Giperlipidemiya (giperlipemiya) - konsentratsiyaning oshishi umumiy lipidlar plazma kabi fiziologik hodisa ovqatdan keyin 1-4 soat o'tgach kuzatilishi mumkin. Oziqlanish giperlipemiyasi aniqroq bo'ladi, och qoringa bemorning qonida lipidlar darajasi qanchalik past bo'lsa.
Qondagi lipidlarning kontsentratsiyasi bir qator ostida o'zgaradi patologik sharoitlar:
Nefrotik sindrom, lipoid nefroz, o'tkir va surunkali nefrit;
Jigarning biliar sirrozi, o'tkir gepatit;
Semirib ketish - ateroskleroz;
Hipotiroidizm;
Pankreatit va boshqalar.
Xolesterin (CH) darajasini o'rganish faqat organizmdagi lipidlar almashinuvining patologiyasini aks ettiradi. Giperkolesterolemiya hujjatlashtirilgan xavf omilidir koronar ateroskleroz. CS barcha hujayralar membranasining muhim tarkibiy qismi bo'lib, CS kristallarining maxsus fizik-kimyoviy xususiyatlari va uning molekulalarining konformatsiyasi harorat o'zgarganda membranadagi fosfolipidlarning tartibliligi va harakatchanligiga yordam beradi, bu esa membrananing oraliq faza holatida bo'lishiga imkon beradi; ("jel - suyuq kristall") va konserva fiziologik funktsiyalar. CS steroid gormonlar (glyuko- va mineralokortikoidlar, jinsiy gormonlar), D 3 vitamini, shuningdek, biosintezda kashshof sifatida ishlatiladi. safro kislotalari. An'anaviy ravishda biz xolesterinning 3 ta hovuzini ajrata olamiz:
A - tez almashinuvchi (30 g);
B - sekin almashinuv (50 g);
B - juda sekin almashinuv (60 g).
Endogen xolesterin jigarda sezilarli miqdorda sintezlanadi (80%). Ekzogen xolesterin hayvonot mahsulotlarining bir qismi sifatida tanaga kiradi. Xolesterinni jigardan ekstrahepatik to'qimalarga tashish amalga oshiriladi
LDL. Jigardan xolesterinni ekstrahepatik to'qimalardan jigarga olib tashlash HDL ning etuk shakllari (50% - LDL, 25% HDL, 17% VLDL, 5% -CM) tomonidan ishlab chiqariladi.
Giperlipoproteinemiya va giperkolesterolemiya (Fredrikson tasnifi):
1-toifa - giperxilomikronemiya;
2-toifa - a - giper-b-lipoproteinemiya, b - giper-b va giperpre-b-lipoproteinemiya;
3-toifa - dis-b-lipoproteinemiya;
4-toifa - giper-pre-b-lipoproteinemiya;
5-toifa - giper-pre-b-lipoproteinemiya va giperxilomikronemiya.
Eng aterogenlari 2 va 3 turlardir.
Fosfolipidlar fosfor kislotasidan tashqari (muhim komponent), spirt (odatda glitserin), yog 'kislotasi qoldiqlari va azotli asoslarni o'z ichiga olgan lipidlar guruhidir. Klinik va laboratoriya amaliyotida umumiy fosfolipidlar darajasini aniqlash usuli mavjud bo'lib, ularning darajasi birlamchi va ikkilamchi giperlipoproteinemiya IIa va IIb bo'lgan bemorlarda ortadi. Bir qator kasalliklarda pasayish kuzatiladi:
Oziqlanish distrofiyasi;
Jigarning yog 'degeneratsiyasi,
Portal sirrozi;
Aterosklerozning rivojlanishi;
Gipertiroidizm va boshqalar.
Lipid peroksidatsiyasi (LPO) erkin radikal jarayon bo'lib, uning boshlanishi reaktiv kislorod turlari - superoksid ioni O 2 shakllanishi bilan sodir bo'ladi. . ; gidroksil radikali H2O . ; gidroperoksid radikali H2O 2 . ; yagona kislorod O 2; gipoxlorit ioni ClO -. LPO ning asosiy substratlari membrana fosfolipidlari tuzilishida joylashgan ko'p to'yinmagan yog'li kislotalardir. Eng kuchli katalizator temir metall ionlaridir. JINSIY ALOQA fiziologik jarayondir muhim organizm uchun, chunki u membrana o'tkazuvchanligini tartibga soladi, hujayra bo'linishi va o'sishiga ta'sir qiladi, fagosintezni boshlaydi, ma'lum bir biosintez uchun yo'ldir. biologik moddalar(prostaglandinlar, tromboksanlar). Lipid peroksidlanish darajasi antioksidant tizim tomonidan boshqariladi ( askorbin kislotasi, siydik kislotasi, b-karotin va boshqalar). Ikki tizim o'rtasidagi muvozanatning yo'qolishi hujayralar va hujayra tuzilmalarining o'limiga olib keladi.
Diagnostik maqsadlarda lipid peroksidlanish mahsulotlarining tarkibini (dien konjugatlari, malondialdegid, Schiff asoslari) va asosiy tabiiy antioksidant - alfa-tokoferolning plazma va qizil qon hujayralarida MDA / TF hisobi bilan kontsentratsiyasini aniqlash odatiy holdir. koeffitsienti. LPO ni baholash uchun integral test eritrotsitlar membranalarining o'tkazuvchanligini aniqlashdir.
