpustných ve vodě (fosfolipidy a neesterifikovaný cholesterol). Vnější část apoproteinů je schopna tvořit vodíkové vazby s molekulami vody. Lipoproteiny tedy mohou být částečně rozpuštěny v tucích a částečně ve vodě.
Chylomikrony se po vstupu do krve rozkládají na glycerol a mastné kyseliny, což má za následek tvorbu lipoproteinů. Chylomikronové zbytky obsahující cholesterol se zpracovávají v játrech.
Cholesterol a triglyceridy se tvoří v játrech na lipoproteiny s velmi nízkou hustotou (VLDL), které uvolňují část triglyceridů do periferních tkání, zatímco zbytek jde zpět do jater a je přeměněn na lipoproteiny s nízkou hustotou (LDL).
L PN II jsou transportéry cholesterolu pro periferní tkáně, který se používá pro stavbu buněčných membrán a metabolických reakcí. V tomto případě se neesterifikovaný cholesterol dostává do krevní plazmy a váže se na lipoproteiny s vysokou hustotou (HDL). Esterifikovaný cholesterol (vázaný na estery) se přeměňuje na VLDL. Poté se cyklus opakuje.
Krev také obsahuje lipoproteiny střední hustoty (IDL), což jsou zbytky chylomikronů a VLDL a obsahují velké množství cholesterolu. DILI v jaterních buňkách za účasti lipázy se přeměňují na LDL.
Krevní plazma obsahuje 3,5-8 g/l lipidů. Zvýšení hladiny lipidů v krvi se nazývá hyperlipidémie a snížení se nazývá hypolipidémie. Ukazatel celkových krevních lipidů neposkytuje detailní obraz o stavu metabolismu tuků v těle.
Diagnostický význam má kvantitativní stanovení specifických lipidů. Složení lipidů krevní plazmy je uvedeno v tabulce.
Lipidové složení krevní plazmy
| Lipidová frakce | Normální indikátor | |
| Obecné lipidy | 4,6-10,4 mmol/l | |
| Fosfolipidy | 1,95-4,9 mmol/l | |
| Lipidový fosfor | 1,97-4,68 mmol/l | |
| Neutrální tuky | 0-200 mg% | |
| triglyceridy | 0,565-1,695 mmol/l (sérum) | |
| Neesterifikované mastné kyseliny | 400-800 mmol/l | |
| Volné mastné kyseliny | 0,3-0,8 umol/l | |
| Celkový cholesterol (existují věkově specifické normy) | 3,9-6,5 mmol/l (jednotná metoda) | |
| Volný cholesterol | 1,04-2,33 mmol/l | |
| Estery cholesterolu | 2,33-3,49 mmol/l | |
| HDL | M | 1,25-4,25 g/l |
| A | 2,5-6,5 g/l | |
| LDL | 3-4,5 g/l | |
Dyslipidémie se dělí na primární, spojené s vrozenými poruchami metabolismu, a sekundární. Příčinou sekundární dyslipidémie je fyzická nečinnost a nadbytečná výživa, alkoholismus, diabetes mellitus, hypertyreóza, jaterní cirhóza a chronické selhání ledvin. Navíc se mohou vyvinout během léčby glukokortikosteroidy, B-blokátory, progestiny a estrogeny. Klasifikace dyslipidemií je uvedena v tabulce.
Klasifikace dyslipidemií
| Typ | Zvýšené hladiny v krvi | |
| Lipoproteiny | Lipidy | |
| já | Chylomikrony | Cholesterol, triglyceridy |
| Na | LDL | Cholesterol (ne vždy) |
| Typ | Zvýšené hladiny v krvi | |
| Lipoproteiny | Lipidy | |
| Nb | LDL, VLDL | Cholesterol, triglyceridy |
| III | VLDL, LPPP | Cholesterol, triglyceridy |
| IV | VLDL | Cholesterol (ne vždy), triglyceridy |
| PROTI | Chylomikrony, VLDL | Cholesterol, triglyceridy |
– skupina heterogenních chemická struktura a fyzikální a chemické vlastnosti látek. V krevním séru jsou zastoupeny především mastnými kyselinami, triglyceridy, cholesterolem a fosfolipidy.
triglyceridy jsou hlavní formou ukládání lipidů v tukové tkáni a transportu lipidů v krvi. K určení typu hyperlipoproteinémie a posouzení rizika rozvoje je nezbytná studie hladin triglyceridů kardiovaskulární choroby.
