Оношлогооны аргуудОрчин үед лабораторид тодорхой өвчнийг тодорхойлох боломжтой болсон тусгай шинжилгээ. Эдгээрийн нэг нь ферменттэй холбоотой дархлалтай цусны шинжилгээ бөгөөд өмнө нь хийсэн оношийг батлах боломжтой.
Enzyme immunoassay ELISA нь хамгийн үр дүнтэй бөгөөд нэг юм орчин үеийн аргууддархлаатай холбоотой эмгэгийг тодорхойлох боломжийг олгодог дааврын тэнцвэргүй байдал, түүнчлэн онкологийн үйл явц. Шинжилгээний явцад бие махбодид халдварын үед үүссэн эсрэгбиемийг цусанд илрүүлж болно. Энэ нюансыг харгалзан үзвэл өвчнийг хөгжлийнхөө эхний үе шатанд ч илрүүлж болно.
Техникийн үндэс нь юу вэ?
ELISA шинжилгээний үр дүн нь олж авахад үндэслэсэн болно химийн урвалэсрэгбиеийг таних тусгай таних тэмдэг болдог ферментүүд дээр. Тиймээс дархлааны химийн урвалын үед эсрэгбие нь тодорхой эсрэгтөрөгчтэй харилцан үйлчилж эхэлдэг. Энэ бүхэн үүнийг батлах үндэслэл болж байна худал үр дүн ELISA-д цус өгөхөд хамгийн бага байдаг.
Судалгаа нь хэмжээг тодорхойлох боломжийг бидэнд олгодог дархлааны эсүүд, тэдгээрийн шинж чанар, түүнчлэн шаардлагатай эсрэгбиемүүд байгаа эсэх
Уусмалын өнгө илэрсэн үед үр дүнг эерэг гэж үзнэ. Өнгө нь эсрэгтөрөгч нь эсрэгбиетэй харилцан үйлчилж байгааг харуулж байна. Хэрэв ийм зүйл тохиолдоогүй бол үр дүн нь сөрөг байна.
(энэ файлын 3-р нийтлэлийн холбоос) нь биеийн эсэргүүцэх чадварыг үнэлэх боломжийг танд олгоно Халдварт өвчинӨвчний үе шатыг харуулсан ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээ (ELISA) нь чухал байр суурийг эзэлдэг. Энэхүү судалгааг хийх нь цусны хамгаалалтын функцийг иж бүрэн үнэлж, халдварт эмгэг, цусны өвчин, аутоиммун үйл явц, дааврын эмгэгийн үед дархлал хомсдолын төлөв байдлыг тодорхойлох боломжийг олгодог.
Яаж ийм олон зорилтыг нэг шинжилгээнд хамруулах боломжтой вэ, түүнийг хэрэгжүүлэх ямар заалтууд байна вэ? Үүнийг ойлгохыг хичээцгээе.
ELISA аргыг ашиглан цусны шинжилгээ гэж юу вэ?
Энэ лабораторийн шинжилгээ, энэ нь тодорхой эсрэгтөрөгч (эмгэг төрүүлэгч бодис) -д тодорхой эсрэгбие (уургийн шинж чанартай цусны хамгаалалтын хүчин зүйл) байгаа эсэхийг тодорхойлох боломжийг олгодог. Эсрэгбиеийн дотроос дархлааны цогцолбор хэлбэрээр байж болох иммуноглобулинууд чухал ач холбогдолтой юм.
Иммуноглобулин нь гадны эсрэгтөрөгчийг нэвтрүүлэхэд хариу үйлдэл үзүүлэх хүний neurohumoral урвалын цогц урвалын үр дүнд үүсдэг. Эмгэг төрүүлэгчийн төрөл бүр өөрийн өвөрмөц эсрэгбие үүсгэдэг. Эдгээр нь эсрэгтөрөгч эсвэл эмгэг төрүүлэгч бичил биетнийг "холбох" замаар үйлчилж, "эсрэгтөрөгч-эсрэгбие" гэсэн нарийн төвөгтэй нэгдлийг үүсгэж, дараа нь саармагжуулах, ферментийн задрал, фагоцитозын урвал, биеэс зайлуулах зэрэг үйл ажиллагаа явуулдаг.
Жич:Тодорхой цогцолборууд байгаа тул ELISA арга нь өвчтөнд байгаа эмгэг төрүүлэгч эсвэл хортой бодисын төрлийг тодорхойлдог.
Мэдэх үндсэн зарчимХүний дархлааны систем хэрхэн ажилладагийг харж болно энэ видеотойм:
Иммуноглобулин гэж юу вэ?
IgA, IgM, IgG, IgD, IgE гэсэн үндсэн 5 иммуноглобулины ангиллыг олж, судалсан. бусдын үүрэг бүрэн тодорхойлогдоогүй байгаа бөгөөд шинжлэх ухааны судалгаанд хамрагдаж байна.
Жич:-д хамгийн чухал практик анагаах ухаан A, M, G ангиллын иммуноглобулинууд нь чухал юм.Тодорхойлолтын мэдээллийн агуулга нь тэдгээрийн харагдах байдал, дээд тал нь, алга болох өөр өөр хугацаан дээр суурилдаг.
Энэ асуудлыг илүү нарийвчлан авч үзье.
Гол ажил иммуноглобулин А (IgA)салст бүрхэвчийн хамгаалалтын функцүүдээс бүрддэг амьсгалын замын, ходоод гэдэсний замболон шээсний систем. Өвчний цочмог үед тэдгээрийг тодорхойлох боломжгүй байдаг. Эдгээр хамгаалалтын цогцолборууд нь зөвхөн өвчний эхэн үеийн 2 дахь долоо хоногоос, заримдаа дараа нь гарч ирдэг. Иммуноглобулин А-ийн ихэнх хэсэг нь салст эдэд төвлөрдөг. Ойролцоогоор 80 орчим хувь. Үлдсэн эсрэгбие нь цусанд эргэлддэг. Гол үүрэг нь бичил биетнийг саармагжуулах, устгах явдал юм. Сулсны дараа цочмог илрэлүүдөвчний үед эдгээр иммуноглобулины хэмжээ буурч эхэлдэг бөгөөд өвчин эхэлснээс хойш 8 долоо хоног хүртэл бүрэн алга болдог. Хэрэв IgA хожуу илэрвэл энэ нь архаг явцтай байгааг илтгэнэ.