2. Pigment almashinuvi odam va hayvon organizmidagi turli rangdagi moddalarning murakkab o'zgarishlari majmui.
Eng mashhur qon pigmenti gemoglobin (globinning oqsil qismidan va 4 gem bilan ifodalangan protez guruhidan tashkil topgan xromoprotein, har bir gema 4 ta pirrol yadrosidan iborat bo'lib, ular metin ko'prigi bilan o'zaro bog'langan, markazda joylashgan. oksidlanish darajasi 2 + bo'lgan temir ioni. Eritrositning o'rtacha umri 100-110 kun. Ushbu davr oxirida gemoglobinni yo'q qilish va yo'q qilish sodir bo'ladi. Parchalanish jarayoni allaqachon boshlanadi qon tomir to'shagi, fagotsitar mononuklear hujayralar tizimining hujayra elementlarida tugaydi (jigarning Kupfer hujayralari, gistotsitlar). biriktiruvchi to'qima, plazma hujayralari ilik). Qon tomir to'shagidagi gemoglobin plazma haptoglobiniga bog'lanadi va buyrak filtridan o'tmasdan qon tomir to'shagida saqlanadi. Gaptoglobinning beta zanjirining tripsinga o'xshash ta'siri va uning gemning porfirin halqasiga ta'siridan kelib chiqadigan konformatsion o'zgarishlar tufayli fagotsitar mononuklear tizimning hujayra elementlarida gemoglobinni oson yo'q qilish uchun sharoit yaratiladi -molekulyar yashil pigment verdoglobin(sinonimlari: verdogemoglobin, xoleglobin, psevdogemoglobin) - globin, singan porfirin halqa tizimi va temir temirdan iborat kompleks. Keyingi o'zgarishlar verdoglobin tomonidan temir va globinning yo'qolishiga olib keladi, buning natijasida porfirin halqasi zanjirga aylanadi va past molekulyar og'irlikdagi yashil safro pigmenti hosil bo'ladi - biliverdin. Ularning deyarli barchasi enzimatik ravishda o'tning eng muhim qizil-sariq pigmentiga aylanadi - bilirubin, qon plazmasining umumiy komponenti bo'lgan sirtda plazma membranasi gepatotsitlar dissotsiatsiyaga uchraydi. Bunday holda, chiqarilgan bilirubin plazma membranasining lipidlari bilan vaqtinchalik bog'lanish hosil qiladi va ma'lum ferment tizimlarining faolligi tufayli u orqali harakatlanadi. Erkin bilirubinning hujayraga keyingi o'tishi bu jarayonda ikkita tashuvchi oqsil ishtirokida sodir bo'ladi: ligandin (u bilirubinning asosiy miqdorini tashiydi) va protein Z.
Ligandin va protein Z buyraklar va ichaklarda ham mavjud, shuning uchun jigar funktsiyasi etarli bo'lmaganda, ular ushbu organdagi detoksifikatsiya jarayonlarining zaiflashuvini qoplashlari mumkin. Ikkalasi ham suvda yaxshi eriydi, lekin membrananing lipid qatlami orqali harakat qilish qobiliyatiga ega emas. Bilirubinni glyukuron kislotasiga bog'lash orqali erkin bilirubinning o'ziga xos toksikligi sezilarli darajada yo'qoladi. Gidrofobik, lipofil erkin bilirubin, membrana lipidlarida oson eriydi va natijada mitoxondriyalarga kirib, ulardagi nafas olish va oksidlovchi fosforlanishni ajratadi, oqsil sintezini, hujayralar va organellalar membranasi orqali kaliy ionlarining oqishini buzadi. Bu markazning holatiga salbiy ta'sir qiladi asab tizimi, bemorlarda bir qator xususiyatlarni keltirib chiqaradi nevrologik belgilar.
Bilirubin glyukuronidlari (yoki bog'langan, konjugatsiyalangan bilirubin), erkin bilirubindan farqli o'laroq, diazoreagent ("to'g'ridan-to'g'ri" bilirubin) bilan darhol reaksiyaga kirishadi. Shuni yodda tutish kerakki, qon plazmasining o'zida glyukuron kislotasi bilan bog'lanmagan bilirubin albumin bilan bog'lanishi yoki bo'lmasligi mumkin. Oxirgi fraktsiya (bilirubin albumin, lipidlar yoki qonning boshqa tarkibiy qismlari bilan bog'liq emas) eng zaharli hisoblanadi.
Bilirubin glyukuronidlari membranalarning ferment tizimlari tufayli ular orqali (kontsentratsiya gradientiga qarshi) faol ravishda harakatlanadilar. o't yo'llari, safro bilan birga ichak lümenine chiqariladi. Unda ichak mikroflorasi tomonidan ishlab chiqarilgan fermentlar ta'sirida glyukuronid aloqasi buziladi. Chiqarilgan erkin bilirubin ingichka ichakda dastlab mezobilirubin, keyin esa mezobilinogen (urobilinogen) hosil qilish uchun kamayadi. Odatda mezobilinogenning ma'lum bir qismi ingichka ichakda va yo'g'on ichakning yuqori qismida tizim orqali so'riladi. portal venasi jigarga kiradi, u erda deyarli butunlay yo'q qilinadi (oksidlanish orqali), dipirol birikmalariga - propent-diopent va mezobileukana aylanadi.
Mezobilinogen (urobilinogen) umumiy qon aylanishiga kirmaydi. Uning bir qismi vayronagarchilik mahsulotlari bilan birga yana safro (enterohepotik qon aylanish) qismi sifatida ichak lümenine yuboriladi. Biroq, jigarda eng kichik o'zgarishlar bilan ham, u to'siq funktsiyasi asosan "olib tashlanadi" va mezobilinogen birinchi navbatda umumiy qon aylanishiga, keyin esa siydikga kiradi. Uning asosiy qismi dan yo'naltirilgan ingichka ichak anaerob mikroflora (Escherichia coli va boshqa bakteriyalar) ta'sirida u sterkobilinogen hosil bo'lishi bilan yanada qisqarishga uchraydi. Olingan sterkobilinogen (kunlik miqdori 100-200 mg) najas bilan deyarli butunlay chiqariladi. Havoda u oksidlanadi va najas pigmentlaridan biri bo'lgan sterkobilinga aylanadi. Sterkobilinogenning kichik bir qismi yo'g'on ichakning shilliq qavati orqali pastki vena kava tizimiga so'riladi, qon bilan buyraklarga etkaziladi va siydik bilan chiqariladi.
Shunday qilib, siydikda sog'lom odam Mezobilinogen (urobilinogen) yo'q, lekin u bir oz sterkobilinni o'z ichiga oladi (ko'pincha noto'g'ri "urobilin" deb ataladi)
Qon zardobida (plazmada), kimyoviy va bilirubin miqdorini aniqlash uchun fizik-kimyoviy usullar kolorimetrik, spektrofotometrik (qo'lda va avtomatlashtirilgan), xromatografik, florimetrik va boshqalarni o'z ichiga olgan tadqiqotlar.
Pigment almashinuvi buzilishining muhim sub'ektiv belgilaridan biri sariqlikning paydo bo'lishi bo'lib, u odatda qondagi bilirubin darajasi 27-34 mkmol / l yoki undan ko'p bo'lganida qayd etiladi. Giperbilirubinemiyaning sabablari quyidagilar bo'lishi mumkin: 1) qizil qon tanachalari gemolizining kuchayishi (80% dan ortiq). umumiy bilirubin konjuge bo'lmagan pigment bilan ifodalanadi); 2) jigar hujayralari faoliyatining buzilishi va 3) o'tning kechikishi (giperbilirubinemiya, agar umumiy bilirubinning 80% dan ko'prog'i konjugatsiyalangan bilirubin bo'lsa, jigardan kelib chiqadi). Birinchi holda, ular gemolitik sariqlik deb ataladigan narsa haqida, ikkinchisida - parenximal sariqlik (bilirubinni tashish va uning glyukuronidlanish jarayonlaridagi irsiy nuqsonlar tufayli yuzaga kelishi mumkin), uchinchisida - mexanik (yoki obstruktiv) haqida. , konjestif) sariqlik.