Cholesterol vystupuje základní funkce: obsažen v buněčné membrány, je prekurzorem žlučových kyselin, steroidních hormonů a vitaminu D a působí jako antioxidant. Má asi 10 % ruské populace zvýšená hladina cholesterolu v krvi. Tento stav je asymptomatický a může vést k vážná onemocnění(aterosklerotické vaskulární léze, ischemická choroba srdeční).
Lipidy jsou nerozpustné ve vodě, proto jsou transportovány krevním sérem v kombinaci s bílkovinami. Komplexy lipid+protein jsou tzv lipoproteiny. A proteiny, které se podílejí na transportu lipidů, se nazývají apoproteiny.
V krevním séru je přítomno několik tříd lipoproteiny: chylomikrony, lipoproteiny s velmi nízkou hustotou (VLDL), lipoproteiny s nízkou hustotou (LDL) a lipoproteiny s vysokou hustotou (HDL).
Každá lipoproteinová frakce má svou vlastní funkci. syntetizovány v játrech a transportují hlavně triglyceridy. hraní důležitá role v aterogenezi. Lipoproteiny s nízkou hustotou (LDL) bohaté na cholesterol, dodávají cholesterol do periferních tkání. Hladiny VLDL a LDL podporují ukládání cholesterolu v cévní stěně a jsou považovány za aterogenní faktory. Lipoproteiny s vysokou hustotou (HDL) podílet se na zpětném transportu cholesterolu z tkání, odvádět ho z přetížených tkáňových buněk a přenášet do jater, která jej „využijí“ a odvedou z těla. Vysoký úroveň HDL je považován za antiaterogenní faktor (chrání tělo před aterosklerózou).
Úloha cholesterolu a riziko rozvoje aterosklerózy závisí na tom, do kterých lipoproteinových frakcí je zařazen. Slouží k posouzení poměru aterogenních a antiaterogenních lipoproteinů aterogenní index.
Apolipoproteiny- Jedná se o proteiny, které se nacházejí na povrchu lipoproteinů.
Apolipoprotein A (protein ApoA) je hlavní proteinová složka lipoproteinů (HDL), která transportuje cholesterol z buněk periferní tkáně do jater.
Apolipoprotein B (protein ApoB) je součástí lipoproteinů, které transportují lipidy do periferních tkání.
Měření koncentrace apolipoproteinu A a apolipoproteinu B v krevním séru poskytuje nejpřesnější a nejjednoznačnější stanovení poměru aterogenních a antiaterogenních vlastností lipoproteinů, který je hodnocen jako riziko rozvoje aterosklerotických vaskulárních lézí a koronárních onemocnění v průběhu následujících pěti let. .
Do studia lipidový profil zahrnuje tyto ukazatele: cholesterol, triglyceridy, VLDL, LDL, HDL, koeficient aterogenity, poměr cholesterol/triglyceridy, glukóza. Tento profil dává úplné informace o metabolismu lipidů, umožňuje určit rizika rozvoje aterosklerotických vaskulárních lézí, ischemické choroby srdeční, identifikovat přítomnost dyslipoproteinémie a typizovat ji, a také, pokud je to nutné, zvolit správnou terapii snižující lipidy.
Indikace
Zvýšená koncentracecholesterolu Má to diagnostická hodnota s primární familiární hyperlipidémií (dědičné formy onemocnění); těhotenství, hypotyreóza, nefrotický syndrom, obstrukční onemocnění jater, onemocnění slinivky břišní ( chronická pankreatitida, zhoubné novotvary), diabetes mellitus.