Цочмог үе шатны гол ба анхны маркерууд хөгжиж буй эмгэгбайна иммуноглобулины анги M (IgM). Тэд өвчний эхэн үеийн 5 дахь өдөр илэрдэг. Тэдний цусанд байгаа эсэхийг 6 долоо хоногийн дотор тодорхойлж болно. Дараа нь тэд хурдан алга болж эхэлдэг.
Үлдэгдэл дархлааны хариу урвал нь цусанд байгаагаар тодорхойлогддог иммуноглобулины анги G (IgG). Цусан дахь эдгээр хүчин зүйлсийн илрэл нь өвчний эхэн үеэс хойш ойролцоогоор сарын дараа илэрдэг. Ирээдүйд тэд олон сар, жил, тэр байтугай насан туршдаа биелэгдэх боломжтой хамгаалалтын функцөвчний эргэн ирэлтээс (дахилтаас), зарим тохиолдолд эмгэг судлалын хоёрдогч хөгжлийг боломжгүй болгодог. Хэрэв иммуноглобулины G-ийн хэмжээ дахин нэмэгдэж эхэлбэл хүн сэжиглэж болно дахин халдвар авах. Үүнтэй төстэй дүгнэлтийг 2 долоо хоногийн зайтай хоёроос гурван дээж авах замаар хийж болно.
Иммуноглобулин D (IgD)В-лимфоцитууд дээр байрладаг бөгөөд бага концентрацитай байдаг эрүүл хүмүүс. Амьдралын 10 жилийн дараа энэ нь хамгийн дээд хэмжээндээ хүрдэг. Жирэмсэн үед иммуноглобулины D-ийн хэмжээ өвчтөнд нэмэгддэг системийн өвчин холбогч эд, дархлал хомсдолоос үүдэлтэй өвчин.
Ферментийн дархлаа судлалын цусны шинжилгээг хэрэглэх заалт
Бие махбодид байгаа эсрэгбиемүүдийг тодорхойлох эмгэг төрүүлэгч бичил биетүүд, шалтгаан:
- трихомониаз;
- уреаплазмоз ба
Иммуноглобулины хэмжээ ихсэж байна.
Оношлогоо нь дараахь зүйлийг илрүүлэхийн тулд хийгддэг.
- герпетик өвчин;
- бүлгүүд вируст гепатит;
- Эпштейн-Барр вирус;
- цитомегоаловирүс.
ELISA ашиглан та 600 төрлийн харшил үүсгэгчийн эсрэгбие байгаа эсэхийг тодорхойлж, дархлал хомсдолын төлөв байдлыг илрүүлж, биеэ авч явах боломжтой. иж бүрэн шалгалтшилжүүлэн суулгах хагалгааны өмнө эмчилгээний үр дүнг тодорхойлохын тулд цогц дүн шинжилгээ хийх.
ELISA бол нэмэлт аргахорт хавдрын эсийг илрүүлэх.
Цусны ЭЛИЗА хэрхэн хийдэг вэ?
Ферментийн дархлаа судлалын хувьд ихэнх тохиолдолд өвчтөний цусыг ашигладаг, заримдаа эдийг цуглуулдаг шилэн хэлбэртэй, нугасны сувгийн шингэн, амнион шингэн.
Цусыг тарилгын зүүгээр тариурт шоо венийн судаснаас авдаг. Судалгааг хоосон ходоодонд хийдэг. Заримыг нь авдаг гэдгийг санах нь зүйтэй эрүүл мэндийн хангамжшинжилгээний үр дүнд нөлөөлж болно. Цусаа өгөхөөс өмнө тамхи татах, архи уухаас татгалзах хэрэгтэй. Мансууруулах бодис хэрэглэх нь үр дүнг гажуудуулж болно.
IgM, IgG, IgA иммуноглобулинуудын сөрөг утгын хувьд бид өвчин байхгүй эсвэл түүний эхний үе шатын талаар ярьж болно; мөн хэрэв хасах үр дүн гарах боломжтой. бүрэн сэргээхнэлээд хугацаа өнгөрсний дараа.
Хэрэв IgA ба IgM илрээгүй, IgG эерэг байвал халдварт өвчний дараа эсвэл вакцин хийлгэсний дараа үүссэн дархлааны тухай ярьж байна.
Хэзээ өндөр титр IgG, IgA-ийн сөрөг утгатай IgM нь цочмог халдварт өвчин байдаг гэж дүгнэж болно.
Иммуноглобулины үр дүнгийн нэгэн зэрэг эерэг үзүүлэлтүүд - IgA, IgM, IgG нь одоо байгаа архаг өвчний дахилтын цочмог үе шатанд тодорхойлогддог.
Учир нь архаг халдвар, үйл явц (ремисс) буурах үе шатанд байгаа ELISA нь иммуноглобулины M (IgM) сөрөг утгыг харуулж байгаа бол иммуноглобулины G (IgG) ба A (IgA) эерэг байх болно.
Ферментийн дархлаа судлалын цусны шинжилгээний аргын давуу тал
ELISA аргын гол давуу талууд нь:
- дүн шинжилгээ хийх зардал бага;
- оношлогооны өвөрмөц байдал, нарийвчлал;
- динамик хяналт (эмчилгээний үр дүн, өвчний үе шатыг тодорхойлох шинжилгээг давтан хийх);
- халдварын бүсэд массын үзлэг хийх боломж;
- үр дүнд хүрэх хурд;
- шинжилгээний харьцангуй энгийн байдал;
- ашиглах боломж мэдээллийн технологиболовсруулахад;
- өвчтөний аюулгүй байдал, өвдөлтгүй байдал.
Цусны ЭЛИЗА-д ямар нэг сул тал бий юу?