Sariqlikning parenximal shakli bilan Jigarning parenxima hujayralarida va stromadagi infiltrativ hujayralarda destruktiv-distrofik o'zgarishlar qayd etiladi, bu jigarda bosimning oshishiga olib keladi. o't yo'llari. Jigarda bilirubinning turg'unligi, shuningdek, turli biokimyoviy va fiziologik jarayonlarni normal bajarish qobiliyatini yo'qotadigan ta'sirlangan gepatotsitlardagi metabolik jarayonlarning keskin zaiflashishi bilan ham yordam beradi, xususan, bog'langan bilirubinni kontsentratsiya gradientiga qarshi hujayralardan safroga o'tkazadi. Qonda konjuge bilirubin kontsentratsiyasining oshishi siydikda paydo bo'lishiga olib keladi.
Gepatitda jigar shikastlanishining eng "nozik" belgisi tashqi ko'rinishdir mezobilinogen siydikda (urobilinogen).
Parenximal sariqlik bilan qonda bog'langan (konjugatsiyalangan) bilirubin kontsentratsiyasi asosan oshadi. Erkin bilirubin miqdori ortadi, lekin kamroq darajada.
Obstruktiv sariqlikning patogenezi siydikdan sterkobilinogenning yo'qolishiga olib keladigan ichakka o't oqimining to'xtashiga asoslangan. Konjestif sariqlik bilan qondagi konjugatsiyalangan bilirubin miqdori asosan oshadi. Ekstrahepatik xolestatik sariqlik triada bilan birga keladi klinik belgilar: rangi o'zgargan najas, qoraygan siydik va terining qichishi. Intrahepatik xolestaz klinik jihatdan terining qichishi va sariqligi bilan namoyon bo'ladi. Da laboratoriya tadqiqotlari giperbilirubinemiya (bog'langanligi sababli), bilirubinuriya, ishqoriy fosfatazaning ko'payishi. normal qiymatlar qon zardobidagi transaminazalar.
Gemolitik sariqlik qizil qon hujayralarining gemolizi va natijada bilirubinning ko'payishi natijasida yuzaga keladi. Erkin bilirubinning ko'payishi gemolitik sariqlikning asosiy belgilaridan biridir.
IN klinik amaliyot bilirubinning tanadan chiqarilishining buzilishi (ferment va bilirubinni hujayra membranalari orqali o'tkazish va ulardagi glyukuronidlanishning boshqa tizimlarida nuqsonlar mavjudligi) tufayli tug'ma va orttirilgan funktsional giperbilirubinemiyani ajratib ko'rsatish. Gilbert sindromi o'rtacha gemolitik bo'lmagan konjugatsiyalanmagan giperbilirubinemiya bilan yuzaga keladigan irsiy yaxshi surunkali kasallikdir. Gepatitdan keyingi giperbilirubinemiya Kalka - qondagi erkin bilirubin darajasining oshishiga olib keladigan orttirilgan ferment nuqsoni, Crigler-Nayjarning konjenital oilaviy gemolitik bo'lmagan sariqligi (gepatotsitlarda glyukuroniltransferaza yo'qligi), konjenital gipotiroidizm bilan sariqlik (konjenital gipotireoz stimulyatori). ferment glyukuroniltransferaza tizimi), yangi tug'ilgan chaqaloqlarning fiziologik sariqligi, dori sariqligi va boshqalar.
Pigment almashinuvidagi buzilishlar nafaqat gemning parchalanish jarayonlaridagi, balki uning prekursorlari - porfirinlarning (metin ko'prigi bilan bog'langan 4 pirroldan tashkil topgan porfin halqasi asosidagi siklik organik birikmalar) hosil bo'lishidagi o'zgarishlar tufayli yuzaga kelishi mumkin. Porfiriya - guruh irsiy kasalliklar, gem biosintezida ishtirok etadigan fermentlar faolligining genetik etishmovchiligi bilan birga keladi, bunda organizmda porfirinlar yoki ularning prekursorlari miqdorining ko'payishi aniqlanadi, bu bir qator klinik belgilarni keltirib chiqaradi (metabolik mahsulotlarning haddan tashqari shakllanishi, nevrologik simptomlarning rivojlanishiga va (yoki) terining fotosensitivligini oshiradi).
Bilirubinni aniqlashning eng ko'p qo'llaniladigan usullari uning diazoreagent (Ehrlich reaktivi) bilan o'zaro ta'siriga asoslangan. Jendrassik-Grof usuli keng tarqaldi. Ushbu usulda bilirubinni "ozod qiluvchi" sifatida asetat tamponidagi kofein va natriy benzoat aralashmasi ishlatiladi. Bilirubinni fermentativ aniqlash uning bilirubin oksidaza bilan oksidlanishiga asoslanadi. Konjugatsiyalanmagan bilirubinni fermentativ oksidlanishning boshqa usullari bilan aniqlash mumkin.
Hozirgi vaqtda bilirubinni "quruq kimyo" usullari yordamida aniqlash, ayniqsa tezkor diagnostikada tobora keng tarqalmoqda.
Vitaminlar.
Vitaminlar organizmga tashqaridan oziq-ovqat bilan kiradigan va fermentlar darajasida biokimyoviy jarayonlarni tartibga solishda ishtirok etadigan muhim past molekulyar moddalardir.
Vitaminlar va gormonlar o'rtasidagi o'xshashlik va farqlar.
O'xshashliklar- fermentlar orqali inson organizmidagi metabolizmni tartibga soladi:
· Vitaminlar fermentlar tarkibiga kiradi va kofermentlar yoki kofaktorlardir;
· Gormonlar yoki hujayradagi mavjud fermentlar faoliyatini tartibga soladi yoki zarur fermentlar biosintezida induktor yoki repressor hisoblanadi.
Farqi:
· Vitaminlar- past molekulyar og'irlik organik birikmalar, metabolizmni tartibga soluvchi ekzogen omillar va tashqaridan oziq-ovqatdan kelib chiqadi.