Snížená koncentracecholesterolu má diagnostickou hodnotu pro onemocnění jater (cirhóza, hepatitida), hladovění, sepse, hypertyreóza, megaloblastická anémie.
Zvýšená koncentracetriglyceridy má diagnostickou hodnotu pro primární hyperlipidémii (dědičné formy onemocnění); obezita, nadměrná spotřeba sacharidy, alkoholismus, diabetes mellitus, hypotyreóza, nefrotický syndrom, chron selhání ledvin, dna, akutní a chronická pankreatitida.
Snížená koncentracetriglyceridy má diagnostickou hodnotu pro hypolipoproteinémii, hypertyreózu, malabsorpční syndrom.
Lipoproteiny s velmi nízkou hustotou (VLDL) používá se k diagnostice dyslipidémie (typy IIb, III, IV a V). Vysoké koncentrace VLDL v krevním séru nepřímo odrážejí aterogenní vlastnosti séra.
Zvýšená koncentracelipoprotein s nízkou hustotou (LDL) má diagnostickou hodnotu pro primární hypercholesterolémii, dislipoproteinémii (typy IIa a IIb); na obezitu, obstrukční žloutenku, nefrotický syndrom, diabetes mellitus, hypotyreózu. Stanovení hladin LDL je nezbytné pro předepsání dlouhodobé léčby, jejímž cílem je snížení koncentrací lipidů.
Zvýšená koncentrace má diagnostickou hodnotu pro jaterní cirhózu a alkoholismus.
Snížená koncentracelipoprotein s vysokou hustotou (HDL) má diagnostickou hodnotu pro hypertriglyceridémii, aterosklerózu, nefrotický syndrom, diabetes mellitus, akutní infekce, obezita, kouření.
Stanovení úrovně apolipoprotein A indikováno pro včasné posouzení rizika ischemické choroby srdeční; identifikace pacientů s dědičnou predispozicí k ateroskleróze v relativně v mládí; sledování léčby léky snižujícími lipidy.
Zvýšená koncentraceapolipoprotein A má diagnostickou hodnotu pro onemocnění jater a těhotenství.
Snížená koncentraceapolipoprotein A má diagnostickou hodnotu pro nefrotický syndrom, chronické selhání ledvin, triglyceridémii, cholestázu, sepsi.
Diagnostická hodnotaapolipoprotein B- nejpřesnější ukazatel rizika rozvoje kardiovaskulárních onemocnění, je také nejadekvátnějším ukazatelem účinnosti terapie statiny.
Zvýšená koncentraceapolipoprotein B má diagnostickou hodnotu pro dyslipoproteinémii (typy IIa, IIb, IV a V), ischemickou chorobu srdeční, diabetes mellitus, hypotyreózu, nefrotický syndrom, onemocnění jater, Itsenko-Cushingův syndrom, porfyrii.
Snížená koncentraceapolipoprotein B má diagnostickou hodnotu pro hypertyreózu, malabsorpční syndrom, chronická anémie, zánětlivá onemocnění kloubů, mnohočetný myelom.
Metodologie
Stanovení se provádí na biochemickém analyzátoru „Architect 8000“.
Příprava
ke studiu lipidového profilu (cholesterol, triglyceridy, HDL-C, LDL-C, Apo-proteiny lipoproteinů (Apo A1 a Apo-B)
Je nutné zdržet se fyzické aktivity, pití alkoholu, kouření a léky, dietní změny po dobu nejméně dvou týdnů před odběrem krve.
Krev se odebírá pouze nalačno, 12-14 hodin po posledním jídle.
Nejlépe ranní recepce léky provést po odběru krve (pokud je to možné).
Před darováním krve by se neměly provádět následující procedury: injekce, punkce, celková masáž tělíska, endoskopie, biopsie, EKG, RTG vyšetření zejména se zavedením kontrastní látky, dialýza.
Kdyby to bylo ještě bezvýznamné cvičební stres– Před darováním krve si musíte alespoň 15 minut odpočinout.