Судалгааны гол сөрөг тал бол хуурамч сөрөг, хуурамч эерэг мэдээлэл олж авах боломж юм. Үл ойлголцлын шалтгаан нь техникийн дутагдал эсвэл эмийн хэрэглээ байж болох бөгөөд энэ нь зургийг гажуудуулж болзошгүй юм.
ELISA нь дараахь зүйлийг илрүүлэхэд ашиглагддаг.
- (аскарис, pinworms);
- цочмог ба архаг хэлбэрописторхоз;
- трихиноз;
- Giardia байгаа эсэх (нэмэлт шинжилгээ болгон);
- лейшманиазын хэлбэрүүд;
- амебиаз;
- токсоплазмын агууламж;
Эцэст нь хэлэхэд орчин үеийн дархлаа судлал нь өвчнийг оношлох, эмчлэх шинэ аргыг эрэлхийлж, хөгжлийн шатандаа байдгийг тэмдэглэх нь зүйтэй.
Степаненко Владимир, мэс засалч
ELISA судалгааг хэрхэн хийдэг вэ?
Урвалын механизм
Ферментийн дархлааны шинжилгээ нь дээр суурилдаг дархлааны урвалэсрэгтөрөгчийг эсрэгбиемтэй холбож, ферментийн шошгыг эсрэгбиемүүдэд хавсаргах нь ферментийн идэвхжил эсвэл түүний түвшний өөрчлөлтөөр эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн урвалын үр дүнг харгалзан үзэх боломжтой болгодог.Хялбаршуулсан хэлбэрээр урвалын механизмыг дараах байдлаар илэрхийлж болно.
|
Эхний урвал нь илэрсэн Ig (Ab) ба цэвэршүүлсэн эмгэг төрүүлэгч антиген (Ag) хооронд дархлаа судлалын таблетын нүхний гадаргуу дээр тогтдог. |
|
|
|
Үүссэн дархлааны цогцолборыг тодорхойлохын тулд хоёрдахь дархлаа судлалын урвалыг хийдэг бөгөөд үүнд холбогдсон өвөрмөц Ig нь эсрэгтөрөгчийн үүрэг гүйцэтгэдэг ба Ig (Ab) -ийг пероксидаза (K) ферментээр тэмдэглэсэн харгалзах хүний Ig-тэй холбодог коньюгат. , түүний эсрэгбие болгон ашигладаг. |
|
|
Дараа нь коньюгат молекулын ферментийн хэсэгээр катализлагдсан ферментийн урвал явагдана.Энэ урвалын субстрат нь өнгөгүй бодис - хромоген бөгөөд урвалын явцад өнгөт бодис үүсгэдэг. Худаг дахь өнгөний эрч хүч нь дээжинд агуулагдах иммуноглобулины хэмжээнээс тодорхой хэмжээгээр хамаарна. |
Үр дүнгийн тооцоо
Ферментийн дархлааны шинжилгээ хийх
Серодиагнозын хувьд 96 худагтай полистирол хавтанг ашигладаг бөгөөд эсийн хананд эсрэгтөрөгчийг урьдчилан шингээдэг. Туршилтын ийлдсийг таблетын эсэд нэмнэ. Энэ тохиолдолд эсрэгтөрөгчтэй ижил төстэй эсрэгбиеүүд түүнд хавсардаг. Холбогдсон эсрэгбиемүүдийг угаах замаар арилгадаг. Дараа нь ферментээр тэмдэглэгдсэн хүний иммуноглобулины эсрэг эсрэгбие (эсрэгбие) эсүүдэд нэмэгддэг. Туршилтын ийлдсэнд илрэх боломжтой эсрэгбие байгаа бол энэ үе шатанд тэдгээр нь шошготой эсрэгбиемүүд хариу үйлдэл үзүүлэх эсрэгтөрөгчийн үүрэг гүйцэтгэнэ. Угаалгын дараа хромоген бодис (будаг) нэмсэнээр эсийн доторх өнгө үүсэх урвалыг харгалзан үзэх боломжтой болно. Өнгөний эрч хүч нь ферментийн хэмжээ, тиймээс эсрэгбиеийн хэмжээтэй пропорциональ байдаг.Эс дэх шингэний оптик нягтыг (ОД) хэмжиж, хяналтын дээжтэй харьцуулахдаа эсрэгбиеийн концентрацийг нэгжээр тооцдог. Үр дүнг оптик нягтын нэгжээр тооцоолоход ихэвчлэн ашиглагддаг.Туршилтын систем бүр үр дүн, хэвийн байдал, эмгэг судлалын үзүүлэлтийг бүртгэх өөрийн гэсэн үзүүлэлттэй байдаг бөгөөд үүнийг тайлбарлахдаа удирдан чиглүүлэх ёстой гэдгийг анхаарах хэрэгтэй. үр дүн.
ELISA шинжилгээгээр ямар халдварыг илрүүлэх боломжтой вэ?
Орчин үеийн венерологид голчлон тэмбүү (бусад урвалуудтай хослуулан), ХДХВ-ийн халдвар, вируст гепатитыг оношлоход ашигладаг. хязгаарлагдмал үнэ цэнэхламидийн халдвар, цитомегаловирусын халдвар болон бусад герпес халдварыг оношлоход мөн ELISA аргыг янз бүрийн халдварт өвчний эсрэгбие, дааврын түвшин, аутоэсрэгбие болон төрөл бүрийн маркеруудыг тодорхойлоход ашигладаг. онкологийн өвчин.
ELISA үр дүнг хэрхэн тайлбарлах вэ
Эсрэгбие байгаа эсэх, түвшинг судлах янз бүрийн ангиудзарим тохиолдолд үе шатыг тодорхойлоход тусалдаг халдварт үйл явц
|
Өвчний үе шат |
IgM |
IgA |
IgG |
|
Анхдагч үе шат |
|||
|
Анхдагч үе шат |
|||
|
Анхдагч үе шат |
|||
|
Архаг үе шатыг хурцатгах |
|||
|
Архаг үе шат |
|||
|
Өнгөрсөн (эдгэрсэн халдвар) |
|||
|
Сэргээх |
дараа нь титр 2-4 дахин буурна амжилттай эмчилгээ |
амжилттай эмчилгээ хийснээс хойш 1-1.5 сарын дараа титр 4-8 дахин буурна |
|
|
Сөрөг үр дүн |
Харамсалтай нь энэ чухал давуу тал ELISA, яаж тоо хэмжэээсрэгбие нь практик ажилд тийм ч чухал биш юм - i.e. үнэн зөв оношлохыг зөвшөөрдөггүй, эмийн тун, цаг хугацааны хувьд нөлөөлдөггүй эм.