· Gormonlar- yuqori molekulyar og'irlikdagi organik birikmalar; endogen omillar, tashqi yoki o'zgarishlarga javoban tananing endokrin bezlarida sintezlanadi ichki muhit inson tanasi, shuningdek metabolizmni tartibga soladi.
Vitaminlar quyidagilarga bo'linadi:
1. Yog'da eriydi: A, D, E, K, A.
2. Suvda eruvchan: B guruhi, PP, H, C, THFA (tetrahidrofoliy kislotasi), pantotenik kislota(B 3), P (rutin).
A vitamini (retinol, antikseroftalmik) - kimyoviy tuzilish b-ionon halqasi va 2 ta izopren qoldig'i bilan ifodalanadi; Tananing ehtiyoji kuniga 2,5-30 mg.
Eng qadimgi va o'ziga xos belgi gipovitaminoz A - gemeralopiya (tungi ko'rlik) - alacakaranlık ko'rishning buzilishi. Kamchilik tufayli paydo bo'ladi vizual pigment- rodopsin. Rodopsin faol guruh sifatida retinal (A vitamini aldegid) o'z ichiga oladi - retinal tayoqchalarda joylashgan. Bu hujayralar (tayoqchalar) past intensivlikdagi yorug'lik signallarini qabul qiladi.
Rodopsin = opsin (oqsil) + cis-retinal.
Rodopsin yorug'lik bilan qo'zg'atilganda, sis-retinal, molekula ichidagi fermentativ qayta tashkil etish natijasida, butunlay trans-retinalga (yorug'likda) aylanadi. Bu butun rodopsin molekulasining konformatsion qayta tuzilishiga olib keladi. Rodopsin opsin va trans-retinalga ajraladi, bu esa oxirlarida qo'zg'atuvchi tetikdir. optik asab keyin miyaga uzatiladigan impuls.
Qorong'ida, fermentativ reaktsiyalar natijasida trans-retinal yana sis-retinaga aylanadi va opsin bilan qo'shilib, rodopsin hosil qiladi.
A vitamini o'sish va rivojlanish jarayonlariga ham ta'sir qiladi epiteliyni qoplaydi. Shuning uchun vitamin etishmasligi bilan teri, shilliq pardalar va ko'zlarning shikastlanishi kuzatiladi, bu teri va shilliq pardalarning patologik keratinizatsiyasida o'zini namoyon qiladi. Bemorlarda kseroftalmiya - ko'zning shox pardasining quruqligi rivojlanadi, chunki epiteliyning keratinizatsiyasi natijasida lakrimal kanal tiqilib qoladi. Ko'zni bakteritsid ta'sirga ega bo'lgan ko'z yoshlari bilan yuvish to'xtatilganligi sababli, kon'yunktivit, yaralar va shox pardaning yumshatilishi - keratomalaziya rivojlanadi. A vitamini etishmovchiligi bilan oshqozon-ichak trakti, nafas olish va shilliq qavatining shikastlanishi ham mumkin. genitouriya tizimi. Barcha to'qimalarning infektsiyalarga chidamliligi buziladi. Bolalikda vitamin etishmasligi rivojlanishi bilan o'sish sekinlashadi.
Hozirgi vaqtda hujayra membranalarini oksidlovchilardan himoya qilishda A vitaminining ishtiroki ko'rsatilgan - ya'ni A vitamini antioksidant funktsiyaga ega.
Lipidlar organizmga oziq-ovqat bilan kiradigan va jigarda hosil bo'ladigan yog'lar deyiladi. Qon (plazma yoki sarum) lipidlarning 3 ta asosiy sinfini o'z ichiga oladi: triglitseridlar (TG), xolesterin (CS) va uning efirlari, fosfolipidlar (PL).
Lipidlar suvni jalb qilishga qodir, ammo ularning ko'pchiligi qonda erimaydi. Ular oqsil bilan bog'langan holatda (lipoproteinlar yoki boshqacha aytganda, lipoproteinlar shaklida) tashiladi. Lipoproteinlar nafaqat tarkibi, balki hajmi va zichligi bilan ham farqlanadi, lekin ularning tuzilishi deyarli bir xil. markaziy qismi(yadro) xolesterin va uning esterlari bilan ifodalanadi, yog 'kislotalari, triglitseridlar. Molekula qobig'i oqsillar (apoproteinlar) va suvda eriydigan lipidlardan (fosfolipidlar va esterifikatsiyalanmagan xolesterin) iborat. Apoproteinlarning tashqi qismi suv molekulalari bilan vodorod aloqalarini hosil qilish qobiliyatiga ega. Shunday qilib, lipoproteinlar qisman yog'larda va qisman suvda eritilishi mumkin.
Xilomikronlar qonga kirgandan so'ng glitserin va yog' kislotalariga parchalanadi, natijada lipoproteinlar hosil bo'ladi. Xolesterin o'z ichiga olgan chilomikron qoldiqlari jigarda qayta ishlanadi.
Xolesterin va triglitseridlar jigarda juda past zichlikdagi lipoproteinlarga (VLDL) hosil bo'ladi, ular triglitseridlarning bir qismini periferik to'qimalarga chiqaradi, qolgan qismi esa jigarga qaytadi va past zichlikdagi lipoproteinlarga (LDL) aylanadi.
L PN II periferik to'qimalar uchun xolesterin tashuvchisi bo'lib, hujayra membranalarini va metabolik reaktsiyalarni qurish uchun ishlatiladi. Bunday holda, esterifikatsiyalanmagan xolesterin qon plazmasiga kiradi va yuqori zichlikdagi lipoproteinlar (HDL) bilan bog'lanadi. Esterlashtirilgan xolesterin (esterlarga bog'langan) VLDL ga aylanadi. Keyin tsikl takrorlanadi.
Qonda, shuningdek, xilomikronlar va VLDL qoldiqlari bo'lgan va ko'p miqdorda xolesterinni o'z ichiga olgan oraliq zichlikdagi lipoproteinlar (IDL) mavjud. Lipaza ishtirokida jigar hujayralarida DILI LDL ga aylanadi.
Qon plazmasida 3,5-8 g/l lipidlar mavjud. Qon lipidlari darajasining oshishi giperlipidemiya, kamayishi esa gipolipidemiya deb ataladi. Umumiy qon lipidlari ko'rsatkichi tanadagi yog 'almashinuvi holatining batafsil tasvirini bermaydi.
Maxsus lipidlarni miqdoriy aniqlash diagnostik ahamiyatga ega. Qon plazmasining lipid tarkibi jadvalda keltirilgan.