Testování lipidů se neprovádí, když infekční choroby, neboť dochází k poklesu hladiny celkového cholesterolu a HDL-C bez ohledu na typ infekčního agens nebo klinický stav pacienta. Lipidový profil by měl být kontrolován až poté plné zotavení trpěliví.
Je velmi důležité, aby byla tato doporučení přísně dodržována, protože pouze v tomto případě budou získány spolehlivé výsledky krevních testů.
Pro kvantitativní stanovení celkových lipidů v krevním séru se nejčastěji používá kolorimetrická metoda s fosfovanilinovým činidlem. Běžné lipidy reagují po hydrolýze s kyselinou sírovou s fosfovanilinem za vzniku červeného zbarvení. Intenzita barvy je úměrná obsahu celkových lipidů v krevním séru.
1. Přidejte reagencie do tří zkumavek podle následující schéma:
2. Obsah zkumavek promíchejte a nechte 40-60 minut v temnu. (barva roztoku se změní ze žluté na růžovou).
3. Znovu promíchejte a změřte optickou hustotu při 500-560 nm (zelený filtr) proti slepému vzorku v kyvetě o tloušťce vrstvy 5 mm.
4. Vypočítejte množství celkových lipidů pomocí vzorce:
kde D 1 je extinkce experimentálního vzorku v kyvetě;
D 2 – zánik kalibračního roztoku lipidů v kyvetě;
X je koncentrace celkových lipidů ve standardním roztoku.
Definujte pojem „celkové lipidy“. Porovnejte hodnotu, kterou jste získali, s normálními hodnotami. Jaké biochemické procesy lze posuzovat podle tohoto ukazatele?
Pokus 4. Stanovení obsahu b- a pre-b-lipoproteinů v krevním séru.
2. Sada pipet.
3. Skleněná tyč.
5. Kyvety, 0,5 cm.
Reagencie. 1. Krevní sérum.
2. Chlorid vápenatý, 0,025 M roztok.
3. Heparin, 1% roztok.
4. Destilovaná voda.
1. Nalijte 2 ml 0,025 M chloridu vápenatého do zkumavky a přidejte 0,2 ml krevního séra.
2. Promíchejte a změřte optickou hustotu vzorku (D 1) na FEC-e při vlnové délce 630-690 nm (červený filtr) v kyvetě o tloušťce vrstvy 0,5 cm proti destilované vodě. Zaznamenejte hodnotu optické hustoty D1.
3. Poté přidejte do kyvety 0,04 ml 1% roztoku heparinu (1000 jednotek v 1 ml) a znovu přesně po 4 minutách změřte optickou hustotu D2.
Rozdíl hodnot (D 2 – D 1) odpovídá optické hustotě v důsledku sedimentu b-lipoproteinů.
Vypočítejte obsah b- a pre-b-lipoproteinů pomocí vzorce:
kde 12 je koeficient pro přepočet na g/l.
Uveďte místo biosyntézy b-lipoproteinů. Jakou funkci plní v lidském a zvířecím těle? Porovnejte hodnotu, kterou jste získali, s normálními hodnotami. V jakých případech jsou pozorovány odchylky od normálních hodnot?
Lekce č. 16. “Lidový metabolismus (část 2)”
Účel lekce: studovat procesy katabolismu a anabolismu mastných kyselin.
OTÁZKY K TESTU:
1. Biochemický mechanismus oxidace mastných kyselin.
2. Metabolismus ketolátek: tvorba, biochemický účel. Jaké faktory predisponují k rozvoji ketózy u zvířat?
3. Biochemický mechanismus syntézy mastných kyselin.
4. Biosyntéza triacylglycerolů. Biochemická úloha tohoto procesu.
5. Biosyntéza fosfolipidů. Biochemická úloha tohoto procesu.
Datum dokončení ________ Bod ____ Podpis učitele ____________
Experimentální práce.
Pokus 1. Expresní metoda stanovení ketolátek v moči, mléce, krevním séru (Lestrade test).
Zařízení. 1. Stojan se zkumavkami.
2. Sada pipet.
3. Skleněná tyč.
4. Filtrační papír.
Reagencie. 1. Prášek činidla.