Тэмбүүгийн оношлогоонд ELISA арга ямар үүрэг гүйцэтгэдэг вэ?
Тэмбүүгийн оношлогоонд ELISA аргыг анх 1975 онд хэрэглэж эхэлсэн.Одоогоор Орос улсад тэмбүүгийн ийлдэс судлалын оношилгоонд өргөн хэрэглэгдэж байгаа бөгөөд тэмбүү өвчнийг баталгаажуулах сорил болгон ашигладаг.Тэмбүү өвчнийг тодорхойлох судалгааг ихэвчлэн хийдэг. Treponema pallidum антиген (IgM ба IgG)-ийн нийт эсрэгбие, гэхдээ зарим тохиолдолд зөвхөн M ангиллын "эрт" эсрэгбиеийг тодорхойлох боломжтой байдаг.Тэмбүүгийн ELISA нь халдвар авсанаас хойш 3 долоо хоногийн дараа эерэг болж, нэлээд хэсэг хугацаанд эерэг хэвээр байна. цаг урт хугацааэмчилгээ хийлгэсний дараа ч (заримдаа амьдралынхаа туршид).Тиймээс ELISA-г тэмбүүгийн эдгэрэлтийг баталгаажуулах тест болгон ашигладаггүй.Ихэнх тохиолдолд зөвхөн ELISA-ийн чанарын тодорхойлолтыг хийдэг - i.e. Зөвхөн эерэг эсвэл сөрөг үр дүн боловч тоон үзүүлэлтийг тодорхойлох боломжтой.
(ELISA) нь тусгай эсүүд - эсрэгбиемүүдийг хайхад үндэслэсэн лабораторид цусыг шинжлэх арга юм. янз бүрийн өвчин. Энэ арга нь зөвхөн эмгэг төрүүлэгчийг тодорхойлох төдийгүй ямар үе шатанд байгааг тодорхойлох боломжийг олгодог эмгэг процесс. Сүүлийнх нь прогноз болон маш чухал юм цаашдын эмчилгээтэвчээртэй.
Аргын давуу болон сул талууд
Бүх дунд орчин үеийн аргуудОношлогооны ELISA нь хамгийн шинэлэг, техникийн хувьд үнэн зөв юм. Үүний гол давуу талууд нь:
- Өвчтөний цусан дахь халдварт өвчний эсрэгбиемүүдийг хайж олох чадвар.
- Судалгааны аргын хүртээмж өндөр. Өнөөдөр ELISA шинжилгээг ямар ч дунд хэмжээний лаборатори хийж болно.
- Аргын бараг 100% өвөрмөц байдал, мэдрэмж.
- Хэмжээг харьцуулах замаар эсрэгбие ба эсрэгтөрөгчийг хайх, эмгэг процессын үе шатыг тогтоох, түүний динамикийг хянах чадвар.
Бусад сорилтой харьцуулахад энэ тооны давуу тал нь шинжилгээний цорын ганц сул талыг бүрэн дарж өгдөг: энэ нь эсрэгбиемийг илрүүлэх чадвартай боловч эмгэг төрүүлэгч өөрөө биш юм.
Шинжилгээг үнэлэх гол нэр томъёо
ELISA шинжилгээ гэж юу болох, энэ нь юу болох, хэрхэн хийгддэгийг ойлгохын тулд та мэргэжилтнүүдийн ашигладаг үндсэн нэр томъёотой танилцах хэрэгтэй.
- Эсрэг бие- хүний дархлалын тогтолцооны эсүүд (В төрлийн лимфоцит) үүсгэдэг уураг. Тэд хариулдаг өвөрмөц хариу үйлдэлбие махбодид гадны бодис, бодис орох хүртэл. Эсрэгбиеийн өөр нэг нэр нь иммуноглобулин бөгөөд тэдгээр нь хамаардаг өөр өөр ангиуд: A, E, M, G. Тэд бие биенээсээ масс, урвалын хурд, хагас задралын хугацаа болон бусад олон шинж чанараараа ялгаатай байдаг. Ер нь хүний цусанд G ангиллын иммуноглобулин голчлон агуулагддаг.Хэрвээ ямар нэгэн халдвар авсан тохиолдолд А,М иммуноглобулины хэмжээ эрс нэмэгддэг.Харшлын урвалд иммуноглобулин Е оролцдог.
- Антиген- гадаадын агент байгаа органик гаралтайба өндөр молекул жинтэй. Ихэнхдээ энэ нь эмгэг төрүүлэгч эсвэл тэдгээрийн биологийн идэвхт бодисыг төлөөлдөг.
- Антиген-эсрэгбиеийн цогцолбор буюу дархлааны цогцолбор нь гадны бодис, иммуноглобулин хоёрын шууд нэгдэл бөгөөд дархлааны хариу урвалыг бий болгодог.
Аргын мөн чанар, хамрах хүрээ
Өвчтөнүүд ихэвчлэн асуулт асуудаг: ELISA шинжилгээ, энэ нь юу вэ, үүнийг хэрхэн хийдэг, юунд зориулагдсан вэ? Та түүний үе шатуудыг товч тайлбарласнаар аргын талаар хүртээмжтэй байдлаар ярьж болно.
Бэлтгэл үе шат. Лабораторийн эмч 96 худагтай тусгай хавтанг ашигладаг. Худаг бүрийн гадаргуу дээр тодорхой эмгэг төрүүлэгчийн эсрэгтөрөгчийг хэрэглэнэ.