Qon plazmasining lipid tarkibi
| Lipid fraktsiyasi | Oddiy ko'rsatkich | |
| Umumiy lipidlar | 4,6-10,4 mmol/l | |
| Fosfolipidlar | 1,95-4,9 mmol/l | |
| Lipid fosfor | 1,97-4,68 mmol/l | |
| Neytral yog'lar | 0-200 mg% | |
| Triglitseridlar | 0,565-1,695 mmol/l (zardob) | |
| Esterizatsiyalanmagan yog 'kislotalari | 400-800 mmol/l | |
| Erkin yog 'kislotalari | 0,3-0,8 mkmol/l | |
| Umumiy xolesterin (yoshga oid normalar mavjud) | 3,9-6,5 mmol/l (birlashtirilgan usul) | |
| Erkin xolesterin | 1,04-2,33 mmol/l | |
| Xolesterin esterlari | 2,33-3,49 mmol/l | |
| HDL | M | 1,25-4,25 g/l |
| VA | 2,5-6,5 g/l | |
| LDL | 3-4,5 g/l | |
Dislipidemiya birlamchi, metabolizmning tug'ma xatolari bilan bog'liq va ikkilamchi bo'linadi. Ikkilamchi dislipidemiyaning sabablari jismoniy harakatsizlik va ortiqcha ovqatlanish, alkogolizm, qandli diabet, gipertiroidizm, jigar sirrozi va surunkali buyrak etishmovchiligi. Bundan tashqari, ular glyukokortikosteroidlar, B-blokerlar, progestinlar va estrogenlar bilan davolash paytida rivojlanishi mumkin. Dislipidemiyalarning tasnifi jadvalda keltirilgan.
Dislipidemiyalarning tasnifi
| Turi | Qon darajasining oshishi | |
| Lipoproteinlar | Lipidlar | |
| I | Xilomikronlar | Xolesterin, triglitseridlar |
| Yoniq | LDL | Xolesterin (har doim ham emas) |
| Turi | Qon darajasining oshishi | |
| Lipoproteinlar | Lipidlar | |
| Nb | LDL, VLDL | Xolesterin, triglitseridlar |
| III | VLDL, LPPP | Xolesterin, triglitseridlar |
| IV | VLDL | Xolesterin (har doim ham emas), triglitseridlar |
| V | Xilomikronlar, VLDL | Xolesterin, triglitseridlar |
- heterojenlar guruhi kimyoviy tuzilishi moddalarning fizik va kimyoviy xossalari. Qon zardobida ular asosan yog 'kislotalari, triglitseridlar, xolesterin va fosfolipidlar bilan ifodalanadi.
Triglitseridlar yog' to'qimalarida lipidlarni saqlash va qonda lipidlarni tashishning asosiy shaklidir. Giperlipoproteinemiya turini aniqlash va rivojlanish xavfini baholash uchun triglitseridlar darajasini o'rganish kerak. yurak-qon tomir kasalliklari.
Xolesterin amalga oshiradi muhim funktsiyalar: kiritilgan hujayra membranalari, safro kislotalari, steroid gormonlar va D vitaminining kashshofi bo'lib, antioksidant vazifasini bajaradi. Rossiya aholisining qariyb 10 foizi bor darajasi oshdi qondagi xolesterin. Bu holat asemptomatik va olib kelishi mumkin jiddiy kasalliklar(tomirlarning aterosklerotik lezyonlari, yurak tomirlari kasalligi).
Lipidlar suvda erimaydi, shuning uchun ular oqsillar bilan birgalikda qon zardobida tashiladi. Lipid+oqsil komplekslari deyiladi lipoproteinlar. Va lipidlarni tashishda ishtirok etadigan oqsillar deyiladi apoproteinlar.
Qon zardobida bir necha sinflar mavjud lipoproteinlar: chilomikronlar, juda past zichlikdagi lipoproteinlar (VLDL), past zichlikdagi lipoproteinlar (LDL) va yuqori zichlikdagi lipoproteinlar (HDL).
Har bir lipoprotein fraktsiyasi o'z funktsiyasiga ega. jigarda sintezlanadi va asosan triglitseridlarni tashiydi. o'ynamoqda muhim rol aterogenezda. Past zichlikdagi lipoproteinlar (LDL) xolesteringa boy, xolesterinni periferik to'qimalarga etkazib beradi. VLDL va LDL darajalari qon tomir devorida xolesterin yotqizilishiga yordam beradi va aterogen omillar hisoblanadi. Yuqori zichlikdagi lipoproteinlar (HDL) xolesterinni to'qimalardan teskari tashishda ishtirok etish, uni ortiqcha yuklangan to'qimalar hujayralaridan olib tashlash va uni "ishlatish" va uni tanadan olib tashlash uchun jigarga o'tkazish. Yuqori HDL darajasi antiaterogen omil sifatida qaraladi (tanani aterosklerozdan himoya qiladi).
Xolesterinning roli va ateroskleroz rivojlanish xavfi uning qaysi lipoprotein fraktsiyalariga kiritilganligiga bog'liq. Aterogen va antiaterogen lipoproteinlar nisbatini baholash uchun u ishlatiladi aterogen indeks.
Apolipoproteinlar- Bular lipoproteinlar yuzasida joylashgan oqsillardir.
Apolipoprotein A (ApoA oqsili) xolesterinni periferik to'qimalar hujayralaridan jigarga olib o'tadigan lipoproteinlarning (HDL) asosiy oqsil komponenti.
Apolipoprotein B (ApoB oqsili) lipidlarni periferik to'qimalarga o'tkazadigan lipoproteinlarning bir qismidir.
Qon zardobida apolipoprotein A va apolipoprotein B kontsentratsiyasini o'lchash lipoproteinlarning aterogen va antiaterogen xususiyatlarining nisbatini eng aniq va aniq aniqlash imkonini beradi, bu keyingi besh yil ichida aterosklerotik tomirlar lezyonlari va yurak-qon tomir kasalliklarini rivojlanish xavfi sifatida baholanadi. .
Tadqiqotga lipid profili quyidagi ko'rsatkichlarni o'z ichiga oladi: xolesterin, triglitseridlar, VLDL, LDL, HDL, aterogenlik koeffitsienti, xolesterin / triglitseridlar nisbati, glyukoza. Bu profil beradi to'liq ma'lumot lipid almashinuvi haqida, aterosklerotik tomirlar lezyonlari, yurak-qon tomir kasalliklari rivojlanish xavfini aniqlash, dislipoproteinemiya mavjudligini aniqlash va uni tiplash, shuningdek, agar kerak bo'lsa, to'g'ri lipidlarni kamaytiradigan terapiyani tanlash imkonini beradi.