3. Krevní sérum.
4. Mléko.
1. Naneste malé množství (0,1-0,2 g) prášku reagencie na filtrační papír na špičce skalpelu.
2. Přeneste několik kapek krevního séra do prášku reagencie.
Minimální hladina ketolátek v krvi, která dává pozitivní reakce rovnající se 10 mg/100 ml (10 mg %). Rychlost vývoje barvy a její intenzita jsou úměrné koncentraci ketolátek ve zkušebním vzorku: pokud se fialová barva objeví okamžitě - obsah je 50-80 mg% nebo více; pokud se objeví po 1 minutě, vzorek obsahuje 30-50 mg%; vývoj slabého zbarvení po 3 minutách ukazuje na přítomnost 10-30 mg % ketolátek.
Je třeba si uvědomit, že test je více než 3x citlivější při stanovení aceto octová kyselina než aceton. Ze všech ketolátek v lidském séru převládá kyselina acetoctová, ale v krvi zdravých krav tvoří 70–90 % ketolátek kyselina b-hydroxymáselná a v mléce tvoří 87–92 %.
Udělejte závěr na základě výsledků vašeho výzkumu. Vysvětlete, proč je nadměrná tvorba ketolátek v lidském a zvířecím těle nebezpečná?
Mají různou hustotu a jsou indikátory metabolismu lipidů. Pro kvantitativní stanovení celkových lipidů existují různé metody: kolorimetrické, nefelometrické.
Princip metody. Produkty hydrolýzy nenasycených lipidů tvoří s fosfovanilinovým činidlem červenou sloučeninu, jejíž intenzita barvy je přímo úměrná obsahu celkových lipidů.
Většina lipidů se v krvi nenachází ve volném stavu, ale jako součást protein-lipidových komplexů: chylomikrony, α-lipoproteiny, β-lipoproteiny. Lipoproteiny lze oddělit různými metodami: centrifugací v solné roztoky různé hustoty, elektroforéza, chromatografie na tenké vrstvě. Při ultracentrifugaci se izolují chylomikrony a lipoproteiny různých hustot: vysoké (HDL - α-lipoproteiny), nízké (LDL - β-lipoproteiny), velmi nízké (VLDL - pre-β-lipoproteiny) atd.
Lipoproteinové frakce se liší množstvím proteinu, relativní molekulovou hmotností lipoproteinů a procentem jednotlivých lipidových složek. α-lipoproteiny, obsahující velké množství bílkovin (50-60%), mají tedy vyšší relativní hustotu (1,063-1,21), zatímco β-lipoproteiny a pre-β-lipoproteiny obsahují méně bílkovin a významné množství lipidů - až 95 % celkové relativní molekulové hmotnosti a nízkou relativní hustotou (1,01-1,063).
Princip metody. Při interakci sérového LDL s heparinovým činidlem se objeví zákal, jehož intenzita se určuje fotometricky. Heparinové činidlo je směs heparinu a chloridu vápenatého.
Studovaný materiál: krevní sérum.
Reagencie: 0,27% roztok CaCl2, 1% roztok heparinu.
Zařízení: mikropipeta, FEC, kyveta s délkou optické dráhy 5 mm, zkumavky.
POKROK. Do zkumavky přidejte 2 ml 0,27% roztoku CaCl 2 a 0,2 ml krevního séra a promíchejte. Stanovte optickou hustotu roztoku (E 1) proti 0,27% roztoku CaCl 2 v kyvetách pomocí červeného filtru (630 nm). Roztok z kyvety se nalije do zkumavky, mikropipetou se přidá 0,04 ml 1% roztoku heparinu, promíchá se a přesně po 4 minutách se znovu stanoví optická hustota roztoku (E 2) za stejných podmínek. podmínky.
Rozdíl v optické hustotě se vypočítá a vynásobí 1000 – empirický koeficient navržený Ledvinou, protože sestrojení kalibrační křivky je spojeno s řadou obtíží. Odpověď je vyjádřena vg/l.
x(g/l) = (E2 - E1) 1000.