1-р шат.Цусыг авч, дараа нь дусал дуслаар худаг руу хийнэ. Худаг нь цусан дахь эсрэгтөрөгч ба эсрэгбиеийн хоорондох урвалыг эхлүүлдэг.
2-р шат.Нүхэнд дархлааны цогцолбор үүсэх урвал бүрэн явагдаж байна. Үүний үр дүнд тодорхой өнгөт бодис үүсдэг. Өнгөний эрч хүч нь тодорхой эмгэг төрүүлэгч бүрийн өвчтөний цусан дахь эсрэгбиеийн хэмжээнээс хамаарна.
3-р шат.Фотометрийн аргаар үр дүнг үнэлэх. Энэ зорилгоор спектрофотометр гэж нэрлэгддэг тусгай төхөөрөмжийг ашигладаг. Энэ нь нүх болон хяналтын дээж дэх материалын нягтыг харьцуулахад хэрэглэгддэг. Дараа нь төхөөрөмж математик шинжилгээүр дүнг бий болгодог.
ELISA-ийн үр дүн ба зорилгын үнэлгээ
Үр дүнгийн тайлбар нь хэд хэдэн чухал нюансаас хамаарна.
- Худагны оптик нягтрал.
- Худаг бүхий хавтанг үйлдвэрлэгч (туршилтын систем).
- Судалгаа хийсэн лаборатори.
Эдгээр нюансуудыг харгалзан та өөр өөр туршилтын систем эсвэл өөр лабораторийн хоёр үр дүнг хэзээ ч харьцуулж болохгүй.
ELISA шинжилгээнд нөлөөлдөг өөр нэг чухал зүйл бол эсрэгбиеийн авидит гэж нэрлэгддэг зүйл юм. Энэ үзүүлэлт нь эсрэгтөрөгчийн хэмжээ, эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн цогцолбор дахь холболтын бат бөх чанарыг тодорхойлдог. Түүний тодорхойлолт нь уургийн бүтцийг шийдвэрлэхийн тулд мочевинтай дархлааны цогцолборыг эмчлэхэд суурилдаг. Энэ нь эсрэгтөрөгч ба эсрэгбие хоорондын сул холбоог устгаж, зөвхөн хүчтэйг нь үлдээх боломжийг олгодог. Авидитийн судалгааны ач холбогдол нь халдварын үргэлжлэх хугацааг тодорхойлоход ашиглаж болно. Энэ мэдээлэл нь жирэмсэн эмэгтэйчүүдэд онош тавихад маш чухал юм.
ELISA аргыг ашиглан цусны шинжилгээ хийх нь:
- Төрөл бүрийн эмгэг төрүүлэгч эсрэгтөрөгчийг хайх.
- Гормоны түвшинг судлах.
- Аутоиммун эмгэг байгаа эсэхийг шалгах зорилгоор.
- Хорт хавдрын маркеруудыг илрүүлэх.
ELISA-ийн сортууд
ELISA шинжилгээ нь дараахь төрлүүдтэй.
- Шууд бус.
- Чигээрээ.
- Өрсөлдөх чадвартай.
- Блоклох арга.
Гэвч үнэн хэрэгтээ өнөөдөр зөвхөн ELISA (ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээ) хэмээх аргыг л хэрэглэж байна. Энэ нь худгийн гадаргуу дээрх өнгөний өөрчлөлттэй эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн цогцолбор үүсэх дээр дурдсан урвал дээр суурилдаг.
Тоон ELISA цусны шинжилгээ нь өөрөө онцгой анхаарал хандуулах ёстой. Энэ бол шинжилгээний нэг төрөл биш, харин үр дүнг үнэлэх арга юм. Үүний ачаар эсрэгбиеийн тоог тооцоолж, тэдгээрийн ангиллыг тодорхойлдог. Үр дүн нь дээжийн оптик нягтрал, ELISA шинжилгээ хийсэн туршилтын систем, түүнчлэн лабораториос хамаарна.
ELISA аргаар илрүүлсэн өвчин
ELISA бол илрүүлдэг цусны шинжилгээ юм их хэмжээнийянз бүрийн Халдварт өвчин. Түүнээс гадна вируст болон вируст халдварыг ижил нарийвчлалтайгаар илрүүлдэг. бактерийн өвчин. Жишээлбэл, дархлааны цогцолборыг бий болгосноор дараахь өвчний эмгэг төрүүлэгчдийн эсрэгтөрөгч байгаа эсэхийг нотлох боломжтой.
Үүнээс гадна ELISA нь дараахь зүйлийг илрүүлэх боломжийг олгодог.
- Хорт хавдрын маркерууд - TNF (хавдрын үхжилийн хүчин зүйл), PSA (түрүү булчирхайн өвөрмөц эсрэгтөрөгч), CEA (хорт хавдрын эсрэгтөрөгч), CA-125 (өндгөвчний хавдрын маркер)
- Жирэмсний даавар нь hCG (хүний chorionic gonadotropin) юм.
- Зөрчил нөхөн үржихүйн систем: эмэгтэй, эрэгтэй нөхөн үржихүйн тогтолцооны гормонууд.
- Бамбай булчирхайн эмгэг.
Өнөөдөр ХДХВ-ийн ELISA шинжилгээ нь энэхүү аюултай өвчнийг оношлох гол арга гэдгийг дурдах нь зүйтэй.
ELISA болон дээж авах техникт зориулсан материал
ELISA-г хийхийн тулд өлөн элгэн дээрээ өвчтөнөөс цус авдаг. Дараа нь цуснаас ийлдэс гаргаж авдаг бөгөөд үүнийг шинжилгээнд шууд ашигладаг. Үүнээс гадна ELISA-г хийж болно тархи нугасны шингэн(тархи нугасны шингэн), умайн хүзүүний сувгийн салиа (умайн хүзүү), амнион шингэн, тэр ч байтугай шилэн шингэн (нүдний алим).
Цус өгөхөөс өмнө өвчтөн цусаа өгөхгүй байхыг анхааруулдаг эм, мөн антибиотик эмчилгээ болон вирусын эсрэг эмүүдЦус цуглуулахаас дор хаяж хоёр долоо хоногийн өмнө дуусгахыг зөвлөж байна.