Ko'rsatkichlar
Konsentratsiyaning kuchayishixolesterin Unda bor diagnostik qiymat birlamchi oilaviy giperlipidemiya bilan (kasallikning irsiy shakllari); homiladorlik, hipotiroidizm, nefrotik sindrom, obstruktiv jigar kasalliklari, oshqozon osti bezi kasalliklari ( surunkali pankreatit, malign neoplazmalar), qandli diabet.
Konsentratsiyaning pasayishixolesterin jigar kasalliklari (siroz, gepatit), ochlik, sepsis, gipertiroidizm, megaloblastik anemiya uchun diagnostik ahamiyatga ega.
Konsentratsiyaning kuchayishitriglitseridlar asosiy giperlipidemiya (kasallikning irsiy shakllari) uchun diagnostik ahamiyatga ega; semizlik, ortiqcha iste'mol uglevodlar, alkogolizm, diabetes mellitus, hipotiroidizm, nefrotik sindrom, surunkali buyrak etishmovchiligi, gut, o'tkir va surunkali pankreatit.
Konsentratsiyaning pasayishitriglitseridlar gipolipoproteinemiya, gipertiroidizm, malabsorbtsiya sindromi uchun diagnostik ahamiyatga ega.
Juda past zichlikdagi lipoproteinlar (VLDL) dislipidemiyani tashxislash uchun ishlatiladi (IIb, III, IV va V turlari). Qon zardobida VLDL ning yuqori konsentratsiyasi bilvosita sarumning aterogen xususiyatlarini aks ettiradi.
Konsentratsiyaning kuchayishipast zichlikdagi lipoproteinlar (LDL) asosiy giperkolesterolemiya, dislipoproteinemiya (IIa va IIb turlari) uchun diagnostik ahamiyatga ega; semizlik, obstruktiv sariqlik, nefrotik sindrom, diabetes mellitus, hipotiroidizm uchun. LDL darajasini aniqlash uzoq muddatli davolanishni tayinlash uchun zarur bo'lib, uning maqsadi lipid kontsentratsiyasini kamaytirishdir.
Konsentratsiyaning kuchayishi jigar sirrozi va alkogolizm uchun diagnostik ahamiyatga ega.
Konsentratsiyaning pasayishiyuqori zichlikdagi lipoproteinlar (HDL) gipertrigliseridemiya, ateroskleroz, nefrotik sindrom, diabetes mellitus uchun diagnostik ahamiyatga ega, o'tkir infektsiyalar, semizlik, chekish.
Darajani aniqlash apolipoprotein A koroner yurak kasalligi xavfini erta baholash uchun ko'rsatilgan; nisbatan aterosklerozga irsiy moyilligi bo'lgan bemorlarni aniqlash yoshligida; lipidlarni kamaytiradigan dorilar bilan davolashni kuzatish.
Konsentratsiyaning kuchayishiapolipoprotein A jigar kasalliklari va homiladorlik uchun diagnostik ahamiyatga ega.
Konsentratsiyaning pasayishiapolipoprotein A nefrotik sindrom, surunkali buyrak etishmovchiligi, triglitseridemiya, kolestaz, sepsis uchun diagnostik ahamiyatga ega.
Diagnostik qiymatapolipoprotein B- yurak-qon tomir kasalliklarini rivojlanish xavfining eng aniq ko'rsatkichi, shuningdek, statin terapiyasi samaradorligining eng adekvat ko'rsatkichidir.
Konsentratsiyaning kuchayishiapolipoprotein B dislipoproteinemiya (IIa, IIb, IV va V turlari), yurak ishemik kasalligi, diabetes mellitus, hipotiroidizm, nefrotik sindrom, jigar kasalliklari, Itsenko-Kushing sindromi, porfiriya uchun diagnostik ahamiyatga ega.
Konsentratsiyaning pasayishiapolipoprotein B gipertiroidizm, malabsorbtsiya sindromi uchun diagnostik ahamiyatga ega, surunkali anemiya, yallig'lanish kasalliklari bo'g'imlar, miyelom.
Metodologiya
Aniqlash "Architect 8000" biokimyoviy analizatorida amalga oshiriladi.
Tayyorgarlik
lipid profilini o'rganish (xolesterin, triglitseridlar, HDL-C, LDL-C, lipoproteinlarning apo-oqsillari (Apo A1 va Apo-B)
Jismoniy faollikdan, spirtli ichimliklarni iste'mol qilishdan, chekishdan va chekishdan voz kechish kerak dorilar, qon to'plashdan oldin kamida ikki hafta davomida dietani o'zgartirish.
Qon faqat och qoringa, oxirgi ovqatdan 12-14 soat o'tgach olinadi.
Afzal ertalabki qabul dorilar qon olingandan keyin amalga oshiring (agar iloji bo'lsa).
Qon topshirishdan oldin quyidagi muolajalarni bajarmaslik kerak: in'ektsiya, ponksiyon, umumiy massaj tana, endoskopiya, biopsiya, EKG, rentgen tekshiruvi, ayniqsa kontrast moddani, dializni kiritish bilan.
Agar u hali ham ahamiyatsiz bo'lsa jismoniy mashqlar stressi– Qon topshirishdan oldin kamida 15 daqiqa dam olishingiz kerak.
Lipid testi qachon amalga oshirilmaydi yuqumli kasalliklar, chunki yuqumli agent turi yoki bemorning klinik holatidan qat'i nazar, umumiy xolesterin va HDL-C darajasining pasayishi. Lipid profilini faqat keyin tekshirish kerak to'liq tiklanish sabr.
Ushbu tavsiyalarga qat'iy rioya qilish juda muhim, chunki faqat bu holatda qon testining ishonchli natijalari olinadi.
Qon zardobidagi umumiy lipidlarni miqdoriy aniqlash uchun ko'pincha fosfovanillin reaktivi bilan kolorimetrik usul qo'llaniladi. Oddiy lipidlar fosfovanillin reaktivi bilan sulfat kislota bilan gidrolizlangandan keyin qizil rang hosil qilish uchun reaksiyaga kirishadi. Rangning intensivligi qon zardobidagi umumiy lipidlar tarkibiga mutanosibdir.
1. ga muvofiq uchta probirkaga reaktivlarni soling quyidagi diagramma:
2. Probirkalarning tarkibini aralashtiramiz va qorong'i joyda 40-60 daqiqaga qoldiring. (eritmaning rangi sariqdan pushti ranggacha o'zgaradi).
3. Yana aralashtiramiz va qatlam qalinligi 5 mm bo'lgan kyuvetada ko'r namunaga nisbatan 500-560 nm (yashil filtr) optik zichlikni o'lchaymiz.