. Obsah LDL (b-lipoproteinů) v krvi se liší v závislosti na věku, pohlaví a běžně je 3,0-4,5 g/l. Zvýšení koncentrace LDL je pozorováno u aterosklerózy, obstrukční žloutenky, akutní hepatitidy, chronická onemocnění játra, diabetes, glykogenóza, xantomatóza a obezita, snížený u b-plazmocytomu. Průměrný obsah LDL cholesterolu je asi 47 %.
Stanovení celkového cholesterolu v krevním séru na základě Liebermann-Burkhardovy reakce (Ilk metoda)
Pochází exogenní cholesterol v množství 0,3-0,5 g potravinářské výrobky a endogenní se v těle syntetizuje v množství 0,8-2 g denně. Zvláště hodně cholesterolu se syntetizuje v játrech, ledvinách, nadledvinách a ve stěně tepen. Cholesterol je syntetizován z 18 molekul acetyl-CoA, 14 molekul NADPH, 18 molekul ATP.
Když se do krevního séra přidá anhydrid kyseliny octové a koncentrovaná kyselina sírová, kapalina postupně zčervená, zmodrá a nakonec zelená barva. Reakce je způsobena tvorbou cholesterylenu zelené kyseliny sulfonové.
Reagencie: Liebermann-Burkhardovo činidlo (směs ledové kyseliny octové, acetanhydridu a koncentrované kyseliny sírové v poměru 1:5:1), standardní (1,8 g/l) roztok cholesterolu.
Zařízení: suché zkumavky, suché pipety, FEC, kyvety s délkou optické dráhy 5 mm, termostat.
POKROK. Všechny zkumavky, pipety, kyvety musí být suché. Při práci s Liebermann-Burkhardovým činidlem musíte být velmi opatrní. 2,1 ml Liebermann-Burkhardova činidla se umístí do suché zkumavky, po stěně zkumavky se velmi pomalu přidá 0,1 ml nehemolyzovaného krevního séra, zkumavka se silně protřepe a poté se termostatuje 20 minut při 37 °C. . Vznikne smaragdově zelená barva, která se kolorimetrizuje na FEC s červeným filtrem (630-690 nm) proti Liebermann-Burkhardovu činidlu. Optická hustota získaná na FEC se používá ke stanovení koncentrace cholesterolu podle kalibračního grafu. Zjištěná koncentrace cholesterolu se vynásobí 1000, protože do experimentu se odebere 0,1 ml séra. Převodní faktor na jednotky SI (mmol/l) je 0,0258. Normální obsah celkový cholesterol (volný a esterifikovaný) v krevním séru 2,97-8,79 mmol/l (115-340 mg%).
Vytvoření kalibračního grafu. Ze standardního roztoku cholesterolu, kde 1 ml obsahuje 1,8 mg cholesterolu, vezměte 0,05; 0,1; 0,15; 0,2; 0,25 ml a upravena na objem 2,2 ml Liebermann-Burkhardovým činidlem (2,15; 2,1; 2,05; 2,0; 1,95 ml, v tomto pořadí). Množství cholesterolu ve vzorku je 0,09; 0,18; 0,27; 0,36; 0,45 mg. Výsledné standardní roztoky cholesterolu, stejně jako zkumavky, se energicky protřepou a umístí na 20 minut do termostatu a poté se změří fotometrem. Kalibrační graf je sestaven na základě hodnot extinkce získaných jako výsledek fotometrie standardních roztoků.
Klinická a diagnostická hodnota. Pokud je metabolismus lipidů narušen, cholesterol se může hromadit v krvi. Zvýšení cholesterolu v krvi (hypercholesterolémie) je pozorováno u aterosklerózy, diabetes mellitus, obstrukční žloutenky, nefritidy, nefrózy (zejména lipoidní nefrózy), hypotyreózy. Snížení cholesterolu v krvi (hypocholesterolémie) je pozorováno při anémii, hladovění, tuberkulóze, hypertyreóze, rakovinové kachexii, parenchymální žloutence, poškození centrálního nervového systému, horečnatých stavech, při podávání