Үр дүнг хүлээн авах, тайлах эцсийн хугацаа
Лабораторийн хариуг хүлээн авах хугацаа нь түүний ажлын хурдаас хамаардаггүй, харин өвчин ямар үе шатанд байгаа, цусанд ямар эсрэгбиемүүд аль хэдийн илэрсэн байна. Жишээлбэл, иммуноглобулин M нь шинжилгээнд цус авснаас хойш ойролцоогоор 2 долоо хоногийн дараа гарч ирдэг бөгөөд энэ нь анхдагч халдварын үе шатанд байгаа эсвэл архаг халдварын хурцадмал байдал үүссэн гэсэн үг юм. Үүний зэрэгцээ анхдагч халдварын үед M ба G ангиллын эсрэгбиемүүд гарч ирдэг. Түүнээс гадна сүүлийнх нь 4 долоо хоногийн дараа илрэх боломжтой.
IgA нь 2-3 долоо хоногийн дараа дангаараа эсвэл M-тэй хамт гарч ирдэг цочмог халдвар, эсвэл G-тэй хамт архаг явцтай байгааг илтгэнэ.
Ийм өөр өөр нэр томъёоЦусан дахь эсрэгбие илрэх нь өвчтөнийг үр дүнг удаан хүлээхэд хүргэдэг. ELISA шинжилгээ хийсний дараа нэг сараас дээш хугацаагаар хүлээхийг зөвшөөрнө. Эмчээр тайлж, тайлбарлах нь бас тодорхой хугацаа шаарддаг.
Сүүлийн хэдэн арван жилд боломжтой оношлогооны аргуудын жагсаалт хурдацтай өргөжиж байгаа бөгөөд оношилгоочид өмнөх бүх сорилтын давуу талыг шинэ аргуудад нэгтгэж, өмнөх бүх сул талуудыг арилгахыг хичээж байна.
IN Сүүлийн үеджагсаалтад улам бүр нэмэгдэж байна оношлогооны процедурЭнэ нь орчин үеийн, нэлээд шинэ сорил болох ферментийн дархлааны шинжилгээг агуулдаг бөгөөд үүнийг анагаах ухаантай холбоогүй энгийн хүн мэддэггүй. Гэсэн хэдий ч энэ техник нь мэргэшсэн эмнэлгийн ажилтнуудын дунд хурдацтай дагаж мөрдөж байна. Та түүний онцлог, үндсэн шинж чанаруудтай танилцаж, энэ нь юу болохыг, ямар тохиолдолд ашиглах ёстойг олж мэдэхийг оролдож болно.
Ферментийн дархлаа шинжилгээ нь молекулын "эсрэгтөрөгч-эсрэгбие"-ийн урвалд суурилсан багажийн лабораторийн арга бөгөөд энэ нь бие махбод дахь тодорхой уургийг илрүүлэх боломжийг олгодог. биологийн материал(судалгааны дээж). Ийм уураг нь фермент, янз бүрийн бичил биетэн (вирус, бактери, мөөгөнцөр), эгэл биетэн гэх мэт байж болно.
Энэ аргыг нээсний дараа үүнийг ELISA тест гэж нэрлэсэн бөгөөд энэ нь нээсэн хүмүүсийн нэртэй ямар ч холбоогүй боловч англи хэл дээрх бүтэн нэрний товчлол юм - enzyme-linked immunosorbent assay. Дэлхийн бүх эмч нар энэ нэрийг ашигладаг бөгөөд Орос хэлээр ярьдаг зарим эмч нар энэ төрлийн судалгааг ингэж нэрлэдэг.
Аргын гол зарчим нь молекулын "эсрэгтөрөгч-эсрэгбие" урвал юм.
Антиген нь гадны ямар нэгэн молекул руу орж ирдэг Хүний биеөвчин үүсгэдэг микробын нэг хэсэг болгон. Антиген нь ихэвчлэн уургийн молекулууд юм. Ийм "танихгүй" нь бичил биетнээс гадна бүлэг эсвэл Rh хүчин зүйлтэй тохирохгүй гадны цусны эсүүд байж болно.
Бие махбодид ийм антиген орж ирсний хариуд гадны аливаа молекулаас хамгаалахад чиглэсэн дархлааны урвал эхэлдэг. Энэ нь тусгай бодисуудын нийлэгжилтээс болж үүсдэг дархлааны систем- эсрэгбие (иммуноглобулин). Эсрэгбие бүр нь зөвхөн тодорхой эсрэгтөрөгчид тохиромжтой бөгөөд эмгэг төрүүлэгч "танихгүй" бодисыг нэг цогцолбор болгон саармагжуулдаг. Ийм холболтын үйл явцыг "эсрэгтөрөгч-эсрэгбие" урвал гэж нэрлэдэг.
Эсрэгбиеийн төрлүүд
Бүх эсрэгбие (иммуноглобулин) нь дархлааны хариу урвалын аль үе шатанд илэрч байгаагаас хамааран 5 төрөлд хуваагддаг.
ELISA-ийн оношлогооны хувьд иммуноглобулины IgG, IgM, IgA-ийн түвшин ихэвчлэн чухал байдаг. Тэдний титрээр та тухайн хүн өмнө нь энэ өвчнөөр өвчилсөн эсвэл саяхан халдвар авсан эсэх, дархлаа бий болсон эсэх, бие нь эмгэг судлалын эсрэг хамгаалалтгүй эсэхийг олж мэдэх боломжтой.
Ферментийн дархлаа судлалын давуу болон сул талууд
Асаалттай Энэ мөч ELISA бол хамгийн үнэн зөв, мэдрэмтгий аргуудын нэг юм. Үүнийг анагаах ухааны янз бүрийн салбарын мэргэжилтнүүд хүлээн зөвшөөрч, хэрэглэх хүрээгээ өргөжүүлсээр байна.
Аргын давуу тал
- Хүлээн авсан мэдээллийн өндөр нарийвчлал.