4. Umumiy lipidlar miqdorini formuladan foydalanib hisoblang:
bu erda D 1 - eksperimental namunaning kyuvetada so'nishi;
D 2 – kyuvetada lipidlarni kalibrlash eritmasining so‘nishi;
X - standart eritmadagi umumiy lipidlar konsentratsiyasi.
“Jami lipidlar” tushunchasini aniqlang. Olingan qiymatni oddiy qiymatlar bilan solishtiring. Ushbu ko'rsatkich bo'yicha qanday biokimyoviy jarayonlarni baholash mumkin?
Tajriba 4. Qon zardobida b- va pre-b-lipoproteinlar miqdorini aniqlash.
2. Pipetkalar to'plami.
3. Shisha tayoq.
5. Kyuvetlar, 0,5 sm.
Reaktivlar. 1. Qon zardobi.
2. Kaltsiy xlorid, 0,025 M eritmasi.
3. Geparin, 1% eritma.
4. Distillangan suv.
1. Probirkaga 2 ml 0,025 M kalsiy xlorid quyiladi va unga 0,2 ml qon zardobi solinadi.
2. Distillangan suvga nisbatan qatlam qalinligi 0,5 sm bo'lgan kyuvetada 630-690 nm (qizil filtr) to'lqin uzunligidagi FEC-e da namunaning optik zichligini (D 1) aralashtiramiz va o'lchaymiz. Optik zichlik D 1 qiymatini yozib oling.
3. Keyin kyuvetaga 0,04 ml 1% li geparin eritmasidan (1 ml ga 1000 dona) soling va 4 daqiqadan so’ng yana D2 optik zichligini o’lchang.
Qiymatlardagi farq (D 2 - D 1) b-lipoproteinlarning cho'kmasi tufayli optik zichlikka mos keladi.
B- va pre-b-lipoproteinlar tarkibini formuladan foydalanib hisoblang:
bu erda 12 - g / l ga o'tkazish koeffitsienti.
b-lipoproteinlarning biosintez qilinadigan joyini ko'rsating. Ular odam va hayvonlar organizmida qanday vazifani bajaradi? Olingan qiymatni oddiy qiymatlar bilan solishtiring. Qanday hollarda normal qiymatlardan chetga chiqish kuzatiladi?
Dars № 16. "Lipidlar almashinuvi (2-qism)"
Darsning maqsadi: yog 'kislotalarining katabolizm va anabolizm jarayonlarini o'rganish.
TEST UCHUN SAVOLLAR:
1. Yog 'kislotalari oksidlanishining biokimyoviy mexanizmi.
2. Keton tanachalarining almashinuvi: shakllanishi, biokimyoviy maqsadi. Hayvonlarda ketoz rivojlanishiga qanday omillar sabab bo'ladi?
3. Yog 'kislotalari sintezining biokimyoviy mexanizmi.
4. Triatsilgliserinlarning biosintezi. Ushbu jarayonning biokimyoviy roli.
5. Fosfolipidlarning biosintezi. Ushbu jarayonning biokimyoviy roli.
Tugallangan sana ________ band ____ O‘qituvchi imzosi ____________
Eksperimental ish.
Tajriba 1. Siydik, sut, qon zardobida keton tanachalarini aniqlashning ekspress usuli (Lestrade testi).
Qurilmalar. 1. Probirkalar solingan stend.
2. Pipetkalar to'plami.
3. Shisha tayoq.
4. Filtr qog'ozi.
Reaktivlar. 1. Reaktiv kukuni.
3. Qon zardobi.
4. Sut.
1. Skalpel uchidagi filtr qog'oziga oz miqdorda (0,1-0,2 g) reaktiv kukuni soling.
2. Reaktiv kukuniga bir necha tomchi qon zardobini o'tkazing.
Beradigan qondagi keton tanalarining minimal darajasi ijobiy reaktsiya, 10 mg/100 ml (10 mg%) ga teng. Rangning rivojlanish tezligi va uning intensivligi sinov namunasidagi keton jismlarining kontsentratsiyasiga mutanosibdir: agar binafsha rang darhol paydo bo'lsa - tarkibi 50-80 mg% yoki undan ko'p; agar u 1 daqiqadan so'ng paydo bo'lsa, namunada 30-50 mg% mavjud; 3 daqiqadan so'ng zaif rangning rivojlanishi 10-30 mg% keton tanalari mavjudligini ko'rsatadi.
Shuni esda tutish kerakki, asetoni aniqlashda test 3 barobardan ko'proq sezgir sirka kislotasi asetonga qaraganda. Odam zardobidagi barcha keton tanachalaridan atsetosirka kislotasi ustunlik qiladi, ammo sog'lom sigirlar qonida keton tanachalarining 70-90% b-gidroksibutirik kislota, sutda esa 87-92% ni tashkil qiladi.
Tadqiqotingiz natijalari asosida xulosa chiqaring. Keton tanachalarining ko'p hosil bo'lishi nima uchun odam va hayvonlar organizmida xavfli ekanligini tushuntiring?
Ular turli xil zichlikka ega va lipidlar almashinuvining ko'rsatkichlari hisoblanadi. Umumiy lipidlarni miqdoriy aniqlashning turli usullari mavjud: kolorimetrik, nefelometrik.
Usulning printsipi. To'yinmagan lipidlarning gidroliz mahsulotlari fosfovanillin reaktivi bilan qizil rangli birikma hosil qiladi, uning rang intensivligi umumiy lipidlar tarkibiga to'g'ridan-to'g'ri proportsionaldir.
Ko'pchilik lipidlar qonda erkin holatda emas, balki oqsil-lipid komplekslarining bir qismi sifatida: xlomikronlar, a-lipoproteinlar, b-lipoproteinlar. Lipoproteinlarni turli usullar bilan ajratish mumkin: sentrifugalash tuzli eritmalar turli zichlik, elektroforez, yupqa qatlam xromatografiyasi. Ultratsentrifugalash jarayonida turli zichlikdagi xlomikronlar va lipoproteinlar ajratiladi: yuqori (HDL - a-lipoproteinlar), past (LDL - b-lipoproteinlar), juda past (VLDL - pre-b-lipoproteinlar) va boshqalar.