- Мэдрэмтгий байдал (дээжинд эмгэг төрүүлэгч хамгийн бага байсан ч шаардлагатай бодисыг илрүүлэх боломжийг танд олгоно).
- Өвчний эхний өдрүүдэд эсвэл инкубацийн үед оношлох боломж.
- Мэдээлэл олж авах хурд нь ижил төстэй нарийвчлалтай бусад аргуудтай харьцуулахад.
- Үйл явцын өндөр автоматжуулалт, хүний оролцоо хамгийн бага бөгөөд энэ нь гүйцэтгэгчийн алдааг бууруулдаг.
- Эмгэг судлалын үйл явцын үе шат, сонгосон эмчилгээний үр дүнгийн талаархи мэдээллийг олж авах.
- Материал цуглуулахдаа өвдөлтгүй, хамгийн бага инвазив.
Аргын сул тал
- Ихэнх тохиолдолд энэ нь эмгэг төрүүлэгч өөрөө биш харин эмгэг төрүүлэгчид бие махбодийн хариу үйлдлийг тодорхойлох боломжийг олгодог.
- Шинжилгээ хийхээс өмнө сэжигтэй өвчнийг нарийн мэдэж байх ёстой, учир нь шинжилгээ нь өндөр өвөрмөц шинж чанартай байдаг.
- Техникийн асуудал, эм уусан эсвэл хэд хэдэн эм нэгэн зэрэг байгаа зэргээс шалтгаалж худал унших магадлал. архаг өвчинэсвэл зөрчил бодисын солилцооны үйл явцөвчтөний биед.
- Үр дүнгийн тайлбарыг зөвхөн өндөр мэргэшсэн мэргэжилтэн хийх ёстой, учир нь олж авсан өгөгдлийг тайлбарлахын тулд мэдлэгтэй байх шаардлагатай. тусгай сургалтмөн тодорхой газар нутаг дахь анагаах ухааны мэдлэгийн асар их нөөц.
- ELISA нь нэлээд ховор шинжилгээ тул бүх оношлогооны лабораторид хийгддэггүй.
- Энэ арга нь нэлээд үнэтэй тул лабораторид урвалжаас гадна олон тооны үнэтэй тоног төхөөрөмж, тусгай институтэд үйлдвэрлэсэн антигенийн дээж байх ёстой.
Ямар тохиолдолд иммуноферментийн шинжилгээг ашигладаг вэ?
Ферментийн дархлаа судлалын заалтуудын бүрэн жагсаалт нь маш өргөн бөгөөд анагаах ухааны бараг бүх салбарыг агуулдаг.
Ихэнх тохиолдолд ELISA-г дараахь зорилгоор ашигладаг.
- халдварт өвчнийг илрүүлэх;
- бэлгийн замын халдварт өвчний оношлогоо;
- тодорхойлолт дархлааны байдалэсвэл зарим аутоиммун өвчин;
- хавдрын маркерыг тодорхойлох;
- гормоныг тодорхойлох.
Халдварт болон вируст өвчинЭнэхүү техник нь дараахь эмгэгийг тодорхойлох боломжийг олгодог.
Нэмж дурдахад, ELISA нь шигдээсийн төлөв байдлыг хурдан бөгөөд үр дүнтэй тодорхойлох, биеийн нөхөн үржихүйн чадавхийг үнэлэх, харшил, тэдгээрийн эх үүсвэр гэх мэтийг тодорхойлох боломжийг олгодог.
Гүйцэтгэхийн тулд ферментийн дархлаа судлалын аргыг ашигладаг Эмнэл зүйн туршилтшинэ эм боловсруулах, хүний биед үзүүлэх нөлөөг үнэлэх явцад.
Дээжийн төрөл, тэдгээрийг судалгаанд сонгох арга
Ихэнх тохиолдолд ферментийн дархлааны шинжилгээний материал нь өвчтөний урд талын судаснаас авдаг цус юм. Дээжийг ихэвчлэн өглөө хоосон ходоодонд хийдэг. Дээж авсны дараа судалгаанд саад болох үүссэн эсүүдийг цуснаас нь салгаж, зөвхөн ийлдсийг нь үлдээдэг.
Шээс бэлгийн замын халдварыг оношлоход энэ материал нь ихэвчлэн бэлэг эрхтний эрхтнүүдийн салст бүрхэвч, шээсний суваг эсвэл умайн хүзүүний салст, шулуун гэдсээр сорьц, цавины хэсэг болон биеийн бусад хэсгүүдийн элэгдэл, шархлааны хусуур болдог. Арчдасыг бас авч болно амны хөндий, түүнчлэн nasopharynx-аас.
Заримдаа ферментийн дархлааны шинжилгээг жирэмсний үед эх барих, эмэгтэйчүүдийн практикт амнион шингэний төлөв байдлыг тодорхойлоход ашигладаг. Энэ тохиолдолд амнион шингэн нь дээж болно. Үүнийг хийхийн тулд урт зүүгээр амнион уутыг цоолж бага хэмжээний шингэн авдаг. Боломжит эрсдлийг багасгахын тулд бүх заль мэхийг ариутгасан багажаар хийдэг.
Ихэнхдээ материал нь тархи нугасны эсвэл серозын шингэн болдог. Энэ нь хэзээ тохиолддог орон нутгийн мэдээ алдуулалт, тарилгын аргаар удирддаг.
Судалгаанд илгээж буй мэргэжилтэн нь ферментийн дархлааны шинжилгээ хийхэд ямар төрлийн материал шаардлагатайг тодруулах ёстой. Ихэнхдээ хэд хэдэн төрлийн эсвэл өөр газраас дээжийг нэг дор авдаг. Энэ төрлийн үзлэгт хамрагдах эмч өвчтөнд биоматериал хандивлах бэлтгэлийн талаар хэлэх ёстой.
Ферментийн дархлаа шинжилгээнд бэлтгэх
Ферментийн дархлаа шинжилгээний дараа олж авсан өгөгдлийн нарийвчлалыг нэмэгдүүлэхийн тулд материалыг сонгох бэлтгэлийг дараах байдлаар хийх ёстой.
- Судалгаанаас 10 хоногийн өмнө антибиотик, вирусын эсрэг болон антимикотик эмийг оруулахгүй байх;
- нэг өдрийн турш архи, тамхи татах, мансууруулах бодис хэрэглэхгүй байх шаардлагатай;
- ижил хугацаанд бие махбодийн хэт ачааллаас зайлсхийх шаардлагатай;
- Өвчтөний хэрэглэж буй бүх эмийн талаар эмчийн зааварлагчийг анхааруулах;
- Хэрэв та жирэмсэн эсвэл жирэмсэн гэж сэжиглэж байгаа бол эмчдээ мэдэгдээрэй.
Шинжилгээний материалыг өглөө өлөн элгэн дээрээ цуглуулсан нь дээр.
Хэрэв онош нь дааврын түвшинг тодорхойлох зорилготой бол үүнийг баталгаажуулах нь чухал юм тайван байдалөмнөх өдөр болон зайлсхий мэдрэлийн хурцадмал байдал. Эмэгтэйчүүдийн хувьд гормоны цусыг хандивлах хугацаа нь тодорхой тодорхойлогддог сарын мөчлөг, үүнийг томилох үед эмч хэлэлцэх болно.
Дээж авахаас 2-3 хоногийн өмнө та шарсан, өөх тостой хоолыг цэснээс хасах хэрэгтэй бөгөөд гепатитын шинжилгээ хийхээс өмнө цитрус болон бусад улбар шар, шар өнгийн жимс, хүнсний ногоо идэж болохгүй.
Ферментийн дархлаа судлалын үр дүнгийн тайлбар
Чанарын судалгааны үр дүнг ихэвчлэн "+" (илрүүлсэн) эсвэл "-" (олдсонгүй) тэмдгээр илэрхийлдэг.
Тодорхой бүлгийн иммуноглобулинууд байгаа эсэхээс хамааран дараахь дүгнэлтийг гаргаж болно.
- JgM (-), JgG (-), JgA (-) - өвчний дархлаа нь бүрэн байхгүй (бие нь өмнө нь энэ төрлийн эсрэгтөрөгчтэй тулгараагүй);
- JgM (-), JgG (+), JgA (-) - энэ эсрэгтөрөгч эсвэл вакцинтай өмнөх мөргөлдөөн байсан;
- JgM (+), JgG (-/+), JgA (-/+) - цочмог эмгэг процесс (их магадлалтай анхдагч);
- JgM (-), JgG (+/-), JgA (+/-) - архаг явц;
- JgM (+), JgG (+), JgA (+) - дахилт;
- JgM (-) - нөхөн сэргээх үе шат.
Тоон утгууд нь мэдээллийн их ачааллыг агуулдаг боловч зөвхөн эмчлэгч эмч өмнөх үзүүлэлтүүд, өвчтөний нас, тодорхой өвчин тус бүрийн нормыг харгалзан тэдгээрийг тайлбарлаж чадна. Ийм учраас та үр дүнг өөрөө үнэлэх боломжгүй юм.
Үр дүнг нь хэр удаан хүлээх хэрэгтэй вэ?
Энэ техник нь гарт байгаа өгөгдлийг олж авах хугацаанаас хамаарч олон сорттой байдаг. Дундаж үргэлжлэх хугацаа ELISA оношлогоо нь 4-6 цаг зарцуулдаг бөгөөд энэ нь дараагийн өдөр нь үр дүнг өгөх боломжийг олгодог.
Хамгийн урт аргууд нь жишээлбэл, ХДХВ-ийн халдвар авсан тохиолдолд 10 хүртэл хоног зарцуулдаг.
At яаралтай хэрэгцээХариултыг 1-2 цагийн дотор авах экспресс аргыг ашиглах боломжтой.
Би ELISA шинжилгээг хаанаас авах вэ?
Энэ төрлийн оношлогооны тоног төхөөрөмж нэлээд үнэтэй тул бүх лаборатори үүнийг худалдаж авах боломжгүй. Нэмж дурдахад, тусгай антиген агуулсан тестүүд нь хадгалах хугацаа нь хязгаарлагдмал байдаг (ихэвчлэн 1 жил орчим) тул байнга шинэчлэх шаардлагатай байдаг.
Эдгээр шалтгааны улмаас Засгийн газар эмнэлгийн байгууллагууд ELISA лаборатори үргэлж байдаггүй. Ихэнх тохиолдолд томоохон хувийн эмнэлэг эсвэл томоохон оношлогооны төвүүдтэй холбоо барих шаардлагатай байдаг.
ELISA шинжилгээг явуулахын тулд лаборатори нь тусгай зөвшөөрөлтэй байх ёстой бөгөөд ажилтан, лаборант нар тусгай сургалтанд хамрагдах ёстой.
Ихэнхдээ тодорхой оношлогооны төвэсвэл лабораторийг өвчтөнийг шинжилгээнд илгээж буй эмч зөвлөж байна.
Ферментийн дархлаа судлалын үнэ
Үнэ энэ судалгаатухайн улсын бүс нутаг, үйлчилгээ үзүүлж буй клиникийн түвшнээс хамаарна. Москвад хамгийн бага үнэнэг эсрэгтөрөгчийг тодорхойлоход 700 рубльээс эхэлдэг. Хэрэв хэд хэдэн иммуноглобулиныг нэг дор тодорхойлох шаардлагатай бол үнийг нэмнэ.
Хэзээ яаралтай шинжилгээзардал 150-200 рубль нэмэгддэг. эсрэгтөрөгч бүрийн хувьд.
Нэлээд өндөр өртөгтэй хэдий ч ферментийн дархлааны шинжилгээ нь өвчтөний үзлэгийг аль болох мэдээлэл сайтай, хурдан хийх боломжийг олгодог бөгөөд энэ нь эмчилгээ эхлэхээс өмнөх хугацааг багасгаж, хүний нөхцөл байдлыг хурдан тогтворжуулах боломжийг олгодог.
Энэхүү видео нь "Ферментийн дархлаа судлалын үндэс" киног толилуулж байна.