Lipoprotein fraksiyalari oqsil miqdori, lipoproteinlarning nisbiy molekulyar og'irligi va individual lipid komponentlarining ulushi bilan farqlanadi. Shunday qilib, ko'p miqdorda protein (50-60%) o'z ichiga olgan a-lipoproteinlar yuqori nisbiy zichlikka ega (1,063-1,21), b-lipoproteinlar va pre-b-lipoproteinlar esa kamroq protein va sezilarli miqdordagi lipidlarni o'z ichiga oladi. umumiy nisbiy molekulyar og'irlikning 95% gacha va nisbiy zichligi past (1,01-1,063).
Usulning printsipi. Sarum LDL geparin reagenti bilan o'zaro ta'sir qilganda, xiralik paydo bo'ladi, uning intensivligi fotometrik tarzda aniqlanadi. Geparin reagenti geparin va kaltsiy xlorid aralashmasidir.
O'rganilayotgan material: qon zardobi.
Reaktivlar: 0,27% CaCl 2 eritmasi, 1% geparin eritmasi.
Uskunalar: mikropipetka, FEC, optik yo'l uzunligi 5 mm bo'lgan kyuveta, probirkalar.
OLISH. Probirkaga 2 ml 0,27% li CaCl 2 eritmasidan va 0,2 ml qon zardobidan solinadi va aralashtiriladi. Eritmaning optik zichligini (E 1) qizil filtr (630 nm) yordamida kyuvetlarda 0,27% CaCl 2 eritmasiga nisbatan aniqlang. Kyuvetadagi eritma probirkaga quyiladi, mikropipet bilan 0,04 ml 1% li geparin eritmasidan solinadi, aralashtiriladi va roppa-rosa 4 minutdan keyin yana shu sharoitda eritmaning optik zichligi (E 2) aniqlanadi. .
Optik zichlikdagi farq hisoblab chiqiladi va 1000 ga ko'paytiriladi - Ledvina tomonidan taklif qilingan empirik koeffitsient, chunki kalibrlash egri chizig'ini qurish bir qator qiyinchiliklar bilan bog'liq. Javob g/l da ifodalangan.
x(g/l) = (E 2 - E 1) 1000.
. Qonda LDL (b-lipoproteinlar) miqdori yoshga, jinsga qarab o'zgaradi va odatda 3,0-4,5 g / l ni tashkil qiladi. LDL kontsentratsiyasining oshishi ateroskleroz, obstruktiv sariqlik, o'tkir gepatit, surunkali kasalliklar jigar, qandli diabet, glikogenoz, ksantomatoz va semizlik, b-plazmositomada kamaydi. O'rtacha LDL xolesterin miqdori taxminan 47% ni tashkil qiladi.
Qon zardobidagi umumiy xolesterin miqdorini Liberman-Burxard reaktsiyasi asosida aniqlash (Ilk usuli)
0,3-0,5 g miqdorida ekzogen xolesterin kelib chiqadi oziq-ovqat mahsulotlari, va endogen organizmda kuniga 0,8-2 g miqdorida sintezlanadi. Ayniqsa, ko'p xolesterin jigar, buyraklar, buyrak usti bezlari va arterial devorda sintezlanadi. Xolesterin 18 molekula atsetil-KoA, 14 molekula NADPH, 18 molekula ATPdan sintezlanadi.
Qon zardobiga sirka angidrid va konsentrlangan sulfat kislota qo'shilsa, suyuqlik ketma-ket qizil, ko'k rangga aylanadi va nihoyat. yashil rang. Reaktsiya yashil sulfonik kislota xolesterilen hosil bo'lishidan kelib chiqadi.
Reaktivlar: Libermann-Burxard reaktivi (1:5:1 nisbatda muzli sirka kislotasi, sirka angidrid va konsentrlangan sulfat kislota aralashmasi), standart (1,8 g/l) xolesterin eritmasi.
Uskunalar: quruq probirkalar, quruq pipetkalar, FEC, optik yo'l uzunligi 5 mm bo'lgan kyuvetalar, termostat.
OLISH. Barcha probirkalar, pipetkalar, kyuvetalar quruq bo'lishi kerak. Libermann-Burkhard reaktivi bilan ishlashda juda ehtiyot bo'lishingiz kerak. Quruq probirkaga 2,1 ml Liberman-Burxard reaktivi solinadi, probirka devori bo‘ylab 0,1 ml gemolizlanmagan qon zardobidan juda sekin qo‘shiladi, probirka qattiq chayqatiladi, so‘ngra 20 daqiqa davomida 37ºC da termostatga qo‘yiladi. . Zumrad yashil rang paydo bo'lib, u Libermann-Burkhard reaktiviga qarshi qizil filtr (630-690 nm) bilan FECda kolorimetrlanadi. FECda olingan optik zichlik kalibrlash grafigiga ko'ra xolesterin kontsentratsiyasini aniqlash uchun ishlatiladi. Tajribaga 0,1 ml sarum olinadi, chunki topilgan xolesterin konsentratsiyasi 1000 ga ko'paytiriladi. SI birliklariga aylantirish koeffitsienti (mmol/l) 0,0258 ni tashkil qiladi. Oddiy tarkib qon zardobida umumiy xolesterin (erkin va esterlangan) 2,97-8,79 mmol/l (115-340 mg%).
Kalibrlash grafigini yaratish. 1 ml tarkibida 1,8 mg xolesterin bo'lgan standart xolesterin eritmasidan 0,05 ni oling; 0,1; 0,15; 0,2; 0,25 ml va Libermann-Burkhard reaktivi (mos ravishda 2,15; 2,1; 2,05; 2,0; 1,95 ml) bilan 2,2 ml hajmga moslashtirildi. Namunadagi xolesterin miqdori 0,09; 0,18; 0,27; 0,36; 0,45 mg. Olingan standart xolesterin eritmalari, shuningdek, probirkalar kuchli chayqatiladi va 20 daqiqa davomida termostatga joylashtiriladi, shundan so'ng ular fotometrlanadi. Kalibrlash grafigi standart eritmalarning fotometriyasi natijasida olingan yo'q bo'lib ketish qiymatlari asosida tuziladi.
Klinik va diagnostik ahamiyatga ega. Agar lipidlar almashinuvi buzilgan bo'lsa, xolesterin qonda to'planishi mumkin. Qonda xolesterin miqdorining oshishi (giperkolesterolemiya) ateroskleroz, qandli diabet, obstruktiv sariqlik, nefrit, nefroz (ayniqsa, lipoid nefroz), hipotiroidizmda kuzatiladi. Qonda xolesterin miqdorining pasayishi (gipoxolesterinemiya) anemiya, ro'za tutish, sil, gipertiroidizm, saraton kaxeksiyasi, parenximal sariqlik, markaziy asab tizimining shikastlanishi, febril holatlar bilan kuzatiladi.
